超声波细胞粉碎机经常报警是怎么回事?
我知道超声波细胞粉碎机和超声波细胞破碎仪是一回事,那么它和超声波均质机有什么区别?还是就是一回事?http://simg.instrument.com.cn/bbs/images/brow/em09512.gif
我用QuEChERS法,先用食品加工器将蔬菜打为浆状,再加入乙腈以及其他的药品,在上离心机之前要用到匀浆机,实验室没有,可以用超声波细胞粉碎仪代替吗?
[color=#444444]各位好,我现在接触一个新样品,标准方法需要用到超声波细胞粉碎仪来提取,可是我们实验室只有昆山的超声清洗仪,请问各位大侠,能用它来代替吗?样品不多,实在不想专门买一台仪器了,两者有什么区别?谢谢[/color]
超声波细胞破碎仪是利用超声波在液体中的分散效应,使液体产生空化的作用,从而使液体中的固体颗粒或细胞组织破碎。常规使用方法是把要破碎的材料放到烧杯中,开电源设定时间(震动时间和间歇时间),将破碎仪的探头放到材料中。使用过程中,超声波发生器电路将50/60Hz的市电转换成18-21KHz的高频高压电能,因此破碎过程中会大量产热,一般在冰浴下破碎。超声波细胞破碎仪的两大组成部件为超声波发生器和换能器(有的配置有隔音箱)。1、超声波发生器:工作原理:由信号发生器来产生一个特定频率的信号,这个特定频率就是换能器的频率,一般应用在超声波设备中的超声波频率为20KHz、25KHz、28KHz、33KHz、40KHz、60KHz。2、换能器组件:换能器组件主要由换能器和变幅杆组成。3、隔音箱:可以有效地的降低工作过程中的所发出的噪音,保持实验室安静。超声波细胞破碎仪在我国的行业推广已进入成熟阶段,而应用仍不够普及!该仪器(设备)应用范围非常广泛,这是其它仪器设备所不能比拟的。也正因如此,该仪器(设备)的市场潜力很大,所以生产厂家也日趋增多,这也同时造成了超声清洗行业及市场的相对混乱,可以用八个字来形容“鱼龙混杂,良莠不齐”!超声波细胞破碎仪分类如下:一、按探头(“tip”)直径分类处理不用体积的样品需要选择不同“tip”头的超声波破碎仪。由于各制造厂家的产品结构不同,其“tip”头直径不尽相同。一般“tip”头从微量5mm(适合1ml处理量)到25mm(适合1000ml处理量),有连续流探头,处理量可达80升/小时。可能会发生磨损的高能应用中会用到可更换“tip”头。当能量通过“tip”头被传递时,金属表面留下痕迹的地方会发生腐蚀。随着时间的推移,发生腐蚀的地方会产生轻微的蚀损斑。“tip”头可以用砂纸或纱布来打磨,除非是损坏到一定的程度;当这种情况发生时,“tip”头将很难进行调谐频率,取而代之的可能是发出长而尖的噪音,最终产生裂纹。 要有效地加工给定剂量的样品,有两个主要的因素需要考虑:“tip”头尺寸和输出功率。这两个因素必须同时匹配才能获得最佳效果。小功率大“tip”头,则“tip”头无法工作;而太大的功率则“tip”头可能损坏。购买时请注意所需型号附件。二、按功率分类超声波细胞破碎仪的功率大小是客户的首选指标,它决定着被破碎物的数量、大小、质量及效果。所以各生产厂家对此指标也都非常重视。一般情况下,实验室、化验室、研究所、药品检验所等科研单位,使用的功率都不大,(一般在500W以下);而生物公司、制药厂、化工企业等生产单位,所用的功率大都在500W-2000W左右。由于各制造厂家的产品结构不同,其功率的标注方法也不尽相同。不过按照用户常用的惯例,一般有以下几种:50W、100W、150W、250W、300W、350W、500W、1000W、2000W。一般超声波细胞破碎仪输出功率可根据需要适度调节。 标准超声波细胞粉碎机产品的额定工作频率是20千赫兹。一些超声波细胞粉碎机有自动调谐功能可以使频率在一个小的范围内变化。
细胞,生活中无处不在,我们身体里有细胞:脑细胞,造血细胞……路边的小草也有细胞,就连我们看不到的细菌都是细胞构成的。细胞与生活息息相关,所以说细胞决定人类健康。 [b][url=http://www.xo-yq.net/]智能超声波细胞破碎仪[/url][/b],一款将电能通过转换器变成声能,然后这种能量通过液体介质而变成一个个小气泡,这些小气泡会在短时间内迅速炸裂,产生能量,从而起到破碎细胞的作用。 生病是人之常情,免不了吃药。药品是怎么来的呢? 首先通过观察细菌,通过分析细菌的组成,然后讲细胞提取出小部分,导入化合物,最后确定候选物,漫长的过程肯定需要[b]智能超声波细胞破碎仪[/b]啊。 南京先欧科技,专业制造[b]智能超声波细胞破碎仪[/b],[b]超声波细胞粉碎机、裂解仪[/b]……[img=智能超声波细胞破碎仪,50,50]http://www.xo-yq.net/img/%E6%99%BA%E8%83%BD%E8%B6%85%E5%A3%B0%E6%B3%A2%E7%BB%86%E8%83%9E%E7%A0%B4%E7%A2%8E%E4%BB%AA.jpg[/img]
如题,衬管一般超声洗多久呀?多大频率?实验室只有超声波细胞破碎仪,可以用这个来洗衬管吗?谢谢`
超声波细胞破碎仪是利用一种超声波在液体中产生的空化效应而使目标细胞破碎的多功能、多用途的仪器。超声波细胞破碎仪的原理:由换能器将电能转换为超声能,超声能量作用于液体介质产生密集的空泡,随着空泡的生长破裂,产生巨大的剪切力及高温高压,从而起到将目标细胞破碎乳化的目的。超声波细胞破碎仪用途广泛:1、超声波提取生物纳米在超声波化学反应中,由空化效应产生的强压力脉冲,能够产生许多化学合成所要求的高温高压,超声波化学合成所利用的正是空化效应的能量,利用这些能量能在一些特殊粉末表面合成出需要的纳米粒子。 2、超声波制药(1)注射用药的细化、均化——将磷脂类与胆固醇混合用适当方法与药物混合在水溶液中,经超声细化、均化得到更小的利于静脉注射的微小药物粒子。(2)中草药提取——利用超声分散破坏植物组织,加速溶剂穿透组织作用,提高中草药有效成分提取率。如金鸡纳树皮中全部生物碱用一般方法侵出需5小时以上,采用超声分散只要半小时即可完成。(3)制备混悬剂——在超声空化和强烈搅拌下,将一种固体药物分散在含有表面活性剂的水溶液中,可以形成1um左右口服或静脉注射混悬剂。例如“静注喜树碱混悬剂”、“肝脏造影剂”、“硫酸钡混悬剂”等。(4)疫苗制备——将细胞或病菌借助于超声作用将其杀死以后,再用适当方法制成疫苗。 3、超声波对化妆品的分散为了更进一步提取药物精华和粒子微细化,并节约生产成本,达到分散、乳化效果,使化妆品更深入渗透到肌肤里层,让肌肤很好的吸收,发挥药物的效力和作用,采用超声波乳化可达到非常理想的效果。 4、超声波对酒的醇化酒味醇厚的主要影响因素是酸的形成、酯化。刚出厂的白酒含有戍醇,有辛辣味,传统制造时,这种气味要经过很长时间贮藏才能使酒味变醇。而利用超声波处理的白酒可使酒的老熟时间缩短1/3到1/2。超声波细胞破碎仪可以并且已经被广泛用于生物化学、微生物学药理学、物理学、动物学、农学、医学、制药等领域的教学、科研、生产。
[b][url=http://www.f-lab.cn/cell-disruptors/sonic-2000wt.html]温控高功率超声波细胞破碎仪SONIC-2000WT[/url][/b]是一种利用超声波探针在液体中产生空化效应的而制成的Sonicator[b]温控型号高功率超声波细胞破碎均质仪器[/b],具有温度显示控制功能避免样品过热,广泛用于细胞均质破碎,由超声波发生器,超声波转换器和超声波探针均质器件构成。用于多种动植物、病毒、细胞、细菌及组织的破碎,可用来乳化、分立、裂解、匀化、提取、消泡、清晰、纳米材料的植被、分散及加速化学反应等。由超声波发生器,转换器和探针组成,具有温度检测器供选配,[img=超声波均质器]http://www.f-lab.cn/Upload/SONIC-1200W.jpg[/img]采用LCD屏清晰显示左右操作参数和选项:温度,时间,输出功率等,具有温度显示控制功能避免样品过热损坏[b]超声波细胞破碎仪:[url]http://www.f-lab.cn/cell-disruptors.html[/url][/b]
超声波细胞破碎仪是一种利用超声波在液体中产生空化效应的多功能、多用途仪器;用于多种动植物、病毒、细胞、细菌及组织的破碎,同时可用来乳化、分立、裂解、匀化、提取、消泡、清晰、纳米材料的植被、分散及加速化学反应等。主要技术参数:1.超声功率常用超声输出功率有150W、250W、650W、1000W、1200W、1800W不等,亦有功率可调类型。因此超声破碎仪可以按照功率大小分150W到1800W等各个型号; 2.破碎容量超声波细胞破碎仪的破碎容量有0.5-500ml、0.5-600 ml、10-100 ml、50-1000 ml、550-1200 ml不等,所配破碎杯根据实验样品的量选择;一般根据超声功率和破碎容量即可选定型号。 3.温度控制一般超声输出功率650W以上都配有温度控制功能,可以防止样品过热破坏样品;4.控制面板控制面板有传统的旋钮式操作面板与较先进的大屏液晶显示两种类型,液晶显示操作简便,并带有程序存储功能。
超声波细胞破碎仪和普通的超声波清洗器有什么区别么?还是都是一样的频率,实验室超声波清洗器可以代替超声波细胞破碎仪做叶绿素的实验吗?
[align=center][size=16px][color=#000000]【仪器心得】:[/color][/size][size=16px][color=#000000]JYD-L[/color][/size][size=16px][color=#000000]超声波细胞粉碎机使用心得[/color][/size][/align][color=#000000]该仪器可广泛应用[/color][color=#000000]环境、生物领域,可进行半挥发性有机物萃取、动植物、病毒、细胞、细菌及组织的破碎等前处理。[/color][color=#000000]1[/color][color=#000000].[/color][color=#000000]操作步骤[/color][color=#000000]1[/color][color=#000000].1 [/color][color=#000000]确保仪器电源线已正确连接,打开仪器后面电源开关,等待仪器自检完毕,即可使用。[/color][color=#000000]1[/color][color=#000000].2[/color][color=#000000]方法编辑[/color][color=#000000] [/color][color=#000000]?左移按键[/color][color=#000000]在设置状态时,按下此键可从[/color][color=#000000]LCD[/color][color=#000000]显示屏下排右边起向左选择移位,移到所需要设定的一位,该位数据闪烁,表示该位数据可以改变。在运行和暂停状态时,此键不起作用。[/color][color=#000000]▼减或下翻键[/color][color=#000000]在设置状态时,如果无数据位闪烁,按下此键可向下依次翻出所存储的程序数据。如果有数据闪烁,按下此[/color][color=#000000]键可是[/color][color=#000000]闪烁数据位的数据减[/color][color=#000000]一[/color][color=#000000],从[/color][color=#000000]9[/color][color=#000000]~[/color][color=#000000]0[/color][color=#000000]循环。[/color][color=#000000]在运行状态时,按下此键可使功率调整值减[/color][color=#000000]一[/color][color=#000000]。直至减为[/color][color=#000000]0[/color][color=#000000]止。[/color][color=#000000]●运行或停止按键[/color][color=#000000]设置状态和运行状态的工作状态切换按键。在设置状态时,按下此键可以进入当前程序的运行状态;在运行状态下,按下此键则终止当前程序的运行,切换到设置状态。[/color][color=#000000]▲加或上翻按键[/color][color=#000000]在设置状态时,如果无数据位闪烁,按下此键可向上依次翻出所存储的程序。如果有数据位闪烁,按下此键可使闪烁的数据加一,从[/color][color=#000000]0[/color][color=#000000]~[/color][color=#000000]9[/color][color=#000000]循环。[/color][color=#000000]在运行状态时,按下此键可使功率调整加一。直至加到[/color][color=#000000]99[/color][color=#000000]为止。[/color][color=#000000]?右移或暂停按键[/color][color=#000000]在设置状态时,按下此键可从上排显示器左边起向右选择移位,移到需要设定的一位,该位数据闪烁,表示该位数据可以改变。[/color][color=#000000]在运行状态时,按下此键可进入或退出暂停状态。[/color]1.3 样品超声萃取将需要超声萃取的样品预先放入合适的容器内。打开箱门,将换能器插入样品容器内,前端探头放入水位上1/3处,关上箱门,按[color=#000000]●开始运行。[/color]1.4关机步骤使用结束后,关闭仪器后侧电源开关,并将换能器取出用清水清洗、干燥并妥善保存。 2.日常使用维护保养2.1每次仪器结束工作时,应保持超声波发生器、换能器组件清洁,可使用软布沾清水擦拭。2.2长期不工作时,取出换能器组件洗净、干燥并妥善保存。2.3 使用中若发现变幅杆末端被空化腐蚀而发毛,可使用油石或锉刀锉平,否则会影响工作效果。3.仪器使用注意事项 3.1温度保护设置点必须比室温或样品温度高5℃以上,否则仪器会出现超温报警。3.2严禁在变幅杆未插入液体内时开机,否则会损坏换能器或超声波发生器。3.3用一定时间后变幅杆末端会被空化腐蚀而发毛,可用油石或锉刀锉平,否则会影响工作效果。3.4在超声波破碎时,由于超声破在液体中会起空化效应,使液体温度会很快升高,建议采用短时间(每次不超过5秒),同时可外加冰浴冷却。
我有一些直径是十几微米的固体颗粒,想用超声波将其粉碎,粉碎成200纳米以下的颗粒。请教可以用什么样的超声波仪器?
超声波是物质介质中的一种弹性机械波,它是一种波动形式,因此它可以用于探测人体的生理及病理信息,既诊断超声。同时,它又是一种能量形式,当达到一定剂量的超声在生物体内传播时,通过它们之间的相互作用.超声波是物质介质中的一种弹性机械波,它是一种波动形式,因此它可以用于探测人体的生理及病理信息,既诊断超声。同时,它又是一种能量形式,当达到一定剂量的超声在生物体内传播时,通过它们之间的相互作用,能引起生物体的功能和结构发生变化,即超声生物效应。超声对细胞的作用主要有热效应,空化效应和机械效应。热效应是当超声在介质中传播时,摩擦力阻碍了由超声引起的分子震动,使部分能量转化为局部高热(42-43℃),因为正常组织的临界致死温度为45.7℃,而肿瘤组织比正常组织敏感性高,故在此温度下肿瘤细胞的代谢发生障碍,DNA、RNA、蛋白质合成受到影响,从而杀伤癌细胞而正常组织不受影响。空化效应是在超声照射下,生物体内形成空泡,随着空泡震动和其猛烈的聚爆而产生出机械剪切压力和动荡,使肿瘤出血、组织瓦解以致坏死。另外,空化泡破裂时产生瞬时高温(约5000℃)、高压(可达500×104Pa),可使水蒸气热解离产生.OH自由基和.H原子,由.OH自由基和.H原子引起的氧化还原反应可导致多聚物降解、酶失活、脂质过氧化和细胞杀伤。机械效应是超声的原发效应,超声波在传播过程中介质质点交替地压缩与伸张构成了压力变化,引起细胞结构损伤。杀伤作用的强弱与超声的频率和强度密切相关。工作原理 同时,它又是一种能量形式,当达到一定剂量的超声在生物体内传播时,通过它们之间的相互作用.超声波是物质介质中的一种弹性机械波,它是一种波动形式,因此它可以用于探测人体的生理及病理信息,既诊断超声。同时,它又是一种能量形式,当达到一定剂量的超声在生物体内传播时,通过它们之间的相互作用,能引起生物体的功能和结构发生变化,即超声生物效应。超声对细胞的作用主要有热效应,空化效应和机械效应。热效应是当超声在介质中传播时,摩擦力阻碍了由超声引起的分子震动,使部分能量转化为局部高热,因为正常组织的临界致死温度为45.7℃,而肿瘤组织比正常组织敏感性高,故在此温度下肿瘤细胞的代谢发生障碍,DNA、RNA、蛋白质合成受到影响,从而杀伤癌细胞而正常组织不受影响。空化效应是在超声照射下,生物体内形成空泡,随着空泡震动和其猛烈的聚爆而产生出机械剪切压力和动荡,使肿瘤出血、组织瓦解以致坏死。另外,空化泡破裂时产生瞬时高温、高压,可使水蒸气热解离产生.OH自由基和.H原子,由.OH自由基和.H原子引起的氧化还原反应可导致多聚物降解、酶失活、脂质过氧化和细胞杀伤。机械效应是超声的原发效应,超声波在传播过程中介质质点交替地压缩与伸张构成了压力变化,引起细胞结构损伤。杀伤作用的强弱与超声的频率和强度密切相关。超声波细胞破碎仪的原理并不是太神秘、太复杂。简单说就是将电能通过换能器转换为声能,这种能量通过液体介质而变成一个个密集的小气泡,这些小气泡迅速炸裂,产生的象小炸弹一样的能量,从而起到破碎细胞等物质的作用
1. [color=#000000]编制目的[/color][color=#000000]本文[/color][color=#000000]用于[/color][color=#000000]指导[/color][color=#000000]JYD-L[/color][color=#000000]超声波细胞粉碎机设备的具体操作和使用时的注意事项,以保证仪器设备及人员的安全。[/color]2. [color=#000000]适用范围[/color][color=#000000]该仪器可广泛应用[/color][color=#000000]环境、生物领域,可进行半挥发性有机物萃取、动植物、病毒、细胞、细菌及组织的破碎等前处理。[/color][color=#000000]3[/color][color=#000000].[/color][color=#000000]设备组成[/color][color=#000000]3[/color][color=#000000].1 [/color][color=#000000]超声波发生器[/color][color=#000000]3[/color][color=#000000].2 [/color][color=#000000]换能器[/color][color=#000000]4.[/color][color=#000000]主要技术参数[/color][color=#000000]4.1[/color][color=#000000]功率调整范围[/color][color=#000000]:[/color][color=#000000]额定功率[/color][color=#000000]0%[/color][color=#000000]~[/color][color=#000000]99%[/color][color=#000000]。[/color][color=#000000]4.2[/color][color=#000000]温度设定范围[/color][color=#000000]:[/color][color=#000000]0[/color][color=#000000]℃[/color][color=#000000]~[/color][color=#000000]99[/color][color=#000000]℃[/color][color=#000000]。[/color][color=#000000]4.3[/color][color=#000000]超声时间范围:[/color][color=#000000]0s[/color][color=#000000]~[/color][color=#000000]99s[/color][color=#000000]。[/color][color=#000000]4.4[/color][color=#000000] [/color][color=#000000]间隙时间范围:[/color][color=#000000]0s[/color][color=#000000]~[/color][color=#000000]99s[/color][color=#000000]。[/color][color=#000000]5.[/color][color=#000000]工作原理[/color][color=#000000]本机采用了单片机控制技术和锁相环频率自动跟踪,通过简单的键盘操作即可设置数据和控制工作状态。功率放大器与换能器的振动频率经相位取样使锁相环实现自动跟踪。功率检测和温度测量电路使单片机实现超声波发射功率超限自动调整和超温保护及报警功能。[/color][color=#000000]6.[/color][color=#000000]环境条件[/color][color=#000000]6[/color][color=#000000].1[/color][color=#000000]仪器工作环境温度控制在[/color][color=#000000]0[/color][color=#000000]℃~55℃[/color][color=#000000],湿度控制在[/color][color=#000000]20%~90%[/color][color=#000000]。[/color][color=#000000]6.2[/color][color=#000000]仪器室及其周围不能有震源、火源、电火花、强大磁场和电场、易燃易爆和腐蚀性物质等存在,以免干扰分析或发生意外。[/color][color=#000000]6[/color][color=#000000].3[/color][color=#000000]应尽可能降低室内空气含尘量,减少尘埃落入仪器内部,以免影响仪器性能,注[/color][color=#000000]意保持仪器和室内清洁。[/color][color=#000000]7[/color][color=#000000].[/color][color=#000000]操作步骤[/color][color=#000000]7[/color][color=#000000].1[/color][color=#000000]开机步骤[/color][color=#000000]7.1.1 [/color][color=#000000]确保仪器电源线已正确连接,打开仪器后面电源开关,等待仪器自检完毕,即可使用。[/color][color=#000000]7[/color][color=#000000].2[/color][color=#000000]测定步骤[/color][color=#000000]7.2.1[/color][color=#000000]方法编辑[/color][color=#000000] [/color][color=#000000]?左移按键[/color][color=#000000]在设置状态时,按下此键可从[/color][color=#000000]LCD[/color][color=#000000]显示屏下排右边起向左选择移位,移到所需要设定的一位,该位数据闪烁,表示该位数据可以改变。在运行和暂停状态时,此键不起作用。[/color][color=#000000]▼减或下翻键[/color][color=#000000]在设置状态时,如果无数据位闪烁,按下此键可向下依次翻出所存储的程序数据。如果有数据闪烁,按下此[/color][color=#000000]键可是[/color][color=#000000]闪烁数据位的数据减[/color][color=#000000]一[/color][color=#000000],从[/color][color=#000000]9[/color][color=#000000]~[/color][color=#000000]0[/color][color=#000000]循环。[/color][color=#000000]在运行状态时,按下此键可使功率调整值减[/color][color=#000000]一[/color][color=#000000]。直至减为[/color][color=#000000]0[/color][color=#000000]止。[/color][color=#000000]●运行或停止按键[/color][color=#000000]设置状态和运行状态的工作状态切换按键。在设置状态时,按下此键可以进入当前程序的运行状态;在运行状态下,按下此键则终止当前程序的运行,切换到设置状态。[/color][color=#000000]▲加或上翻按键[/color][color=#000000]在设置状态时,如果无数据位闪烁,按下此键可向上依次翻出所存储的程序。如果有数据位闪烁,按下此键可使闪烁的数据加一,从[/color][color=#000000]0[/color][color=#000000]~[/color][color=#000000]9[/color][color=#000000]循环。[/color][color=#000000]在[/color][color=#000000]运行状态时,按下此键可使功率调整加一。直至加到[/color][color=#000000]99[/color][color=#000000]为止。[/color][color=#000000]?右移或暂停按键[/color][color=#000000]在设置状态时,按下此键可从上排显示器左边起向右选择移位,移到需要设定的一位,该位数据闪烁,表示该位数据可以改变。[/color][color=#000000]在运行状态时,按下此键可进入或退出暂停状态。[/color]7.2.2 样品超声萃取将需要超声萃取的样品预先放入合适的容器内。打开箱门,将换能器插入样品容器内,前端探头放入水位上1/3处,关上箱门,按[color=#000000]●开始运行。[/color]7.3关机步骤使用结束后,关闭仪器后侧电源开关,并将换能器取出用清水清洗、干燥并妥善保存。 8.维护保养8.1日常维护8.1.1每次仪器结束工作时,应保持超声波发生器、换能器组件清洁,可使用软布沾清水擦拭。8.1.2长期不工作时,取出换能器组件洗净、干燥并妥善保存。8.1.3使用中若发现变幅杆末端被空化腐蚀而发毛,可使用油石或锉刀锉平,否则会影响工作效果。9. 注意事项 9.1 温度保护设置点必须比室温或样品温度高5℃以上,否则仪器会出现超温报警。9.2 严禁在变幅杆未插入液体内时开机,否则会损坏换能器或超声波发生器。9.3 用一定时间后变幅杆末端会被空化腐蚀而发毛,可用油石或锉刀锉平,否则会影响工作效果。9.4 在超声波破碎时,由于超声破在液体中会起空化效应,使液体温度会很快升高,建议采用短时间(每次不超过5秒),同时可外加冰浴冷却。9.5 本机应安放在干燥、无潮湿。无阳光直射。无腐蚀性气体的地方工作。9.6 严格按照超声波发生器。换能器组件性能参数范围工作。9.7 严禁液体溅入超声波发生器内部。9.8 仪器室及其周围不能有震源、火源、电火花、强大磁场和电场、易燃易爆和腐蚀性物质等存在,以免干扰分析或发生意外。9.9 应尽可能降低室内空气含尘量,减少尘埃落入仪器内部,以免影响仪器性能,注意保持仪器和室内清洁。9.10室内必须严禁烟火,照明应使用防爆型灯具,必须备有灭火器,落实好有关防火防爆等安全措施,以免发生意外事故。9.11 使用仪器时,注意个人安全防护,小心触电,以及超声破碎时产生的噪音对人耳朵的影响。
最近实验室准备购买一台超声波细胞破碎仪,希望帮忙推荐几款价廉物美的,经销商和我联系也可以,最好要把优惠的价格告诉我,谢谢 EMIAL:yangliang870221@126.com 电话:15173250907 杨
大肠杆菌表达外源蛋白,在超声破碎的时候,用含有1%triton-X-100的PBS悬浮,然后超声的效果较好,1%triton-X-100的作用还是很明显的,对其他的一些细菌同样起作用,比如链霉菌。 细菌沉淀直接加样品1buffer,再加5ul的巯基乙醇,混匀,离心,煮沸10min,直接上样,染色脱色步骤如下:将胶放入适量的染色液微波炉里加热1min(下次适当补点醋酸即可),将染色液换成大量的水(自来水即可)在微波炉煮10min 就可以。 在表达重组蛋白后超声波破碎细胞,采用冰浴,400w,破2s停1s,但是不一会就产生大量泡沫,影响了破碎功率,pbs和tris缓冲液都是这样,最后都是破碎不完全,而我的目的蛋白就在这些未破碎的细胞中。1*会产生气泡是因为你的探头位置没放好。探头一定要接近底部,约1cm(我一般是距底部0.5mm)。功率根据仪器不同会有所不同,但你可以观察液面,有波动但不要太剧烈就好。2*破3S停10S,破个二三十次看看。 3*变幅杆位置摆放也要注意,听声音如果不对的话就要及时调整。另外可以从菌浓度方面考虑。 在破碎时试着加大体积,强度最好不要超过60%. 4*尝试超8s停8s,对有些菌体蛋白来说,你的方法很难散热,导致蛋白变性产生气泡,最好停顿时间稍长一些,这种情况多见于包涵体形式的蛋白。链霉菌(放线菌)超声破碎的,用的方法条件是什么?前处理一般就是配置成一定浓度的菌悬液。使用超声破碎时采用的具体条件是:(1)取细菌的24 h培养液于5 000 r/min 下离心5 min收集菌体.(2)用pH 7.5的Na2HPO -NaH2PO 缓冲液洗涤3次,再用该缓冲液将菌体配成1:3的菌悬液.置于40 mL大塑料试管内.(3)将大塑料试管置于冰浴中,采用超声波破碎(功率200 W,1/2”探头,破碎30 s,间歇30 S).(4)破碎液于12 000 r/min下高速冷冻离心30 min,收集细胞碎片和上清夜. 超声破菌流程与 上述基本一致,就是洗涤菌体也可以用预冷的生理盐水或pH8的Tris-HCl,洗涤一次就可以。另外,超声剂量随样品量、菌体改变比较大,功率可以到400-600w,超5s,停5s,冰浴,要加终浓度1 mM的PMSF。为确定合适的超声强度和次数,有必要随时镜检观察菌体是否完全破碎。 放线菌属于原核生物系统进化树上的(G+C)摩尔百分含量(mol%)高的革兰氏阳性菌(Eubacteria)分枝类群,它虽然具有原核生物特有的分子生物学特性,但在其不同类群中,细胞壁的化学组分变化很大。 在做大肠杆菌超声时,采用的是400W,超5停5的方法,效果不错,但是用在链霉菌上,似乎没什么效果。会不会就是由于细胞壁组成差异造成的呢,因为大肠杆菌式属于革兰氏阴性菌的。 再有镜检是检验破碎效果,但是细胞破碎程度和我需要的酶获得之间有正比关系吗?破碎时间长也会影响到酶的活性。所以想问问anaisai战友,你提供的“功率200 W,1/2”探头,破碎30 s,间歇30 S”的条件好像是用于破碎链霉菌孢子的,也可以用于发酵离心后的菌泥吗?如果可以,你破碎的全程时间大概是多少呢? 如果你需要的是胞内酶,细胞破碎程度和需要的酶获得之间基本上有正比关系。破碎时间长的确会影响到酶的活性。这就需要在最佳的破碎时间和酶活性之间做出判断,最直接的办法是先绘制相关曲线(酶活性和时间的关系曲线)。 实验中,破碎的是棒状杆菌(也是很难破壁的G+菌),破碎时间控制在30min左右,酶活较好。
http://www.instrument.com.cn/show/Breviary.asp?FileName=C119298%2Ejpg&iwidth=200&iHeight=200 宁波新芝生物科技股份有限公司 的 Scientz-IID 超声波细胞粉碎机(Scientz-IID)已参加“国产好仪器”活动并通过初审。自上市以来,这款产品已经被多家单位采用,如果您使用过此仪器设备或者对其有所了解,欢迎一起聊聊它各方面的情况。您还可以通过投票抽奖、参与调研等方式参与活动,并获得手机电子充值卡。【点击参与活动】 仪器简介: 应用领域:生命科学:对细菌、病毒、孢子及其它细胞结构的裂解、破碎、浸出、萃取动物细胞内DNA、蛋白质的提取、修剪DNA/RNA,染色质免疫沉淀技术。材料化学:对纳米材料如碳纳米管,石墨烯等材料的分散、均质土壤、岩石样本、有色金属、稀土等颗料物的崩解、乳化、均质、破碎。另外可用于中草药的分散、萃取。可以用于其他样品的分散化均质及加速反应进程,也适用于化工、医疗、考古、地质、海洋等领域的样品前处理。 性能特点:采用PWM控制开关电源,功率连续可调仪器采用液晶大屏显示,高分辨率中央微机集中控制超声时间、功率任意设定样品温度检测显示、实际频率显示、频率微机跟踪、故障自动报警隔间装置采用ABS材质,模具化设计,带门锁功能专利号:ZL94244314.4 200630105827.5频率20-25KHz频率自动跟踪功率950W(1%-99%)显示方式 7寸TFT触摸屏显示显示内容 时间,功率,温度破碎容量0.5-600ml占空比0.1-99.9%随机变幅杆Φ6可选配变幅杆Φ2、3、10、15 mm存储数据50组温度报警0-99℃报警超温、过载、时间定时0-999分钟工作模式间隙、连续标准配置发生器(主机)一台,密封换能器一只,Φ6mm变幅杆一支,隔间箱一台电源220/110V 50Hz/60Hz电源箱+换能器重量14.3kg电源机箱尺寸及净重400×280×220(mm);12.2kg特点用PWM控制开关电源,功率连续可调,稳定性好外包装尺寸534×295×435mm【了解更多此仪器设备的信息】
超声波是一种弹性机械波,同时,也是一种能量形式,当达到一定剂量的超声在生物体内传播时,通过它们之间的相互作用,能引起生物体的功能和结构发生变化。超声波对生物细胞的作用效应主要有热效应、空化效应和机械效应三种。1、热效应:超声在介质中传播时,由于摩擦力对超声引起的分子震动的的阻碍,使得超声波的部分能量转化为了局部热能。正常组织的临界致死温度为45.7℃,而对温度较为敏感的肿瘤组织在此温度下常常发生细胞的代谢障碍,使肿瘤组织的DNA、RNA、蛋白质等重要生物大分子的合成受到严重影响。医学上利用超声波对生物细胞的热效应而发明的超声波治疗仪即是能对癌细胞产生杀伤作用却不影响正常组织生理代谢。2、空化效应:指在超声作用下,生物体内的水分子会形成微小空泡,伴随空泡生长和破裂产生的巨大机械剪切力和高温,使肿瘤出血、组织瓦解以致坏死。另外,空化泡破裂时产生瞬时高温(约5000℃)、高压(可达500×104Pa),可使水蒸气热解离产生.OH自由基和.H原子,由.OH自由基和.H原子引起的氧化还原反应可导致多聚物降解、酶失活、脂质过氧化和细胞杀伤。3、机械效应:是超声引起的原发效应,超声波在传播过程中介质质点交替地压缩与伸张构成了压力变化,引起细胞结构损伤。超声机械效应杀伤作用的强弱与超声的频率和强度密切相关。利用超声波对生物细胞的三大作用而发明的仪器设备广泛应用于基础研究领域的细胞破碎乳化、医疗系统的疾病诊断、超声治疗等各个行业领域。
作为精密科研仪器,大家在使用LC-CS650超声波细胞破碎仪时要注意哪些呢?下面就是几点常见的注意要点。1、切记将超声变幅杆插入样品后才能开机,防止空载对仪器的损伤。2、变幅杆探头入水深度:1到2 厘米之间,液面高度宜30mm以上,探头居中不可贴壁。3、超声参数设置: 1)时间:时间设定应以超声短时多次原则,超声工作时间应小于5秒,间隙时间应大于或等于超声时间,以便于热量散发。2)超声功率: 不宜太大,以免样品飞溅或起沫。小于10ml样品容量,功率应在200w以内,选用2mm超声探头(2MM的小探头功率严禁超过350W);10-200ml样品容量,功率应在200-400w,选用6mm超声探头;200ml以上的样品容量,功率在300-600w,选用10mm超声探头;(2MM的小探头功率严禁超过350W)3)破碎容器选择:根据样品量选择破碎杯(可用烧杯代替);参数设定实例:如100ml大肠杆菌样品设置参数:300W, 70次,超声5秒,间隙5秒(总时间为10分钟)。
非接触式超声波细胞裂解系统SL型型号简介:非接触式超声波细胞裂解系统可获得传统超声方法无可比拟的质量、效率和安全性,在分子生物学研究领域样品前处理掀起一场新的浪潮。用途广泛, 常用于细胞的破碎、裂解,细胞颗粒的释放。尤其是应用于腺病毒的微粒释放,除适合制备高效价的重组腺病毒外,还可以制备病毒DNA,DNA终端蛋白化合物,同时是土壤样品制备的理想仪器。已经成为CHIP(染色质免疫共沉淀)研究平台不可缺少的标准化工具。特点:1.无气雾浮质产生-增强生物安全性,用于无菌操作; (如:分支杆菌,乙肝病毒,甲肝病毒,流感(包括H1N1),非典病毒SARS);2. 消除了样品交叉污染的危险;能隔着离心管能打断染色体、破碎细胞。3.消除了传统的手持探头,固定探头的繁琐,带有消音压紧装置;4.可有效阻止样品泡沫的产生;5.中文液晶显示,功率可以微调,击进方式可每次5W微调;6.采用周期性的脉冲破碎细胞,脉冲的启动和终止时间可调,可调时间精确至0.1秒7.可处理多种样品,样品处理范围广泛;8.可使用标准地可抛弃式容器 (PCR tubes Eppendorf, 1.5~50ml Corning/Falcon tubes) ;9.可用于处理微量样品;最少到5uL;10.可一次性处理4~32个样品,需选择相应的型号;11.自动的连续旋转离心管则使超声波的能量分布更为均匀,数据专一,且可以重复;12. 带冷却水循环槽,可选配低温冷却液循环机,避免了破碎过程中温度过高,影响病毒的感染力。
实验室常用来破碎大肠杆菌,用于提取表达外源蛋白等试验,在超声波破碎大肠杆菌过程中常常温度探头测得大肠杆菌菌液中温度逐渐升高,有可能会致使热敏物质失活,该怎么解决呢?今天来谈谈在超声波细胞破碎仪处理大肠杆菌过程中降低温度的解决措施。 超声波细胞破碎仪在处理大肠杆菌过程中,由于超声波的空化效应会产生大量的热使菌液的温度逐渐升高,所以我们在处理样品的时候一定要采用冰浴或者其他降温方法,在这您提供两点建议,一种是用实验室的碎冰来做冰浴,示意图如下:(同学们的智慧是无穷的,此图来自于中国药科大学某实验室正在处理大肠杆菌) http://www.shunmayq.com/Upload/image/dachangganjun.jpg (图中液体为冰水混合物,也可以用碎冰) 另外一种方法一般适用于50或者50毫升以上超声细胞破碎仪处理大肠杆菌时使用。图片中超声波细胞破碎仪,。您可以将菌液放置于我们特制的双层夹套反应杯中,在冷却水循环系统上设置好您需要的温度,就可以放心实验不必担心菌液的温度升高啦 http://www.shunmayq.com/Upload/image/1234.jpg 与此同时,在处理大肠杆菌过程中实验条件摸索也来得尤为重要。功率是根据您的处理量多少来调节的,我们建议如果可以用小功率来处理样品切忌用大功率,功率越小对应的超声波的热效应也会相对降低,另外超声时间尽量放短,间隙时间尽量放长,例如超声1秒停2-3秒。
随着分子生物学的快速发展,许多实验的目标物质都是细胞内物质,要进行实验研究或产物收集就必须将细胞破壁,使产物得以释放,才能进一步提取,因此细胞破碎就变成了提取胞内产物的关键步骤,破碎方法的得当与否,直接影响到所提取产品的产量、质量和生产成本。现将常用的几种细胞破碎方法介绍如下。1.超声波破碎 利用超声波高强度声能产生的空化现象引起冲击波和剪切力进行细胞破碎。超声破碎的效率与超声频率、超声功率、处理时间、细胞浓度及处理量等因素有关。 不足及须加强的问题:超声波破碎在实验室规模应用较普遍,处理少量样品时操作简便,液量损失少,但超声波产生的化学自由基团可能使某些敏感性活性物质变性失活影响实验结果。且大容量装置声能利用率低,装置散热性差。2.生物酶溶法 就是用生物酶将细胞壁和细胞膜消化溶解的方法。常用的溶酶有溶菌酶β-1.3-葡聚糖酶、蛋白酶等。 不足:易造成产物抑制作用,这可能是导致胞内物质释放率低的最主要因素。而且溶酶价格高,限制了大规模利用。若回收溶酶,则又增加分离纯化溶酶的操作。另外酶溶法通用性差,不同菌种需选择不同的酶。3.物理珠磨法 微生物细胞悬浮液与极细的研磨剂在搅拌浆作用下充分混合,珠子之间以及珠子和细胞之间和互相剪切、碰撞,使细胞壁破碎,释出内容物,在珠波分离器的协助下,珠子被滞留在破碎室内,浆液流出,从而实现连续操作,破碎中产生的热量由夹套中的冷却液带走。缺陷:效能利用率仅为1%左右,且破碎过程产生大量的热能无法利用。4.化学渗透法 某些有机溶剂(如苯、甲苯)、抗生素、表面活性剂、金属螯合剂、变性剂等化学药品都可以改变细胞壁或膜的通透性从而使细胞内容物物有选择地渗透出来。其作用机理;化学渗透取决于化学试剂的类型以及细胞壁和膜的结构与组成。 不足:时间长,效率低;化学试剂毒性较强,同时对产物也有毒害作用,进一步分离时需要用透析等方法除去这些试剂;通用性差。
1、高速组织捣碎:将材料配成稀糊状液,放置于筒内约1/3体积,盖紧筒盖,将调速器先拨至最慢处,开动开关后,逐步加速至所需速度http://www.39kf.com/Txt2Img/ju.png此法适用于动物内脏组织、植物肉质http://www.39kf.com/Txt2Img/named.png子等。 2、玻璃匀浆器匀浆:先将剪碎的组织置于管中,再套入研杆来回研磨,上下移动,即可将细胞研碎,此法细胞破碎程度比高速组织捣碎机http://www.39kf.com/Txt2Img/iuy87612.png高,适用于量少和动物脏器组织。 3、超声波处理法:用http://www.39kf.com/Txt2Img/2008-9-13.png定功率的超声波处理细胞悬液,使细胞急剧震荡破裂,此法http://www.39kf.com/Txt2Img/kmmn675.png适用于微生物材料,用http://www.39kf.com/Txt2Img/datu.png肠杆菌制备各种酶,常选用50-100毫克菌体/毫升浓度,在1KG至10KG频率下处理10-15分钟,此法的缺点是在处理过程会产生大量的热,应采取相应降温措施。对超声波敏感和核酸应慎用。 4、反复冻融法:将细胞在-20度以下冰冻,室温融解,反复几次,由于细胞内冰粒形成和剩余细胞液的盐浓度增高引起溶胀,使细胞结构破碎。 5、化学处理法:有些动物细胞,例如肿瘤细胞可采用十二烷基磺酸钠(SDS)、去氧胆酸钠等细胞膜破坏,细菌细胞壁较厚,可采用溶菌酶处理效果http://www.39kf.com/Txt2Img/877667jkdkk.png好。 无论用哪一种方法破碎组织细胞,都会使细胞内蛋白质或核酸水解酶释放到溶液中,使大分子生物降解,导致天然物质量的减少,加入二异丙基氟磷酸(DFP)可以抑制或减慢自溶作用;加入碘乙酸可以抑制那些活性中心需要有疏基的蛋白水解酶的活性,加入苯甲磺酰氟化物(PMSF)也能清除蛋白水解酥活力,但不是全部,还可通过选择pH、温度或离子强度等,使http://www.39kf.com/Txt2Img/jsdh766289sdmkxu.png些条件都要适合于目的物质的提取。
超声波技术在环境监测中的应用之预处理技术 超声波是频率高于20000赫兹的声波,它方向性好,穿透能力强,易于获得较集中的声能,在水中传播距离远,可用于测距、测速、清洗、焊接、碎石、杀菌消毒等。超声波因其频率下限大约等于人的听觉上限而得名。 大家有没有留意过自己的身边有多少利用超声波分析的仪器设备呢?我初略统计了下在环境监测领域中利用超声波的样品预处理技术,和大家分享。1. 超声清洗http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/11/201211031755_401128_1653274_3.jpg清洗的超声波应用原理是由超声波发生器发出的高频振荡信号,通过换能器转换成高频机械振荡而传播到介质,清洗溶剂中超声波在清洗液中疏密相间的向前辐射,使液体流动而产生数以万计的微小气泡,存在于液体中的微小气泡(空化核)在声场的作用下振动,当声压达到一定值时,气泡迅速增长,然后突然闭合,在气泡闭合时产生冲击波,在其周围产生上千个大气压力,破坏不溶性污物而使它们分散于清洗液中,当团体粒子被油污裹着而粘附在清洗件表面时,油被乳化,固体粒子即脱离,从而达到清洗件表面净化的目的。在环境监测工作中,超声波清洗器常用来清洗有大量油污或盐附着的瓶子或蒸馏器。比如我们做潮汐性河流挥发酚样品后,向蒸馏瓶内加入少量水,用超声波清洗器清洗,很快上面的盐就被洗脱下来。2. 超声破碎细胞http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/11/201211031755_401130_1653274_3.jpg超声波破碎仪相较于超声波清洗仪来说,其功率一般大挺多。原因是超声波破碎仪要对含细胞壁的藻类细胞能同样起到破碎作用,而浮游植物细胞壁的破坏需要更高的能量。超声波清洗仪在环境监测工作中不仅可以用来做叶绿素分析,还能用来做一些生物组织的分析,如鱼肝内毒性物质分析。3. 超声溶解 利用超声波加速试剂的溶解是超声波在我们工作中的另一大应用。这里使用普通的超声波清洗仪就可以。这个我使用了N次了,溶解速度提高真的不是一点点。不过前提是超声不会对试剂的组成造成影响。特别是还原性物质或易挥发物质,在超声过程中可能发生氧化作用和加速挥发,影响后续实验。4. 超声颗粒破碎超声颗粒破碎是样品预处理技术之一。在07年写的一篇论文中我曾经用过该技术。对于含大颗粒物质的水样,如果直接取样,由于污染物会随颗粒分散不均匀,导致取样的代表性比较差,这使得实验结果偏差变大。使用超声波的产生的微小气泡和空化作用,能在短时间内将大颗粒物打散成小颗粒,从而使样品匀质化。5. 超声消解 超声消解主要是利用超声波在介质中的超声空化、自由基氧化、高温热解、超临界水氧化四大效应。利用超声技术与其他技术的联用,可能更好地完成消解工作,具体在另一个原创中我会详述。6. 超声促反应对于某些反应,一定频率的超声波能促进反应的进行。比如在某些酶促反应中,超声波能起到促进作用,这点对于酶联免疫反应的分析方法来说是个很好的消息。貌似这个在现有的酶联免疫中应用还不多吧,研究研究,积累点数据
[b][color=#0c0c0c](1)机械效应:[/color][/b][color=#0c0c0c]超声波在介质中的传播可以使介质质点在其传播空间内产生振动,从而强化介质的扩散、传播,这就是超声波的机械效应。超声波在传播过程中产生一种辐射压强,沿声波方向传播,对物料有很强的破坏作用,可使细胞组织变形,植物蛋白质变性;同时,它还可以给予介质和悬浮体以不同的加速度,且介质分子的运动速度远大于悬浮体分子的运动速度。从而在两者间产生摩擦,这种摩擦力可使生物分子解聚,使细胞壁上的有效成分更快地溶解于溶剂之中。[/color] [b][color=#0c0c0c](2)空化效应:[/color][/b][color=#0c0c0c]通常情况下,介质内部或多或少地溶解了一些微气泡,这些气泡在超声波的作用下产生振动,当声压达到一定值时,气泡由于定向扩散(rectieddiffvsion)而增大,形成共振腔,然后突然闭合,这就是超声波的空化效应。这种气泡在闭合时会在其周围产生几千个大气压的压力,形成微激波,它可造成植物细胞壁及整个生物体破裂,而且整个破裂过程在瞬间完成,有利于有效成分的溶出。[/color] [b][color=#0c0c0c](3)热效应:[/color][/b][color=#0c0c0c]和其它物理波一样,超声波在介质中的传播过程也是一个能量的传播和扩散过程,即超声波在介质的传播过程中,其声能不断被介质的质点吸收,介质将所吸收的能量全部或大部分转变成热能,从而导致介质本身和药材组织温度的升高,增大了药物有效成分的溶解速度。由于这种吸收声能引起的药物组织内部温度的升高是瞬间的,因此可以使被提取的成分的生物活性保持不变。[/color] [color=#0c0c0c]此外,超声波还可以产生许多次级效应,如乳化、扩散、击碎、化学效应等,这些作用也促进了植物体中有效成分的溶解,促使药物有效成分进入介质,并于介质充分混合,加快了提取过程的进行,并提高了药物有效成分的提取率。[/color]
随着重组DNA技术得到广泛应用以来,生物技术发生了质的飞跃。很多基因工程产物都是胞内物质,必须将细胞破壁,使产物得以释放,才能进一步提取,因此细胞破碎是提取胞内产物的关键步骤,破碎方法的得当与否,直接影响到所提取产品的产量、质量和生产成本。现将近年来常用的几种细胞破碎方法介绍一下。 1. 高压匀浆法 设备是高压匀浆器,它由高压泵和匀浆间组成,美国Microfluidics公司和ATS公司均有产品出售。其破碎机理:细胞在一系列过程中经历了高速造成的剪刀,碰撞以及由高压到常压的变化从而造成细胞的破碎。 存在的问题;较易造成堵塞的团状或丝状真菌,较小的革兰氏阳性首以及有些亚细胞器,质地坚硬,易损伤匀浆阀,也不适合用该法处理。 2. 高速珠磨法 设备是珠后机,瑞士WBC公司和德国西门子机械公司均制造各种型号的珠磨机,其破碎机下:微生物细胞悬浮液与极细的研磨剂在搅拌浆作用下充分混合,珠子之间以及珠子和细胞之间和互相剪切、碰撞,促使细胞壁破碎,释出内含物,在珠波分离器的协助下,珠子被滞留在破碎室内,浆液流出,从而实现连续操作,破碎中,生的热量由夹套中的冷却液带走。 存在的问题:操作参数多,一般赁经验估计并且珠子之间的液体损失30%左右。 3. 超声破碎 频高于15-20KHz的超声波在高强度声能输入下可以进行细胞破碎。其破碎机理:可能与空化现象引起的冲击波和剪切力有关。超声破碎的效率与声频、声能、处理时间、细胞浓度及首种类型等因素有关。 存在问题;超声波破碎在实验室规模应用较普遍,处理少量样品时操作简便,液量损失少,但是超声波产生的化学自由基团能使某些敏感性活性物质变性失活。而且大容量装置声能传递,散热均有困难。 4. 酶溶法 就是用生物酶将细胞壁和细胞腊消化溶解的方法。常用的溶酶有溶菌酶β-1.3-葡聚糖酶、蛋白酶等。 存在的问题;易造成产物抑制作用,这可能是导致胞内物质释放率低的一个重要因素。而且溶酶价格高,限制了大规模利用。若回收溶酶,则又增加百分离纯化溶酶的操作。另外酶港法通用性差,不同菌种需选择不同的酶。 5. 化学渗透法 某些有机溶剂(如苯、甲苯)、抗生素、表面活性剂、金属螯合剂、变性剂等化学药品都可以改变细胞壁或膜的通透性从而使内合物有选择地渗透出来。其作用机理;化学渗透取决于化学试剂的类型以及细胞壁和膜的结构与组成。 存在的问题;时间长,效率低;化学试剂毒性较强,同时对产物也有毒害作用,进一步分离时需要用透析等方法除去这些试剂;通用性差:某种试剂只能作用于某些特定类型的微生物细胞。 本文介绍了几种细胞破碎的方法,可谓各有千秋,在实际应用中,应尽量考虑全面,选择最科学、有效的方法。
一、什么是超声波? 超声波清洗,波可以分为三种,即次声波、声波、超声波。次声波的频率为20Hz以下;声波的频率为20Hz~20kHz;超声波的频率则为20kHz以上。其中的次声波和超声波一般人耳是听不到的。超声波由于频率高、波长短,因而传播的方向性好、穿透能力强,这也就是为什么设计制作超声波清洗机的原因。 二、超声波如何完成清洗工作? 超声波清洗是利用超声波在液体中的社会化作用、加速度作用及直进流作用对液体和污物直接、超声波清洗间接的作用,使污物层被分散、乳化、剥离而达到清洗目的。超声波清洗目前所用的超声波清洗机中,空化作用和直进流作用应用得更多。 (1)空化作用:空化作用就是超声波以每秒两万次以上的压缩力和减压力交互性的高频变换方式向液体进行透射。在减压力作用时,液体中产生真空核群泡的现象,超声波清洗在压缩力作用时,真空核群泡受压力压碎时产生强大的冲击力,由此剥离被清洗物表面的污垢,从而达到精密洗净目的。 (2)直进流作用:超声波在液体中沿声的传播方向产生流动的现象称为直进流。声波强度在0.5W/cm2时,肉眼能看到直进流,垂直于振动面产生流动,流速约为10cm/s。通过此直进流使被清洗物表面的微油污垢被搅拌,污垢表面的清洗液也产生对流,溶解污物的溶解液与新液混合,使溶解速度加快,对污物的搬运起着很大的作用。 (3)加速度:液体粒子推动产生的加速度。对超声波清洗于频率较高的超声波清洗机,空化作用就很不显著了,这时的清洗主要靠液体粒子超声作用下的加速度撞击粒子对污物进行超精密清洗。 三、超声波清洗机的原理是什么? 超声波换能器将高频振荡电讯号转换成高频机械振荡,以纵波的形式在清洗液中辐射。在辐射波扩张的半波期间,清洗液的致密性破坏并形成无数超声波清洗直径为50-500μm的气泡。这种气泡中充满着溶液蒸汽。在压缩的半波期间,气泡讯速闭合,会产生上百Mpa的局部液压撞击。这种现象称为“空化”效应。在“空化”效应的连续作用下,工件表面或隐蔽处的污垢被爆裂、剥落。同时,在超声的作用下,清洗液的渗透作用加强超声波清洗;脉动搅拌加剧;溶解、分散和乳化加速;从而将工件彻底清洗干净。 四、超声波清洗机是由哪几部分构成的? 超波清洗机主要由超声波清洗槽和超声波发生器两部分构成。超声波清洗槽用坚固弹性好、耐腐蚀的优质不锈钢制成,底部安装有超声波换能器振子;超声波发生器产生高频高压,通过电缆联结线传导给换能器,换能器与振动板一起产生高频共振,从而使清洗槽中的溶剂受超声超声波清洗波作用对污垢进行洗净。 五、超声波清洗机有什么特点? 超声波清洗与各种化学的、物理的、电化的和超声波清洗物化的清洗方法比较,具有以下独特的优点: ·能快速、彻地清除工件表面上的各种污垢。 ·能清洗带有空腔、沟槽等形状复杂的精密零件。 ·对工件表面无损。 ·可采用各种清洗剂。 ·在室温或适当加温(60℃左右)即可进行清洗。 ·整机一体化结构便于移动。 ·节省溶剂、清洁纸、能源、工作场地和人工等。 六、如何使用超声波清洗机? 超声波清洗机的使用应严格按以下要求分部骤操作。 (1)联结好清洗槽与发生器之间的电缆; (2)将清洗液倒入清洗槽中(倒入清洗液的量就为放入被清洗物时,液面的位置约为整体的四分之三为佳); (3)将被清洗物放入清洗槽; (4)插上电源插头; (5)设立清洗时间,开机。 七、使用超声波清洗机应注意什么问题? 1、超声波清洗机电源及电热器电源必须有良好接地装置。 2、超声波清洗机严禁无清洗液开机,即清洗缸没有加一定数量的清洗液,不得合超声波开关。 3、有加热设备的清洗设备严禁无液时打开加热开关。 4、禁止用重物(铁件)撞击清洗缸缸底,以免能量转换器晶片受损。 5、超声波发生器电源应单独使用一路220V/50Hz电源并配装2000W以上稳压器。 6、清洗缸缸底要定期冲洗,不得有过多的杂物或污垢。 7、每次换新液时,待超声波起动后,方可洗件。 八、使超声波清洗效果最佳的方式? (1)超声波清洗槽的温度最好为30~50℃。 (2)根据不同的清洗对象正确选择清洗剂。清洗剂一般分为水基(碱性)清洗剂、有机溶剂清洗剂和化学反应清洗剂。通常使用最多的为水基清洗剂。 (3)根据被清洗物的污染程度和污垢性质,选用不同的清洗时间。 九、节约清洗液的小窍门? 超声波清洗机的清洗液可以循环使用,这种清洗方式可以节约大量的清洗液,每次使用完清洗机后,最好将清洗液放入容器中,下次使用时再倒入清洗槽,余下的沉淀物可处理掉。如清洗液的浓度不够时,适量加入一点即可重复使用。 十、适用范围及作用? 超声波清洗器主要应用于科研单位、大专院校、医学、生化、物理、化学等实验中作提取,脱气、乳化、混匀、细胞粉碎之用。并广泛用于医疗器械、手术器械、玻璃器皿、机器零件、电子器件、音频磁头、乳胶模具、化纤喷丝头、打印机喷墨头、磁性材料、照相器械、通讯器械、油泵、化油器、喷油嘴、缸头、缸盖体、各种阀体、轴承、轴瓦、液压气动件、电镀件、金银首饰、钟表、眼镜器件等的清洗、去硅除油、除碳及表面处理。特别对深孔、盲孔、凹超声波清洗凸槽的清洗最理想设备.
[font=宋体]链接:[/font]https://bbs.instrument.com.cn/topic/4840810 https://bbs.instrument.com.cn/topic/4952621问题描述:超声波在样品前处理中的重要作用和主要应用有哪些?解答:[font=宋体]超声波是一种弹性机械波,同时也是一种能量形式,当达到一定剂量的超声在生物体内传播时,通过它们之间的相互作用,能引起生物体的功能和结构发生变化。超声波对生物细胞的作用效应主要有热效应、空化效应和机械效应三种。[/font]1[font=宋体]、热效应:超声在介质中传播时,由于摩擦力对超声引起的分子震动的的阻碍,使得超声波的部分能量转化为了局部热能。正常组织的临界致死温度为[/font]45.7[font=宋体]℃[/font][font=宋体],而对温度较为敏感的肿瘤组织在此温度下常常发生细胞的代谢障碍,使肿瘤组织的[/font]DNA[font=宋体]、[/font]RNA[font=宋体]、蛋白质等重要生物大分子的合成受到严重影响。医学上利用超声波对生物细胞的热效应而发明的超声波治疗仪即是能对癌细胞产生杀伤作用却不影响正常组织生理代谢。[/font]2[font=宋体]、空化效应:指在超声作用下,生物体内的水分子会形成微小空泡,伴随空泡生长和破裂产生的巨大机械剪切力和高温,使肿瘤出血、组织瓦解以致坏死。另外,空化泡破裂时产生瞬时高温(约[/font]5000[font=宋体]℃[/font][font=宋体])、高压(可达[/font]500×104Pa[font=宋体]),可使水蒸气热解离产生[/font].OH[font=宋体]自由基和[/font].H[font=宋体]原子,由[/font].OH[font=宋体]自由基和[/font].H[font=宋体]原子引起的氧化还原反应可导致多聚物降解、酶失活、脂质过氧化和细胞杀伤。[/font]3[font=宋体]、机械效应:是超声引起的原发效应,超声波在传播过程中介质质点交替地压缩与伸张构成了压力变化,引起细胞结构损伤。超声机械效应杀伤作用的强弱与超声的频率和强度密切相关。利用超声波对生物细胞的三大作用而发明的仪器设备广泛应用于基础研究领域的细胞破碎乳化、医疗系统的疾病诊断、超声治疗等各个行业领域。[/font]以上内容来自仪器信息网《样品前处理实战宝典》
[b][font=微软雅黑][size=10.5pt]一、机械破碎法:[/size][/font][/b][font=微软雅黑][size=10.5pt][font=微软雅黑]是指利用捣碎机、研磨器或匀浆器[/font] [font=微软雅黑]等将细胞破碎开来[/font] [font=微软雅黑]。[/font][/size][/font][font=微软雅黑][size=10.5pt]1. 高速组织捣碎:将材料配成稀糊状液,放置于筒内约1/3体积,盖紧筒盖,将调速器先拨至最慢处,开动开关后,逐步加速至所需速度。此法适用于动物内脏组织、植物肉质种子等。[/size][/font][font=微软雅黑][size=10.5pt]2. 玻璃匀浆器匀浆:先将剪碎的组织置于管中,再套入研杆来回研磨,上下移动,即可将细胞研碎,此法细胞破碎程度比高速组织捣碎机为高,适用于量少和动物脏器组织。[/size][/font][b][font=微软雅黑][size=10.5pt]二、物理破碎法:[/size][/font][/b][font=微软雅黑][size=10.5pt]指利用温度差、压力差或超声波等将细胞破碎开来。[/size][/font][font=微软雅黑][size=10.5pt]1.用一定功率的超声波处理细胞悬液,使细胞急剧震荡破裂(借助超声的震动力破碎细胞壁和细胞器)。[/size][/font][font=微软雅黑][size=10.5pt]机制:可能与强声波作用溶液时,气泡产生、长大和破碎的空化现象有关,空化现象引起的冲击波和剪刀力使细胞裂解。[/size][/font][font=微软雅黑][size=10.5pt]超声波破碎的效率取决于声频、声能、处理时间、细胞浓度和细胞类型等。(使用时注意降温,防止过热)。[/size][/font][font=微软雅黑][size=10.5pt]2. 高压破碎:细胞悬浮液从高压室的环状隙喷射到静止的撞击环上,被迫改变方向经出口管流出。此过程中细胞经历了高速造成的剪切的碰撞及高压到常压的变化,从而破碎释放内含物。[/size][/font][font=微软雅黑][size=10.5pt]这是一种温和的、彻底破碎细胞的较理想的方法。[/size][/font][font=微软雅黑][size=10.5pt]3. 反复冻融法:将细胞在-20度以下冰冻,室温融解,反复几次,由于细胞内冰粒形成和剩余细胞液的盐浓度增高引起溶胀,使细胞结构破碎。[/size][/font][b][font=微软雅黑][size=10.5pt]三、化学破碎法:[/size][/font][/b][font=微软雅黑][size=10.5pt][font=微软雅黑]指利用甲醛、丙酮等有机溶剂或表面活性剂作用于细胞膜,使细胞膜的结构遭到破坏或透性发生改变[/font] [font=微软雅黑]。[/font][/size][/font][font=微软雅黑][size=10.5pt][font=微软雅黑]有些动物细胞,例如肿瘤细胞可采用十二烷基磺酸钠([/font]SDS)、去氧胆酸钠等细胞膜破坏。浓度一般为1mg/ml。[/size][/font][font=微软雅黑][size=10.5pt][font=微软雅黑]四、酶学破碎法[/font] [font=微软雅黑]:[/font][/size][/font][font=微软雅黑][size=10.5pt]选用合适的酶,使细胞壁遭到破坏,进而在低渗溶液中将原生质体破碎开来。[/size][/font][font=微软雅黑][size=10.5pt]细菌细胞壁较厚,可采用溶菌酶处理效果更好。[/size][/font][font=微软雅黑][size=10.5pt][font=微软雅黑]裂解液标准配方[/font]: :50mM Tris-HCl(pH8.5~9.0), 2mM EDTA, 100mM NaCl, 0.5% Triton X-100, 1mg/ml溶菌酶。(溶菌酶在这个pH范围内比较好发挥作用) 。[/size][/font][font=微软雅黑][size=10.5pt][font=微软雅黑]综合叙述:无论用哪一种方法破碎组织细胞,都会使细胞内蛋白质或核酸水解酶释放到溶液中,使大分子生物降解,导致天然物质量的减少,加入二异丙基氟磷酸([/font]DFP)可以抑制或减慢自溶作用;加入碘乙酸可以抑制那些活性中心需要有疏基的蛋白水解酶的活性,加入PMSF也能清除蛋白水解酶活力,但不是全部,而且应该在破碎的同时多加几次;另外,还可通过选择pH、温度或离子强度等,使这些条件都要适合于目的物质的提取。[/size][/font]