离心沉淀器

由于各种大小和密度的颗粒在离心机管中均匀分布，经一段时间连自己后全部最重的颗粒达到管底时，离心机开始时离新管底较近的比较轻的颗粒也沉降扫官司而混于该重颗粒之中，所以还要将沉淀在悬浮，医用离心机以原来的转速再次离心，获得的沉淀将更加的纯一些，这样反复几次之后，就金额以得到基本上大喜爱均一的纯样品，这个过程我们称之为洗沉淀。 将每次洗过的上清液合并起来以更高转速离心机，从上清液或者沉淀得到分离提纯的另一组分，差速离心机常用来分离各种亚细胞及粗提核酸，蛋白质，例如组织均匀浆可根根据它们的s值大小以其他分组提出来，高速离心机这种方法将最初的反复沉淀的悬浮液和离心机两道三次就能得到一个相对纯的亚细胞组分，但得到的组分也不是绝对均一，可以进一步用哟中连续的液体密度梯度代替均匀的悬浮介质，从而得到一个更好的分离。

最近做矿山化验，沉淀太浪费时间。想求购一款离心机。我一天大约能做20个矿样左右，哪一款离心机比较适合！

氨氮纳氏试剂法，絮凝沉淀后有少量悬浮，规范HJ535-2009中说可以过滤或是离心处理，我选用的离心分离，请问都有哪些需要注意的地方！

从 植物 叶片提取的植物总蛋白不但是家养类动物生长发育的重要营养物质，而且是具有潜力的新一代营养保健食品，因而掌握植物叶蛋白的提取方法至关重要，让我们一起了解这整个实验原理和过程吧。一、实验目的熟悉植物叶蛋白的几种提取原理和方法，了解其意义及其应用价值。二、实验原理植物叶蛋白或称绿色蛋白浓缩物(leaf protein concentration，简称LPC)，是从新鲜植物叶片中提取的高质量浓缩蛋白质，不仅是畜禽生长发育和生产畜产品的主要营养物质，而且目前也正成为人类的保健营养理想食品之一。天然蛋白存在于为数甚多的植物体内，对其分离应依据人们的利用目的及提取蛋白含量和品质加以考虑。天然蛋白质一般在溶液中呈稳定的亲水胶体状态，故LPC 亦称叶蛋白胶。其特点是：(1)水化作用 即蛋白质分子表面附有能有效防止蛋白质分子沉淀析出的水化膜;(2)电荷排斥作用 水化膜外还有电荷层(具阴、阳离子)能有效地防止蛋白质分子的凝集。故溶液蛋白质颗粒(溶质)呈溶解状态;(3)欲提取植物组织中的蛋白质必须利用溶解度的差异进行分离纯化(如盐析、有机溶剂分级沉淀法、疏水层析、结晶、加热、离心分离等法)，利用分子大小和形状差异进行分离纯化(分子筛层析法);还可利用电荷性质的差异分离纯化(离子交换法)。只要创造上述影响因素，即可使蛋白质从植物叶片中分离并沉淀出来。植物叶蛋白提取一般遵循如下基本原则：尽可能提高样品蛋白的溶解度，抽提最大量的总蛋白，减少蛋白质的损失;减少对蛋白质的人为修饰;破坏蛋白与其他生物大分子的相互作用，并使蛋白质处于完全变性状态。根据该原则，植物叶蛋白制备过程中一般需要有四种试剂①离液剂：尿素和硫脲等;②表面活性剂：又称去垢剂，早期常用NP-40、Tritonx-100等非离子型去垢剂，离子型去垢剂有SDS、胆酸钠、LiDS 等，还有象CHAPS(含它的蛋白溶液可以冻存)与Zwittergent 等双性离子去垢剂;③还原剂：DTT、DTE、TBP、Tris-base 等;④蛋白酶抑制剂及核酸酶：EDTA、PMSF、蛋白酶抑制剂混合物(Protease inhibitor cocktails)等，如为了去除缓冲液中存在的痕量重金属离子，可在其中加入0.1～5 mmol/LEDTA，同时使金属蛋白酶失活。三、仪器和试剂仪器离心机、移液器、研钵、离心管、冰箱。试剂1. 20 mL 样品提取缓冲液：2.5 mL 0.5 mol/LTris-HClhttp://img.dxycdn.com/trademd/upload/userfiles/image/2013/10/A1381399946_small.jpg3. -20 ℃下预冷丙酮(含0.07% β-巯基乙醇)4. -20 ℃预冷的80%丙酮(含0.07% β-巯基乙醇)5. 饱和硫酸铵溶液 称取(NH4)2SO4 80 g，加蒸馏水100 mL，加热50～60 ℃，搅拌溶解，室温过夜，用浓氨水调pH 至7.06. 0.05 molpH7.0的磷酸缓冲液10%NaCl 0.1mol 醋酸95%乙醇7. 植物叶片(草本植物、木本植物叶片等都可)四、实验步骤植物叶蛋白的提取主要有盐析法、有机溶剂沉淀法、加热法(含逐步和快速加热)、 离心分离法、结晶和重结晶法等。依据今后的开发方向(以饲料为基础，以食品、饮品为开发方向)及简便易行和使用的原则，主要采用盐析法、加热法和有机溶剂法分离提取叶蛋白(冷提和热提)。不同的提取方法，对样品的处理方式、程度和要求不同，结果也有差异。1. (NH4)2SO4 沉淀法提取叶蛋白取0.3 g 植物叶蛋白，用液氮充分研磨转入离心管中，加入3 mL 提取缓冲液，摇匀并放在4 ℃条件下提取1 h，充分溶解蛋白后，4 ℃10000 r/min 离心20 min，弃沉淀，上清液中加入(NH4)2SO4，混匀1 h，按1：2(v/v)加入-20 ℃预冷的80%丙酮，混匀后4 ℃12000 r/min 离心10 min，沉淀在-20 ℃冰箱中放置20 min，使丙酮完全挥发后加适量上样缓冲液，待沉淀充分溶解后，4 ℃12000 r/min 离心5 min，取上清液即为所提取的叶蛋白溶液。2. 改良丙酮沉淀法提取叶蛋白取0.3 g 左右的植物叶片，用液氮研磨，色素多的可按材料鲜重的10%加入PVP，并将充分研磨过的样品转入离心管中，加入4 mL 的提取缓冲液，摇匀并放在4 ℃条件下提取1 h，充分溶解蛋白。放置后的样品充分摇匀，4 ℃10000 r/min 离心30min，弃沉淀，上清液中加入2.5～3倍体积的村-20 ℃条件下过夜，让蛋白充分沉淀。之后，4 ℃10000 r/min 离心30min，其上清，沉淀置于-20 ℃下，使丙酮完全挥发，如有必要加入上样缓冲液溶解沉淀。缓冲液用量300 ul，沉淀充分溶解后，转移至1.5 mL 离心管中，4 ℃12000 r/min 离心15min ，取上清液即为所提取的叶蛋白溶液。该方法提取的蛋白质，提取效率高，杂质干扰少，电泳结果蛋白条带清晰，数量多。 3. 植物叶片总蛋白的提取—三氯醋酸—丙酮沉淀法①在液氮中研磨适量的叶片;②悬浮于含10%的三氯醋酸和含0.07% β-巯基乙醇(可用DTT 代替)的丙酮溶液在-20 ℃条件下冰浴;③让蛋白质沉淀过夜后离心(4 ℃ 10000 r/min 离心30~60min)，弃上清;④重悬沉淀浮于含0.07% β-巯基乙醇的预冷丙酮溶液中;⑤离心(同上)后真空干燥沉淀;⑥用上样缓冲液溶解沉淀，离心;⑦Brandford 法定量蛋白，然后分装至Eppendof 管中保存在-78 ℃备用。4. 分步提取可溶性叶蛋白(1)蛋白质浸出①水溶性蛋白质浸出：用0.05 molpH7.0的磷酸缓冲液(或蒸馏水)将样品制成匀浆液，然后离心15min(4000 r/min)，收集上清液即蛋白质浸出液，再将沉淀物按上述操作重复两次。②盐溶性蛋白质浸出用10%NaCl 将前者剩余沉淀物分离提取两次，收集蛋白质浸出液。(2)蛋白质沉淀用0.1mol 醋酸将蛋白质浸出液pH 值调至蛋白质等电点(pH4.5左右)，即8体积蛋白质浸出液加入1体积0.1 mol 醋酸，混匀，离心15min(3000 r/min)，弃去上清液，沉淀物即为可溶性叶蛋白。(3)蛋白质收集于沉淀物中加入95%乙醇，混匀，用定量滤纸过滤或抽滤，待风干后收集。植物总蛋白的提取方法以有机盐沉淀法为主，本文中介绍到的(NH4)2SO4沉淀法、丙酮沉淀法、三氯乙酸—丙酮沉淀法和分步提取法，各个方法各有特点和适用范围，各位如有更好的植物总蛋白提取方法，欢迎补充。

难溶物的沉淀目的原理1.学会运用溶度积理论，掌握沉淀反应的规律，并用以预测、验证、分析某些实验现象以加深对溶度积概念的理解，增加沉淀反应的感性认识。2.利用沉淀反应来分离或鉴定某种物质。过程步骤一、沉淀现象1.在试管中加10滴0.1moldm-3Pb(NO3)2，加入等量0.1moldm-3K2ClO4溶液，记录现象。2.取10滴0.1moldm-3Pb(NO3)2，加入等量0.1moldm-3Na2S溶液，记录现象。3.根据溶度积判断下列溶液是否有沉淀生成，并用实验证明之。在两支干燥试管中各加10滴0.1moldm-3 Pb(NO3)2溶液，然后分别加10滴0.2moldm-3 NaCl和0.1moldm-3 NaCl溶液。二、分步沉淀向试管中加入2滴0.1moldm-3 Na2S溶液和5滴0.1moldm-3 K2CrO4溶液，用水稀释至5吨。然后逐滴加入0.1moldm-3 Pb(NO3)2溶液，观察首先生成沉淀的颜色。待沉淀沉降后，继续向清液中滴加Pb(NO3)2溶液。会出现什么颜色的沉淀?根据有关溶度积数据加以说明。三、沉淀的转化1.已知Ksp,AgCl = 1.8×10-10，Ksp,AgI = 3.5×10-17，设计利用浓度均为0.1moldm-3的AgNO3、NaCl、KI溶液，实现AgCl沉淀转化成AgI沉淀的实验。2.设计制备Ag2CrO4沉淀的实验，观察其颜色，试验Ag2CrO4沉淀能否与0.2moldm-3的NaCl发生反应?注意沉淀及溶液的变化，解释观察到的现象。四、沉淀的溶解1.在试管中加入2moldm-3MgSO4溶液，加入2moldm-3NH3H2O水数滴，此时生成的沉淀是什么?再向此溶液中加入1moldm-3NH4Cl溶液，观察沉淀是否溶解?用离子平衡移动的观点解释上述现象。2.取5滴0.01moldm-3Pb(Ac)2溶液，加入5滴0.02moldm-3KI溶液，待沉淀生成，再加入少量固体NaNO3，振荡试管观察PbI2沉淀又溶解，为什么?五、用沉淀法分离混合离子1.Pb2+、Ca2+、K+的混合液的沉淀分离用0.1MPb(NO3)2、0.1MCa(NO3)2、0.1MKNO3溶液各5滴滴入一支试管中然后加入饱和H2S溶液数滴，振荡试管，产生什么沉淀?离心沉淀后，在清液中再加一滴饱和H2S溶液，若无沉淀出现，则表示Pb2+已沉淀完全，离心分离。用滴管将清液移入另一试管中，在清液中加入1moldm-3Na2CO3溶液，直到沉淀完全，离心分离。写出分离过程示意图。2.混合AgNO3、Fe(NO3)3、Al(NO3)3溶液用沉淀法使Ag+、Al3+、Fe3+分离。试设计其分离程序。分析思考 1.根据溶度积判断10滴0.1moldm-3 Pb(NO3)2溶液加10滴0.2moldm-3 NaCl溶液是否有沉淀产生?2.估计Ag2CrO4沉淀与2moldm-3NaCl反应的综合平衡常数。估计该反应的可能性及主要现象。3.设计沉淀法分离Ag+、Fe3+、Ap3+离子的分离程序。

请问离心机的转速如何确定？如果按不同的分子量来粗略地划分，多少转能将分子量在2000或500左右的物质沉淀下来？

我要用液质联用技术定量检测血浆中的固醇类物质，首先向血浆中加入乙腈，有沉淀产生，需要离心取上清液吗？

硫酸水解脱脂棉制备纳米微晶纤维素，离心时是去掉上清液还是沉淀

油品检验中机械杂质（gb/t511-1988）和沉淀物（离心法）是一个概念吗（仅方法不一样）？

请教，磷脂脂肪酸被萃取在上层的有机溶剂里，在调离心速率时会不会因为转速过大，而沉淀到下层？

蛋白复性液稀释沉淀如何去除，0.22过滤不掉 啊我的蛋白复性液稀释后还有一部分沉淀析出，但是沉淀过滤去除不了啊，请大家帮忙啊？ 蛋白复性液稀释沉淀如何去除，0.22过滤不掉 啊，除了高速离心有什么好的办法吗，快速或量大点的处理方法，

在前处理中，内脏组织大多杂质很多，需要沉淀蛋白质，沉淀后离心，提上清夜再萃取，但内源性物质中的待检物同时也会和蛋白质成结合状态，需要水解，再萃取。所以请问如果我先沉淀了蛋白，那么会不会把成结合状态的待检物一同沉淀，损失待检物。在运用中如何处理蛋白质杂质和蛋白质结合物的前处理问题？

氨氮絮凝沉淀预处理怎么做，我们是加1毫升硫酸锌，调ph到10-11，这个要很准确吗，然后放置一晚上，第二天取上清液测定，取的时候你们要过滤吗还是离心？

刚接触氨氮分析，还望多多指点。纯水空白吸光度大约在0.013—0.020之间，多次用纯水絮凝沉淀后测定吸光度0.080—0.1之间。絮凝沉淀时候加1ml硫酸锌，四滴氢氧化钠，充分静置后取上清液分析，离心后也一样高。最可能的原因是：硫酸锌？氢氧化钠？pH？

求助求助做的是玉米籽粒中除草剂提取，做[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]质谱分析，前处理过滤后放置一段时间后进样小瓶中出现沉淀，想问一下是什么原因导致的呢？是油脂没除净导致的吗？前处理步骤如下：1、取10g玉米籽粒加入10mL乙腈和6mL1%乙酸溶液，涡旋2min2、加入4g无水硫酸镁和1g氯化钠，涡旋2min3、3000r/min离心10min，去上清液加入2g无水硫酸镁和200mgPSA，涡旋2min，再次离心10min4、取上清液过0.22μm滤膜，装入进样小瓶中待测不知道为什么瓶里会有沉淀，刚过滤完是没有的，是变质了还是物质不稳定析出了呢？该怎么解决呀？谢谢大家。

下列有关晶形沉淀的沉淀条件叙述不正确的为（ ）。（A）在适当的稀溶液中进行沉淀 （B）迅速加入沉淀剂（C）沉淀时不断搅拌 （D）沉淀结束后进行陈化

下列有关晶形沉淀的沉淀条件叙述不正确的为（ ）。（A）在适当的稀溶液中进行沉淀 （B）迅速加入沉淀剂（C）沉淀时不断搅拌 （D）沉淀结束后进行陈化

下列对非晶形沉淀的沉淀条件叙述正确的是（ ）。 (A)在浓溶液中快速加入沉淀剂并不断搅拌 (B)在稀溶液中慢慢加入沉淀剂并不断搅拌 (C)沉淀完全后应加入冷水稀释并充分搅拌 (D)沉淀析出后,应进行陈化

下列有关晶形沉淀的沉淀条件叙述不正确的为（ ）。（A）在适当的稀溶液中进行沉淀 （B）迅速加入沉淀剂（C）沉淀时不断搅拌 （D）沉淀结束后进行陈化

下列对非晶形沉淀的沉淀条件叙述正确的是（ ）。 (A)在浓溶液中快速加入沉淀剂并不断搅拌 (B)在稀溶液中慢慢加入沉淀剂并不断搅拌 (C)沉淀完全后应加入冷水稀释并充分搅拌 (D)沉淀析出后,应进行陈化

用于沉淀滴定法的沉淀反应必须符合（）。①沉淀反应速度要快 ②按一定的化学反应或定量进行③用适当的指示剂确定终点 ④沉淀的吸附现象不妨碍终点的确定 (A)①②③④ (B)②③ (C)①④ (D)①②③

用于沉淀滴定法的沉淀反应必须符合（）。①沉淀反应速度要快 ②按一定的化学反应或定量进行③用适当的指示剂确定终点 ④沉淀的吸附现象不妨碍终点的确定 (A)①②③④ (B)②③ (C)①④ (D)①②③

对于晶形沉淀和非晶形沉淀（ 　）陈化。（A）都需要　（B）前者不要后者要　（C）都不需要　（D）前者需要后者不要

什么晶形沉淀、无定形沉淀？

晶形沉淀的沉淀条件是什么？

我用沉淀法检测硫酸根，加入氯化钡后不产生沉淀。我以为是氯化钡有问题，但加到高含量的硫酸根溶液中，几滴就有大量沉淀。哪位大神告诉我这是什么原因啊？

教学目的：1、掌握沉淀滴定法对反应的要求。2、掌握银量法确定理论终点的方法原理。3、明确分级沉淀及沉淀转化的概念。4、理解测定氯化物的条件。教学重点与难点：莫尔法（铬酸钾作指示剂）作为教学重点。教学内容： 一、方法简介沉淀滴定法（precipitation titration）：也称容量分析法（volumetric precipitation method），以沉淀反应为基础的滴定分析方法。用作沉淀滴定的沉淀反应必须满足以下条件：（1）反应速度快，生成沉淀的溶解度小；（2）反应按一定的化学式定量进行；（3）有准确确定理论终点的方法。应用范围：含量在1%以上的卤素化合物和硫氰化物的测定。解释：沉淀反应很多，但能用于沉淀滴定的沉淀反应并不多，因为很多沉淀的组成不恒定，或溶解度较大，或形成过饱和溶液，或达到平衡速度慢，或共沉淀现象严重等。目前比较有实际意义的是生成微溶性银盐的沉淀反应。Ag+ + Cl- = AgCl↓Ag+ + SCN- =AgSCN↓以这类反应为基础的沉淀滴定法称为银量法。主要测定Cl-、Br-、I-、Ag+ 及SCN-等。如有一些沉淀HgS、PbSO4、BaSO4等也可用于沉淀滴定法，但重要性不及银量法。

当抗原与相应抗体形成一个接触面时，如二者比例适当，接触面上可形成一个乳白色的环状物即为阳性沉淀反应。一、材料（1）免疫血清：免疫兔抗人血清。（2）抗原：人血清。（3）小沉淀管、毛细吸管、橡皮头、生理盐水。二、方法（1）取小沉淀管2只，以毛细吸管吸取抗人血清约0.2ml，加入第一管，加时注意不能有气泡。（2）以毛细吸管吸取生理盐水0.2 ml 加入第二管。（3）用毛细吸管吸入血稀释0.2ml 加入各管，加时应注意使抗原溶液缓缓由管壁流下，轻浮于血清面上，使成一明显界面，切勿使之相混。（4）置室温中10~20分钟，观察液面有无乳白色沉淀环，若有则为阳性。

当抗原与相应抗体形成一个接触面时，如二者比例适当，接触面上可形成一个乳白色的环状物即为阳性沉淀反应。一、材料（1）免疫血清：免疫兔抗人血清。（2）抗原：人血清。（3）小沉淀管、毛细吸管、橡皮头、生理盐水。二、方法（1）取小沉淀管2只，以毛细吸管吸取抗人血清约0.2ml，加入第一管，加时注意不能有气泡。（2）以毛细吸管吸取生理盐水0.2 ml 加入第二管。（3）用毛细吸管吸入血稀释0.2ml 加入各管，加时应注意使抗原溶液缓缓由管壁流下，轻浮于血清面上，使成一明显界面，切勿使之相混。（4）置室温中10~20分钟，观察液面有无乳白色沉淀环，若有则为阳性。