当前位置: 仪器信息网 > 行业主题 > >

狂犬病抗体检测

仪器信息网狂犬病抗体检测专题为您提供2024年最新狂犬病抗体检测价格报价、厂家品牌的相关信息, 包括狂犬病抗体检测参数、型号等,不管是国产,还是进口品牌的狂犬病抗体检测您都可以在这里找到。 除此之外,仪器信息网还免费为您整合狂犬病抗体检测相关的耗材配件、试剂标物,还有狂犬病抗体检测相关的最新资讯、资料,以及狂犬病抗体检测相关的解决方案。

狂犬病抗体检测相关的论坛

  • 动物疫病诊断仪主要检测什么

    动物疫病诊断仪主要检测什么

    [size=16px]动物疫病诊断仪主要检测什么动物疫病诊断仪主要检测以下几种:猪弓形体IgG抗体检测:用于检测弓形虫抗体。猪蓝耳病ELISA诊断试剂盒:用于检测猪蓝耳病病毒抗体。猪伪狂犬病ELISA抗体检测诊断试剂盒:用于伪狂犬病毒抗体检测。猪瘟ELISA诊断试剂盒:用于检测猪瘟抗体。猪细小病毒ELISA诊断试剂盒:用于检测细小病毒抗体。此外,动物疫病诊断仪还可以检测黄曲霉毒素B1、猪伪狂犬病毒、猪口蹄疫3ABC蛋白、猪口蹄疫病毒IgG、猪布鲁氏杆菌病、猪传染性胃肠炎等。[img=,690,690]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/11/202311290939024874_272_6098850_3.jpg!w690x690.jpg[/img][/size]

  • 【原创大赛】猪伪狂犬病毒荧光定量PCR检测方法的模块化构建及实践

    【原创大赛】猪伪狂犬病毒荧光定量PCR检测方法的模块化构建及实践

    [color=black]猪伪狂犬病毒荧光定量[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]检测方法的模块化构建及实践[/color][color=black]1 前言[/color][color=black]猪伪狂犬病是由猪伪狂犬病病毒(Pseudo rabies virus,PRV)引起的猪的急性传染病。该病在猪呈暴发性流行。可引起妊娠母猪流产、死胎,公猪不育,新生仔猪大量死亡,育肥猪呼吸困难、生长停滞等,是危害全球养猪业的重大传染病之一。[/color][color=black]伪狂犬病毒属于疱疹病毒科(Herpesviridae)、猪疱疹病毒属,病毒粒子为圆形,直径150~180nm,核衣壳直径为105~110nm。病毒粒子的最外层是病毒囊膜,它是由宿主细胞衍生而来的脂质双层结构。囊膜表面有长约8~10nm呈放射状排列的纤突。[/color][color=black]伪狂犬病毒是疱疹病毒科中抵抗力较强的一种。在37℃下可存活7h,8℃可存活46天,而在25℃干草、树枝、食物上可存活10~30天,但短期保存病毒时,4℃较-20℃冻结保存更好。病毒在pH4~pH9之间保持稳定。5%石炭酸经2min灭活,但0.5%石炭酸处理32天后仍具有感染性。0.5%~1%氢氧化钠迅速使其灭活。对乙醚、氯仿等脂溶剂以及福尔马林和紫外线照射敏感。[/color][color=black]伪狂犬病毒在全世界广泛分布。伪狂犬病自然发生于猪、牛、绵羊、犬和猫,另外,多种野生动物、肉食动物也易感。水貂、雪貂因饲喂含伪狂犬病毒的猪下脚料也可引起[/color][url=https://baike.baidu.com/item/%E4%BC%AA%E7%8B%82%E7%8A%AC%E7%97%85%22 \t %22_blank][color=black]伪狂犬病[/color][/url][color=black]的暴发。[/color][color=black]猪是伪狂犬病毒的贮存宿主,病猪、带毒猪以及带毒鼠类为本病重要传染源。不少学者认为,其他动物感染本病与接触猪、鼠有关。[/color][color=black]在猪场,伪狂犬病毒主要通过已感染猪排毒而传给健康猪,另外,被伪狂犬病毒污染的工作人员和器具在传播中起着重要的作用。而空气传播则是伪狂犬病毒扩散的最主要途径,但到底能传播多远还不清楚。人们还发现在邻近有伪狂犬病发生的猪场周围放牧的[/color][url=https://baike.baidu.com/item/%E7%89%9B%E7%BE%A4%22 \t %22_blank][color=black]牛群[/color][/url][color=black]也能发病,在这种情况下,空气传播是惟一可能的途径。在猪群中,病毒主要通过鼻分泌物传播,另外,乳汁和精液也是可能的传播方式。[/color][color=black]除猪以外的其他动物感染伪狂犬病毒后,其结果都是死亡。猪发生伪狂犬病后,其临诊症状因日龄而异,成年猪一般呈隐性感染,怀孕母猪可导致流产、死胎、木乃伊胎和种猪不育等综合症候群。15日龄以内的仔猪发病死亡率可达100%,断奶仔猪发病率可达40%,死亡率20%左右;对成年肥猪可引起生长停滞、增重缓慢等。[/color][color=black]伪狂犬病的发生具有一定的季节性,多发生在寒冷的季节,但其他季节也有发生。[/color][color=black]新生仔猪感染伪狂犬病毒会引起大量死亡,临诊上新生仔猪第1天表现正常,从第2天开始发病,3~5天内是死亡高峰期,有的整窝死光。同时,发病仔猪表现出明显的神经症状、昏睡、呜叫、呕吐、拉稀,一旦发病,1~2日内死亡。剖检主要是肾脏布满针尖样出血点,有时见到肺水肿、脑膜表面充血、出血。15日龄以内的仔猪感染本病者,病情极严重,发病死亡率可达100%。仔猪突然发病,体温上升达41℃以上,精神极度委顿,发抖,运动不协调,痉挛,呕吐,腹泻,极少康复。断奶仔猪感染伪狂犬病毒,发病率在20%~40%左右,死亡率在10%~20%左右,主要表现为神经症状、拉稀、呕吐等。成年猪一般为隐性感染,若有症状也很轻微,易于恢复。主要表现为发热、精神沉郁,有些病猪呕吐、咳嗽,一般于4~8天内完全恢复。怀孕母猪可发生流产、产木乃伊胎儿或死胎,其中以死胎为主无论是头胎母猪还是经产母猪都发病,而且没有严格的季节性,但以寒冷季节即冬末春初多发。[/color][color=black]伪狂犬病的另一发病特点是表现为种猪不育症。近几年发现有的猪场春季暴发伪狂犬病,出现死胎或断奶仔猪患伪狂犬病后,紧接着下半年母猪配不上种,返情率高达90%,有反复配种数次都屡配不上的。此外,公猪感染伪狂犬病毒后,表现出睾丸肿胀、萎缩,丧失种用能力。[/color][color=black]由于猪伪狂犬病毒可以通过精液传播,一旦公猪感染伪狂犬,则在短时间内可快速导致整个猪场母猪群感染该病。而猪伪狂犬病又可通过乳汁传播,故感染伪狂犬病的母猪又可快速导致整个猪场的仔猪感染该病。因此,非常有必要对种猪(公猪、母猪)进行猪伪狂犬病进行病毒核酸监测,并实施猪伪狂犬病实施净化措施。[/color][color=black]2 模块化检测方法思路[/color][color=black]总体思路是:将动物疫病荧光定量[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]检测分为三个模块,核酸提取采用DNA/RNA共提试剂,核酸扩增采用预混液+引物探针方式,质控品利用抗原或商品化疫苗自制。具体思路如下:[/color][color=black]——核酸提取采用DNA/RNA共提试剂;[/color][color=black]——引物探针严格按照标准方法,委托生物工程公司合成;[/color][color=black]——反应体系中其他成分,采购商品化q[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]预混液;[/color][color=black]——质控品:阳性对照采用商品化疫苗,测定结果后按一定比例稀释,保存备用。[/color][color=black]——反应体系:设为20μL,其中包含:预混液(2×)10μL、ROX 0.4μL为固定量,引物探针加入量根据检测标准中的终浓度予以换算,加灭菌水补足18μL,RNA模板为2μL;[/color][color=black]——反应条件首先按照标准中的条件开展摸索,如达到预期效果则予以固定;如效果不佳则参照预混液及引物探针推荐条件进行适当调整。[/color][color=black]3 材料和方法[/color][color=black]3.1 病毒[/color][color=black]猪伪狂犬病毒疫苗。[/color][color=black]3.2 试剂[/color][color=black]DNA/RNA共提试剂盒:FastPure Viral DNA/RNA Mini Kit试剂盒,南京诺维赞生产;[/color][color=black]q[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]预混液:AceQ Universal U+ Probe Master Mix V2,南京诺维赞生产。[/color][color=black]3.3 引物探针[/color][color=black]按照GB/T 35911-2018 《伪狂犬病病毒荧光[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]检测方法》提供的序列,委托上海生工合成,引物稀释成10μmol/L、探针稀释成5μmol/L,分装成小包装冷冻保存备用。具体序列如下:[/color][color=black]检测gH基因引物探针序列:[/color][color=black]正向引物:5’-ACGCTCGGCTTCCTCTCC-3’[/color][color=black]反向引物:5’-GGTAGTCGTCGCTCTCGTG-3’[/color][color=black]探 针:5’-FAM-TCGCGCATCGTCTGGTGCAT-BHQ1 -3’[/color][color=black]检测gE基因引物探针序列:[/color][color=black]正向引物:5’-GCTGTACGTGCTCGTGAT-3’[/color][color=black]反向引物:5’-TCAGCTCCTTGATGACCGTGA-3’[/color][color=black]探 针:5’-VIC-CACAACGGCCACGTCGCCACCTG-BHQ1 -3’[/color][color=black]3.4 反应体系[/color][color=black]根据GB/T 35911-2018 《伪狂犬病病毒荧光[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]检测方法》所载反应体系,按照终浓度一致原则予以转化。具体转换方法:[/color][color=black]——反应体系总体积设定为20μL;[/color][color=black]——将标准中反应体系的10×[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url] Buffer、MgCl2、dNTPs、Taq酶等成分转换为q[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]预混液10μL(推荐量);[/color][color=black]——因使用ABI7500荧光[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]仪,故在体系中加入ROX 0.4μL;[/color][color=black]——标准中gH基因正向引物、反向引物、探针的终浓度分别为0.2μmol/L、0.2μmol/L和0.2μmol/L,gE基因正向引物、反向引物、探针的终浓度分别为0.2μmol/L、0.2μmol/L和0.12μmol/L,故在修改后的体系中加入量为0.4μL、0.4μL、0.8μL和0.4μL、0.4μL、0.48μL;[/color][color=black]——总DNA加入量修改为2μL(根据经验该加入量已经足够);[/color][color=black]——根据上述各成分用量,补充体积的无核酸酶水修改为4.72μL。[/color][table][tr][td][color=black]标准方法[/color][/td][td][/td][td][/td][td][color=black]修改方法[/color][/td][td][/td][/tr][tr][td][color=black]10Χ [url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url] Buffer[/color][/td][td][align=center][color=black]5.0[/color][/align][/td][td][/td][td][color=black]2Χ q[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]预混液[/color][/td][td][align=center][color=black]10[/color][/align][/td][/tr][tr][td][color=black]Taq酶(5U/μL)[/color][/td][td][align=center][color=black]2.0[/color][/align][/td][td][/td][td][color=black]ROX[/color][/td][td][align=center][color=black]0.4[/color][/align][/td][/tr][tr][td][color=black]dNTPs(100mmol/L)[/color][/td][td][align=center][color=black]1.5[/color][/align][/td][td][/td][td][color=black]gH基因正向引物(10μmol/L)[/color][/td][td][align=center][color=black]0.4[/color][/align][/td][/tr][tr][td][color=black]MgCl2[/color][/td][td][align=center][color=black]0.25[/color][/align][/td][td][/td][td][color=black]gH基因反向引物(10μmol/L)[/color][/td][td][align=center][color=black]0.4[/color][/align][/td][/tr][tr][td][color=black]gH基因正向引物(10μmol/L)[/color][/td][td][align=center][color=black]1.0[/color][/align][/td][td][/td][td][color=black]gH基因探针(5μmol/L)[/color][/td][td][align=center][color=black]0.8[/color][/align][/td][/tr][tr][td][color=black]gH基因反向引物(10μmol/L)[/color][/td][td][align=center][color=black]1.0[/color][/align][/td][td][/td][td][color=black]gE基因正向引物(10μmol/L)[/color][/td][td][align=center][color=black]0.4[/color][/align][/td][/tr][tr][td][color=black]gH基因探针(10μmol/L)[/color][/td][td][align=center][color=black]1.0[/color][/align][/td][td][/td][td][color=black]gE基因反向引物(10μmol/L)[/color][/td][td][align=center][color=black]0.4[/color][/align][/td][/tr][tr][td][color=black]gE基因正向引物(10μmol/L)[/color][/td][td][align=center][color=black]1.0[/color][/align][/td][td][/td][td][color=black]gE基因探针(5μmol/L)[/color][/td][td][align=center][color=black]0.48[/color][/align][/td][/tr][tr][td][color=black]gE基因反向引物(10μmol/L)[/color][/td][td][align=center][color=black]1.0[/color][/align][/td][td][/td][td][color=black]无核酸酶水[/color][/td][td][align=center][color=black]4.72[/color][/align][/td][/tr][tr][td][color=black]gE基因探针(10μmol/L)[/color][/td][td][align=center][color=black]0.6[/color][/align][/td][td][/td][td][color=black]总DNA[/color][/td][td][align=center][color=black]2.0[/color][/align][/td][/tr][tr][td][color=black]无核酸酶水[/color][/td][td][align=center][color=black]23.95[/color][/align][/td][td][/td][td][color=black]总体积[/color][/td][td][align=center][color=black]20[/color][/align][/td][/tr][tr][td][color=black]内参质粒[/color][/td][td][align=center][color=black]0.2[/color][/align][/td][td][/td][td][/td][td][/td][/tr][tr][td][color=black]总DNA[/color][/td][td][align=center][color=black]10[/color][/align][/td][td][/td][td][/td][td][/td][/tr][tr][td][color=black]总体积[/color][/td][td][align=center][color=black]50[/color][/align][/td][td][/td][td][/td][td][/td][/tr][/table][color=black]3.5 反应条件[/color][color=black]参照GB/T 35911-2018 《伪狂犬病病毒荧光[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]检测方法》推荐的扩增程序,结合ABI7500荧光采集时间不能少于34s的要求,进行预试验。扩增程序如下:[/color][color=black]50℃2min →95℃2min →(95℃15s → 60℃34s)*40[/color][color=black]如扩增结果理想,则不做修改直接采纳,否则进行适当调整。[/color][color=black]4 试验结果[/color][color=black]对猪伪狂犬病毒疫苗(BK61株)进行核酸检测,结果较理想。扩增曲线如下:[/color][align=center][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2020/09/202009251442207825_7042_1627156_3.jpg[/img][/align][color=black]注:因猪伪狂犬疫苗BK61株属于gE基因缺失苗,故gE基因未能检出。[/color][color=black]5 阳性质控的制备[/color][color=black]根据GB/T 35911-2018 《伪狂犬病病毒荧光[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]检测方法》规定,阳性对照应Ct≤30。对猪伪狂犬病毒疫苗(BK61株)适当稀释后进行再次检测,结果如下:[/color][table][tr][td][align=center][color=black]稀释倍数[/color][/align][/td][td][align=center][color=black]1:10^0[/color][/align][/td][td][align=center][color=black]1:10^1[/color][/align][/td][td][align=center][color=black]1:10^2[/color][/align][/td][td][align=center][color=black]1:10^3[/color][/align][/td][/tr][tr][td][align=center][color=black]PRV疫苗(BK61株)[/color][/align][/td][td][align=center][color=black]19.12[/color][/align][/td][td][align=center][color=black]22.58[/color][/align][/td][td][align=center][color=black]25.90[/color][/align][/td][td][align=center][color=black]29.58[/color][/align][/td][/tr][/table][color=black]经综合判定,最后采用猪伪狂犬病毒疫苗(BK61株)作1: 10^2稀释,分装为200μL/管作为阳性质控,Ct值约26,-70℃冻存备用。[/color][color=black]6 讨论[/color][color=black]6.1 检测工作更加方便高效[/color][color=black]一是在核酸提取环节采用了DNA/RNA共提试剂,待检样品经一次提取核酸,除可应用于伪狂犬病毒、圆环病毒、非洲猪瘟等DNA病毒项目检测外,还可应用于口蹄疫、蓝耳病等RNA病毒项目检测;[/color][color=black]二是由于实验室储备了足够量的q[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]预混液,在开展检测时,不必担心部分检测量较少的项目由于试剂组分不足而罢工事件的发生;[/color][color=black]三是由于q[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]预混液适用于多数DNA病毒项目的检测,在检测任务发生重大变化时,可以方便地调整检测项目,不必担心试剂不足或浪费情况的发生。[/color][color=black]6.2 阳性质控品制备方便[/color][color=black]猪伪狂犬病毒疫苗是较常用的动物免疫用疫苗,只需对疫苗进行含量测定,进行一定比例的稀释即可作为实验室内部的阳性质控品。[/color][color=black]6.3 适用性有待进一步验证[/color][color=black]尽管在构建新方法时,对适用性进行了验证,但由于缺少伪狂犬全基因疫苗,因此对于gE基因的适用性未对进行验证。对于其他毒株,尤其是较新型的变异株是否有效,尚有待进一步观察和验证。[/color][color=black]6.4 严格依法依规操作[/color][color=black]如果有关法律法规或上级有关部门出台政策,要求采用获批准的成品试剂盒用于检测,则实验室必须及时停止自建方法的使用。[/color]

  • 【分享】WS 281-2008 狂犬病诊断标准

    WS 281-2008 狂犬病诊断标准2008-02-28发布,2008-09-01实施,现行有效。该标准实施之日起,GB 17014-1997《狂犬病诊断标准及处理原则》废止。[img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=147886]WS 281-2008 狂犬病诊断标准[/url]

  • 抗体检测所需耗材汇总

    目前来说,最常用的[url=https://www.thermofisher.com/cn/zh/home/life-science/antibodies.html]抗体检测[/url]方法应该是ELISA,既可以检测抗体的存在又可以对其定量。此方法用到的仪器主要有离心机,自动洗板机和酶标仪;用到的主要试剂有PBS溶液,吐温20,BSA,一抗,二抗和显色液。其他的抗体检测方法还有免疫扩散和免疫电泳,但是大多是定性或者半定量,而好处是操作简单,所需试剂少。

  • 什么是中和抗体?如何检测假病毒中和抗体?

    [font='calibri'][size=13px]什么是中和抗体?如何检测[/size][/font][font='calibri'][size=13px]假病毒[/size][/font][font='calibri'][size=13px]中和抗体?[/size][/font]什么是中和抗体?中和抗体是一类与病毒结合并使病毒失去传染性的抗体。当病毒侵入人体时,浆细胞会产生病毒特异性抗体,但只有少数是中和抗体。中和机制如下:(1)改变病毒表面的构象;(2)与吸附相关的病毒表位结合,阻断其与宿主细胞受体的相互作用;(3)与病毒形成免疫复合物,易于被巨噬细胞清除;(4)当病毒表面抗原与中和抗体结合时会激活补体,从而导致病毒裂解。S蛋白(spike protein)是SARS-CoV-2病毒的主要包膜蛋白,由S1和S2亚基组成的三聚体跨膜糖蛋白,负责识别宿主细胞受体即血管紧张素转换酶2(ACE2)并介导膜融合。S1亚基上的受体结合域(RBD)直接参与宿主受体识别并介导病毒入侵。S蛋白上的受体结合结构域(RBD),被认为是病毒感染宿主细胞的关键位点和大多数中和抗体的靶标。中和抗体可阻止S1或RBD与ACE2结合,从而防止病毒侵入宿主细胞并最终阻止病毒感染(图1)。因此,S1或RBD的突变可能会导致SARS-CoV-2有较强的传染性。如何检测假病毒中和抗体?中和抗体检测试验包括病毒中和试验、假病毒中和试验和替代病毒中和试验。病毒中和试验中和抗体检测的金标准是病毒中和试验,主要包括空斑减少中和试验和微量中和试验。两种方法都使用定量的活病毒与不同稀释度的等量血清混合,并接种预先准备好的单层细胞。最后,根据空斑形成单位或细胞病变效应来评估中和抗体的效价。由于涉及到活病毒的操作,这些检测只能在生物安全三级实验室进行,极大地限制了空斑减少中和试验和微量中和试验的使用。假病毒中和试验目前,越来越多的实验室使用假病毒中和试验进行中和抗体检测。SARS-CoV-2假病毒以非致病性病毒(如复制缺陷型HIV-1)为载体,将载体病毒的包膜蛋白替换为SARS-CoV-2的S蛋白,并引入检测信号分子,例如GFP和荧光素酶。假病毒利用S蛋白的RBD结构域与ACE2结合,模拟病毒入侵的过程。中和抗体可有效抑制SARS-CoV-2假病毒感染宿主细胞(图2),并通过信号检测评估中和抗体效价。由于假病毒为一次性感染病毒,不具备自我复制能力,无生物安全危险,所以这种方法可以在生物安全二级实验室进行。替代病毒中和试验替代病毒中和试验是基于竞争性酶联免疫吸附试验(ELISA)的原理,利用重组RBD蛋白与重组ACE2蛋白的结合作用来模拟病毒-细胞相互作用。样品中的中和抗体可有效阻断RBD蛋白与ACE2蛋白的结合。与病毒和假病毒中和试验相比,替代病毒中和试验更安全、更容易执行且耗时更少。中和检测服务信息由北京义翘神州科技股份有限公司(Sino Biological Inc.)为您提供,如您想了解更多关于SARS-CoV-2 (2019-nCoV) Spike假病毒中和检测服务报价、型号、参数等信息,欢迎来电或留言咨询。具体详情可点击:https://cn.sinobiological.com/services/pseudovirus-neutralization-assay-service

  • 谱尼医学开展新冠病毒抗体检测

    国家卫健委5月29日通报,全国新冠病毒疫苗接种超过6亿剂次。自3月27日超过1亿剂次以来,每亿剂次所需时间为25天、16天、9天、7天、5天,间隔不断缩短,这就是疫苗接种的中国速度。接种新冠病毒疫苗后,理论上体内会产生IgM、IgG及中和抗体,这些抗体与新冠病毒结合后将使病毒失去感染性。因此新冠病毒疫苗接种后,检测IgM、IgG及中和抗体水平,对于评价疫苗的免疫效果至关重要,同时为常态化新冠疫情防护政策调整提供基础性的数据参考。

  • 医学开展新冠病毒抗体检测

    国家卫健委5月29日通报,全国新冠病毒疫苗接种超过6亿剂次。自3月27日超过1亿剂次以来,每亿剂次所需时间为25天、16天、9天、7天、5天,间隔不断缩短,这就是疫苗接种的中国速度。接种新冠病毒疫苗后,理论上体内会产生IgM、IgG及中和抗体,这些抗体与新冠病毒结合后将使病毒失去感染性。因此新冠病毒疫苗接种后,检测IgM、IgG及中和抗体水平,对于评价疫苗的免疫效果至关重要,同时为常态化新冠疫情防护政策调整提供基础性的数据参考。

  • 绵阳高新区疾病预防控制中心人类免疫缺陷病毒抗体检测试剂采购项目

    [quote]项目概况绵阳高新区疾病预防控制中心人类免疫缺陷病毒抗体检测试剂采购项目 采购项目的潜在供应商应在绵阳高新区绵兴东路55号中沅广场世爵假日18楼获取采购文件,并于2023年08月14日 14点00分(北京时间)前提交响应文件。[/quote][font=inherit]一、项目基本情况[/font]项目编号:ZDSF(2023)0801号项目名称:绵阳高新区疾病预防控制中心人类免疫缺陷病毒抗体检测试剂采购项目采购方式:竞争性磋商预算金额:20.0000000 万元(人民币)最高限价(如有):20.0000000 万元(人民币)采购需求:详见采购需求附件合同履行期限:签订合同后5个工作日内交清货物。本项目( 不接受 )联合体投标。[font=inherit]二、申请人的资格要求:[/font]1.满足《中华人民共和国政府采购法》第二十二条规定;2.落实政府采购政策需满足的资格要求:无3.本项目的特定资格要求:(1)供应商须符合《医疗器械监督管理条例》要求,若供应商是制造厂家的须具有《医疗器械生产许可证》或有效备案凭证;若供应商为经销商或代理商的须具有《医疗器械经营许可证》或有效备案凭证。(仅限医疗器械适用)(2)投标产品须符合《医疗器械注册与备案管理办法》要求并提供产品的注册/备案证明材料。(仅限医疗器械适用)[font=inherit]三、获取采购文件[/font]时间:2023年08月04日 至 2023年08月10日,每天上午9:00至12:00,下午14:00至17:00。(北京时间,法定节假日除外)地点:绵阳高新区绵兴东路55号中沅广场世爵假日18楼方式:获取磋商文件时,经办人员当场提交以下资料:供应商为法人或者其他组织的,只需提供单位介绍信(原件)、经办人身份证明(查验原件收复印件);供应商为自然人的,只需提供本人身份证明。以上资料均盖单位鲜章。售价:¥300.0 元(人民币)[font=inherit]四、响应文件提交[/font]截止时间:2023年08月14日 14点00分(北京时间)地点:绵阳高新区绵兴东路55号中沅广场世爵假日18楼[font=inherit]五、开启[/font]时间:2023年08月14日 14点00分(北京时间)地点:绵阳高新区绵兴东路55号中沅广场世爵假日18楼[font=inherit]六、公告期限[/font]自本公告发布之日起3个工作日。[font=inherit]七、其他补充事宜[/font][font=inherit]八、凡对本次采购提出询问,请按以下方式联系。[/font]1.采购人信息名 称:绵阳高新区疾病预防控制中心地址:绵阳高新区石桥铺东路创意联邦6栋1单元302联系方式:赵金华 0816- 25306052.采购代理机构信息名 称:四川中达盛丰工程项目管理有限公司地 址:绵阳高新区绵兴东路55号中沅广场世爵假日18楼联系方式:蒋骐羽 0816-21997273.项目联系方式项目联系人:蒋骐羽电 话:  0816-2199727

  • 双抗体夹心法检测抗原操作步骤

    实验室常用的ELISA方法可以用来测定抗体,也可以用来测定抗原。我们可以根据试剂的来源和标本的情况以及检测的具体条件,可设计出各种不同类型的检测方法。下面就让上海劲马ELISA试剂盒为您分享其中关于双抗体夹心法检测抗原的操作步骤。双抗体夹心法是检测抗原最常用的方法,操作步骤如下:1) 将特异性抗体与固相载体联结,形成固相抗体。洗涤除去未结合的抗体及杂质。2) 加受检标本,保温反应。标本中的抗原与固相抗体结合,形成固相抗原抗体复合物。洗涤除去其他未结合物质。3) 加酶标抗体,保温反应。固相免疫复合物上的抗原与酶标抗体结合。彻底洗涤未结合的酶标抗体。此时固相载体上带有的酶量与标本中受检抗原的量相关。4) 加底物显色。固相上的酶催化底物成为有色产物。通过比色,测知标本中抗原的量。只要获得针对受检抗原的异性抗体,就可用于包被固相载体和制备酶结合物而建立此法。如抗体的来源为抗血清,包被和酶标用的抗体最好分别取自不同种属的动物。如应用单克隆抗体,一般选择两个针对抗原上不同决定簇的单抗,分别用于包被固相载体和制备酶结合物。这种双位点夹心法具有很高的特异性,而且可以将受检标本和酶标抗体一起保温反应,作一步检测。劲马ELISA试剂盒小提示:双抗体夹心法适用于测定二价或二价以上的大分子抗原,但不适用于测定半抗原及小分子单价抗原,因其不能形成两位点夹心。

  • 293万!浙江省动物疫病预防控制中心动物疫病监测试剂采购项目(第一批)

    一、项目基本情况 项目编号:CTZB-2024080188 项目名称:浙江省动物疫病预防控制中心动物疫病监测试剂采购项目(第一批) 预算金额(元):2932900 最高限价(元):182500,293400,165900,331200,179200,321900,236600,253800,211100,185000,115600,156700,180000,120000 采购需求: 标项一 标项名称:非洲猪瘟病毒荧光[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]检测等试剂盒 数量:1 预算金额(元):182500 简要规格描述或项目基本概况介绍、用途:非洲猪瘟病毒荧光[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]检测试剂盒、非洲猪瘟病毒比对核酸样品,具体内容详见招标文件。 备注:采购依据:[2024]47794号; 最高限价:182500元; 项目属性:货物项目(非进口产品)。 标项二 标项名称:布鲁氏菌检测试剂盒 数量:1 预算金额(元):293400 简要规格描述或项目基本概况介绍、用途:布鲁氏菌病竞争ELISA检测试剂盒、布鲁氏菌病虎红平板凝集试验抗原、布鲁氏菌病试管凝集试验抗原、布鲁氏菌比对血清样品,具体内容详见招标文件。 备注:采购依据:[2024]47794号; 最高限价:293400元; 项目属性:货物项目(非进口产品)。 标项三 标项名称:非洲猪瘟病毒ELISA抗体检测等试剂盒 数量:1 预算金额(元):165900 简要规格描述或项目基本概况介绍、用途:非洲猪瘟病毒ELISA抗体检测试剂盒、禽白血病病毒抗原ELISA 检测试剂盒、狂犬病毒抗体ELISA检测试剂盒、布鲁氏菌病抗体检测试纸条、猪瘟病毒ELISA抗体检测试剂盒、猪繁殖与呼吸综合征病毒抗体检测试剂盒、猪伪狂犬病毒gB 蛋白ELISA 抗体检测试剂盒、猪伪狂犬病毒gE 蛋白ELISA 抗体检测试剂盒,具体内容详见招标文件。 备注:采购依据:[2024]47794号; 最高限价:165900元; 项目属性:货物项目(非进口产品)。 标项四 标项名称:禽流感病毒通用型荧光[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]检测等试剂盒 数量:1 预算金额(元):331200 简要规格描述或项目基本概况介绍、用途:禽流感病毒通用型荧光RT-[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]检测试剂盒、新城疫病毒荧光RT-[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]检测试剂盒,具体内容详见招标文件。 备注:采购依据:[2024]47794号; 最高限价:331200元; 项目属性:货物项目(非进口产品)。 标项五 标项名称:禽流感病毒H5亚型荧光RT-[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]检测等试剂盒 数量:1 预算金额(元):179200 简要规格描述或项目基本概况介绍、用途:禽流感病毒H5亚型荧光RT-[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]检测试剂盒、禽流感病毒H9亚型荧光RT-[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]检测试剂盒、禽流感病毒H7N9亚型荧光RT-[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]检测试剂盒、禽流感病毒N6亚型荧光RT-[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]检测试剂盒、禽流感病毒N8亚型荧光RT-[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]检测试剂盒、禽流感病毒H9亚型血凝抑制试验抗原、新城疫病毒血凝抑制试验抗原,具体内容详见招标文件。 备注:采购依据:[2024]47794号; 最高限价:179200元; 项目属性:货物项目(非进口产品)。 标项六 标项名称:口蹄疫病毒抗体检测试剂盒 数量:1 预算金额(元):321900 简要规格描述或项目基本概况介绍、用途:口蹄疫A型[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相[/color][/url]阻断ELISA抗体检测试剂盒、口蹄疫病毒非结构蛋白3ABC阻断ELISA抗体检测试剂盒、口蹄疫A型[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相[/color][/url]阻断ELISA抗体检测用盲样、口蹄疫病毒竞争ELISA抗体检测试剂盒,具体内容详见招标文件。 备注:采购依据:[2024]47794号; 最高限价:321900元; 项目属性:货物项目(非进口产品)。 标项七 标项名称:口蹄疫病毒通用型荧光RT-[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]检测等试剂盒 数量:1 预算金额(元):236600 简要规格描述或项目基本概况介绍、用途:口蹄疫病毒通用型荧光RT-[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]检测试剂盒、口蹄疫病毒(O/A/Asia 1)荧光RT-[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]检测试剂盒、口蹄疫病毒塞内卡病毒双重荧光RT-[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]检测试剂盒、猪伪狂犬病毒荧光[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]检测试剂盒、猪圆环病毒2型荧光[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]检测试剂盒、猪腹泻病毒(PEDV/TGEV/轮状病毒)三重荧光RT-[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]检测试剂盒、猪delta冠状病毒荧光RT-[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]检测试剂盒、猪繁殖与呼吸综合征NADC-30毒株荧光RT-[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]检测试剂盒、猪繁殖与呼吸综合征NADC-34毒株荧光RT-[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]检测试剂盒、布鲁氏菌荧光[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]检测试剂盒,具体内容详见招标文件。 备注:采购依据:[2024]47794号; 最高限价:236600元; 项目属性:货物项目(非进口产品)。 标项八 标项名称:小反刍兽疫病毒检测试剂盒 数量:1 预算金额(元):253800 简要规格描述或项目基本概况介绍、用途:小反刍兽疫病毒ELISA抗体检测试剂盒(阻断法)、小反刍兽疫病毒ELISA抗体检测试剂盒(竞争法)、小反刍兽疫病毒荧光RT-[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url] 检测试剂盒、小反刍兽疫病毒野毒株与疫苗株双重荧光RT-[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]检测试剂盒、小反刍兽疫病毒核酸比对样品,具体内容详见招标文件。 备注:采购依据:[2024]47794号; 最高限价:253800元; 项目属性:货物项目(非进口产品)。 标项九 标项名称:复核比对用检测试剂盒 数量:1 预算金额(元):211100 简要规格描述或项目基本概况介绍、用途:禽白血病AB亚群抗体检测试剂盒、禽白血病J亚群抗体检测试剂盒、非洲猪瘟病毒ELISA抗体检测试剂盒、非洲猪瘟病毒荧光[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]检测试剂盒 布鲁氏菌病竞争ELISA抗体检测试剂盒、布鲁氏菌病间接ELISA抗体检测试剂盒、禽流感病毒通用型荧光RT-[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]检测试剂盒、禽白血病病毒J/AB亚群通用荧光RT-[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]检测试剂盒、禽白血病病毒JAB/K亚群通用荧光RT-[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]检测试剂盒、禽白血病荧光RT-[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]检测试剂盒、牛A型流感病毒H5N1亚型抗体检测试剂盒、禽流感病毒通用型抗原检测试剂盒,具体内容详见招标文件。 备注:采购依据:[2024]47794号; 最高限价:211100元; 项目属性:货物项目(非进口产品)。 标项十 标项名称:禽流感病毒H10亚型荧光检测等试剂盒 数量:1 预算金额(元):185000 简要规格描述或项目基本概况介绍、用途:禽流感病毒H10亚型荧光RT-[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]检测试剂盒、禽流感病毒H6亚型荧光RT-[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]检测试剂盒禽流感病毒N1-N9亚型荧光RT-[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]试剂盒、禽流感病毒H3N8亚型荧光RT-[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]试剂盒、禽流感病毒其他亚型(H1、H2、H4、H8、H11、H12、 H13、H14、 H15、H16)荧光RT-[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]试剂盒,具体内容详见招标文件。 备注:采购依据:[2024]47794号、[2024]47795号; 最高限价:185000元; 项目属性:货物项目(非进口产品)。 标项十一 标项名称:流感病毒快速分型检测试剂盒 数量:1 预算金额(元):115600 简要规格描述或项目基本概况介绍、用途:甲型流感病毒HxNy快速分型荧光RT-[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]检测试剂盒,具体内容详见招标文件。 备注:采购依据:[2024]47795号; 最高限价:115600元; 项目属性:货物项目(非进口产品)。 标项十二 标项名称:核酸提取试剂盒 数量:1 预算金额(元):156700 简要规格描述或项目基本概况介绍、用途:预分装核酸提取及纯化试剂,具体内容详见招标文件。 备注:采购依据:[2024]49975号; 最高限价:156700元; 项目属性:货物项目(非进口产品)。 标项十三 标项名称:猪瘟病毒ELISA抗体检测等试剂盒 数量:1 预算金额(元):180000 简要规格描述或项目基本概况介绍、用途:猪瘟病毒ELISA抗体检测试剂盒、猪伪狂犬病毒gE抗体检测试剂盒、猪繁殖与呼吸综合征病毒抗体检测试剂盒,具体内容详见招标文件。 备注:采购依据:[2024]47935号; 最高限价:180000元; 项目属性:货物项目(接受进口产品)。 标项十四 标项名称:猪繁殖与呼吸综合征病毒抗体检测试剂盒 数量:1 预算金额(元):120000 简要规格描述或项目基本概况介绍、用途:猪繁殖与呼吸综合征病毒抗体检测试剂盒,具体内容详见招标文件。 备注:采购依据:[2024]47935号; 最高限价:120000元; 项目属性:货物项目(接受进口产品)。 合同履约期限:标项 1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14,按招标文件规定 本项目(是)接受联合体投标。 二、申请人的资格要求: 1.满足《中华人民共和国政府采购法》第二十二条规定;未被“信用中国”(www.creditchina.gov.cn)、中国政府采购网(www.ccgp.gov.cn)列入失信被执行人、重大税收违法失信主体、政府采购严重违法失信行为记录名单。 2.落实政府采购政策需满足的资格要求:标项1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11:(1)本标项为货物项目,本标项标的属于【工业】行业,要求全部采购由中小企业制造的货物,即货物由中小企业生产且使用该中小企业商号或者注册商标。中小企业是指满足《政府采购促进中小企业发展管理办法》(财库〔2020〕46号)第二条规定的企业,监狱企业、残疾人福利性单位视为小型、微型企业。 标项12、13、14:无。 3.本项目的特定资格要求: 【标项1、2、3、4、5、6、7、8、9】 (1)单位负责人为同一人或者存在直接控股、管理关系的不同投标人,不得参加本标项的政府采购活动; (2)根据《关于规范政府采购供应商资格设定及资格审查的通知》(浙财采监〔2013〕24号)第6条规定接受金融、保险、通讯等特定行业的全国性企业所设立的区域性分支机构(应依法办理了工商、税务和社保登记手续,获得总公司(总机构)授权或能够提供房产权证或其他有效财产证明材料,能证明其具备实际承担责任的能力和法定的缔结合同能力)、以及个体工商户、个人独资企业、合伙企业(应依法办理了工商、税务和社保登记手续,能够提供房产权证或其他有效财产证明材料,能证明其具备实际承担责任的能力和法定的缔结合同能力); (3)为本标项提供整体设计、规范编制或者项目管理、监理、检测等服务的供应商不得参加本标项的政府采购活动; (4)电子交易平台运营机构,以及与该机构有直接控股或者管理关系可能影响采购公正性的任何单位和个人,不得在该平台进行的政府采购项目电子交易中投标、响应和代理政府采购项目; (5)投标人为采购人提供货物须满足《兽用生物制品经营管理办法》的要求; (6)接受联合体,联合体参加本标项的政府采购活动应满足以下条件: ◇两个以上的自然人、法人或者其他组织可以组成一个联合体,以一个投标人的身份共同参加本标项的政府采购活动,联合体在投标文件中提供联合体协议并明确分工; ◇联合体主办单位和成员单位均应具备资格要求1、2及特定资格要求第(1)(2)(3)(4)(5)项; ◇联合体中有同类资质的供应商按照联合体分工承担相同工作,按资质等级较低的供应商确定资质等级; ◇联合体各方不得再单独参加或与其他供应商另外组成联合体参加本标项的政府采购活动。 【标项10、11、12】 (1)单位负责人为同一人或者存在直接控股、管理关系的不同投标人,不得参加本标项的政府采购活动; (2)根据《关于规范政府采购供应商资格设定及资格审查的通知》(浙财采监〔2013〕24号)第6条规定接受金融、保险、通讯等特定行业的全国性企业所设立的区域性分支机构(应依法办理了工商、税务和社保登记手续,获得总公司(总机构)授权或能够提供房产权证或其他有效财产证明材料,能证明其具备实际承担责任的能力和法定的缔结合同能力)、以及个体工商户、个人独资企业、合伙企业(应依法办理了工商、税务和社保登记手续,能够提供房产权证或其他有效财产证明材料,能证明其具备实际承担责任的能力和法定的缔结合同能力); (3)为本标项提供整体设计、规范编制或者项目管理、监理、检测等服务的供应商不得参加本标项的政府采购活动; (4)电子交易平台运营机构,以及与该机构有直接控股或者管理关系可能影响采购公正性的任何单位和个人,不得在该平台进行的政府采购项目电子交易中投标、响应和代理政府采购项目; (5)接受联合体,联合体参加本标项的政府采购活动应满足以下条件: ◇两个以上的自然人、法人或者其他组织可以组成一个联合体,以一个投标人的身份共同参加本标项的政府采购活动,联合体在投标文件中提供联合体协议并明确分工; ◇联合体主办单位和成员单位均应具备资格要求1、2及特定资格要求第(1)(2)(3)(4)项; ◇联合体中有同类资质的供应商按照联合体分工承担相同工作,按资质等级较低的供应商确定资质等级; ◇联合体各方不得再单独参加或与其他供应商另外组成联合体参加本标项的政府采购活动。 【标项13、14】 (1)单位负责人为同一人或者存在直接控股、管理关系的不同投标人,不得参加本标项的政府采购活动; (2)根据《关于规范政府采购供应商资格设定及资格审查的通知》(浙财采监〔2013〕24号)第6条规定接受金融、保险、通讯等特定行业的全国性企业所设立的区域性分支机构(应依法办理了工商、税务和社保登记手续,获得总公司(总机构)授权或能够提供房产权证或其他有效财产证明材料,能证明其具备实际承担责任的能力和法定的缔结合同能力)、以及个体工商户、个人独资企业、合伙企业(应依法办理了工商、税务和社保登记手续,能够提供房产权证或其他有效财产证明材料,能证明其具备实际承担责任的能力和法定的缔结合同能力); (3)为本标项提供整体设计、规范编制或者项目管理、监理、检测等服务的供应商不得参加本标项的政府采购活动; (4)电子交易平台运营机构,以及与该机构有直接控股或者管理关系可能影响采购公正性的任何单位和个人,不得在该平台进行的政府采购项目电子交易中投标、响应和代理政府采购项目; (5)投标人须具有有效的兽药经营许可证; (6)接受联合体,联合体参加本标项的政府采购活动应满足以下条件: ◇两个以上的自然人、法人或者其他组织可以组成一个联合体,以一个投标人的身份共同参加本标项的政府采购活动,联合体在投标文件中提供联合体协议并明确分工; ◇联合体主办单位和成员单位均应具备资格要求1、2及特定资格要求第(1)(2)(3)(4)(5)项; ◇联合体中有同类资质的供应商按照联合体分工承担相同工作,按资质等级较低的供应商确定资质等级; ◇联合体各方不得再单独参加或与其他供应商另外组成联合体参加本标项的政府采购活动。 三、获取招标文件 时间:/至2024年09月02日 ,每天上午00:00至12:00 ,下午12:00至23:59(北京时间,线上获取法定节假日均可,线下获取文件法定节假日除外) 地点(网址):浙江政府采购网(http://zfcg.czt.zj.gov.cn/); 方式:投标人通过“浙江政府采购网”在线获取(招标公告下方选取“潜在供应商”处“获取采购文件”),不提供纸制版招标文件;投标人只有在“浙江政府采购网”完成获取招标文件申请并下载了招标文件后才视作依法获取招标文件; 售价(元):0 四、提交投标文件截止时间、开标时间和地点 提交投标文件截止时间:2024年09月02日 09:30(北京时间) 投标地点(网址):政府采购云平台(https://www.zcygov.cn)。 开标时间:2024年09月02日 09:30 开标地点(网址):在政府采购云平台(https://www.zcygov.cn)上开启投标文件; 五、公告期限 自本公告发布之日起5个工作日。 六、其他补充事宜 1.《浙江省财政厅关于进一步发挥政府采购政策功能全力推动经济稳进提质的通知》(浙财采监(2022)3号)、《浙江省财政厅关于进一步促进政府采购公平竞争打造最优营商环境的通知》(浙财采监(2021)22号))、《浙江省财政厅关于进一步加大政府采购支持中小企业力度助力扎实稳住经济的通知》(浙财采监(2022)8号)已分别于2022年1月29日、2022年2月1日和2022年7月1日开始实施,此前有关规定与上述文件内容不一致的,按上述文件要求执行。 2.根据《浙江省财政厅关于进一步促进政府采购公平竞争打造最优营商环境的通知》(浙财采监(2021)22号)文件关于“健全行政裁决机制”要求,鼓励供应商在线提起询问,路径为:政采云-项目采购-询问质疑投诉-询问列表:鼓励供应商在线提起质疑,路径为:政采云-项目采购-询问质疑投诉-质疑列表。质疑供应商对在线质疑答复不满意的,可在线提起投诉,路径为:浙江政府服务网-政府采购投诉处理-在线办理00-888-4636;天谷CA 400-087-8198。

  • 如何选择健康体检项目?

    该如何选择健康体检项目?目前健康体检项目很多,人们应根据自己家庭病史、年龄、性别、身体状况等方面,有针对性地选择体检“套餐”。1、一般人群常规检查  对于身体没有症状、工作压力不太大以及生活、作息、饮食较为规律的中青年人,只需接受常规性体检即可。主要体检项目包括:内科、外科、胸部透视、腹部B超、心电图和化验血、尿常规以及肝肾功能、血脂两项、血糖等。2、白领筛查“亚健康”  公司白领、从事脑力劳动强度较高的机关工作人员,因工作压力大、生活节奏快,并且作息不规律、应酬多、平时锻炼时间少,多坐少动,身体不同程度地存在“亚健康”状态,甚至有人已经患有高血压、脂肪肝等常见病。所以,建议这一人群在接受上述常规体检的基础上,再增加乙肝六项、血脂全项、血尿酸、胸部拍片和五官科、口腔科等项目;40岁以上人群应加查肛门指诊,以及早发现直肠肿物;中年女性还应增加妇科、宫颈涂片检验、乳腺扫描、B超检查。3、老年人体检应全面  高血压、冠心病、糖尿病、恶性肿瘤以及慢性呼吸道疾病等是老年人的常见病,并且由于老年人各脏器功能减退,对躯体疼痛、发热等症状反应迟钝,极易因延误治疗而损伤脏器功能。老年人定期体检有利于早期发现病情,应把内科、神经内科作为必查项目,同时接受B超、心电图、经颅多普勒、脑电图、眼底照相,以及血尿常规、血糖、血流变和肝、肾功能检查,然后再根据医生临床观察,视情增加CT等相关检查项目。此外,老年男性还应检查前列腺,老年女性应增加妇科检查及宫颈涂片检测。

  • 【国内简讯】药监局:狂犬疫苗因含非法添加物质被召回

    6日从国家食品药品监管局获悉,辽宁大连金港安迪生物制品有限公司生产的人用狂犬疫苗因含有非法添加物质,目前已被控制和召回。今年1月,中国药品生物制品检定所在对狂犬疫苗的监督检验中发现,辽宁大连金港安迪生物制品有限公司2008年生产的部分人用狂犬病疫苗中含有违法添加的核酸物质。 国家食品药品监管局新闻发言人颜江瑛说,核酸物质临床上常作为免疫制剂,用于某些病毒性感染疾病的治疗。目前,有专家正在就能否将核酸物质作为佐剂添加到狂犬疫苗中进行相关研究,在动物实验中未发现对动物造成危害,但这一研究尚未进入人体临床试验阶段,因此,未经批准擅自在人用狂犬病疫苗中加入核酸物质属于违法行为。 颜江瑛表示,食品药品监管部门目前已召回大连金港安迪生物制品有限公司2008年生产的所有批次人用狂犬病疫苗,并已对该公司立案调查,将依法作出严肃处理。药品不良反应监测部门正在密切关注已使用这一疫苗的人群,截至目前,尚未收到因使用这一疫苗而出现的不良反应报告。

  • 抗体标记与检测的种类和方法详解

    [font=宋体]抗体是生物体内重要的免疫分子,它们能够识别并攻击外部入侵者,如病毒和细菌。在医学、生物学和免疫学等领域,抗体标记与检测技术广泛应用于疾病诊断、治疗监测、药物研发等方面。本文将详细介绍[url=https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/antibody-conjugation][b]抗体标记[/b][/url]与检测的种类和方法,包括直接标记、间接标记、免疫荧光、酶联免疫吸附试验等。通过对这些技术的了解和应用,我们可以更好地利用抗体进行疾病诊断和治疗监测,提高医疗水平和治疗效果。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b][font=Calibri]1.[/font][font=宋体]抗体与标记物[/font][/b][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]抗体广泛应用于多种免疫分析中,用于检测和定量抗原。直接识别抗原的抗体被称为一抗([/font][font=Calibri]primary antibody[/font][font=宋体]),赋予检测的特异性。同时,在检测中还需加入标记物(详见后文“间接标记法 [/font][font=Calibri]Vs.[/font][font=宋体]直接标记法”),标记物的加入赋予可检测性。表[/font][font=Calibri]1[/font][font=宋体]中列出了一些常用的免疫分析技术,及可能使用到的标记物。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][table][tr][td][b][font=微软雅黑]免疫分析方法[/font][/b][/td][td][b][font=微软雅黑]标记物[/font][/b][/td][/tr][tr][td][font=微软雅黑][font=微软雅黑]免疫印迹[/font][font=微软雅黑](WB)[/font][/font][/td][td][font=微软雅黑][font=微软雅黑]酶[/font][font=微软雅黑](通常为辣根过氧化物酶HRP或碱性磷酸酶AP)[/font][/font][/td][/tr][tr][td][font=微软雅黑][font=微软雅黑]酶联免疫吸附试验[/font][font=微软雅黑](ELISA)[/font][/font][/td][td][font=微软雅黑][font=微软雅黑]酶、生物素[/font][font=微软雅黑]/链亲和素[/font][/font][/td][/tr][tr][td][font=微软雅黑][font=微软雅黑]免疫荧光[/font][font=微软雅黑](Immunofluorescence)[/font][/font][/td][td][font=微软雅黑]荧光染料[/font][/td][/tr][tr][td][font=微软雅黑][font=微软雅黑]免疫组化[/font][font=微软雅黑](Immunohistochemistry)[/font][/font][/td][td][font=微软雅黑][font=微软雅黑]酶、生物素[/font][font=微软雅黑]/链亲和素[/font][/font][/td][/tr][tr][td][font=微软雅黑][font=微软雅黑]流式细胞术[/font][font=微软雅黑](Flow Cytometry)[/font][/font][/td][td][font=微软雅黑]荧光蛋白或染料、串联染料[/font][/td][/tr][/table][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b][font=Calibri]2.[/font][font=宋体]直接检测法 [/font][font=Calibri]Vs.[/font][font=宋体]间接检测法[/font][/b][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]检测技术可分为两大类:直接法和间接法。对于直接检测法,标记物通过共价键连接到一抗上。而对于间接检测法,标记物则是共价连接到与一抗特异性结合的二抗上。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]在间接法中,检测由两个部分组成:第一步,用未标记的一抗进行孵育(通常[/font][font=Calibri]1[/font][font=宋体]小时),[/font][font=Calibri]([/font][font=宋体]若存在抗原[/font][font=Calibri])[/font][font=宋体]部分抗体与抗原结合,未结合的抗体则通过洗涤去掉,然后加入标记二抗。再次孵育(通常[/font][font=Calibri]1[/font][font=宋体]小时),洗涤去掉未结合的二抗。然后对结合在抗体上的标记物进行量化。若有抗原存在时,标记物通常导致有色物质的生成或某一个波长的发射光量增加。当无抗原存在时,则无一抗的结合,也无二抗试剂的结合,因此无信号产生。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]在直接法中,标记物直接与一抗共价结合,因此仅需一轮孵育及洗涤步骤,而间接法则需要两轮孵育及洗涤步骤。直接法简化了试验的流程,但检测的灵活性降低。下表列举出了直接法[/font][font=Calibri]/[/font][font=宋体]间接法的主要利弊。[/font][/font][table][tr][td][b][font=微软雅黑]方法[/font][/b][/td][td][b][font=微软雅黑]优点[/font][/b][/td][td][b][font=微软雅黑]缺点[/font][/b][/td][/tr][tr][td][font=微软雅黑]直接法[/font][/td][td][font=微软雅黑]仅需使用一抗,检测快速[/font][font=微软雅黑][/font][font=微软雅黑]无二抗的非特异性结合[/font][/td][td][font=微软雅黑][font=微软雅黑]由于标记可能导致一抗的免疫反应性降低[/font][font=微软雅黑] [/font][/font][font=微软雅黑][/font][font=微软雅黑]信号放大作用较弱[/font][/td][/tr][tr][td][font=微软雅黑]间接法[/font][/td][td][font=微软雅黑]一抗含有多个标记,二抗可结合的表位,因而灵敏度升高,信号放大作用较强。[/font][/td][td][font=微软雅黑][font=微软雅黑]二抗可能发生非特异性结合[/font][font=微软雅黑] [/font][/font][font=微软雅黑][/font][font=微软雅黑]孵育及洗涤步骤增多[/font][/td][/tr][/table][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]尽管直接标记法具有诸多潜在的优点,但为何如今众多的免疫分析仍采用间接法原理呢[/font][font=Calibri]?[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]无疑,最主要的原因就是直接标记一抗相对较复杂,确实从历来经验看,抗体标记都是由那些具有化学修饰技术的专业人员来完成的。在间接法中二抗试剂所起的信号放大效应究竟如何呢?是否直接标记法所产生的信号就很弱?其实在很多情况下,间接法的放大效应是让人产生错觉的。在与二抗试剂的孵育过程及洗涤过程中,一些一抗会与抗原发生解离,因此真正被放大的只是逐渐减少的一抗的量。其实在很多情况下,直接法也可获得与间接法相同甚至更好的结果。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b][font=Calibri]3.[/font][font=宋体]常见的抗体标记方法[/font][/b][/font][font=宋体]和所有蛋白质一样,抗体也是由氨基酸组成的。理论上,通过大多数氨基酸可以实现生物偶联。以下内容介绍了几种基于赖氨酸残基的抗体偶联和标记技术。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]①[/font][font=Calibri]NHS[/font][font=宋体](琥珀酰亚胺)酯法[/font][/font][font=宋体]应用广泛的荧光染料(如罗丹明衍生物)是采用这种方法对抗体进行偶联。通常在磷酸盐缓冲液中进行,随后与未标记的染料在柱上进行分离。该方法的主要缺点是,由于酯类对水分敏感,酯类的稳定性差。因此,反应结束后,标记抗体应立即使用。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]吉妥珠单抗([/font][font=Calibri]Gemtuzumab ozogamicin, Mylotarg[/font][font=宋体])是全球范围内首个获批上市的抗体偶联药物([/font][font=Calibri]ADC[/font][font=宋体])。半合成的卡奇霉素衍生物具有[/font][font=Calibri]NHS[/font][font=宋体]酯,以便将卡奇霉素与人源化[/font][font=Calibri]IgG4[/font][font=宋体]的赖氨酸残基偶联。然而,由于患者的临床获益不足,[/font][font=Calibri]Mylotarg[/font][font=宋体]已于[/font][font=Calibri]2010[/font][font=宋体]年退市。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体]②异硫氰酸盐法[/font][font=宋体][font=宋体]这种方法主要用于异硫氰酸荧光素([/font][font=Calibri]FITC[/font][font=宋体])染料的偶联,广泛用于荧光标记蛋白和抗体的制备。异硫氰酸盐比[/font][font=Calibri]NHS[/font][font=宋体]更稳定,但也更难制备,而且利用该方法,标记的反应效率可能会降低。与[/font][font=Calibri]NHS[/font][font=宋体]法一样,应在反应结束后通过层析法去除多余染料。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体]③碳二亚胺法[/font][font=宋体][font=宋体]碳二亚胺衍生化合物将蛋白质上的羧基转换为反应中间体,可与赖氨酸发生反应。碳二亚胺的高反应性意味着它们可用于使用相对惰性的材料(如磁性或金颗粒)标记抗体。最常用的碳二亚胺为[/font][font=Calibri]EDC[/font][font=宋体]。[/font][font=Calibri]NHS[/font][font=宋体]有时可被添加至反应中,以辅助产生相对稳定的中间体。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]该方法操作简单,但与[/font][font=Calibri]NHS[/font][font=宋体]一样,[/font][font=Calibri]EDS[/font][font=宋体]具有吸水性,因此,标记后抗体需立即使用。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体]④高碘酸盐法[/font][font=宋体][font=宋体]这种方法可用于制备特异性的[/font][font=Calibri]HRP[/font][font=宋体]标记抗体。高碘酸盐通过产生与赖氨酸残基相互作用的醛分子来激活[/font][font=Calibri]HRP[/font][font=宋体]。[/font][font=Calibri]HRP[/font][font=宋体]本身只有少量的赖氨酸残基,因此酶聚合的影响不大。[/font][font=Calibri]HRP[/font][font=宋体]和抗体之间的键是可逆的,可通过添加氰基硼氢化钠使其保持稳定。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]详情可以关注:[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/antibody-conjugation[/font][/font]

  • 抗体选择指南及抗体选择指南

    一 抗体选择指南:检测任何目的靶蛋白都有不止一种抗体可供选择,为缩小抗体的选择范围选中合适的抗体,需要考虑如下几种因素:1. 分析或应用的类型2. 样本蛋白的结构性质3. 样本的种属4. 抗体宿主的种类5. 抗体的标记和检测1 分析试验的应用类型一般抗体说明书都列出该抗体经试验验证过适用于何种分析类型,如:可以应用于WB IHC ICC ELASA 分析等,如果抗体说明书没有提及的应用类型,并不意味着该抗体不适用于此种分析应用类型,而仅是说明尚未经过此种分析试验验证,如果抗体不适用某些分析试验,则会在抗体说明书上标注出来不适于某分析试验。2 样本蛋白的结构性质了解样本蛋白的结构性质有助于选择最合适的抗体,至少两方面因素需要考虑(1)..待测样本蛋白的结构域:抗体是由各种不同免疫原免疫宿主而制备得来,其中的免疫原包括:全长蛋白、蛋白片断、多肽、全有机体(如:细菌)或细胞,抗体说明书一般都有免疫原的描述,如果打算检测的是蛋白片断或一种特殊的同型物或蛋白全长的某一区域,则必须选择用含此片段域的免疫原制备出的抗体。如果打算用FACS 流式检测活细胞的表面蛋白,则需要选择含该表面蛋白的胞外域来免疫制备的抗体。(2)样本的提取或处理过程:某些抗体要求样本经过某些特殊处理,例如:许多抗体只识别还原和变性的、表位已暴露不受二级四级结构阻碍的蛋白样本,另一方面,某些抗体仅识别天然折叠状态的蛋白。当选择免疫组化的抗体时,应注意某些抗体只识别未固定的冷冻的组织,而另一些抗体则适用于无需抗原修复解交联步聚的甲醛固定石蜡包埋的组织,这些都会在抗体说明书上应用部分标示出来3 样本的物种 应选择物种相同或有交叉反应的抗体,抗体可能与不同物种的同种靶蛋白有交叉反应,因其氨基酸序列同源性较高,如果样本的种类未列入抗体说明书上的交叉反应种属表中,并不意味着该抗体不适用于检测该物种的蛋白,而只是表示该物种尚未用此抗体检测验证过,应通过序列比对的方法来预测交叉反应,可应用Expasy 和 NCBI BLAST 来进行不同物种蛋白同源性比对。4 一抗宿主物种的选择一般说来,在使用偶联二抗结合无偶联物的一抗时,一抗宿主动物的物种选择较为重要,对于免疫组化而言,尽可能选择与样本不同种系物种的一抗,从而避免二抗与样本内源性免疫球蛋白产生交叉反应,例如:检测小鼠样本蛋白,则不应选择小鼠或大鼠源的一抗,最好选兔源的一抗,则二抗则可选择偶联了检测分子(酶、荧光素、生物素等)的抗兔IgG。如果选择有偶联物的一抗则不适用上述情况,除免疫组化外的其它对不含内源性免疫球蛋白样本的检测方法,则抗体宿主物种的影响不大,如对不含IgG 的细胞裂解物样本的western blotting检测,尽管如此,含有血清的组织裂解物和组织培养上清中含有免疫球蛋白,还原变性样本中含IgG,在western blot 检测中则结合出现IgG 分子50 and 25 kDa 的重链和轻链条带。5 二抗的选择 二抗应选用与使用的一抗相同的物种来源,例如:如果你的一抗是小鼠的单克隆抗体,二抗则选抗小鼠的二抗anti-mouse secondary。建议检查二抗说明书确保该抗体适用于你的检测应用, 二抗一般连接荧光素FITC 或发光团。6 双重染色抗体的选择用未偶联一抗进行细胞培养物或组织切片的双重免疫染色要求一抗来源于不同物种并且二抗分别识别其中之一,二抗说明书应描述其与其它物种来源的免疫球蛋有否有交叉吸附。

  • 【讨论】江苏延申公司承认4批次狂犬疫苗不合格

    新华网南京4月1日电 (记者刘巍巍 朱旭东 邓华宁)记者1日从疫苗生产商江苏延申生物科技股份有限公司获悉,该公司承认其生产的4批次狂犬疫苗不合格。根据规定,中国人用狂犬病疫苗的效价是每剂量2.5个国际单位(2.5IU/剂)。江苏延伸总经理刘武承认,该公司2008年生产的4个批次人用狂犬疫苗效价低于国家标准,可能导致疫苗接种后免疫抗体水平低,无法充分发挥疫苗应有的预防保护作用,属于不合格产品。针对近期导致15名儿童死亡的山西“问题疫苗”事件,刘武表示,这些儿童接种的是乙脑疫苗,而“延申从未生产过乙脑疫苗,山西儿童死亡事件与延申没有任何关系”。  “2008年7月-10月间,我们共有4个批次、总计17.9952万人份的人用狂犬病疫苗存在质量问题。”刘武介绍说。  刘武同时表示,自2009年11月30日以来,“公司没有生产、销售过任何一个种类的任何一支疫苗”。这一方面是国家药监局的调查还没有结论,产品拿不到生物制品出厂上市或者进口时必须持有的批签发,“产品无法上市销售,企业当然不会坚持生产。”另一方面,延申流感疫苗的GMP认证已于今年2月份到期,目前申请认证的工作仍在进行中,“所以,公司甲流疫苗目前也没有生产”。  2009年12月3日,国家药监局发布公告称,河北福尔生物制药股份有限公司和江苏延申生物科技股份有限公司在2008年7月-10月期间生产的7个批次共21.58万人份的人用狂犬病疫苗质量存在问题,并责令其停止人用狂犬病疫苗等全部产品的生产和销售。  而近日有舆论指称,江苏延申疫苗造假致全国超100万人受害,该公司7名高层因涉嫌生产销售劣药罪被批准逮捕,江苏延申疑似复工。  对于舆论指称,国家药监局新闻发言人颜江瑛表示,目前有关案件正在调查中,还没有得出最终调查结论,药监部门没有向任何媒体公布过所谓的调查结果。颜江瑛还曾表示,江苏延申疫苗的问题是效价低于国家标准,可能保护效果不能达到理想标准。  江苏延申2008年在中国狂犬疫苗批签发数据榜上排名第四位,占据了国内11%的市场。2009年,作为中国8家具备甲型H1N1流感疫苗生产资质的企业之一,江苏延申拿到了工信部630万份订单,排名全国前三。 [url]http://news.sina.com.cn/c/2010-04-01/183819989870.shtml[/url]新浪新闻中心

  • VELP漩涡混匀器在抗核抗体谱(IgG)检测中的应用

    抗核抗体(antinuclear antibody,ANA)又称抗核酸抗原抗体,是一组将自身真核细胞的各种成分脱氧核糖核蛋白(DNP)、DNA、可提取的核抗原(ENA)和RNA等作为靶抗原的自身抗体的总称,能与所有动物的细胞核发生反应,主要存在于血清中,也可存在于胸水、关节滑膜液和尿液中。抗核抗体识别是各种细胞核组分(细胞核生化成分),可特征地出现于许多疾病中。ANA鉴别诊断对于一些特定疾病的确认十分必要,而且对自身免疫性疾病的进一步诊断也很有价值。为了确保检测结果的准确性,对此相关部门对抗核抗体谱(IgG)检测制定了标准操作规程。在规程中,对于样品的要求写到,患者样本用样本缓冲液1:101稀释,如可取15μl血清用1.5ml样本缓冲液稀释并用漩涡混匀器进行充分混匀,不可用加样器混匀。选择一款稳定、高效的漩涡混匀器备显重要。化验室样品处理量大,选择一款快捷、省力的漩涡混匀器十分必要。意大利VELP推出了创新性红外感应漩涡混匀器,红外传感是VELP创新性的专利产品。VELP红外感应漩涡混匀器,一旦检测到试管,VELP漩涡混匀器自动开始震动,不需要施加任何外力,而且相比于传统的接触模式,VELP红外传感漩涡混匀器能确保在震动减少过程的急剧变化。VELP漩涡混匀器确保了样品的稳定性。VELP漩涡混匀器最大转速可以达到3000rpm,VELP漩涡混匀器可以满足大部分实验室的需求。VELP漩涡混匀器在实验中解放您的双手,让实验更快捷、更准确!

  • 动物疫病检测机构人员要求以及CMA认证

    我们想搞一个动物疫病检测机构,按214进行基本要求准备?还是有其它依据,现在想尽快弄准需要人员的专业是什么?仪器设备?场地布置? 当前政府抽检参数有,禽流感,新城疫抗体检测,口蹄疫抗体检测,猪瘟抗体检测,小反刍兽疫抗体检测,非洲猪瘟病原体检测 奶牛布病检测

  • 抗独特型抗体应用——药代动力学(PK)+ADA检测

    [font=宋体][font=宋体][url=https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/anti-idiotype-antibody][b]抗独特型抗体[/b][/url]是一种能够特异性结合另一抗体独特位的抗体。独特型由多个抗原决定簇([/font][font=Calibri]Antigenic determinant[/font][font=宋体])组成,每个抗原决定簇都是一个独特位。抗原决定簇或独特位可存在于重链可变区,也可存在于轻链可变区,或者存在于两条链组成的表面。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]抗独特型抗体在治疗性抗体药物开发过程中有着非常广泛的应用。由于抗独特型抗体与抗药抗体([/font][font=Calibri]Anti-drug antibody, ADA[/font][font=宋体])之间的相似性,抗独特型抗体在免疫原性([/font][font=Calibri]Immunogenicity[/font][font=宋体])分析中可作为阳性对照用于抗药物抗体总量的测定。另外,在抗体药的药代动力学([/font][font=Calibri]PK[/font][font=宋体])和药效学([/font][font=Calibri]PD[/font][font=宋体])分析中,抗独特型抗体可用于检测血液中抗体药物的含量(游离型、结合型和总量)。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]抗独特型抗体的不同应用[/b][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]①药代动力学([/font][font=Calibri]PK[/font][font=宋体])分析[/font][/font][font=宋体][font=宋体]药代动力学([/font][font=Calibri]PK[/font][font=宋体])描述并表征了药物在人或动物体内的四个不同阶段:吸收、分布、代谢和排泄(也称为[/font][font=Calibri]ADME[/font][font=宋体])。在药物开发中,[/font][font=Calibri]PK[/font][font=宋体]分析提供了药物与身体相互作用以及疗效强度和疗效持续时间的基本信息。在开发生物仿制药时,需要通过比较[/font][font=Calibri]PK[/font][font=宋体]分析来评价与原研药在生物活性的潜在差异。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]根据结合模式和性质的不同,抗独特型抗体可分为三种类型:抗原阻断型、抗原非阻断型和药物靶标复合物型。基于这些特点,可以建立不同形式的[/font][font=Calibri]PK[/font][font=宋体]检测,以测量血清中的抗体药物含量,包括游离型、结合型或总量。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]抗独特型抗体可用于定量检测动物或人血清中的抗体药物水平,是[/font][font=Calibri]PK[/font][font=宋体]研究的关键检测试剂。抗体药物定量分析有多种分析方法,其中[/font][font=Calibri]ELISA[/font][font=宋体]为最常用的形式。在抗独特型抗体捕获[/font][font=Calibri]ELISA[/font][font=宋体]中,将抗独特型抗体包被在平板上,再将含有抗体药物的样本加入系统中,然后用特异性结合药物的标记抗独特型抗体定量抗体药物。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]②免疫原性[/font][font=Calibri]/[/font][font=宋体]抗药抗体([/font][font=Calibri]ADA[/font][font=宋体])检测[/font][/font][font=宋体][font=宋体]免疫原性评价主要采用抗药抗体([/font][font=Calibri]anti-drug antibody, ADA[/font][font=宋体])分析的方法进行,这是治疗性蛋白药物(如单克隆抗体、[/font][font=Calibri]ADC[/font][font=宋体]和融合蛋白)开发过程中的关键步骤。在这些情况下,通常采用多层次递进式进行(图[/font][font=Calibri]3[/font][font=宋体])。该方法首先采用高灵敏的筛选试验鉴别阳性抗体样本,使用验证性试验尽量减少假阳性结果,然后使用表征试验评估抗体的中和能力。[/font][/font][font=宋体][font=宋体]在整个过程中,抗独特型抗体是必要的试剂。检测[/font][font=Calibri]ADA[/font][font=宋体]的检测方法有多种,包括[/font][font=Calibri]ELISA[/font][font=宋体]、放射免疫沉淀法([/font][font=Calibri]RIPA[/font][font=宋体])、表面等离子体共振([/font][font=Calibri]SPR[/font][font=宋体])和电化学发光检测([/font][font=Calibri]ECL[/font][font=宋体])。其中,桥联[/font][font=Calibri]ELISA[/font][font=宋体]是最常用方法,可用于检测所有[/font][font=Calibri]ADA[/font][font=宋体]同种型([/font][font=Calibri]IgG[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]IgM[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]IgA[/font][font=宋体]等)。在典型的桥联[/font][font=Calibri]ELISA[/font][font=宋体]中,将抗体药物预包被在平板上,并将标记的抗体药物与患者样本一起孵育,以检测是否存在[/font][font=Calibri]ADA[/font][font=宋体](图[/font][font=Calibri]4[/font][font=宋体])。抗独特型抗体将用作阳性对照或参比标准品,用于样本中[/font][font=Calibri]ADA[/font][font=宋体]的定性分析。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体][url=https://cn.sinobiological.com/services/anti-idiotype-antibody-service][b]抗独特型抗体制备[/b][/url][b]套餐[/b][/font][font=宋体][font=宋体]为支持药物开发,义翘神州为客户提供了从抗原制备、抗独特型抗体开发到检测方法建立和试剂盒开发的全方位、一站式的定制抗独特型抗体生产服务。我们拥有丰富的开发经验,包括不同抗体类型如全长[/font][font=Calibri]mAb[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]F(ab')2[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]Fab[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]scFv[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]VHH[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]ADC[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]bsAb[/font][font=宋体]和[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]融合蛋白等。定制的抗独特型抗体可用于建立药代动力学([/font][font=Calibri]PK[/font][font=宋体])[/font][font=Calibri]/ADA[/font][font=宋体]检测方法,以测定样本中的特异性抗体药物或[/font][font=Calibri]ADA[/font][font=宋体]水平。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]服务:[/font][font=宋体]①抗独特型兔多抗制备服务[/font][font=宋体]交付内容:[/font][font=宋体]? 纯化抗体[/font][font=宋体][font=宋体]? [/font][font=Calibri]CoA[/font][/font][font=宋体][font=宋体]周期:[/font][font=Calibri]2-3[/font][font=宋体]个月[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]②抗独特型鼠单抗制备服务[/font][font=宋体]交付内容[/font][font=宋体][font=宋体]? 阳性克隆,[/font][font=Calibri]2[/font][font=宋体]管细胞[/font][font=Calibri]/[/font][font=宋体]克隆[/font][/font][font=宋体][font=宋体]? 纯化抗体,[/font][font=Calibri]10 mg/[/font][font=宋体]克隆[/font][/font][font=宋体][font=宋体]? [/font][font=Calibri]ELISA[/font][font=宋体]抗体对(可选)[/font][/font][font=宋体][font=宋体]? [/font][font=Calibri]CoA[/font][/font][font=宋体][font=宋体]周期:[/font][font=Calibri]4~6[/font][font=宋体]个月[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]详情可以关注:[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/anti-idiotype-antibody[/font][/font]

  • 肉类综合检测仪检测项目有哪些

    【云唐】肉类综合检测仪检测项目有哪些  病害肉诊断 组胺、挥发性盐基氮  瘦肉精激素(兽药) 盐酸克伦特罗、沙丁胺醇、莱克多巴胺、己烯雌酚等  抗生素残留(兽药) 四环素类、硝基呋喃类、磺胺类、β-兴奋剂类、沙星类、磺胺类、喹诺酮类,甲砜霉素,氟苯尼考,金刚烷胺、替米考星、庆大霉素、林可霉素、链霉素、恩诺沙星、环丙沙星、头孢啦啶、青霉素、阿莫西林等  水产品安全类 孔雀石绿、氯霉素、呋喃妥因、呋喃西林、呋喃它酮、呋喃唑酮等  蛋类药物残留类 氯霉素,四环素,磺胺类,喹诺酮类,呋喃西林,呋喃它酮,呋喃妥因,呋喃唑酮,氟苯尼考,阿莫西林、头孢氨苄、红霉素、链霉素等  真菌毒素残留 食用油、粮食及饲料中黄曲霉毒素B1、黄曲霉毒素总量,奶中黄曲霉毒素M1、呕吐毒素、玉米赤霉烯酮、赭曲霉毒素A、T2毒素、伏马毒素等  动物疫病类 禽流感、新城疫、牛羊口蹄疫、牛羊结核病、牛羊包虫、牛羊布病、小反刍兽、猪蓝耳病毒、猪瘟病毒、猪伪狂犬病毒、猪细小、猪圆环、犬细小病毒、犬瘟热病毒、犬狂犬病毒等

  • 揭秘抗组蛋白抗体:健康守护者还是疾病信号?

    [font=宋体][font=宋体]抗组蛋白抗体是抗核抗体家族的一个亚基,专门针对组蛋白亚基或组蛋白复合物。[/font][font=Calibri]1959[/font][font=宋体]–[/font][font=Calibri]60[/font][font=宋体]年,[/font][font=Calibri]Henry Kunkel[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]H.R.Holman[/font][font=宋体]和[/font][font=Calibri]H.R.G.Dreicher[/font][font=宋体]在对红斑狼疮细胞病因的研究中首次报道了这些抗体。如今,抗组蛋白抗体仍被用作系统性红斑狼疮的标志物,但也与其他自身免疫性疾病有关,如[/font][font=Calibri]Sj?gren[/font][font=宋体]综合征、皮肌炎或类风湿性关节炎。抗组蛋白抗体可作为药物诱导性狼疮的标志物。[/font][/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体]特异性[/font][/b][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]组蛋白是蛋白质的复合体,[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]储存在其周围。抗组蛋白抗体可以靶向组蛋白复合物或显示的任何蛋白质亚基。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]抗组蛋白抗体靶向五大类组蛋白亚基:[/font][font=Calibri]H1[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]H2A[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]H2B[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]H3[/font][font=宋体]和[/font][font=Calibri]H4[/font][font=宋体]。抗组蛋白的抗体多种多样,因此除了靶向蛋白亚基外,不同的抗体也可能对不同的复合物,包括[/font][font=Calibri]H2A-H2B[/font][font=宋体]二聚体或[/font][font=Calibri]H3-H4[/font][font=宋体]四聚体。有证据表明,不同药物暴露产生的[/font][font=Calibri]IgG[/font][font=宋体]和[/font][font=Calibri]IgM[/font][font=宋体]抗组蛋白抗体对不同组蛋白复合物的表位具有特异性。高度修饰的组蛋白已被证明能促进更大的免疫反应。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体]检测抗体[/font][/b][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]抗组蛋白抗体可以使用[/font][font=Calibri]ELISA[/font][font=宋体]测定法进行临床检测。测试需要血样。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]间接免疫荧光也可用于检测抗组蛋白抗体。均匀、扩散染色表明存在抗组蛋白抗体、染色质和一些双链[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]。义翘神州提供[url=https://cn.sinobiological.com/services/immunofluorescence-servicehttp://][b]免疫荧光检测服务[/b][/url]![/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体]抗组蛋白抗体阳性说明什么?[/font][/b][font=宋体] [/font][font=宋体]抗组蛋白是含有五个亚单位的碱性蛋白,抗组蛋白阳性说明可产生了组蛋白抗体,多存在系统性红斑狼疮、类风湿关节炎、风湿病等疾病中,建议患者对症治疗。[/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体]正常值:[/font][/b][font=宋体]正常人抗组蛋白抗体为阴性。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]在探索抗组蛋白抗体的道路上,科学家们从未停止脚步。他们致力于解开这一生物标志物的所有谜团,以期为人类健康带来更多福祉。作为普通公众,我们也可以通过学习和了解抗组蛋白抗体的相关知识,为自己的健康保驾护航。让我们共同期待未来科学研究在抗组蛋白抗体领域取得的更多突破,为人类的健康事业贡献智慧和力量。[/font][b][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]义翘神州:蛋白与抗体的专业引领者,欢迎通过百度搜索[/font][font=宋体]“义翘神州”与我们取得联系。[/font][/font][/b]

  • 抗核抗体p蛋白抗体阳性是什么意思?

    [font=宋体][font=宋体]传统意义上,抗核抗体([/font][font=Calibri]antinuclear antibodies[/font][font=宋体],[/font][font=Calibri]ANA[/font][font=宋体])是所有抗细胞核抗原成分的自身抗体的总称,包括一大类抗体。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]然而,随着[/font][font=Calibri]ANA[/font][font=宋体]检测技术的改进、尤其是培养细胞抗原基质(如[/font][font=Calibri]HEp-2[/font][font=宋体]细胞,即人喉癌上皮样细胞系)的广泛运用,[/font][font=Calibri]ANA[/font][font=宋体]针对的靶抗原成分已由细胞核扩展到整个细胞成分,包括细胞核、细胞浆、细胞骨架及细胞分裂周期蛋白等。目前对[/font][font=Calibri]ANA[/font][font=宋体]的定义为:以真核细胞的各种成分为靶抗原的自身抗体的总称。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]ANA[/font][font=宋体]的检测方法,目前国际及国内指南或共识推荐的均是间接免疫荧光法([/font][font=Calibri]indirect immunofluorescence[/font][font=宋体],[/font][font=Calibri]IIF[/font][font=宋体]),而且是以[/font][font=Calibri]HEp-2[/font][font=宋体]细胞为实验基质的[/font][font=Calibri]IIF[/font][font=宋体]。此外还有[/font][font=Calibri]ELISA[/font][font=宋体]、线性免疫印迹法、化学发光免疫分析法等,各有优缺点。瑞金医院检验科实验室、皮肤科实验室均采用[/font][font=Calibri]IIF[/font][font=宋体]法检测[/font][font=Calibri]ANA[/font][font=宋体]。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]IIF-ANA[/font][font=宋体]规范的结果报告内容应包括:检测方法、定性结果(阳性[/font][font=Calibri]/[/font][font=宋体]阴性)、荧光模型、滴度、临床建议。[/font][font=Calibri]IIF-ANA[/font][font=宋体]荧光模型分[/font][font=Calibri]3[/font][font=宋体]类:细胞核荧光模型([/font][font=Calibri]14[/font][font=宋体]种)、细胞浆荧光模型([/font][font=Calibri]9[/font][font=宋体]种)、细胞有丝分裂荧光模型([/font][font=Calibri]5[/font][font=宋体]种);国内共识建议必报的荧光模型有[/font][font=Calibri]13[/font][font=宋体]种,细胞核类的有均质型、斑点型(需区分致密斑点型)、着丝点型、核点型、核仁型、核膜型,细胞浆类的有胞浆纤维型、胞浆颗粒型、胞浆网状[/font][font=Calibri]/[/font][font=宋体]线粒体型、胞浆极型[/font][font=Calibri]/[/font][font=宋体]高尔基体型、胞浆棒状环状型、胞浆线性[/font][font=Calibri]/[/font][font=宋体]肌动蛋白型。[/font][/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体][font=宋体]抗核抗体[/font][font=Calibri]P[/font][font=宋体]蛋白抗体阳性通常指的是抗核糖体[/font][font=Calibri]P[/font][font=宋体]蛋白抗体阳性,它可能意味着身体存在结缔组织疾病,尤其是系统性红斑狼疮([/font][font=Calibri]SLE[/font][font=宋体])。[/font][/font][/b][font=宋体][font=宋体]包括类风湿关节炎、干燥综合征的患者等,阳性率并不是很高,特异性也不是很好。系统性红斑狼疮是一种自身免疫性疾病,可能会对皮肤黏膜、肝功能、中枢神经系统等造成损伤。抗核糖体[/font][font=Calibri]P[/font][font=宋体]蛋白抗体对系统性红斑狼疮具有高度特异性,尤其是在伴有典型神经系统症状的中枢神经系统损害型红斑狼疮中,出现抗核糖体[/font][font=Calibri]P[/font][font=宋体]蛋白抗体阳性的几率比较高。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]所以出现抗体阳性后,一定要到医院请专科大夫来进行诊断,并来进行合理的解释,再进行其他实验室检查,包括血沉、[/font][font=Calibri]C[/font][font=宋体]反应蛋白 、血尿常规、肝肾功能、类风湿因子,以及相关其他,如[/font][font=Calibri]SM[/font][font=宋体]抗体、核小体抗体、[/font][font=Calibri]SSA[/font][font=宋体]抗体、[/font][font=Calibri]SSB[/font][font=宋体]抗体等自身抗体检查。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]义翘神州提供[url=https://cn.sinobiological.com/services/platform/facs-b-cell-sorting][b]单[/b][/url][/font][font=Calibri][url=https://cn.sinobiological.com/services/platform/facs-b-cell-sorting][b]B[/b][/url][/font][font=宋体][url=https://cn.sinobiological.com/services/platform/facs-b-cell-sorting][b]细胞分选平台[/b][/url],可向全球客户提供[url=https://cn.sinobiological.com/services/single-b-cell-antibody-service][b]单[/b][/url][/font][font=Calibri][url=https://cn.sinobiological.com/services/single-b-cell-antibody-service][b]B[/b][/url][/font][font=宋体][url=https://cn.sinobiological.com/services/single-b-cell-antibody-service][b]细胞抗体制备服务[/b][/url],整个过程涉及单[/font][font=Calibri]B[/font][font=宋体]细胞分离、测序、克隆和单[/font][font=Calibri]B[/font][font=宋体]细胞抗体筛选等步骤。更多详情可以关注:[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/single-b-cell-technology[/font][/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体][font=宋体]义翘神州:蛋白与抗体的专业引领者,欢迎通过百度搜索[/font][font=宋体]“义翘神州”与我们取得联系。[/font][/font][/b]

  • 【分享】北京康农兴牧 猪瘟抗体金标快速检测卡使用说明书

    猪瘟抗体金标快速检测卡使用说明书【产品用途】本检测卡采用免疫原理和胶体金免疫层析技术制成,用于快速检测猪血液或猪血清中的猪瘟抗体,为国内最新检测试剂。检测时间仅需20 分钟,操作简便、快速、结果准确、直观、灵敏度高、容易判定。当猪瘟抗体滴度达到能抵御猪瘟强毒攻击时,在检测区和对照区各形成一条色线,则视为阳性,抗体滴度越高,检测线颜色越深;当猪瘟抗体滴度达不到抵御猪瘟强毒攻击的抗体滴度时,只在对照区形成一条色线,则视为阴性。本卡附带一张金标试纸与正相间接血凝试验实物参照图,将检测线的颜色深浅与参照图对照,便可粗略估计样品抗体的滴度。【操作步骤】1.打开包装袋,取出检测卡平放在桌面上,并做好标记;2.在检测卡的加样孔内加入2 滴(50-100ul)血液或血清样品;3.在20 分钟内观察和记录结果,超过20 分钟的结果只能作为参考。【结果判定】见右图阳性:在检测区(T)和对照区(C) 各出现一条紫红色线。检测线颜色越深,表明猪瘟抗体滴度越高。弱阳性:在检测区(T)和对照区(C)各出现一条紫红色线,但检测线颜色很浅。阴性:只在对照区(C)出现一条紫红色线。无效:都不出现紫红色线或只在检测区(T)出现紫红色线,对照区(C)不出现紫红色线。【结果参考意义】1.强阳性结果说明猪瘟抗体滴度较高,暂时不必进行猪瘟疫苗的接种免疫;2.弱阳性结果说明猪瘟抗体滴度只达到抵抗猪瘟强毒攻击的最低保护水平,这时应该及时进行猪瘟疫苗接种,此时也是猪瘟疫苗接种的最佳时间;3.阴性结果说明机体内无猪瘟抗体或抗体水平低于抵抗猪瘟强毒攻击的最低保护水平,如果动物群体健康,应该及时进行猪瘟疫苗接种。如果动物群体已有个别动物出现疑似猪瘟病时,则可作为诊断猪瘟病的一个参考依据。【注意事项】1.请严格按照说明书要求进行操作和结果判定。2.检测样品可以是猪血液或血清。3.检测卡从铝箔袋取出后应尽快使用,尽量避免长时间放置在空气中,否则吸潮后将失效。4.检测环境应保持一定的湿度,避风和避免在过高温度下进行操作。5.检测卡在室温下保存,如在2-8℃冷藏,使用时需平衡至室温后方可打开包装进行检测操作。【包装规格】单头份铝箔袋包装(内含检测卡、吸管和干燥剂);50 头份/盒【贮藏和有效期】密封,在干燥处保存;在3-30℃下贮存,有效期为12 个月。

  • 单链抗体scfv的分子结构、制备流程及应用领域深度解析

    [font=宋体][font=宋体]单链抗体([/font][font=Calibri]Single chain fragment variable, scFv[/font][font=宋体])是一种基因工程抗体,在研究、诊断和临床应用等领域展示出广阔的前景。[/font][font=Calibri]scFv[/font][font=宋体]的分子量约为[/font][font=Calibri]28kDa[/font][font=宋体],由抗体的重链([/font][font=Calibri]VH[/font][font=宋体])可变区和轻链([/font][font=Calibri]VL[/font][font=宋体])可变区通过一段[/font][font=Calibri]10~25[/font][font=宋体]个氨基酸的柔性短肽([/font][font=Calibri]linker[/font][font=宋体])连接而成。[/font][font=Calibri]VH[/font][font=宋体]和[/font][font=Calibri]VL[/font][font=宋体]各自包含[/font][font=Calibri]3[/font][font=宋体]个互补决定区([/font][font=Calibri]CDR[/font][font=宋体]),即[/font][font=Calibri]CDR1[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]CDR2[/font][font=宋体]和[/font][font=Calibri]CDR3[/font][font=宋体]。由于[/font][font=Calibri]CDR[/font][font=宋体]的氨基酸组成和排列顺序呈现高度多样性,故可形成许多种具有不同结合抗原特异性的抗体。[/font][font=Calibri]VH[/font][font=宋体]与[/font][font=Calibri]VL[/font][font=宋体]的[/font][font=Calibri]6[/font][font=宋体]个[/font][font=Calibri]CDR[/font][font=宋体]共同组成[/font][font=Calibri]Ig[/font][font=宋体]的抗原结合部位,决定了一个抗体的特异性。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b][font=Calibri]1. scFv[/font][font=宋体]的结构[/font][/b][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]scFv[/font][font=宋体]是由抗体重链可变区和轻链可变区通过[/font][font=Calibri]15-20[/font][font=宋体]个氨基酸的短肽连接而成,不含[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]片段,属于小 分子基因工程抗体。完整的抗体由两条重链[/font][font=Calibri](heavy chain, H)[/font][font=宋体]和两条轻链[/font][font=Calibri](light chain, L)[/font][font=宋体]构成,透过人工改造,可使其只表达可变区,通过人工合成的连接肽[/font][font=Calibri](Linker) [/font][font=宋体]基因将抗体重链可变区[/font][font=Calibri](VH) [/font][font=宋体]和轻链可变区[/font][font=Calibri](Vu) [/font][font=宋体]连接成重组基因,由该重组基因表达的抗体就称为单链抗体[/font][font=Calibri](scFv) [/font][font=宋体]。在结构上,可以将重链的[/font][font=Calibri]N[/font][font=宋体]端与轻链的[/font][font=Calibri]C[/font][font=宋体]端相连,也可以将轻链的[/font][font=Calibri]N[/font][font=宋体]端与重链的[/font][font=Calibri]C[/font][font=宋体]端相连。[/font][font=Calibri]Linker[/font][font=宋体]长度通常为[/font][font=Calibri]15-25[/font][font=宋体]个氨基酸,通常由甘氨酸[/font][font=Calibri](Gly) [/font][font=宋体]和丝氨酸[/font][font=Calibri](Ser) [/font][font=宋体]构成,具有一定弹性及蛋白酶抗性,[/font][font=Calibri]Linker[/font][font=宋体]的作用是连接[/font][font=Calibri]VH[/font][font=宋体],[/font][font=Calibri]VL, [/font][font=宋体]并保持一定的弹性[/font][font=Calibri], [/font][font=宋体]使[/font][font=Calibri]VH, Vi [/font][font=宋体]的功能区折叠后仍可配对,构成单价抗原结合位点。[/font][/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体][font=Calibri]2. scFv[/font][font=宋体]的制备流程[/font][/font][/b][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]噬菌体展示技术是一种将[/font][font=Calibri]scFv[/font][font=宋体]单链抗体或[/font][font=Calibri]Fab[/font][font=宋体]抗体展示于噬菌体表面的抗体库制备技术,已广泛应用于抗原表位分析、抗体人源化、药物筛选、单克隆抗体制备和疫苗开发等领域。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]scFv[/font][font=宋体]单链抗体的制备流程:首先从杂交瘤(或脾脏、淋巴细胞和骨骼)中分离出[/font][font=Calibri]mRNA[/font][font=宋体],随后逆转录成[/font][font=Calibri]cDNA[/font][font=宋体],再经[/font][font=Calibri]RT-[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url][/font][font=宋体]分别扩增抗体的重链及轻链基因,然后将抗体基因连入噬菌粒载体,构建[/font][font=Calibri]scFv[/font][font=宋体]抗体库。利用生物淘选步骤,我们可获得具有高度亲和力和特异性的[/font][font=Calibri]scFv[/font][font=宋体]抗体片段。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]在抗体发现项目中,[/font][font=Calibri]scFv[/font][font=宋体]抗体片段表达和制备是一项常规工作。抗体基因完成测序后,[/font][font=Calibri]scFv[/font][font=宋体]抗体可在原核系统(如[/font][font=Calibri]E. coli[/font][font=宋体])中进行表达,也可以通过转染在哺乳动物系统(即[/font][font=Calibri]HEK293[/font][font=宋体]细胞)中进行表达。义翘神州可根据客户的要求,在不同表达系统进行[/font][font=Calibri]scFv[/font][font=宋体]抗体片段的制备。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]常用的纯化标签为[/font][font=Calibri]poly-histidine[/font][font=宋体]标签、[/font][font=Calibri]FLAG[/font][font=宋体]标签、[/font][font=Calibri][url=https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review/ha-tag-protein-production][b]HA[/b][/url][/font][font=宋体][url=https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review/ha-tag-protein-production][b]标签[/b][/url]和[/font][font=Calibri][url=https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review/myc-tag-protein-production][b]Myc[/b][/url][/font][font=宋体][url=https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review/myc-tag-protein-production][b]标签[/b][/url]等。通常,将合适的纯化标签添加至[/font][font=Calibri]scFv[/font][font=宋体]抗体片段的[/font][font=Calibri]C[/font][font=宋体]端,另外,在设计表达载体时可在纯化标签和[/font][font=Calibri]Fab[/font][font=宋体]之间加上蛋白酶切位点,方便后续纯化后去除标签。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b][font=Calibri]3. scFv[/font][font=宋体]的应用[/font][/b][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]scFv[/font][font=宋体]的特异性和低免疫原性使它们成为传统治疗形式的一种很好的替代方法,提高了靶向特定分子的准确性并避免了不良副作用。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]①[/font][font=Calibri]scFv[/font][font=宋体]最显著的应用无疑是作为靶向药物重要的一部分,即[/font][font=Calibri]CAR-T[/font][font=宋体]中的嵌合抗原受体([/font][font=Calibri]Chimeric antigen receptor, CAR[/font][font=宋体])。[/font][font=Calibri]CAR-T[/font][font=宋体]作为当下靶向治疗中的明星,通过工程改造的[/font][font=Calibri]T[/font][font=宋体]细胞进行癌症治疗。[/font][font=Calibri]CAR-T[/font][font=宋体]免疫疗法的前提是修饰[/font][font=Calibri]T[/font][font=宋体]细胞以识别癌细胞,以便更有效地靶向和破坏它们,而起到识别和结合癌细胞作用的正是嵌合在[/font][font=Calibri]T[/font][font=宋体]细胞上的[/font][font=Calibri]scFv[/font][font=宋体]。[/font][font=Calibri]CAR-T[/font][font=宋体]已经在血液癌症,[/font][font=Calibri]HIV[/font][font=宋体],单纯疱疹病毒([/font][font=Calibri]HSV[/font][font=宋体])中发挥重要的作用。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]②[/font][font=Calibri]scFv[/font][font=宋体]也可以应用于疾病的诊断,比如狂犬病病毒的检测。在狂犬病感染的情况下,仅在暴露后不久可治疗,准确的诊断对于患者的生存至关重要,[/font][font=Calibri]scFv[/font][font=宋体]相对传统单抗更便宜,可广泛普及。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]③噬菌体展示库也可以为抗体治疗后续实验提供广泛的平台,包括人源化和亲和力成熟等。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]义翘神州拥有一整套的抗体开发解决方案,包括免疫原制备、动物免疫、[/font][font=Calibri]scFv[/font][font=宋体]抗体库构建和筛选等步骤。此外,我们在[/font][font=Calibri]scFv[/font][font=宋体]抗体表达纯化方面具有丰富的经验,已成功为客户表达[/font][font=Calibri]di-scFvs[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]tri-scFvs[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]BiTE[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]Diabody[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]scFv-(H)IgG[/font][font=宋体]和[/font][font=Calibri]scFv-(L)IgG[/font][font=宋体]等多种[/font][font=Calibri]scFv[/font][font=宋体]形式。义翘神州的技术专家非常乐意为客户解决问题,欢迎随时咨询。详情关注:[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/scfv-antibody-production[/font][/font]

  • 基于细胞的荧光法:一种新型抗体亲和力检测技术

    [font=宋体]在生物医学研究和治疗领域,[/font][url=https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/monoclonal-antibody-production][u][font=宋体][color=#0000ff][b][font=宋体]单克隆抗体([/font][font=Calibri]mAbs[/font][font=宋体])[/font][/b][/color][/font][/u][/url][font=宋体][font=宋体]扮演着越来越重要的角色。特别是在癌症和慢性疾病的治疗中,抗体的亲和力[/font][font=宋体]——即其与目标抗原结合的紧密程度[/font][/font][font=宋体],[/font][font=宋体]直接影响[/font][font=宋体]抗体药物的[/font][font=宋体]治疗效果。因此,开发一种既准确又可靠的抗体亲和力测定方法,对于提高治疗效率和开发新型抗体药物至关重要。[/font][b][font=宋体]传统[/font][font=宋体]的亲和力测定[/font][font=宋体]技术[/font][/b][font=宋体]目前存在多种测[/font][font=宋体]定[/font][font=宋体]抗体亲和力的方法,如放射免疫[/font][font=宋体]分析[/font][font=宋体][font=宋体]、表面等离子共振([/font][font=Calibri]SPR[/font][font=宋体])、流式细胞术[/font][/font][font=宋体]、酶联免疫吸附分析和动力学排阻分析[/font][font=宋体]等[/font][font=宋体]。作为一种成功的候选治疗药物,[/font][font=宋体][font=Calibri]mAbs[/font][font=宋体]必须能识别目标抗原上的天然表位,因此需要一种更加快速灵敏、直观简便的测定方法。[/font][/font][b][font=宋体]基于细胞的荧光法:一种新的[/font][font=宋体]检测[/font][font=宋体]技术[/font][/b][font=宋体][font=Calibri]Yu[/font][font=宋体]等人在杜克大学医学中心的研究中,开发了一种基于细胞的荧光[/font][/font][font=宋体]检测[/font][font=宋体]法[/font][font=宋体](如基于细胞的[/font][font=宋体][font=Calibri]ELISA[/font][font=宋体]法[/font][/font][font=宋体])[/font][font=宋体],用于测[/font][font=宋体]定[/font][font=宋体][font=宋体]抗体亲和力。这种方法通过使用荧光标记的抗体,并将其加入到固定在[/font][font=Calibri]96[/font][font=宋体]孔板上的抗原阳性和抗原阴性的细胞系中,通过计算特异性结合和非特异性结合的差值来测量抗体的亲和力。[/font][/font][font=宋体][font=宋体]研究者通过与传统的流式细胞术和放射性([/font][font=Calibri]I[/font][/font][sup][font=宋体][font=Calibri]125[/font][/font][/sup][font=宋体][font=宋体])[/font][font=Calibri]Scatchard[/font][font=宋体]分析方法进行比较,验证了基于细胞的荧光法的有效性。结果显示,新方法得到的解离常数[/font][font=Calibri]KD[/font][font=宋体]值与传统方法相当,证明了这一新技术的准确性和可靠性。[/font][/font][font=宋体]此外,研究还展示了如何使用这种荧光法进行竞争性结合分析,进一步验证了抗体与抗原的特异性结合。这一功能对于研究抗体的结合表位和选择高亲和力抗体具有重要意义。[/font][b][font=宋体]基于细胞的荧光法的优势[/font][/b][font=宋体]与[/font][font=宋体]流式细胞术和[/font][font=宋体][font=Calibri]I[/font][/font][sup][font=宋体][font=Calibri]125[/font][/font][/sup][font=宋体]比色法等[/font][font=宋体]传统方法相比,基于细胞的荧光法具有多项优势。首先,该方法不使用放射性同位素,减少了实验的安全风险。其次,使用完整的细胞而非纯化的蛋白质,能够更真实地模拟抗体与天然抗原的相互作用。此外,该方法操作简便,成本低廉,适合高通量筛选,且能够在短时间内完成大量样本的分析。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]尽管基于细胞的荧光法具有诸多优势,但也存在一些局限性。例如,对于复杂样品的处理可能会产生非特异性结合,导致结果的误判。然而,随着技术的不断优化和发展,这些问题有望得到解决。[/font][font=宋体]尽管目前还未有人利用[/font][font=宋体]基于细胞的荧光法[/font][font=宋体]来评估抗体亲和力,但是其自身具备的优势[/font][font=宋体][color=#182026]表明[/color][/font][font='Segoe UI'][color=#182026]该方法具有作为抗体亲和力检测方法的潜力[/color][/font][font=宋体],为抗体药物的开发和研究提供强有力的支持。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][/font][font=宋体]本篇[/font][font=宋体]文章[/font][font=宋体]由[/font][font=宋体]义翘神州[/font][font=宋体]编辑[/font][font=宋体]整理[/font][font=宋体],[/font][font=宋体]同时[/font][font=宋体]义翘[/font][font=宋体]神州[/font][font=宋体]提供[/font][url=https://cn.sinobiological.com/services/spr-bli-assay-services][u][font=宋体][color=#0000ff][b][font=Calibri]SPR/BLI[/font][font=宋体]亲和力测定服务[/font][/b][/color][/font][/u][/url][font=宋体],[/font][font=宋体]详情[/font][font=宋体]请[/font][font=宋体]点击[/font][font=宋体]![/font][font=宋体][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]参考文献:[/font][font=宋体][font=Calibri]Yu X, Pegram CN, Bigner DD, Chandramohan V. Development and validation of a cell-based fluorescent method for measuring antibody affinity. J Immunol Methods. 2017 442:49-53. doi:10.1016/j.jim.2016.12.004[/font][/font][font=Calibri] [/font]

  • 荧光标记抗体:原理、应用与进展

    [b][font=宋体]一、引言[/font][/b][font=宋体] [/font][font=宋体]荧光标记技术是生物学和医学领域中常用的可视化技术,其中荧光标记抗体凭借其独特的应用优势,在许多研究方向中发挥了重要作用。本文将详细介绍荧光标记抗体的原理、应用及最新进展。[/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体]二、荧光标记抗体的原理[/font][/b][font=宋体] [/font][font=宋体]荧光标记技术是一种利用荧光物质对目标进行标记,通过特定波长的光激发后发出荧光,从而实现可视化检测的方法。荧光标记抗体则是将荧光物质与特异性抗体结合,形成荧光标记抗体,用于对目标抗原进行特异性结合和荧光标记。常见的荧光物质有荧光素、量子点、上转换纳米颗粒等。[/font][b][font=宋体] [/font][font=宋体]三、荧光标记抗体的应用[/font][/b][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]免疫分析:荧光标记抗体在免疫分析中具有广泛的应用,如酶联免疫吸附试验([/font][font=Calibri]ELISA[/font][font=宋体])、流式细胞术、免疫荧光染色等。通过荧光标记抗体与抗原的特异性结合,可以实现对目标抗原的高灵敏度、高特异性检测。例如,利用荧光标记抗体检测肿瘤标志物,有助于肿瘤的早期诊断和治疗监测。[/font][/font][font=宋体]细胞成像:荧光标记抗体在细胞成像中具有重要作用,可以用于观察细胞内特定抗原的表达情况,了解细胞的功能和行为。例如,利用荧光标记抗体对细胞膜抗原进行标记,可以观察细胞迁移、侵袭等行为。[/font][font=宋体]组织切片染色:荧光标记抗体也可用于组织切片染色,对病理组织中的特定抗原进行标记,有助于病理诊断和组织学研究。例如,利用荧光标记抗体对肿瘤组织进行染色,有助于肿瘤类型的鉴别和恶性程度的评估。[/font][font=宋体]药物筛选:荧光标记抗体在药物筛选中具有重要应用,可以用于药物作用靶点的检测和药物作用机制的研究。例如,利用荧光标记抗体对药物作用靶点进行标记,可以观察药物对靶点的影响,评估药物的疗效和安全性。[/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体]四、展望[/font][/b][font=宋体] [/font][font=宋体]随着荧光标记技术的不断发展,荧光标记抗体在灵敏度、特异性和可视化效果等方面得到了显著提升。同时,新型荧光物质的开发和制备也为荧光标记抗体的应用提供了更多选择。未来,随着荧光标记技术的进一步优化和多色荧光标记技术的发展,荧光标记抗体将在更多领域发挥重要作用,为生物学、医学和其他相关领域的研究提供有力支持。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]义翘神州提供[url=https://cn.sinobiological.com/services/immunofluorescence-service][b]免疫荧光检测服务[/b][/url]:[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/services/immunofluorescence-service[/font][/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体][font=宋体]义翘神州:蛋白与抗体的专业引领者,欢迎通过百度搜索[/font][font=宋体]“义翘神州”与我们取得联系。[/font][/font][/b]

  • 【分享】猪瘟抗体金标快速检测卡使用说明书

    猪瘟抗体金标快速检测卡使用说明书【产品用途】本检测卡采用免疫原理和胶体金免疫层析技术制成,用于快速检测猪血液或猪血清中的猪瘟抗体,为国内最新检测试剂。检测时间仅需20 分钟,操作简便、快速、结果准确、直观、灵敏度高、容易判定。当猪瘟抗体滴度达到能抵御猪瘟强毒攻击时,在检测区和对照区各形成一条色线,则视为阳性,抗体滴度越高,检测线颜色越深;当猪瘟抗体滴度达不到抵御猪瘟强毒攻击的抗体滴度时,只在对照区形成一条色线,则视为阴性。本卡附带一张金标试纸与正相间接血凝试验实物参照图,将检测线的颜色深浅与参照图对照,便可粗略估计样品抗体的滴度。【操作步骤】1.打开包装袋,取出检测卡平放在桌面上,并做好标记;2.在检测卡的加样孔内加入2 滴(50-100ul)血液或血清样品;3.在20 分钟内观察和记录结果,超过20 分钟的结果只能作为参考。【结果判定】见右图阳性:在检测区(T)和对照区(C) 各出现一条紫红色线。检测线颜色越深,表明猪瘟抗体滴度越高。弱阳性:在检测区(T)和对照区(C)各出现一条紫红色线,但检测线颜色很浅。阴性:只在对照区(C)出现一条紫红色线。无效:都不出现紫红色线或只在检测区(T)出现紫红色线,对照区(C)不出现紫红色线。【结果参考意义】1.强阳性结果说明猪瘟抗体滴度较高,暂时不必进行猪瘟疫苗的接种免疫;2.弱阳性结果说明猪瘟抗体滴度只达到抵抗猪瘟强毒攻击的最低保护水平,这时应该及时进行猪瘟疫苗接种,此时也是猪瘟疫苗接种的最佳时间;3.阴性结果说明机体内无猪瘟抗体或抗体水平低于抵抗猪瘟强毒攻击的最低保护水平,如果动物群体健康,应该及时进行猪瘟疫苗接种。如果动物群体已有个别动物出现疑似猪瘟病时,则可作为诊断猪瘟病的一个参考依据。【注意事项】1.请严格按照说明书要求进行操作和结果判定。2.检测样品可以是猪血液或血清。3.检测卡从铝箔袋取出后应尽快使用,尽量避免长时间放置在空气中,否则吸潮后将失效。4.检测环境应保持一定的湿度,避风和避免在过高温度下进行操作。5.检测卡在室温下保存,如在2-8℃冷藏,使用时需平衡至室温后方可打开包装进行检测操作。【包装规格】单头份铝箔袋包装(内含检测卡、吸管和干燥剂);50 头份/盒【贮藏和有效期】密封,在干燥处保存;在3-30℃下贮存,有效期为12 个月。

Instrument.com.cn Copyright©1999- 2023 ,All Rights Reserved版权所有,未经书面授权,页面内容不得以任何形式进行复制