氦气纯化器

近日复旦大学封东来及李世燕组定制的ATL氦液化系统以及ATP氦气纯化系统成功完成安装验收。此套系统是国内套ATL160+型号氦液化器，该型号氦液化器为ATL系列中的高端型号，能够在保持杜瓦常压的前提下实现高速液化，其高液化速率能够达到30L/天，超越了目前现有冷头式氦液化设备液化效率限。Quantum Design智能型氦液化系统实现多种液氦回收方案 Quantum Design公司30年来一直致力于低温系统的研发与设计，积累了大量的技术和经验，在国内外其他厂商通过单纯为氦液化器增加冷头的方法实现液化效率提升的趋势下，Quantum Design仍然坚持研发基于单冷头的氦液化器，并联合萨拉戈萨大学一同进一步采用局部高压并保证杜瓦内常压的氦液化装置。相对于单纯使用增加冷头的设计，单冷头式氦液化器拥有更低廉的维护成本，并能够有效减少冷头失效造成氦液化器无法工作的风险。 复旦大学封东来及李世燕课题组定制的ATL氦液化系统以及ATP氦气纯化系统 复旦大学此套回收系统曾因为氦气回收及纯化问题困扰较久，先后采用了国内外其他品牌的多种纯化及液化装置均未取得较好的效果，此次在升Quantum Design的氦液化回收系统后，Quantum Design工程师也同时对此前的管路及气体纯度进行了监测，经过全面的检修并采用先进的冷头式纯化器ATP30后情况得到了大大改善，目前ATP处理后的高纯氦气已经让整个氦液化装置重新运转起来，解决了一直以来的困扰。 该套设备将在较低的维护成本下更有效地提高实验室液氦利用率，助力关联电子材料的低温物理性质，包括各种超导体、量子磁体、拓扑材料等方面的研究。相关产品链接：Quantum Design智能型氦液化器 (ATL)：http://www.instrument.com.cn/netshow/C180307.htm关于Quantum DesignQuantum Design是的科研设备制造商和仪器分销商，于1982年创建于美国加州圣迭戈。公司生产的 SQUID 磁学测量系统 (MPMS) 和材料综合物理性质测量系统 (PPMS) 已经成为公认的测量平台，广泛的分布于上几乎所有材料、物理、化学、纳米等研究领域的实验室。2007年，Quantum Design并购了欧洲大的仪器分销商LOT公司，现已成为著名的科学仪器领域的跨国公司。目前公司拥有分布于英国、美国、法国、德国、巴西、印度，日本和中国等地区的数十个分公司和办事处，业务遍及全球一百多个和地区。中国地区是Quantum Design公司活跃的市场，公司在北京、上海和广州设有分公司或办事处。几十年来，公司与中国的科研和教育领域的合作有成效，为中国科研的进步提供了先进的设备以及高质量的服务。

一、微孔过滤法微孔过滤法包括三种类型：深层过滤(depth)、筛网过滤(screen)及表面过滤(surface)。深层滤膜是以编织纤维或压缩材料制成的基质，利用随机性吸附或是捕捉方式来滞留颗粒。筛网滤膜基本上是具有一致性的结构，就像筛子一般，将大于孔径的颗粒，都滞留在表面上(这种滤膜的孔径大小是非常精确的)，而表面过滤则是多层结构，当溶液通过滤膜时，较滤膜内部孔隙大的颗粒将被滞留下来，并主要堆积在滤膜表面上。由于上述三种滤膜的功能不同，因此对滤膜之间的分辨非常重要。由于深层过滤是一种较为经济的方式，可去除98%以上的悬浮固体，同时保护下游的纯化单元不会败坏或堵塞，因此通常被作为预过滤处理。表面过滤可去除99.99%以上的悬浮固体，所以也可作为预过滤处理或澄清用。微孔薄膜(筛网滤膜)一般被置于纯化系统中的最终使用点，以去除最终残留的微量树脂碎片、碳屑、胶质颗粒和微生物。例如：0.22μm微孔滤膜，其可滤过所有的细菌，通常用于将静脉注射用的液体、血清及抗生素进行除菌用。二、活性碳吸附法有机物可能是阳离子、阴离子或非离子性的物质，离子交换树脂可去除原水中一些可溶性的有机酸和有机碱(阴离子和阳离子)，但有些非离子性的有机物却会被树脂包覆，这过程称为树脂的“污染阻塞”现象，不但会减少树脂的寿命，而且降低其交换能力。为保护离子交换树脂，可将活性碳过滤器安装在离子交换树脂之前，以去除非离子性的有机物。活性碳的吸附过程是利用活性碳过滤器的孔隙大小及有机物通过孔隙时的渗透率来达到的。吸附率和有机物的分子量及其分子大小有关，某些颗粒状的活性碳较能有效的去除氯胺。活性碳也能去除水中的自由氯，以保护纯水系统内其他对氧化剂敏感的纯化单元。活性碳通常与其他的处理方法组合应用。在设计纯水系统时，活性碳与其他相关纯化单位的相关配置，是一项极为重要的项目。三、反渗透法反渗透(RO)法是可达到90%~99%杂质去除率中最经济的方法。RO膜的滤孔结构较UF膜还要致密，RO膜可去除所有的颗粒、细菌以及分子量大于300的有机物(包括热源)。RO膜的滤孔结构较UF膜还要致密，RO膜可去除所有的颗粒、细菌以及分子量大于300的有机物(包括热源)。当二种不同浓度的溶液，由一个半透膜隔开时，渗透现象会自然发生。渗透压将水压过半透膜，水将浓度较高的溶液稀释，后造成浓度平衡。在水纯化系统中，施加压力于高浓度的溶液中，以抗衡渗透压。如此迫使得纯水由高浓度的液体通过RO膜，并可加以收集。由于RO膜致密度极高，因此，产出的水流很慢，需要经过相当的时间，贮水箱内才会有足够的水量。RO膜可执行离子排除，使得只有水可通过RO膜，其余所有的离子及溶解的分子都被截留，并加以排除(包括盐类和糖)。RO膜以电荷反应将离子排除，带电荷愈大，排除性愈高，所以RO膜几乎可排除所有的(99%)强离子性的高价离子，但是，对于弱离子性的单价离子(如钠离子)的效果只有95%。不同的进水需要不同种类的RO膜，RO膜包括由乙酸纤维酯制成，或是以聚硫胺与聚砜基质的混合薄层聚合物。如果以原水水质及产水水质为基准，经过适当设计后，RO是将自来水纯化的最经济有效方法。RO同时也是试剂级纯水系统很好的前处理方法。四、离子交换法离子交换法是以圆球形树脂(离子交换树脂)过滤原水，水中的离子会与固定在树脂上的离子交换。常见的两种离子交换方法分别是硬水软化和去离子法。硬水软化主要是用在反渗透(RO)处理之前，先将水质硬度降低的一种前处理程序。软化机里面的球状树脂，以两个钠离子交换一个钙离子或镁离子的方式来软化水质。离子交换树脂利用氢离子交换阳离子，而以氢氧根离子交换阴离子；以包含磺酸根的苯乙烯和二乙烯苯制成的阳离子交换树脂会以氢离子交换碰到的各种阳离子(例如Na+、Ca2+、Al3+)。同样的，以包含季铵盐的苯乙烯制成的阴离子交换树脂会以氢氧根离子交换碰到的各种阴离子(如Cl-)。从阳离子交换树脂释出的氢离子与从阴离子交换树脂释出的氢氧根离子相结合后生成纯水。阴阳离子交换树脂可被分别包装在不同的离子交换床中，分成所谓的阴离子交换床和阳离子交换床。也可以将阳离子交换树脂与阴离子交换树脂混在一起，置于同一个离子交换床中。不论是那一种形式，当树脂与水中带电荷的杂质交换完树脂上的氢离子及(或)氢氧根离子，就必须进行“再生”。再生的程序恰与纯化的程序相反，利用氢离子及氢氧根离子进行再生，交换附着在离子交换树脂上的杂质。若将离子交换法与其他纯化水质方法(例如反渗透法、过滤法和活性碳吸附法)组合应用时，则离子交换法在整个纯化系统中，将扮演非常重要的一个部分。离子交换法能有效的去除离子，却无法有效的去除大部分的有机物或微生物。而微生物可附着在树脂上，并以树脂作为培养基，使得微生物可快速生长并产生热源。因此，需配合其他的纯化方法设计使用。五、EDI纯水技术电渗析(EDI)是一项结合了离子交换树脂和离子选择性通透膜，并结合直流电去除水中离子化杂质的技术。该项技术的发展克服了离子交换树脂的局限性，特别是离子交换柱耗竭时离子杂质的释放及重填或再生离子交换柱的工作。水通过一个或多个在阳离子或阴离子选择膜之间填满离子交换树脂的管腔，在电场的作用下，离子在离子交换树脂间向管腔的两侧移动并进入另外的管腔，这个过程中也会电解产生维持树脂处于再生状态所需的H+和OH- 。流向两侧独立管腔的离子被水冲刷掉。六 、超滤法超滤（UF）是一个过滤术语，指能去除如蛋白质大小的颗粒的过滤器。膜孔径通常在1-50nm之间，中空纤维结构的超滤膜通常有较高的滤过速率。超滤膜根据其降低相关污染物浓度的效率来分级微孔薄膜是依其孔径大小来去除颗粒，而超滤(UF)薄膜则是一个分子筛，它以尺寸为基准，让溶液通过极细微的滤膜，以达到分离溶液中不同大小分子的目的。超滤膜是一种强韧、薄、具有选择性的通透膜，可截留大部分某种特定大小以上的分子，包括：胶质、微生物和热源。较小的分子，例如：水和离子，都可通过滤膜。所以，超滤法可将截留液中的大分子加以浓缩，但是，仍有些大分子会渗漏至滤过液中。超滤膜有数种不同的范围，在所有的实例中，超滤膜会留在大部分大于其分子筛所定义分子量的分子。七 、紫外线照射法紫外线照射法已广泛的使用在水处理上，低压水银灯所放射出来的254nm的紫外线是一种有效的杀菌方法，因为细菌中的DNA及蛋白质会吸收紫外线而导致死亡。近来在UV灯制造技术方面的进步，已可制造同时产生185nm和254nm波长的紫外灯管，这种光波长组合可利用光氧化有机化合物，接着这种特殊灯泡，将纯水中的总有机碳浓度降低至5ppb以下。八、蒸馏法蒸馏法是通过改变水的形态，从液态到气态再回到液态，将水和污染物分离。蒸馏法的每一个转换过程都为纯水与污染物的分离提供了机会。理论上，除蒸汽压力与水接近的物质和共沸化合物，蒸馏法能去除所有种类的水中污染物。像RO一样，蒸馏法生产纯水的速度较慢，所以蒸馏水必须先储存起来以备日后使用。蒸馏水器非常耗电，每生产1升纯水通常耗费1KW电力。依据蒸馏水器的不同设计，蒸馏水的电阻率大约能达到1 MΩ-cm，因为空气中的CO2会溶入蒸馏水中迅速降低其电导率。新鲜蒸馏水是无菌的，但如果保存不当，一段时间后就不再是无菌的了。九、凯得菲(KDF)凯得菲(KDF)的作用及功效：凯得菲(KDF)是高纯度的铜/锌合金颗粒，它通过微电化学氧化-还原反应(Redox)进行水处理工作，在与水接触时，合金中的两种金属在亚微观尺度上构成无数小的原电池系统，这种材料在水中具有强大的反应能力和极快的反应速度，可以清除水中高达99%的氯和水中溶解的铅、汞、镍、铬等金属离子和化合物。对抑制细菌、真菌、污垢、水藻的滋生效果卓著。被用于预处理、主处理与废水处理设备。凯得菲(KDF)完善或取代现有技术，可大辐度延长了系统寿命，减少重金属、微生物、污垢，降低了总费用，减化系统维护。(1) 去除强氧化剂(余氯)凯得菲(KDF)具有强大的还原能力，能去除水中的各种强氧化剂，对余氯特别有效。(2)去除重金属凯得菲(KDF)处理介质可以去除水中的多种重金属离子，如铅、汞、铜、镍、镉、砷、锑、铝和其他许多可溶性重金属离子，它们的去除是通过置换反应和物理和化学吸附反应来完成的。凯得菲(KDF)去除重金属离子的机理如下：金属离子吸附于凯得菲(KDF)处理介质的表面并与凯得菲(KDF)中的锌发生置换反应，生成的金属或吸附在凯得菲(KDF)表面，或进入凯得菲(KDF)晶格中，从而使有毒重金属污染物结合在凯得菲(KDF)上。例如，水中溶解的铅离子还原成不溶性的铅原子，并吸附于凯得菲(KDF)介质的表面,汞离子与凯得菲(KDF)也发生类似的反应，X射线衍射研究发现汞的去除是形成了铜－汞合金。(3)去除硫化氢在应用膜法进行水处理时，如果选用地下水作水源，水中可能存在硫化氢，硫化氢如被氧化成硫磺就会污染滤膜表面，凯得菲(KDF)过滤介质有去除硫化氢的功能，生成的硫化铜不溶于水，可在凯得菲(KDF)介质反冲洗时去除(4)减少悬浮固体凯得菲(KDF)处理介质的颗粒平均尺寸大约为60目，最小的颗粒约110目，也能起到物理过滤去除悬浮物质的作用，通常凯得菲(KDF)过滤介质能够有效地去除直径小于至50μm的颗粒。(5)减少矿物质结垢(6)抑制微生物繁殖凯得菲(KDF)处理介质不是通过一种机理、而是几种机理控制微生物的生长繁殖，通过每一种的单独作用或协同作用来达到抑制微生物的作用。主要机理包括：氧化还原电位的变化，氢氧根离子和过氧化氢的形成，介质中锌的溶出等。在一般情况下，凯得菲(KDF)处理介质作为反渗透膜的预处理手段时，能够抑制细菌、藻类等微生物的繁殖，从而防止了微生物对膜的破坏。【本文由和泰仪器发布，未经允许，禁止转载、抄袭！部分内容整理摘编自网络，如有侵权,请联系改正！】

酸纯化器一、 产品简介：南京滨正红---酸纯化器：又称酸纯化系统，高纯酸提纯器，酸试剂提纯器，高纯酸蒸馏纯化器等，可用于实验室酸如HNO3、HCl、HF、碱溶液和有机溶剂的纯化，纯化后的酸和Merck的一样好，可用于痕量和超痕量分析的样品制备，纯化器带有液位计方便观察里面的溶液，一个出酸口，一个排废液口，操作维护方便，是超纯净实验室化学反应的必备产品。 实验后期可配套我单位Teflon特氟龙系列试剂瓶收取高纯酸。为了满足更多客户的需求，我厂研发了更大规格的酸纯化器（2000ml）二、工作原理：酸纯化器是利用热辐射原理，保持液体温度低于沸点温度蒸发，再将其酸蒸气冷凝从而制备高纯水和高纯试剂，广泛应用于样品处理及分析中。目前市场上的超纯酸由于价格较贵，很难满足日常分析需求，因此提纯优化酸的质量，是最为经济可行的途径。是超纯净实验室提取高纯酸的得力助手。典型用户：中国地质大学、中国计量科学研究院、中国科学院地球化学研究所、中国工程物理研究院、中核建中核燃料元件有限公司、长沙核工业230研究所、广西壮族自治区海洋环境监测中心站、中国建材地勘中心陕西总队等。 三、 产品特点：1、可以满足ICP、ICP-MS极低的检测限需要及苛刻的分析应用中提供实验室级超纯酸，所用容器均采用Teflon耐腐蚀无吸附塑料，可处理如HNO3、HCl、HF等实验室的常用酸。2、实验证明将金属杂质含量约10ppb的酸经过一次蒸馏后，金属杂质含量可以降低到0.01ppb左右。若对酸要求更高，可增加提纯次数。四、相关参数：型号CH-I 500mlCH-II 1000mlCH-Ⅲ 2000ml名称酸纯化器酸纯化器酸纯化器产酸率30ml/h50ml/h70ml/h温控方式PID温控数显PID温控数显PID温控数显控温精度±1℃±1℃±1℃材质FEP、PTFE、硅胶（冷却水管）电压220V/50Hz功率（W）350优势1.密闭环境下提纯酸，不受环境污染，确保酸纯度2.纯PFA、FEP、PTFE材质制造，空白值低无腐蚀3.技术先进，结构合理，操作简单，一键式操作，蒸干自我保护4.提纯过程中，极少量酸气逸出5.节约成本，方便实验：较短时间内纯化低成本的酸试剂以达到痕量分析要求实验数据（仅供参考）：仪器：CH-I 酸纯化器；试剂：优级纯HF 蒸馏后，经中国地质大学地质过程与矿产资源国家重点实验室ICP-MS检测出HF中杂质的含量：元素测量浓度（ng/g=ppb）元素测量浓度（ng/g=ppb）Be0.01Ba0.01Mg0.02La0.01Sc0.01Ce0.01V0.01Pr0.01Cr0.03Nd0.01Mn0.01Eu0.01Co0.01Gd0.01Ni0.01Tb0.01Zn0.02Er0.01Ga0.01Tm0.01Rb0.01Yb0.01Sr0.02Lu0.01Zr0.01Hf0.01Cd0.01Pb0.01Sn0.01Th0.01Cs0.01U0.01 创新点：顶部驻酸，从源头上避免交叉污染底部硅胶片加热，PID温控数显，人性化结构设计，可置于通风橱中工作并实现无人看管所有部件均采用特氟龙塑料、彻底杜绝腐蚀和二次污染的问题可连续不间断地制备硝酸、盐酸、氢氟酸、碱溶剂及有机溶剂CH酸纯化器,高纯酸提纯器

p　　strongspan style="color: rgb(31, 73, 125) "超速离心的差速沉淀及等密度梯度离心法/span/strong/pp　　无论是国际顶级杂志的文献统计，还是国内用户的私下调研，超速离心一直都是作为外泌体或者说胞外囊泡分离纯化的金标准而存在。伴随着外泌体的发现、研究深入和产业转化，不断有各种“替代”方法、试剂盒出现，试图挑战超离在外泌体分离纯化方式中的领导地位，但至今仍未有成功。究其原因，超速离心也许是唯一一个可以同时用两个不同维度对外泌体进行分离纯化的实验方法。/pp　　每一种颗粒，例如外泌体，都会有其自身的一定特定属性，例如特定的大小区间、一定的密度范围、也许还有某些特别的表面标记物等等。以上每一种属性，只要能够与其他的颗粒存在足够的区分度，我们就可以相对应想办法进行识别和分离，这就构成了近百年来分子生物学的种种纯化手段。/pp　　以超速离心为例，其核心原理为沉降平衡方程：/pp style="text-align: center"img src="http://img1.17img.cn/17img/images/201806/insimg/0f433fe1-85c9-43f2-9e09-d27552a46652.jpg" title="1.png"/img src="http://img1.17img.cn/17img/images/201806/insimg/ac34f1d2-2ece-4c7e-939b-988f7f3f7ce1.jpg" title="2.png" width="300" height="366" border="0" hspace="0" vspace="0" style="float: right width: 300px height: 366px "/　　/pp style="text-indent: 2em "v为每个颗粒在离心过程中的瞬时移动速度，d是颗粒直径， σ是颗粒密度，ρ介质液密度，?介质液年度，ω2r为转速及所处离心半径 /pp　　当两个或多个颗粒的直径d有显著差异时，其离心沉降速度也将会有较明显差别。直径大的颗粒很快就可以沉淀下来，而更小的颗粒需要更大的离心力或者更长的离心时间才可完成沉降。这就是我们最常用的差速沉淀的基本原理。例如10万xg离心1-3小时，就是最常见的把100nm左右的颗粒沉淀下来的实验条件。/pp　　但一种方法不可能是万能，当不同颗粒的大小比较接近时，基于大小的分离方法就会出现误差，把不同的颗粒都一起分离下来，虽然已经把过大或者过小的颗粒去除，但如果类似大小的杂质颗粒过多，实际上这也只能算是分离富集，而不能算作纯化。/pp　　为此，离心专家们又开发了另一种实验方案，人为地制造不同的介质液密度区间。基于上述沉降速度方程，每一个颗粒最终将会停留在跟它本身密度相同的位置。由于介质液按实验需要铺设成连续或不连续分布，最终不同样品也会根据密度的差异，形成不同的区间性分布。外泌体由于其脂膜结构(密度~1g/ml)包裹了一定量的核酸(密度1.4~1.7g/ml)及蛋白(密度1.2~1.4g/ml)，导致其平均密度区间为1.13~1.19g/ml左右(实测值)。通过铺设不同的介质液分层，例如通过不同浓度的OptiPrep/蔗糖/TE Buffer，我们就可以人为的仅把符合此密度区间的颗粒给筛选出来。/pp style="text-align: center"img src="http://img1.17img.cn/17img/images/201806/insimg/d813137b-fb44-4826-b814-626f12a8d2ec.jpg" title="3.png"//pp　　不同的胞外囊泡，拥有不同的大小和密度分布区间，这类物理属性是我们在研究生物颗粒时最直观也是最准确的表观参数。超速离心法，正式通过大小和密度两个不同的维度，根据实验的需要，一步步地把我们所要重点研究的外泌体颗粒，从纷繁复杂的体液环境中、从不同的胞外囊泡中分离、富集和纯化下来。/pp style="text-align: center"img src="http://img1.17img.cn/17img/images/201806/insimg/4f8ecfd3-926d-4a24-9385-f9f77097ef19.jpg" title="3.jpg"//pp　　下一期，我们将进一步对比分析其他基于试剂盒或其他实验原理的外泌体分离纯化方法，从中找出最适合我们不同实验所需的实验方案，以及超速离心为什么始终被认为是金标准的原因，敬请期待！/p

p style="line-height: 1.5em " strong仪器信息网讯/strong 日前，拜泰齐推出了全新一代快速纯化系统Selekt以及纯化色谱柱Sfä r。这两个新产品将共同为有机和多肽领域的实验人员提供全新的快速纯化解决方案，以改善他们的分离体验。br//pp style="text-align: center line-height: 1.5em "img src="https://img1.17img.cn/17img/images/201810/uepic/ee7f9dc1-ee15-4525-9aeb-90e90d64c894.jpg" title="biotageselekt5863_800x800.jpg" alt="biotageselekt5863_800x800.jpg" width="450" height="397" border="0" vspace="0" style="width: 450px height: 397px "//pp style="line-height: 1.5em text-align: center "strongspan style="color: rgb(0, 176, 240) "span style="font-family: " times new roman" "Selekt /spanspan style="font-family: 宋体, SimSun "系统/span/span/strong/pp style="line-height: 1.5em "　　span style="font-family: 宋体, SimSun color: rgb(247, 150, 70) "strongspan style="font-family: 宋体, SimSun font-size: 20px "性能提升 小身材有大智慧/span/strong/span/pp style="line-height: 1.5em "　　拜泰齐全新的快速纯化色谱系统Selekt小巧紧凑，占地面积很小，并且可以将色谱柱安装在仪器的一侧或前面，最大限度的节省了实验室的空间。同时该仪器在性能参数上做了大幅提升，包括双通道设计，避免了单通道运行所需的准备时间，也可以保证系统在正反相之间轻松转换，提高了仪器使用效率；全新高速流量设计，流速最高可达300mL/min，拓宽了耐压范围，由原来的10bar提升至30bar，使纯化过程能够以更快的速度进行；多项优化提升有助于在提高样品纯度的同时减少溶剂的使用，更加绿色环保。/pp style="text-align: center"img src="https://img1.17img.cn/17img/images/201810/uepic/a1cc65a3-eac2-45ee-a4f4-e152f35aae0e.jpg" title="sfar column.jpg" alt="sfar column.jpg" width="450" height="494" border="0" vspace="0" style="width: 450px height: 494px "//pp style="line-height: 1.5em text-align: center "strong style="color: rgb(0, 176, 240) text-align: center "Sfä r 色谱柱/strong/pp style="line-height: 1.5em "　　与新系统一起推出的纯化色谱柱Sfä r，是拜泰齐全新的快速纯化柱系列，具有从5g到350g的各种尺寸和条件类型。色谱柱使用具有更高表面积的的填料填充，因此具有更高的负载能力，使用户能够选择更小的柱子分离更多的样品，减少了溶剂的用量和分离的成本。同时， Sfä r色谱柱具有灵活多样的上样方式，满足用户的多种选择。/pp style="line-height: 1.5em text-align: left "　　span style="font-size: 14px "strongspan style="color: rgb(0, 176, 240) "Selekt 技术参数/span/strong/span/pp style="line-height: 1.5em text-align: left "span style="font-size: 14px "　　重量: 23 kg/span/pp style="line-height: 1.5em text-align: left "span style="font-size: 14px "　　大小: (W x D) 335 mm x 393 mm/span/pp style="line-height: 1.5em text-align: left "span style="font-size: 14px "　　高度: 545 mm./span/pp style="line-height: 1.5em text-align: left "span style="font-size: 14px "　　触屏面积： 15.0英寸./span/pp style="line-height: 1.5em text-align: left "span style="font-size: 14px "　　色谱柱通道： 两个/span/pp style="line-height: 1.5em text-align: left "span style="font-size: 14px "　　流量范围： 1–300 mL/min./span/pp style="line-height: 1.5em text-align: left "span style="font-size: 14px "　　压力范围：0–30 bar (0–3000 kPa 0–435 psi)./span/pp style="line-height: 1.5em "　　strongspan style="font-size: 20px color: rgb(247, 150, 70) "智慧交互 细节带来良好用户体验/span/strong/pp style="line-height: 1.5em "　　Selekt在全面提升仪器性能的同时，也针对用户体验做了多项优化，整体提高了仪器的易用性。全新设计的15英寸大屏灵活交互界面，集成所有功能，使操作更简便更直观。独家研发的操作系统，为使用者提供了更深度的智能体验，可以记录实验人员的使用习惯，预先加载常用的分析方法。拜泰齐的产品经理也表示，Selekt系统第一次在系统推出的同时搭载了专业的中文操作软件，更有利于国内的用户在第一时间获得良好的使用体验。/pp style="line-height: 1.5em "　　而Sfä r色谱柱，每一个柱子上都有专属的二维码，可以记录柱子的使用数据，使得用户可以通过扫码清楚地知道柱子的使用时间以及分析方法，带来更智能化的体验。/pp style="line-height: 1.5em "　　span style="color: rgb(247, 150, 70) font-size: 20px "strong全面升级 拓展应用领域范围/strong/span/pp style="line-height: 1.5em "　　本次新产品，是拜泰齐近年来最重要的一次产品革新，拜泰齐对于全新的分离纯化解决方案充满信心，随着产品的全面升级，拜泰齐将瞄准更多应用领域。随着流速和耐压的提升，Selekt能够支持部分高压制备液相的功能，可以支持10um粒径填料的应用。Selekt支持从小分子到大分子的样品分离纯化需求，大大拓展了应用范围，除了应用于以往的小分子制药等传统领域之外，也可用于天然产物、生物大分子等领域。/pp style="text-align: center"img src="https://img1.17img.cn/17img/images/201810/uepic/3467a369-769c-4221-b515-812260b08be0.jpg" title="35391535431917963.jpg" alt="35391535431917963.jpg" width="450" height="300" border="0" vspace="0" style="width: 450px height: 300px "//ppbr//p

由中国生物工程杂志社(中国生物工程学会会刊)主办的第14期蛋白质分离纯化技术专题研讨班定于2012年9月15-16日在上海举行。本期研讨班课程综合了国内外最新的蛋白质分离纯化技术与方法，特别是广泛吸纳了历届参会代表的大量问题解答与反馈意见以及研发与产业中的实际应用需求，经权威专家的反复提炼而成。研讨班内容涵盖蛋白质样品制备、纯化策略、过程优化，相关的产品规定、政策解读以及技术经济分析等内容，并注意突出重点和难点，如基因工程上下游的整体策略、纯化中的具体难点，层析介质的选择等多方面，以及层析柱蛋白质失活等具体问题。　　本期研讨班由中国科学院从事制备与纯化技术的一线专家授课，注重引导学员讨论实际案例，突出互动性以提高学习效果，从而帮助参会人员在短时间里高效率地掌握蛋白质分离纯化工具，获得规范和先进的蛋白质纯化与工艺开发知识和方法，提高蛋白质分离纯化实践中解决具体问题的能力。　　本期研讨班课程涵盖了从样品制备到纯化策略和过程优化的全过程，主要内容包括：　　蛋白质样品的获得层析预处理原则与技术：离心、过滤、超滤、双水相抽提蛋白质层析，包括：　　(1)层析介质选择：层析介质特性对层析过程的影响——材质、孔径、官能团　　(2)层析技术：分子排阻、离子交换、疏水层析、金属螯合、亲和层析等　　(3)层析步骤整合方法：选择性、分辨率、动态载量、主要杂质的控制和去除　　(4)蛋白质纯化平台：适应于分子生物学实验室蛋白质纯化的方法和实例　　单克隆抗体纯化，包括：　　(1)单克隆抗体的生化性质　　(2)单克隆抗体纯化的工具　　(3)单克隆抗体纯化的策略和方案　　用于疫苗和基因治疗的病毒颗粒纯化策略和方法　　(1)双水相技术　　(2)整体柱分离技术：病毒颗粒的离子交换，疏水，IMAC及亲和层析纯化　　蛋白质纯化的溶液体系　　(1)蛋白质纯化的缓冲溶液组成和功能　　(2)各种层析模式的常用缓冲溶液的设计和使用　　蛋白质层析技术经济分析　　研讨班还安排高效重组蛋白表达策略与经验介绍等专题内容。　　会议时间、地点：2012年9月15-16日，中国科学院上海学术活动中心(好望角大饭店)，地址：上海市肇嘉浜路500号。报到时间：2012年9月14日，报到地点：好望角大饭店一层。　　参会办法：参会代表请于9月7日前填写会议回执后Email/邮寄/传真至会议主办单位中国生物工程杂志社，会议费每人1600元，在读研究生每人1400元(凭有效证件)，食宿统一安排，费用自理。　　联系方式：　　通信地址：北京市海淀区中关村北四环西路33号中国生物工程杂志社(100190)　　联 系 人：任红梅13641036700　　电 话：(010)82624544，82626611-6511 传真：(010)82624544　　电子邮件：renhm@mail.las.ac.cn　　中国生物工程杂志社　　2012年8月　　第14期蛋白质分离纯化技术专题研讨班报名回执表　　(参会代表请于2012年9月5日前Emial/传真/邮寄至中国生物工程杂志社)单位名称 通信地址邮编姓名性别职称电话传真E-mail是否住会 　　第14期蛋白质分离纯化技术专题研讨班住宿预订表　　(住会者请务必2012年9月5日前回传本表，否则无法安排住宿)单位名称联系人电话手机电子邮件代表姓名性别是否需要单人间入住日期离店日期 　　报到及住宿酒店　　好望角大饭店，地址：上海市肇嘉浜路500号，酒店电话021-64716060。住宿标准：330元/天标准间。由于好望角大饭店属于政府采购指定酒店，对于事业单位的参会代表，可以凭工作证享受政府采购价格298元/标准间(含早餐)。

流动化学创新地将传统独立分开的合成操作过程整合起来，在连续流动的系统中完成化学反应，加快了合成的速度，对于绿色化学和实验室自动化领域具有非常重要的意义。此前，我们与爱丁堡赫利瓦特大学 VilelaLAB 和流动化学实验室进行合作，借助 Advion Interchim Scientific puriFlash5.250 纯化制备系统，搭建了全新的连续分离纯化平台，进一步加快实验流程。AIS puriFlash5.250 纯化制备系统ONE平台搭建 平台大致上分为三部分：流动反应池部分、在线输送部分以及AIS puriFlash 5.250 制备纯化部分。实验平台搭建示意图ONE基本思路step 1：流动反应池系统用于进行合成并将粗反应混合物直接或通过在线萃取器输送到 AIS puriFlash 5.250 色谱仪的进样口处。step 2：puriFlash 5.250 通过仪器的 10 通阀，将原料交替切换注入到其中一个样品环中。step 3：两根相同的色谱柱：一个加载反应混合物，另一个用于平衡和执行色谱方法，确保样品环中的样品不损失。 step 4：使用 UV＋ELSD 检测器监测并进行馏分收集。 ONE 实验关键点1、优化流动反应池的设置，以获得产品的最大产率；2、优化纯化方法，尽量减少离线实验中粗反应混合物纯化所需的时间；3、色谱方法与流动反应池的进料流速同步，以实现成功的耦合。ONE应用实例(A) 乙二醇和苯甲酰氯酯化反应的在线快速纯化流程示意图。 (B) 40 个连续分离的酯产物的色谱堆叠图。DMAP：4-（二甲氨基）吡啶，FBR：固定床反应器。 实验体系证明了流动化学集成 puriFlash 5.250 从粗反应混合物中同时分离两种产品（以克/小时为单位，纯度 99%）的潜力。在乙二醇和苯甲酰氯的连续流动酯化中，两种酯的产率分别为 9.9 和 7.6 mmol/h。ONE讨论 使用测试混合物(4-甲氧基苯酚和2,5-二溴对二甲苯，正己烷/乙酸乙酯体系)成功进行了原理验证研究，证明了流动化学-puriFlash5.250集成的可行性，并确认了 Advion Interchim Scientific Flash 柱的耐用性。 受到该方法成功的启发，另外几种不同的反应也得到了验证，连续分离出纯度为 97-99% 的产品。 除此之外，puriFlash 5.250 纯化制备系统还可以提供重要的辅助功能。 • 以4,7-二苯基-2,1,3-苯并噻二唑为均相光敏剂，催化 fmoc-l-蛋氨酸生成相应的亚砜为例，证明了均相催化剂在线回收的可能性。 • 可以实现 AIS puriFlash 纯化制备色谱系统与您的流动化学无缝集成，这种联合能够满足实验需求，有助于加速化学新反应的发现。

为了进一步加强国产科学仪器的推广使用，支持民族仪器工业的发展，优先选择适用的国产科学仪器。《现代科学仪器》编辑部与国产科学仪器应用示范中心合作开展&ldquo 第二届受用户欢迎的国产科学仪器产品推荐&rdquo 活动，从用户使用过反映较好、性能稳定的国产科学仪器中，遴选出优秀的国产科学仪器作为《国产科学仪器推荐目录》(第1期)，供广大仪器用户参考和选购。 天津博纳艾杰尔&ldquo CHEETAH快速纯化系统&rdquo 顺利入选此次推荐目录。 &ldquo CHEETAH快速纯化系统&rdquo 是博纳艾杰尔自主研发的一款中压设备，该仪器包含技术专利2项，已经获得ISO9001认证，天津市计量监督检测科学研究院鉴定，并获得CE认证，远销国外。 我们的客户有：南开大学，浙江大学，军事医学科学院二所，中国计量科学研究院，上海药物所等等，产品分离效果好，效率高，操作界面简洁实用，性价比高，获得广大用户的认可。 本次入选国产科学仪器推荐目录，充分体现了广大用户对博纳艾杰尔的支持与信赖，我们将一如既往以建立有竞争力的民族品牌为己任，深入研发产品技术，为客户提供更优质的服务。 关于此仪器的详细信息见http://www.agela.com.cn/web/product/detail.asp?id=362&topstyle=4

随着现代生物技术与生物产业的迅速发展，蛋白质分离纯化已成为现代生物工程的关键技术。应国内生物技术科研界与产业界的需求，中国生物工程杂志社(中国生物工程学会、中国生物技术发展中心、中国科学院文献情报中心主办)围绕蛋白质分离纯化与抗体制备、蛋白组学技术与应用举办了一系列的专题研讨班。本期研讨班由国内从事制备与纯化技术的一线专家授课，课程内容综合了国内外蛋白质分离纯化领域的新技术、新方法，兼顾国内研发及产业工作中的实际需求，同时重视与吸纳往届参会代表的意见反馈，从而使课程内容不断成熟完善。　　第七期蛋白质分离纯化专题研讨班将于2010年6月23-24日在上海举办。本期研讨班内容涵盖蛋白质样品制备、纯化策略、过程优化，相关的产品规定、申报政策以及技术经济分析等，旨在帮助生命科学研究与生物技术应用领域的专业人员在短时间里高效率的掌握蛋白质分离纯化工具，提高蛋白质分离纯化实践中解决具体问题的能力。　　研讨班主要内容：　　l 蛋白质样品的获得　　l 层析预处理原则与技术：离心、过滤、超滤、双水相抽提　　l 蛋白质层析，包括：　　(1)层析介质选择：层析介质特性对层析过程的影响——材质、孔径、官能团　　(2)层析技术：分子排阻、离子交换、疏水层析、金属螯合、亲和层析等　　(3)层析步骤整合方法：选择性、分辨率、动态载量、主要杂质的控制和去除　　(4)蛋白质纯化平台：适应于分子生物学实验室蛋白质纯化的方法和实例　　l 单克隆抗体纯化，包括：　　(1)单克隆抗体的生化性质　　(2)单克隆抗体纯化的工具　　(3)单克隆抗体纯化的策略和方案　　l 蛋白质纯化的溶液体系　　(1)蛋白质纯化的缓冲溶液组成和功能　　(2)各种层析模式的常用缓冲溶液的设计和使用　　l 蛋白质层析技术经济分析　　会议时间、地点：2010年6月23-24日，上海光大会展中心西馆三层2号会议室(上海市徐汇区漕宝路66号)　　报到时间、地点：2010年6月22日，上海华夏宾馆　　参会办法：参会代表请于6月10日前填写会议回执后Email或传真至会议主办单位中国生物工程杂志社，会议费每人1500元，在读研究生每人1300元(凭有效证件)。食宿统一安排，费用自理。　　联系方式：　　联 系 人：任红梅13641036700，吴飞13693693883　　通信地址：北京市海淀区中关村北四环西路33号中国生物工程杂志社(100190)　　电 话：(010)82624544，82626611-6511 传真：(010)82624544　　电子邮件：renhm@mail.las.ac.cn　　蛋白质分离纯化技术专题研讨班报名回执表　　(参会代表请于2010年6月10日前Emial/传真至中国生物工程杂志社)单位名称通信地址邮编姓名性别职称电话传真E-mail是否住会 　　蛋白质分离纯化技术专题研讨班住宿预订表　　(住会者请务必2010年6月10日前回传本表，否则无法安排住宿)单位名称联系人电话手机电子邮件姓名性别是否需要单人间入住日期离店日期 报到及住宿酒店：会议住地：上海华夏宾馆（021-51001610），标准间每天300元。地址：上海市徐汇区漕宝路38号

疫苗，是2020年一个被频繁提及的词，在以后的很长一段时间里也会持续出现在大家的视野中。接种疫苗是预防和控制传染病经济、有效的公共卫生干预措施，对于家庭来说也是减少成员疾病发生、减少医疗费用的有效手段。 不同疫苗的生产时间各不相同，有的疫苗可能需要22个月才能生产出一个批次。疫苗的开发是一个漫长而复杂的过程，且成本很高。为保证疫苗的安全性和有效性，降低接种疫苗的副作用和杂质的免疫干扰，需要对疫苗进行有效的分离纯化，去除细胞培养液中的其它杂质，提高疫苗有效成分的含量和纯度。本文简要介绍了疫苗分离和纯化的当前方法，以及疫苗纯化技术的应用，发展和前景。疫苗纯化路线疫苗在研制方式、组成成分和物理、化学性质及原始来源等诸多方面都存在或大或小的差异，其分离纯化方法具有相对特殊性。针对不同的疫苗应选用不同的分离纯化路线，但一般而言，都包括两个基本阶段：初级分离和精制纯化。初级分离阶段的主要任务是分离细胞和培养液，破碎细胞释放产物(如果产物在细胞内)，浓缩产物和去除大部分杂质等，这一阶段可选用的分离方法包括细胞破碎技术、离心沉降、盐析和超滤浓缩技术等；精制纯化阶段则选用各种具有高分辨率的技术，以使目的蛋白和少量干扰杂质尽可能分开，达到所需的质量标准，超速离心技术和各种层析技术成为当前达到此目的的主要方法。膜技术（粗纯技术）膜分离和超速离心纯化技术在疫苗、蛋白组分、多肽及生物大分子的纯化过程中有着广阔的发展前景。用该工艺制备的疫苗，纯度和性状符合规程要求，但抗原回收率相对较低、操作繁琐且周期长、技术设备要求高，近年来已逐渐为日臻成熟的层析技术所代替，在基因工程疫苗的研制中尤为如此。层析技术（精纯技术）凝胶过滤色谱也称为排阻色谱，凝胶渗透，凝胶色谱，分子筛色谱等。它是液相色谱中按分子大小分离的技术。它主要用于组分分离：脱盐，更换缓冲液，去除有害试剂，纯化蛋白质，肽，多糖等生物分子。具有更换缓冲液快速，温和，产率高。适用于任何缓冲液系统。 离子交换色谱离子交换色谱法是一种吸附色谱法，可根据样品电荷差异起到分离作用。它被广泛用于所有纯化阶段和所有规模生产，具有可控，高选择，高容量，样品浓缩和高回收率特点。另外，没有一种离子交换是完美的。选择正确的离子交换介质非常重要。不同的样品和不同的纯化目的需要不同的离子交换介质。此外，值得注意的是，样品在上样之前要进行处理：除去颗粒物（离心或过滤方法），调节pH和离子强度（使用脱盐或缓冲液交换方法）。 疏水色谱疏水色谱法是基于液相色谱中生物分子的疏水性的技术。它是离子交换技术，凝胶过滤技术和亲和色谱技术的补充。具有温和且不变性的纯化；这也是一种浓缩技术；它具有高选择性和高收率的特点。 亲和层析亲和色谱是一种通过生物分子之间的特异性相互作用来分离生物分子的技术。这是一种特别易于使用的方法，该方法简单易用，纯度高且样品浓缩。纯化蛋白质更常见，因为它易于使用。一步纯化可以使纯度大于95％，去除特定杂质并快速分离。它广泛用于分离单克隆抗体和多克隆抗体，融合蛋白，酶，DNA结合蛋白以及任何可以结合其配体的蛋白。用于传统疫苗和新型疫苗的纯化技术,必须依靠各学科相关技术之间的结合而发展起来的，至今尚无一项技术能单独承担分离纯化的全过程。创新的分离纯化工艺，往往是由多项新技术和原有技术的优势组合而成。传统的离心、过滤和沉淀技术更多只是作为整个疫苗分离纯化工艺的起始步骤，用于初步分离过程，层析技术与沉淀、离心等传统分离技术的结合已逐渐成为疫苗分离纯化的主流。 1.更均匀的粒径分布及平均34um的粒径使其具有极高的分辨率！2.琼脂糖基质使其可以耐受0.5MPa的压力！3.极高的耐压性使其具有高流速。使用高回收率高分辨率离子交换填料，再也不用担心高分辨率的离子交换填料流速太慢了！4.小粒径基质使其具有极高的比表面积，载量也很高哦！5.纯化工艺灵活，可以方便和疏水层析组合使用！6.就是如此完美，高载量，高流速，高分辨率，高回收率，高寿命！

科学家利用层析系统开发高效的蛋白分离介质。诺维信供图　　注射疫苗出现副作用，使用血液制品感染疾病，热销的生物制品紧急召回……这样的消息接连见诸报端。这在国家生化工程技术研究中心(北京)首席科学家苏志国看来，出现上述问题的背后，可能都是生物分离纯化技术不过关在“捣鬼”。　　“生物制药对纯度要求颇高，需要通过生物分离纯化技术将有害物质或杂质去除，但又不能破坏目标产物的活性，其过程十分复杂。”苏志国说，包括生物制药在内的生物技术各相关产业流程，到最后都绕不过分离纯化这一步。　　业内人士更是形象地将分离纯化技术，比作为生物技术产业化的“最后一棒”，而跑过的人都知道这一棒的艰难程度。　　不可替代的产业角色　　根据业内人士的共识，生物技术有所谓的上、下游之分。习惯上，把由生物学家从事的工作，包括分子生物学、生物化学、生物物理学以及遗传、育种、细胞培养、代谢等的研究划分为上游技术，而把生物技术初级制品的进一步分离、纯化、精制，进而制成最终产品的过程统称为下游技术。　　因此，生物分离纯化技术常常被称作生物技术的下游工程。　　从工业流程上来看，分离纯化技术也是距离终端产品最近的关键一步。　　在生物技术科研和生产过程中，存在着大量的蛋白质、多肽和核酸等生物大分子的分析、分离和纯化工作，需要高效快速的分析、分离和制备方法。　　而生物分离纯化技术又有别于传统的化学分离方法。全球最大生物酶制剂生产商诺维信中国研发部高级经理吴桂芳向《中国科学报》记者表示：“与化学方法相比，生物分离纯化要保持生物分子的活性，通常需要低温、特定的酸碱度、渗透压等。”　　苏志国进一步解释，化学分离法通常利用物质挥发度的不同，比如蒸馏、精馏，通过加热来分离 但对于生物分子，例如蛋白质，通过加热就容易失去活性，所以传统化工方法往往不适用于具有生物活性产物的分离纯化。因此，生物分离纯化技术具有不可替代的产业角色。　　据吴桂芳介绍，在生物制品的生产流程中，分离纯化成本一般占总成本的60%以上，主要是因为分离过程中的选择性不高，有效成分损失多。对于一些对终产物纯度要求高的产品，分离步骤越多，产物的最终收率越低。　　特别是用于临床的生物医药产品，不仅要达到很高的纯度，而且还要在分离过程中最大限度地保持其生物活性，因为一旦失活，不仅失效，甚至可能产生有毒有害物质。苏志国认为，不合格疫苗等生物制品在人体出现副作用，其背后往往存在生产企业生物分离纯化技术不过关的问题。　　令学者又爱又怵　　据苏志国观察，很多学生非常愿意学习生物分离纯化技术，甚至从其他专业“投奔”过来。“因为产业需求大，很多企业都需要这方面人才，毕业生好找工作。”　　而与此形成鲜明对比的是，国内长期在这一领域从事研究的学者却并不多。　　苏志国对《中国科学报》记者说：“有别于大多数基础科学研究，生物分离纯化技术的应用性很强，需要产业实践来检验，很难出理论成果，也不容易在国际一流期刊上发论文。”　　该领域的科研人员还需要直面来自企业的压力。花了真金白银的企业不会在乎学者发了多少文章，而是看能不能解决产业化问题。因此，研究者对于从事生物分离纯化技术研究的矛盾心理也就不难理解了。　　那么，生物分离纯化技术到底难在哪?　　马宁宁来自北京义翘神州生物技术有限公司。该公司以蛋白和抗体生产见长，去年还被世界知名生物技术公司Life Technologies选为战略合作伙伴。身为研发副总经理的他对于生物分离技术之难深有体会。　　据他介绍，生物活性物质对外界很敏感，具有天生的不稳定性，对分离条件要求高，从而限制了分离的手段，而同时其分离和纯化又是一个非常复杂的过程。　　例如，生物合成的发酵液或反应液是很复杂的多相体系。它含有微生物细胞、细胞碎片、代谢产物、未用完的培养基等，杂质含量较高，而目标产物的浓度却非常低，常常不到百分之一甚至千分之一 有的杂质还具有与产物非常相似的化学结构及理化性能，很难去除 目标产物具有生理活性物质，极不稳定，遇热或遇某些化学试剂极易失活或分解，还容易受到环境微生物的污染，因此常常要求在无菌条件下进行分离纯化。　　受制于人的局面必须打破　　生物分离纯化的复杂性，直接导致了其工艺流程长、需要的设备多，对原材料要求高等特点。　　而在生物分离纯化领域，我国生物产业却面临着受制于国外厂商的尴尬局面。　　马宁宁表示，有些设备和原材料看似简单，但对精度和GMP规范符合程度的要求很高，国内还不能生产，只能从国外进口。　　“例如色谱柱，国内产品精度和强度能达到生物制药生产要求的很难找到。”他对《中国科学报》记者说，“再比如分离介质，进口产品在国内的售价要比在原产国高出50%~100%。”　　苏志国认为，这意味着我国具有战略意义的生物产业，其命脉却掌握在别国手中。“长期以来我国生物分离纯化关键技术、设备和部分原材料依靠国外引进，这是发展阶段所决定的，但我们若想实现生物技术新产品的创制，就必须打破这一局面。”　　他建议，应加强生物分离纯化技术的基础研究，“因为基础科学是原动力，而如何在复杂系统中分离生物产品，其中某些科学规律还不清楚”。　　而各个被访者均重点阐述的，就是要攻克在设备和原材料方面的难题，其中又以分离介质为甚。　　吴桂芳表示，应针对特定的产品开发高选择性的分离纯化介质，从而缩短分离流程，提高产品得率。这需要材料学、化学、生物技术及化学工程的紧密合作，并与终端市场需求、生产企业需求的紧密结合。　　据马宁宁观察，分离纯化介质虽然附加值高，但由于用量低，并且技术要求高，对于习惯生产低端大宗工业品的企业不具吸引力，还需依靠有技术优势的中小企业来开发，但这些企业又因规模小不受国家重视。　　他认为，国家在选择扶持对象时，应该更多关注专于某个细分领域的小企业，“这样的企业非常重要，没有它们，现代化的生物技术产业链就无法建立，这些小公司不该被忽视”。　　记者手记　　产业化长跑不能倒在冲刺阶段　　科技产品从基础研究到投放市场，会经历漫长的过程。如果把这比作长跑，那生物技术产业化就是马拉松。　　这段时间记者接连跑了两家生物技术企业，其负责人无不感慨生物产业的煎熬：多少品种在中试阶段表现良好，结果一放大生产就功亏一篑。　　而生物分离纯化正是产业化冲刺阶段的关键技术。　　我们常说，不要输在起跑线上。经过近些年的努力，我国在生物技术基础研究上的成果可谓丰硕，已成为在国际顶级期刊上发表论文的常客。　　而在距离产业化最近的生物分离纯化阶段，我们同样需要强大的合力共同攻坚。　　与大多数基础科学不同，生物分离纯化技术研究的应用性很强，需要产业实践来检验，很难出理论成果，也不容易在国际一流期刊上发论文，不少学者望而却步或者来了又走。　　那么，能不能针对这一特点调整科研评价体系，把更多优秀学者吸引过来呢?　　生物分离纯化过程复杂，涉及多种设备和原材料，其中有些虽然附加值高，但由于用量低，并且技术要求高，对于习惯生产低端大宗工业品的企业不具吸引力，还需依靠有技术优势的中小企业来开发，但这些企业往往规模小，抗风险能力差，一个订单被国外抢走就可能倒闭。　　它们就像机器上的一颗颗螺丝钉，易被忽视但又不可或缺。它们期盼扶持政策的甘霖。国家能否鼓励更多的中小企业专于某一细分领域，给起跑不久的它们推上一把，这样，生物产业的整体才能尽早抵达终点。

由Percepta 公司发布的最新一季行业分析报告显示，中国核酸纯化(nucleic acid purification，NAP)市场明年内预计将增长8%，对于这个具有广阔前景却没有行业龙头的新兴市场，各大公司都在虎视眈眈的企图分一杯羹。　　&ldquo 中国的核酸纯化市场年轻而又富有生机，在这个新的市场领域缺乏相应的供应商以及相关领域专家。&rdquo Percepta 公司生命科学市场研究事务所主任Anne St Louis作为业内人士解释道。　　Percepta 公司近日以中国449名科研专家为调查对象做了一份调查报告，449名学者中将近20%从事相关产业。受访者表示Qiagen公司、Tiangen公司以及life technologies公司在当前细分的15个市场中是三大龙头供应商。罗氏、康宁、BioTeke、lllumina、Promega以及Clontech六家公司平分了中国核酸纯化的二线市场。　　根据Percepta 公司的这项调查显示，核酸纯化市场近四成以上被质粒DNA的小量制备、凝胶提取DNA、细胞和组织的隔离及反应后清理占据。　　与北美和欧洲市场不同，中国的核酸纯化市场没有明确的领导者。在西方市场，Qiagen公司占据着不容置疑的垄断性地位，通过调查北美和欧洲各个阶层核酸纯化市场，Qiagen最终以超过37个平均百分点的成绩击败了与其最接近的竞争对手。Qiagen公司以雄厚的资金和实力稳坐欧美核酸纯化市场的江山。　　只有拥有强大实力和背景、在世界名列前茅的生物公司才有可能占据中国核酸纯化市场的半壁江山。在中国，某些核酸纯化部门甚至以超过整体市场预估率的速度直线增长。例如，为下一代测序准备的DNA/RNA文库构建正以超过20%的速率迅猛增长。　　&ldquo 在北美及欧盟市场，由于Qiagen公司的垄断地位，几乎没有几家小型的核酸纯化企业在运行，但在中国仍有一些本土企业参与核酸纯化的市场运作。&rdquo Percepta 公司说。　　此外，除了中国Percepta 公司还将对印度、韩国的核酸纯化市场及产值做调研。无论怎样，对于中国的核酸纯化市场，Percepta 公司已经为我们描述出一幅诱人的蓝景。

众所周知，随着寡核苷酸的应用越来越广泛，不少企业相继加入寡核苷酸合成的赛道。想得到*高纯度的核酸不是一件简单的事，寡核苷酸的合成通常会导致不可避免的杂质积累，它们可能会与全长产品竞争，或者抑制反应，因此选择高效率高质量的纯化和干燥工艺是很有必要的。那么对于工业级别的寡核苷酸纯化，一般又有哪些方法呢？且听小编跟您慢慢分享。寡核苷酸的应用Oligo即寡核苷酸链，分子实验室常用的PCR引物、NGS捕获探针、qPCR探针和FISH探针等都是寡核苷酸。除了引物探针以外，还可作为核酸药物用于遗传疾病、肿瘤、病毒感染和感觉器官等疾病的治疗或预防。 探针及引物主要用于IVD试剂盒，面对需求量巨大的检测试剂盒，上游原材料的质量和供应速度应该同幅度进步和增长，在引物和探针的制备过程中，提高生产效率以及产物纯度更是重中之重。纯化方式对于不同的寡核苷酸链，应该如何选择合适的纯化方法？下面列举了几种常见的纯化方法。DSL（脱盐）纯化利用反相 C-18 层析柱进行脱盐，它对 DNA 有特异性的吸附，一些杂质，如氨、盐，不能被吸附，所以能有效地去除盐分等杂质。该方法不能有效去除比目的DNA短的小片段，所以适用于要求较低的PCR普通引物。 图1：DSL纯化制备流程图OPC纯化根据 DNA 保护基（ DMTr 基）和 Cartridge 柱中树脂间的亲合力作用的原理进行纯化目的 DNA 片段。该方法得到目的DNA的纯度能达到 95%以上,但受柱容量影响，适用于 40mer 以下的普通引物。 图2：OPC纯化制备流程图PAGE纯化聚彬稀酰胺凝胶电泳使用变性聚丙烯酰胺凝胶电泳，对引物DNA进行分离，然后从凝胶中回收目的DNA。PAGE纯化法也是一种非常有效的DNA纯化方法，纯化后的DNA纯度大于90%，对长链 (大于50mer)普通引物的纯化特别有效。 图3：PAGE纯化制备流程图HPLC高效液相色谱法根据寡核苷酸的疏水性对DNA片段进行纯化分离，该方法能达到极高的纯度和灵敏度，可以有效去除N-1短片段，目标DHA的纯度大于95%。适用于对纯度要求高的短链（小于40 mer）普通引物、修饰引物，尤其适合及荧光标记探针的纯化。若想得到纯度极高的寡核苷酸片段，HPLC法也常被用于与其他方式双重联合（如HPLC_PAGE、HPLC_CE、2xHPLC等）。 图4：HPLC纯化制备流程图引物干燥过程中的质量控制考虑引物合成纯化后都会产生一定的有机溶剂（如乙腈、甲醇、水等），需要采用真空离心浓缩设备将寡核苷酸干燥成干粉状，一般包装至EP管或者96孔板中。 图5：引物生产流程作为分子诊断qPCR试剂盒中的核心原料，qPCR引物及Taqman探针的质量直接影响了靶标检测的准确性，所以选择干燥工艺也十分关键，在干燥过程的质量控制需尽考虑以下几个方面：样品保护和温度控制在寡核苷酸的干燥过程中，尽量避免加热源直接照射在样品上而导致样品局部过热。红外加热模式，不直接加热样品，这样确保了样品的温度不会高于样品支架的温度，保证了样品的安全。SampleShield温度控制系统，采用非接触式温度探测用以在整个离心过程中，检测样品和离心腔的温度变化，确保整个蒸发过程受到质控。 避免交叉污染由于溶剂蒸发的过程中，低沸点溶剂和混合溶剂容易产生暴沸而导致样品损失和交叉污染，这会直接影响样品纯度。Dri-Pure防爆沸技术，控制真空度下降梯度和施加500g的离心力，让用户处理96孔板或384孔板等密集型容器时，无需担心样品交叉污染。 高通量选用通量高、干燥效率快的干燥手段对寡核苷酸的制备过程事半功倍，GeneVac浓缩仪可批量处理样品：一次可以处理几百个甚至上千个样品，全系列产品都有专门适配EP管和96孔板的铝制实心转子。如HT-12一次可以浓缩384个1.5ml EP管或24块96孔板，大大提高了研发和生产效率。 自动停机在制备大量的寡核苷酸样品时，无需值守的自动停机功能派上用场，使寡核苷酸样品干燥后立即自动停止蒸发，为核酸样品提供双重保护机制。应用案例WTCHG（牛津大学人类遗传学威康信托中心) 使用Sequenom MassARRAYSNP 基因分型系统用于SNP分析，样品前制备过程分别使用风干（左）和Genevac&ensp EZ-2真空离心浓缩仪（右）干燥含有寡核苷酸样品的384孔板。下图结果表明，使用EZ-2真空离心浓缩仪干燥寡核苷酸样品，可以大大降低样品降解率，保证样品不会被污染，消除了样品损坏的潜在来源。 图6：在空气干燥(左)和EZ-2蒸发器干燥(右)后的序列样品质量分析 *深绿色-高样本数据质量 *浅绿色-中等样本数据质量 *红色-样品质量差或无数据 图7：空气干燥(左)和EZ-2蒸发器干燥(右)后的SNP分析Genevac真空离心浓缩仪离心浓缩作为IVD原料合成制备的关键技术之一，具有通量高、干燥效率高、保护样品等特点，真空离心使浓缩过程都保持在较温和的环境中，提高寡核苷酸的产品纯度与收率，在工艺选择开发和放大中建立良好的工艺空间。一台高通量真空离心浓缩仪就可以做到浓缩干燥一步到位，可以直接作为生产设备投入到生产中，缩短整个Oligo制备过程，例如上述实验中所提到的Genevac&ensp EZ-2真空离心浓缩仪。这边我们为大家推荐下面几款Genevac旗下的真空离心浓缩仪。

概述制备色谱（Prep-LC）以其高分离效率，重现性和低溶剂消耗而闻名，是一种纯化技术。来自中国的色谱专家团队应用了传质动力学建模和吸附等温线，以改善该技术的缺点之一，即超载导致的非线性，这是纯化工艺发展的重要问题。保持直率对于药物提取，纯化仍然是一个巨大的挑战，因为结构相似的化合物可以共存于基质中，特别是对于从生物发酵或多肽合成中获得的药物而言。Prep-LC广泛用作分离和纯化技术，但是由于过载导致的非线性（用于提高通量）对于开发高效的纯化过程一直存在问题。为了克服这个问题，来自中国西南医科大学的一组研究人员选择了羟基酪醇（与橄榄果和叶片中橄榄苦苷水解产生的其他成分同时生成）作为模型化合物，用于系统地开发纯化方法。甲醇和乙醇用作有机改性剂，并在三种商用色谱柱C8TDE，C18ME和C18TDE上确定了最佳流速。曲线用van Deemter方程拟合，并对A，B和C项进行了全面分析。然后研究了吸附等温线，并提出了最合适的基于制备液相色谱的羟基酪醇纯化方法。纯化方法的开发与优化使用Shimadzu Prominence-i9（LC-2030）系列仪器进行HPLC分析，该仪器配备有脱气器，低压梯度仪，混合器，自动进样器和柱箱，并与UV检测器相连。在配备P680A泵，低压梯度仪，带有500μL样品定量环的手动进样器，TCC 100柱温箱和PDA 100检测器的Dionex P680A系列仪器上进行馏分收集。色谱条件为5％甲醇或乙醇水溶液。进样量5μL 柱温40°C 检测波长为280 nm。使用三根色谱柱（C8TDE，C18ME和C18TDE）在0.1至1.5 mL/min的15种不同流速下以0.1 mL/min的增量比较羟基酪醇的传质动力学。为了精确确定变量对等效于理论塔板（HETP）的高度的影响，使用van Deemter方程，Gidddings方程，Horvath和Lin方程以及Knox方程计算了羟基酪醇的传质动力学。 van Deemter方程的三个项，即涡流扩散（A项；由于固定相色谱柱的存在而导致的峰展宽，与流动相的速度无关），分子扩散（B项）和传质阻力（C项） ），确定了三列中的两种有机改性剂。随后研究了吸附等温线，以探讨溶质在固定相和流动相之间处于平衡状态的分布。将浓度较高的羟基酪醇（10–160mmol/L）的标准溶液泵入C18TDE色谱柱，并记录穿透时间。在这项工作中，发现在5％甲醇-水条件下C8TDE和C18ME色谱柱的最佳线速度为6.37 mm/s（0.3 mL/min），在5％乙醇条件下为4.24 mm/s（0.2 mL/min）。以水为流动相。对于C18TDE色谱柱，发现5％甲醇-水的最佳线速度为14.85 mm/s（0.7 mL/min），而5％乙醇-水的最佳线速度为4.24 mm/s（0.2 mL/min）。发现C18TDE柱是最高效的色谱柱，传质动力学分析表明，乙醇是分离羟基酪醇的合适溶剂，因为带有甲醇流动相的B项极其敏感，因此在改变其他条件时很难稳定其性能。由于C18TDE的最小A项以及可接受的B和C值，因此它是最佳选择。因此，选择C18TDE和乙醇纯化羟基酪醇是因为这种组合对变化不敏感，具有最佳的A，B和C项，并且符合Langmuir等温线模型。羟基酪醇已成功纯化，样品量为1.6％，回收率为90.98％，纯度为98.01％，以5％乙醇-水为流动相，采用了优化的分馏方法，流速为0.2 mL/min。动力学使其线性在制备型液相色谱中，传质动力学建模和吸附等温线的使用证明对开发和优化羟基酪醇纯化方法非常有帮助。此方法应适用于其他制药和生物技术产品的纯化。未来将如何在行业中采用这种方法将是很有趣的。（编译：符斌 北京中实国金国际实验室能力验证研究中心研究员）根据下列两篇文章编写1. Nonlinear behavior in preparative liquid chromatography: A method-development case study for hydroxytyrosol purificationPublished:Dec 22, 2020Author: Ruting Xiao2. LEGO MINDSTORMS fraction collector: A low-cost tool for a preparative high-performance liquid chromatography systemPublished:Dec 20, 2020Author: Marco Caputo

自20世纪诞生以来，分子生物学迅速发展并在整个生命科学领域广泛渗透和应用，推动了传统医学进入基于分子层面实验科学的现代生物医学时代。核酸提取和纯化是分子生物学试验的基础，在以下应用实验中都需要进行核酸提取： ● 分析基础研究和疾病研究中的基因表达；● 跟踪对药物治疗的反应(例如，在抗病毒治疗期间和之后监测病毒滴度）；● 识别新物种并深入了解进化过程 (例如，Ancient DNA分析）；● 对人类、动物和植物中引起传染病暴发的病原体进行监测和分类；● 通过微生物检测和量化监测食品和水安全；● 诊断疾病 (如基因疾病，癌症，免疫学缺陷）。核酸提取纯化基本步骤 核酸纯化方法是影响提取核酸质量高低的最重要因素之一，也是下游分子生物学试验成败的关键，遵循提取纯化原则以及选择合适的纯化、浓缩方法，可以使核酸的质量及回收率达到最大化。 核酸提取纯化原则和要求 ● 需要保证核酸一级结构的完整性，为下游实验做准备；● 排除其它核酸分子的污染（提取DNA时排除RNA的干扰，反之亦然）；● 核酸样品中没有对酶有抑制作用的有机溶剂和高浓度的金属离子；● 将核酸样品中其它生物大分子如蛋白质、多糖和脂类分子的污染降到最低程度。 核酸提取纯化的常见方法溶液抽提法经典的DNA提取方法：酚氯仿抽法，主要是使用两种不同的有机溶剂交替抽提将蛋白去除。通过苯酚氯仿处理细胞破碎液或者组织匀浆后，在水相中主要溶解的是以DNA为主的核酸成分，在有机相中主要是多糖和脂类物质，蛋白质则沉淀于两相之间。离心分层后取出水层，多次重复操作，再合并含核酸的水相，利用核酸不溶于醇的性质，用乙醇沉淀核酸，之后再离心分离和溶解洗脱，最后通过将洗涤后的核酸沉淀进行浓缩干燥即可得到高纯度核酸。 离心柱法（柱膜法）通过特殊硅基质吸附材料，能够特定吸附DNA，而RNA和蛋白质顺利通过。硅胶膜表面的硅醇基团呈弱酸性，其水化后带负电。当溶液中存在一定浓度的阳离子后，形成的阳离子桥能够中和DNA和硅醇基团之间的表面负电荷，从而使DNA牢固地吸附在硅胶膜表面。反之，处于低盐水溶液状态下时，由于硅胶膜的硅醇基团与DNA磷酸基团之间的静电排斥，硅胶膜释放DNA。 利用高盐低PH结合核酸，低盐高PH值洗脱，来分离纯化核酸。离心柱纯化也是试剂盒提取中广泛的使用方法。磁珠法运用纳米技术对超顺磁性纳米颗粒的表面进行改良和表面修饰后，该磁珠能在微观界面上与核酸分子特异性地识别和高效结合。磁珠法利用了磁性颗粒活性基团在一定条件下可与核酸结合和解离的原理，先使用细胞裂解液裂解细胞，带有活性基团的磁性颗粒可特异性吸附从细胞中游离出来的核酸分子，而样品中的其他干扰物则很好的移除了，在磁场作用下，磁性颗粒与液体分开完成，最后回收颗粒（即磁珠-DNA 混合物），再用洗脱液洗脱，纯化浓缩后即可得到纯净的DNA，获得质量较高的核酸模板。 提取纯化方法的选择一般地，分离纯化步骤越多，核酸的纯度也越高，但得率会逐渐下降，完整性也愈难以保证。相反，通过分离纯化步骤少的实验方案，我们可以得到比较多的完整性较好的核酸分子，但纯度不一定很高。这需要结合核酸的用途而加以选择。如果对核酸提取的质量要求不高，可以选择经济实惠的溶液法，选择柱膜法还是磁珠法自动化提取，基本上取决于样本数量，针对大批量的样本，优选磁珠法自动化提取。如果对样本数量较少，则可以选择柱膜法，既快速又经济实用。对于Oligo寡核苷酸的纯化，实验要求更高。（可参考往期推文） 不管采用哪一种核酸提取纯化方法最后都离不开浓缩干燥！ ● 再浓缩核酸样品，随着核酸提取试剂的逐步加入，以及去除污染物过程中核酸分子不可避免的丢失，样品中核酸的浓度会逐渐下降，甚至影响到后面的实验操作或不能满足后继研究与应用的需要时，需要对核酸进行浓缩，可将150uL DNA水溶液浓缩至10uL再进行测序；● 去除DNA样品中醇的残留，当DNA样品中有乙醇的残留会影响测序反应；● 干燥DNA样品。DNA沉淀后可能会含水或水/乙醇混合液，浓缩去除后可以得到干燥的DNA样品。常用的干燥方法：风干VS真空离心浓缩仪应用案例分享WTCHG（牛津大学人类遗传学威康信托中心) 使用Sequenom MassARRAYSNP 基因分型系统用于SNP分析，样品前制备过程分别使用风干（左）和Genevac EZ-2真空离心浓缩仪（右）干燥含有寡核苷酸样品的384孔板。下图结果表明，使用EZ-2真空离心浓缩仪干燥寡核苷酸样品，可以大大降低样品降解率，保证样品不会被污染，消除了样品损坏的潜在来源。深绿色-高样本数据质量浅绿色-中等样本数据质量红色-样品质量差或无数据使用真空离心浓缩仪，可以避免核酸浓缩干燥遇到的过度加热、绝对干燥、交叉污染及紫外损害保证核酸样品的完整性。Genevac真空离心浓缩仪浓缩干燥DNA样本，Genevac真空离心浓缩仪是合适的选择，Genevac系统广泛应用于DNA样品制备与纯化处理，不论是处理PCR前的简单的小体积浓度DNA pellets，还是高通量处理许多纯化DNA或寡核苷酸的样品，都有不同的机型可供选择。如果你对上述产品或方案感兴趣，欢迎随时联系德祥科技，可拨打热线400-006-9696。 Genevac英国Genevac是德祥集团资深合作伙伴之一。英国Genevac公司成立于1990年，隶属SP Scientific旗下，一直专注于研究和生产各种离心蒸发浓缩设备，其产品广泛应用于生命科学、制药、化学、分析等领域。德祥科技德祥科技有限公司成立于1992年，总部位于中国香港特别行政区，分别在越南、广州、上海、北京设立分公司。主要服务于大中华区和亚太地区——在亚太地区有27个办事处和销售网点，5个维修中心和2个样机实验室。30多年来，德祥一直深耕于科学仪器行业，主营产品有实验室分析仪器、工业检测仪器及过程控制设备，致力于为新老客户提供更完善的解决方案。公司业务包含仪器代理，维修售后，实验室咨询与规划，CRO冻干工艺开发服务以及自主产品研发、生产、销售、售后。与高校、科研院所、政府机构、检验机构及知名企业保持密切合作，服务客户覆盖制药、医疗、商业实验室、工业、环保、石化、食品饮料和电子等各个行业及领域。2009至2021年间，德祥先后荣获了“最具影响力经销商”、“年度最佳代理商“、”年度最高销售奖“等殊荣。我们始终秉承诚信经营的理念，致力于成为优秀的科学仪器供应商，为此我们从未停止前进的脚步。我们始终相信，每一天都在使这个世界变得更美好！

3本草奇遇记分离纯化之旅”在上一期的本草奇遇记中，我们详细介绍了步琦在中药萃取浓缩方面的解决方案，希望能通过先进且高效的萃取浓缩方式助力“十四五”中医药的发展。这次，我们将带大家另外了解奇遇记之分离纯化之旅，领略其在步琦产品线中是如何占有一席之地的。分离纯化天将降大任于斯人也。中药研究当中，分离纯化过程是“痛苦”的也是重中之重的。以往我们在此过程必将苦其心志，劳其筋骨，稍有不慎就会使得我们前功尽弃。而如今步琦公司推出的全息中高压制备色谱可以使得分离纯化过程变得异常的简单与高效。中高压制备色谱 Pure C-850智能高效，分离纯化理想伴侣全息中高压一体制备色谱 Pure C-850 功能十分强大，尤其适用于中药化学当中复杂成分的有效拆分。其优异的参数上限为用户提供更多的选择性。C-850 所搭载的 DAD+ELSD 双检测器系统可以更加完善的检测有紫外吸收和无紫外吸收的化合物，保证用户样品检测全面性。 Flash 与 Prep 双模式功能可允许用户在前期样品粗分及后期单体化合物高压制备两种需求中自由切换。除该型号之外，用户还可以根据自己样品特性及实验室条件选择最适合的一款型号：低复杂度样品纯化左右滑动色块查看系统适合的应用范围↓对于低复杂度样品，可以轻松或妥善地分离感兴趣的峰与杂质。使用中至大粒径 (15 - 60 μm) 颗粒是标准应用最经济的解决方案高复杂度样品纯化左右滑动色块查看系统适合的应用范围↓高复杂度样品难以分离并显示出部分重叠的峰需要使用小粒径 (5 - 15 μm) 硅胶颗粒以提供出色的分离度 (=纯度)，但会产生高背压从低到高样品浓度的进样左右滑动色块查看系统适合的应用范围↓可支持上样量最大 300g可支持 Flash 预填充色谱柱尺寸：最大 5000g可支持耐高压玻璃柱尺寸：直径 46-100mm支持固体上样和液体上样两种方式低样品浓度进样左右滑动色块查看系统适合的应用范围↓可支持上样量最大 1g可支持高压色谱柱直径尺寸：4.6-70mm支持液体进样检测生色团化合物左右滑动色块查看系统适合的应用范围↓生色团化合物吸收紫外波段或可见光波段 (200 - 800 nm) 的光线适用于紫外线检测的化合物通常含有不饱和键、芳族基或含杂原子的官能团。检测非生色团化合物左右滑动色块查看系统适合的应用范围↓非生色团化合物不吸收光，因此不能通过紫外线检测器显现典型化合物为碳水化合物非生色团化合物可通过蒸发光散射 (ELS) 检测装置来检测应用：中药化学、天然产物和有机合成领域的组分分离方法：吸附色谱法、体积排阻色谱法等溶剂：有机溶剂/水应用实例一从银杏提取物中分离纯化类黄酮仪器：全息制备色谱 Pure C-815▲左右滑动查看更多应用实例二使用 Pure 制备色谱对五倍子中有效成分进行分离仪器：全息制备色谱 Pure C-815▲左右滑动查看更多应用实例三使用 Pure 制备色谱对水溶性抗坏血酸和烟酸的分离纯化仪器：全息制备色谱 Pure C-850▲左右滑动查看更多好啦，分离纯化之旅到这里就结束啦，如果您想要对这次“旅行”有更深入的了解的话，可以随时联系我们。步琦公司作为全球知名样品前处理设备供应商，致力于以丰富的经验与方案帮助用户解决实验难题。

对于痕量、超痕量元素分析，酸的质量尤为重要——酸的纯度越高，背景值就越低。市售超纯酸由于价格昂贵，且开盖后纯度会急剧下降，很难满足日常分析需求，因此，通过提纯普通酸的质量，是最为经济可行的途径。亚沸酸纯化器利用亚沸蒸馏原理，亚沸状态下温和蒸发低纯度的酸，再将酸蒸气冷凝，从而制备纯度更高的酸，广泛应用于AAS、ICP-OES、ICP-MS、原子荧光等光谱分析。为什么要亚沸？ 为了保证纯化效果，必须控制酸液的温度，确保其始终处于亚沸状态下温和蒸发，这是酸纯化器能否成功的最基本要素。 怎么确保亚沸的？ 采用专利的RTC真实温度控制技术，温度探头经过特殊处理，具有与特氟龙一样的抗酸能力，直接插进酸液，监控酸液的真实温度，控制器根据温度信号，自动调节加热器功率，确保始终在亚沸状态下产生高纯度的酸蒸汽。优势：1、图形化显示、10寸彩色触摸屏操作。蓝牙无线通讯。多种语言可选（含中文）。所有参数自动保存，下次开机自动调用。温度、液位等传感器可被校正。2、可实时记录温度、液位等曲线，用户可在事后随时查看纯化过程是否正常，以确认纯化后的酸是否可用，杜绝了因纯化质量不好而浪费大量的微波消解仪、ICP-MS的时间与金钱。 AP200使用廉价的低纯度酸来制备高纯酸。与购买商品化的昂贵的高纯酸相比，AP200制备高纯酸所节约的试剂购置费用是惊人的！ 根据不同用量，AP200可以在几个月甚至几周内收回它自身的购置成本！

p　　strongspan style="color: rgb(112, 48, 160) "兽用疫苗很重要/span/strong/pp　　我国是全球最大的家禽、家畜生产国和消费国。兽用疫苗在家禽、家畜疾病的预防和控制中发挥了重要作用，为畜牧业的健康和可持续发展提供了重要保障。我国的兽用疫苗从无到有，从粗放式到规范化快速发展，已发展成为一个品种多、覆盖面广的高增长行业。2015年的市场规模已达120多亿元，近7年年均复合增长率超过17%，在未来的5-10年里仍将保持13-15%的高速增长。/pp　　为保证疫苗的安全性和有效性，降低接种疫苗的副作用和杂质的免疫干扰，需要对疫苗进行有效的分离纯化，去除细胞培养液中的其它杂质，提高疫苗有效成分的含量和纯度。/pp　　由于兽用疫苗对生产成本控制要求极高，以及早期人们对兽用疫苗纯化技术与工艺缺乏系统的研究，传统的纯化技术大多采用微滤、超滤、沉淀(PEG沉淀、硫酸铵沉淀等)、超速离心等初级的纯化方法，杂质去除效果有限，导致疫苗纯度低、安全性差、副作用大。/pp　　随着市场对高端疫苗需求的日益扩大，疫苗研发机构及生产厂家对提高疫苗质量的重视和投入，以往人用疫苗纯化所采用的各种层析技术及分析检测技术逐渐开始应用于兽用疫苗的分离纯化和分析检测中来。与人用疫苗相比，兽用疫苗对生产成本极其敏感，对纯度要求相对较低，如何简化纯化工艺、提高纯化效率、降低纯化成本，对于兽用疫苗的产业化尤其重要。/pp　　strongspan style="color: rgb(112, 48, 160) "需要什么样的兽用疫苗/span/strong/pp　　为保证疫苗的安全性和有效性，降低接种疫苗的副作用和杂质的免疫干扰，需要对疫苗进行有效的分离纯化，去除细胞培养液中的其它杂质，提高疫苗有效成分的含量和纯度。/pp　　由于兽用疫苗对生产成本控制要求极高，以及早期人们对兽用疫苗纯化技术与工艺缺乏系统的研究，传统的纯化技术大多采用微滤、超滤、沉淀(PEG沉淀、硫酸铵沉淀等)、超速离心等初级的纯化方法，杂质去除效果有限，导致疫苗纯度低、安全性差、副作用大。/pp　　随着市场对高端疫苗需求的日益扩大，疫苗研发机构及生产厂家对提高疫苗质量的重视和投入，以往人用疫苗纯化所采用的各种层析技术及分析检测技术逐渐开始应用于兽用疫苗的分离纯化和分析检测中来。与人用疫苗相比，兽用疫苗对生产成本极其敏感，对纯度要求相对较低，如何简化纯化工艺、提高纯化效率、降低纯化成本，对于兽用疫苗的产业化尤其重要。/pp　　strongspan style="color: rgb(112, 48, 160) "传统疫苗纯化技术/span/strong/pp　　strongspan style="color: rgb(0, 112, 192) "沉淀法/span/strong/pp　　沉淀法，即通过向蛋白质溶液中加入盐、有机溶剂、聚合物，改变溶液的pH或温度，从而使蛋白质沉淀出来的方法。最常用的沉淀剂主要有硫酸铵、硫酸钠、乙醇、丙酮、PEG等。例如在口蹄疫病毒的纯化中，所采用的沉淀方法主要包括硫酸铵沉淀法、PEG沉淀法、等电点沉淀法、鱼精蛋白沉淀法等。沉淀法对疫苗的纯化效果有限，单步处理所得到的疫苗纯度质量较低，往往作为样品预处理的一种有效方法。/pp　　strongspan style="color: rgb(0, 112, 192) "超滤法/span/strong/pp　　超滤法是利用超滤膜在一定的驱动力下使水、无机盐等小分子通过，截留一定大小的大分子或病毒等颗粒，进而使大颗粒得到浓缩的方法。超滤法已成为蛋白质浓缩和缓冲液置换的首选方法。超滤膜的材料一般选用聚砜、聚醚砜等多聚物 而在疫苗等生物大分子领域，应用最多的是再生纤维素。超滤法是从大量病毒原料液中浓缩病毒样品的一种非常快捷高效的方法，其优点是操作条件简单、处理量大、疫苗损失小 在进行浓缩的同时还可以根据分子大小的差异(类似凝胶过滤层析)起到一定的纯化效果，但超滤法的选择性不高，只能透过或截留一定分子量的物质，使得最终得到的浓缩液中还会含有大量的大分子杂质，分辨率低于凝胶过滤层析。在超滤过程中，选择合适的膜组件以及优化合适的操作条件，对疫苗回收率的影响非常大。此外，疫苗等分子在膜上的吸附和超滤过程中的浓差极化现象，对超滤的应用效果也有显著的负面影响。/pp　　王振辉等[1]采用超滤方法对效力检验不合格的猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)病毒灭活液进行浓缩和纯化处理(0.6/0.8/1.0微米的微滤膜过滤碎片等杂质、陶瓷膜过滤器(10k)浓缩和纯化、0.22微米滤膜无菌过滤)。结果表明，杂蛋白去除率达到62-70% 免疫至63 d时中和抗体效价(ELISA)平均高达245.7 稀释倍数，比常规疫苗中和抗体效价平均高出66.3 稀释倍数。/pp　　strongspan style="color: rgb(0, 112, 192) "超速离心法/span/strong/pp　　超速离心技术主要包括差速离心和密度梯度离心2种类型，可用于样品浓缩、样品分析和生物大分子(病毒颗粒等)的分离纯化。差速离心法常用于对纯度和产量要求不高时的分离，通过不同的离心速度使颗粒从溶液中沉淀出来，并根据目的蛋白所在的位置选择保留上清还是沉淀。差速分离最常见的实际应用是通过其他手段浓缩和纯化上清液中的病毒之前，用差速离心法去除病毒裂解物中的细胞碎片等杂质。通过差速离心法能够将病毒离心沉淀与小颗粒的杂质分开，但是在沉淀或重悬过程中，病毒的结构可能会被破坏 此外一些病毒沉淀后难以再溶解，这就影响后续的纯化或分析。如果要得到活性和结构良好、分散均一并且纯度较高的病毒样品，那么就应该考虑密度梯度离心法。/pp　　Kaaden O R等[2]人先用PEG沉淀法(PEG 6000、8-10%(W/V)浓度)从BHK-21型细胞病毒养液中对口蹄疫病毒(FMDV)进行预处理，然后采用蔗糖密度梯度离心，得到高纯度的口蹄疫病毒。Barzilai R[3]等人通过氯化铯密度梯度离心，直接从细胞质裂解液中获得了FMDV纯品，回收率达到95%。但超速离心存在操作繁琐、离心时间长、重复性差、设备成本高、处理量小、不易于放大等问题，只适用于实验室规模的病毒纯化和分析，难以满足工业化生产需求。/pp　　strongspan style="color: rgb(0, 112, 192) "新型疫苗纯化技术/span/strong/pp　　层析技术具有分辨率高、操作条件温和、重复性好、易于放大、分离系统可实现管道化和自动化(更好满足密闭无菌要求)等突出优势，在生物制品(重组蛋白、疫苗、抗体等)的分离纯化中扮演着极其重要的角色。层析技术应用广泛，在疫苗纯化中已有大量成功的案例，绝大多数人用疫苗(乙肝疫苗、百日咳疫苗、狂犬疫苗等)都采用层析技术进行纯化和大规模生产[3]。/pp　　层析技术根据分离原理的不同，主要包括凝胶过滤层析、离子交换层析、疏水层析和亲和层析4大类。各种层析技术的特点和应用情况如表1所示，其中离子交换层析技术的应用最为广泛。/pp　　strong表1.层析技术的特点和应用情况/strong/pp/ptable border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="648"colgroupcol width="72" span="5" style="width:54pt"//colgrouptbodytr height="18" style="height:13.5pt" class="firstRow"td height="13" class="xl63" style="border-color: windowtext border-width: 1px border-style: solid " width="129"层析技术/tdtd class="xl64" style="border-width: 1px border-style: solid border-color: windowtext " width="129"特点/tdtd class="xl64" style="border-width: 1px border-style: solid border-color: windowtext " width="129"捕获 /tdtd class="xl64" style="border-width: 1px border-style: solid border-color: windowtext " width="130"精纯 /tdtd class="xl64" style="border-width: 1px border-style: solid border-color: windowtext " width="130"精制/td/trtr height="18" style="height:13.5pt"td height="13" class="xl64" style="border-width: 1px border-style: solid border-color: windowtext " width="129"离子交换/tdtd class="xl64" style="border-width: 1px border-style: solid border-color: windowtext " width="129"高分辨率、高载量、高流速；低盐上样/tdtd class="xl64" style="border-width: 1px border-style: solid border-color: windowtext " width="129"***/tdtd class="xl64" style="border-width: 1px border-style: solid border-color: windowtext " width="130"***/tdtd class="xl64" style="border-width: 1px border-style: solid border-color: windowtext " width="130"***/td/trtr height="18" style="height:13.5pt"td height="13" class="xl64" style="border-width: 1px border-style: solid border-color: windowtext " width="129"台风（TY）/tdtd class="xl64" style="border-width: 1px border-style: solid border-color: windowtext " width="129"高分辨率、中等载量、高流速；高盐上样/tdtd class="xl64" style="border-width: 1px border-style: solid border-color: windowtext " width="129"**/tdtd class="xl64" style="border-width: 1px border-style: solid border-color: windowtext " width="130"***/tdtd class="xl64" style="border-width: 1px border-style: solid border-color: windowtext " width="130"*/td/trtr height="18" style="height:13.5pt"td height="13" class="xl64" style="border-width: 1px border-style: solid border-color: windowtext " width="129"凝胶过滤/tdtd class="xl64" style="border-width: 1px border-style: solid border-color: windowtext " width="129"高分辨率；低载量、低流速/tdtd class="xl64" style="border-width: 1px border-style: solid border-color: windowtext " width="129"-/tdtd class="xl64" style="border-width: 1px border-style: solid border-color: windowtext " width="130"*/tdtd class="xl64" style="border-width: 1px border-style: solid border-color: windowtext " width="130"***/td/trtr height="18" style="height:13.5pt"td height="13" class="xl64" style="border-width: 1px border-style: solid border-color: windowtext " width="129"亲和/tdtd class="xl64" style="border-width: 1px border-style: solid border-color: windowtext " width="129"高分辨率、中/高载量、高流速/tdtd class="xl64" style="border-width: 1px border-style: solid border-color: windowtext " width="129"***/tdtd class="xl64" style="border-width: 1px border-style: solid border-color: windowtext " width="130"***/tdtd class="xl64" style="border-width: 1px border-style: solid border-color: windowtext " width="130"**/td/tr/tbody/tablep　　随着市场需求的扩大、研发机构及疫苗厂家的研发投入和技术积累，越来越多的兽用疫苗开始使用层析技术进行分离纯化，工艺开发和小批量制备取得了重要进展，部分产品已进入后续的中试放大阶段。中科院过程工程研究所生化工程国家重点实验室是我国分离纯化领域的知名机构和优势单位，拥有一支高水平的人才队伍、配置齐全的分离纯化和分析检测平台，在人用疫苗领域具有10多年的研发和产业化经验(与企业合作)。近年来在兽用疫苗的分离纯化、分析检测、结构稳定性研究等领域也开展了一系列富有成效的工作[4-7]。/pp　　苏志国、张松平等[4]通过对口蹄疫病毒结构特点的研究、培养液中杂质的组成和特性分析，在对介质选型、操作条件优化的基础上，建立了1条由离子交换层析和凝胶过滤层析组成的分离纯化工艺，口蹄疫灭活病毒的纯化倍数达到217倍，纯度达到95%以上，收率为37.5%。为提高疫苗的收率和降低纯化成本，又进一步研究疏水层析技术在口蹄疫病毒分离纯化中的应用效果，最终建立的由疏水层析、超滤浓缩和凝胶过滤层析组成的分离纯化工艺，取得了更好的分离纯化效果，纯化倍数达到247倍，收率达到75.4%，纯度接近电泳纯 该工艺进一步提高了疫苗收率，更有利于提高纯化效率和降低疫苗的纯化成本，为大规模制备口蹄疫灭活病毒疫苗奠定了基础。/pp style="text-align: center"img src="http://img1.17img.cn/17img/images/201711/insimg/d040dc05-cfd0-42b9-87a8-be93c3088b2e.jpg" style="" title="1_副本.jpg"//pp style="text-align: center"img src="http://img1.17img.cn/17img/images/201711/insimg/a7545038-4f01-43fb-89d8-cd7b9eda952f.jpg" style="" title="2_副本.jpg"//pp style="text-align: center"img src="http://img1.17img.cn/17img/images/201711/insimg/8a3f7210-7fb4-4ec4-aa4b-89e9aec73c98.jpg" style="" title="3_副本.jpg"//pp　　图1：丁基疏水层析分离纯化FMDV层析谱图/pp　　图2 ：凝胶过滤层析精制纯化FMDV层析谱图/pp　　图3：图3 SDS-PAGE和Western blot分析(1、FMDV培养液，2、HIC初纯样品，3、超滤浓缩样品，4、凝胶过滤样品 5、凝胶过滤样品的VP1条带进行Western blot分析)/pp　　除了灭活病毒疫苗，基因工程重组疫苗(重组蛋白抗原或重组融合(标签)蛋白抗原)也可以有效抑制病毒感染，有望发展成为更为安全有效的疫苗品种。基因工程重组疫苗，特别是带有标签的重组疫苗，分离纯化难度大大降低，分离效率大大提高。熊毅等[8]分别构建了带His和GST标签的重组表达载体，成功表达了A型口蹄疫病毒(FMDV)的结构蛋白VP1(包涵体形式)，并分别采用金属螯合层析和GST亲和层析进行纯化，得到电泳纯的VP1蛋白 活性鉴定结果表明重组蛋白具有良好的特异性和抗原性，可用于易感动物的免疫及血清抗体筛查。/pp　　strongspan style="color: rgb(112, 48, 160) "疫苗检测技术/span/strong/pp　　分析检测技术应用于疫苗培养、纯化、质控的各个阶段。快速、准确地对疫苗进行分析表征，对于疫苗分离纯化工艺的开发和优化，意义重大。人用疫苗研究历史悠久、技术完善，相关技术都可以直接用于兽用疫苗的分析检测。疫苗表征内容主要包括纯度、结构和活性 相应的分析检测技术主要包括电泳(以及Western blot)、ELISA、高效液相色谱、超速离心、动态光散射、透射电镜、差示扫描量热等技术[4-8]。/pp　　strong表2 疫苗分析检测技术/strong/ptable border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="648"colgroupcol width="72" span="3" style="width:54pt"//colgrouptbodytr height="18" style="height:13.5pt" class="firstRow"td height="13" class="xl65" style="border-color: windowtext border-width: 1px border-style: solid " width="215"技术名称/tdtd class="xl65" style="border-width: 1px border-style: solid border-color: windowtext " width="216"特点 /tdtd class="xl65" style="border-width: 1px border-style: solid border-color: windowtext " width="216"应用 /td/trtr height="18" style="height:13.5pt"td height="13" class="xl65" style="border-width: 1px border-style: solid border-color: windowtext " width="215"电泳 /tdtd class="xl65" style="border-width: 1px border-style: solid border-color: windowtext " width="216"操作简单，定性半定量 /tdtd class="xl65" style="border-width: 1px border-style: solid border-color: windowtext " width="216"纯度、分子量/td/trtr height="18" style="height:13.5pt"td height="13" class="xl65" style="border-width: 1px border-style: solid border-color: windowtext " width="215"ELISA/tdtd class="xl65" style="border-width: 1px border-style: solid border-color: windowtext " width="216"体外活性 /tdtd class="xl65" style="border-width: 1px border-style: solid border-color: windowtext " width="216"活性表征/td/trtr height="18" style="height:13.5pt"td height="13" class="xl65" style="border-width: 1px border-style: solid border-color: windowtext " width="215"高效液相色谱/tdtd class="xl65" style="border-width: 1px border-style: solid border-color: windowtext " width="216"快速、准确/tdtd class="xl65" style="border-width: 1px border-style: solid border-color: windowtext " width="216"纯度、颗粒大小、分子量/td/trtr height="18" style="height:13.5pt"td height="13" class="xl65" style="border-width: 1px border-style: solid border-color: windowtext " width="215"场流分级/tdtd class="xl65" style="border-width: 1px border-style: solid border-color: windowtext " width="216"无损伤表征疫苗真实结构/tdtd class="xl65" style="border-width: 1px border-style: solid border-color: windowtext " width="216"纯度、颗粒大小、分子量/td/trtr height="18" style="height:13.5pt"td height="13" class="xl65" style="border-width: 1px border-style: solid border-color: windowtext " width="215"高效液相色谱/tdtd class="xl65" style="border-width: 1px border-style: solid border-color: windowtext " width="216"分析速度慢、操作繁琐/tdtd class="xl65" style="border-width: 1px border-style: solid border-color: windowtext " width="216"纯度/td/trtr height="18" style="height:13.5pt"td height="13" class="xl65" style="border-width: 1px border-style: solid border-color: windowtext " width="215"动态光散射/tdtd class="xl65" style="border-width: 1px border-style: solid border-color: windowtext " width="216"快速、准确/tdtd class="xl65" style="border-width: 1px border-style: solid border-color: windowtext " width="216"颗粒大小和分布/td/trtr height="18" style="height:13.5pt"td height="13" class="xl65" style="border-width: 1px border-style: solid border-color: windowtext " width="215"高效液相色谱/tdtd class="xl65" style="border-width: 1px border-style: solid border-color: windowtext " width="216"方便快捷直观昂贵/tdtd class="xl65" style="border-width: 1px border-style: solid border-color: windowtext " width="216"分子大小和形貌/td/trtr height="18" style="height:13.5pt"td height="13" class="xl65" style="border-width: 1px border-style: solid border-color: windowtext " width="215"差示扫描量热/tdtd class="xl65" style="border-width: 1px border-style: solid border-color: windowtext " width="216"快速、疫苗稳定性条件筛选/tdtd class="xl65" style="border-width: 1px border-style: solid border-color: windowtext " width="216"结构稳定性/td/tr/tbody/tablep/pp　　在上述分析检测技术中，疫苗结构及其变化的表征对于疫苗分离纯化工艺和产品保存稳定性的研究越来越引起研究者的关注。高效液相色谱(或场流分级)与光散射技术(如多角度激光)联用，广泛用于各种疫苗的颗粒大小、分子量，以及结构变化的表征[4, 6, 7]。差示扫描量热技术也被广泛应用于疫苗稳定性研究中，无论是分离纯化过程中疫苗稳定结构条件(温度、缓冲液(pH、盐种类和浓度)、添加剂等)的筛选，还是疫苗成品的制剂研究[5]。　　/pp　　strongspan style="color: rgb(112, 48, 160) "结论与展望/span/strong/pp　　我国兽用疫苗市场潜力巨大，未来一段时间都将保持高速发展的态势。近年来，疫苗品质不断提高，市场逐步由政府招标向市场化转变，因此，疫苗分离纯化必将成为今后疫苗发展的重要趋势，只有经过浓缩、纯化等技术处理的高品质疫苗，才有可能在越来越激烈的市场竞争中占有一席之地。/pp　　单从技术层面来看，兽用疫苗和人用疫苗的分离纯化与分析检测技术是相通的。目前广泛用于各种人用疫苗分离纯化和分析检测的技术都可用于兽用疫苗研发和生产中。但在市场价格方面，与人用疫苗相比，兽用疫苗市场价格相对较低，因此兽用疫苗的工业化生产对分离纯化技术及成本控制的要求也极为苛刻。如何借鉴人用疫苗的分离纯化技术和成功经验，设计和简化纯化工艺、提高疫苗稳定性和疫苗收率、降低介质等关键材料的使用成本，对于高端兽用疫苗的研发和产业化，意义重大。/pp　　strongspan style="color: rgb(112, 48, 160) "作者介绍/span/strong：黄永东，博士，中科院过程工程研究所副研究员，长期致力于蛋白质分离纯化工艺研发和层析分离介质研制工作。先后主持了9项国家自然科学基金、国家重点研发计划等课题，以及多项和生物医药企业的合作课题 先后开发了乙肝疫苗、百日咳疫苗、胸腺肽等多种生物活性物质的分离纯化工艺，以及10多种层析分离介质，相关技术和产品在200多家科研单位和企业得到应用。在纯化工艺开发和介质筛选等方面具有高超的理论水平和丰富的实战经验。/pp　　strongspan style="color: rgb(112, 48, 160) "参考文献/span/strong/pp　　[1] 武桂梅, 何玉友, 王振辉, 李鹏, 郑洪娟. 膜分离法纯化浓缩猪繁殖与呼吸综合征灭活病毒的效果试验. 中国兽医杂志, 2015, 51 (9): 99-102./pp　　[2] Kaaden OR, Dietzschold B, Matheka HD, Tokui T. Konzentrierung und Reinigung von Maul-und-Klauenseuche-(MKS-) Virus durch Polyä thylenglykol (PEG). Archiv fü r die gesamte Virusforschung, 1971. 35(1): 104-113./pp　　[3] Barzilai R, Lazarus L H, Goldblum N. Viscosity-Density Gradient for Purification of Foot-and-Mouth Disease Virus. Archly fü r die gesamte Virusforschung, 1972, 34: 141-146./pp　　[4] Li H, Yang YL, Zhang Y, Zhang SP, Zhao Q, Zhu YY, Zou XQ, Yu MR, Ma GH, Su ZG. A hydrophobic interaction chromatography strategy for purification of inactivated foot and mouth disease virus. Protein Expression and Purification, 2015, 113: 23-29./pp　　[5] Yang YL, Zhao QZ, Li ZJ, Sun LJ, Ma GH, Zhang SP, Su ZG. Stabilization study of inactivated foot and mouth disease virus vaccine by size-exclusion HPLC and differential scanning calorimetry. Vaccine, 2017, 35: 2413-2419./pp　　[6] Chen Y, Zhang Y, Zhou YF, Luo J, Su ZG. Asymmetrical flow field-flow fractionation coupled with multi-angle laser light scattering for stability comparison of virus-like particles indifferent solution environments. Vaccine, 2016, 34: 3164-3170./pp　　[7] Yang YL, Li H, Li ZJ, Zhang Y, Zhang SP, Chen Y, Yu MR, Ma GH, Su ZG. Size-exclusion HPLC provides a simple, rapid, and versatile alternative method for quality control of vaccines by characterizing the assembly of antigens. Vaccine 33 (2015) 1143–1150/pp　　[8] 颜健华, 何奇松, 蒋家霞, 冯淑萍, 黄胜斌, 韦达有, 易春华, 许瑞胜, 梁晟, 熊毅. A型口蹄疫病毒结构蛋白VP1的原核表达、纯化及鉴定. 南方农业学报, 2016, 47 (2): 301-305./ppbr//p

核酸纯化新技术研讨会Solutions on NA extraction by AJ to state-of-the-art researchers 下面这些核酸纯化问题，您也碰到过吗？由于高盐或乙醇残留，导致DNA样品不够纯，抑制后续的酶切、PCR反应和测序等整个提取过程步骤太多，过程太长，导致核酸有降解复杂样品、痕量样品、细胞外循环DNA等核酸很难获得样品量大，核酸提取工作占用太多的时间，而且每次的提取效果不一致 您想改善这些情况吗？德国耶拿的DC双缓冲液新技术和PMI聚合物介导分离新技术及革命性的全自动平台可以帮您找到解决办法！ 3min完成PCR产物纯化，6min完成质粒抽提，1h完成小鼠尾巴核酸纯化轻松获得高质量的细胞外循环DNA（circulating cell-free DNA）、石蜡包埋组织的高纯度DNA，在毛发、烟蒂、指纹等痕量检材上能获得足够量的DNA用于检测快速的DNA甲基化修饰试剂盒 ，3h完成转换，高效的转换效率为下游的分析提供可靠和可重复的保障采用自动化的核酸纯化系统，可明显节省在核酸提取方面的时间，更重要的是标准化的过程，能确保每批样品提取结果的稳定性第一场：时间：2013年11月26日下午14:00-16:30地点：北京-中国科学院动物研究所B105室 （朝阳区北辰西路1号院5号） 第二场：时间：2013年11月27日下午14:00-16:30地点：北京-中国农业大学西校区图书馆报告厅 所有参会者，可获赠精美礼品，以及德国耶拿核酸纯化试剂&ldquo 买一送一&rdquo 优惠券（试剂盒介绍详见下面）报名联系方式：电话：010-65543849短信：13764007224 Email：info@analytik-jena.com.cn此外，活动现场还有精彩的抽奖活动，众多奖品等您来拿！(提前报名且实际到场的人员可参加抽奖，电话和邮件均可报名)自动核酸纯化系统InnuPure C16/C96 高效的全自动核酸纯化，16个或96个样品同时处理核酸产物洁净，无磁珠残留专业的设计确保产物无污染优化好的程序和试剂直接调用，实现标准化操作满足各种样品类型的核酸纯化 德国耶拿核酸抽提纯化试剂盒基因组DNA 抽提试剂盒RNA抽提试剂盒innuPREP DNA Micro Kit（5mg样品）innuPREP RNA Mini Kit（总RNA）innuPREP DNA Mini Kit（50mg样品）innuPREP RNA MIDI Direct Kit（总RNA）innuPREP Forensic Kit（痕量法医样品）innuPREP Micro RNA Kit（小RNA）innuPREP Blood DNA Mini Kit（300µ l全血）innuPREP Blood RNA Kit（1ml全血）innuPREP Blood DNA Midi Kit（2ml全血）innuPREP Blood RNA MIDI Direct Kit（10ml全血）innuPREP Blood DNA MIDI Direct Kit（1ml全血）innuPREP Plant RNA Kit（100mg植物样品）innuPREP Blood DNA Master Kit（5ml全血）innuPREP Virus RNA Kit（150µ l或20mg）innuPREP Plant DNA Kit（100mg植物样品）总核酸抽提试剂盒innuPREP Swab DNA Kit（拭子样品）innuPREP DNA/RNA Mini KitinnuPREP Bacteria DNA Kit（109细菌）innuPREP Virus DNA/RNA KitinnuPREP Mycobacteria DNA Kit（唾液、痰液等）innuPREP MP Basic Kit A（细菌和病毒）innuPREP Stool DNA Kit（400µ g粪便）胞外循环DNA抽提试剂盒innuPREP Virus DNA Kit（200µ l或20mg）PME circulating cell-free DNA kit blackPREP试剂盒&mdash &mdash 专门针对复杂的初始样品 blackPREP Tick DNA Kit 蜱虫blackPREP Tick DNA/RNA Kit 蜱虫blackPREP Powder DNA/RNA Kit 奶粉、茶、土壤等 blackPREP Rodent Tail DNA Kit 小鼠尾巴blackPREP FFPE DNA Kit 石蜡包埋组织blackPREP Food DNA Kit I 食品blackPREP Swab DNA Kit 擦拭子 质粒提取试剂盒 innuPREP Plasmid Mini Kit 5ml菌液约得20µ g质粒DNAinnuPREP Plasmid Mini Kit Plus 15ml菌液约得70µ g质粒DNAinnuPREP Plasmid MIDI Direct Kit 25ml菌液约得80ug质粒DNAinnuPREP Plasmid Rapid Kit 快速，可在6min完成innuPREP Plasmid Small Kit 250µ l菌液约得3µ g质粒 PCR或凝胶产物纯化试剂盒 innuPREP PCRpure Kit PCR产物纯化innuPREP Gel Extraction Kit 凝胶电泳产物回收innuPREP DOUBLEpure Kit PCR产物或凝胶产物纯化innuPREP DYEpure Kit 测序反应中去除荧光标记的ddNTPs 甲甲基化修饰试剂盒 innuCONVERT Bisulfite Conversion Kit 主办方：德国耶拿分析仪器股份公司 北京元业伯乐科技发展有限公司 北京竹远科创科技有限公司 邀请函（点击查看详情）

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p /pp　　层析纯化技术由于其高选择性、灵活性、易放大性等优点，已经成为蛋白质药物纯化中不可或缺的技术。传统的层析填料为多糖基质，孔径一般在100 nm以下。1970年代出现了大孔和微孔无机材料硅填料，虽然增大了孔道、提高了层析的分辨率和流速，但只能在PH2-7.5范围内稳定，不利于分离纯化在碱性范围内稳定的蛋白质或是需要碱性层析条件的分离，从而限制了其在大规模快速分离蛋白质层析上的应用。多孔聚合物微球由于其高的比表面积、高的机械强度和多样的表面特征，常被用作层析分离纯化的填料。目前已发展出了多种表面基团、基质种类的层析填料，成功用于疫苗、病毒、抗体、酶、细胞因子等的分离纯化。/pp　span style="color: rgb(0, 176, 240) "strong　层析纯化病毒、病毒样颗粒等生物大分子的瓶颈问题/strong/span/pp　　随着病毒、病毒样颗粒在疫苗、肿瘤治疗、免疫治疗中的地位越来越重要，这类复杂生物大分子的分离纯化需求也逐渐增加。然而传统填料由于孔径较小，蛋白质只能以扩散方式通过填料，传质速率慢，处理量低，造成分离时间长、容易失活等问题[1]。当蛋白质体积较大时，填料表面在吸附一层蛋白后，由于体积位阻以及静电排斥作用，会阻碍其它的蛋白质进一步进入孔内，造成填料的载量下降。另一个限制是病毒或疫苗，尤其是带有包膜的病毒或疫苗，在狭窄的填料孔径内发生吸附时非常容易发生结构变化，破坏其整体结构。在乙肝病毒表面抗原(HBsAg)的纯化中发现这种病毒样颗粒在层析时会发生解聚[2]，经过离子交换层析分离后，疫苗的回收率通常不到50%[3, 4]。而抗原的结构发生变化以后，就会对其免疫原性产生影响，所以需要在纯化过程中尽可能维持抗原的结构。/pp　　为了解决针对病毒及病毒样颗粒纯化的瓶颈问题，目前已有采用膜色谱、超大孔贯穿孔颗粒填料及整体柱的策略进行纯化的案例，成功纯化了包括人乳头瘤病毒、番茄花叶病毒、流感病毒、腺病毒、慢病毒及各种病毒样颗粒。/ppspan style="color: rgb(0, 176, 240) "strong　　病毒及病毒样颗粒的分离纯化/strong/span/pp　　根据文献报道，超大孔填料相比传统层析填料不仅在载量及处理速度上有极大的优势，还更有利于病毒及病毒样颗粒的结构保持。/pp　　例如，在重组乙肝病毒表面抗原的分离纯化中，采用具有120nm及280nm超大孔径的离子交换填料DEAE-AP-120 nm和DEAE-AP-280 nm(商品名为中科森辉的Giga系列)具有比传统填料DEAE-FF高7倍以上的动态载量[1]。此外，采用ELISA测定抗原收率，发现采用超大孔填料能够减少重组乙肝病毒表面抗原在层析过程中的裂解，从而显著提高活性抗原的收率。/pp style="text-align: center "img width="576" height="450" title="1.jpg" style="width: 415px height: 282px " src="http://img1.17img.cn/17img/images/201808/insimg/3b67db18-4291-4ab6-9874-209cd57644af.jpg"/　　/pp style="text-align: center "重组乙肝病毒表面抗原在不同孔径离子交换填料上/pp style="text-align: center "　　的吸附动力学[1]/pp style="text-align: center "img width="497" height="345" title="2.jpg" style="width: 387px height: 289px " src="http://img1.17img.cn/17img/images/201808/insimg/07fdf233-77a5-4c30-8d20-faf7f044b54a.jpg"/　/pp style="text-align: center "　重组乙肝病毒表面抗原从不同孔径的填料上洗脱下来的/pp style="text-align: center "　　ELISA回收率[1]/pp　　对病毒的分离纯化同样有类似的效果。例如在灭活口蹄疫病毒的纯化中，DEAE-FF导致严重的病毒裂解。而采用具有100nm以上孔径的超大孔填料，不仅载量提高10倍以上，还能显著提高病毒在填料上吸附时的热稳定性，从而减少病毒的裂解，具有更高的收率。最终的分离纯化单步收率达90%以上[5]。/pp style="text-align: center "　　span style="font-size: 14px "strong灭活口蹄疫病毒在传统填料与超大孔填料上的吸附解离过程/strong/span/pp　　与商品填料的小孔道填料相比，超大孔结构可能从以下几方面提高对蛋白质构象的稳定性：/pp　　1)增大孔道(受限空间)：根据蛋白质折叠行为计算显示，蛋白质的折叠速率与空腔大小、形状密切相关，也即当填料孔道与蛋白的相对尺寸超过某一阈值后，蛋白的折叠行为将不受空腔大小影响。与数十纳米中孔结构的传统填料的相比，数百纳米超大孔结构会因孔道增大、与蛋白接触面积减小，从而对某一尺寸下蛋白质的变构行为有所改善。/pp　　2)界面曲率：小孔径填料孔道曲率大，填料与蛋白质接触面积大，因此受更大吸附力影响，蛋白质二级结构变化越严重。而曲率更大的超大孔孔道对蛋白二级结构的保护比狭窄孔道更有优势。/pp style="text-align: center "　span style="font-size: 14px "strong　表面曲率变化对蛋白接触面积的影响/strong/span/pp　　3)改善配基与蛋白活性区域的接触面积：超大孔微球内部数百纳米孔道在修饰配基后可能会有效改善传统填料狭窄孔道内由于配基拥挤造成的蛋白质失活现象。/pp　　4)减少蛋白在孔道内的静电排斥作用：有研究者认为，在离子交换填料上蛋白质起初会在孔道入口处形成一圈静电层，这一静电层会对后来蛋白继续进入孔道产生排斥作用从而使孔道关闭，动态载量下降。如果将超大孔填料修饰为离子交换树脂，由于孔道尺寸显著扩大可能会有效改善蛋白吸附静电层对孔道的封闭作用，从而有效引导蛋白质进入超大孔道，提高回收率。/ppspan style="color: rgb(0, 176, 240) "strong　　快速分离蛋白质及pDNA/strong/span/pp　　除了应用于病毒及病毒样颗粒的分离纯化的分离纯化，利用超大孔填料传质速度快的优势，将超大孔填料镀上亲水表层，再接上不同配基制成多种形式的层析填料，用于快速高分辨率的纯化蛋白混合物或质粒。超大孔填料制备成的亲和层析、反相层析和离子交换层析填料广泛的应用在蛋白质的分离纯化方向，显示出超大孔填料比传统分离填料高速高分辨率的蛋白质纯化优势。/pp　　例如以肌红蛋白、转铁蛋白和牛血清白蛋白的混合溶液为模拟体系，考察不同流速下超大孔聚苯乙烯阴离子交换介质(DEAE-AP，商品名为Giga系列)的分离效果，并与DEAE 4FF介质进行了对比。实验结果(图2)显示，作为对照的DEAE-4FF介质在流速达到361 cm/h时，分离效果已明显降低，而超大孔介质可以在流速高达1084 cm/h的条件下操作，分离效果良好，能够在6 min内实现三种生物大分子的快速分离。/pp style="text-align: center "img width="588" height="170" title="3.jpg" style="width: 473px height: 144px " src="http://img1.17img.cn/17img/images/201808/insimg/65df31ac-bd00-4a08-8a5a-feedfa1aa990.jpg"//pp　span style="color: rgb(0, 176, 240) "strong　超大孔填料应用前景与展望/strong/span/pp　　近年来，随着生命科学的发展，生物样品越来越复杂，如人的血样、尿样、组织样品等，对生物分离分析技术提出更高的要求。根据超大孔填料固有的诸多优点，通过合成不同种类的超大孔固定相及在固定相上做不同功能的衍生，超大孔填料已经被广泛应用于生物分离分析中，但也存在一些问题。因此，发展新的制备手段，优化制备条件和过程，探索制备和分离机理，对于开辟新的应用领域以及开展实际样品的分离分析有更大的理论和现实意义。/pp　　根据已有的文献报道，我们可以预测今后几年的相关工作仍会集中在以下几个方面：/pp　　(1)规则的聚合物整体材料内部形态。如获得规则的3D网络骨架，可控的孔径尺寸和分布。/pp　　(2)继续在微分离系统中扩展其应用。如在加压电色谱、微流控芯片材料、微流色谱和纳流色谱系统，甚至纳米器件开发等诸多方面大显身手。/pp　　(3)表面物理化学性质的调控向功能化、智能化方向发展。如基于分子印迹技术、温度响应以及pH响应的表面智能化的整体材料。/pp　　(4)制备规模整体柱的开发及其在生物下游技术中的应用。/pp　　目前，已经有一部分整体柱实现了商品化，但种类有限，还无法与种类繁多的颗粒型填充柱相提并论，也远未能满足分离分析的需求。而颗粒型的超大孔填料，由于其制备较困难、批次间重复性较差、价格昂贵等，也没有得到广泛的应用。相对于超大孔填充柱，有机相整体柱存在因流动相变会发生溶胀或收缩、机械强度差、比表面积小、柱容量差以及聚合过程中产生的微孔不利于小分子样品的分析等问题，现有报道大都用于生物大分子的分离。硅骨架整体柱也存在必须预先聚合好装入套管中，制备繁琐，比表面积较小的问题。因此，如何以更简便、有效的方式制备高效新型的超大孔填料并将其应用于实际样品的分离分析仍然是今后工作的重心。在实际工作中所面临的层出不穷的问题也是推动新型超大孔填料制备技术和方法发展的源源不竭的动力，在诸多的尝试中很可能就会出现某些性质优良的超大孔填料，这也预示着将来商品化的超大孔会越来越多。/ppspan style="color: rgb(0, 176, 240) "strong　　部分商品化的超大孔层析介质/strong/span/pp　　strong超大孔填料因其具有独特的多孔结构，与传统填料相比具有更加优良的渗透性和传质速率，可以在较低的操作压力下实现高效和快速的分离，已成为继多聚糖、交联与涂渍、单分散之后的第四代分离填料。可以预测，随着制备技术的不断提升，超大孔填料在生命科学、医药、环境和化学化工等领域必将大有可为。/strong/pp　　参考文献/pp　　[1] M.R. Yu, Y. Li, S.P. Zhang, X.N. Li, Y.L. Yang, Y. Chen, G.H. Ma, Z.G. Su, Improving stability of virus-like particles by ion-exchange chromatographic supports with large pore size: Advantages of gigaporous media beyond enhanced binding capacity, Journal of Chromatography A, 1331 (2014) 69-79./pp　　[2] P.M. Kramberger P, Boben J, Ravnikar M, ?trancar, A.S.m.c.a.b. in, p.a.f.q.o.t.m. virus., J. Chromatogr. A 1144(1)./pp　　[3] W. Zhou, J. Bi, J.-C. Janson, A. Dong, Y. Li, Y. Zhang, Y. Huang, Z. Su, Ion-exchange chromatography of hepatitis B virus surface antigen from a recombinant Chinese hamster ovary cell line, Journal of Chromatography A, 1095 (2005) 119-125./pp　　[4] W. Zhou, J. Bi, J.C. Janson, Y. Li, Y. Huang, Y. Zhang, Z. Su, Molecular characterization of recombinant Hepatitis B surface antigen from Chinese hamster ovary and Hansenulapolymorpha cells by high-performance size exclusion chromatography and multi-angle laser light scattering, Journal of Chromatography B, 838 (2006) 71-77./pp　　[5] S.Q. Liang, Y.L. Yang, L.J. Sun, Q.Z. Zhao, G.H. Ma, S.P. Zhang, Z.G. Su, Denaturation of inactivated FMDV in ion exchange chromatography: Evidence by differential scanning calorimetry analysis, BiochemEng J, 124 (2017) 99-107./pp/p

第七期蛋白质分离纯化专题研讨班于2010年6月23-24日在上海光大国际大酒店二层8号厅举办，本期研讨班由中国生物工程杂志社主办，内容涵盖蛋白质样品制备、纯化策略、过程优化，相关的产品规定、申报政策以及技术经济分析等，旨在帮助生命科学研究与生物技术应用领域的专业人员在短时间里高效率的掌握蛋白质分离纯化工具，提高蛋白质分离纯化实践中解决具体问题的能力。　　来自全国各高校、研究所从事相关研究共计150多位老师参加了这次研讨班，五洲东方作为特约赞助商也参加了此次研讨班。会议期间，很多老师对我公司展示的德国Brand移液器、德国Sigma离心机、美国BIOCOMP全自动密度梯度分离系统以及Merinton超微量紫外分光光度计等仪器均表示很大的兴趣。　　 　　工作人员在介绍液体操作产品　　 学员们在了解我公司产品

基因工程提供了人们改变蛋白质性质的机会，因而可以借此改善蛋白质的纯化特性。通过在目的DNA的3’端或5’端插入DNA序列，可以改变蛋白质两端的氨基酸序列，进而作为可纯化的融合蛋白。这些融合子可帮助蛋白质形成包含体，用于稳定蛋白质，免受蛋白酶的攻击，还可以赋予蛋白质特定的纯化性质，使其适用于免疫亲和、金属螯合、离子交换、疏水色谱以及其他分离操作。此外，对于已知特性的蛋白质，改变其中特氨基酸可引入具有特定基质吸附亲和力的片段。市面上有两种很常见的标签，分别为组氨酸标签和GST标签，这两种标签可插入蛋白形成重组蛋白，月旭科技现有针对这两种标签蛋白纯化的填料可供选择。His-Tag（组氨酸标签）是重组蛋白表达最常用的标签，无论表达的蛋白是可溶的或者包涵体都可以用固定金属离子亲和层析纯化。6×His-tag是指六个组氨酸残基组成的融合标签，可插入在目的蛋白的C末端或N末端。纯化组氨酸标签蛋白最常用的配体是亚氨基二乙酸（IDA）和次氨基三乙酸（NTA），可使用月旭科技Ni Tanrose 6FF（NTA）或Ni Tanrose 6FF（IDA）来纯化。技术参数✦✦谷胱甘肽-S-转移酶（GST）是一种亲和标签，用GST标记真核蛋白可增强融合蛋白的溶解性。此外，带有 GST 标签的蛋白可以在细菌中高水平表达，但可能会由于蛋白聚集而形成包涵体。一般将GST标签添加到目标蛋白质的N或C末端。 GST对谷胱甘肽具有很相对强的亲和力，这意味着可以在固定的基质（如键合谷胱甘肽的填料）上捕获GST蛋白融合物。这种结合特性可用于蛋白质纯化以及通过蛋白质的结合，来捕获对应的蛋白质。因此可使用月旭科技GST Tanrose 4FF来纯化GST标签蛋白。

2011 年 3 月 15日，北京 — 安捷伦科技公司(纽约证交所：A) 今日推出了 Agilent 971-FP Flash LC纯化系统，这是一款为药物化学工程师量身打造的个人快速制备纯化色谱仪，能够对新合成的化合物进行快速、简单以及可靠的纯化。　　该仪器具有新的软件界面，操作简单方便，且易于跟踪样品。“Guide Me”向导简化了系统设置，还免去了大量繁琐的方法开发设置。“Six-Clicks”触摸屏对话框进一步提高了分离的便利性，以前繁琐的步骤如今变得简单便捷。化学工程师通过该新系统能够利用薄层色谱结果来优化快速制备的分离方法，甚至还可以在运行过程当中进行更改，进一步缩短方法开发的时间。　　Agilent 971-FP 快速制备纯化系统的设计, 旨在短短几分钟内从几十克目标化合物中以最大回收率和纯度获得毫克级样品。仪器的若干特征的设计都是为了确保珍贵样品的回收率。　　脉冲式氙灯比标准紫外检测器的预热时间减少了大约十分钟，从而提高了效率。独特的气泡探测器能够降低溶剂灌注时间，进一步加快分析速度。　　安捷伦液相分离事业部市场经理 Helmut Schulenberg-Schell 说：“我们非常高兴能够为药物化学工程师提供与分析液相色谱和气相色谱相同水平的质量和售后支持的Flash LC色谱。今后，我们用于药物发现的产品系列里又增加了一名优秀成员。”　　有关 Agilent 971-FP 快速制备纯化系统(Flash LC)的更多信息，请访问 www.agilent.com/chem/flash:cn 。　　关于安捷伦科技公司　　安捷伦科技公司(NYSE : A)是世界领先的测量仪器公司，同时也是化学分析、生命科学、电子测量和通讯领域的技术引领者。公司现有 18500 名员工，为超过 100 个国家的客户提供服务。安捷伦科技公司在2010财年的净收入为54亿美元。有关安捷伦科技公司的更多资讯请访问公司官网www.agilent.com.cn。

做ICP-OES、ICP-MS、AFS、GFAAS/AAS 等实验室痕量、超痕量元素分析的，都知道试剂纯度的重要性。唯有解决了试剂纯度不够带来的高空白值，才能提升分析结果的可靠性。高纯金属、半导体等材料领域，更是对试剂纯度有着严苛要求。可是高纯试剂价格昂贵且不说，还不易运输和存放，更不要说采购程序是多么复杂。那么，何不买一台高品质、高效、高安全性的酸纯化仪？ 屹尧隆重推出全新S1 亚沸酸纯化仪，采用亚沸蒸馏模式，自动控制热辐射与蒸发之间的动态平衡。更人性化的智能结构设计，操作简单方便，可置于通风厨中工作并实现无人看管。没有任何石英与金属部件，彻底杜绝腐蚀和二次污染的潜在问题。可连续不间断地制备硝酸、盐酸、氢氟酸和水，能将1 ppb级金属元素原酸转换成10ppt级高纯酸。无耗材、维护简便、超低运行功耗。 好吧，这些不稀奇，卖得够贵的那几款据说也有。那么，24小时内就能蒸馏出1.8L高纯硝酸这个谁能做到？屹尧S1可以。怎么实现的呢？咱们来看点不一样的加热和冷凝，还有什么叫真正的安全。 S1 亚沸酸纯化仪，效率为王：■ 3D聚能环绕加热蒸馏方式：加热更高效、更均匀■ 大角度球形冷凝腔：冷却更迅速，高效产率的源头■ 入底式注酸：从源头避免交叉污染?■ 更直观的软件界面：方法库即调即用，温度曲线实时显示? 六重安全防护，安全至上：■ 自动温控保护系统，高温停止工作，待恢复到既定温度范围内，重新启动■ 过热保护装置防干烧■ 灵敏的压力气阀设计，自动泄压■ 稳固提手，轻松移动，便捷操作■ 直观液位观测■ 特制接收区稳固底座，防倾倒 这台全新S1 亚沸酸纯化仪在正式发布之前，已经在上面提到的那些ICP等仪器的某家国际巨头的应用实验室里被全方位操练了一年，报告结论是意料之中的出彩，对得起屹尧这个品牌。所以，大家就放心用吧，趁着它刚发布所以价格特别实惠，买两台囤着都行，能保值增值哦。用得好，记得上来给我们点个赞。

01 摘要通过使用手性催化剂对烯丙醇香叶醇进行环氧化反应，可以通过夏普莱斯不对称合成法选择性地制备出（2S,3S）-环氧香叶醇。合成后的（2S,3S）-环氧香叶醇通过自动化 Flash 色谱法和手动玻璃柱色谱法进行了纯化。为了确定哪种纯化方法对化学家在专业和教学环境中更有益处，我们对每种纯化方法的成功率、效率、质量和经济性进行了分析和比较。结果发现，使用 Teledyne ISCO CombiFlash NextGen 300+ 系统的自动化色谱法在成功率、效率和成本效益方面均优于传统的手动玻璃柱色谱法。02 背景 Flash 色谱法通常作为本科生实验室实验的一部分而被广泛使用。在研究生研究中，由于需要对合成化合物进行纯化，它也是常规使用的技术。Flash 色谱法是一种简单、低成本的色谱技术入门方法，它在纯化化合物方面非常有效。 开放柱的优点开放柱的缺点 尽管自动化 Flash 色谱系统的出现，开放柱在大学中仍然非常流行。它们的初始资金成本很低，因此可以同时使用多个。它们还提供了一种直观的感受，展示了 Flash 色谱是如何进行的。 开放柱由易碎的玻璃制成，一旦破损，需要清理尖锐的碎片和松散的硅胶。在实验结束时，需要对玻璃柱进行填充和拆卸，这会使学生们接触到硅胶粉尘、溶剂以及柱子上残留的任何化合物。开放柱只能使用等度或阶梯梯度。柱子运行需要更多时间，并且需要持续监控，管理溶剂和组分。由于缺乏任何检测器，需要大量的 TLC 板来识别感兴趣的组分。 自动化 Flash 柱的优点自动化 Flash 柱的缺点自动化 Flash 柱是自成一体的，因此在实验完成后，不会接触到硅胶或柱子上残留的任何产品或溶剂。这些柱子填充得当，提高了分辨率，减少了共洗脱峰的可能性。尽管这些柱子是用塑料包装的，但由于检测器可以显示哪些组分应该合并，而不是使用薄层色谱（TLC）板来观察化合物何时被洗脱，因此减少了固体废物。自动化系统允许对梯度进行实验（以梯度冲洗进行纯化测试），并且比开放柱更好地展示了梯度改变与分辨率之间的关系。由于无需填充或清洁柱子，而且纯化过程更快，所以在给定时间内可以处理更多样本，开放柱可同时运行的优势因此被抵消了。 自动化系统的主要缺点是 Flash 色谱设备的初始投资较高，因此与开放的玻璃柱相比，可用的色谱系统数量更少。此外，还需要持续投资预装填的柱子，以及与设备相关的任何维护成本。 03 结果与讨论测试编号 手动（管柱）纯化回收率或产率（%）自动（管柱）纯化回收率或产率（%）#429.0452.85#549.7356.14产率和时间分析成功合成了(2S,3S)-环氧香叶醇，并通过手动与自动化 Flash 色谱法进行了纯化。为了评估两种方法的优劣，我们对比了它们的成功率、效率、产物质量和成本。 通过分析产率，我们发现自动化纯化的产率较高，实验显示分别为 52.85% 和 56.14%，而手动纯化产率仅为 29.04% 和 49.73%。自动化纯化使用预装填柱，紧实充填的硅胶提高了分离效率，减少了样品在柱中的停留时间，避免了环氧环的潜在不稳定。 从纯化质量来看，自动化纯化也表现更佳。NMR 谱图显示，自动化纯化的产物杂质和溶剂残留较少。尽管两种方法都去除了大部分杂质，但自动化技术在纯化效果上更为出色。 在时间效率方面，自动化纯化显著优于手动纯化。自动化过程仅需 26 分钟，而手动纯化需 135 分钟，大大节省了时间和劳力，并减少了操作错误的风险。自动化系统还提供用户友好的操作界面，减少了人为错误并提高了重现性。 经济效益分析表明，自动化纯化的总成本低于手动纯化，为教学实验室提供了一种经济有效的解决方案。此外，自动化纯化减少了对环境的负担，使用了更少的一次性材料，更易于处理废物，并且更安全，因为操作人员无需直接接触硅胶。 综上所述，自动化 Flash 色谱法不仅提高了纯化效率和产物质量，而且更加经济和环保，是化学家们在专业及教育环境中的理想选择。 04 经济分析 平均来说，每个手动玻璃柱纯化所需的材料如表 1-3 所示，用量一致。而自动 Flash 色谱纯化的溶剂用量则根据所选参数和柱子大小（在本例中为 12 克和 4 克柱子）而定。以下是每次纯化所用的材料和溶剂详情。需要注意的是，初始需要的可重复使用设备未包含在价格明细和比较中，如手动纯化用的玻璃器皿和自动纯化用的 Teledyne ISCO CombiFlash NextGen 300+，未包含在价格明细和比较中。 以下比较中使用的化学产品供应商是 Sigma Aldrich；因此，列出的所有价格都基于这家供应商。 表 1：一次手动玻璃柱纯化所用材料的价格细目Materials UsedPrice per quantity used (£ ) 70% hexane/30% EtOAc (600 mL)49.59230-400 mesh Silica Gel (100 g)10.90Dust mask2.37Sand (5 g)0.39TLC plates (7 total)11.48Pipette tips (26 total)0.39KMnO4 (100 mL) (TLC plate detection)4.39一次纯化的总材料成本：79.51£ 表 2：使用 4 克柱进行一次自动 Flash 纯化所用材料的价格细目Materials UsedPrice per quantity used （£ ） Hexane (100 mL)9.80EtOAc (100 mL)4.694 g RediSep Gold silica column5.00Hexane chaser (1 mL)0.0981 mL Syringe (2 total)0.22一次纯化的总材料成本：19.81£ 表3：使用12克柱进行一次自动 Flash 纯化所用材料的价格细目Materials UsedPrice per quantity used（£ ）Hexane (300 mL)29.40EtOAc (200 mL)9.3812 g RediSep Gold silica column500Hexane chaser (3 mL)0.291 mL Syringe (1 total)0.1110 mL Syringe (1 total)0.52一次纯化的总材料成本：44.70£ 05 实验步骤 将粉末状分子筛（0.28克）和无水二氯甲烷（15毫升）一起加入并混合，同时冷却至 -10°C。然后在前述混合物中加入 L-(+)-二乙基酒石酸酯（0.13毫升）和钛（IV）异丙醇盐（0.15毫升），随后再加入叔丁基氢氧化物的癸烷溶液（5.5 M，约3毫升）。混合物在 -10°C 下搅拌 10 分钟，然后冷却至 -20°C。将香叶醇（1.54克）溶解在无水二氯甲烷（1毫升）中，并确保温度不超过 -15°C 的情况下加入到混合物中。加入后，混合物在 -15 至 -20°C 下搅拌 60 分钟。然后将混合物升温至 0°C，并加入水（3毫升）。当溶液升温至室温时，加入饱和氯化钠的氢氧化钠溶液（30%，0.7毫升）。混合物搅拌 10 分钟。然后用二氯甲烷（2 × 10毫升）萃取水层。合并的有机层用 MgSO4 干燥，并在减压下浓缩以得到粗制的（2S,3S）-环氧香叶醇。 表4：实验 4（使用4克柱）的固定参数项目所用参数 Wavelengths254 nm (red)280 nm (purple)Mobile phasesSolvent A: HexaneSolvent B: Ethyl acetateFlow Rate13 mL/minEquilibration Volume7.0 CVGradient% Solvent B0.00.0100.0100.0100.0MinuteInitial0.510.03.52.8Run Length11.4 min, not includingequilibration timeNotesELSD used表5：实验 5（使用12克柱）的固定参数项目所用参数Wavelengths254 nm (red)280 nm (purple)Mobile phasesSolvent A: HexaneSolvent B: Ethyl acetateFlow Rate30 mL/minEquilibration Volume6.0 CVGradient% Solvent B0.00.0100.0100.0MinuteInitial0.510.03.5Run Length8.3 min, not includingequilibration timeNotesELSD used 06 结论 通过手动和自动 Flash 色谱法纯化了合成的（2S-3S）-环氧香叶醇。研究发现，与手动纯化相比，自动 Flash 纯化在纯化合成的粗产品方面更为成功，因为它能从产品中去除更多的杂质和残留溶剂峰。这一点通过分析获得的 NMR 光谱得以证实。此外，通过分析获得的产量比较了每种纯化技术的效率。结果表明，自动纯化的产量更高。此外，自动柱纯化比手动柱纯化耗时少得多，从而蕞大化了实验室的时间利用。这消除了采用手动玻璃柱纯化所需的劳动力投入，并避免了可能发生的高风险错误。与自动纯化相比，手动纯化成本更高、对环境更不友好，并且对用户的危险更大。因此，可以得出结论，自动纯化仪器（如Teledyne ISCO CombiFlash NextGen 300+）是一项值得投资的设备，因为它效率更高，能更成功地纯化合成产品，并且是一种更经济、对环境更有意识的投资。这一结论适用于专业环境中的化学家，如研究或工业领域，以及本科化学教学设施中的化学家。07 补充信息 实验4 手动纯化使用的粗产品 = 1.000 g获得的纯手动纯化产品 = 0.2933 g产率 = 0.2933/1.000 × 100 = 29.33 %自动纯化使用的粗产品 = 0.4 g获得的纯自动纯化产品 = 0.2114 g产率 = 0.2114/0.4 × 100 = 52.85 % 实验5 手动纯化使用的粗产品 = 1.0441 g获得的纯手动纯化产品 = 0.2855 g产率 = 0.2855/1.0441 × 100 = 49.73 %自动纯化使用的粗产品 = 1.0 g获得的纯自动纯化产品 = 0.5614 g产率 = 0.5614/1.000 × 100 = 56.14 % 自动 Flash 管柱纯化结果：实验4（上图，4克柱）和实验5（下图，12克柱）参考文献1. Purification of Delicate Compounds with RediSep Gold Diol and Cyano Columns Retrieved 19 Nov 2021

核酸纯化新技术研讨会Solutions on NA extraction by AJ to state-of-the-art researchers 下面这些核酸纯化问题，您也碰到过吗？? 痕量DNA提取得率很低，如常用于肿瘤诊断和产前诊断的cell free circulating DNA? 要进行高通量测序，核酸样品质量却经常不如人意，石蜡包埋组织、食品等复杂样品的核酸很难高质量获得? 正在开展土壤、粪便等样品的宏基因组方面的研究，无奈获得的核酸样本混有大量的真核生物核酸? 样品量大，核酸提取工作占用太多的时间，而且每次的提取效果不一致 您想改善这些情况吗？德国耶拿的DC双缓冲液新技术和PME聚合物介导分离新技术及革命性的全自动平台可以帮您找到解决办法！? 轻松获得高质量的cell free circulating DNA，还可针对性地提高长片段或短片段DNA的含量比例? 专利的双缓冲液试剂体系能提高核酸产物的纯度和得率，确保顺利进行下游的高通量测序工作? 独特的蛋白吸附技术能从混合核酸样本中去除掉95%以上的真核生物DNA，为宏基因组研究提供强力工具? 快速的DNA甲基化修饰试剂盒 ，高效的转换效率为表观遗传学研究提供可靠和可重复的保障? 采用自动化的核酸纯化系统，可明显节省在核酸提取方面的时间，更重要的是标准化的过程，能确保每批样品提取结果的稳定性 德国耶拿公司于2014年5月举办核酸提取纯化方面的技术讲座，主讲人Timo Hillebrand博士毕业于德国柏林洪堡大学生物化学研究所，一直致力于研发稳定高效、简单快速的核酸纯化和核酸检测方法，以提高实验样品质量和检测结果质量，在解决分子生物学实验问题方面具有很强的实际操作经验。 诚挚邀请您参加此次活动！ 主讲人：Timo Hillebrand博士 讲座主要内容：1. 核酸提取纯化技术的最新进展2. 针对血液、动物组织、细菌病毒、粪便、石蜡包埋组织、植物根茎果实、土壤、食品等各类样品的DNA/RNA/cell free DNA的提取，以及甲基化检测等的常见问题及解决方案 上海站：时间：2014年5月20日（周二）下午14:30-16:30地点：上海市徐汇区钦州北路1122号91号楼10层 德国耶拿公司上海办事处 杭州站：时间：2014年05月22日（周四）上午 9:30-11:30地点：浙江大学紫金港校区医学院综合楼205会议室 德国耶拿分析仪器股份公司 上海021-54261977 54261978 Email：xy.wu@analytik-jena.com.cn 会务联系人： 吴女士 13764007224 余先生13661884489

近日，《国务院关于加快培育和发展战略性新兴产业的决定》中将生物产业列为我国经济发展的支柱产业，这意味着生物技术及产业发展在未来时间将得到更多的资金和政策支持，以疫苗、抗体、蛋白质药物作等为主的生物产业必将得到快速发展。结合产业发展的需求，为帮助生命科学研究与生物技术应用领域的专业人员系统掌握蛋白质分离纯化工具与关键技术，中国生物工程学会继续教育工作委员会与中国生物工程杂志社在成功举办多次蛋白质产品分离纯化、生物工程下游技术、蛋白质组学专题研讨班的基础上，定于2010年12月4-5日在广州举办第九期蛋白质分离纯化技术专题研讨班。　　第九期蛋白质分离纯化专题研讨班的内容经过多位专家的反复提炼，综合了国内外蛋白质分离纯化领域的新技术、新方法，广泛吸纳往届参会代表的意见反馈和研发及产业工作中的实际需求。研讨班内容涵盖蛋白质样品制备、纯化策略、过程优化，相关的产品规定、政策解读以及技术经济分析等内容 同时突出重点和难点，例如基因工程上下游的整体策略、纯化中的具体难点，层析介质的选择等多方面，以及层析柱蛋白质失活等具体问题。本次研讨班由中国科学院从事制备与纯化技术的一线专家授课，并采用专家讲座为主、引导学员讨论实际案例为辅的学习方式，突出互动性以提高学习效果，从而可以在短时间里高效率的掌握蛋白质分离纯化工具，提高蛋白质分离纯化实践中解决具体问题的能力。　　研讨班主要内容：　　蛋白质样品的获得　　层析预处理原则与技术：离心、过滤、超滤、双水相抽提　　蛋白质层析，包括：　　(1)层析介质选择：层析介质特性对层析过程的影响——材质、孔径、官能团　　(2)层析技术：分子排阻、离子交换、疏水层析、金属螯合、亲和层析等　　(3)层析步骤整合方法：选择性、分辨率、动态载量、主要杂质的控制和去除　　(4)蛋白质纯化平台：适应于分子生物学实验室蛋白质纯化的方法和实例　　单克隆抗体纯化，包括：　　(1)单克隆抗体的生化性质　　(2)单克隆抗体纯化的工具　　(3)单克隆抗体纯化的策略和方案　　蛋白质纯化的溶液体系　　(1)蛋白质纯化的缓冲溶液组成和功能　　(2)各种层析模式的常用缓冲溶液的设计和使用　　蛋白质层析技术经济分析　　会议时间、地点：　　2010年12月4-5日，广州广大商务酒店(广州市大学城中环西路230号)　　报到时间：2010年12月3日　　报到地点：广州广大商务酒店　　参会办法：参会代表请于11月26日前填写会议回执后Email或传真至会议主办单位，会议费每人1600元，在读研究生每人1400元(凭有效证件)。食宿统一安排，费用自理。　　联系方式：　　通信地址：北京市海淀区中关村北四环西路33号中国生物工程杂志社(100190)　　联 系 人：任红梅13641036700　　电 话：(010)82624544，82626611-6511 传真：(010)82624544　　电子邮件：renhm@mail.las.ac.cn　　中国生物工程学会继续教育工作委员会、中国生物工程杂志社　　2010年11月第九期蛋白质分离纯化技术专题研讨班报名回执表(参会代表请于2010年11月26日前Emial/传真至主办单位)单位名称通信地址邮编姓名性别职称电话传真E-mail是否住会 第九期蛋白质分离纯化技术专题研讨班住宿预订表(住会者请务必2010年11月26日前回传本表，否则无法安排住宿)单位名称联系人电话手机电子邮件姓名性别是否需要单人间入住日期离店日期 　　报到及住宿酒店位置：　　会议住地：广州广大商务酒店(020-39360988)，标准间每天280元。地址：广州市大学城中环西路230号。　　具体路线：　　1. 从机场：乘坐机场大巴快线2号线至裕通大酒店(约22元)，换乘B25路公交车至广大生活区，即到广大商务酒店。或者乘坐地铁至大学城南站，换乘381、382路公交车至广大生活区，即到广大商务酒店。　　2. 从火车站：乘坐地铁至大学城南站，换乘381、382路公交车至广大生活区，即到广大商务酒店。(提示：广州火车总站、火车东站、火车南站均可乘坐地铁。到达火车北站的会议代表，可以先乘车到广州总站，之后再沿路线提示。)

当前，我国以疫苗和单抗药物为主要领域的生物制药研发已经初具规模，生物工程中下游的关键技术与配套基础正在加速建立与完善，国际生物产业的发展也将加快向中国转移。基因工程下游技术、蛋白质分离纯化技术等作为生物技术研究与产业化中的一线技术，在新产品开发、工艺流程优化、基因工程项目规划与实施等方面极为重要。鉴于目前生物技术相关专业中蛋白质纯化等下游技术课程较为薄弱的问题，中国生物工程杂志社定于2011年7月在北京举办“第11期蛋白质分离纯化技术专题研讨班(基础班)”。基础班旨在使生命科学研究与生物技术应用领域的专业人员在从事蛋白质实验工作中，能够建立系统规范的掌握蛋白质纯化的概念和知识。此外，与以往举办的专题研讨班不同，中高级班专题研讨班以掌握蛋白质分离纯化全面知识和国际最新进展为主体，基础班则是系统讲解与演示生物工程下游技术的基础知识与操作技能。　　本期研讨班将邀请中国科学院从事制备与纯化技术的一线专家授课，并结合大量实例具体讨论蛋白质纯化中的各种考虑要素，以专家讲座为主，辅以关键实验步骤演示与学员实际案例讨论，突出互动性以提高学习效果。　　研讨班主要内容：　　蛋白质样品的获得层析预处理原则与技术：离心、过滤、超滤、双水相抽提蛋白质层析，包括：　　(1)层析介质选择：层析介质特性对层析过程的影响——材质、孔径、官能团　　(2)层析技术：分子排阻、离子交换、疏水层析、金属螯合、亲和层析等　　(3)层析步骤整合方法：选择性、分辨率、动态载量、主要杂质的控制和去除　　(4)蛋白质纯化平台：适应于分子生物学实验室蛋白质纯化的方法和实例　　单克隆抗体纯化疫苗病毒纯化基础，包括：　　(1)单克隆抗体的生化性质　　(2)单克隆抗体纯化的工具　　(3)单克隆抗体纯化的策略和方案　　(4)病毒疫苗的纯化流程　　蛋白质纯化的溶液体系　　(1)蛋白质纯化的缓冲溶液组成和功能　　(2)各种层析模式的常用缓冲溶液的设计和使用　　会议时间、地点：2011年7月2-3日，中国科学院文献情报中心一层院士厅(北京中关村北四环西路33号国家科学图书馆)，报到时间：2011年7月1日8：00——18：00，报到地点：《中国生物工程杂志》编辑部。　　参会办法：参会代表请于6月27日前填写会议回执后Email/邮寄/传真至会议主办单位中国生物工程杂志社，会议费每人1200元，在读研究生每人1000元(凭有效证件)，食宿统一安排，费用自理。　　联系方式：　　通信地址：北京市海淀区中关村北四环西路33号中国生物工程杂志社(100190)　　联 系 人：任红梅　　电 话：(010)82624544(可传真)，82626611-6511，13641036700　　电子邮件：renhm@mail.las.ac.cn　　中国生物工程杂志社　　2011年6月　　第11期蛋白质分离纯化技术专题研讨班(基础班)报名回执表（参会代表请于2011年6月27日前Emial/传真/邮寄至中国生物工程杂志社）单位名称 部门通信地址邮编姓名性别职称电话传真E-mail是否住会 第11期蛋白质分离纯化技术专题研讨班（基础班）住宿预订表（住会者请务必于2011年6月27日前回传本表，否则无法安排住宿）单位名称联系人电话手机E-mail代表姓名 性别是否需要单人间入住日期离店日期 　　会议驻地：中科院第一招待所（010-62564642）、中科院中关村公寓（010-62635070），标准间每天150元。公交线路：913、983、740、696、826、466、641、26、47、320区间、运通113等各路公交车至中关村一街站即到。

SFC应用—苯基吡啶的纯化3-苯基吡啶与4-苯基吡啶都是生产高附加值精细化工产品的重要有机原料，随着农药、医药等精细化工行业的蓬勃发展，对两者的需求日益增高。两者的沸点接近（分别为 144.14℃ 和 145℃），性质相似。依靠传统的分离方法，如精馏、普通的溶剂萃取无法将其分离。而采取化学转化法则会有污水量大、产率低等缺点。虽然邻苯二甲酸法和铜盐法研究较多，但相对来说步骤比较繁琐。现如今通过 SFC 可以有效将两者进行分离，高效快速的同时也解决了有机溶剂污水处理量大等难题。1SFC 分离条件设备Sepiatec SFC-50色谱柱AS-HUV波长254nm改性剂MeOH,5%进样体积15 ul流速8 ml/min压力100bar温度40℃2实验结果▲图1.SFC 在 5% MeOH 等度条件下对 3-苯基吡啶与 4-苯基吡啶分离色谱图3叠加进样▲图2. 3-苯基吡啶与 4-苯基吡啶在 6 次叠加进样状态下的分离色谱图4结论与传统的分离方式相比，通过超临界流体色谱可以快速有效的将 3-苯基吡啶与 4-苯基吡啶进行分离，并将分离时间控制在 4min 之内，除此之外，较少的改性剂使用也为用户解决溶剂成本及后续废液处理等烦恼。通过叠加进行功能，在保证两者分离度的情况下可以更加快速的对样品进行制备，避免非必要的时间等待，叠加进样功能可将每次进样时间控制在 1.6min 以内。