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科技日报讯 据物理学家组织网近日报道,美国斯克里普斯研究所开发出一种“液体活组织检查”技术,通过检查血液中有没有一种叫做循环内皮细胞(CECs)的特殊标记,能确认病人是否处于心脏病发作的高风险中。相关论文发表在最新一期的英国物理学会(IOP)刊物《生物医学》上。 血管内皮细胞排列在动脉壁上,当它们在血液中循环时,就和心脏病发作的进程密切相关。研究人员认为,这些循环内皮细胞所到之处会出现病变斑块、组织断裂和溃疡,造成动脉发炎。这些损害会形成血管阻塞,妨碍血液在动脉中流通,最终导致心脏病发作。 预测检查技术的原理是用健康的对照组来识别循环内皮细胞(CECs),并找出那些最近曾因心脏病发作而接受过治疗的病人。为此,研究人员开发出一种叫做“高清循环内皮细胞”(HD-CEC)化验的程序,探测并描绘出79名病人血液样本中的CEC特征。这些病人已经历过一次心脏病发作。他们用了两个控制对照组作为对比,包括25个健康人士和7个身患血管病并经过治疗的病人。该检测能从外形上以及循环内皮细胞与特殊抗体的反应中识别出它们,经过心脏病发作的人循环内皮细胞水平明显升高。 “在经历一次心脏病发作后,病人体内能可靠地探测到循环内皮细胞,而健康对照组中却没有。研究论文的目标是建立证据,我们已成功做到了这一点。”负责该研究的斯克里普斯研究所副教授彼得·库恩说,“相比于健康对照组,我们的结果非常明显。下一步就是要评估这项检测在心脏病发作早期识别中的有用性了。” 研究人员认为,这种技术现已能对那些显出征兆但尚未心脏病发作的人进行检测。此前尚无针对心脏病的预测检查,至少预测准确性无法令人满意。 他们还把检测结果与一种已经商业化的CellSearch检查进行了对比,CellSearch已获美国食品和药物管理局批准,用于检查癌症病人肿瘤细胞的数量。HD-CEC测试对循环内皮细胞显示出了更高的特异性,因为它用的是直接分析法,避免了浓缩阶段的偏差。“我们的检测能有效分析数百万个细胞,效率更高,但要保证你分析的是病人所有的可疑细胞。”(常丽君)来源:中国科技网-科技日报 2014年01月21日
作为一只刚进实验室的菜鸟把自己遇到的东东总结一点发出来,抛砖引玉吧,为即将进实验室的朋友些资料,同时欢迎老鸟们指正。1、在实验室登记领试剂和药品pbs 1640 Gbico的FBS 台盼蓝 计数板 酒精灯 胶塞 封口胶 消毒的喷剂 记号笔 镊子 标签 饭盒 消毒时包饭盒的布 冻存管 冻存剂 离心管 培养瓶 6孔板 96空板 吸管 吸球。pbs 1640 Gbico的FBS 我都是买的现成的,就是那些实验室老师用原料配好了来卖的那种,我是害怕自己本来就是一个新手,为省那钱自己配,别污染了多的事情都来了,当然很多老鸟都自己配,别鄙视我哈。2、换液a 开瓶盖的时候,网上的视频里是用镊子开的,但是现在用的瓶塞多是新的,稍微一使劲,胶塞就会被扯破(我这周换了好多塞子了),扯破了的塞子把瓶子包不住,有污染的危险,特别是冰箱里试剂装得很拥挤的时候。方法:切忌男生像我一样用力过猛,如果实在要扯烂,干脆就用手去扯塞子,不过严格按照翻起塞子-烧-扯-再烧就是了,完全没有污染的顾虑b 加液体的时候很很容易就吸到赛棉花那一截去了(很多熟练的都不塞棉花了,他们力度控制得好,只要不吸过头,完全ok的),这时候,就不要再吝惜你的培养基了,全部甩到废液缸里去吧,毕竟吸球没有消毒(我们这里是这样的哈),浸湿过了棉花就可能沾到吸球。c 往培养瓶里加pbs、FBS等液体时候,手抖得厉害。不是滴在瓶口,瓶壁上,就是滴在超净台上。方法:滴在瓶口的一定要烧干,不然小心污染,瓶壁和台子上的可以用消毒后的干净纱布擦拭;另外就是自己找个空瓶子,自己练习加液体,熟能生巧。3、传代a 消化细胞的时间真的是不同细胞就不同,我的细胞是消化5分钟,还是在孵箱里放着的,拿出来以后还要又拍又晃的,朋友的一分钟就全飘起来了,如果你是第一次做,或者你们实验室没有做过这个细胞,您就最好一直在镜下看着细胞,摸一下时间(用表记录时间,不光是“摸”哈),消化过头的细胞,长得不好,如果你是外面买的细胞,就又可能浪费经费了。另外,认真分析了一下,我的癌细胞稍微比朋友的正常组织的细胞消化得慢,他的细胞长得慢,细胞少(毕竟正常细胞不能和癌细胞比),3天才传第一代,我的都2代的瓶子了都铺满60%,他的贴的也不怎么紧。b 离心离心的时候,因为忙着把刚终止了消化的细胞拿去离心,很容易忘记在您的离心管上标记,配平完了,机子都转到1000转了,才想起来,也没法子了。方法:实在是忘记了标记,用于配平的管子里的液体没有你刚做完消化的液体清亮,你反正选最清亮的那个就是了。c 分装的时候,我一传3,加上离心管的盖子,满桌子都是瓶盖,很容易搞错,尤其是在和别个拼台子做实验的时候,更是拥挤,千万要放好,不然空间一拥挤,你取东西的时候很容易从这些面朝上的盖子塞子上面经过,就有可能污染了,虽然盖盖子的时候还要过火烧,但是说实话,烧那几下,连手指都烧不烫,咱还是从不污染的角度做起吧。4、我犯其他的傻a 进细胞间去照台子(说实话,是去抢台子,别人要是紫外照起了,就只能等他们做完再照,就又要等半小时),结果口罩帽子都忘记了带,挨了顿批评。b 吸管在酒精灯上过火烧几次的时候,吸管尖碰在了灯芯旁的酒精瓶铜的那部分。c 倒老的培养液的时候才发觉,废液缸没拿进细胞间。跑出去再拿。记得重新消毒手,而且我离开台子的时候,很怕其他人经过污染我已经打开了的各个试剂的瓶子。不放心的只有盖好再走,再进来时再从头弄,浪费时间。5、其他要注意的问题a 我看见也是个新进实验室的女生,双手悬在空中费劲的塞胶塞(估计也是新胶塞,太紧了,塞不大进去),结果手一滑,整瓶胰酶倒在超净台上。(还好不是加GbicoFBS的1640,呵呵),倒了记得把台子擦干净,上次不知道是谁把什么有机溶剂都倒在台子上了,我一去,还沾手,郁闷,自己做好自己分内的,别让实验室里其他的人说你是个污染源或者细胞杀手。b 某天朋友准备换液,结果就把培养基pbs胰酶全都放在37摄氏度水浴里,结果后来有事走了,只把照台子时候放那的东西收拾了,5个小时后才突然想起,只好暂时不用那个培养基了,重新再用新的。养到后面细胞多了,不怕细胞死的时候,还是可以试验着用用那瓶培养基的。
目前血细胞分析仪检测原理包括电学和光学两种,电学包括电阻抗法和射频电导法,光法包括激光散射法和分光光度法。电阻抗法根据Coulter原理及血细胞非传导的性质,以电解质溶液中悬浮的血细胞在通过计数小孔时引起的电阻变化进行检测为基础,进行血细胞计数和体积测定。当有细胞通过小孔时,由于电阻增加,于瞬间引起电压变化及通过脉冲。细胞体积越大,脉冲振幅越高,细胞数量越多,脉冲数量也越多。脉冲信号经过:放大、阈值调节、甄别、整形、计数而得出细胞技术结果。电阻抗法可准确量出细胞(或类似颗粒)的大小,是三分类血液分析仪的主要应用原理,并与光学检测原理组合应用于五分类血液分析仪中。激光散射法应用了流式细胞术检测原理及细胞通过激光束被照射时,产生与细胞特征相应的各种角度的散射光。对经信号检测器接受的散射光信息进行综合分析,即可准确区分正常类型的细胞。激光散射法在区别体积相同而类型不同的细胞特征时,比电阻抗法分群更加准确。故激光散射法已成为现代五分类血液分析仪的主要检测原理之一。射频电导法是用高频电磁探针渗入细胞膜脂质可测定细胞的导电性,提供细胞内部化学成分、细胞核和细胞质、颗粒成分等特征信息。射频电流是每秒变化大于10000次的高频交流电磁波,能够通过细胞壁。分光光度法是所有类型的血细胞分析仪检测血红蛋白的原理,它利用血红蛋白与溶血剂在特定波长下比色,吸光度的变化与液体中血红蛋白含量成比例。