脂肪酸定量检测

各位大神，最近准备做鱼粉中脂肪酸的检测，有一些问题不太清楚，特此请教1、查了文献，鱼粉中的脂肪酸种类比较多，标准品应该购买哪一种呢？sigma公司的37种脂肪酸甲酯混标是否可以？另外这个混标用的溶剂是二氯甲烷溶解的，那么我是否可以用正己烷来稀释制备成储备液呢？2、国标上定量用内标法，内标物选择的是十七烷酸，但是我查到文献中报道的鱼粉中有C17:0，这是不是意味着这个内标物不合适呢？那么大神们用的是哪一种内标物呢？3、手头上只有TR-5的柱子，是否可以用呢？大神们有用这种柱子的吗？我试了一下进样口230,FID检测器230，分流比10:1，程序升温80度维持1min，然后以10度/min升至230度，维持15min，样品中有些峰没有分开。不知道是柱子不合适还是程序升温不合适？问题比较多，麻烦各位大神啦~~~

最近在做油脂的组分分析，样品含有较多DHA（二十二碳六烯酸）与EPA（二十碳五烯酸）。在选用检测器上面遇到了麻烦。按照一些标准上用的都是示差折光检测器，但因为目前我们只有紫外检测器，所以想用紫外检测器摸索一下方法。 在一些书籍和参考文献上，也有用紫外检测器的分析方法，所以应该还是有可行性。可接下来的问题是我在一篇文献上看到：HPLC-UV明显的缺点是紫外检测器对脂肪酸双键数非常敏感，因此饱和度不同的物质可以产生差异巨大的响应值，在做油脂定量分析方面可行性差。 目前我想定量分析油脂中的甘一酯，甘二酯，甘三酯与脂肪酸甲酯。请问各位大虾，有谁做过油脂这方面的分析，如果仅仅做为内控的话，紫外检测器是否可用呢，误差是否在可接受范围。

关于脂肪酸检测方法，哪位老师有关于脂肪酸检测方法和国标？

查看了好多检测反式脂肪酸的标准，都是用百分比法定量的，但我们现在只有七八种反式脂肪酸的标准，用百分比法定量肯定是不准备的，请问用外标法定量好做吗？能用外标法定量吗？谢谢了！

[color=#444444]C10以上长链脂肪酸检测，定量检测用[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]可以吗？定性检测[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]可以确定到哪个水平？ 质谱用哪种离子源的？[/color][color=#444444]谢谢！[/color]

最近测脂肪酸（主要是C12～C18），看资料一般脂肪酸都是用气相色谱检测，需要将脂肪酸甲酯化，过程挺复杂的。好像也有不需要甲酯化直接测游离脂肪酸的方法，直接测游离脂肪酸的话用INNOWAX的柱子可以吗（柱的最高使用温度260/270，而十八酸的沸点为350左右℃）？色谱条件是什么？怎样甲酯化呢？请有经验的大侠赐教啊

我用岛津2010plus测定油脂中的脂肪酸含量，so-2560柱子，甲酯化，内标法，现在标准曲线最大浓度做到150ppm，样品中脂肪酸含量差别很大，稀释后含量小的就检测不到了，如果不稀释，含量大的响应很高，请教各位，浓度大了对柱子有没有损害？有没有一个合适的浓度范围？

[color=#444444]最近测脂肪酸（主要是C12～C18），看资料一般脂肪酸都是用[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]检测，需要将脂肪酸甲酯化，过程挺复杂的。好像也有不需要甲酯化直接测游离脂肪酸的方法，直接测游离脂肪酸的话用INNOWAX的柱子可以吗（柱的最高使用温度260/270，而十八酸的沸点为350左右℃）？色谱条件是什么？怎样甲酯化呢？请有经验的大侠赐教啊[/color]

写在前面：该贴内容基于仪器微课堂第四期群友以及无心老师多年工作经验交流整理出来的关于乳制品中脂肪酸检测项目的分享，有不同见解的或者发现内容整理有误的欢迎跟帖交流指正，谢谢！1、液态奶建议用GB 5413.27 第二法做，需冷凝回流。且液态奶样品放置在4°C冷藏保存后拿出来做实验要注意样品回温（室温下放置1h以上或30°C环境下30min以上）。5413.27第一法比较适用于粉状样品，但是也有部分样品一法不能很好地打开包埋状态，导致脂肪酸提取率低。2、GB 5413.27一法不足之处：（1）一法虽是用于测乳粉中脂肪酸含量，却未具体说明检测多少种脂肪酸。单点外标定量，样品中各脂肪酸含量低高浓度可相差千倍，但是所购37种脂肪酸甲酯标准品最高浓度和最低浓度却只差2倍。由于单点外标定量要求样品和标品浓度在一数量级上，所以不管怎么稀释样品还是标准品都很难保证样品中脂肪酸和标准品脂肪酸浓度在一个水平线上。（2）标准上有两个计算公式，一个是计算出所有脂肪酸进行加和；一个是面积归一乘以换算因子，两者计算出结果不一样，特别是卡限值的检测结果。3、样品中脂肪酸实际存在形式是甘油三酯，GB 5413.27一法要求标准品和样品同步处理，所以标准品必须是甘油三酯，对于只测ARA DHA LA ALA这类个别脂肪酸的可采用相应的甘油三酯标准品随样品五点标曲前处理，但是测总脂肪酸，很难全部用甘油三酯单点外标法去定量，且样品浓度和标准品浓度不一致会影响定量的准确性，可考虑采用C11：0 甘油三酯内标法进行定量，方便折算回收率。C11：0 甘油三酯标准品有两个品牌，Sigma和Nu-chek，Nu-chek性价比会更好点。用内标法做的话，最好看下样品本底里C11是否存在，且ARA DHA由于与C11碳原子数相差较大，所以回收率不一定与其他脂肪酸保持一致，且高碳数的脂肪酸结果会偏高。37种脂肪酸甲酯混标（10mg/mL,1mL）溶剂是二氯甲烷，易挥发，用正己烷或正庚烷转溶也易挥发，建议开新标去定量，剩余用于定性。单点内标进37种脂肪酸甲酯混标，不更换柱子仪器衬管不用每天进标，保留时间有偏离的，可用开过的37种混标去定性。采用C11内标法，由于与GB5413.27不符，要做好审查时应对方法偏离的解释工作。4、营养米粉可采用5413.27一法做，但是结果一直不稳定，经常存在偏低的情况，特别是DHA。5、不建议使用超声水浴去分散样品，会导致反式脂肪酸含量的降低，可以每隔5min、10min、20min地去振摇一次。营养米粉一法前处理出现抱团现象是样品分散过程中没有很好地和溶剂打开造成的，这样也就容易导致结果忽高忽低，不稳定以及不平行。6、奶粉中Sn-2位脂肪酸：GB/T 23894 是测某个2位脂肪酸占所有2位总脂肪酸的比例，Sn-2位脂肪酸是2位棕榈酸占总的棕榈酸的结果，分子可采用GB/T 23894测2位棕榈酸占2位脂肪酸比值（层析法，需买胰脂肪酶），分母采用总棕榈酸占总脂肪酸（皂化甲酯化，面积归一）。7、GB 5415.36测反式脂肪酸积区域：C18：1T :区域是油酸前一个峰起点到油酸峰起点；C18：2T区域是亚油酸前一个的峰起点到亚油酸峰的起点。C18：1 T 区域容易有杂质存在，在定量超出限量时，可以尝试用质谱去验证。8、GB 5413.27 一法使用顶空进样瓶做反应瓶较好，螺纹的盖子个别也会有漏液情况，但喷的几率小，实验中难免会有瓶子破裂的情况发生，实验时做好相应的防护措施保护好自己。一法实验在水浴中进行容易出现抓底现象，实验前期可以拿出彻底涡旋几次。9、脂肪酸色谱柱：SP-2560 100m，时间长，分离37种脂肪酸甲酯效果好，但是不同批次的柱子，存在差异，个别批次稳定性还差。DB-23 60m，时间短，新柱分离效果好，峰形也很好，使用一段时间后，截过几次就影响分离效果。HP-88 100m，分离反式脂肪酸效果好，但是分离37种脂肪酸甲酯不是太好，会有个别两个峰分不开。

[size=3] 在奶粉的检测中，某个脂肪酸的含量指的是该脂肪酸占总脂肪酸的百分比，而不是除于样重，GB/T5413.27-2010中的总脂肪酸是把样中所有脂肪酸均测出，是不是有点麻烦啊！我有个做法大家看看是否合理。先把奶粉中的脂肪用水解法全提取出来（同时样品中脂肪也测出来了），再用正己烷定容，取部分体积按照食用油的方法甲酯化，测得各脂肪酸含量，再除于提取的脂肪重。比上述方法简单多了！这样合理吗？[/size]

大家好,有没有做反式脂肪酸检测的?我们单位要开展检测,但我没方法,以前也没做过,欢迎有经验的来指导指导啊

请问各位专家谁有反式脂肪酸的检测方法啊？或者哪个单位可以做？

请教下做过脂肪酸检测的老师，饱和脂肪酸、单个饱和脂肪酸和多不饱和脂肪酸这三类皂化和甲酯化要不要区别对待。最近在做脂肪酸测定时做了下Standard Reference Material 1849a Infant/Adult Nutritional Formula 这个质控品，发现饱和脂肪酸、单个饱和脂肪酸结果满足质控值的要求，多不饱和脂肪酸的就很差了，偏差很大。

求教？ 1.游离脂肪酸含量不大于2%的油脂样品,这里的 游离脂肪酸怎么测定？2.脂肪进行皂化时用的冷凝器和回流装置是什么样子？3.标准中样品固体和液体的检出限和定量限不同是怎么回事，不懂？4.在提取过程中加入的焦性没食子酸是什么目的？

1.反式脂肪（ Trans fats ），又称为反式脂肪酸、逆态脂肪酸或转脂肪酸（ Trans fatty acid ），是一种不饱和脂肪酸（单元不饱和或多元不饱和）。 简单来说，反式脂肪就是通过氢化处理把液态的植物油变成固态或半固态的油脂。它的名字来自于它的化学结构。反式脂肪分子包含位于碳原子相对两边的反向共价键结构，和顺式脂肪相比，这种反向分子结构不易扭结。与未经处理的植物油相比，人造反式脂肪具有耐高温、不易变质、存放更久、使食物口感更酥松等优点，因此被广泛用于生产点心、饼干、面包、蛋糕、炸薯条、甜甜圈及其他煎炸食品中。2.脂肪酸（fatty acid），是指一端含有一个羧基的长的脂肪族碳氢链，是有机物，通式是C(n)H(2n 1)COOH，低级的脂肪酸是无色液体，有刺激性气味，高级的脂肪酸是蜡状固体，无可明显嗅到的气味。脂肪酸是最简单的一种脂，是中性脂肪、磷脂和糖脂的主要成分。脂肪酸在有充足氧供给的情况下，可氧化分解为CO2和H2O，释放大量能量，因此脂肪酸是机体主要能量来源之一。

[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/bp][color=#3333ff]GC-MS[/color][/url]测定植物中的脂肪酸，如何定量，采用内标法还是外标法？

想问一下脂肪酸实验，检测血浆的脂肪酸质控一般要咋制作而成呀？可以直接把多管血浆混成一管涡旋就可以混匀吗？还是有其他试剂添加或者其他步骤呀？本人刚入[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/bp][color=#3333ff]气质联用[/color][/url]脂肪酸检测菜鸟一枚??

有时见到脂肪酸检测中脂肪酸衍生化时会出现氮吹，请问氮吹的目的是什么？如何实现？谢谢

想请教各位大侠，怎样用[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]法定量测定食品中脂肪酸的种类及含量？麻烦详细告知预处理，分离，纯化的方法及检测用的色谱柱，流动相及检测器。新手上路，还望前辈们不吝赐教。在此先谢谢各位了！：）

想请教各位大侠，怎样用[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]法定量测定食品中脂肪酸的种类及含量？麻烦详细告知预处理，分离，纯化的方法及检测用的色谱柱，流动相及检测器。新手上路，还望前辈们不吝赐教。在此先谢谢各位了！：）

如题，我如果想检测尿中的有机酸，如果种类太多比如60中与检测30中成本上会有差别吗，结果有差别吗？脂肪酸也只这个问题，检测血中脂肪酸，如果检测的种类很全，会不会有结果干扰很大的问题，求解。

最近测脂肪酸（主要是C12～C18），看资料一般脂肪酸都是用气相色谱检测，需要将脂肪酸甲酯化，过程挺复杂的。好像也有不需要甲酯化直接测游离脂肪酸的方法，直接测游离脂肪酸的话用INNOWAX的柱子可以吗（柱的最高使用温度260/270，而十八酸的沸点为350左右℃）？色谱条件是什么？怎样甲酯化呢？请有经验的大侠赐教啊

请教一下，检测脂肪酸甲酯的时候，像亚油酸，油酸浓度太高了，要是稀释的话其他含量低的就检测不到了，不稀释的话又超过检测线了，这样的怎么办那？

打算认证气相色谱法检测食品中的反式脂肪酸，不知道气相色谱法相对来说好做吗？按照GB/T 22110-2008方法处理。共九中脂肪酸甲酯标准品，打算用hp-88色谱柱100m的，不知道大家用什么色谱柱，看似进样时间很长。是不是可以用短点的柱子。不知道大家做反式脂肪酸检测多少种。按哪个标准检测。有没有新的检测方法，望大家提供宝贵的信息，谢谢。

各位老师好，想请教关于营养成分饱和脂肪酸检测问题，我们现在做月饼营养标签，最近测的饱和脂肪酸结果跟CIQ比偏低很多。要做进一步分析，按照GB/T 22223-2008标准进行样品油脂提取，然后皂化和甲酯化。色谱条件跟标准一致。但是C18:0 与C18:1总是分不开，现在不知道是样品处理有问题还是色谱条件的问题，但是按照标准操作的，我们用的色谱柱是安捷伦HP-88 ,100M。

各位老师，大神们好。我用的是内标法做鱼肉脂肪酸，在定量的过程中，这个公式对中的m-试样的质量，指的是取鱼肉的质量（9g）还是取甲酯化时候脂肪（0.1g）的质量。还有Xi到底算出来单位是 g/100g脂肪，还是g/100g鱼肉啊？谢谢各位啦[img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2021/06/202106251031040347_78_5077987_3.png[/img]

[size=3] 在奶粉的检测中，某个脂肪酸的含量指的是该脂肪酸占总脂肪酸的百分比，而不是除于样重，GB/T5413.27-2010中的总脂肪酸是把样中所有脂肪酸均测出，是不是有点麻烦啊！我有个做法大家看看是否合理。先把奶粉中的脂肪用水解法全提取出来（同时样品中脂肪也测出来了），再用正己烷定容，取部分体积按照食用油的方法甲酯化，测得各脂肪酸含量，再除于提取的脂肪重。比上述方法简单多了！这样合理吗？[/size]

低分标率质谱可以检测脂肪酸吗？

请问妥尔油脂肪酸可以直接用GC检测么？一些高沸点的物质是否会堵柱子？

求助GB5009.257-2016反式脂肪酸检测方法怎么建立、验证。新手上路，不会搞新方法，求大神赐教