液相色谱柱后衍生化器

是戴安的液相色谱仪u3000，配了一个紫外和荧光检测器。现在想配柱后衍生检测器。请详细说明衍生检测器用途。谢谢！

[color=#666666]液相色谱柱后衍生，两种衍生剂，是否要混合之后再反应[/color]

[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱仪[/color][/url]如何连接柱后衍生？

液相色谱柱后衍生做氨基甲酸酯 走标准品出峰都好好的，但是 我用基质添加标准品配的表液好多峰都没出来 有可能是哪方面的原因？

最近有在用液相色谱柱后衍生测定草甘膦农药，将装置连接示意图分享给大家

色谱仪的衍生化主要是为了提高目的物的可检测性。对于气相色谱，主要是为了增强目的物的挥发性或改善目的物的极性。对于液相色谱仪，主要是为了提高检测器对目的物的响应。一、衍生化分类：　　1、柱前衍生：在分析物经过色谱柱前与衍生剂反应，反应产物在色谱柱上实现分离，实际分离的是衍生产物，检测的也是衍生产物。　　2、柱后衍生：分析物在色谱柱中实现分离后，在衍生池内与衍生剂反应，检测的是衍生产物。二、适用的化合物：　　生物酸、生物碱、胺类、抗生素和氨基酸类等。三、衍生化要求：　　1、衍生剂必须过量且稳定。衍生剂不过量，反应不完全，检测不充分。衍生剂不稳定，重现性差。　　2、衍生剂、衍生产物和衍生副产物容易分离。只能检测到衍生产物最好。　　3、衍生反应快速、完全。四、柱前衍生特点：　 1、优点：　　 （1）相对自由地选择反应条件。　　 （2）不存在反应动力学的限制。　　 （3）衍生副产物可进行预处理。　　 （4）容易允许多步反应的进行。　　 （5）有较多的衍生剂可选择。　　 （6）不需要复杂的仪器设备。　 2、缺点：　　 （1）形成的衍生副产物可能对色谱分离造成较大困难。　　 （2）在衍生化过程中，容易引入杂质，或损失样品。五、柱后衍生特点：　　1、优点：　　 （1）重现性好，影响因素少，引入物质比较少。　　 （2）分析物可以在其原有的形式下进行分离，容易选用已有的分析方法。　　2、缺点：　　 （1）对于一定的溶剂和有限的反应时间来说，目前只有有限的反应可供选择。　　 （2）可能有扩散问题。　　 （3）需要额外的仪器设备。

做[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相[/url]时经常会用到衍生化，液相也会用时，有柱前和柱后两种。柱前的做过，柱后的没做过，故请教下柱后衍生化除衍生试剂外，还需要其它的设备或装置吗？我们单位有液相和荧光检测器，想做链霉素，如何去实现（主要是柱后衍生这一步）？如下是2007年蜂蜜中链素检测的国标：[img]http://bbs.instrument.com.cn/images/affix.gif[/img][url=http://bbs.instrument.com.cn/download.asp?ID=195953]GBT 21164-2007 蜂王浆中链霉素、双氢链霉素残留量测定 液相色谱法.pdf[/url]

弱弱问一句，液相色谱的柱后衍生系统是做什么的？

[b]（1）参考标准GB/T 5009.124-2003 《食品中氨基酸的测定》（2）应用背景[/b][align=left][b]我国大多数国民中有近70% 的蛋白质由粮食供给。蛋白质的营养质量主要取决于氨基酸的组成与比例，尤其是必需氨基酸的组成与比例，植物性蛋白往往相对缺少赖氨酸、蛋氨酸、苏氨酸和色氨酸，如大米和面粉蛋白质中赖氨酸含量最少。氨基酸的含量和比例是糕点营养评价的重要组成部分。[/b][/align][b]（3）推荐解决方案高效液相色谱仪柱后衍生法色谱条件： 色谱柱：SMT SCX 阳离子交换柱4. 6 mm × 150 mm，5 μm； 流速：0.4mL/min； 进样体积：20μL；柱温：程序升温：初始温度34℃保持12min，以1.3℃升温至65℃保持16.1min，接着以1.3℃/min升温至70℃保持11.1min，然后以-40℃降温至34℃保持7min；检测器波长：570nm。[img]http://www.tianjinlanbo.com/uploads/allimg/151229/09535331c-3.png[/img] 柱后衍生条件：衍生剂：茚三酮；流速：0.3mL/min； 衍生温度：45℃；标准色谱图：[img]http://www.tianjinlanbo.com/uploads/allimg/151229/095353DN-4.png[/img]（4）推荐配置：[/b][list][*][b]Series4000系列四元高压梯度液相色谱仪[/b][*][b]UVD紫外检测器[/b][*][b]兰博PCR柱后衍生系统[/b][*][b]AS1000自动进样器[/b][*][b]SMT C18 4. 6 mm × 150 mm，5 μm[/b][*][b]转速≥5000转/分钟的离心机[/b][/list]

寻几家戴安液相色谱柱后衍生装置的厂家或者代理，要求有联系方式，厂家或者代理越多越好最好为进口的

色谱仪的衍生化主要是为了提高目的物的可检测性。对于气相色谱，主要是为了增强目的物的挥发性或改善目的物的极性。对于液相色谱仪，主要是为了提高检测器对目的物的响应。一、衍生化分类：1、柱前衍生：在分析物经过色谱柱前与衍生剂反应，反应产物在色谱柱上实现分离，实际分离的是衍生产物，检测的也是衍生产物。2、柱后衍生：分析物在色谱柱中实现分离后，在衍生池内与衍生剂反应，检测的是衍生产物。二、适用的化合物：生物酸、生物碱、胺类、抗生素和氨基酸类等。三、衍生化要求：1、衍生剂必须过量且稳定。衍生剂不过量，反应不完全，检测不充分。衍生剂不稳定，重现性差。2、衍生剂、衍生产物和衍生副产物容易分离。只能检测到衍生产物最好。3、衍生反应快速、完全。四、柱前衍生特点：1、优点：（1）相对自由地选择反应条件。（2）不存在反应动力学的限制。（3）衍生副产物可进行预处理。（4）容易允许多步反应的进行。（5）有较多的衍生剂可选择。（6）不需要复杂的仪器设备。2、缺点：（1）形成的衍生副产物可能对色谱分离造成较大困难。（2）在衍生化过程中，容易引入杂质，或损失样品。五、柱后衍生特点：1、优点：（1）重现性好，影响因素少，引入物质比较少。（2）分析物可以在其原有的形式下进行分离，容易选用已有的分析方法。2、缺点：（1）对于一定的溶剂和有限的反应时间来说，目前只有有限的反应可供选择。（2）可能有扩散问题。（3）需要额外的仪器设备。来源：互联网

[align=center][font='calibri'][size=13px][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]分析预处理之衍生化[/size][/font][/align][align=center][font='calibri'][size=13px]通标小菜[/size][/font][font='calibri'][size=13px]鸟[/size][/font][/align][font='calibri'][size=13px]说起衍生化，想必大家都不陌生。当我们想要用[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]测定一个化合物，但是通过实际的测试发现该化合物在紫外或者荧光检测器上没有响应和吸收，或者响应很差，又或者该物质本身就不是很稳定的，在这种情况下没有办法满足我们的测试需求。这时候衍生化技术就要登场了，通过样品的衍生化可以使得我们的被测物转化成能够用原先仪器和条件进行分析的物质。[/size][/font][font='calibri'][size=13px]样品经过衍生化后，它的物理和化学性质就会发生改变，原先不稳定的物质会变得稳定，原先的分子结构及极性大小也会随之改变。有些人可能在想，那我以后遇到不能测试的物质是不是都能进行衍生吗？其实不是的，不是所有化合物都能进行衍生的，衍生也是有前提条件的。比如衍生过程中使用的衍生剂必须是稳定的，不然还没等化合物衍生完成，衍生剂就已经失效了。还有在衍生化中，目标物与衍生试剂可能会发生副反应，从而生成一些其它的杂质，这些杂质可能与目标物转化后的物质物理化学性质很相近，色谱上无法实现分离，进而干扰到目标物的测定，这时候选择衍生就不是很明智了，就要采取其它手段，比如更换测试仪器等等。再有衍生反应能正常完成，但是衍生所需要的条件很苛刻，比如对温度，光照，时间，设备等都有很高要求，这些下来做一个衍生反应成本就会很高，这种情况下也不适合采用衍生的方式，因为在实际操作中会很难实现。所以对于衍生反应，我们还是希望它越简单越好，比如通过衍生就加一个发色[/size][/font][font='calibri'][size=13px]团或者[/size][/font][font='calibri'][size=13px]荧光团，让原先不能被检测器检测到的现在能够检测到。[/size][/font][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/07/202307011747216849_8171_3141805_3.jpeg[/img][font='calibri'][size=13px]比较典型一个衍生化反应就是环境空气中用[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相[/color][/url]测定醛酮类化合物，它所使用的衍生剂[/size][/font][font='times new roman'][size=13px]是[/size][/font][font='times new roman'][size=13px]2[/size][/font][font='times new roman'][size=13px]，[/size][/font][font='times new roman'][size=13px]4-[/size][/font][font='times new roman'][size=13px]二硝基苯[/size][/font][font='times new roman'][size=13px]肼[/size][/font][font='times new roman'][size=13px]，整个反应很简单，反应时间也很短，反应之前醛酮类化合物会带上一[/size][/font][font='calibri'][size=13px]个DNPH发色基团变成[/size][/font][font='calibri'][size=13px]腙[/size][/font][font='calibri'][size=13px]类化合物，在[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相[/color][/url]上就会有很好的响应。[/size][/font][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/07/202307011747220076_4305_3141805_3.jpeg[/img][font='calibri'][size=13px]衍生化反应按衍生化方法可分为柱前衍生化和柱后衍生化。所谓柱前就是样品在进入色谱柱之前就完成衍生化反应，进入色谱柱的就已经是衍生后的化合物了。而柱后就是原先不能被测定的目标[/size][/font][font='calibri'][size=13px]物先进[/size][/font][font='calibri'][size=13px]入色谱柱进行分离，然后在其进入检测器之前加入衍生化试剂，在进入检测器之前完成整个反应。[/size][/font][font='calibri'][size=13px]柱前衍生受仪器和反应条件的影响较少，被测物预先就衍生化完成，对于那些衍生时间和温度有特殊要求的物质最适合。而柱后衍生优点是[/size][/font][font='calibri'][size=13px]受认为[/size][/font][font='calibri'][size=13px]因素干扰少，全程由仪器自己来完成，对人的依赖少，不需要分析人员在预处理方面花费大量时间。[/size][/font][font='calibri'][size=13px]但是柱[/size][/font][font='calibri'][size=13px]后衍生几乎所有的色谱峰都会发生扩散、展宽，使得方法建立和日常应用变得复杂化。两种衍生化方法都各有优缺点，具体使用哪一种还需要结合实际情况来进行选择。[/size][/font]

1、为什么要衍生?　　衍生化最为主要的目的就是提高目的物的可检测性。对于GC来讲，多数是为了增强目的物挥发性或者改善目的物极性 对于HPLC来讲多数是为了提高检测器对目的物的相应。　　2、衍生化分类：柱前衍生和柱后衍生。柱前衍生是在经过分析柱前使分析物与衍生剂反应，反应产物在分析柱上实现分离，实际分离的是衍生产物，检测的也是衍生产物 柱后衍生是分离物在分析柱中实现分离后，在衍生池内与衍生剂反应，在柱子中分离的是目的物，在检测器处检测的衍生产物。　　3、适用的化合物：生物酸/碱、胺类、抗生素(聚醚类抗生素多见)和氨基酸类。　　4、衍生化要求?　　1)衍生剂必须过量且稳定 不过量反应不完全，检测不充分。不稳定，重现性差。　　2)衍生物、衍生产物和衍生副产物至少是好分离的。当然如果只能检测到衍生产物最好。　　3)衍生反快速完全。反应慢，柱前衍生还可以，但柱后不行。因为流速固定，衍生池管路长度一定，留给衍生化的时间是一定的。柱前衍生可以在系统外等衍生完毕后进样，但也是影响效率的。　　5、两种衍生比较　　柱前衍生优点是，对设备要求不高，可以手工衍生，而且对衍生时间要求相对宽泛。缺点是，引入了过多的物质，如：衍生剂、衍生产物(当然这个是检测需要的)和衍生副产物，对柱子有潜在的负面影响，另如采用手工衍生也会引入过多的认为因素。　　柱后衍生优点是，重现性好，人为因素少，引入物质比较少。缺点是，可能有扩散问题，在柱子中分离结束后，就存在扩散，如果衍生慢(必然流速低)、管路长扩散问题就会比较严重，再有就是要求有一套外源的泵系统和一个检测池，对于设备要求较高。

大家抖没有遇到柱后衍生的问题么？我这里有一台液相，瓦里安公司的，只有紫外和荧光两个检测器，没有柱后衍生器，我要做的是检测氨基甲酸酯农药，请问高手们有何高见，多多指点一下吧，谢谢了！

液相色谱柱后衍生荧光检测做氨基甲酸酯为何同一浓度的对照品每3小时间隔进样，发现对照品峰面积越来越低，从原来的15934858，变成10334905。新配了对照品还是不行。因为连续进样了3天，会不会是仪器的原因？？仪器也需要休息了啊？？

如题，检测室最近购买了一台安捷伦1260液相色谱仪，配的是荧光检测器和二极管阵列检测器，钱不够，就没安柱后衍生系统，我们是做农产品及水质类的农药残留检测的 ，查了下资料，像安基甲酸酯类的农药，基本都要求用紫外检测器，我想请教各位高手，像我们现在这样的配置，可以测点啥呢。谢谢了。

问题:请问农残方面，液相色谱仪没有配柱后衍生可以做什么？大家有谁知道呢？

安捷伦液相色谱-柱后衍生测氨基甲酸酯类农药，用的是NY/T761方法，有做过的同行么。流动相的设置如何优化

二、柱后衍生化：　　柱后衍生化是指先将被测物分离，再将从色谱柱流出的溶液与衍生化试剂在线混合，生成可检测的衍生物，然后导入检测器。按生成衍生物的类型可分为紫外可见光衍生化、荧光衍生化、拉曼衍生化和电化学衍生化等。　　1、紫外可光见衍生化：　　（1）紫外衍生化是指将紫外吸收弱或无紫外吸收的有机化合物与带有紫外吸收基团的衍生化试剂反应，使之生成可以用紫外检测的化合物。如胺类化合物容易与卤代烃、羰基、酰基类衍生试剂反应。　　（2）可见光衍生化有两个主要的应用：一是用于过渡金属离子的检测，将过渡金属离子与显色剂反应，生成有色的配合物、螯合物或离子缔合物后用可见光检测；二是用于有机离子的检测，在流动相中加入被测离子的反离子，使之形成有色的离子对化合物后，分离检测。　　2、荧光衍生化：　　荧光衍生化是指将被测物与荧光衍生化试剂反应后生成具有荧光的物质进行检测。有的荧光衍生化试剂本身没有荧光，而其衍生物却有很强的荧光。衍生化技术不仅使高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱仪[/color][/url]分析体系复杂化，而且需要消耗时间，增加分析成本，有的衍生化反应还需要控制严格的反应条件。因此，只有在找不到方便而灵敏的检测方法或为了提高分离检测的选择性时，才考虑用衍生化技术。

高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱仪[/color][/url]的衍生化技术衍是指将用通常检测方法不能直接检测或检测灵敏度比较低的物质与某种试剂（即衍生化试剂）反应，使之生成易于检测的化合物的过程。按衍生化方法可分为柱前衍生化和柱后衍生化。　　一、柱前衍生化：　　柱前衍生化是指将被测物转变成可检测的衍生物后，再通过色谱柱分离。这种衍生化可以是在线衍生化，即将被测物和衍生化试剂分别通过两个输液泵送到混合器里混合并使之立即反应完成，随之进入色谱柱；也可以先将被测物和衍生化试剂反应，再将衍生物作为样品进样；也可以在流动相中加入衍生化试剂，进样后，让被测物与流动相直接发生衍生化反应。

色谱衍生化技术概述 色谱衍生化技术指当使用色谱分离原理检测化学成分，被检测目标成分的理化性质（如沸点、极性、吸光性）不便分离检测时，经常采用衍生化技术，改变其理化性状，达到可以使用色谱仪检测的目的。 化学衍生法指借助化学反应将待测组份接上某种特定基团，从而改善其检测灵敏度和分离效果的方法。利用化学衍生反应达到改变化合物特性的目的，使其更适合于特定分析的过程，在仪器分析中被广泛应用。气相色谱中应用化学衍生反应是为了增加样品的挥发度或提高检测灵敏度，而高效液相色谱的化学衍生法是指在一定条件下利用某种试剂(通称化学衍生试剂或标记试剂)与样品组份进行化学反应，反应的产物有利于色谱检测或分离。一般化学衍生法主要有以下几个目的：提高样品检测的灵敏度；改善样品混合物的分离度；适合于进一步做结构鉴定，如质谱、红外或核磁共振等。进行化学衍生反应应该满足如下要求：对反应条件要求不苛刻，且能迅速、定量地进行；对样品中的某个组份只生成一种衍生物，反应副产物及过量的衍生试剂不于扰被测样品的分离和检测；化学衍生试剂方便易得，通用性好。 衍生化常用的反应有酯化、酰化、烷基化、硅烷化、硼烷化、环化和离子化等。虽然气相色谱已有许多衍生化方法，但它有一个致命的缺点是不能用于热不稳定化合物。此外，对于一些有复杂基质的实际样品，除分离上的困难外，还容易污染进样器和损坏柱子。 衍生化反应从是否形成共价键来说，可分为两种：标记和非标记反应。标记反应是在反应过程中，被分析物与标记试剂之间生成共价键；所有其它类型的反应，如形成离子对、光解、氧化还原、电化学反应等都是非标记反应。另一种区分衍生化反应是从衍生反应的场所来分，有柱前衍生化(pre-columnderivatization)，柱上衍生化(on-columnderivatization)和柱后衍生化(post-columnderivatization)三种。从是否与仪器联机的角度来分有：在线(on-line)、离线(off-1ine)和旁线(at-line)(自动化)三种。目前在HPLC中以离线的柱前衍生法(简称柱前衍生法)与在线的柱后衍生法(简称柱后衍生法)使用居多，旁线衍生化方法是发展方向。 柱前衍生法和柱后衍生法各有其优缺点。柱前衍生法的优点是：相对自由地选择反应条件；不存在反应动力学的限制；衍生化的副产物可进行预处理以降低或消除其干扰；容易允许多步反应的进行；有较多的衍生化试剂可选择；不需要复杂的仪器设备。缺点是：形成的副产物可能对色谱分离造成较大困难；在衍生化过程中，容易引入杂质或干扰峰，或使样品损失。柱后衍生法的优点有：（1）形成副产物不重要，反应不需要完全，产物也不需要高的稳定性，只需要有好的重复性即可；（2）被分析物可以在其原有的形式下进行分离，容易选用已有的分析方法。缺点是：（1）对于一定的溶剂和有限的反应时间来说，目前只有有限的反应可供选择；（2）需要额外的设备，反应器可造成峰展宽，降低分辨率。 衍生化试剂很多,简单的说:它能帮你将不能分析的样品通过衍生化试剂反应转化为可分析的化合物.衍生化试剂比如有:烷基化试剂、硅烷化试剂、酰化试剂类、荧光衍生化试剂、 紫外衍生化试剂、苯甲酰氯为衍生化试剂、羟基衍生化试剂 、 手性衍生化试剂、氨基衍生化试剂、气相色谱和液相色谱中常用的柱前衍生化方法、、固相化学衍生化法.高效液相色谱法有甲醛与2，4－二硝基苯肼（DNPH）反应生成腙，衍生化产物醛腙用有机溶剂萃取富集后，在一定温度下蒸发、浓缩，再以甲醇或乙腈溶解或稀释，最后进行色谱测定。柱后衍生装置的特点解析及概述柱后衍生装置是一种采用衍生反应原理对被测物体进行反应来通过改变物理化学性质后来进行检测的一种装置。柱后衍生装置在对柱后衍生装置的性能以及价格、外形等进行打造后特点变个更加便于操作者使用，传统的柱后衍生装置的特点在于更容易快速设置、可以进行外部控制等优特点，当前常被用于一些常规的分析应用当中。 柱后衍生装置特点之一在于操作中可以更快速且，且易于设置，在操作中只需要连接一个自色谱柱的入口和一个出口就可以安装完毕；在采用模块化的设计之后可以选择单或双反芯，可以同时进行加热等系列的反应，同时也降低了接头及管路连接更加方便用户使用。 其次在柱后衍生装置的控制面板中较为人性化的设计使得柱后衍生装置反应器面板中显示的反应芯片可以显示当前 的实际温度，衍生泵面板中可以显示每种试剂的压力限以及流速、常规压力；对于衍生装置来说其外部的控制也显得尤为重要，装置的流速以及温度大多可以通过前 控制面板来进行控制，除此之外还可以通过RS232来实现系列的外部控制，而对于模块反应器来说最有需要的还是连接2个连接头来更换反应器的反应芯，新型 设计的反应芯可以很好的减低柱后衍生装置峰值的扩散.版面相关的帖子汇总：1、【晒仪器】 晒仪器衍生——原理故障种种2、【第三届原创大赛】氨基酸衍生后样品溶液溶剂效应问题3、【分享】柱前衍生和柱后衍生4、光化学柱后衍生器5、新技术—光化学柱后衍生器6、HPLC柱后衍生装置连接真实图欢迎大家补充！！！http://simg.instrument.com.cn/bbs/images/default/em09505.gif

[font=微软雅黑, &][size=15px]通过柱后衍生来提高方法的特异性和检测限，我应该怎么做呢？[/size][/font][font=微软雅黑, &][size=15px][font=微软雅黑, &]这需要好多事情，第一，你需要找到和你目标化合物快速反应的物质，为了和液相方法兼容，你如果想要一个好的结果，那反应时间要小于5min，甚至要小于2min，第二，反应需要和液相流动相兼容，特别是如果你为了分离而使用时，反应需要和水介质兼容，这个在实际例子中不常用，第三，反应产物需要在通用的液相检测器上面很容易检测出，为了获得低的检测限，反应产物需要在没有其他基质干扰情况下检测出，这种条件下的样品的吸收检测一般在可见波长或者荧光检测，第四，这种检测要对你目标物质有专属性，例如，胺的衍生可以提高世界上所有胺的检测，但是你只需检测出你分析的物质里面所含的胺，这个是你解决的问题最好的方式，[/font][/size][/font][size=15px][font=微软雅黑, &][size=15px]确实，这需要好多的要求，我想知道里面的一点点，为什么完成需要如此短的反应时间？[/size][/font][/size][font=微软雅黑, &][size=15px][font=微软雅黑, &]刚刚给你了好几个知识点，这也以为着里面有好多灵活可调节的地方，让我们思考一下，哪个是必须的，液相分离需要不断的流动相，不断的流动相会在柱后和反应试剂混合，而这个混合物需要储存在某个地方一直到反应到我们想要的物质，这个方式通常是在流动中进行，流动相的一般流速是1 ml/min，你的反应试剂也是同样的流速，如果你反应5min，你需要在你的检测器和柱子中间储存10ml混合物，标准9/1000毛细管大约是250米，即使你使用的毛细管是0.5mm，你依然需要50m的管路，这个是非常大的管路，你同时也需要担心管路的扩增，如果你使用run-of-the-mill管路，那管路的扩展需要毫升或者更多，在4.6 mm × 150 mm的色谱柱上，保留系数为2的峰宽仅为0.2 ml，色谱柱中分辨良好的峰会相互稀释和丢失。因此，在我们的例子中，柱外带扩展将破坏你在你的高性能高效液相色谱柱中实现的分离。现在你明白为什么要缩短反应时间了吧[/font][/size][/font][font=微软雅黑, &][font=微软雅黑, &][size=15px]好的，我明白了，你刚刚说使用一个普通的油管，这个是什么？我有其他的选项吗？[/size][/font][/font][font=微软雅黑, &][font=微软雅黑, &][size=15px]我指的是一根直的管子或简单的线圈，如果你使用特氟龙的管路，你可以做一些事情来防止带扩散。你可以“编织”它。[/size][/font][/font][font=微软雅黑, &][font=微软雅黑, &][size=15px]什么？编织一节特氟龙管路？[/size][/font][/font][font=微软雅黑, &][font=微软雅黑, &][size=15px]你没有听错，这是指一种将受控变形模式应用到油管(1.2.3)，这种控制模式在油管内产生二次流动，提供径向混合。二次流极大地减小了油管内的带状扩张。在精心设计的几何变形油管中，HETP可能比直管小100倍甚至1000倍。这种效果在压力下会有一点损失，这都不是事了。[/size][/font][/font][font=微软雅黑, &][font=微软雅黑, &][size=15px]关于编织技术的重要部分是流动路径(1)的变形模式。一个人想要实现一个恒定的转移的离心力的方向那么就需要在作用在油管中的流动上，并创建径向混合。就像三维过山车一样。最好的配置有0.5cm左右的HETP，从而在50m的油管中产生约10000个板。这种高性能的结构使柱后衍生化与HPLC分离兼容，并很大程度上消除了上述的带扩散问题。[/size][/font][/font][font=微软雅黑, &][font=微软雅黑, &][size=15px]特氟龙因为其他的原因也是一个很好的选择，实际上它可以直接接触你可以想到的所有反应介质和流动相，并且它还有好的热稳定性，为了加速反应，你也可以提高工作温度，其他一些你想使用的塑料管路在这种情况下会变软，钢或者铜的管路也是你柱后衍生的另外的选择，它们也可以直接接触你衍生反应过程中的中间物质，然而，把他们编织成最佳形式可不是简单的事情，。与特氟龙管相比，你将会降低带扩展性能。[/size][/font][/font][font=微软雅黑, &][font=微软雅黑, &][size=15px]让我们讨论一下反应条件，我应该考虑哪些呢？[/size][/font][/font][font=微软雅黑, &][font=微软雅黑, &][size=15px]首先，所有的反应必须是你满足你的需要，它必须有足够的特异性和检测灵敏度，大量的反应早已开发完成了，这本书里面已经有详细的介绍了（Handbook of Derivatization Reactions for HPLC），这个会帮助你学习到一些你需要的基本知识，你需要探索感兴趣的分析对象和它们的矩阵之间的差异，你的反应和检测方案就越具体。你能忍受的基质干扰越多同时，感兴趣的化合物的反应应该与没有发生反应的背景有显著不同。这就是为什么大多数已发表的反应方案会导致颜色或荧光的形成[/size][/font][/font][font=微软雅黑, &][font=微软雅黑, &][size=15px]下一步，你想要缩短反应时间，慢的反应和缩短反应时间两个是相互矛盾的，对于大多数实际的例子，反应时间都不会超过5min，你可以通过提高温度或者增加反应试剂的浓度来加速大部分反应，而反应不需要到达终点，由于反应过程的综合影响和管路的扩展，你需要在反应终点前获得检测器的最大反应，然而，你需要找到试剂浓度或温度的轻微的变化不会影响响应的条件。在反应模式中找到一个平台期通常并不困难，通常我们可以计算得到，但对于大多数实际目的来说，一些实验将提供正确的答案。[/size][/font][/font][font=微软雅黑, &][font=微软雅黑, &][size=15px][/size][/font][/font]

??液相色谱使用最多的是紫外检测器，为了使一些没有紫外吸收或紫外吸收很弱的化合物能被紫外检测器检测，往往通过衍生化反应在这些化合物的分子中引入有强紫外吸收的基团：2,4-二硝基苯、苯甲基、对硝基苯甲基、3,5-二硝基苯甲基、苯甲酸酯、对甲苯酰、对氯苯甲酸制、对硝基苯甲酸酯、对甲氧基苯甲酸酯、苯甲酰甲基、对溴苯甲酰甲基，这些衍生物可被紫外检测器检测。??大多数紫外衍生反应来自经典的光度分析和有机定量分析，新的衍生化反应和衍生化试剂是随液相发展而发展的，这些反应的原理都来自有机合成，所以就要求操作者对有机合成有所了解。但是，由于柱前衍生化是为色谱分析准备样品，处理样品的量小（mg级），所用的小型和微型反应器皿又不同于常量的有机合成，而是类似于近年来发展的微量有机合成。紫外衍生化反应要选择反应产率高、重复性好的反应。过量试剂和试剂中的杂质如果干扰下一步的色谱分离和检测，则在色谱进样前要进行纯化分离。还要注意反应介质对紫外吸收的影响。??（1）苯甲酰化反应：苯甲酰氯及其衍生物--对硝基苯甲酰氯、3,5-二甲基苯甲酰氯和对甲氧基苯甲酰氯都可以同胺、醇和酚类化合物反应，生成紫外吸收的苯甲酸酯类衍生物；??（2）2,4-二硝基氟代苯（DNFB）的反应：DNFB与醇的反应产率很低，但可与大多数伯胺、仲胺和氨基酸反应，生成强紫外吸收的苯胺类衍生物；??（3）苯基异硫氰酸酯（PITC）的反应：PITC可与氨基酸反应，生成苯基己丙酰硫脲衍生物--PTH氨基酸；??（4）苯基磺酰氯的反应：苯基磺酰氯可与伯胺和仲胺反应。??甲苯磺酰氯可与多氨基化合物反应，不仅能提高它们的检测灵敏度，还可改变HPLC的分离度。??（5）有机酸的酯化反应：有机酸很容易与酰溴基反应生成酯，常用的酰溴基试剂有苯甲酰溴、甲氧基苯甲酰溴、对溴基苯甲酰溴和对硝基苯甲酰溴等；??酯化反应在极性溶剂（如乙腈、丙酮或四氢呋喃）中进行，有时需要加催化剂，如冠醚加钾离子、二乙胺或N-二异丙基胺等。??（6）羰羟基化合物的反应：醛类和酮类中的羰基可与2,4-二硝基苯肼（DNPA）反应，反应在弱酸性条件下进行，生成苯腙衍生物。??羰基化合物还可以与对甲基苄基羟胺（PNBA）在碱催化下反应，生成有强紫外吸收的肟。