[size=18px] 汉邦全自动蛋白纯化系统是公司自主研发的一款高效、快速、可靠的全自动蛋白纯化系统。可用于微克到克级水平的蛋白、多肽和核酸等生物分子的快速高效纯化。该系统采用模块化设计、配套智能化软件并结合公司的各类层析柱，可满足实验室各类生物大分子的纯化需求。它的模块化设计、智能化软件并结合汉邦科技的各类层析柱，可以满足实验室中各类生物大分子的纯化挑战！ 欢迎来电咨询：18952338196 [img=,690,469]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/05/202205261525020323_4695_2788731_3.jpg!w690x469.jpg[/img][/size]
有个同学是做生物分子的，想买个液相，主要用于DNA和RNA纯化，我还不知道HPLC可以纯化核酸呢，不知道这个对仪器有没有什么要求，我只是知道会用到PEEK管的，用反向C18把杂链分离，不知道大虾们有没有做这个行业的，给小弟点意见啊。流量，压力这块有没有什么要求的，泵用那种比较好？检测器呢？
公司（上海********有限公司）现有waters 质谱/UV 引导的自动纯化系统一套。该系统具备：沃特世AutoPurification系统可以同时与UV，RI，ELSD，PDA，MS等多种检测器并联，从而一针进样可以同时得到多种检测信号，获得更多更完整的信息。并可以其中任何一个或多个信号触发收集。大大提高分离纯化通量和纯度。这套系统设计可以用单一指令来切换最多5根色谱柱（3根分析柱，2根制备柱）。 结合沃特世最佳柱床优化设计的OBD制备柱，可以对复杂的中药进行高效分离，并获得最佳的柱寿命。系统优势■ 是目前市面上唯一一款能够实现从粗品分析到馏分收MS/ UV 引导的自动纯化制备系统（AutoPurification system）在TCM中的应用集再到馏分纯度再分析的全自动化过程的纯化系统，具有独立的分析及制备进样阀及管路，可实现完全自动化的复杂物质的分析方法开发，制备方法开发，馏分纯度分析的功能■ 该纯化系统的二元高压梯度溶剂泵，具有专利的11条梯度曲线功能（梯度曲线：11条包括1条线性，2条阶梯，4条凹线，4条凸线）， 对于复杂化合物的分离，如中药等具有快速，高效分离的特点。且该泵具有完整的，自动的，可编程控制的泵密封冲洗程序，有效提高泵的使用性能■ 该系统标准配置分析方法到制备方法开发的计算器，可以实现从分析到制备的无忧放大，保证复杂化合物的制备效率■ 具备完全独立的纯化软件系统，能自动对色谱峰形进行切割、区分，同时可采用分子量及紫外光谱纯度，保留时间或模拟信号等设定多种触发模式进行收集设置http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/09/201109251936_319223_1929184_3.jpg
公司（上海************有限公司）沃特世AutoPurification 系统主要用于复杂基质中各种目标化合物的分析及制备。可以根据多种触发模式进行合成药，环境毒素，中药、天然产物、多肽等复杂基质组分的分离及纯化。众所周知中药成分复杂，采用传统分离制备方法，面临着上样量、分离度、回收率、分析到制备的无忧放大，高通量等多方面的挑战。沃特世AutoPurification系统可以同时与UV，RI，ELSD，PDA，MS等多种检测器并联，从而一针进样可以同时得到多种检测信号，获得更多更完整的信息。并可以其中任何一个或多个信号触发收集。大大提高分离纯化通量和纯度。这套系统设计可以用单一指令来切换最多5根色谱柱（3根分析柱，2根制备柱）。 结合沃特世最佳柱床优化设计的OBD制备柱，可以对复杂的中药进行高效分离，并获得最佳的柱寿命。系统优势■ 是目前市面上唯一一款能够实现从粗品分析到馏分收MS/ UV 引导的自动纯化制备系统（AutoPurification system）在TCM中的应用集再到馏分纯度再分析的全自动化过程的纯化系统，具有独立的分析及制备进样阀及管路，可实现完全自动化的复杂物质的分析方法开发，制备方法开发，馏分纯度分析的功能■ 该纯化系统的二元高压梯度溶剂泵，具有专利的11条梯度曲线功能（梯度曲线：11条包括1条线性，2条阶梯，4条凹线，4条凸线）， 对于复杂化合物的分离，如中药等具有快速，高效分离的特点。且该泵具有完整的，自动的，可编程控制的泵密封冲洗程序，有效提高泵的使用性能■ 该系统标准配置分析方法到制备方法开发的计算器，可以实现从分析到制备的无忧放大，保证复杂化合物的制备效率■ 具备完全独立的纯化软件系统，能自动对色谱峰形进行切割、区分，同时可采用分子量及紫外光谱纯度，保留时间或模拟信号等设定多种触发模式进行收集设置http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/09/201109251941_319224_1929184_3.jpg
[img=,257,264]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/06/201706301258_01_3194653_3.png[/img]Aurora全自动核酸提取系统采用专利SCODA（ Synchro-nous Coefficient of Drag Alteration）电泳DNA操作技术，从具有挑战性的样品中浓缩和纯化DNA.SCODA根据DNA的物理特性选取长的带电聚合物（而非通过其其化学性质或化合物亲合力分离DNA).因此，系统可提供卓越的污染物排斥.此外，Aurora系统可从单一样本中提取高达100倍浓度，从几百分子到100微克的DNA.可高效稳定地纯化提取核酸和蛋白，尤其适合珍贵样品、低生物质低丰度样品、土壤、环境等各类型难提取样品的提取. 产品特征电泳纯化高分子量DNA的提取低生物量和严重抑制样品处理样品成本为零，适合低通量样品处理宏基因组学/NGS/光学测绘/单分子测序应用应用领域生命科学研究土壤与环境农业生物技术法医学 技术参数样品处理时间：2-4小时,样品盐度60％DNA / RNA片段大小： 500 nt RNA，300 bp - 50 kb DNA，可扩展到1Mb污染物抑制： 10-50,000X2产量： 60 uL 该系统避免了研磨、匀浆等传统方法的费力、耗时、低效等诸多缺点，通过非机械过程直接从环境样品，细胞提取物，或带电泳插头的琼脂糖中回收完整的高纯大片段DNA。DNA提取缓冲液、DNA凝胶柱可用于进行后续的克隆，归档，光学标测，或PCR、测序等遗传分析。系统可从至多5毫升稀释裂解液或洗出液中提取核酸，回收低生物质样品包括沉积物，土壤，苔原，和水样中的微量核酸。系统还可净化商业试剂盒受污染洗脱液，提高样品利用率，并无缝对接到现有的工作流程中.
全自动层析分离纯化系统和制备液相是一样的吗?有什么区别?
核酸提取(核酸的分离与纯化)主要是指将核酸与蛋白质、多糖、脂肪等生物大分子物质分开,但在分离核酸时,应保证核酸分子一级结构的完整性,并排除其他分子污染。核酸提取方法一般包括细胞裂解、酶处理、核酸与其他生物大分子物质分离、核酸纯化等几个主要步骤,而每一步骤又可由多种不同的方法单独或联合实现。操作过程中首先通过物理、化学或酶解作用裂解细胞,使核酸释放出来,并去除与核酸结合的蛋白质以及多糖、脂肪类等生物大分子的过程。在此基础上,沉淀核酸、去除盐类和有机试剂等杂质,从而得到纯化的核酸。核酸提取仪是应用配套的核酸提取试剂来自动完成样本核酸的提取工作的仪器。在传统的手工核酸提取过程中通常采用离心澄清的方法，操作时费时费力。近年来,出现了磁珠分离技术，利用磁珠在一定条件下对核酸具有很强亲和力的特点，吸附核酸。当条件改变时，磁珠又可以与其吸附的核酸分离,从而得到纯化的核酸。这种方法简便、高效、易于操作，是目前核酸提取仪采用的主要方法。具体来说，磁珠法提取核酸是通过细胞裂解液裂解细胞，从细胞中游离出来的核酸分子被特异的吸附到磁性颗粒表面，而蛋白质等杂质不被吸附而留在溶液中。反应一定时间之后，再在磁场作用下，使磁性颗粒与液体分开，回收颗粒（即磁珠-DNA 混合物），再用洗脱液洗脱即可以得到纯净的DNA。磁珠法不需要离心、不需要加入多种试剂，操作简单，符合核酸自动化提取要求，是未来核酸纯化方法发展的一个重要方向。
有没有人留意过waters 2767/3767系列 纯化系统的自动清洗问题，这个系列的进样针是套管针，正常不应该是针内通过T7管路清洗，针外壁通过T8管路清洗吗？现在发现在灌注进样系统时，没有液体从T6流到T8，T7是有液体流出的，这样就导致针外壁没有洗针液清洗。尝试过调换wash path valve和wash select valve，还是同样的问题，T1/T2切换正常，T7有液体流出，T6没有液体，说明切换阀是正常的。想问问论坛的同行前辈，有没有人遇到这种问题，还是说我对于整个自动清洗管路的理解有误？[img=,690,326]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/07/202207071121586225_8237_5600108_3.jpg!w690x326.jpg[/img]
[size=16px][color=#ff0000][b][url=https://www.instrument.com.cn/job/position-88640.html]立即投递该职位[/url][/b][/color][/size][b]职位名称：[/b]蛋白纯化仪器产品经理-广州市[b]职位描述/要求：[/b]主要工作内容1、开发大分子生产研发客户，寻找蛋白核酸制备纯化需求；2、根据客户的计划与资金，为客户提供配置解决方案；3、维护客户关系；4、进行市场分析与预测，为公司提供策略建议；主要要求1、生命科学与制药相关专业本科以上学历；2、熟悉生物制药企业客户3、具有良好的沟通技能4、本行业三年以上经验5、强大的市场开拓能力6、熟悉蛋白纯化仪器与相关市场；7、具有良好的工作习惯主要待遇1、具有良好的薪酬待遇2、具有良好的上升空间[b]公司介绍：[/b] 上海闪谱生物科技有限公司公司简介： 上海闪谱生物科技有限公司成立于上海漕河泾高科技区的中国科学院上海生物工程中心，专注于样品纯化仪器的研发、生产与销售。主要产品有全自动GPC凝胶净化系统、全自动固相萃取仪、全自动制备色谱系统三大系列产品。 上海闪谱生物科技有限公司是一家技术型公司，拥有中国科学院大连化物所、中国科学院上海生物工程中心的专业技术人员为主体的科技队伍，具有大量技...[url=https://www.instrument.com.cn/job/position-88640.html]查看全部[/url][align=center][img=,178,176]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2021/08/202108160948175602_3528_5026484_3.png!w178x176.jpg[/img][/align][align=center]扫描二维码，关注[b][color=#ff0000]“仪职派”[/color][/b]公众号[/align][align=center][b]即可获取高薪职位[/b][/align]
利用硅胶膜法提取纯化质粒DNA摘要：系统的阐述了质粒核酸提取过程中针对裂解和核酸纯化两大关键步骤的研究，重点介绍了利用硅胶膜法提取纯化核酸，以及在实验过程中的一些经验。关键词：硅胶膜法；纯化；质粒DNA一、前言随着分子生物学技术的发展，核酸的分子生物学技术成为了药物研发、遗传病和感染性疾病的诊断、基因研究及物种鉴定等的常用研究手段之一。然而，核酸提取质量是进行下游一系列研究的关键，因此提取的方法会直接影响后续实验。细菌质粒是一类双链闭合环状的DNA，大小范围从1kb至200kb以上不等。各种质粒都是存在于细胞质中、独立于细胞染色体之外的自主复制的遗传成份。质粒已成为目前最常用的基因克隆的载体分子，重要的条件是可获得大量纯化的质粒DNA分子。硅胶膜法是一种应用最为广泛的提取纯化质粒DNA的方法，因硅基质材料可特异吸附核酸DNA，使用方便、快捷，不需要使用有毒溶剂如酚、氯仿等，使得提取质粒核酸像过滤一样简单。二、实验部分2.1 原理硅基质材料吸附核酸的原理主要利用DNA在高盐低pH值环境下与硅基质材料相结合，在低盐高pH值环境下与硅基质材料脱离的特征。其机理是带负电荷的DNA和带正电的二氧化硅粒子之间有很强的亲和力。在高浓度盐离子的作用下，盐离子打破水中的氢和二氧化硅上带负电荷的氧离子间的氢键，DNA与硅基质紧密结合，洗涤除去其他杂质；再用低离子强度的TE缓冲液或蒸馏水洗脱结合的DNA分子，机理是当盐被清除后，再水化的硅基质破坏了基质和DNA之间的吸引力，因而DNA从硅基质上被洗脱下来。2.2 主要试剂溶液Ⅰ:50mM葡萄糖，25mM Tris-HCl(pH 8.0)，10mM EDTA(pH 8.0）。溶液Ⅱ：0.2NNaOH，1% SDS。溶液Ⅲ：醋酸钾（KAc）缓冲液，pH 4.8。漂洗液：60mM 乙酸钾、10mM Tris-HCl (pH 7.5) 、60% 乙醇TE：10mMTris-HCl(pH 8.0)，1mM EDTA(pH 8.0)。2.3 主要步骤该步骤采用CommaPrePTM的质粒小提纯化柱。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/07/201507171513_556042_3310_3.jpgCommaPrep™核酸小提柱可用在核酸提取过程中过柱结合、洗涤、洗脱步骤中http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/07/201507171516_556043_3310_3.jpg1. 取1.5ml过夜培养的菌液，加入离心管中，使用常规台式离心机，12,000 rpm 离心1 min， 尽量吸除上清。 （注意：应根据所培养菌体的浓度与质粒的拷贝数，确定收集的菌液量。菌量过大可能导致溶菌不充分，纯化时会影响质粒纯度菌液较多时可以通过多次离心将菌体沉淀收集到一个离心管中）。2. 将细菌沉淀重悬于100uL溶液Ⅰ中，移液器或涡旋振荡器彻底悬浮细菌沉淀，使菌体分 散混匀。 (注意：如果有未彻底混匀的菌块，会影响裂解，导致提取量和纯度偏低。并且溶液Ⅰ中 要加入适量的RNA酶）3. 向离心管中加入200uL溶液Ⅱ，温和地上下翻转数次，并将离心管放置于冰上2-3min，使细胞膜裂解。（注意：温和地混合，不要剧烈震荡，以免污染基因组DNA。此时菌液应变得清亮，如果未变得清亮，可能由于菌体过多，裂解不彻底，应减少菌体量。）4. 加入150uL溶液Ⅲ，立即将管温和颠倒数次混匀，见白色絮状沉淀。12000rpm， 离心2分钟。 (注意：加入溶液Ⅲ后，要立即将管温和颠倒，避免产生局部沉淀。如果上清液中存在沉淀，可再一次离心。溶液Ⅲ为中和溶液，此时质粒DNA复性，染色体和蛋白质不可逆变性，形成不可溶复合物。）5. 吸取上清至吸附柱（内管）中（吸附柱在离心管中），尽量不要吸出沉淀，12000rpm，离心30秒。弃去废液，将吸附柱重新放入一个新的离心管中。6. 加入750uL的漂洗液（漂洗液要在实验前加入无水乙醇）12000rpm离心，1min。取出 DNA结合柱，弃废液，重新插入DNA结合柱到离心管中。7. 用500uL漂洗液重复冲洗过程。12000rpm离心，1min。（注意：重复一次可以增加质粒的回收效率。）8. 转移DNA结合柱到1个新的1.5mL离心管中，加入60uL的无核酸酶的水到DNA结合柱中，洗脱质粒DNA，室温条件下，12000rpm离心，1min。 （注意：不要转入DNA结合柱中的漂洗液，如果混有，就需要12000rpm离心，1min。洗脱缓冲液体积不少于50uL，体积小会影响回收效率。 洗脱液的pH值对于洗脱效率有很大的影响，若用水洗脱应保证pH值在7.0-8.5范围内， pH小于7会降低洗脱效率。如果长期保存DNA，洗脱液建议使用TE。）9. 加入100uL的无核酸酶水到结合柱中，洗脱质粒DNA，离心12000rpm，1min。（注意：重复一次，增加洗脱效率。）10.洗脱DNA后，从1.5mL离心管中取出DNA结合柱并废弃。11.取2uLDNA进行电泳，检测DNA质量。12.将纯化的DNA溶液于-20℃中。三、实验结果图为质粒DNA（10kb）的凝胶电泳图，说明提取效果较好。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/07/201507171525_556044_3310_3.jpg
[size=16px][color=#ff0000][b][url=https://www.instrument.com.cn/job/position-88641.html]立即投递该职位[/url][/b][/color][/size][b]职位名称：[/b]蛋白纯化仪器产品经理-深圳市[b]职位描述/要求：[/b]主要工作内容1、开发大分子生产研发客户，寻找蛋白核酸制备纯化需求；2、根据客户的计划与资金，为客户提供配置解决方案；3、维护客户关系；4、进行市场分析与预测，为公司提供策略建议；主要要求1、生命科学与制药相关专业本科以上学历；2、熟悉生物制药企业客户3、具有良好的沟通技能4、本行业三年以上经验5、强大的市场开拓能力6、熟悉蛋白纯化仪器与相关市场；7、具有良好的工作习惯主要待遇1、具有良好的薪酬待遇2、具有良好的上升空间[b]公司介绍：[/b] 上海闪谱生物科技有限公司公司简介： 上海闪谱生物科技有限公司成立于上海漕河泾高科技区的中国科学院上海生物工程中心，专注于样品纯化仪器的研发、生产与销售。主要产品有全自动GPC凝胶净化系统、全自动固相萃取仪、全自动制备色谱系统三大系列产品。 上海闪谱生物科技有限公司是一家技术型公司，拥有中国科学院大连化物所、中国科学院上海生物工程中心的专业技术人员为主体的科技队伍，具有大量技...[url=https://www.instrument.com.cn/job/position-88641.html]查看全部[/url][align=center][img=,178,176]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2021/08/202108160948175602_3528_5026484_3.png!w178x176.jpg[/img][/align][align=center]扫描二维码，关注[b][color=#ff0000]“仪职派”[/color][/b]公众号[/align][align=center][b]即可获取高薪职位[/b][/align]
[size=16px][color=#ff0000][b][url=https://www.instrument.com.cn/job/position-88646.html]立即投递该职位[/url][/b][/color][/size][b]职位名称：[/b]蛋白纯化仪器产品经理-南京市[b]职位描述/要求：[/b]主要工作内容1、开发大分子生产研发客户，寻找蛋白核酸制备纯化需求；2、根据客户的计划与资金，为客户提供配置解决方案；3、维护客户关系；4、进行市场分析与预测，为公司提供策略建议；主要要求1、生命科学与制药相关专业本科以上学历；2、熟悉生物制药企业客户3、具有良好的沟通技能4、本行业三年以上经验5、强大的市场开拓能力6、熟悉蛋白纯化仪器与相关市场；7、具有良好的工作习惯主要待遇1、具有良好的薪酬待遇2、具有良好的上升空间[b]公司介绍：[/b] 上海闪谱生物科技有限公司公司简介： 上海闪谱生物科技有限公司成立于上海漕河泾高科技区的中国科学院上海生物工程中心，专注于样品纯化仪器的研发、生产与销售。主要产品有全自动GPC凝胶净化系统、全自动固相萃取仪、全自动制备色谱系统三大系列产品。 上海闪谱生物科技有限公司是一家技术型公司，拥有中国科学院大连化物所、中国科学院上海生物工程中心的专业技术人员为主体的科技队伍，具有大量技...[url=https://www.instrument.com.cn/job/position-88646.html]查看全部[/url][align=center][img=,178,176]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2021/08/202108160948175602_3528_5026484_3.png!w178x176.jpg[/img][/align][align=center]扫描二维码，关注[b][color=#ff0000]“仪职派”[/color][/b]公众号[/align][align=center][b]即可获取高薪职位[/b][/align]
[size=16px][color=#ff0000][b][url=https://www.instrument.com.cn/job/position-88639.html]立即投递该职位[/url][/b][/color][/size][b]职位名称：[/b]蛋白纯化仪器产品经理-上海市[b]职位描述/要求：[/b]主要工作内容1、开发大分子生产研发客户，寻找蛋白核酸制备纯化需求；2、根据客户的计划与资金，为客户提供配置解决方案；3、维护客户关系；4、进行市场分析与预测，为公司提供策略建议；主要要求1、生命科学与制药相关专业本科以上学历；2、熟悉生物制药企业客户3、具有良好的沟通技能4、本行业三年以上经验5、强大的市场开拓能力6、熟悉蛋白纯化仪器与相关市场；7、具有良好的工作习惯主要待遇1、具有良好的薪酬待遇2、具有良好的上升空间[b]公司介绍：[/b] 上海闪谱生物科技有限公司公司简介： 上海闪谱生物科技有限公司成立于上海漕河泾高科技区的中国科学院上海生物工程中心，专注于样品纯化仪器的研发、生产与销售。主要产品有全自动GPC凝胶净化系统、全自动固相萃取仪、全自动制备色谱系统三大系列产品。 上海闪谱生物科技有限公司是一家技术型公司，拥有中国科学院大连化物所、中国科学院上海生物工程中心的专业技术人员为主体的科技队伍，具有大量技...[url=https://www.instrument.com.cn/job/position-88639.html]查看全部[/url][align=center][img=,178,176]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2021/08/202108160948175602_3528_5026484_3.png!w178x176.jpg[/img][/align][align=center]扫描二维码，关注[b][color=#ff0000]“仪职派”[/color][/b]公众号[/align][align=center][b]即可获取高薪职位[/b][/align]
[size=16px][color=#ff0000][b][url=https://www.instrument.com.cn/job/position-88645.html]立即投递该职位[/url][/b][/color][/size][b]职位名称：[/b]蛋白纯化仪器产品经理-太原市[b]职位描述/要求：[/b]主要工作内容1、开发大分子生产研发客户，寻找蛋白核酸制备纯化需求；2、根据客户的计划与资金，为客户提供配置解决方案；3、维护客户关系；4、进行市场分析与预测，为公司提供策略建议；主要要求1、生命科学与制药相关专业本科以上学历；2、熟悉生物制药企业客户3、具有良好的沟通技能4、本行业三年以上经验5、强大的市场开拓能力6、熟悉蛋白纯化仪器与相关市场；7、具有良好的工作习惯主要待遇1、具有良好的薪酬待遇2、具有良好的上升空间[b]公司介绍：[/b] 上海闪谱生物科技有限公司公司简介： 上海闪谱生物科技有限公司成立于上海漕河泾高科技区的中国科学院上海生物工程中心，专注于样品纯化仪器的研发、生产与销售。主要产品有全自动GPC凝胶净化系统、全自动固相萃取仪、全自动制备色谱系统三大系列产品。 上海闪谱生物科技有限公司是一家技术型公司，拥有中国科学院大连化物所、中国科学院上海生物工程中心的专业技术人员为主体的科技队伍，具有大量技...[url=https://www.instrument.com.cn/job/position-88645.html]查看全部[/url][align=center][img=,178,176]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2021/08/202108160948175602_3528_5026484_3.png!w178x176.jpg[/img][/align][align=center]扫描二维码，关注[b][color=#ff0000]“仪职派”[/color][/b]公众号[/align][align=center][b]即可获取高薪职位[/b][/align]
跪求强酸性阳离子交换树脂分离纯化黑曲霉发酵液中的柠檬酸方法，使用仪器核酸蛋白检测仪（波长多少？）实验步骤？实验所用洗脱剂？洗脱下来之后怎么检测柠檬酸含量？如何证明是柠檬酸？如何侧柠檬酸含量？。。。无语无助ing。。。目前在用280纳米核酸蛋白检测仪，恒流泵，记录仪，百分之一氨水洗脱，，下一步如何测柠檬酸含量啊啊啊啊，，，，，
蛋白质纯化及复性 重组蛋白在大肠杆菌（E. coli）高效表达时，往往以不溶的、无活性的蛋白聚集体，即包涵体(inclusion body)的形式存在于细胞内。必须从细胞内分离出包涵体，采用高浓度变性剂（如7.0mol/L盐酸胍、8.0mol/L脲）溶解包涵体，然后除去变性剂或降低变性剂的浓度，使包涵体蛋白得以复性，最后再用色谱法使目标蛋白质得到纯化。其中包涵体蛋白的复性和纯化是整个过程中的核心。 目前重组蛋白生产中普遍存在的问题是：（1）复性效率低。传统的复性方法稀释法和透析法。稀释复性法对样品几十倍，甚至上百倍的稀释会使样品的体积急剧增大，给后续的分离纯化带来很大的困难，而且复性过程中需要较大的复性容器。透析法耗时较长，而且要多次更换透析溶液。这两种方法的共同缺点是蛋白质在复性过程中会发生聚集而产生大量沉淀，复性效率低，通常蛋白质的活性回收率只有5~20%，而且复性后的蛋白质溶液中含有大量的杂蛋白，需要进行进一步的分离纯化。（2）工艺路线烦琐，生产周期长。在传统的重组蛋白质分离纯化工艺中，大多采用经典的软凝胶分离介质，由于这种介质的颗粒较大，分离效率较差，因此常常需要采用多种不同模式的色谱操作联用对目标蛋白质进行纯化，才能得到纯度符合一定标准的目标蛋白质。另外，这种色谱介质的耐压性很差，只能在流速较低的情况下进行操作，分离纯化时间较长。分离纯化步骤多和分离时间长使得蛋白质的质量回收率和活性回收率很低。而且在传统的重组蛋白质生产工艺中，蛋白质的复性和纯化是生产过程中两个独立的单元操作，也在很大程度上制约着生产效率。（3）生产成本高，设备投资大。由于复性和分离纯化分别单独进行，而且分离纯化步骤多，每一步都需要有与之配套的设备，致使设备投资大，生产成本高。随着生产规模的增加，这种弊端会愈来愈严重。 1991年耿信笃教授首先将高效疏水相互作用色谱(HPHIC)用于变性蛋白的复性，很好的解决了上述问题，现已成功用于重组人干扰素-g(rhIFN-g)、重组人干扰素-a(rhIFN-a)、人粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF)、重组人胰岛素原(proinsulin)、重组牛朊病毒(prion)等重组蛋白以及溶菌酶和核搪核酸酶等标准模型蛋白的复性与同时纯化中。目前，排阻色谱法、离子交换色谱法和亲合色谱法也已用于蛋白质的复性和同时纯化中。与传统的稀释法及透析法比较，用色谱法进行蛋白复性的优点是：①在进样后可很快除去变性剂；②由于色谱固定相对变性蛋白质的吸附，可明显地减少、甚至完全消除复性过程中蛋白质聚集体和沉淀的产生，从而提高蛋白质复性的质量和活性回收率；③在蛋白质复性的同时可使目标蛋白质与杂蛋白分离以达到纯化的目的，使复性和纯化同时进行；④便于回收变性剂，以降低废水处理成本。简言之，色谱法复性可以提高蛋白质的活性和质量回收率，将蛋白复性和纯化集成在一步操作完成，缩短了操作步骤和生产时间，减少了设备投资，使生产成本大大降低，已经引起了全世界范围内许多生化研究者和重组蛋白药物生产厂家的关注。由于高效液相色谱（HPLC）分离效率高，往往在一步操作中便可得到纯度符合要求的蛋白质，而且分离速度快，在应用方面具有更大的优势。
[size=3]选择材料及预处理 以蛋白质和结构与功能为基础，从分子水平上认识生命现象，已经成为现代生物学发展的主要方向，研究蛋白质，首先要得到高度纯化并具有生物活性的目的物质。蛋白质的制备工作涉及物理、化学和生物等各方面知识，但基本原理不外乎两方面。一是得用混合物中几个组分分配率的差别，把它们分配到可用机械方法分离的两个或几个物相中，如盐析，有机溶剂提取，层析和结晶等；二是将混合物置于单一物相中，通过物理力场的作用使各组分分配于来同区域而达到分离目的，如电泳，超速离心，超滤等。在所有这些方法的应用中必须注意保存生物大分子的完整性，防止酸、硷、高温，剧烈机械作用而导致所提物质生物活性的丧失。蛋白质的制备一般分为以下四个阶段：选择材料和预处理，细胞的破碎及细胞器的分离，提取和纯化，浓细、干燥和保存。 微生物、植物和动物都可做为制备蛋白质的原材料，所选用的材料主要依据实验目的来确定。对于微生物，应注意它的生长期，在微生物的对数生长期，酶和核酸的含量较高，可以获得高产量，以微生物为材料时有两种情况：（1）得用微生物菌体分泌到培养基中的代谢产物和胞外酶等；（2）利用菌体含有的生化物质，如蛋白质、核酸和胞内酶等。植物材料必须经过去壳，脱脂并注意植物品种和生长发育状况不同，其中所含生物大分子的量变化很大，另外与季节性关系密切。对动物组织，必须选择有效成份含量丰富的脏器组织为原材料，先进行绞碎、脱脂等处理。另外，对预处理好的材料，若不立即进行实验，应冷冻保存，对于易分解的生物大分子应选用新鲜材料制备。 蛋白质的分离纯化 一，蛋白质（包括酶）的提取 大部分蛋白质都可溶于水、稀盐、稀酸或碱溶液，少数与脂类结合的蛋白质则溶于乙醇、丙酮、丁醇等有机溶剂中，因些，可采用不同溶剂提取分离和纯化蛋白质及酶。 （一）水溶液提取法 稀盐和缓冲系统的水溶液对蛋白质稳定性好、溶解度大、是提取蛋白质最常用的溶剂，通常用量是原材料体积的1-5倍，提取时需要均匀的搅拌，以利于蛋白质的溶解。提取的温度要视有效成份性质而定。一方面，多数蛋白质的溶解度随着温度的升高而增大，因此，温度高利于溶解，缩短提取时间。但另一方面，温度升高会使蛋白质变性失活，因此，基于这一点考虑提取蛋白质和酶时一般采用低温（5度以下）操作。为了避免蛋白质提以过程中的降解，可加入蛋白水解酶抑制剂（如二异丙基氟磷酸，碘乙酸等）。下面着重讨论提取液的pH值和盐浓度的选择。[/size]
[font=宋体]蛋白质是包括人类在内的各种生物有机体的重要组成成分，是生命的物质基础之一。生物体的生长、发育、遗传和繁殖等一切生命活动都离不开蛋白质。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]随着分子生物学、结构生物学、基因组学等研究的不断深入，人们意识到仅仅依靠基因组的序列分析来试图阐明生命活动的现象和本质是远远不够的。只有从蛋白质组学的角度对所有蛋白质的总和进行研究，才能更科学地掌握生命现象和活动规律，更完善地揭示生命的本质。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]由此许多学者将生命科学领域的研究焦点从基因转向蛋白质，使蛋白质成为揭示生命活动现象和分子生物学机理的重要研究对象。研究蛋白质首要的步骤是将目的蛋白从复杂的大分子混合物中分离纯化出来，得到高纯度具有生物学活性的目的物。因此，高效的纯化技术和手段是蛋白质研究的重要基础和关键之一。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体][font=宋体]蛋白纯化的目的[/font] [/font][/b][font=宋体][font=宋体]蛋白纯化的目的是将目标蛋白质从细胞裂解液的全部组分中分离出来，同时仍保留蛋白的生物学活性及化学完整性。蛋白质的分离和提纯工作是一项艰巨而繁重的任务，需根据蛋白的特性选择合适的纯化方法来提高获得的蛋白制品的纯度。[/font] [/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体][font=宋体]蛋白纯化的原理[/font] [/font][/b][font=宋体][font=宋体]不同蛋白质的氨基酸序列及空间结构不同，导致其在物理、化学、生物学等性质上存在差异，利用待分离蛋白质与其它蛋白质性质上的差异，即可以设计出一套合理的蛋白纯化方案。蛋白的纯化大致分为粗分离阶段和精细纯化阶段两个阶段。粗分离阶段主要将目的蛋白和其他细胞成分如[/font] [font=Calibri]RNA[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]DNA [/font][font=宋体]等分开，常用的方法为硫酸铵沉淀法。精细纯化阶段的目的是把目的蛋白与其他大小及理化性质接近的蛋白区分开来，[/font][/font][b][font=宋体][font=宋体]常用的方法有：凝胶过滤层析、离子交换层析、疏水层析、亲和层析等。[/font] [/font][/b][font=宋体] [/font][b][font=宋体]①[/font][font=宋体]凝胶过滤层析[/font][/b][font=宋体]凝胶过滤层析（又叫做分子筛）是根据样品的分子大小对样品进行分离的一种简单温和的层析技术。凝胶过滤层析也称分子筛层析、排阻层析，是利用具有网状结构的凝胶的分子筛作用，根据被分离物质的分子大小不同来进行分离。不同于离子交换层析和亲和层析，凝胶过滤的层析样品不与层析柱料结合，因此，缓冲液成分不直接影响分辨率。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]原理：层析柱中的填料是球状颗粒的惰性的多孔网状结构的柱料，多是交联的聚糖[/font][font=Calibri]([/font][font=宋体]如葡聚糖或琼脂糖[/font][font=Calibri])[/font][font=宋体]类物质。在加入样品之后，样品中的小分子物质能进入球状填料内部，在柱子中停留时间较长；而大分子物质不能进入球状填料内部，停留时间较短。所以当样品经过凝胶过滤层析柱分离后，样品中的不同分子大小的物质就可以被分离开了。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]特点：[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]根据分子大小和形状进行分离[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]是一种非吸附的分离方式[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]缓冲液成分不直接影响分辨率，只需要一种缓冲液[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]操作便捷[/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体]②[/font][font=宋体]离子交换层析[/font][/b][font=宋体]离子交换层析是目前蛋白质分离纯化中应用最广泛的方法之一。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]原理：不同蛋白等电点差异，分子大小差异，在同一个流动相中电荷密度分布不同，电荷量不等，与具有相反电荷的离子交换介质结合强度不同，在流动相洗脱时保留时间不同，从而得以分离。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体]特点：[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]根据分子大小和等电点差异进行分离[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]灵敏度高，重复性，选择性好，分析速度快[/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体]③[/font][font=宋体]疏水层析[/font][/b][font=宋体]原理：疏水层析是依据蛋白质疏水性差异分离的。即根据蛋白质和疏水介质表面的疏水基团的可逆相互作用进行分离。蛋白的疏水性在高离子强度下被增强，因此在高离子强度环境中结合，通常采用降低离子强度的方式进行洗脱。独特的吸附分离模式使得疏水层析成为硫酸铵盐析后或离子交换高盐洗脱后理想的纯化方式。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]特点：[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]采用了盐的水溶液作为流动相，色谱条件温和，生物大分子的活性回收率很高。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]蛋白质在[/font][font=Calibri]HIC[/font][font=宋体]操作过程中是高盐上样，低盐洗脱（高盐浓度的样品不必作处理就可直接上样）。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]在一次色谱中可同时实现出去盐酸胍、蛋白质复性和分离三个目的。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]温度升高，蛋白质天然折叠伸展，暴露出更多内部疏水集团，使蛋白质的[/font][font=Calibri]HIC[/font][font=宋体]保留发生变化。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]色谱填料稳定性好，盐水体系作流动相无环境污染。[/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体]④[/font][font=宋体]亲和层析[/font][/b][font=宋体][font=宋体]原理：[url=https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review/protein-purification-by-ac][b]亲和层析[/b][/url]是应用生物高分子与配基可逆结合的原理，将配基通过共价键牢固结合于载体上而制得的层析系统。这种可逆结合的作用主要是靠生物高分子对它的配基的空间结构的识别。常用的生物亲和关系有酶[/font][font=Calibri]-[/font][font=宋体]底物、底物类似物、抑制剂、激活剂、辅因子，抗体[/font][font=Calibri]-[/font][font=宋体]抗原，激素[/font][font=Calibri]-[/font][font=宋体]受体蛋白、载体蛋白，外源凝集素[/font][font=Calibri]-[/font][font=宋体]多糖、糖蛋白、细胞表面受体，核酸[/font][font=Calibri]-[/font][font=宋体]互补核苷酸序列、组蛋白、核酸结合蛋白等，具有高效、简单、快速的优点，是当前最为理想的分离纯化蛋白的方法。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]更多详情可以参看蛋白纯化技术[/font][font=Calibri]/[/font][font=宋体]方法：[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review/protein-purification-techniques[/font][/font][font=Calibri] [/font]
AKTA蛋白纯化系统是当前重组蛋白表达与纯化服务中经常用到的一组设备，自动化程度很高。AKTA系统依据不同的配置，可以分为AKTA EXPLORER、AKTA PILOT、AKTA PURIFIER等多种型号的设备。以下以AKTA EXPLORER为例简单介绍AKTA蛋白纯化系统的一般操作。
问题描述：核酸纯化用什么方法好？解答：[align=left][font='Times New Roman','serif']PC(P[/font][font=宋体]是酚的缩写，[/font][font='Times New Roman','serif']C[/font][font=宋体]是氯仿的缩写[/font][font='Times New Roman','serif'])[/font][font=宋体]抽提[/font][font='Times New Roman','serif']/[/font][font=宋体]醇沉淀方法，是一个永不过时的方法。稳定、可靠、经济、方便。[/font][font='Times New Roman','serif']PC[/font][font=宋体]抽提可以彻底去除蛋白质，醇沉淀可以去除盐，对于一般的干净的样品[/font][font='Times New Roman','serif'] ([/font][font=宋体]杂质为蛋白质[/font][font='Times New Roman','serif'])[/font][font=宋体]，该方法完全可以获得高质量的核酸。虽然每次[/font][font='Times New Roman','serif'] PC [/font][font=宋体]抽提都会损失一部分核酸[/font][font='Times New Roman','serif'] ([/font][font=宋体]因为不可能将水相全部移取[/font][font='Times New Roman','serif'])[/font][font=宋体]，以及低浓度核酸的醇沉淀效率低，但这些问题都可以靠操作的调整而得以解决或者减少影响。该方法的最大的问题是不适合大规模抽提。[/font][font='Times New Roman','serif']PC[/font][font=宋体]抽提是去除蛋白质的一个非常有效的手段。苯酚能使蛋白质变性，变性后的蛋白质从水相中被析出，处于苯酚中或者苯酚[/font][font='Times New Roman','serif']/[/font][font=宋体]水相之间。[/font][font='Times New Roman','serif']PC [/font][font=宋体]抽提的关键是，一要混匀彻底，二要用量足够。彻底混匀，才能确保苯酚与蛋白质的充分接触，使蛋白质完全变性。许多人总是担心混匀的剧烈程度是否会对核酸，尤其是基因组[/font][font='Times New Roman','serif'] DNA [/font][font=宋体]造成破坏，实际上大可不必如此小心。剧烈的混匀操作，是会部分打断大分子的基因组[/font][font='Times New Roman','serif'] DNA[/font][font=宋体]，但该破坏作用不会强烈到[/font][font='Times New Roman','serif'] DNA [/font][font=宋体]变成[/font][font='Times New Roman','serif'] 10kb [/font][font=宋体]以内的小片段。手剧烈晃动混匀后，基因组[/font][font='Times New Roman','serif'] DNA [/font][font=宋体]的片段，大部分会大于[/font][font='Times New Roman','serif'] 20kb[/font][font=宋体]，这个大小，除了一些特别的要求外，对[/font][font='Times New Roman','serif'] [url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url] [/font][font=宋体]和酶切，都是完全适用的。[/font][/align]以上内容来自仪器信息网《PCR实战宝典》
近日,南京艾迪迈科技有限公司(以下简称“艾迪迈”)宣布继动平衡资本、南京市创新投资集团之后,又完成由宇杉资本、苏州天汇微球基金(纳微科技参股基金,天汇资本管理)、中鑫资本的近五千万元Pre-A轮融资。本轮融资资金将主要用于生命科学领域自动化检测与纯化整体解决方案的落地,加速临床小分子检测与纳微&艾迪迈CRDMO解决方案等开发及推广,为临床色谱质谱实验室、生物分析实验室、药物检测实验室等实现智能化自动化赋能。艾迪迈成立于2019年2月,公司以原研技术驱动产品创新为战略核心,拥有智能化核心材料制备技术及自动化辅助设备开发应用与GMP生产能力,在多地设立有技术应用与服务中心,与中国科学院、威高集团、日本岛津、纳微生命等知名院校和企业建立长期合作,是国内领先的专用型色谱、质谱自动化检测领域的材料、设备及应用的全流程解决方案供货商。立足创新,用智能化材料技术实现分析检测与纯化的自动化在「工业 4.0」的背景下,传统色谱分析检测实验室向智能化自动化实验室转型势在必行,包括生物分析实验室、药物检测实验室、临床色谱质谱实验室等。目前大部分实验室还停留在流动相手工配制,样品手工称量等阶段,特别是样本前处理仍然是采用常规的蛋白沉淀、固相萃取小柱等方式方法,导致实验难以自动化,或者需要配置昂贵的自动化工作站来替代手工,但这些并没有从根本上解决我国整个色谱检测与样本处理的效率问题。艾迪迈科技通过多年在智能化样本前处理方面通过材料的技术革新及色谱的多维应用方案技术带来的突破,用低成本智能化材料技术+自动化设备技术+整体应用方案解决试剂配制、样本前处理及检测问题,为分析检测实验节约成本、解放生产力、提高工作效率,极大满足了分析实验室的效率提升需求。目前公司在临床色谱质谱检测领域已推出了包含全自动二维[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]系统、临床专用多维[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱仪[/color][/url]、磁珠法质谱检测系统等精准检测装备及首创ASP磁性固相萃取材料与配套试剂耗材,覆盖精准营养、精准用药、肿瘤筛查等多种产品组合 在生命科学与分析检测领域已开发了基于聚合物、硅胶及琼脂糖基质的系列特殊分离纯化用微球填料及样本前处理磁珠,覆盖离线与在线固相萃取、磁性固相萃取、蛋白沉淀等全部前处理方法,已逐步应用于生物制药、药物代谢、食品安全、刑侦毒检等方面。商业加速,纳微生命&艾迪迈联合打造临床色谱质谱CRDMO解决方案平台人体内小分子物质结构简单、分子量小、种类繁多,常见的小分子物质包括生理激素、维生素、生物胺、生物毒素、血清素、胆汁酸、氨基酸、药物等。小分子检测在临床医学诊断领域具有重大意义,随着小分子研究的深入,其临床应用也越来越广泛。由于小分子物质不具有免疫原性,且大多只有一个抗原决定簇,难以通过直接免疫的方式产生高亲和力、高特异性的抗体,而且极易受到类似物的干扰。因受限于竞争法本身方法学的各种缺陷,如精密度欠缺、准确度不够、易受干扰、线性范围窄等,其临床应用存在较多的局限性和争议。色谱质谱技术作为小分子检测的金标准,具有优异的特异性和准确度,但由于前处理方法复杂、面对多项目检测无标准方案、对设备和人员要求高等缺点限制了其广泛使用。但面对临床的需求不断扩大至百亿市场规模,全球诊断企业龙头如罗氏等纷纷入局。在这一背景下,纳微生命与艾迪迈科技结合各自的技术优势与临床方案开发经验,成立联合实验室,重点突破临床小分子检验困境,开发多种兼顾免疫学方法和色谱质谱方法两者优势的检测技术,集合前处理单元、分离提取单元、检测单元等,充分满足客户的不同项目需求,最大程度加速市场准入门槛,提供一个真正成熟稳定的端到端小分子色谱质谱检测一站式解决方案服务平台。可支持客户从项目需求、方案设计、开发验证、注册服务、委托生产、产品上市等一系列服务的临床色谱/质谱检测一站式解决方案平台。艾迪迈总经理石功名表示:感谢新老投资人的认可与支持,这将激励我们不断前行。艾迪迈的核心价值观与使命是通过打造极致性价比的自动化产品与方案,让检测纯化更简单。简单的讲,我们以材料为核心,辅以设备,来解决设备高成本与检测纯化问题。如我们针对临床诊断方面开发的专用色谱法检测系统可应用于治疗药物监测、维生素检测、儿茶酚胺检测等,如血液中脂溶性维生素检测,可实现一步法原管上样,自动在线净化、富集及检测,8分钟内出结果,可区分A、D2、D3、E等,准确度可媲美质谱,综合速度快于质谱,解决了用“大炮打蚊子”的低性价比的现状。另外我们与纳微生命合作开发的磁珠法质谱前处理及检测方案,用类似磁微粒化学发光的前处理方法结合质谱检测的高灵敏度及多选择性的优势,真正解决了质谱的临床自动化高通量的应用困境。天汇资本合伙人、苏州天汇微球基金负责人赵丹表示:天汇资本于2023年联合纳微科技、园丰资本、苏州天使母基金、苏州纳米城、德美化工等共同发起苏州天汇微球基金,聚焦“一个底层核心技术+一条生物医药产业链+N个应用领域”,投资于纳米微球的上下游关键技术和项目,以期通过专业创投基金支持中国纳米科技及其与生物医药、体外诊断、色谱分析、前沿生物技术等领域的联动发展。提供全自动化集成解决方案是临床色谱质谱检测和生命科学检测纯化发展必然趋势。艾迪迈基于智能化样本前处理用材料方面的技术革新及色谱的多维应用方案技术的突破,开发了多种产品,解决了目前色谱及质谱前处理及临床检测痛点,竞争优势明显。创始团队多元化复合背景,执行力强。借助纳微科技在微球材料的深厚积淀,以及纳微科技在色谱填料/色谱仪器及耗材的完整产业链布局,未来可与艾迪迈深度合作,期待共同为国内外医疗领域客户提供一站式的临床色谱质谱检测整体解决方案。宇杉资本投资总监李凡奇表示:艾迪迈开发的单分散微米级磁珠是具备高工艺技术壁垒和know-how的技术路线 ,也是通过核心材料的智能化打通分离纯化与检测自动化和性价比的关键一环。同时艾迪迈团队通过多年的应用经验,在此基础上辅以开发了多个国产专用型检测设备,完整的解决方案能力将更好的在临床检验、生命科学、分离纯化等领域崭露头角。中鑫资本投资总监顾依文表示:艾迪迈立足于上游微球材料产品的优势往下延伸至临床检测应用产品的开发,对于临床小分子色谱检测行业推出了整体解决方案模式,让客户能更快获得高效精准的结果。同时依托于磁性微球的优势,公司在积极布局临床质谱的检测样本前处理及更多科研端的产品,期待艾迪迈在未来能有更大突破,更上一层楼。[size=14px][color=#707d8a][ 来源：腾讯网 ][/color][/size]
[font=宋体][font=宋体]亲和层析是应用生物高分子与配基可逆结合的原理，将配基通过共价键牢固结合于载体上而制得的层析系统。这种可逆结合的作用主要是靠生物高分子对它的配基的空间结构的识别。常用的生物亲和关系有酶[/font][font=Calibri]-[/font][font=宋体]底物、底物类似物、抑制剂、激活剂、辅因子，抗体[/font][font=Calibri]-[/font][font=宋体]抗原，激素[/font][font=Calibri]-[/font][font=宋体]受体蛋白、载体蛋白，外源凝集素[/font][font=Calibri]-[/font][font=宋体]多糖、糖蛋白、细胞表面受体，核酸[/font][font=Calibri]-[/font][font=宋体]互补核苷酸序列、组蛋白、核酸结合蛋白等，具有高效、简单、快速的优点，是当前最为理想的分离纯化蛋白的方法。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]亲和层析纯化步骤：[/b][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]1[/font][font=宋体]、捕获阶段[/font][/font][font=宋体]在样品捕获阶段，通过将速度和容量进行优化组合，使样品中的目标产物被有效的分离、浓缩和稳定化处理。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]捕获阶段一般选择亲和层析，离子交换层析或者疏水层析，通过吸附作用使样品和杂质实现分离。如果样品带有标签，第一步可以选择标签蛋白亲和层析；如果样品不带有标签，可以考虑使用离子交换[/font][font=Calibri]/[/font][font=宋体]疏水层析。由于捕获阶段一般样品量较大，杂质较多，所以捕获阶段分辨率不是特别主要考虑的因素，可以主要考虑增加上样量和速度。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]2[/font][font=宋体]、中度纯化阶段[/font][/font][font=宋体]在中度纯化阶段，应将注意力集中于将目标样品和大多数大体积的杂质分开。在中度纯化阶段，速度不是最重要的因素，因为经过捕获阶段样品体积会缩减。中度纯化阶段一般建议使用离子交换层析或者疏水层析进一步提高样品的纯度。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]3[/font][font=宋体]、精细纯化阶段[/font][/font][font=宋体]在精细纯化阶段，关注的重点就是如何达到高分辨率，从而完成最终的纯化。在此前的步骤中已经去除了大部分的污染物和杂质。如果需要达到较高的分辨率，可能会在此步骤造成一些回收率的损失。精细纯化阶段一般建议使用高分辨率的分子筛或者高分辨率的离子交换层析柱。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]亲和层析纯化优缺点：[/b][/font][font=宋体][font=Calibri]1. [/font][font=宋体]亲和层析法是分离蛋白质的一种极为有效的方法，它经常只需经过一步处理即可使某种待提纯的蛋白质从很复杂的蛋白质混合物中分离出来，而且纯度很高。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]2. [/font][font=宋体]是最有效的生物活性物质纯化方法，它对生物分子选择性的吸附和分离，可以取得很高的纯化倍数。此外蛋白在纯化过程中得到浓缩，结合到亲和配基后，性质更加 稳定，其结果提高了活性回收率。此外它可以减少纯化步骤，缩短纯化时间，对不稳定蛋白的纯化十分有利。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]3. [/font][font=宋体]除特异性的吸附外，仍然会因分子的错误认别和分子间非选择性的作用力而吸附一些杂蛋白质，另洗脱过程中的配体不可避免的脱落进入分离体系。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]4. [/font][font=宋体]载体较昂贵，机械强度低，配基制备困难，有的配基本身要经过分离纯化，配基与载体耦联条件激烈等。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]更多详情可以参看义翘神州[url=https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review/protein-purification-by-ac][b]亲和层析纯化蛋白[/b][/url]：[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review/protein-purification-by-ac[/font][/font]
新版GMP认证出台后，许多制药企业在纯化水设备系统的GMP认证会遇到一些问题，以下是整理收集的20个常见的制药纯化水设备系统GMP认证问题。1.纯化水设备没有安装PID图；2.纯水设备没有贴取样点编号；3.纯化水系统中需要加上用水点编号；纯化水储罐上面管道无流向标识；4.纯化水理化检测记录中：不挥发物检测称重无原始打印记录；电导率的检测应加入单位；其整张记录太粗，可操作性不强；5.纯化水系统从EDI出来就是纯化水，但现场的管路及阀门、送水泵、压力表都没安照纯化水的标准做，存在污染风险；6.纯化水系统验证时没有验证自动电磁阀的动作是否准确无误；7.安装纯化水在线电导率监测时没有图纸；8.纯化水无管理设计图，管路非卫生连接，无日常监控，管路设计不利于取样；9.纯化水灌及焊接不符合要求，应该采用一面焊两面的成型工艺，并提供纯化水管道的内窥镜照片；10.纯化水设备系统无取样记录；纯化水回水处应安装流量计；11.纯化水系统需要对总送、总回、储罐、最远用水点进行每周全检，其余用水点每月全检；12.纯化水系统的验证，对纯化水设备系统的IQ\OQ\PQ等性能进行验证；13.纯化水的设计、安装、臭氧消毒依据、焊接、验证确认等部分不符合要求；14.纯化水设备的图纸与实际设计不相符，各控制阀应在图纸上注明；15.管道、储水罐、电焊问题；16.储备出水口，回水口应有温度计，以便对其温度变化进行控制，应有流量监控计；17.纯化水管道接口连接方式应该采用卫生级卡箍连接方式，并且杜绝使用丝牙连接方式；18.纯化水区段管线为应采用自动焊接工艺以及专业的切管工具；19.循环管线安装没有坡度，未设计最低点为排放点；20.纯化水系统管道存在死角，容易滋生微生物及细菌。
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国产酸上icp-ms背景有点高，进口的酸用下来成本太高，想买一台酸纯化蒸馏仪来自己纯化，大家有用过的推荐一下
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[size=16px][color=#ff0000][b][url=https://www.instrument.com.cn/job/position-88648.html]立即投递该职位[/url][/b][/color][/size][b]职位名称：[/b]蛋白纯化仪器产品经理-合肥市[b]职位描述/要求：[/b]主要工作内容1、开发大分子生产研发客户，寻找蛋白核酸制备纯化需求；2、根据客户的计划与资金，为客户提供配置解决方案；3、维护客户关系；4、进行市场分析与预测，为公司提供策略建议；主要要求1、生命科学与制药相关专业本科以上学历；2、熟悉生物制药企业客户3、具有良好的沟通技能4、本行业三年以上经验5、强大的市场开拓能力6、熟悉蛋白纯化仪器与相关市场；7、具有良好的工作习惯主要待遇1、具有良好的薪酬待遇2、具有良好的上升空间[b]公司介绍：[/b] 上海闪谱生物科技有限公司公司简介： 上海闪谱生物科技有限公司成立于上海漕河泾高科技区的中国科学院上海生物工程中心，专注于样品纯化仪器的研发、生产与销售。主要产品有全自动GPC凝胶净化系统、全自动固相萃取仪、全自动制备色谱系统三大系列产品。 上海闪谱生物科技有限公司是一家技术型公司，拥有中国科学院大连化物所、中国科学院上海生物工程中心的专业技术人员为主体的科技队伍，具有大量技...[url=https://www.instrument.com.cn/job/position-88648.html]查看全部[/url][align=center][img=,178,176]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2021/08/202108160948175602_3528_5026484_3.png!w178x176.jpg[/img][/align][align=center]扫描二维码，关注[b][color=#ff0000]“仪职派”[/color][/b]公众号[/align][align=center][b]即可获取高薪职位[/b][/align]
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