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我们知道噬斑法和TCID50法检测的是感染性病毒的浓度,并不体现病毒的总浓度(总颗粒数)。现在有越来越多的研究显示,很多病毒在包装过程中由于缺失基因组,形成空心病毒。或者在合成过程中,基因的突变或者缺陷导致蛋白的突变,造成病毒没有感染性。而这些非感染性病毒的数量在总病毒数量中所占的比例意义重大,能影响体内和体外的研究结果。所以快速的病毒总浓度定量方法是非常必要的。流感疫苗的生产中,从鸡胚培养来源的流感疫苗在使用专门的试剂裂解后,收获免疫原蛋白HA。非传染性的流感病毒(被证实含有衣壳蛋白和部分的基因组)在裂解后同样能贡献免疫原蛋白HA。所以总病毒浓度的评估对流感疫苗的生产意义重大。此外,总病毒浓度的定量也有助于减毒疫苗的生产。减毒疫苗是复制缺陷的非感染性的但是能引发机体免疫反应的一种疫苗。减毒疫苗既然不能复制,所以就不会引起细胞病变反应,而CCID50法则以细胞病变反应为判断基准。在某种意义上来说,所有的减毒疫苗是由非感染的病毒颗粒构成,因此,采用总病毒浓度定量的方法是减毒疫苗唯一可靠的方法。在动物疾病的预防和治疗中,采用感染性方法测得病毒滴度来决定注射的剂量,往往忽视了非感染性病毒颗粒在动物免疫反应中的作用以及最终的药剂效果。比如噬斑法测得病毒滴度为1E6 pfu,但是总病毒浓度是1E8 vp/ml,在每一个感染颗粒中,有100个颗粒没有被计数,最终可能影响动物治疗结果。考虑到非感染性病毒颗粒的生物学作用以及在疫苗生产的作用,感染性病毒颗粒和总病毒颗粒的定量对于病毒疫苗的生产和研究都至关重要,而病毒计数仪在10min内能快速获得病毒总浓度,所以能广泛应用于在病毒的研究和生产中。
[color=#cc0000][b]到目前为止,人来还没真正研究清楚病毒是如何形成的,当前主要有三种学说,解释病毒的进化。[/b][/color][color=#cc0000][b]一、病毒起源于自主复制的RNA分子 [/b][/color][color=#cc0000][b]核糖核酸(RNA)具有自主复制的信息和能力,并研究发现RNA分子具有酶的催化能力,这促使RNA为病毒的起源学说变得更具说服力。RNA分子至少具备下列可以进行复制和进化三种相关功能:1、核糖核酸酶的活性 2、能自我拼接去掉内部的核酸序列(核酸) 3、有实验表明,以RNA作引物可以合成依赖于模板的多聚胞嘧啶核酸。 [/b][/color][color=#cc0000][b]二、病毒起源于宿主细胞中的DNA或RNA成分的学说 这个学说可以解释所有病毒的起源:DNA病毒起源于质粒或转移因子,反转录病毒起源于反转座子,RNA病毒起源于自主复制的mRNA。 该学说的核发心内容是:病毒是正常的细胞成分获得了自主复制的能力,进化而来的。[/b][/color][color=#cc0000][b]三、退化性起源学说 该学说认为病毒是细胞内寄生物的退化形式。在细胞内,这类寄生物可以在不影响其生存的情况下逐渐丢失部分生物学功能。它们所必需保留的功能是具有可进行自主复制的DNA复制原点(顺式元件)、可以对复制进行调控的反式调控蛋白,以及能与宿主生物合成及复制系统相互作用的顺式和反式功能。最终,就可产生一种专性细胞内寄生的DNA分子或质粒。[/b][/color]
[b][color=#cc0000]什么是死病毒?什么是活病毒?它们在人体里都有哪些影响?[/color][/b]