高效递送

Neon NxT 电转染系统：可靠的转染性能使用高效、快速、简单、灵活的紧凑型电转染系统，节省宝贵的研究时间，并保护珍贵的样本。Invitrogen Neon NxT 电转染系统采用专有移液器吸头技术，再结合经过简化的工作流程和灵活操作，有助于减少样本损失，降低污染风险，减少操作步骤，让您全方位管控各种实验。Neon NxT 电转染系统的优势极高的转染效率和细胞活率—可转染具有挑战性的细胞株，转染效率高、细胞活率高 提高基因编辑效率—专有的Neon NxT基因编辑缓冲液可以帮助提高基因编辑性能根据需要灵活变通—针对不同的细胞类型、细胞密度、递送物质和电转染方案，精确优化电转染参数节省宝贵的研究时间—利用一个缓冲液试剂盒和直观的用户界面，通过 3 步简单的工作流程即可快速转染细胞节省珍贵样本—尽量减少样本输送造成损失和污染的风险使用该转染系统对多种细胞株进行转染时，均可实现极高的转染效率和细胞存活率Neon NxT 电转染系统是一款电转仪，在极难转染的细胞（包括免疫细胞、原代细胞和干细胞）中实现高达 90% 的转染和基因编辑效率。150 多个细胞株已在经过优化的即用条件下进行了转染效率和细胞存活率测试。 图1 .Neon NxT 电转染系统的转染效率。 使用 GFP 质粒 DNA 或 GFP mRNA 在 10 μL 或 100 μL 电转染反应液中对细胞进行转染。报告的转染效率为 GFP 阳性细胞的百分比 (n = 3) 注意： 初始 T 细胞仅在 100 μL 反应中进行电转染。图 2.Neon NxT 系统进行电转染后的细胞存活率。 在使用 GFP 质粒 DNA 或 GFP mRNA 在 10 μL 或 100 μL 电转染反应液中对细胞进行转染。转染细胞使用 Invitrogen SYTO Red 死细胞染色剂染色，并通过 Invitrogen ATTUNE NxT 流式细胞仪评估细胞存活率。报告的细胞存活率 (%) 为 3 次测量的平均值。 注意： 初始 T 细胞仅在 100 μL 反应液中进行电转染。图 3. Neon NxT 重悬基因编辑缓冲液在基于 CRISPR-Cas9 的基因编辑实验中的性能。. 在 10 μL 或 100 μL 反应中电转细胞。(A) 以 GFP 阳性细胞百分比表示的 GFP 供体 DNA 基因敲入效率。(B) GFP 供体 DNA 敲入后细胞的存活率。(C) 以电转后不表达 GFP 的初始 GFP 阳性细胞百分比表示的基因敲除效率。(D) 电转后基因敲除细胞的存活率。提高基因编辑效率基因编辑在进一步了解人类健康和疾病方面大有可为。在基因编辑工作流程中，一个关键而又具有挑战性的步骤是将 CRISPR 核糖核蛋白 (RNP)、DNA 和 RNA 分子有效地递送到所选择的细胞系中，也就是所谓的转染。如上所述，电转是最广泛使用的递送方法，因为它能够实现高转染效率，即使是难以转染的细胞也不例外。与 Neon NxT 电转染系统配合使用时，我们的基因编辑试剂和 Neon NxT 重悬基因编辑缓冲液可以帮助提高基因编辑性能，使用 CRISPR Cas9 等特定物质进行哺乳动物细胞（包括原代细胞、干细胞和难以转染的细胞）的基因敲除或基因敲入实验 (图 3)。为什么 Neon NxT 电转染系统可以很好地替代电转比色皿？与标准比色皿电转染腔室不同，Neon NxT 电转染系统使用专有的生物兼容移液器吸头腔，可产生更均匀的电场。这一设计可以更好地维持生理状态，与常规电转染相比，细胞存活率更高。形成更加均匀的电场在整个电转染腔室内维持稳定的 pH 值产生极少热量生成较少离子减少细胞遇到的剪切力图 3.Neon NxT 移液器吸头相对于标准电转比色皿的优势。 专有的生物兼容型 (A) Neon NxT 吸头展示了成熟可靠的毛细管电转染技术，与(B) 电转比色皿相比具有重要优势。针对不同的细胞类型、细胞密度、递送物质和电转染方案，精确优化电转染参数电转染参数可定制使用 Neon NxT 电转染系统，您可以精确控制对实验至关重要的参数，而不会将宝贵的时间浪费在调整不准确的参数上。您可以利用该转染系统修改以下参数：脉冲电压脉冲宽度脉冲次数细胞类型缓冲液类型递送物质类型对各种递送物质、细胞类型和细胞密度均可通用将 DNA、RNA 或蛋白质递送到多种哺乳动物细胞中，每次反应可灵活转染 2 x 10⁴ 至 6 x 10⁶ 个细胞。使用 TransfectionLab 云端 APP 轻松制定计划Invitrogen TransfectionLab 是一款云端 APP，可以通过Thermo Fisher Connect平台进行访问，能够根据每个电穿孔实验，从设计阶段开始量身定制分步指南。您可以远程设置多达 384 个样本的多个孔板布局，通过已经连接网络的 Neon NxT 系统，您可以直接访问 APP 中保存的任何方案或孔板布局。利用一个缓冲液试剂盒和直观的用户界面，通过 3 步简单的工作流程即可快速转染细胞经简化的电转染工作流程Neon NxT 电转染系统的工作流程经过简化，易于操作和执行，用户几乎不需要进行培训，提高了结果的一致性和可再现性。使用该转染系统可轻松完成电转染过程：首先，将细胞和质粒混合物加入 Neon NxT 移液管吸头中。其次，插入移液器架，按下“电穿孔”。最后，将转染细胞转移至培养皿中。由于转染在移液器吸头内进行，所以 3 个简单的步骤即可完成转染操作：吸液、电转染、分液。该电转染系统能够缩短处理时间除了简化工作流程外，与常规电转染系统相比，我们专有的电转染技术可将总处理时间缩短至 10-15 分钟，因为转染在 Neon NxT 移液器吸头内进行。一个缓冲液试剂盒即可用于多种哺乳动物细胞类型解决了根据细胞株寻找缓冲液试剂盒的问题。我们使用一个缓冲液试剂盒简化了这一过程，该试剂盒可适配 150 多个哺乳动物细胞株。我们建议使用电压低于 1,900 V 的 Invitrogen Neon NxT 重悬缓冲液 R 和电压较高的 Invitrogen Neon NxT 重悬缓冲液 T。节省时间的孔板设置使用 Neon NxT 电转染系统的直观用户界面，提前设置整个孔板，而不用“快速启动 (Quick Start)”功能调整不同样本之间的电转参数。在每个样本进行电转染时，可监测屏幕上的进展情况，在 20 分钟内最多可完成 24 个样本的电转染。

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