随着全球“回归自然”的热潮,对天然植物活性成分的研究开发也就成了当前医药、食品、化妆品等领域的热点,基于天然产物资源开发的产业已被认为是世界上最有前途、最具生机的行业之一。从天然植物资源中分离天然活性成分具有很多的困难和问题,因为大多数植物资源中所含有的活性成分含量低,且存在于复杂的介质中,色谱分离法一直是天然产物成分分离的常用的方法,例如有柱色谱法和制备型高效液相色谱法等,但是,物质在固态填充物的不可逆吸附和变性是固相色谱所遇到的共同问题。另外,从分析到制备规模的放大,所需费用也相当昂贵。逆流色谱是一种无需任何固定相支撑体的液-液分配色谱分离技术,不存在对样品组分的吸附、变性、失活、拖尾等不良影响,节省填充材料和溶剂消耗;它的操作简便,重现性好,分离量较大,粗提物样品可以直接进样分离。目前已有许多成功应用的实例作为参考,所以在操作时溶剂系统的变换更为方便、快捷。对天然产物的分离纯化,是高速逆流色谱非常适合的应用领域。我国是世界上最早将逆流色谱技术应用于天然植物和中草药成分分离纯化的国家。早在1980年,张天佑教授就自行研制出了国产的逆流色谱仪,并开创了在天然植物和中草药领域的应用研究工作 。此后的20多年中,越来越多的中国科技工作者利用我国的资源优势和技术优势,在这一技术领域和应用领域做出了成绩和贡献。 不同种类天然产物的分离虽然已有文献总结,但系统性和更新程度还有待完善。山东省科学院分析测试中心王晓研究员的研究团队以在天然产物分离方面取得的优异成绩为基础,对不同种类的天然产物分离正在进行全面的最新的总结。不日,最新的不同种类天然产物的分离总结及独有的相关见解将面世。
如题,想买高速逆流色谱,不知道国产高速逆流色谱的易用性耐用性怎么样?各位高手有什么好的建议?比如TBE-1000A制备色谱仪,TBE-20A分析型高速逆流色谱仪大概多少钱?
高速逆流色谱仪 高速逆流色谱仪(HSCCC) 逆流色谱技术是一种应用在化学分离分析领域中的技术,其原理是用充满两相溶剂的螺旋管作为分离单元在离心力场中按一定规律运动,当被分离的混合物通过分离单元时,由于不同物质在两相溶剂中具有不同的分配特性将会产生物质的分离排列。 一般逆流色谱仪中,分离单元不仅围绕公转中心做公转运动,同时也做自转运动,呈行星式运动状态,分离柱数与流通管内径参数为固定不易改变,无法调节分离柱容积和更换分离柱,分离量受到严格限制。 北京艾美林科技有限公司生产的高速逆流色谱仪(EMC-500A)为张天佑教授的最新专利,该产品优于以往高速逆流色谱仪,无中间轴提高了贝塔值,提升了分离效率。 以往的多分离柱高速逆流色谱仪 (ZL00207386.2)为一种三分离柱的逆流色谱仪,该仪器各分离柱之间的流通管通过管道连接器串联,溶剂需流经每一分离柱的流通管,实验时间过长,且分离柱的更换过于专业,易予损坏。由于单柱、双柱、三柱、多柱的逆流色谱仪均带有中间轴,无法使分离柱的β值达到最大值(分离柱自转半径r同公转半径R的比值r/R)因此不能实现高效率的分配分离。 艾美林EMC-500A高速逆流色谱仪是一种螺旋管分离单元,不仅围绕公转中心运转也做自转运动地体积小,重量轻,多分离柱串并联的可拆卸组装的多功能大β值高效逆流色谱仪。 EMC-500A高速逆流色谱仪取消了传统的贯通中心的中间轴。而在自转轴上装设的螺旋管分离柱组件的β值即分离柱自转半径r与公转半径R的比值r/R可以从0.1到1之间选取,本产品β值≥0.85。加之可通过齿轮传动比的变化实现不同转速,由此实现高效率的分配分离。 EMC-500A高速逆流色谱仪有四个容积相同的螺旋管分离柱分别安装在两个旋转柱上,每个旋转柱由两个容积相同的螺旋管分离柱单元组合而成,分离柱同引入、引出的流通管的接口都是可拆卸的活动接头。两个螺旋管分离柱通过接头和引入、引出管,引至仪器外部的接点,可以用短管将多个分离柱单元串连或并连起来,形成不同的柱容积和柱长度的连接,以实现一机多用
寻找高速逆流色谱仪器的使用者和专家大家共同探讨高速逆流色谱使用过程中的各种问题提供您使用的仪器厂牌和型号,可以帮助有问题的网友和您联系交流,分享经验和心得而且还有积分奖励,欢迎正在使用的童鞋积极参与!高速逆流色谱法帖子合集:高速逆流色谱法介绍:高速逆流色谱介绍---前言http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20101027/2887073/高速逆流色谱介绍---概述http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20101027/2887430/高速逆流色谱介绍---分离原理及仪器http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20101027/2888113/高速逆流色谱介绍---工作步骤http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20101027/2887460/高速逆流色谱介绍---工作方法http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20101027/2888124/高速逆流色谱介绍---pH-区带精制逆流色谱http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20101027/2888122/无需更换分离柱的 高速逆流色谱技术原理等资料http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20070817/945368/高速逆流色谱http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20060521/431751/大家来讨论一下高速逆流色谱技术http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20071025/1033035/什么是高速逆流色谱http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20080805/1397257/高速逆流色谱http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20101206/2980199/技术问题:请教高速逆流色谱http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20080708/1346290/关于高速逆流色谱仪漏液问题http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20110226/3145035/高速逆流色谱固定相流失严重如何处理?http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20100119/2355336/探讨一下高速逆流色谱进行样品前处理的可能http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20081226/1666685/应用文章:好文章“高速逆流色谱研究进展”http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20070716/910437/高速逆流色谱在植物有效成分分离中的应用http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20080805/1397257/高速逆流色谱(HSCCC)应用文献全文 免费下载http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20060810/513106/高速逆流色谱法分离纯化丹参并尝试制订中药指纹图谱http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20040105/24582/高速逆流色谱介绍---天然产物资源分离纯化和制备中的应用-生物碱的分离http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20101121/2943174/高速逆流色谱介绍---天然产物资源分离纯化和制备中的应用-黄酮成分的分离http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20101201/2968218/高速逆流色谱法在天然药物中的应用及其研究进展http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20071028/1036669/
pH-区带精制逆流色谱(pH-Zone-Refining Countercurrent Chromatography)是Ito等1994年在应用HSCCC分离纯化溴乙酰三碘甲腺氨酸(BrAcT3)时发现的,它是在普通的高速逆流色谱仪器的基础上,通过对分离样品所用的溶剂系统的组成的调配,采用化学的手段,使样品组分的色谱分离过程增添了按pH区带聚集的特征,同时,使组分的洗脱过程表现为类似置换(顶替)色谱(Displacement Chromatography)的洗脱过程,因此,它的色谱图不再是高斯分布的色谱峰形系列,而成为按pH值的大小排列的边界陡削的矩形区带系列,其结果是能把相同容积的逆流色谱仪器的分离制备量提高数倍乃至十倍。 pH-区带精制逆流色谱的分离原理,以分离酸性物质为例,在分离柱内,有机相固定相占据上半部分的空间,水溶性流动相占据下半部分空间。基于其非线性等温线的作用,保留酸形成了一个陡峭的缓行边界。该边界在柱中移动的速度比流动相慢,当酸性被分离物出现在流动相中时,由于低的pH值而形成了疏水的质子化形式,随后,它进入了有机相固定相。随着陡峭保留边界的前移,分离物将暴露在一个较高的pH的位置,这时,分离物会失去质子并且转移到水溶性的下相中。在水溶性流动相中,被分离物快速迁移穿过陡峭的保留边界,进而重复上述的循环。因此,被分离物总是被限制在陡峭的保留边界周围的狭窄区域,并且伴随着陡峭的保留酸边界洗脱成一个尖峰。被分离物的流出,按区带的pH值大小密排成顺序,而每一个区带的pH值则是由被分离物的电离常数pKb 值及亲水性所决定,可以表达为以下关系式: pHzone= pKa+log], 式中,Kd为分配率 (反映被分离物的亲水性的强弱);K[
高速逆流色谱法分离纯化丹参并尝试制订中药指纹图谱顾铭* 欧阳藩 苏志国(中国科学院过程工程研究所生化工程国家重点实验室,北京,100080)摘要 用国产高速逆流色谱(HSCCC)分离纯化中草药——丹参,选用正己烷-乙醇-水体系,固定相保留率达到78.8%。采用分步洗脱,3个产地丹参各分离得到12个洗脱组分,经高效液相色谱仪和紫外光谱仪检测证明3张HSCCC洗脱图谱中对应洗脱峰为同一组分。HSCCC洗脱图谱不包含非共有峰,并且对应洗脱峰保留时间的相对标准偏差RSD3%,符合国家标准关于制订指纹图谱方法学考察资料的技术参数。因此,HSCCC作为制订指纹图谱的方法之一具有可行性。关键词 高速逆流色谱(HSCCC),中药指纹图谱,丹参中图分类号 R917仪器TBE-300半制备型高速逆流色谱仪(深圳同田生化技术有限公司,中国)。聚四氟乙烯管缠绕在3个水平轴上形成螺旋管(管直径2.6mm,分离体积300mL),进样圈20mL。高速逆流色谱配备了柱塞式泵(S系列,北京圣益通技术开发有限责任公司,中国),紫外检测仪(8823A,北京新技术应用研究所,中国),记录仪(3057型,四川记录仪器厂,中国)。
高速逆流色谱在植物有效成分分离中的应用国家自然科学基金资助项目袁黎明(云南师范大学化学系 昆明 650092)傅若农(北京理工大学化工与材料学院 北京 100081)张天佑(北京市新技术应用研究所 北京 100035)高速逆流色谱(High-speed Countercurrent Chromatography,简称HSCCC)是由美国国家医学院Yiochiro Ito博士于1982年首先开始的。到目前为止,此项技术已用于生物化学、生物工程、医学、药学、天然产物化学、有机合成、化工、环境、农业、 食品、材料等领域。开展此项技术研究的科学家遍及美国、日本、中国、俄罗斯、法国、英国、瑞士等地。高速逆流色谱具有两大突出优点:1.聚四氟乙烯管中的固定相不需要载体,因而消除了气液色谱中由于使用载体而带来的吸附现象,特别适用于分离极性物质和具有生物活性的物质2.由于其与一般色谱的分离方式不同,使其特别适用于制备性分离。最近的研究结果表明:一台普通的高速逆流色谱仪一次进样可达几十毫升,一次可分离近10g的样品。因此,在80年代后期被广泛地应用于植物化学成分的分离制备研究,本文就其在这方面的成果作一综述。 HSCCC在天然产物中的分离制备是很成功的。既可分离又可定量,进样量可从毫克级到克级,进样体积可从几毫升到几十毫升;不但适用于非极性化合物,而且适用于极性化合物的分离;它可用于天然产物粗提物的去除杂质,也可用于最后产物的精制,甚至直接从粗提物一步纯化到达纯品;当加快仪器转速如1800r/min,其分离速度可与HPLC媲美,用于天然产物化学成分的分离始于1985年,到1988年、1989年达到一个高潮,发表了大量的文章,目前处于平稳发展阶段。1994年HSCCC创始人Ito又发展了pH-zone-refining CCC,使HSCCC的进样量又大大地前进了一步,能方便地分离克量级的样品,使其更加有利于天然植物的分离制备。因此,我们可以说HSCCC已为天然植物的分离制备开辟了一个十分广阔的新天地。
高速逆流色谱法分离纯化丹参并尝试制订中药指纹图谱顾铭* 欧阳藩 苏志国(中国科学院过程工程研究所生化工程国家重点实验室,北京,100080)摘要 用国产高速逆流色谱(HSCCC)分离纯化中草药——丹参,选用正己烷-乙醇-水体系,固定相保留率达到78.8%。采用分步洗脱,3个产地丹参各分离得到12个洗脱组分,经高效液相色谱仪和紫外光谱仪检测证明3张HSCCC洗脱图谱中对应洗脱峰为同一组分。HSCCC洗脱图谱不包含非共有峰,并且对应洗脱峰保留时间的相对标准偏差RSD3%,符合国家标准关于制订指纹图谱方法学考察资料的技术参数。因此,HSCCC作为制订指纹图谱的方法之一具有可行性。关键词 高速逆流色谱(HSCCC),中药指纹图谱,丹参中图分类号 R917仪器TBE-300半制备型高速逆流色谱仪(深圳同田生化技术有限公司,中国)。聚四氟乙烯管缠绕在3个水平轴上形成螺旋管(管直径2.6mm,分离体积300mL),进样圈20mL。高速逆流色谱配备了柱塞式泵(S系列,北京圣益通技术开发有限责任公司,中国),紫外检测仪(8823A,北京新技术应用研究所,中国),记录仪(3057型,四川记录仪器厂,中国)。*通讯作者。Tel: 86-10-82627061;Fax: 86-10-62558174;E-mail: rainbow_gm@sina.com
[em01] 书 名 高速逆流色谱分离技术及应用 定 价 48元 作 者 曹学丽 开 本 16开 出 版 社 化工出版社 总 页 数 I S B N 7-5025-6518-3 加入日期 2005-4-28 高速逆流色谱(HSCCC)技术正在发展成为一种备受关注的新型分离纯化技术,已经广泛应用于生物医药、天然产物、食品和化妆品等领域。本书详细介绍了HSCCC的理论、技术与应用,全书共分15章,第1~4章着重阐述逆流色谱(CCC)基础知识以及HSCCC分离机理、工作方法及溶剂选择策略;第5~8章主要介绍近年来HSCCC发展过程中形成的新技术、新方法,包括分析型高速逆流色谱、双向逆流色谱、pH区带精制逆流色谱、正交轴逆流色谱;第9~15章对逆流色谱技术(主要是HSCCC技术)在各个领域的应用研究成果进行了报道,包括HSCCC在天然植物有效成分、海洋生物活性成分、抗生素的分离中的应用,双水相逆流色谱、离心沉淀色谱在蛋白质等分离中的应用,逆流色谱在手性分离和天然药物工业中的应用。 可供天然产物、中药、药品、食品、化妆品及生物工程等领域的研发人员、技术(分析、分离等)人员使用,也可供高等院校相关专业师生参考。" "第1章逆流色谱基础 11逆流色谱的概念 12逆流色谱的发展 121逆流分溶法 122液滴逆流色谱 123离心分配色谱和螺旋管式逆流色谱 124高速逆流色谱和正交轴逆流色谱 125pH区带精制逆流色谱 126离心沉淀色谱 127螺线形圆盘柱式高速逆流色谱 128逆流色谱的发展趋势 13现代逆流色谱仪器体系 131流体静力学平衡体系 132流体动力学平衡体系 133两种体系的逆流色谱仪的比较 14逆流色谱的基本色谱理论 141溶质的保留 142保留因子和选择性 143分离度 15逆流色谱和液相色谱的比较 151理论塔板数的工作范围 152逆流色谱的制备性分离 153逆流色谱和液相色谱的互补性 参考文献 第2章高速逆流色谱分离机理 21重力场中旋转螺旋管内流体动力分布 22不用旋转密封接头的流通式离心分离仪 23同步行星式运动旋转螺旋管内流体动力分布 24高速逆流色谱的单向流体动力平衡机理 25高速逆流色谱仪器系统 26相分布图 27影响相分布的物理参数 271β值的影响 272溶剂体系的物理特性和分层时间 273温度对分层时间的影响 参考文献 第3章高速逆流色谱工作方法 31溶剂体系的准备 311溶剂体系的选择原则 312几种常用的溶剂体系选择方法 313溶剂体系的平衡 314温度的影响 32柱系统的准备 33样品溶液的准备和进样 34洗脱方式 341梯度洗脱 342双向洗脱 343清空柱子 35检测 351紫外可见光检测器 352蒸发光散射检测器 353傅里叶红外光谱检测器 354薄层色谱检测器 36高速逆流色谱的优点 参考文献 第4章溶剂体系的选择策略 41溶剂体系的物理参数 411Hildebrand溶解度参数 412Snyder吸附溶剂强度参数 413Rohrschneider和Snyder极性参数 414Reichardt极性指数 415HSCCC中应采用的极性指数 42三元溶剂体系 421三元相图 422三元相图的类型 423三元溶剂体系的选择策略 43多元溶剂体系 431Ito方法 432Oka方法 433HBAW方法 434ARIZONA方法 435扩展的“ARIZONA”方法 436乙基乙二醇二甲基醚体系 437丙酮溶剂系列 438Abbott方法 44一种实用性的溶剂选择思路 参考文献
高速逆流色谱技术是现代分离科学领域的一个新颖的技术分支,是一种不用任何固态填料的液-液分配色谱技术,物质的分离依据其在两相中分配系数的不同而实现的,它完全排除了固态载体对样品的不可逆吸附、沾染、失活等影响,具有无耗材、分离效率高、制备量大、回收率高、重现性好等优势,被大量用于天然产物化学成分的分析和制备分离。目前已广泛应用于生物医药、天然产物、食品和化妆品等领域,尤其是在我国生物医药以及中药现代化等领域的应用俞来俞广。
请问有没有和TBE-300高速逆流色谱仪配套用的空气压缩机?请大家推荐一下,谢谢!
高速逆流色谱高速逆流色谱仪(High-speed Countercurrent Chromatography,简称HSCCC),于1982年由美国国立卫生院Ito博士研制开发的一种新型的、连续高效的液液分配色谱技术.
高速逆流色谱原理 高速逆流色谱技术(HSCCC)是一种不用任何同态载体的液.液色谱技术,其原理是基于组分在旋转螺旋管内的相对移动而互不混溶的两相溶剂间分布不同而获得分离,其分离效率和速度可以与HPLC相媲美。HSCCC分离效率高,产品纯度高;不存在载体对样品的吸附和污染;制备量大和溶剂消耗少;操作简单,能从极复杂的混合物中分离出特定的组分。 HSCCC应用于天然产物的分离可实现:(1)制备高纯度的药用成分对照品和必需控制的杂质成分;(2)配合活性跟踪与入药部位的设计,逐级分离制备活性部位或活性成分;(3)中药材和中药方剂指纹的建立,提供更丰富的信息和数据;(4)进行中试批量生产和工业生产。如中科院工程研究所探索了利用HSCCC制订中药指纹图谱的方法,以丹参原药材为模式植物,初步建立了丹参的HSCCC指纹图谱。该技术有望成为中药有效成分质量标准研究的一种新方法及中药生产的一种新型分离技术 转自:百度知道
各位大侠,近期小弟不小心将空气抽进高速逆流色谱仪的恒流泵中,该恒流泵是GE公司的,不知道应该如何处理,请不吝赐教啊
在各种分离技术之中,高速逆流色谱具有其自身的特点和应用价值。它属于现代色谱技术,具有高效、连续、广谱的特征;它是一种液-液分配色谱技术,完全排除了固态相的影响,不存在不可逆吸附、样品组分损失、被沾染、失活等固-液色谱技术中可能出现的问题,具有结果物纯净、制备量大、技术成本低等优点;它是色谱家族中较年轻的成员,其技术机理的研究、应用技术的开发、实用领域的拓展等方面都存在较大的发展空间。关于高速逆流色谱技术的专著不算多。1991年,张天佑教授发表了我国第一部这方面的书《逆流色谱技术》(北京科技出版社出版发行),向国人介绍了这一技术的基本原理和设备机理。那时,国内外对这一较新的分离技术的研究和了解还不多,因此,该书涉及的应用领域和实例还很有限。此后,虽然相关的研究论文渐渐出现,也有一些汇编、手册、专著纳入了这项技术的内容,但是集中的专题论著依然缺乏。自2002年我们在中国北京主持召开第2届国际逆流色谱技术会议,并创导在天然产物领域推广应用此项技术之后,国内外的研究与应用工作出现了长足发展的局面。2005年,曹学丽博士编著了《高速逆流色谱分离技术及应用》一书(化学工业出版社出版发行),对于这项技术的推广应用起到了很好的作用,特别是编入了一些应用实例,提供给读者实际可行的借鉴。现在出版的《高速逆流色谱技术》一书,则是希望进一步总结逆流色谱技术的发展历程和研究成果,进一步阐述这项技术的内涵与特质,在归纳较丰富的应用研究成果的同时,讨论了关于应用技术和使用方法方面的问题,希望能为读者提供较为实用的帮助。国外的相关专著主要有:《High-Speed Countercurrent Chromatography》(John Wiley & Sons, New York, 1996. Volume 132 in The Series of Mono-Graphs on Analytical Chemistry and Its Applications),《Countercurrent Chromatography-The Support-Free Stationary Phase》(Elsevier, Amsterdam, 2002. Volume 38 in Comprehensive Analytical Chemistry)。这些专著反映了各个时期逆流色谱技术的研究与应用的概貌和水平,张天佑教授参与了这些专著的编写工作,读者可以查阅参考。 近年来在逆流色谱应用方面成就显著的是山东省科学院分析测试中心的王晓研究员,在仪器的研发及改进、新型方法的的开发与应用、天然产物的提取及分离等方面成绩卓然,为逆流色谱的发展与应用做出了杰出的贡献。
(一)、高速逆流色谱系统的组成高速逆流色谱系统主要由溶剂泵、进样阀、色谱柱、检测器、色谱工作站以及馏分收集器组成。与普通高效液相系统相似,如果把HPLC的色谱柱部分用一台HSCCC螺旋管式离心分离仪替代,就可构成一台高速逆流色谱系统。由于HSCCC的柱系统是由在高速行星式运动的螺旋管内的两相互不相溶的液体构成,其中一相作为固定相,另一相作为流动相,待分离的物质根据其在两相中的分配系数的不同,在通过两相对流平衡体系的过程中实现分离。分离效果与所选择的两相溶剂系统、固定相与流动相的选择、仪器的运转参数(包括转速、转向)、洗脱的速度与洗脱方式、进样量与进样方式等多种因素密切相关。因此,在采用逆流色谱分离时,其操作方法和工作程序等方面都有独特之处。高速逆流色谱系统对所用的输液泵的要求要比HPLC低的多,通常柱系统所产生的压力要小于1MPa,所以一般的恒流泵即可满足要求,如上海同田生物技术公司生产的TBP系列双柱塞恒流泵,北京圣益通技术开发有限公司生产的S系列单柱塞恒流泵,在国产逆流色谱系统中经常使用。HSCCC分离过程可以连接多种检测器,进行在线检测,而最常用的是单波长或多波长的紫外-可见光检测器(UV-VIS)。也可以借用制备型液相的检测器(如二极管阵列检测器(PDA))。在HSCCC分离中,通常会因固定相的流失或气泡,造成色谱曲线出现毛刺。通常可以通过优化体系、控制流动相温度或在检测器的出口加一个细管来产生一定的反压、溶剂体系使用前超声处理,来抑制气泡的形成。 对于没有紫外吸收的样品,可以采用近年来发展起来的蒸发光散射检测器(evaparative light scattering detector, ELSD)进行在线检测。由于ELSD的检测对样品是破坏性的,所以在制备型CCC中要通过分流管进行分流。目前HSCCC-ELSD技术已经应用在皂苷等物质的分离。 质谱是近年来得到迅速发展和广泛应用的分析检测技术,它能够有效提供化合物的分子结构信息。现在已出现了HSCCC与电子电离质谱(EIMS)、化学电离质谱(CIMS)、快速原子轰击质谱
我对农残检测样品前处理不熟悉,但是学习了之后发现,回收率,溶剂和试剂消耗,以及操作的简便性等都是非常重要的影响因素。想与各位前辈们讨论一下,高速逆流色谱仪是否能在样品的前处理中起一定作用呢?高速逆流色谱是一种无固体载体的连续高效液液分配色谱分离技术,采用多层缠绕的螺旋管柱,由柱体的高速行星式运动产生的不对称离心力场实现两相溶剂体系的高效混合、分配及充分保留,形成连续流萃取,从而实现不同溶解分配系数的溶质在两相溶剂中的分离。由于避免了固相载体,从而排除了不可逆吸附等现象,理论上能够实现分离物质的完全回收。而且样品处理量可以大大超过固相萃取。成本低,操作也简单,回收率高。我觉得样品前处理过程中有可以取代固相萃取的。向前辈们请教,这个技术有没有可能用于畜牧产品,水产品,或者蔬菜水果的样品前处理或者精制过程呢?或者哪一位老师有兴趣进行一些创新性的研究?谢谢!
在节前的时候我使用的高速逆流色谱仪已经漏过一次了,打开主机箱检查后发现是盘管外的一根管子的喇叭口断裂导致的,之后重新做了喇叭口接入就好了。 节后回来第一次上机重复原来的实验,在泵入固定相的时候还没有问题,但开启转速泵入流动相的时候,我发现固定相的保留率非常小,远远小于我原来实验的结果。打开主机箱检查后发现漏液了,但这次我无法发现具体是什么地方漏液,而且漏液的直接结果是机器接上电源也无法启动了。 想请教下版内高手,我该怎么排查仪器问题?谢谢!
高速逆流色谱(High-speed Countercurrent Chromatography,简称HSCCC)是由美国国家医学院Yiochiro Ito博士于1982年首先开始的。到目前为止,此项技术已用于生物化学、生物工程、医学、药学、天然产物化学、有机合成、化工、环境、农业、 食品、材料等领域。开展此项技术研究的科学家遍及美国、日本、中国、俄罗斯、法国、英国、瑞士等地。高速逆流色谱具有两大突出优点:1.聚四氟乙烯管中的固定相不需要载体,因而消除了气液色谱中由于使用载体而带来的吸附现象,特别适用于分离极性物质和具有生物活性的物质。2.由于其与一般色谱的分离方式不同,使其特别适用于制备性分离。最近的研究结果表明:一台普通的高速逆流色谱仪一次进样可达几十毫升,一次可分离近10g的样品。因此,在80年代后期被广泛地应用于植物化学成分的分离制备研究,本文就其在这方面的成果作一综述。1 生物碱生物碱是植物中一类重要的化学成分,在植物中分布非常广泛,至少有50多科120属以上的植物中已证明有生物碱存在,已知的生物碱种类也至少在2000种以上。到目前为止,用高速逆流色谱研究天然产物化学成分也以生物碱的研究报道得最多。正丁醇:丙酮:水(8:1:10)曾用于从委内瑞拉的箭毒中分离马枯素和Panarine,样品进样达700mg;正丁醇:氯化钠(0.1mol/L)(1:1)的两相溶剂体系用于从Strychnos usambarensis(马钱科)的树干和树皮(3:7:5:5)在70min内以1800r/min的转速从粉防已干根的提取物中分离了粉防己碱、去甲粉防己碱和轮环藤酚碱;从小蔓长春花植物的叶子中用正己烷:乙醇:水(6:5:5)体系分离长春胺和长春辛;分别用正己烷:乙酸乙脂:乙醇:水(6:3:2:5)和正己烷:乙酸乙酯:甲醇:水(1:1:1:1)从红豆杉的粗提物中分离纯化了紫杉醇、cephalomannine、巴卡亭Ⅲ;以石油醚(bp.40~65℃):乙酸乙脂:甲醇:水(50:70:80:65)为两相体系从紫杉醇的混合物中分离得到了纯的紫杉醇和cephalomannine。有学者对粉防己的粗提物也进行了分离;从苦参总碱中分离了苦参碱和氧化苦参碱,从洋金花总碱中分离了莨菪碱、东莨菪碱及待定成分;从峨眉千里光粗碱中分离了金缘千里光碱、阔叶千里光碱和新阔叶千里光碱;从三尖杉总碱中分离异三尖杉酯碱、高三尖杉酯碱和三尖杉酯碱。氯仿:甲醇:水(5:4:3)体系曾用于感染了枝顶孢属内部寄生菌的睡眠草,分离得到了麦角生物碱。Ito于1994年用新型的pH区带提取CCC技术从Crinum moores的抽取物中进样3g得到了3个纯的生物碱,此技术是HSCCC的一个较大的突破,它使植物的分离提取每次很方便地就达到了克量级。2 黄酮类似物黄酮类似物是一类比较重要的植物化学成分,它包括黄酮、异黄酮、二氢黄酮、花色苷元、儿茶精和属于黄酮异构体的橙酮,以及由它们所衍生的各式各样的衍生物。用氯仿:甲醇:水(4:3:2)体系曾从芫花总黄酮中一次进样100mg分离得到了3'-羟基芫花素、洋芹素、木犀草素;从山楂叶粗提物中分离金丝桃苷、槲皮素、芦丁、牡荆素、异牡荆素;以氯仿:甲醇:水(33:40:27)体系,700r/min转速,在70min内从黄酮混合物中分离出橙皮素,四羟基黄酮和槲皮黄酮,并有效地利用了梯度洗脱技术;Vanhaelen等将HSCCC与HPLC相结合从500mg的Ginkgo biloba(银杏属)的叶子萃取物中一次分离出了7个黄酮苷,其以水为固定相,开始以乙酸乙酯为流动相,然后在流动相中逐渐添加异丁醇,到分离结束时乙酸乙酯与异丁醇之比为(6:4);Oka等以氯仿:甲醇:水(4:3:2)的体系在3500r/min下在8min内从See buckthourn的果实萃取物中分离得到了5个主成分,其分离速度完全可与HPLC相比较;还有学者也从大黄羟基蒽醌总苷元中分离了大黄酸、芦荟大黄素、大黄素、大黄素甲醚、大黄酚等;用正己烷:乙酸乙酯:甲醇:水(9:1:5:5)在1800r/min转速下在70min内从掌叶大黄的根茎中分离出大黄素甲醚、芦荟大黄酸、大黄酸、大黄酚和大黄素;将Epilobium parviflorum(柳叶菜属)的甲醇萃取物进样2g分离得到了槲皮苷、杨梅苷、异杨梅苷和没食子酸,两相系统为氯仿:甲醇:水(7:13:8)。Chen1992年利用氯仿:甲醇:水(4:3:2)的两相系统对5个黄酮类化合物进行了分离并进行了定量分析;Kapadia 1994年利用正己烷:乙酸乙酯:甲醇:水(1:4:2.5:2.5)从Garcinia Kola(藤黄属)种子中也分离出了多个双黄酮。
请问有人知道GS10A高速逆流色谱仪的线圈材料是PTEE吗?线圈的内径是多少?
在山东省科学院王晓研究员的带领下,我们课题组近日完成了高速逆流色谱分离生物碱的总结工作,其它活性成分的分离也将在今后的日子里随总结工作的完成而上传。全部工作完成后,会上传总结工作的word版。 生物碱是指一类绝大多数具有碱性、天然产的含氮有机化合物。主要分布于低等类群植物、裸子植物中,少数被子植物的单子叶和双子叶植物也有分布。在较常用的来源于植物的中药中至少有40多味中药中含有生物碱,而且大多数是主要活性成分,例如,阿片中的镇痛成分吗啡,止咳成分可待因;麻黄的抗哮喘成分麻黄碱;喜树的抗癌成分喜树碱;颠茄的解痉成分阿托品;黄连的抗菌消炎成分黄连素(小檗碱);等等。迄今已报道并明确化学结构的生物碱已达4000多种。在植物体内除以酰胺形式存在的生物碱外,仅少数极性较弱的生物碱以游离形式存在,绝大多数生物碱是以盐的形式存在。大多数生物碱是结晶形物质(除烟碱、毒芹碱等少数呈液态之外),味苦,有的具有旋光性。绝大多数仲胺和叔胺生物碱具有亲脂性,能溶于甲醇、乙醇、丙酮、乙醚、苯、二氯甲烷、氯仿和四氯化碳等。除少数季胺型生物碱外,大部分不溶于水。酚性生物碱能溶于苛性碱溶液。所以在应用HSCCC分离时,经常需要用磷酸盐缓冲液及低浓度的盐酸等调整水相的pH值,使样品在溶剂系统中的分配状态达到最佳。在很多生物碱化合物的分离实验中,都可以选用氯仿-甲醇-水(用磷酸盐缓冲液或低浓度的盐酸水的pH值)的溶剂系统。对于中低极性的生物碱化合物则适合于选用石油醚(正己烷)-乙酸乙酯-甲(乙)醇-水(低浓度的盐酸)的溶剂系统。因为大多数生物碱具有一定的碱性,所以适合于采用pH-区带精制逆流色谱的分离方法。在用pH-区带精制逆流色谱分离生物碱时,经常遇到的难题是样品的溶解度偏低,这时可将叔丁基甲醚-乙腈-水系统改换成正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水的系统进行尝试,一般可用5︰5︰x︰(10-x)的组成比例。将已经应用的HSCCC分离的生物碱进行了总结,供读者参考。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2010/11/201011211054_260895_1615407_3.jpg
逆流色谱技术Countercurrent Chromatigraphy(ccc)是当今国际分离技术的一个新颖的分支。它的突出特点是用很长的软管(如聚四氟乙烯管)绕制成的色谱柱内不加入任何固态支撑体或填料。使用时有使用人根据被分离混合物的理化特性.选择某一种有机/水两相溶剂体系或双水相溶剂体系,此体系可以是二元的或多元的。用此体系的上层或下层作为色谱过程的固定相,首先将其注满管柱内,然后让此管柱作特定的旋转运动,用由此形成的离心力场来支撑住柱内的液态相。这时,若用溶剂体系中的另一层作为流动相,带着混合样品由泵的压力推入分离管柱,样品就会穿过两个液相对流的整个管柱空间,各个组分也就会按其在两相中的分配系数(即某一化组分在流动相中的溶解度同它在固定相中的溶液解度的比值)分离开来。 一、逆流色谱技术的特点 1.逆流色谱不用固态支撑体,完全排除了支撑体对样品组分的吸附、玷染、变性、失活等不良影响。所以,能避免不可逆吸附所造成的溶质色谱峰拖尾现象能实现很高的回收率。例如,对于黄酮等易被填料吸附的物质的分离与制备就具有明显的优势。 2.逆流色谱的分配分离是在旋转运动中完成的,两相溶剂都被剧烈振动的离心力场依其界面特征见成极微小的颗粒,样品各组分会在两相微粒的极大表面上分配,并且能在颗粒振荡与对流的环境中有效地传递。所以,它就象是把通常的溶剂萃取过程成千上万次地、高效地、自动连续地予以完成。 3.没有填料在柱内的占空体积,逆流色谱的分离柱又容易做得容积大些,柱内空间全部是有效空面。所以,它的样品负载能力很强,制备量很大,而且重视性很好。 4.逆流色谱不用填料,分离过程不是淋洗或洗脱过程,而是对流穿透过程。所以,能节省昂贵的材料消耗和溶剂消耗,运行使用的后续投入较低。 逆流色谱的分离效率比不上[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]和高效液相色谱等技术,不适宜用它去完成组成复杂的混合物的全谱分离分析。而它对于样品预处理条件的放松,以及它的回收率高,制备量大的优点,作为特定部位和特定组分的分离纯化与制备则是十分可取的。 二、 逆流色谱技术的发展概况 逆流色谱的基本模型早在20世纪60年代就由Dr 。Yoichiro Ito创立,经过数10年在 美国国家健康研究院刚(NIH)的实验室研究,特别是在近20年,高速逆流色谱技术(High-Speed CCC,HSCCC)的出现,使它进入了在世界范围内推广应用的阶段。每年一度的美国匹兹堡国际分析化学与应用光谱学学术会议上,都设有CCC的专题组:“Journal of Liquid Chromatography”等重要学术刊物曾多次出版这一技术的论文专辑。近10年间,HSCCC在生物化学、医药学、农业、环境、材料、化工、海洋生物以及无机离子等众多领域的成功应用,使之成为一种引入注目的技术手段。1996年,在美国由John Wiley&Sons,Inc出版了《High-Speed Countercurrent Chro-matography》一书,笔者应邀撰写了该书的HSCCC onMedicinal Herbs一章,此书被选编为著名的分析化学丛书第132卷,作为一项新技术向世界传播。2000年9月,逆流色谱技术国际委员会在英国Brunel大学召开了此技术的第一届国际学术会议CCC-2000,笔者参加了会议的组织领导工作并作了天然产物分离纯化方面的特邀报告。受该国际委员长会的委托,我们将于2002年4月在北京召开此项新技术的第二届国际学术会议,CCC-2002将突出天然产物研究与开发的主题。 1978年,当时任我国卫生部药品生物制品检定所所长的周海韵教授,从世界卫生组织的资料中获知Dr。Ito正在美国NIH研究开发实现逆流色谱的设备,并已用于抗生素异构体的分离。周先生建议笔者研制此种设备以配合我国的抗生素质检工作。1980年,我们研制出了我国第一台逆流色谱仪,并由检定所抗生素室用于抗生素成分的分离与分析检定。在蔡定国教授等植物药学专家的帮助与合作下,完成了首打批生物学碱、黄酮等类中药成分的分离应用研究,其结果引起了国内外的关注。这些工作,确立了我国在CCC技术及其应用研究方面的国际领先地位。1987年,笔者应美国NIH邀请,赴美同Dr。Ito合作从事CCC技术及相关生物工程技术的研究,共同推进了HSCCC技术的发展并获得美国发明专利。在美期间,笔者还同蔡定国教授、中国医学院药物所方起程教授、华西医科大学药学院消悼英教授、消蓉教授等密切合作,发表了一批用HSCCC分离制备天然药物活性成分的论文,为形成我国CCC技术在这一应用研究领域的国际领先优势和技术特色打下了基础。近10年来,我国关于CCC技术的研究开发工作始终同天然产物的研究开发工作密切地结合着。 三、逆流色谱技术为中药 现代化服务的设想 我们经过20余年的科研实践,已经建立了具有自主知识产权的快速分析型HSCCC、半制备型HSCCC、PH区带制备型HSCCC和大分子蛋白质分离用的CCC等系化的技术成果。应用这些技术成果,我们开发出了数10种常用中草药和茶叶等农产品中数百种单体成分的分离纯化与制备的工艺技术。这些成分包括黄酮类、生物碱类、蒽醌类、皂苷类、大环内酯类、多酚类、儿茶素类、多糖类、糖蛋白类等不同类别的物质。例如对于银杏黄酮苷元、异鼠李素、山奈酚、茶叶中儿茶素ECCE、EC、GCG、红豆杉中紫杉醇及其类似物、白藜芦醇和白藜芦醇甙、番茄红素等等,都已建立了制备纯度达到98%以上的工艺技术。 不论是从中医药的理论基础和思维体系,还是从中药的功能主治和临床效果来看,中药都不会象西药那样采用单纯的成分入药,我们利用先进的技术,制备药物中活性部位和活性成分的主要目的是一种技术表达,绝不是企图违背中药的根本法则。恰恰相反,我们希望利用这一手段,从标准物质、检定方法、活性研究、功效阐述、生产和产品的质量控制等方面,去演绎中医药的精髓,丰富国际交流和促进理解的技术语言,推动传统中药的科学化和现代化。 我国正在中药行业推广CO2超临界萃取、大孔树脂层析和膜分离等技术。逆流色谱技术同前三者比较,其制备规格较小,但是选择性和分离、分辨能力较强。因此,逆流色谱可以作为前三者的后续步骤,用以完成进一步的分离纯化。美国NIH曾经支持过这样一个技术方法学的研究课题,即是针对象紫杉醇等价值较高的物质的分离制备,采用CO2超临界萃取做前期提取,高速逆流色谱做分离纯化,高效液相色谱做最终的分离分析与鉴定。以这样的技术架构,来表达一种天然纯净的、高回收率低消耗的、高效率的技术制程。
请教:高速逆流色谱有国外厂家生产吗?
最近才知道高速逆流色谱这种技术,查了不少资料才知道我们国家在这项技术上还占据世界前沿.从各种资料上都看到的是该技术的正面优点介绍,但作为一项并不算新的技术(我国1978年就有第一台逆流色谱仪器应用在中检所抗生素室,1988年就提出了HSCCC技术),多年来没有象HPLC那样普及,应该还是有些原因的.请了解HSCCC技术的朋友们来讨论一下该技术的优势和劣势,以及应用范围究竟是哪些.
我研究所最近了解到了高速逆流色谱,不知道这种色谱仪器用起来怎么样?不知大家有没有用过这种色谱仪器,用起来怎样?[em09]
高速逆流色谱由于结构复杂,维修拆解一般只能返厂进行,维修的成本非常高昂,本文在实验室自行维修的基础上为维修逆流色谱提供了一点参考与经验。如有不当之处敬请批评指正。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2014/06/201406111125_501730_1034334_3.jpghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2014/06/201406111125_501731_1034334_3.jpghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2014/06/201406111125_501732_1034334_3.jpghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2014/06/201406111125_501733_1034334_3.jpghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2014/06/201406111126_501734_1034334_3.jpghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2014/06/201406111126_501735_1034334_3.jpghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2014/06/201406111126_501736_1034334_3.jpghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2014/06/201406111126_501737_1034334_3.jpg
一、 原理简介 逆流色谱法是一种最新发展的液液分配分离方法,它不用任何固态的支撑物或载体。同其它色谱分析方法比较,不存在吸附损耗、样品变性、沾染和色谱峰形拖尾畸变等固态载体所造成的问题。在分离组分极其复杂的天然产物方面有很强的能力,被认为是制备分离生物样品的有效技术。对于有机组分的初步提取和最终提纯都很适宜,应用面广泛,众多科研和生产部门的实验室都宜采用。二、 特点1.无固定相载体2.100%回收率3.操作简便4.使用成本低5.重现性好三、 产品技术参数型号:EMC-500制备型分离柱:无中间轴双分离柱β值:0.45-0.85主机容量:500mL进样圈:2ml, 10ml, 20ml, 50ml可选分离量:毫克-克量级分离转速 300-800rpm耐压极限:2Mpa额定电压:220V功率:300W净重:55Kg主机尺寸:470*530*400四、 独特优势1.多分离柱串并联2.柱容积可选择,可按需要使用1/4、1/2、3/4、1倍的柱容量,实现一机多用的功能。
(一)逆流色谱的概念逆流色谱(Counter-current Chromatography)是一种不用固态支撑体或载体的液-液分配色谱技术,是一种能实现连续有效的分配分离的实用分离技术。也就是说在这类色谱系统中,固定相和流动相都是液态的,这两相的物质可以是互不相溶或很少相溶的有机相-水相体系,也可以是大分子聚合物(polymer)的双水相体系。由于没有应用固态载体,所以不会出现固态载体对样品和分离结果的不可逆吸附、干扰污染、失活变性等不良影响。而且,因为分离柱内没有固态载体的占空体积,容易做到较大的进样量。它一种在国际上被公认的有效的分离纯化与制备的技术手段,特别适合于天然产物和活性组分的分离纯化和制备工作。但是,它的固定相和流动相都是液态的,如何使两相与被分离样品之间形成有效的分配与传递关系?它的固定相是液体的,如何使之能在分离管柱内空间保持稳定的保留状态?它不是靠特定种类和型号的填充材料来保证分离过程的选择性,如何选择液态的对流溶剂体系来保证有效的分配分离结果?这些问题,都需要从特殊的作用原理,特殊的运动机制,特殊的实验方法来研究解决。(二)逆流色谱的起源与发展逆流色谱起源于最简单的液-液分配装置——实验室里常用的分液漏斗。把两个互不混溶的溶剂相置入分液漏斗中,投入要萃取分离的样品,经振摇和静置,样品溶质就按分配系数的特征在两溶剂相间实现分配。如果两种溶质分子在两相溶剂系统中的分配系数差异明显,那么,在分液漏斗里的一次萃取过程中就能分离开来。但是,实际遇到的问题往往是要分离性质极其相近的复杂混合物,这就需要进行多次萃取才能实现满意的分离。20世纪30年代初,Jantzen对工业上混合物分离单元首先使用逆流分配的术语,并发展了实验室规模的逆流分配装置。1941年,Martin 和Synge提出了一种级联链型萃取装置,开创了分配色谱技术 。1944年,Craig发明了非连续式的逆流分溶装置(Countercurrent Distribution,CCD),它适用于大量或小量的样品的液液分配分离。在分离大极性组分,包括天然产物、多肽和其他大分子时更具有特色,适合于大制备量的分离提取工作。CCD的主要缺点是:仪器设备庞大复杂容易破碎,溶剂系统容易乳化,溶剂消耗量大和分离操作时间太长等。此后,又出现过多种液-液分配分离装置和仪器,但都因没有根本的突破,因此,没有得到推广和应用。1966年,日本学者Yoichiro Ito等首先在日本,随后在美国国立健康研究院(National Institute of Health, U.S.A)发现
逆流色谱技术 Countercurrent Chromatigraphy(CCC)是当今国际分离科学技术的一个新颖的分支。它的突出特点是在用很长的软管(如聚四氟乙烯管)绕制成的色谱柱内不加入任何固态支撑体或填料。使用时由使用人根据被分离混合物的理化特征,选择某一种有机/水两相溶剂体系或双水相溶剂体系,此体系可以是二元的或多元的。用此体系的上层或下层作为色谱过程的固定相,首先将其注满管柱内,然后让此管柱作特定的旋转运动,用由此形成的离心力场来支撑住柱内的液态相。这时,若用溶剂体系中的另一层作为流动相,带着混合样品由泵的压力推入分离管柱,样品就会穿过两个液相对流的整个管柱空间,各个组分也就会按其在两相中的分配系数(即某一组分在流动相中的溶解度同它在固定相中的溶解度的比值)分离开来。 一、逆流色谱技术的特点 1.逆流色谱不用固态支撑体,完全排除了支撑体对样品组分的吸附、玷染、变性、失活等不良影响。所以,能避免不可逆吸附所造成的溶质色谱峰拖尾现象,能实现很高的回收率。例如,对于黄酮等易被填料吸附的物质的分离与制备就具有明显的优势。 2.逆流色谱的分配分离是在旋转运动中完成的,两相溶剂都被剧烈振动的离心力场依其界面特征见成极微小的颗粒,样品各组分会在两相微粒的极大表面上分配,并且能在颗粒振荡与对流的环境中有效地传递。所以,它就象是把通常的溶剂萃取过程成千上万次地、高效地、自动连续地予以完成。 3.没有填料在柱内的占空体积,逆流色谱的分离柱又容易做得容积大些,柱内空间全部是有效空面。所以,它的样品负载能力很强,制备量较大,而且重视性很好。 4.逆流色谱不用填料,分离过程不是淋洗或洗脱过程,而是对流穿透过程。所以,能节省昂贵的材料消耗和溶剂消耗,运行使用的后续投入较低。 逆流色谱的分离效率比不上[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]和高效液相色谱等技术,不适宜用它去完成组成复杂的混合物的全谱分离分析。而它对于样品预处理条件的放松,以及它的回收率高,制备量大的优点,作为特定部位和特定组分的分离纯化与制备则是十分可取的。 二、逆流色谱技术的发展概况 逆流色谱的基本模型早在20世纪60年代就由Dr.Yoichiro Ito创立,经过数10年在美国国家健康研究院刚(NIH)的实验室研究,特别是在近20年,高速逆流色谱技术(High-Speed CCC,HSCCC)的出现,使它进入了在世界范围内推广应用的阶段。每年一度的美国匹兹堡国际分析化学与应用光谱学学术会议上,都设有CCC的专题组:“Journal of Chromatography”、“Journal of Liquid Chromatography”等重要学术刊物曾多次出版这一技术的论文专辑。近10年间,HSCCC在生物化学、医药学、农业、环境、材料、化工、海洋生物以及无机离子等众多领域的成功应用,使之成为一种引人注目的技术手段。1996年,在美国由John Wiley&Sons,Inc出版了《High-Speed Countercurrent Chro-matography》一书,笔者应邀撰写了该书的HSCCC onMedicinal Herbs一章,此书被选编为著名的分析化学丛书第132卷,作为一项新技术向世界传播。2000年9月,逆流色谱技术国际委员会在英国Brunel大学召开了此技术的第一届国际学术会议CCC-2000,笔者参加了会议的组织领导工作并作了天然产物分离纯化方面的特邀报告。受该国际委员会的委托,我们将于2002年4月在北京召开此项新技术的第二届国际学术会议,CCC-2002将突出天然产物研究与开发的主题。 1978年,当时任我国卫生部药品生物制品检定所所长的周海钧教授,从世界卫生组织的资料中获知Dr.Ito正在美国NIH研究开发实现逆流色谱的设备,并已用于抗生素异构体的分离。周先生建议笔者研制此种设备以配合我国的抗生素质检工作。1980年,我们研制出了我国第一台逆流色谱仪,并由检定所抗生素室用于抗生素成分的分离与分析检定。在蔡定国教授等植物药学专家的帮助与合作下,完成了首批生物碱、黄酮等类中药成分的分离应用研究,其结果引起了国内外的关注。这些工作,确立了我国在CCC技术及其应用研究方面的国际领先地位。1987年,笔者应美国NIH邀请,赴美同Dr.Ito合作从事CCC技术及相关生物工程技术的研究,共同推进了HSCCC技术的发展并获得美国发明专利。在美期间,笔者还同蔡定国教授、中国医学科学院药物所方起程教授、华西医科大学药学院肖悼英教授、肖蓉教授等密切合作,发表了一批用HSCCC分离制备天然药物活性成分的论文,为形成我国CCC技术在这一应用研究领域的国际领先优势和技术特色打下了基础。近10多年来,我国关于CCC技术的研究开发工作始终同天然产物(如中草药和农产物)的研究开发工作密切地结合着。
高速逆流色谱的工作步骤1、溶剂系统的准备 溶剂系统通常要在使用前配制,并要给予充分的时间来使两相溶剂达到的平衡。否则,在运行过程容易产生气泡。溶剂系统最好在使用前再把两相分开,由于不同溶剂的蒸气压的不同,溶剂的蒸发会引起溶剂比例的变化,所以,已经分开的溶剂系统的上、下相要放置于密闭的容器储存。2、柱系统的运行 在仪器不旋转的状态下,通常以较高流速将固定相泵入螺旋管柱内。然后按照设定的仪器转向(正转或反转),调节转速,使之达到设定的速度,开启溶剂泵的开关,以一定的流速泵入流动相。当溶剂体系建立了流体动力学平衡时,即流动相从管柱的尾端清晰的流出时,整个仪器系统稳定后,即可进行下一步的进样操作。应该指出,在快速泵入固定相时,让仪器作选定转动方向的反向的慢转(例如每分钟几十转),能够有效地排除螺旋管柱内的气体,更好地保证分离工作的效果。3、样品溶液的制备和进样逆流色谱样品溶液的制备,通常是用上、下相的混合溶液来溶解样品。当样品量比较少时,可用上下相任何一相来溶解;当样品量比较多时,通常要用适量等体积的上、下相混合溶液来溶解。过高的浓度的样品溶液进入分离柱时,有时会形成“样品栓”,会把整个固定相推出分离柱。在这种情况下,只能采取稀释样品的办法来解决。大体积的进样量,通常会使峰带变宽,固定相会出现流失。在这种情况下,可采用降低流速的办法来改善这一缺陷。4、HSCCC分离和检测 在上述进样后,进入HSCCC分离的过程,利用检测器监测得到逆流色谱峰形图,利用馏分收集器或手动收集法收集被分离后的相应于各色谱峰的馏分。在HSCCC操作中除了正常的洗脱方式外,还能采用步级式洗脱和梯度洗脱。不论采用何种洗脱方法,在这种分离实验中,采用首到尾端的洗脱方式总能给出较好的分离结果。对于某些溶剂系统来说,尾到首端的洗脱方式会导致一定的固定相流失,从而使峰形分辨度降低。尽管这种流失不严重和对分离结果影响不大,但是,流失的固定相水滴会被吸附在检测器的流通池壁上,形成对于溶质吸收峰的“噪音”干扰。5、清洗分离柱当HSCCC一次分离完成时,可以利用氮气瓶或者空气压缩机将分离柱中的液体吹出,并收集这些排出液体,并测定固定相的保留率总-V下测[co