质谱短肽链分析

基于 Q-Exactive plus 质谱平台，主要优化了源内碎裂能量（SID）这一质谱参数和色谱洗脱梯度，从而实现了单抗轻重链有效的色谱分离和高信噪比的质谱测定，为药物开发、生产和质检过程中的单抗轻重链分析提供了直接的实验方法，同时相似的质谱参数也可以应用到其它基于 Orbitrap 类型的质谱仪器上，为广大的生物制药客户提供了单抗样品轻重链快速分析的参考依据。

摘要 这项研究是基于美国CEM公司多肽合成仪“LIBERTY”的微波技术能够协助固相肽合成(SPPS) 完成传统方法不可能实现的困难合成实验. 微波技术成功合成难以合成的PrP (90-144), PrP( 106-126) 和 长肽链PrP (1-111) 而且其产量和纯度相当高。

MALDI-8020体积紧凑、占位面积小、成本低、仪器维护方便、分析速度快，性能与传统大型同等模式的MALDI-TOF相比毫不逊色，可以快速获得N-糖链的分子量信息。通过分析MALDI-TOF质谱图谱的变化，直接评估不同预处理方法对结果的影响。

样品中C12、C13 短链氯化石蜡组分，该样品用EI 扫描时干扰非常大，使用NCI 扫描时干扰小，可以有效进行判别，表明TRACE 1310 ISQ-NCI 能很好的去除干扰，准确的对SCCP 进行定量和定性。上述分析结果表明，TRACE1310-ISQ NCI 气相色谱质谱联用仪有非常高的灵敏度，同时仪器重现性好，稳定性佳，能够非常好的SCCP 定量定性的分析。

样品中C12、C13 短链氯化石蜡组分，该样品用EI 扫描时干扰非常大，使用NCI 扫描时干扰小，可以有效进行判别，表明TRACE 1310 ISQ-NCI 能很好的去除干扰，准确的对SCCP 进行定量和定性。上述分析结果表明，TRACE1310-ISQ NCI 气相色谱质谱联用仪有非常高的灵敏度，同时仪器重现性好，稳定性佳，能够非常好的SCCP 定量定性的分析。

使用配备Waters ASAP样品入口和ACQUITY SQ Detector (SQD)的解吸质谱系统，在5 min或更短时间内快速分析短链天然和合成特种聚合物、表面活性剂以及低聚物材料，获取绝对分子量分布、数据以及有价值的材料结构信息。

本文参照2020版《中国药典》，采用全多孔色谱柱Alphasil VC-C18，对鹅不食草供试品进行分析，结果显示，鹅不食草中目标峰峰形良好，短叶老鹳草素A目标峰理论塔板数大于3000，短叶老鹳草素A与相邻色谱峰的分离度符合要求，符合《中国药典》要求。本方案可为鹅不食草中短叶老鹳草素A的测定提供参考。

本应用简报证实，使用配备新型 HILIC 色谱柱和荧光检测器的 Agilent 1260 Infinity 生物惰性四元液相色谱仪，可对人免疫球蛋白 G 的 N-连接糖链进行灵敏、重现的分析。对人 IgG N-连接糖链文库分析的保留时间和峰面积精度进行测定。此外，对于具有低检测限和低定量限的五种糖链标准品（M5、A2G2、A2G2S1、FA2G2S1 和 A2G2S2）混合物，在 0.016-1 pmol 的范围内具有良好的线性。配备 Agilent AdvanceBio 2.7 μ m 糖谱分析色谱柱和荧光检测器的 Agilent 1260 Infinity 生物惰性四元液相色谱仪是一款出色的系统，可实现灵敏且重现的 2-AB 衍生人免疫球蛋白 G 释放 N-连接糖链分析。

本应用简报证实，使用配备新型 HILIC 色谱柱和荧光检测器的 Agilent 1260Infinity 生物惰性四元液相色谱仪，可对人免疫球蛋白 G 的 N-连接糖链进行灵敏、重现的分析。对人 IgG N-连接糖链文库分析的保留时间和峰面积精度进行测定。此外，对于具有低检测限和低定量限的五种糖链标准品（M5、A2G2、A2G2S1、FA2G2S1 和 A2G2S2）混合物，在 0.016-1 pmol 的范围内具有良好的线性。配备 Agilent AdvanceBio 2.7 μm 糖谱分析色谱柱和荧光检测器的 Agilent 1260Infinity 生物惰性四元液相色谱仪是一款出色的系统，可实现灵敏且重现的2-AB 衍生人免疫球蛋白 G 释放 N-连接糖链分析。

本研究开发出一种针对短链 CPs (SCCPs) 和中链 CPs (MCCPs) 的分析方法，该方法使用在负化学电离模式 (NCI) 下操作的气相色谱- 四极杆飞行时间高分辨率质谱联用系统 (GC-NCI-Q-TOF-HRMS) 。利用氯化度与 CPs 总响应因子之间的线性关系定量分析了 CPs 含量和同族体分布模式。实现一次进样，定量分析了 24 种 SCCPs 同族体和 24 种 MCCPs 同族体。使用 TOF-HRMS 提取特征质量数，可以实现对 SCCPs 和 MCCPs 的区分，并有效避免其他化学物质（例如 PCB）引起的干扰。SCCPs 和 MCCPs 检测限分别为 24–81 ng/mL 和 27–170 ng/mL。将这些结果与气相色谱-低分辨率质谱联用系统在相同电离模式 (GC-NCI-LRMS) 下获得的结果进行比较，表明所开发的技术是一种更准确、便捷的方法，适用于不同环境基质样品中的 CPs。

本应用说明介绍了一种运行时间短且选择性高的方法，该方法应用了超高效合相色谱（UPC2）-二极管阵列检测器-质谱法来分析一种铱络合物染料（Ir (Fppy) 3）的纯度，Ir (Fppy) 3是一种重要的发光材料，蓝光发光寿命长，被用于制造OLED的部件。同时，本方法也评估了OLED装置中存在其他添加材料时，本方法对Ir (Fppy) 3 测定的专一性。

采用 Thermo Fisher 公司全新一代三重四级杆质谱 TSQ Quantum XLS，使 15 种药物15min内分析完毕，极大得缩短了检测时间，能够满足实验室高通量的要求。并且，TSQ Quantum XLS 具有超高的灵敏度，在本实验中所有化合物的最低定量检出限都在 1ppb，使得此种方法可以应用于常规的分析检测。 采用 EZ-method 设定分析方法，使整个分析方法一目了然，只需要了解化合物的出峰时间，然后再设定一个时间范围，保证化合物的出峰时间在这个范围内。不需要划分时间段，系统会自动优化扫描每个离子对的时间，从而使方法建立更为简单方便。 采用定量增强数据关联二级全扫描（QED）功能，创新性地实现了一次进样的同时完成定量分析和定性确证。所以 QED 在样品定性，尤其是在基质较复杂的样品分析当中，可以最大限度地减少假阳性结果的可能。

本文采用岛津Nexera LC-40高效液相色谱仪及单四极杆质谱LCMS-2020联用对曲妥珠单抗的胰蛋白酶酶解样品进行分析，配套使用多肽分析专用色谱柱进行分离，利用紫外检测器和质谱进行检测，质谱检测结果对关键色谱峰进行定位。该方法重复性实验中，各肽段的保留时间RSD为0.04-0.22%；峰面积RSD值为0.46-1.88%。实验结果表明，该方法方便快捷，具有良好的重复性。

最近，一种新的离子源，实时直接分析（DART® ）已经面世，该技术可以将生物样品直接导入质谱（MS）系统中。免除了通常在MS分析前需要进行的样品制备和高效液相色谱（HPLC）分离，大大缩短了周转时间、减轻了对环境的影响，也减少了经济成本与人力成本。这一新技术已开始在各种定性分析中得到应用，直接检测固体表面、液体和气体中的各种化合物。在本研究中，我们把在大气压下以接地电位操作的DART离子源，直接安装在Sciex 4000串联质谱上，将血浆样品直接导入DART-MS/MS系统中进行分析。所测生理体液中各种化合物均获得了良好的精密度和准确度（%CV和 误差%均 10%）。此外，80%所测化合物的最低检测限均达到5 ng/mL或更低，完全可以支持药物开发研究。最后，我们对明显影响分析性能的实验条件进行了优化和限定。我们认为DART简便、数据获取速度快（3-5秒）、成本低，将在生物基质的定量药物分析中发挥重要作用。

在本应用纪要中，我们展示了一种可快速标记游离N-糖的新型试剂-RapiFluor-MS的应用。RapiFluor-MS将游离N-糖样品制备的总时间缩短为仅30分钟，而且与传统的标记技术相比，可将荧光信号提高14倍，同时将MS信号提高1000倍。采用这种用时更短的样品制备方案，我们成功地对一种高分离度色谱方法进行了几何放大，使其总分析周期缩短为仅10分钟。最后，我们使用ACQUITY QDa质谱检测器，通过选择离子监测(SIR)模式来监测选定的游离寡糖，开发了一种特异性(即使发生共洗脱)监测的方法。我们将介绍RapiFluor-MS与ACQUITY QDa质谱检测器相结合，快速高效地获取有用数据的强大解决方案。

采用 Thermo Fisher 公司全新一代三重四级杆质谱 TSQ Quantum XLS，使 15 种药物15min内分析完毕，极大得缩短了检测时间，能够满足实验室高通量的要求。并且，TSQ Quantum XLS 具有超高的灵敏度，在本实验中所有化合物的最低定量检出限都在 1ppb，使得此种方法可以应用于常规的分析检测。 采用 EZ-method 设定分析方法，使整个分析方法一目了然，只需要了解化合物的出峰时间，然后再设定一个时间范围，保证化合物的出峰时间在这个范围内。不需要划分时间段，系统会自动优化扫描每个离子对的时间，从而使方法建立更为简单方便。 采用定量增强数据关联二级全扫描（QED）功能，创新性地实现了一次进样的同时完成定量分析和定性确证。所以 QED 在样品定性，尤其是在基质较复杂的样品分析当中，可以最大限度地减少假阳性结果的可能。

采用 Thermo Fisher 公司全新一代三重四级杆质谱 TSQ Quantum XLS，使 15 种药物15min内分析完毕，极大得缩短了检测时间，能够满足实验室高通量的要求。并且，TSQ Quantum XLS 具有超高的灵敏度，在本实验中所有化合物的最低定量检出限都在 1ppb，使得此种方法可以应用于常规的分析检测。 采用 EZ-method 设定分析方法，使整个分析方法一目了然，只需要了解化合物的出峰时间，然后再设定一个时间范围，保证化合物的出峰时间在这个范围内。不需要划分时间段，系统会自动优化扫描每个离子对的时间，从而使方法建立更为简单方便。 采用定量增强数据关联二级全扫描（QED）功能，创新性地实现了一次进样的同时完成定量分析和定性确证。所以 QED 在样品定性，尤其是在基质较复杂的样品分析当中，可以最大限度地减少假阳性结果的可能。

对于嵌段聚烯烃树脂，嵌段情况的分析非常重要，是否嵌入，嵌段的含量及其分布对于研发人员全面地了解聚烯烃的性能非常重要，温度梯度交叉色谱TGIC就是在传统CCD分析不能满足该需求的情况下诞生的，TGIC的分离原理是利用聚烯烃结晶能力的不同、以及聚烯烃与柱子中石墨填料之间的吸附解吸作用来实现，独特的石墨柱也减少了树脂共结晶效应。比如乙烯与丙烯的嵌段聚合物因为嵌段后结晶性能没有明显变化，传统的CCD分析根据结晶能力不同无法分离分析嵌段聚烯烃，而TGIC根据线性聚烯烃与石墨表面吸附解吸力可以实现这种要求，因为聚乙烯嵌段越多, 嵌段聚合物与石墨柱表面的吸附力越大，在淋洗该聚合物时则需要更高的能量，换句话说嵌段聚烯烃树脂中聚乙烯嵌段多的级分将在更高的温度条件下被淋洗出来（见下图）。

采用Agilent 6510 四极杆飞行时间质谱(QTOF) 分析地表水样品中存在的药物。采用快速分离高通量Extend C18 色谱柱（粒径1.8 μ m）运行一个简单的梯度洗脱程序。在54种潜在的化合物中，使用安捷伦分子特征提取算法(MFE) 在一个样品中鉴定出多达11种化合物。另一种算法（即Mass Profiler）也被应用于MFE 数据处理过程，用来对几个样品进行比较。由于MFE 根据特征可能生成数千个潜在化合物，所以用Mass Profiler 对两个不同样品的特征进行统计比较时，能够判断出哪一个是独有的，哪一个是共存的。所有工作都采用全扫描质谱数据进行。确定目标化合物时，可借助精确质量全扫描串联质谱进行结构鉴定。

体液的代谢组指纹图谱能够揭示许多代谢异常相关性疾病的发病原因，从而成为疾病诊断和治疗预后诊断的潜在工具。本文报导了一种将实时直接分析（DART）与飞行时间质谱（TOF MS）联用的快速方法，用该方法对人血清代谢组指纹图谱进行了分析。在本研究中，首先对血清样品进行蛋白沉淀处理，并通过衍生化提高代谢物的挥发性，然后进行DART MS分析。用同体积健康人血清样品优化了电离气体温度和流速等仪器参数，获得了DART MS的最佳性能。实验表明这些参数对所检测代谢物全质量范围及DART质谱图信噪比有显著影响。每次DART分析只需要1.2分钟，在此过程中可以按时间顺序观察到1500多张不同的特征图谱。用手动取样臂得到的总离子信号重现性为4.1% 到4.5%。DART MS最令人感兴趣的特点是高通量、无记忆效应和简单性，因此有望成为代谢组指纹图谱研究极宝贵的工具。 代谢组指纹图谱，一种基于代谢模式或“指纹图谱”对样品分类的无偏差全面筛查方法，已经在尿、血浆、血清和体液等各种生物样品类型上进行了实验。核磁共振（NMR）和质谱是代谢组指纹图谱研究广泛使用的两种分析平台。NMR的优势是几乎不用进行样品处理，更容易获得大量数据，但成本高、灵敏度低是它的两个主要缺陷。气相色谱-质谱（GC-MS）和液相色谱-质谱（LC-MS）是代谢组学工作流程中常用的两项补充技术。除非常复杂以外， GC-MS和LC-MS还有分析通量低和有色谱记忆效应等缺点，尤其是在研究生物基质（如血清）中的代谢物时。为了克服上述局限，人们还在不断研究能有效分析代谢组学的技术。 实时直接分析（DART）是一种在室温和大气压条件下操作的基于等离子体的电离技术。属于大气压等离子体电离技术，该技术包括直接大气压光电离（DAPPI）、实时直接分析（DART）流动大气压辉光放电?（FAPA）、等离子体辅助解吸附电离（PADI）、低温等离子体（LTP）电离和介质阻挡放电电离（DBDI）等。DART以记忆效应最小的非接触方式电离。样品可以手动处理，也可以通过自动进样器辅助，主要的消耗品是高纯压缩气体（氦气或氮气），每个样品的分析成本较低。DART的工作原理是，首先在气流（氮气或氦气）中发生辉光放电，形成的亚稳原子与大气压中的水发生相互作用，生成质子化的水簇。这些clusters通过质子转移与热气流解吸附的分析物发生作用。在大多数情况下，不经过样品制备即可发生直接电离。DART已成功用于制药产品、仿冒药物、细菌脂肪酸、调料和香料等分析领域。 本文报导了一种用DART-TOF和DART-Q-TOF MS快速分析人血清代谢组指纹图谱的方法。讨论了各种实验参数的优化，通过精确质量测定和添加实验，对血清代谢物进行了鉴定。用DART离子源与Q-TOF质谱联接，用DART进行血清代谢组学研究的工作，迄今尚未见文献报导。

本发明公开一种短链氯化石蜡的检测方法，包括以下步骤 ：利用超声萃取法对样品进行前处理 ；将萃取液过滤到色谱瓶中进行仪器分析 ；气相色谱和质谱联用技术检测短链氯化石蜡 ；将经过前处理的样品经过所述气相色谱和质谱联用仪的进样口进入所述色谱柱中，进行程序升温 ；所述被色谱柱分离的样品各组分通过接口进入所述气相色谱和质谱联用仪的质谱检测部分进行质谱检测，所述质谱检测的离子源采用电子轰击离子源。本发明的仪器价廉、安全 ；分析方法准确、快速、干扰小 ；且能对短链氯化石蜡(SCCPs) 进行最优化的分离。

采用 Thermo Fisher 公司全新一代三重四级杆质谱 TSQ Quantum XLS，使 15 种药物15min内分析完毕，极大得缩短了检测时间，能够满足实验室高通量的要求。并且，TSQ Quantum XLS 具有超高的灵敏度，在本实验中所有化合物的最低定量检出限都在 1ppb，使得此种方法可以应用于常规的分析检测。 采用 EZ-method 设定分析方法，使整个分析方法一目了然，只需要了解化合物的出峰时间，然后再设定一个时间范围，保证化合物的出峰时间在这个范围内。不需要划分时间段，系统会自动优化扫描每个离子对的时间，从而使方法建立更为简单方便。 采用定量增强数据关联二级全扫描（QED）功能，创新性地实现了一次进样的同时完成定量分析和定性确证。所以 QED 在样品定性，尤其是在基质较复杂的样品分析当中，可以最大限度地减少假阳性结果的可能。

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使用超高效液相色谱三重四极杆质谱仪联用系统，建立了血清中皮质醇含量测定方法。使用标准品及质控品进行了方法的线性、准确度及精密度的考察。结果显示该方法线性良好，标准曲线相关系数大于0.999；连续测定6次质控品回收率在95.3%~104.7%之间，RSD在2.1%~3.5%之间，满足临床测定需求。该方法前处理简便，样本用量少，分析速度快，灵敏度高，专属性强，对库欣综合征及肾上腺皮质功能减退症的筛查诊断具有重要参考意义。

本应用简报证实，使用配备新型 HILIC 色谱柱和荧光检测器的 Agilent 1260Infinity 生物惰性四元液相色谱仪，可对人免疫球蛋白 G 的 N-连接糖链进行灵敏、重现的分析。对人 IgG N-连接糖链文库分析的保留时间和峰面积精度进行测定。此外，对于具有低检测限和低定量限的五种糖链标准品（M5、A2G2、A2G2S1、FA2G2S1 和 A2G2S2）混合物，在 0.016-1 pmol 的范围内具有良好的线性。配备 Agilent AdvanceBio 2.7 μm 糖谱分析色谱柱和荧光检测器的 Agilent 1260Infinity 生物惰性四元液相色谱仪是一款出色的系统，可实现灵敏且重现的2-AB 衍生人免疫球蛋白 G 释放 N-连接糖链分析。

本应用介绍了利用 SFC 与三重四极杆质谱联用开发用于测定 223 种农药化合物的多农药残留分析方法。在该方法中，将有机改性剂浓度在 10 分钟内由 2% 增加至 10%，195 种农药化合物中的大多数化合物均在 10 分钟内被洗脱。与常用的 HPLC 方法相比，该方法通过聚焦这些农药，在测量相同数量的化合物时，能够大大缩短分析时间。测得的目标农药的典型LOQ 等于或低于 1 ppb，并且校准线性优于 R2 = 0.999。利用 SFC/MS 能够直接从有机样品提取物中轻松分离并测定标准反相 HPLC/MS 难以测定的极性农药化合物。基质效应与之前报道的结果处于相同范围内，并且建议使用基质校准或内标来补偿特定化合物的强基质效应。

针对多种农药建立一种快速、灵敏的定量方法是每一个农残分析实验室的主要目标。采用上文建立的农残测试方法，可在 28 分钟内对 200 余 种农药化合物完成筛查和定量分析。QuEChERS前处理方法具备高回收率和良好的重复性。配有 TRACEGuard 的 TR-5MS 色谱柱可有效分离所有目标化合物。三重四极杆质谱仪 TSQ 8000 GC-MS/MS 与 TraceFinderTM 软件联合使用，有效节省数据处理时间，从而实现了高通量检测。在待测样本进行前处理的短暂时间内即可完成方法线性、专属性、回收率和重复性测试。TSQ 8000 系统具备超高灵敏度，即使是对经过 QuEChERS 快速处理的复杂样品基质仍能实现高灵敏检测和可信定量。本方法可应用于如混合植物药等复杂基质样本中痕量农药残留的检测和确证。最低检测限可低至 2.5 ng/g。依据现行的指导规范，本次测试的农残浓度（0.0023 和 0.0027 mg/kg）已低于尤纳尼测试指南所规定限值。

采用 Thermo Fisher 公司全新一代三重四级杆质谱 TSQ Quantum XLS，使 15 种药物15min内分析完毕，极大得缩短了检测时间，能够满足实验室高通量的要求。并且，TSQ Quantum XLS 具有超高的灵敏度，在本实验中所有化合物的最低定量检出限都在 1ppb，使得此种方法可以应用于常规的分析检测。 采用 EZ-method 设定分析方法，使整个分析方法一目了然，只需要了解化合物的出峰时间，然后再设定一个时间范围，保证化合物的出峰时间在这个范围内。不需要划分时间段，系统会自动优化扫描每个离子对的时间，从而使方法建立更为简单方便。 采用定量增强数据关联二级全扫描（QED）功能，创新性地实现了一次进样的同时完成定量分析和定性确证。所以 QED 在样品定性，尤其是在基质较复杂的样品分析当中，可以最大限度地减少假阳性结果的可能。

采用 Thermo Fisher 公司全新一代三重四级杆质谱 TSQ Quantum XLS，使 15 种药物15min内分析完毕，极大得缩短了检测时间，能够满足实验室高通量的要求。并且，TSQ Quantum XLS 具有超高的灵敏度，在本实验中所有化合物的最低定量检出限都在 1ppb，使得此种方法可以应用于常规的分析检测。 采用 EZ-method 设定分析方法，使整个分析方法一目了然，只需要了解化合物的出峰时间，然后再设定一个时间范围，保证化合物的出峰时间在这个范围内。不需要划分时间段，系统会自动优化扫描每个离子对的时间，从而使方法建立更为简单方便。 采用定量增强数据关联二级全扫描（QED）功能，创新性地实现了一次进样的同时完成定量分析和定性确证。所以 QED 在样品定性，尤其是在基质较复杂的样品分析当中，可以最大限度地减少假阳性结果的可能。

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