最近我做叶绿素a,用的方法是水和废水那本书里的,效果不好。也不知道一般水库含量在多少,以及相关标准限值,请各位帮忙忙看看。
[size=16px] 叶绿素测定仪是一种用于测量植物叶片中叶绿素含量的设备。叶绿素是植物中进行光合作用的关键色素,它们吸收光能并将其转化为化学能以支持植物的生长和发展。以下是一般情况下使用叶绿素测定仪测量植物叶绿素相对含量的步骤: 样本准备: 从要测量的植物中选取代表性的叶片样本。这些叶片应该是健康的、没有损伤的,并且尽可能避免太老或太嫩的叶片。 叶片处理: 如果需要,将叶片处理成较小的块状或碎片,以确保测量时样本的均匀性。同时,避免过度损伤叶片,因为这可能会影响叶绿素的测量结果。 提取叶绿素: 使用适当的提取液(比如乙醇、乙醚等)将叶片中的叶绿素提取出来。提取的过程通常需要在低温下进行,以防止叶绿素的降解。 测量光吸收: 将提取液中的叶绿素溶液置于叶绿素测定仪中。这种仪器通过照射样本并测量样本对不同波长光的吸收来确定叶绿素的含量。最常见的方法是使用分光光度计,它可以测量不同波长下样本吸收的光强度。 建立标准曲线: 使用已知浓度的叶绿素标准溶液,进行一系列测量以建立标准曲线。标准曲线可以用来将样本吸收的光强度值转换为叶绿素浓度值。 测量样本: 使用同样的方法测量你的样本,获取其吸收的光强度值。 计算叶绿素含量: 根据标准曲线,将样本的光吸收值转化为叶绿素浓度。如果你感兴趣的是叶绿素的相对含量,可以将不同样本的叶绿素浓度与标准样本进行比较。 请注意,使用叶绿素测定仪需要一定的实验操作技能和基本的化学常识。在操作之前,云唐建议仔细阅读仪器的操作手册,并根据实际情况调整实验步骤。另外,确保在实验过程中遵循安全操作规范,使用适当的防护措施。[/size]
各位老师,最近我们实验室要扩项,BOSS让加上叶绿素这一个项目。我的问题是,叶绿素属于哪个评价标准里规定的范畴呢? 我查到相关资料,现行的地表水质量标准GB3838-2002的上一版本,99年的那版里有湖泊水库特定项目里,包括了叶绿素,并对其进行限值规定。现行版本里给删除了,那我要做叶绿素,我得用什么标准给他评价呢?限值又是多少呢?
原先用普通的可见分光光度法测了一系列的叶绿素含量。可老板不满意,叫用F-4500荧光仪测量。新手的我查了半天也没找到相关的标准方法,他又急着要,哭啊!不知道哪位大侠有这方面的资料,可否指点一下小弟。弟弟先在这儿谢谢您了!
[em0808] 某客户要做鱼塘水质的检测,里面有个叶绿素,请问哪个标准里面有这一项?
各位老师,我想寻找一种检测叶绿素a、叶绿素b和叶绿素铜钠的含量,目前使用紫外-可见光分光光度计,采用的是标准曲线法,但是非常麻烦;希望能够找到更简便快捷的测量方法或者仪器,精确度要求99.99%。请各位老师指点!!
国外标准版ASTM标准的求助?我该不该应助?论坛已有的ASTM应助帖怎么办?今天猛然回帖时看到论坛已改版!其中有一条红色字体!请用户不要上传ASTM标准等侵权资料,发现后将一律删除
[color=#444444]定量蔬菜中叶绿素ab和脱镁叶绿素ab。查了资料想用[/color][u]分光光度法[/u][color=#444444]或者[/color][u]高效液相色谱法[/u][color=#444444]来做,但是发现了几个问题,[/color][color=#444444]1:用高效液相色谱法的定量一般是需要做标准曲线的吧? 阿拉丁里关于叶绿素AB的纯品1mg 1000+ 而脱镁叶绿素阿拉丁里没有需要到别的公司定,并且价格很高 4、5千的样子,所以我想问 如果要定量测一定需要做标准曲线吗,或者使用别人做出的,可以拷到软件里计算吗?[/color][color=#444444]2: 关于定量叶绿素ab和脱镁叶绿素ab还有其他好用的方法吗? 谢谢各位的指导[/color]
[size=16px] 叶绿素测定仪是一种用于测量植物叶片中叶绿素含量的设备。它在植物生理学、生态学和农业研究中非常有用。然而,是否认为叶绿素测定仪好用取决于具体的使用情境和需求。 以下是一些使用叶绿素测定仪的优点和考虑因素: 优点: 快速准确: 叶绿素测定仪能够快速测量叶片中的叶绿素含量,提供准确的结果,节省时间和人力成本。 非破坏性: 使用叶绿素测定仪通常不需要摘取植物叶片,因此不会对植物造成破坏,可以进行长期监测。 数据量大: 叶绿素测定仪能够高通量地收集数据,适用于大规模实验和研究。 定量分析: 通过叶绿素测定仪,您可以获取叶绿素含量的定量数据,有助于更深入地理解植物生长和环境因素之间的关系。 考虑因素: 成本: 叶绿素测定仪可能需要较高的投资成本,包括设备购买和维护费用。 操作复杂性: 操作叶绿素测定仪可能需要一定的技术培训,特别是对于没有相关经验的人员。 适用范围: 叶绿素测定仪主要用于叶绿素含量的测量,如果您需要其他植物参数的数据,可能需要其他类型的设备或方法。 样本处理: 样本的准备和处理可能会影响测量结果的准确性,需要注意标准化的操作步骤。 综合考虑以上因素,如果您在植物研究、农业实验或环境监测等领域需要准确测量叶绿素含量,叶绿素测定仪可能会非常有用。然而,在购买之前,云唐建议您仔细评估您的研究需求、预算以及操作和维护的可行性。[/size]
我自己开发了一款海水水下叶绿素分析仪器,不知道如何对仪器进行定标,配置叶绿素标准曲线是采用丙酮为基体的叶绿素溶液呢还是培养活体藻类进行稀释测定?如果采用丙酮基体的溶液定标是不是会与实际值差距较大?
求助大家,在使用《叶绿素的测定 分光光度法HJ 897》这一标准时,使用了塑料离心管(标准是玻璃离心管),0.22微米有机相针式滤器(标准为0.45微米)。然后再测样过程中,测得750nm处的值为0.008,不符合标准要求的低于0.005吸光度,是哪里会影响这个结果呢,请大佬们指点一下
为了提高行业标准版的知名度,为了更好、更及时的使版友得到自己所需用的标准,行业标准版特举办“传标准、应求助、得积分”活动~~~活动细则: 在本版上传各类行业标准和应助版友所需要得到的标准。活动时间: 2011年4月1日~2011年12月31日活动要求及奖励: 1. 每位版友参与上传标准主题帖和应助帖子每月的总数不得低于25个帖子。 2. 每个版友上传标准主题帖和应助帖子均奖励2个积分 3. 每月底进入top5的版友按名次顺序分别奖励80、60、40、30、20个积分(积分以悬赏贴的形式发放,可以得到声望)。 4. 如果进入前top5的版友帖子数额<25贴,则按照第2条执行,不参与月底的积分奖励。 5. 凡活动期间连续每月都进入top5的版友,活动结束后会得到相应的奖励。注意事项: 在上传标准时,请先搜索下版面是否已经有其标准的帖子发布,若重复则不计入你的发帖总数。 最后欢迎各位版友积极参与!
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最近,偶尔有暇的时候常到标准版面去转悠,本想将历史的遗留问题浏览一下,无奈太多,尤其有些是明明已经有应助,但未及时修正主题词的帖子!建议标准版面的版主能否费心整理一下,也方便一些利用论坛搜索的用户不至于找到一些死链接!纯属建议!
[B]我们标准版创建有半年了,得到了广大用户的大力支持,【求助】和【应助】是标准版的主要在职责之一,会员应助是我们标准版产生互动和气氛的重要手段,为了鼓励广大用户的积极参与和支持,特在【国标GB】、【行业标准】、【其他标准】、【标准物质】四个版面中,自荐或推荐2006年来“十佳应助会员”,自荐或推荐均有10分的奖励![/B]由版主发哥拿出1000分,对标准版块十佳应助会员进行奖励!1.标准版的6位版主可直接得到100分的新年奖励。6位版主不在十佳应助的范围、6位版主也没有推荐的权利(避嫌)。2.其他所有会员可以自荐或推荐,自荐或推荐时最好给出连接(太多的,无需全部,一部分即可),在任意四个版面中发帖自荐或推荐。2.由标准版的6位版主列出自荐或推荐名单,确定"十佳应助会员"。3.所有奖励由发哥通过积分转移发放。4.标准版评选“十佳应助会员”截止日期为2月1日,2月2日公布并发奖。
实验室检测水质叶绿素a的分析方法SL 88-1994,分光光度法。标准里没有说明叶绿素a的检出限,敢问此分析方法,叶绿素a的检出限。http://simg.instrument.com.cn/bbs/images/default/em09511.gif
与第四版比较,《水质叶绿素a的测定 分光光度法 HJ897-2017》的变与不变叶绿素a是浮游植物光合作用的载体,常用来表征浮游植物现存量,是湖泊水库富营养化评价指标之一。国内外叶绿素a测定方法繁杂多样,不同研究者采用的方法各式各样,导致研究结果之间少有可比性。环境监测普遍采用的是《水和废水监测分析方法》(第四版)(以下称第四版)叶绿素a的测定方法-丙酮研磨提取法[sup][/sup]。2017年12月21日环境保护部首次发布《水质叶绿素a的测定 分光光度法 HJ897-2017》[sup][/sup],与第四版比较,做了一些改动,核心内容依然是丙酮研磨提取法,标准实施过程仍有诸多疑问和困难,写下来,希望同行不吝赐教。1.方法检出限HJ897-2017规定了方法检出限和测定下限,明确规定测定结果有效数字的保留。[img=,690,69]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/07/201807300911232717_1558_3247383_3.png!w690x69.jpg[/img]图1 HJ897-2017关于方法检出限的规定《水和废水监测分析方法》(第四版)对检出限的定义[sup][/sup]是:为某特定分析方法在给定的置信度内从样品中检出待测物质的最小浓度或最小量。但没有严格规定检出限的计算方法,以下三种与分光光度法有关。①.《全球环境监测系统水监测操作指南》的计算方法为 D.L=4.6δ式中:δ——空白平行测定(批内)标准偏差(重复测定20次以上)②美国EPA SW-846规定MDL=3.143δ(δ重复测定7次)③某些分光光度法以扣除空白值后的与0.01吸光度相对应的浓度值为检出限。方法检出限受样品基质、前处理和仪器水平的影响,因此有必要说明取样体积、测量条件。“本标准测定丙酮提取液中叶绿素a的检出限为0.04mg/L”,“提取液”必然与提取方式有关,而这里没有说明提取条件,我的理解是分光光度法的检出限,即扣除空白值后的与0.01吸光度相对应的浓度值,那么这句话改成“本标准测定叶绿素a丙酮溶液的检出限为0.04mg/L”是不是严谨一些?根据HJ897-2017关于检出限和测定下限的数据,推测计算过程:当取样体积200ml,丙酮提取液体积为10ml,方法检出限=0.04mg/Lx10 ml/200ml=0.002mg/L=2μg/L美国EPA SW-846规定4MLD为定量下限,所以测定下限=4x2μg/L=8μg/L如果取样体积为500ml,方法检出限=0.04mg/Lx10 ml/500ml=0.8μg/L取样100ml,检出限4μg/L方法检出限与取样体积有关,那么测定下限是否随着检出限而变化?2.防酸化问题第四版和HJ897-2017都规定样品采集后,立即做样品预处理:每升样品加1ml1%碳酸镁悬浊液,“以防酸化引起色素溶解”。叶绿素a是卟啉化合物,之所以呈绿色,是卟啉环中的电子和Mg决定的,卟啉环极易失去镁原子,分解生成暗褐色的脱镁叶绿素。水污染的地方、或者样品采集、保存、制备过程,因为酸性条件、高温、光照,浮游植物细胞被破坏,叶绿素变成脱镁叶绿素造成测量误差[sup][/sup]。酸化是脱镁反应的条件之一,加入碳酸镁是防止脱镁而非防酸化。3.修改了过滤水样的滤膜,用玻璃纤维滤膜代替乙酸纤维滤膜,并规定滤膜直径及孔径,增加配真空泵的玻璃砂芯过滤装置。3.1材质乙酸纤维滤膜过滤水样没问题,但用丙酮萃取叶绿素时,滤膜会被溶解成胶状,萃取液无法正常分离。HJ897-2017改用玻璃纤维滤膜,不存在滤膜溶解问题。3.2孔径滤膜孔径的选择很重要,要保证藻类细胞有效截留,另外要保证过滤效率。[img=,690,517]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/07/201807300911487270_7582_3247383_3.jpg!w690x517.jpg[/img]图2几种浮游植物的细胞直径 [sup][/sup]细胞大小是浮游植物分类的重要依据,比较常见的藻类细胞绝大多数大于0.7μm,个人认为选择0.7μm的玻璃纤维滤膜比较合适。4.修改水样过滤时的操作。第四版是水样抽完后继续抽1-2min,减少滤膜上的水分。HJ897-2017是在水样刚刚完全通过滤膜时结束抽滤,最后用滤纸吸干水分;有些藻类没有细胞壁或者细胞壁很薄,强大负压作用下,可能造成原生质破坏,叶绿素溶出,造成测量误差。HJ897-2017用滤纸吸干的做法尽可能避免在样品制备过程中叶绿素流失,但“注”中关于富营养化水样用离心法浓缩水样并不可取。因为水分的存在严重影响有机溶剂萃取效率,而离心法去除水分不完全。如果藻类密度较大,适量少取就好了。5.取样体积[img=,690,125]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/07/201807300912335267_3403_3247383_3.jpg!w690x125.jpg[/img]图3(第四版)关于取样体积的规定[img=,690,151]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/07/201807300913206267_7656_3247383_3.png!w690x151.jpg[/img]图4 HJ897-2017中取样体积的规定取样体积直接关系到试样制备效率,是叶绿素a测定精密度准确度重要影响因素,HJ897-2017规定按水体的营养状况确定取样体积,并按营养状态给出相应的参考值。根据湖泊(水库)富营养化评价方法及分级技术规定(总站生字090号)评价标准,计算综合营养状态指数需要取得总氮、总磷、透明度、高锰酸盐指数和叶绿素a数据,是比较复杂的计算过程,用它来指导叶绿素测定的取样量,个人认为不适用。第四版的规定视浮游植物分布而定,少则多取,提高实验精密度;多则少取,提高实验效率,更具可操作性。6.低温保存样品过滤后,第四版规定滤膜在冰箱中低温干燥6-8h再研磨。“低温”让细胞质形成冰晶、膨胀,达到破碎细胞的目的,尤其是细胞壁坚硬的硅藻或者有胶被的蓝藻群体,低温处理有利于叶绿素顺利溶出,提高萃取效率。水分的存在影响有机试剂萃取效率,所以“干燥”也是必要的措施,低温保存具有双重效果。HJ897-2017则是过滤后马上研磨。7.第四版和HJ897-2017都用研磨法作为提取方法,不同的是第四版少量多次研磨,每次研磨后转移至离心管,离心后将上清液倒入容量瓶,最后用丙酮定容。HJ897-2017规定研磨5分钟以上,最后与滤膜一并转入离心管,定容至10ml,放置4℃避光浸提2-24h,离心取上清液,然后用针式过滤器过滤,测定。手动研磨费时费力,且不易把细胞完全磨碎,多次研磨、转移不可避免见光,还会造成样品流失,离心后很难得到上清液同时不能保证萃取液与滤膜完全分离,导致结果准确度、精密度不够,而且操作人员长时间接触丙酮,不利身体健康。多年以来,很多研究者提出用乙醇代替丙酮,用直接浸提、超声法、加热、反复冻融等多种细胞破碎方法代替研磨法,实验数据表明,经过改良的提取方法测得的叶绿素a水平明显高于研磨法,标准偏差变小,缩短实验操作时间。8.修改了测定波长及计算公式:第四版测定波长750nm、663 nm、645 nm、630 nm,HJ897-2017测定波长750nm、664nm、647 nm、630 nm。9.增加了空白试验和平行样测定等质控措施,试验过程增加质量保证注意事项。参考文献:国家环境保护总局《水和废水监测分析方法》编委会.水和废水监测分析方法.4版.北京:中国环境科学出版社,2002:670-671.环境保护部.水质 叶绿素a的测定 分光光度法:HJ 897-2017[s].北京:中国环境出版社,2017.国家环境保护总局《水和废水监测分析方法》编委会.水和废水监测分析方法.4版.北京:中国环境科学出版社,2002:28-29.陈文峻,[color=#333333]蒯本科,植物叶绿素降解[/color].植物生理学通讯2001,37(4):336-338. 胡鸿钧, 魏印心. 中国淡水藻类——系统、分类及生态. 北京: 科学出版社,2006. HU Hongjun, WEI Yinxin. The freshwater algae of china: Sys- tematics,taxonomy and ecology. Beijing:Science Press, 2006. (in Chinese)[/s]
[align=center][font='黑体'][size=29px]叶绿素铜钠盐[/size][/font][/align][align=center]杨宗琦[/align]叶绿素是植物进行光合作用所必需的催化剂,是由四个吡咯环与镁离子相互配合而形成的镁卟啉类化合物。它是天然生物活性物质之一,具有排毒养颜,抗病强身,抑菌除臭等功效,一方面被广泛应用于日用品、食品、色素、脱臭剂等方面,另一方面在医药上也可用来治疗多种疾病,并应用于各种牙膏的开发中。但游离的叶绿素卟啉环中的镁离子在酸性条件下容易被氢离子取代,生成脱镁叶绿素使色泽褪去,且对光、酸和热比较敏感,使叶绿素的应用受到严重限制。近年来,有不少研究者试图对叶绿素的结构进行修饰,使其变成相对稳定的金属卟啉结构,而叶绿素铜钠盐就是极其重要的一种。叶绿素铜钠盐具有很高的稳定性,在医学上,叶绿素铜钠盐是一类重要的药物,甚至可用叶绿素铜钠盐用于治疗白血病。本文将从基本性质、制备工艺、含量测定等方面介绍叶绿素铜钠盐。[font='黑体'][size=18px]一、基本性质[/size][/font] [align=left]叶绿素,英文名Chlorophyllin,中文别名叶绿素镁钠盐 、叶绿酸粉末、 叶绿素铜三钠,呈墨绿色粉末,着色力强,色泽亮丽,其水溶液呈蓝绿色澄清透明液,[font='宋体'][size=13px][color=#000000]易溶于水,几乎不溶于低醇,不溶于氯仿。水溶液透明、无沉淀。在酸性情况下([/color][/size][/font][font='times new roman'][size=13px][color=#000000]pH 6.5 [/color][/size][/font][font='宋体'][size=13px][color=#000000]以下[/color][/size][/font][font='宋体'][size=9px][color=#000000])[/color][/size][/font][font='宋体'][size=13px][color=#000000]或钙离子存在时,则有沉淀析出。[/color][/size][/font]当其水溶液pH 值小于6 时,染液底部出现粉末状沉淀,这是由于平面空间结构的叶绿素铜钠分子在酸性条件下易于聚集 。叶绿素铜钠盐可以菠菜或蚕粪为原料,用丙酮或乙醇提取叶绿素,添加适量硫酸铜、叶绿素卟啉环中的镁原子被铜置换即生成。[/align]1.1物理化学性质沸点:801.6℃at 760 mmHg分子式:C[font='calibri'][size=13px]34[/size][/font]H[font='calibri'][size=13px]31[/size][/font]CuN[font='calibri'][size=13px]4[/size][/font]Na[font='calibri'][size=13px]3[/size][/font]O[font='calibri'][size=13px]6[/size][/font]分子量:724.148闪点:438.6℃储存条件:密封于2-8℃阴凉干燥处溶解性:易溶于水,略溶于醇和氯仿。[img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2021/08/202108061804161897_7669_1608728_3.png[/img] [img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2021/08/202108061804162109_5211_1608728_3.png[/img]1.2中毒症状和影响,急性和迟发效应系统性铜中毒症状包括:毛细血管损伤、头痛、冷汗、脉搏微弱、肝肾损伤、中枢神经系统兴奋继而抑制、黄疸、抽搐、麻痹和昏迷。休克和肾衰会导致死亡。慢性铜中毒包括肝硬化、脑损伤和脱髓鞘、肾损害;铜沉积在角膜引起人威尔逊病。还有报道铜毒性导致血红蛋白贫血和加剧动脉硬化。目前,其化学、物理和毒性性质尚未经完整的研究。1.3安全操作的注意事项在有粉尘生成的地方,提供合适的排风设备。1.4安全储存的条件,包括任何不兼容性贮存在阴凉处。 容器保持紧闭,储存在干燥通风处。建议的贮存温度:2 - 8℃,对光线敏感[font='黑体'][size=18px]二、制备工艺[/size][/font]工艺流程:原料→预处理→浸提→过滤→皂化→回收乙醇→石油醚洗涤→ 酸化铜代→抽滤水洗→ 溶解成盐→过滤→干燥→ 成品2.1方法一将富含叶绿素的原料( 国内生产以蚕沙为主) 于40~ 50℃烘干后,研细成粉末状。加粉末量3倍的乙醇丙酮混合液( 1/ 1)于40~45℃提取2.5h,抽滤,滤渣用同等体积乙醇丙酮的混合液再提取 一次。合并两次提取液并加NaOH 调pH 值为11,加热皂化( 50°C左右) 30min。皂化是否完全可用石油醚萃取来判断,上层液呈黄色即为皂化完全 。皂化完全后蒸馏浓缩回收混合液( 60°C左右) 直至体积为原来的1/4~ 1/ 3 即可。再用石油醚萃取4次。下层用盐酸调至pH 值为7,加硫酸铜后调pH值为2, 并在50℃下铜代2h。反应结束即有颗粒状沉淀形成,静置冷却。室温下收集沉淀, 先用50~ 60℃水洗涤,再用30% ~ 40% 的乙醇洗涤至乙醇层为浅绿色。再用石油醚洗涤至石油醚层为浅绿色。滤饼用丙酮溶解,用5%的NaOH 乙醇溶液沉淀,pH 值为12,收集沉淀,用无水乙醇洗涤即得产品。在制备过程中反应温度不易过高,调节pH 值时要小心,温度过高以及pH 值过大或过小都能使叶绿素分解 。此为百度文库提供的制备方法。通过查阅知网,我们了解到以下几种从不同原材料出发的制备叶绿素铜钠盐的方法。2.2方法二:螺旋藻制取叶绿素铜钠盐基本思路:利用硫酸铜对螺旋藻进行浸泡铜化,再用丙酮乙醇混合液浸提得到叶绿素的有机溶液,再经过皂化、萃取、浓缩、干燥等步骤将叶绿素改造为叶绿素铜钠盐。具体步骤:材料:螺旋藻主要试剂:AR乙醇(沸点 78.1℃),AR 丙酮(沸点 56.1℃),AR氢氧化钠,AR 石油醚,AR 盐酸,硫酸铜晶体(CuSO[font='calibri'][size=13px]4[/size][/font].5H[font='calibri'][size=13px]2[/size][/font]O),食盐,白砂糖,可溶性淀粉,用时配成各种所需浓度。工艺流程:螺旋藻→粉碎→铜化(5%CuSO[font='calibri'][size=13px]4[/size][/font]溶液)→洗涤、脱水→浸提(丙酮乙醇混合液)→过滤→浓缩→皂化(5%NaOH溶液)→萃取(石油醚)→干燥→叶绿素铜钠盐产品具体步骤:称量 5.0g 粉碎好的螺旋藻于试管中铜化 13h 后,洗涤脱水于锥形瓶中,加入 70:30 的丙酮乙醇混合液 300mL,加盖在室温下浸提 2h,过滤,浓缩,皂化(5%NaOH 溶液),萃取(石油醚),干燥,可制得墨绿色带金属光泽的叶绿素铜钠盐产品。该文献还对叶绿素铜钠盐的稳定性进行实验分析,实验结果表明,螺旋藻叶绿素铜钠盐的耐光性较较差,需在避光条件下保存;热稳定性较好,但不能高于85 ℃;不耐强酸;食盐、白砂糖、淀粉等食品添加剂无不良影响。2.3方法三:剑麻膏中叶绿素铜钠盐的制备基本思路:以从剑麻膏中萃取得到的叶绿素为原料,研究了酸化、铜代、皂化条件对叶绿素铜钠盐产率的影响。该文献指出,叶绿素铜钠盐的制备过程可分为两种,一种是先皂化,后铜代,目前大多数文献都采用这种方法,但由于叶绿素的耐酸性较差,所得产品纯度不够,产率不高 另一种是先铜代后皂化,即将提取出的叶绿素首先脱镁铜代,使叶绿素变成比较稳定的叶绿素铜,再经皂化成盐得到产品。这种方法对反应温度和时间的要求不太苛刻,有利于提高叶绿素的稳定性。故他们采用先铜代后皂化的方法,遵循节能降耗,提高效率的原则,对反应条件进行优化,并对所得叶绿素铜钠盐的性能和质量进行检测。实验试剂与仪器:剑麻膏,由广西武鸣东风农场提供 乙醇、丙酮、盐酸、氢氧化钠、石油醚、硫酸铜均为分析纯。BSA224S电子天平 FZ102 微型植物试样粉碎机 HH-2数显恒温水浴锅 723N可见分光光度计 R201L 旋转蒸发仪。具体步骤:[font='宋体']①[/font]叶绿素的提取称取30 g 剑麻膏于250 mL的三口烧瓶中,用 85% 的乙醇在 60 ℃水浴锅中提取3 h。提取液减压浓缩,得到含有叶绿素的提取膏状物。加入丙酮,萃取叶绿素,回收丙酮,得到叶绿素膏状物。[font='宋体']②[/font]叶绿素铜的制备 叶绿素加入少量乙醇溶解,用 10%的盐酸调 pH 为酸性,这时溶液由绿色变成黄褐色,酸化脱镁 45 min 后,边搅拌边加入10%CuSO[font='calibri'][size=13px]4[/size][/font]溶液进行铜代,有絮状沉淀生成,抽滤,用热水反复洗涤,得叶绿素铜。[font='宋体']③[/font]叶绿素铜钠盐的制备 叶绿素铜用少量乙醇溶解,加入 10% NaOH 溶液,75 ℃皂化 1 h,加入等量的石油醚,充分摇动,静置分层。除去上层黄色的叶黄素等脂溶性杂质,将下层深绿色的叶绿素铜钠盐收集于小烧杯中,水浴蒸干水分,在 60 ℃下烘干,即得目标产物。 该文献还讨论了酸化脱镁的条件优化,他们发现,叶绿素铜的产率随着溶液 pH 的增大而逐渐减小,pH>3时,产率下降。说明当 pH较大时,酸度不够,一部分叶绿素卟啉环中的镁离子没有脱落下来,导致叶绿素铜得率下降。所以,以pH =3 为宜。对于[font='fzktk--gbk1-00'][size=13px][color=#000000]酸化时间对叶绿素铜得率的影响[/color][/size][/font][font='fzktk--gbk1-00'][size=13px][color=#000000],研究发现[/color][/size][/font][font='ssj4'][size=13px][color=#000000],[/color][/size][/font]酸化时间超过 60 min 时,叶绿素铜的产率增大不太明显,说明酸化反应基本完成。为了节约实验时间,酸化时间以 60 min 为宜。对于酸化温度对叶绿素铜得率的影响,发现叶绿素铜得率在45-65℃随着酸化温度的升高呈上升趋势在65-85 ℃产率变化不大,超过85 ℃时,产率突然下降。可能是高温使叶绿素铜中的环状结构氧化,四吡咯环破坏而被降解,使叶绿素铜的产率降低。所以,酸化温度以65℃为宜。对于加铜量对叶绿素铜得率的影响,研究发现随着硫酸铜量的增加,叶绿素铜的得率增加,加入量大于 15 mL 时,增大幅度不明显,基本保持稳定。实验过程中还发现,加铜量太多时,溶液中游离铜的量也会增多,会延长叶绿素铜的洗涤时间。考虑到实验效率和能耗问题,加铜量以15 mL为宜。对于铜代时间对叶绿素铜得率的影响,研究发现叶绿素铜的得率随着铜代时间的延长呈增大趋势,铜代时间超过2h时,叶绿素铜得率的增大幅度不大。所以,铜代时间以2h为宜。对于皂化温度对叶绿素铜钠盐得率的影响,叶绿素铜钠盐的产率随着皂化温度的升高不断提高,当温度高于85℃时,产率稍有下降,这可能是因为生成的叶绿素铜钠盐在较高的温度下会部分分解,导致产率下降,为了保证叶绿素铜钠盐的质量,皂化温度选择75 ℃为宜。对于皂化时间对叶绿素铜钠盐得率的影响,研究发现叶绿素铜钠盐的得率随着皂化时 间的延长而增大,≥60 min 后得率趋于稳定。皂化时间较短时,用石油醚萃取的过程中,分层不明显,醚相呈绿色,说明没有皂化完全。所以,皂化时间以60 min 为宜。对于pH 对叶绿素铜钠盐得率的影响,研究发现,当pH>11 时,叶绿素铜钠盐的得率趋于稳定,在实验过程中发现,当 pH为9或10时,用石油醚萃取酯溶性物质时,界面会有固体颗粒,分层界面不清晰,醚相为绿色,这都是因加碱量不够,导致皂化不完全。所以,皂化时以pH = 12为宜。该文献还对叶绿素铜钠盐的性质进行了探究。对于耐光性,研究表明叶绿素铜钠盐在强光下不稳定,但与叶绿素相比,已经大大提高了耐光性。对于耐热性,实验结果为在90 ℃以内,叶绿素铜钠盐的吸光度基本保持不变,颜色均为绿色 温度高于90 ℃时,吸光度开始有下降趋势,但幅度不大,即使是在110 ℃时,叶绿素的保存率也为96.9%,说明叶绿素铜钠盐的耐热性还是比较理想的,可添加到处理温 度在100 ℃以内的食物中。对于耐酸碱性,从实验数据可以看出溶液的吸光度随着pH的增大而升高,pH在3~6 范围内,吸光度变化幅度不大,溶液颜色呈土绿色 pH = 7时,吸光度值有个比较大的跳跃 在 7~12 范围内,吸光度的变化幅度也不太大,溶液颜色呈碧绿色。在实验过程中发现,当 pH<3时,溶液中会出现大量沉淀,这可能是因为叶绿素铜钠盐在强酸条件下生成了不溶于水的叶绿素铜酸 当pH>11时,因碱性太强,加速脱酯反应,使叶绿素分解,溶液的吸光度迅速下降,但在碱性条件下,因不发生脱镁或碳环裂解反应,却能保持相对稳定的色泽,在使用中只要控制溶液 pH 值在近中性或偏碱水平,就能基本维持叶绿素铜钠盐的稳定性。综上可以得出,采用先铜代后皂化的方法制备叶绿素铜钠盐,即叶绿素提取出来后先脱镁铜代,增加中间产物的稳定性,在后续操作中,不必考虑因温度太高或时间太长而使叶绿素分解的问题,从而提高了产品的产率和纯度。从剑麻膏中萃取制备叶绿素铜钠盐的优化条件是: 酸化时 pH = 3,酸化时间 60 min,温 度 65 ℃ 铜代时硫酸铜加量1.5 g,时间2h 皂化时温度 75 ℃,时间 60 min,pH = 12。在此条件下,产率为 4.46% ,产品为墨绿色粉末,略带氨臭,易溶于水,水溶液呈绿色透明澄清液,微溶于或不溶于乙醇、乙醚、丙酮、氯仿等有机溶剂,有Ca[font='calibri'][size=13px]2+[/size][/font],Mg[font='calibri'][size=13px]2+[/size][/font]存在时,产品中会有少许白色沉淀,在空气中容易吸潮,应隔绝空气保存。[font='黑体'][size=18px]三、含量测定[/size][/font]3.1试剂与材料氢氧化钠乙酸铵甲醇冰乙酸聚酰胺粉:粒径0.150mm~0.180mm。3.2试剂配制氢氧化钠溶液(4mol/L):称取16.0g氢氧化钠,用水溶解并定容至100mL。氢氧化钠溶液(0.1mol/L):称取0.40g氢氧化钠,用水溶解并定容至100mL。乙酸铵缓冲溶液(0.2mol/L):称取7.708g乙酸铵,用水溶解并定容至500mL。解吸液:0.1mol/L氢氧化钠溶液+甲醇=1+10(体积比)。3.3标准溶液配制精确称取经105℃±1℃干燥至恒重并按其纯度折算为100%质量的叶绿素铜钠标准品0.0500g,用水溶解并定容至100mL棕色容量瓶中,此溶液浓度为500μg/mL,当天配制,避光保存。3.4标准工作溶液准确移取500μg/mL标准溶液10mL至100mL烧杯中,加入0.2mol/L的乙酸铵溶液30mL,用4mol/L氢氧化钠溶液和冰乙酸调pH5~6。加入3.0g聚酰胺粉,充分搅拌2min,避光静置5min用约20mL蒸馏水转移至 G3砂芯漏斗中抽滤,弃去滤液。用75mL 解吸液分3次解吸色素:每次倒入约25mL解吸液,浸泡2min,再振摇2min,抽滤并用20mL解吸液洗净抽滤瓶中残液。收集滤液,用解吸液定容至100mL,配制成浓度为50μg/mL的标准溶液,此溶液临用时配制。[font='e-bz'][size=12px][color=#000000] [/color][/size][/font]3.5被测样品溶液后期处理向含有被测样品粉末或样品浆液的100mL烧杯中加入0.2mol/L的乙酸铵溶液30mL,溶解并混匀样液,用4mol/L氢氧化钠溶液和冰乙酸调pH5~6。加入3.0g聚酰胺粉,充分搅拌2min。将样品溶液用约20mL60 ℃±2 ℃蒸馏水转移至 G3砂芯漏斗中抽滤,弃去滤液。再用75mL 解吸液分3次解吸色素,抽滤并用20mL解吸液洗净抽滤瓶中残液,收集滤液,用解吸液定容至100mL。3.6仪器条件测定波长:405nm。比色皿:1cm。3.7标准曲线的制作分别取标准工作液0mL、5.0mL、10mL、20mL、30mL、40mL、50mL至100mL容量中,用解吸液稀释至刻度,配制成浓度为 0μg/mL、5μg/mL、10μg/mL、20μg/mL、30μg/mL、40μg/mL、50μg/mL的标准系列。以0μg/mL溶液为空白,测定其吸光值。以浓度为横坐标,以吸光值为纵坐标绘制标准曲线。试样溶液的测定取经过前处理的样品的制备液,以标准曲线的0μg/mL为空白,测定其吸光值,根据标准曲线获得样品溶液中叶绿素铜钠的浓度。本标准检出限为0.001g/kg,定量限为0.005g/kg。3.8总铜含量试样处理[align=left][font='宋体'][size=13px][color=#000000]准确称取 [/color][/size][/font][font='times new roman'][size=13px][color=#000000]0.1g [/color][/size][/font][font='宋体'][size=13px][color=#000000]试样,精确至 [/color][/size][/font][font='times new roman'][size=13px][color=#000000]0.000 2g[/color][/size][/font][font='宋体'][size=13px][color=#000000],置于硅皿中,在不超过 [/color][/size][/font][font='times new roman'][size=13px][color=#000000]500[/color][/size][/font][font='宋体'][size=13px][color=#000000]℃下灼烧至无碳,用[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=13px][color=#000000]1[/color][/size][/font][font='宋体'][size=13px][color=#000000]滴[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=13px][color=#000000]~2 [/color][/size][/font][/align][font='宋体'][size=13px][color=#000000]滴硫酸湿润,再次灰化。用质量分数为[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=13px][color=#000000]10%[/color][/size][/font][font='宋体'][size=13px][color=#000000]的盐酸溶液分[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=13px][color=#000000]3[/color][/size][/font][font='宋体'][size=13px][color=#000000]次(每次[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=13px][color=#000000]5mL[/color][/size][/font][font='宋体'][size=13px][color=#000000])煮沸溶解灰分,并过滤[/color][/size][/font]于100mL容量瓶中,冷却后用水定容至刻度,此为试样液。测定[align=left][font='宋体'][size=13px][color=#000000]除试样处理外,其他步骤按[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=13px][color=#000000]GB/T 5009.13[/color][/size][/font][font='宋体'][size=13px][color=#000000]规定的方法测定。[/color][/size][/font][/align]游离铜含量3.9试样处理[align=left][font='宋体'][size=13px][color=#000000]准确称取[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=13px][color=#000000]0.1g[/color][/size][/font][font='宋体'][size=13px][color=#000000]试样,加水约[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=13px][color=#000000]50mL[/color][/size][/font][font='宋体'][size=13px][color=#000000]溶解后,用[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=13px][color=#000000]1mol/L [/color][/size][/font][font='宋体'][size=13px][color=#000000]盐酸调节[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=13px][color=#000000]pH[/color][/size][/font][font='宋体'][size=13px][color=#000000]至[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=13px][color=#000000]4.0[/color][/size][/font][font='宋体'][size=13px][color=#000000],定容至[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=13px][color=#000000]100mL[/color][/size][/font][font='宋体'][size=13px][color=#000000],过 [/color][/size][/font][/align][align=left][font='宋体'][size=13px][color=#000000]滤,此为试样液。[/color][/size][/font][/align]测定[align=left][font='宋体'][size=13px][color=#000000]除试样处理外,其他步骤按[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=13px][color=#000000]GB/T 5009.13[/color][/size][/font][font='宋体'][size=13px][color=#000000]规定的方法测定。[/color][/size][/font][/align]参考文献[align=left][font='宋体'][size=13px][color=#000000]【1】韩敏.直接皂化法制备叶绿素铜钠盐[J].应用化工,:,2014.43(4):704-707.[/color][/size][/font][/align][align=left][font='宋体'][size=13px][color=#000000]【2】赖海涛.螺旋藻制取叶绿素铜钠盐的稳定性研究[J].化学工程与装备,:,2020.3(3):14-15.[/color][/size][/font][/align][align=left][font='宋体'][size=13px][color=#000000]【3】李祥.剑麻膏中叶绿素铜钠盐的制备及性能测定[J].应 用 化 工,:,2018.47(2):262-267.[/color][/size][/font][/align][align=left][/align][align=left][/align][align=left][/align]
各位同仁: 本人这次要测一水体的叶绿素含量。以前没做过,没经验也没资料。能否给我提供一份全面的有关水体叶绿素测定的资料(国家标准)。谢谢!
我是分子荧光的新手,现在单位买了一台日立F-4500,不知道?还需要?资料和辅助才能做叶绿素叶绿素a(Sigma公司)的标准那里有卖啊?
我们准备扩叶绿素a,标准要求离心用15ml玻璃离心管,但公司买的离心机15ml规格的只有pp管(按参数定制了玻璃管也放不进去),想问下各位有没有类似的情况,能不能用pp管做,谢谢
各位同仁: 本人这次要测一水体的叶绿素含量。以前没做过,没经验也没资料。能否给我提供一份全面的有关水体叶绿素测定的资料(国家标准)。谢谢!
我现在在做水样的叶绿素测定,用的是第四版的分光光度法,有做叶绿素a测定的吗?大家一起交流交流,一起进步。
刚开始接触叶绿素的测定,发现标准上用的滤膜都为水相的,我国常用的是醋酸纤维滤膜,会溶于丙酮,增加浊度。为什么不用有机膜呢?是机理上有什么问题吗?我用有机膜试了一下,貌似效果也挺好的,请大家帮我解疑~~~~[img]http://simg.instrument.com.cn/bbs/images/brow/em09511.gif[/img]
分析叶绿素a的高速离心机有什么具体参数要求?叶绿素荧光仪能否直接测叶绿素a ?国家环保局认可吗?
叶绿素测定仪是一种用于测量植物或其他生物样品中叶绿素含量的仪器。叶绿素是植物中的关键色素之一,它在光合作用中扮演着重要的角色,将光能转化为化学能。测定叶绿素含量可以用来评估植物的生长状况、健康状态以及光合作用效率。 叶绿素测定仪在许多领域都有广泛的应用,主要涉及到植物生长、生态系统研究、环境监测和农业等。以下是叶绿素测定仪的一些主要应用范围: 植物生长与健康评估: 叶绿素测定仪可以用于评估植物的健康状况和生长状态。通过测量叶绿素含量,可以推断出植物的光合作用活性、养分吸收能力以及受到的环境影响。 农业领域: 叶绿素测定仪在农业中被用来监测作物的生长情况和健康状态。这有助于决定适宜的施肥、灌溉和其他农业管理措施,以提高农作物产量和质量。 生态学研究: 叶绿素测定仪在生态系统研究中非常有用。通过对植物叶片和水体中叶绿素的测量,可以了解生态系统的光合作用活动、能量流动和生态链的结构。 水质监测: 叶绿素测定仪可用于评估水体中的藻类和蓝藻数量,从而判断水体的富营养化程度和水质。这对于保护水体生态平衡和提供饮用水质量至关重要。 环境污染监测: 叶绿素测定仪可以用于检测污染物对植物生长和光合作用的影响。它们可以帮助监测工业排放、空气污染和土壤污染等对环境的影响。 生物学研究: 叶绿素测定仪在生物学领域中用于研究不同生物体中叶绿素的含量和分布,如藻类、植物、海洋生物等。 教育与科普: 叶绿素测定仪也可用于教育和科普活动,帮助人们理解光合作用的基本原理以及叶绿素在生态系统中的作用。 总之,叶绿素测定仪在植物学、生态学、环境科学、农业和生物学等多个领域中都发挥着重要作用,帮助人们更好地了解和评估生态系统、植物健康和环境状况。
针对“水质 叶绿素a 的测定 分光光度法 HJ 897-2017”同事最近在纠结叶绿素a测加标回收率的问题,因为水样是要抽滤的,即溶解态的所有物质,均会通过滤膜。如果固态的标准品,经丙酮溶解后就变成溶解态了,再加入水样,也是溶解态,过滤时能被滤膜截住?而叶绿素a的测定,却是收集滤膜,加丙酮后浸提,再测定还有就是,常见的地表水(I-III类),叶绿素a含量都很低,观察发现滤膜截住的藻类非常少,如果研磨的话,很容易残留在研钵的内壁,损失会很严重,如果按照标准进行研磨,怎么保证准确度?[b][color=#ff0000]看了编制说明,是全程序加标[/color][color=#ff0000][img=,690,145]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/02/201802281634537558_2167_1880649_3.png!w690x145.jpg[/img][/color][/b]
公司生产的一种野菜用到叶绿素铜钠盐作为着色剂,但是客户检测说是只检测到叶绿素铜。请问由钠盐向叶绿素铜怎么转化?(产品为酸性,pH值4.0-4.6)是不是酸碱反应呢?请给出比较有说服力的依据,谢谢!
最近我单位要采购叶绿素测定仪,用于水库和湖泊中叶绿素测定,那位兄弟提供点资料