LC-MS样品处理过程中影响疏水性肽回收率的因素
要使用LC-MS成功定量蛋白质和肽,必须持续关注工作流程中各个步骤的细节,包括样品前处理到色谱分离,再到质谱检测。分析人员常常忽视的一个细节是样品可能会在LC-MS进样之前损失,尤其是在使用收集板或样品瓶等容器储存样品的过程中。溶液中的某些蛋白质和肽很容易被容器表面吸附,导致样品永久损失。这种非特异性吸附(NSB)可能影响定量结果的准确性,进而限制LC-MS分析能力。使用阻断试剂是缓解非特异性吸附(简称NSB:Non-Specific Binding)问题最常用的解决方法,但这些试剂不一定能完全兼容下游LC-MS条件。本研究探讨了影响肽回收率的多种因素,并提出了一种不使用阻断试剂即可防止样品损失的系统方案。