狂犬病抗体检测

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狂犬病抗体检测相关的厂商

  • 武汉康德庆生物科技有限公司
    武汉康德庆生物科技有限公司共有医用消毒液、宠物猫犬伤创口清洗消毒液_犬伤冲洗器_狂犬病预防消毒液，体外诊断试剂（IVD）检测胶体金法、体外诊断试剂（IVD）检测酶联免疫法等多条生产线以及30多份产品检验报告。疫情期间，公司自主研发了包括新型冠状病毒（2019n-CoV）抗体检测试剂盒（胶体金法）、新型冠状病毒（2019n-CoV）唾液抗体检测试剂盒（胶体金法）在内的多项新冠产品并取得欧盟CIBG认证及国内商务部白名单等相关认证。 公司立足于武汉光谷生物医药产业园基地，坐拥面积4461平方米的独栋厂房。公司先后取得了中科院生物高科技创新基金、光谷3551人才计划基金、生物创新基金、湖北省科技型中小企业技术创新基金等无偿奖助，是湖北省上市“银种子”重点培养企业，也是高新技术企业。
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  • 宁波市鄞州佰瑞生物科技有限公司
    波佰瑞生物科技有限公司，是一家致力于食品安全抗体抗原、动物疾病抗体抗原、体外诊断抗体抗原的生产销售和服务的高科技生物技术公司。 目前，公司已经在抗体制备、体外诊断、食品安全检测和动物疾病检测领域取得一些成果，并初步实现了成果的工业化生产和商业化运作。我公司主要推出的原料产品有食品安全检测原料（瘦肉精类抗体抗原、三聚氰胺抗体抗原、磺胺类抗体抗原、氨基糖苷类抗体抗原、大环内脂类抗体抗原、喹诺酮类抗体抗原、青霉素类抗体抗原、四环素类抗体抗原、孔雀石绿类抗体抗原等）、动物疾病检测原料（猪瘟抗原抗体、猪伪狂犬抗原抗体、狂犬病抗体、猪口蹄疫抗原抗体、猪圆环抗原抗体、猪蓝耳抗原抗体等）、体外诊断类抗体原料（CysC、B2微球蛋白、RBP、CRP、乙肝类、HCG、肿瘤标志物类等）、二抗原料（羊抗鼠、羊抗兔等）等。 我公司与国内大部分食品安全检测试剂生产企业建立了长期合作伙伴关系。 公司倡导“以先进管理凝聚力量，以优势技术占领市场，以优质服务赢得客户”的理念，把客户的满意作为己任，我们期待与国内外同仁携手合作，用我们专业的产品为你提供专业的服务。
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  • 西安华凡科技有限公司（气体检测仪）
    西安华凡科技自主研发生产气体检测仪，主要生产：便携式气体检测仪，泵吸式气体检测仪，单点壁挂式气体检测仪，固定式气体检测仪，咨询：18392161232
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狂犬病抗体检测相关的仪器

  • 医用外伤冲洗器（狂犬病伤口冲洗专用）
    医用外伤冲洗器（狂犬病伤口冲洗专用）是一款专 用于动物咬伤、抓伤(犬咬伤、猫抓伤、家禽致伤、野生动物致伤)的伤口消毒冲洗设备,犬伤冲洗设备以”狂犬病伤口暴露处置指南和狂犬病伤口暴露处置规范”为框架结合临床研发而成,犬伤冲洗机具有自动冲洗和手动冲洗两种模式，自动冲洗模式下，设备接入专用犬伤弱碱性皮肤黏膜伤口冲洗液和流动清水和生理盐水，自动实现交替冲洗伤口，具有脉冲冲洗功能，可以彻底有效清楚伤口内嵌杂物和减少细菌病毒数量，设备 具有加热功能，保证冲洗液体温度和体温相近,减少伤口刺激，冲洗完成后自动使用生理盐水将伤口冲洗干净，整个冲洗流程不少于15分钟，冲洗完毕后设备自动打印冲洗凭条，由患者和医生同时签字留档保存。犬伤冲洗机优势： ①整套控制系统以国家规范为框架，以伤患的安全为目标，准确的控制，一键开启即可自动完成一次标准的犬伤冲洗流程，甚至轻伤患完全可轻松完成自助冲洗。 ②整个冲洗过程中水温、水压、益涟茗&trade 弱碱性皮肤黏膜消毒剂与清水的交替冲洗、生理盐水的冲洗都会自动完成 ③结束时的小票打印等自动完成，并会作出语音提示，无需做其他任何操作 ④针对重伤患、大面积撕裂伤患等特有手动功能，专业人员可根据情况选择优的冲洗方式（手动模式同样有程序辅助，极大降低医护人员工作负担）。 ⑤卫生部《狂犬病暴露预防处置工作规范》硬性要求，深创必须使用高频脉冲器械进行灌冲冲洗 ⑥压力水柱结合间歇性的大量水泡瞬间爆裂的冲击，共同作用在冲洗创面，使创口组织规律的收缩舒张，使创面缝隙中的破碎组织、杂质、病毒、细菌被翻动冲出，显著降低患者疼痛阈值，不破坏健康组织，冲洗工作安全高效。 ⑦脉动压力zui大压强56kPa,频率每分钟900~1800次，安全快速，不会造成清创部位组织水肿”产品特点1、能进行自动、手动和自手结合模式的清洗。2、有专门的生理盐水冲洗功能，符合国家狂犬病暴露预防处置工作相关要求。3、可手动或自动打印按“狂犬病暴露预防处置工作规范”的冲洗结果单。4、能按操作者及实际需要设置自动模式冲洗周期、冲洗时间、加热温度及启动加热的流量。具有狂犬病毒杀灭双机构认证:军科院军事医学研究院兽医研究所实验室狂犬病毒灭活报告中关村医药检验认证机构(MA认证)狂犬病毒灭活实验报告在说明书[杀灭微生物类别]中写入狂犬病毒:国内将狂犬病毒写入杀灭范围的消毒产品。近年来，随着我国宠物饲养量的快速增加，动物致伤尤其被犬、猫伤害的人数不断增加，再加上运动、野外作业等意外产生的外伤，污染伤口清创作为外伤处置第一步，也就显得尤为重要；处理不慎增加了感染狂犬病、破伤风的风险！一. 我国是受动物致伤（狂犬病）危害最为严重的国家之一，仅次于印度，居全球第二位，狂犬病一直位于我国各类传染病报告死亡数的前三位。二. 狂犬病不但严重威胁人民群众的生命安全，而且容易造成严重的心理影响和沉重的经济负担，不利于社会和谐发展，因而狂犬病的防治显得尤为重要。处置规范要求：卫生部2009版《预防处置规范》：第 7 条 伤口冲洗:用20%的肥皂水(或者其他弱碱性清洁剂) 和一定压力的流动清水交替彻底清洗、冲洗所有咬伤和抓伤处至少15分钟......较深伤口冲洗时,用注射器或者高压脉冲器械伸入伤口深部进行灌注清洗, 做到全面彻底。 国家疾控2016版 《技术指南》：2、暴露后处置:伤口冲洗:用肥皂水(或其他弱碱性清洗剂)和一定 压力的流动清水交替清洗咬伤和抓伤的每处伤口至少 15 分钟。 如条件允许,建议使用狂犬病专业清洗设备和专用清洗剂对伤口内部进行冲洗。
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    厂商： 河南希彤医疗器械有限公司
    品牌： Anasys
    型号： Q18339243155
    价格： 9500元
  • 犬伤狂犬病清洗消毒冲洗器
    犬伤狂犬病清洗消毒冲洗器，详询：。动物抓咬伤后，给我们造成了严重的伤害。清洗、消除皮肤及伤口上的狂犬病毒，让我们避免第二次伤害，远离恐惧与风险！康德庆生物的犬伤狂犬病清洗消毒冲洗器适用于被动物抓、咬伤及被舔伤口等部位清洗与消毒（包括狂犬病毒的冲洗与消毒） 《狂犬病暴露预防处置工作规范》（2009年）第七条伤口处理包括底冲洗和消毒处理。局部伤口处理越早越好。伤口冲洗:用20％的肥水(或者其他弱碱性清洁剂)和一定压力的流动清水交替初底清洗、冲洗所有咬伤和抓伤处至少15分钟。然后用生理盐水(也可用清水代替)将伤口洗净，之后用无菌脱脂棉将伤口处残留液吸尽，避兔在仿口处残留肥皂水或者清洁剂。较深伤口冲洗时，用注射器或者高压脉冲器械伸入伤口深部进行灌注清洗，做到全面彻底。 《狂犬病预防控制技术指南》中疾控传防发(2016)10号暴露后处置有两个主要目标，一是预防狂犬病的发生，二是预防伤口发生继发细菌感染，促进伤口愈合和功能恢复。伤口冲洗：用肥皂水(或其他弱碱性清洗剂)和一定压力的流动清水交替清洗咬伤和抓伤的每处伤口至少15分钟。如条件允许，建议使用狂犬病专业清洗设备和专用清洗剂对伤口内部进行冲洗。之后用生理盐水冲洗伤口以避免肥皂液或其他清洗残留。 犬伤清洗流程:清水一一专用清洗液一一生理盐水康德庆犬伤狂犬病清洗消毒冲洗器（即犬动物咬伤清洗消毒液）清洗、消毒二合一，适用于被犬、猫等宠物抓咬伤后的皮肤创面狂犬病毒的清洗和消毒，使用方便。 康德庆生物的犬伤狂犬病清洗消毒冲洗器能灭活狂犬病毒降低狂犬病发病几率杀灭伤口常见致病菌防止感染，促进伤口愈合对人体安全无毒、无刺激作用 使用方法:1、先用清洗瓶清洗2、再用消毒瓶消毒
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    厂商： 武汉康德庆生物科技有限公司
    品牌： 康德庆/kdq
    型号： kdq
    价格： 面议
  • 动物抗体检测仪 400-860-5168转3452
    CSY-E96KT抗体检测仪、动物抗体检测仪采用固相酶联免疫吸附ELISA的原理,即酶联免疫法进行分析检测，抗体检测仪、动物抗体检测仪广发运用于医疗防疫、疫病防疫以及抗体检测、动物抗体检分析技术参数：☆波长范围:300nm-1000nm☆波长准确度:±2nm☆吸光度范围: 0.000~4.000ABS☆分辨率 :0.001Abs☆稳定性 : ±0.001A/hr☆透射比重复性: ≤0.5%T☆光源 : 进口LED☆样品池 : 微孔板★抗体检测仪动物抗体检测仪96通道设计，9通道光路系统，其中8路光源用于96孔板的光路信号检测。另外一道光路用于校准光源，作光源系统的补偿及光源工作情况的监测。★准确性高：采用进口特制LED光源，具有良好的波长准确度和重复性，全面提高检测结果的 准确性。★抗体检测仪动物抗体检测仪自动化程度高：仪器自动诊断系统故障、波长校准：自动校准★仪器使用寿命长：采用LED光源，自动开关节能设计，非连续工作模式。使用寿命可达10年★仪器自动硬盘存储测量数据。内置微型热敏打印机，终身无需更换色带，可实时打 印检测结果检测报告可打印样品名称，检测日期 ，检测单位。更能体现 检测结果的权威性，并利于公示★抗体检测仪动物抗体检测仪内置振荡功能，可根据需要编辑振荡形式，促使终止液充分混匀，保证结果的可靠性。★ 内置以太网卡接口，可实现无线传输数据，无线上网，收发邮件等★windows电脑操作程序，彩色液晶触摸屏操作，操作简捷方便★抗体检测仪动物抗体检测仪具有查询、打印、汇总、报表等功能，可直接输出检测结果，软件终身免费升级★配备RS-232接口和USB口，可通过计算机进行数据处理、统计分析以及结果上传。如选配本公司食品安全监控网络软件，可根据用户要求组建省、市、地、县等各级网络。
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    厂商： 深圳市芬析仪器制造有限公司
    品牌： 深芬仪器/CSY
    型号： CSY-E96KT动物抗体检测仪
    价格： 3.6万元
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狂犬病抗体检测相关的资讯

  • 西藏检验检疫局技术中心通过猪伪狂犬病血清抗体检测能力验证
    3月17日讯，近日，西藏检验检疫局技术中心收到国家认监委颁发《能力验证合格实验室证书》。根据该证书，西藏检验检疫局技术中心参加的由国家认监委组织开展的猪伪狂犬病血清抗体ELISA试验(CNCA-09-A01-26)能力验证项目，结果为满意。这是西藏检验检疫局在重大动物疫病检测方面首次通过国家认监委组织的能力验证，标志着西藏检验检疫局已具备了检测猪伪狂犬病血清抗体的能力和水平。 　　猪伪狂犬病是由伪狂犬病病毒引起的多种家畜和野生动物的一种高度接触性、急性传染病。猪是伪狂犬病的唯一自然宿主，对其危害大。 往往是分娩高峰的母猪会首先发病，窝发病率可达100%。可致妊娠母猪流产，产死胎及胎儿干尸化。对初生仔猪则引起神经症状，出现运动失调，麻痹，衰竭死亡，病死率100%。成年猪多呈隐性感染，但可引起呼吸道症状。
    时间： 2010-03-18
    作者： 丰收秋天
  • 10万瓶！长春生物制药企业人用狂犬病疫苗再现问题
    p style=" text-indent: 2em text-align: justify " 近日,中国食品药品检定研究院发布公示，不予签发两家企业生产的人用狂犬病疫苗，合计约10万瓶。不予签发意味着该产品无法获得上市许可。两家被拒企业均为长春地区的生物制药企业。 /p p style=" text-indent: 2em text-align: justify " 本报讯（记者 赵新培）继长生生物疫苗事件之后，位于长春的生物制药企业的人用狂犬病疫苗再次出现问题。中国食品药品检定研究院（以下简称“中检院”）11月21日发布公示，不予签发两家企业生产的人用狂犬病疫苗，合计约10万瓶。据了解，中检院是专门负责对疫苗制品开展强制检验的批签发机构。 /p p style=" text-indent: 2em text-align: justify " 在中检院官方网站公告通知栏内可以看到，最新一期“中检院生物制品不予批签发信息公示表”显示，有两个被拒签发的产品，一个产品名称为“人用狂犬病疫苗(Vero细胞)”，批签发量为4.35万瓶，生产企业为吉林迈丰生物药业有限公司。另一个产品名称为“冻干人用狂犬病疫苗(Vero细胞) ”，批签发量为5.72万瓶，生产厂家为长春卓谊生物股份有限公司。据了解，不予签发意味着该产品无法获得上市许可。 /p p style=" text-indent: 2em text-align: justify " 引发舆论关注的是，两家被拒企业均为长春地区的生物制药企业。公开信息显示，吉林迈丰生物药业有限公司位于吉林省长春市，生产地点在高新技术开发区，主要产品为片剂、小容量注射剂、冻干粉针剂、疫苗(人用狂犬病纯化疫苗)。2007年，长春百克出资4000万元收购了吉林迈丰生物药业有限公司。2008年6月，长春百克生产的水痘减毒活疫苗正式投放市场。 /p p style=" text-indent: 2em text-align: justify " 长春卓谊生物股份有限公司位于长春市双阳经济开发区，是浙江赛尔康宁生物科技有限公司投资的吉林省重点扶持疫苗生产企业。该公司目前批准生产的生物制品主要是冻干人用狂犬病疫苗（Vero细胞），公司于2016年末顺利通过二合一检查获得注册批件和GMP证书，2017年1月正式投产。公司现有生产车间占地面积约5700平方米，累计投资3亿元人民币，最大年产量100万人份，二期车间已于2017年年末竣工，生产能力可达到400万人份。 /p p style=" text-indent: 2em text-align: justify " 新闻背景 /p p style=" text-indent: 2em text-align: justify " 长生生物被强制退市 /p p style=" text-indent: 2em text-align: justify " 2018年7月15日，国家药品监督管理局发布通告指出，长春长生生物科技有限公司冻干人用狂犬病疫苗生产存在记录造假等行为。这是长生生物自2017年11月份被发现百白破疫苗效价指标不符合规定后不到一年再曝疫苗质量问题。 /p p style=" text-indent: 2em text-align: justify " 国家药监局通报，该企业编造生产记录和产品检验记录，随意变更工艺参数和设备。上述行为严重违反了《中华人民共和国药品管理法》、《药品生产质量管理规范》有关规定，国家药监局已责令企业停止生产，收回药品GMP证书，召回尚未使用的狂犬病疫苗。 /p p style=" text-indent: 2em text-align: justify " 7月29日，长春新区公安分局以涉嫌生产、销售劣药罪，对长春长生生物科技有限责任公司董事长高某芳等18名犯罪嫌疑人向检察机关提请批准逮捕。 /p p style=" text-indent: 2em text-align: justify " 10月16日，长生生物科技股份有限公司的主要子公司因违法违规生产疫苗，被国家药品监督管理部门作出吊销药品生产许可证的行政处罚决定，并处罚没款91亿元。 /p p style=" text-indent: 2em text-align: justify " 11月17日，深交所启动对长生生物重大违法强制退市机制。深交所表示，2018年长生生物主要子公司存在涉及国家安全、公共安全、生态安全、生产安全和公众健康安全等领域的重大违法行为。根据证监会相关规定，深交所启动对长生生物重大违法退市机制。 /p
    时间： 2018-11-23
    作者： 李哲
  • 中国学者领衔！创新抗体检测，有助快速诊断神经免疫疾病
    9月5日，国际神经病学顶级期刊JAMA Neurology（影响因子29）在线发表了国际创新技术-免疫斑点法（IDoT）检测水通道蛋白（AQP4）抗体的研究论著，为快速诊断神经免疫疾病增添助力。这是目前国内神经免疫抗体检测领域首个发表于该期刊的研究，在国际神经免疫病研究领域发出了中国声音，也体现了国际同行对中国开展国际临床合作研究的认可。该研究由中山大学附属第三医院（以下简称“中山三院”）、福建医科大学附属第一医院、陕西师范大学联合组成的中国团队领衔，其中中山三院邱伟、韩国国立癌症中心（NCC）Ho Jin Kim为共同通讯作者，福建医科大学附属第一医院付莹、毕锦，陕西师范大学闫亚平以及中山三院孙晓渤为共同第一作者。视神经脊髓炎视谱疾病在亚洲多见视神经脊髓炎视谱疾病（NMOSD）是神经免疫病的一种，在亚洲女性中发病率较高。NMOSD会反复发作视神经炎和脊髓炎，最终造成神经功能障碍，给家庭、社会造成负担。目前，NMOSD诊断依赖外周血水通道蛋白4（AQP4-IgG）抗体检测，因此，基于细胞表达的抗体检测方法（CBA）于2015年被国际NMOSD诊断指南推荐，作为当今AQP4-IgG抗体检测的金标准。然而，CBA法耗时3-7天，且需要特殊实验室和技术人员等，大大限制了CBA法的广泛使用，尤其在一些NMOSD高发、但医疗条件欠发达的地域；并且，目前商品化的检测试剂盒仍依赖国外进口，检测成本极高。解决传统AQP4-IgG抗体检测的瓶颈，是全球神经免疫学者关注的重点，同时中国人作为NMOSD高发人群，我国需要具有自主知识产权的可靠检测方法。面对临床需求，中山三院、福建附一、陕西师大与国际学者组成联合攻关团队，从临床问题出发，依托中国南方NMOSD临床队列，开展基础-临床结合的转化研究，共同进行抗体检测新技术的研发与验证。研究过程中，陕西师大闫亚平团队首先利用表达AQP4的细胞提取的膜碎片（带有完整AQP4空间构象）作为抗原底物，创建一种高效、易操作的AQP4-IgG检测新技术--IDoT法。随后，邱伟、孙晓渤团队以及福建医科大学附属第一医院付莹团队，联合韩国国立癌症中心（NCC）Ho Jin Kim团队自主设计，开展为期3年（2020年5月-2023年2月）的前瞻性、病例-对照、国际多中心交叉验证研究。该研究在中国（广东、福建）和韩国共检测836例患者的血清样本。结果显示，与传统的金标准CBA法对比（活细胞CBA法或者固定CBA法等），IDoT法的抗体检测性能与CBA相当，诊断性研究结果Kappa系数为98.0%（400例患者）；436例验证者，包括275例其他疾病队列（风湿免疫疾病等）、57例NMOSD前瞻性随访队列、31例国内交叉验证队列、73例韩国神经免疫疾病队列交叉验证（NMOSD、MOGAD等），整体验证队列结果中，仅2例与CBA检测不一致。因此，IDoT总体敏感性为99.4%（95%CI:97.8%- 99.9%），特异性为99.2%（95%CI:98.0%- 99.8%）。新方法有望降低检测成本该研究证明，IDoT法与目前金标准CBA法具有相同检测效能。但IDoT法高效、易操作，可实现在普通实验室、一般技术人员、广泛人群中进行AQP4-IgG抗体检测，在快速筛查中具有更广泛的应用前景，可实现NMOSD患者早诊断早治疗，同时为资源较少和经验不足的基层医院以及其他经济欠发达国家提供一种可选择方法，最终实现提高AQP4-IgG抗体检测率。该研究成果是我国的自主研发成果，有效解决国内神经免疫抗体检测的“卡脖子”问题，也填补了国际上快速检测AQP4-IgG抗体领域的空白，对于推动全球NMOSD的早期精确诊断具有重要意义。同时，我国对该成果自主知识产权的拥有，未来将大大降低NMOSD诊断成本，促进患者群体早诊断早干预，减轻家庭与国家的经济负担。JMMA Neurology 在全球享有很高的声誉和影响力，研究论文得到了JMMA Neurology 杂志多个审稿人的高度评价，认为 “这项非常详实的研究将引起神经科医生的极大兴趣，克服在不同医疗条件下NMOSD抗体检测的障碍”、“该研究发现将对NMOSD抗体检测领域产生重大影响”、“该研究是神经免疫抗体检测技术的重大进步”。
    时间： 2023-09-08
    作者： dahua1981
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  • 人抗狂犬病毒抗体(anti-RV)检测试剂盒
    人抗狂犬病毒抗体(anti-RV)检测试剂盒人抗狂犬病毒抗体(anti-RV)检测试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。检测范围： 规格：96T/48T使用目的：本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中人抗狂犬病毒抗体(anti-RV)含量。实 验 原 理 本试剂盒应用双抗体夹心酶标免疫分析法测定标本中人抗狂犬病毒抗体(anti-RV)水平。用纯化的抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入人抗狂犬病毒抗体(anti-RV)抗原、生物素化的人抗狂犬病毒抗体(anti-RV)抗体、HRP标记的亲和素，经过彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的人抗狂犬病毒抗体(anti-RV)呈正相关。 使用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度
  • 人狂犬病毒抗体（anti-RV）检测试剂盒
    人狂犬病毒抗体（anti-RV）检测试剂盒人狂犬病毒抗体（anti-RV）检测试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。检测范围： 规格：96T/48T使用目的：本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中人狂犬病毒抗体（anti-RV）含量。实 验 原 理 本试剂盒应用双抗体夹心酶标免疫分析法测定标本中人狂犬病毒抗体（anti-RV）水平。用纯化的抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入人狂犬病毒抗体（anti-RV）抗原、生物素化的人狂犬病毒抗体（anti-RV）抗体、HRP标记的亲和素，经过彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的人狂犬病毒抗体（anti-RV）呈正相关。 使用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度
  • 人狂犬病毒抗体（anti-RV）ELISA试剂盒
    人狂犬病毒抗体（anti-RV）ELISA试剂盒中文名称 人狂犬病毒抗体（anti-RV）ELISA试剂盒英文名称 Human rabies virus antibody (anti-RV) ELISA Kit 规格 96T/48T 生 产 商 进口原装/分装 产品介绍 实 验 原 理 本试剂盒应用双抗体夹心酶标免疫分析法测定标本中人狂犬病毒抗体（anti-RV）水平。用纯化的抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入人狂犬病毒抗体（anti-RV）抗原、生物素化的人狂犬病毒抗体（anti-RV）抗体、HRP标记的亲和素，经过彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的人狂犬病毒抗体（anti-RV）呈正相关。 使用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度。
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  • 动物疫病诊断仪主要检测什么

    动物疫病诊断仪主要检测什么

    [size=16px]动物疫病诊断仪主要检测什么动物疫病诊断仪主要检测以下几种：猪弓形体IgG抗体检测：用于检测弓形虫抗体。猪蓝耳病ELISA诊断试剂盒：用于检测猪蓝耳病病毒抗体。猪伪狂犬病ELISA抗体检测诊断试剂盒：用于伪狂犬病毒抗体检测。猪瘟ELISA诊断试剂盒：用于检测猪瘟抗体。猪细小病毒ELISA诊断试剂盒：用于检测细小病毒抗体。此外，动物疫病诊断仪还可以检测黄曲霉毒素B1、猪伪狂犬病毒、猪口蹄疫3ABC蛋白、猪口蹄疫病毒IgG、猪布鲁氏杆菌病、猪传染性胃肠炎等。[img=,690,690]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/11/202311290939024874_272_6098850_3.jpg!w690x690.jpg[/img][/size]

  • 【原创大赛】猪伪狂犬病毒荧光定量PCR检测方法的模块化构建及实践

    【原创大赛】猪伪狂犬病毒荧光定量PCR检测方法的模块化构建及实践

    [color=black]猪伪狂犬病毒荧光定量[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]检测方法的模块化构建及实践[/color][color=black]1 前言[/color][color=black]猪伪狂犬病是由猪伪狂犬病病毒（Pseudo rabies virus，PRV）引起的猪的急性传染病。该病在猪呈暴发性流行。可引起妊娠母猪流产、死胎，公猪不育，新生仔猪大量死亡，育肥猪呼吸困难、生长停滞等，是危害全球养猪业的重大传染病之一。[/color][color=black]伪狂犬病毒属于疱疹病毒科(Herpesviridae)、猪疱疹病毒属，病毒粒子为圆形，直径150～180nm，核衣壳直径为105～110nm。病毒粒子的最外层是病毒囊膜，它是由宿主细胞衍生而来的脂质双层结构。囊膜表面有长约8～10nm呈放射状排列的纤突。[/color][color=black]伪狂犬病毒是疱疹病毒科中抵抗力较强的一种。在37℃下可存活7h，8℃可存活46天，而在25℃干草、树枝、食物上可存活10～30天，但短期保存病毒时，4℃较-20℃冻结保存更好。病毒在pH4～pH9之间保持稳定。5%石炭酸经2min灭活，但0.5%石炭酸处理32天后仍具有感染性。0.5%～1%氢氧化钠迅速使其灭活。对乙醚、氯仿等脂溶剂以及福尔马林和紫外线照射敏感。[/color][color=black]伪狂犬病毒在全世界广泛分布。伪狂犬病自然发生于猪、牛、绵羊、犬和猫，另外，多种野生动物、肉食动物也易感。水貂、雪貂因饲喂含伪狂犬病毒的猪下脚料也可引起[/color][url=https://baike.baidu.com/item/%E4%BC%AA%E7%8B%82%E7%8A%AC%E7%97%85%22 \t %22_blank][color=black]伪狂犬病[/color][/url][color=black]的暴发。[/color][color=black]猪是伪狂犬病毒的贮存宿主，病猪、带毒猪以及带毒鼠类为本病重要传染源。不少学者认为，其他动物感染本病与接触猪、鼠有关。[/color][color=black]在猪场，伪狂犬病毒主要通过已感染猪排毒而传给健康猪，另外，被伪狂犬病毒污染的工作人员和器具在传播中起着重要的作用。而空气传播则是伪狂犬病毒扩散的最主要途径，但到底能传播多远还不清楚。人们还发现在邻近有伪狂犬病发生的猪场周围放牧的[/color][url=https://baike.baidu.com/item/%E7%89%9B%E7%BE%A4%22 \t %22_blank][color=black]牛群[/color][/url][color=black]也能发病，在这种情况下，空气传播是惟一可能的途径。在猪群中，病毒主要通过鼻分泌物传播，另外，乳汁和精液也是可能的传播方式。[/color][color=black]除猪以外的其他动物感染伪狂犬病毒后，其结果都是死亡。猪发生伪狂犬病后，其临诊症状因日龄而异，成年猪一般呈隐性感染，怀孕母猪可导致流产、死胎、木乃伊胎和种猪不育等综合症候群。15日龄以内的仔猪发病死亡率可达100%，断奶仔猪发病率可达40%，死亡率20%左右；对成年肥猪可引起生长停滞、增重缓慢等。[/color][color=black]伪狂犬病的发生具有一定的季节性，多发生在寒冷的季节，但其他季节也有发生。[/color][color=black]新生仔猪感染伪狂犬病毒会引起大量死亡，临诊上新生仔猪第1天表现正常，从第2天开始发病，3～5天内是死亡高峰期，有的整窝死光。同时，发病仔猪表现出明显的神经症状、昏睡、呜叫、呕吐、拉稀，一旦发病，1～2日内死亡。剖检主要是肾脏布满针尖样出血点，有时见到肺水肿、脑膜表面充血、出血。15日龄以内的仔猪感染本病者，病情极严重，发病死亡率可达100%。仔猪突然发病，体温上升达41℃以上，精神极度委顿，发抖，运动不协调，痉挛，呕吐，腹泻，极少康复。断奶仔猪感染伪狂犬病毒，发病率在20%～40%左右，死亡率在10%～20%左右，主要表现为神经症状、拉稀、呕吐等。成年猪一般为隐性感染，若有症状也很轻微，易于恢复。主要表现为发热、精神沉郁，有些病猪呕吐、咳嗽，一般于4～8天内完全恢复。怀孕母猪可发生流产、产木乃伊胎儿或死胎，其中以死胎为主无论是头胎母猪还是经产母猪都发病，而且没有严格的季节性，但以寒冷季节即冬末春初多发。[/color][color=black]伪狂犬病的另一发病特点是表现为种猪不育症。近几年发现有的猪场春季暴发伪狂犬病，出现死胎或断奶仔猪患伪狂犬病后，紧接着下半年母猪配不上种，返情率高达90%，有反复配种数次都屡配不上的。此外，公猪感染伪狂犬病毒后，表现出睾丸肿胀、萎缩，丧失种用能力。[/color][color=black]由于猪伪狂犬病毒可以通过精液传播，一旦公猪感染伪狂犬，则在短时间内可快速导致整个猪场母猪群感染该病。而猪伪狂犬病又可通过乳汁传播，故感染伪狂犬病的母猪又可快速导致整个猪场的仔猪感染该病。因此，非常有必要对种猪（公猪、母猪）进行猪伪狂犬病进行病毒核酸监测，并实施猪伪狂犬病实施净化措施。[/color][color=black]2 模块化检测方法思路[/color][color=black]总体思路是：将动物疫病荧光定量[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]检测分为三个模块，核酸提取采用DNA/RNA共提试剂，核酸扩增采用预混液+引物探针方式，质控品利用抗原或商品化疫苗自制。具体思路如下：[/color][color=black]——核酸提取采用DNA/RNA共提试剂；[/color][color=black]——引物探针严格按照标准方法，委托生物工程公司合成；[/color][color=black]——反应体系中其他成分，采购商品化q[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]预混液；[/color][color=black]——质控品：阳性对照采用商品化疫苗，测定结果后按一定比例稀释，保存备用。[/color][color=black]——反应体系：设为20μL，其中包含：预混液（2×）10μL、ROX 0.4μL为固定量，引物探针加入量根据检测标准中的终浓度予以换算，加灭菌水补足18μL，RNA模板为2μL；[/color][color=black]——反应条件首先按照标准中的条件开展摸索，如达到预期效果则予以固定；如效果不佳则参照预混液及引物探针推荐条件进行适当调整。[/color][color=black]3 材料和方法[/color][color=black]3.1 病毒[/color][color=black]猪伪狂犬病毒疫苗。[/color][color=black]3.2 试剂[/color][color=black]DNA/RNA共提试剂盒：FastPure Viral DNA/RNA Mini Kit试剂盒，南京诺维赞生产；[/color][color=black]q[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]预混液：AceQ Universal U+ Probe Master Mix V2，南京诺维赞生产。[/color][color=black]3.3 引物探针[/color][color=black]按照GB/T 35911-2018 《伪狂犬病病毒荧光[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]检测方法》提供的序列，委托上海生工合成，引物稀释成10μmol/L、探针稀释成5μmol/L，分装成小包装冷冻保存备用。具体序列如下：[/color][color=black]检测gH基因引物探针序列：[/color][color=black]正向引物：5’-ACGCTCGGCTTCCTCTCC-3’[/color][color=black]反向引物：5’-GGTAGTCGTCGCTCTCGTG-3’[/color][color=black]探 针：5’-FAM-TCGCGCATCGTCTGGTGCAT-BHQ1 -3’[/color][color=black]检测gE基因引物探针序列：[/color][color=black]正向引物：5’-GCTGTACGTGCTCGTGAT-3’[/color][color=black]反向引物：5’-TCAGCTCCTTGATGACCGTGA-3’[/color][color=black]探 针：5’-VIC-CACAACGGCCACGTCGCCACCTG-BHQ1 -3’[/color][color=black]3.4 反应体系[/color][color=black]根据GB/T 35911-2018 《伪狂犬病病毒荧光[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]检测方法》所载反应体系，按照终浓度一致原则予以转化。具体转换方法：[/color][color=black]——反应体系总体积设定为20μL；[/color][color=black]——将标准中反应体系的10×[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url] Buffer、MgCl2、dNTPs、Taq酶等成分转换为q[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]预混液10μL（推荐量）；[/color][color=black]——因使用ABI7500荧光[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]仪，故在体系中加入ROX 0.4μL；[/color][color=black]——标准中gH基因正向引物、反向引物、探针的终浓度分别为0.2μmol/L、0.2μmol/L和0.2μmol/L，gE基因正向引物、反向引物、探针的终浓度分别为0.2μmol/L、0.2μmol/L和0.12μmol/L，故在修改后的体系中加入量为0.4μL、0.4μL、0.8μL和0.4μL、0.4μL、0.48μL；[/color][color=black]——总DNA加入量修改为2μL（根据经验该加入量已经足够）；[/color][color=black]——根据上述各成分用量，补充体积的无核酸酶水修改为4.72μL。[/color][table][tr][td][color=black]标准方法[/color][/td][td][/td][td][/td][td][color=black]修改方法[/color][/td][td][/td][/tr][tr][td][color=black]10Χ [url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url] Buffer[/color][/td][td][align=center][color=black]5.0[/color][/align][/td][td][/td][td][color=black]2Χ q[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]预混液[/color][/td][td][align=center][color=black]10[/color][/align][/td][/tr][tr][td][color=black]Taq酶(5U/μL)[/color][/td][td][align=center][color=black]2.0[/color][/align][/td][td][/td][td][color=black]ROX[/color][/td][td][align=center][color=black]0.4[/color][/align][/td][/tr][tr][td][color=black]dNTPs(100mmol/L)[/color][/td][td][align=center][color=black]1.5[/color][/align][/td][td][/td][td][color=black]gH基因正向引物(10μmol/L)[/color][/td][td][align=center][color=black]0.4[/color][/align][/td][/tr][tr][td][color=black]MgCl2[/color][/td][td][align=center][color=black]0.25[/color][/align][/td][td][/td][td][color=black]gH基因反向引物(10μmol/L)[/color][/td][td][align=center][color=black]0.4[/color][/align][/td][/tr][tr][td][color=black]gH基因正向引物(10μmol/L)[/color][/td][td][align=center][color=black]1.0[/color][/align][/td][td][/td][td][color=black]gH基因探针(5μmol/L)[/color][/td][td][align=center][color=black]0.8[/color][/align][/td][/tr][tr][td][color=black]gH基因反向引物(10μmol/L)[/color][/td][td][align=center][color=black]1.0[/color][/align][/td][td][/td][td][color=black]gE基因正向引物(10μmol/L)[/color][/td][td][align=center][color=black]0.4[/color][/align][/td][/tr][tr][td][color=black]gH基因探针(10μmol/L)[/color][/td][td][align=center][color=black]1.0[/color][/align][/td][td][/td][td][color=black]gE基因反向引物(10μmol/L)[/color][/td][td][align=center][color=black]0.4[/color][/align][/td][/tr][tr][td][color=black]gE基因正向引物(10μmol/L)[/color][/td][td][align=center][color=black]1.0[/color][/align][/td][td][/td][td][color=black]gE基因探针(5μmol/L)[/color][/td][td][align=center][color=black]0.48[/color][/align][/td][/tr][tr][td][color=black]gE基因反向引物(10μmol/L)[/color][/td][td][align=center][color=black]1.0[/color][/align][/td][td][/td][td][color=black]无核酸酶水[/color][/td][td][align=center][color=black]4.72[/color][/align][/td][/tr][tr][td][color=black]gE基因探针(10μmol/L)[/color][/td][td][align=center][color=black]0.6[/color][/align][/td][td][/td][td][color=black]总DNA[/color][/td][td][align=center][color=black]2.0[/color][/align][/td][/tr][tr][td][color=black]无核酸酶水[/color][/td][td][align=center][color=black]23.95[/color][/align][/td][td][/td][td][color=black]总体积[/color][/td][td][align=center][color=black]20[/color][/align][/td][/tr][tr][td][color=black]内参质粒[/color][/td][td][align=center][color=black]0.2[/color][/align][/td][td][/td][td][/td][td][/td][/tr][tr][td][color=black]总DNA[/color][/td][td][align=center][color=black]10[/color][/align][/td][td][/td][td][/td][td][/td][/tr][tr][td][color=black]总体积[/color][/td][td][align=center][color=black]50[/color][/align][/td][td][/td][td][/td][td][/td][/tr][/table][color=black]3.5 反应条件[/color][color=black]参照GB/T 35911-2018 《伪狂犬病病毒荧光[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]检测方法》推荐的扩增程序，结合ABI7500荧光采集时间不能少于34s的要求，进行预试验。扩增程序如下：[/color][color=black]50℃2min →95℃2min →（95℃15s → 60℃34s）*40[/color][color=black]如扩增结果理想，则不做修改直接采纳，否则进行适当调整。[/color][color=black]4 试验结果[/color][color=black]对猪伪狂犬病毒疫苗（BK61株）进行核酸检测，结果较理想。扩增曲线如下：[/color][align=center][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2020/09/202009251442207825_7042_1627156_3.jpg[/img][/align][color=black]注：因猪伪狂犬疫苗BK61株属于gE基因缺失苗，故gE基因未能检出。[/color][color=black]5 阳性质控的制备[/color][color=black]根据GB/T 35911-2018 《伪狂犬病病毒荧光[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]检测方法》规定，阳性对照应Ct≤30。对猪伪狂犬病毒疫苗（BK61株）适当稀释后进行再次检测，结果如下：[/color][table][tr][td][align=center][color=black]稀释倍数[/color][/align][/td][td][align=center][color=black]1:10^0[/color][/align][/td][td][align=center][color=black]1:10^1[/color][/align][/td][td][align=center][color=black]1:10^2[/color][/align][/td][td][align=center][color=black]1:10^3[/color][/align][/td][/tr][tr][td][align=center][color=black]PRV疫苗（BK61株）[/color][/align][/td][td][align=center][color=black]19.12[/color][/align][/td][td][align=center][color=black]22.58[/color][/align][/td][td][align=center][color=black]25.90[/color][/align][/td][td][align=center][color=black]29.58[/color][/align][/td][/tr][/table][color=black]经综合判定，最后采用猪伪狂犬病毒疫苗（BK61株）作1: 10^2稀释，分装为200μL/管作为阳性质控，Ct值约26，-70℃冻存备用。[/color][color=black]6 讨论[/color][color=black]6.1 检测工作更加方便高效[/color][color=black]一是在核酸提取环节采用了DNA/RNA共提试剂，待检样品经一次提取核酸，除可应用于伪狂犬病毒、圆环病毒、非洲猪瘟等DNA病毒项目检测外，还可应用于口蹄疫、蓝耳病等RNA病毒项目检测；[/color][color=black]二是由于实验室储备了足够量的q[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]预混液，在开展检测时，不必担心部分检测量较少的项目由于试剂组分不足而罢工事件的发生；[/color][color=black]三是由于q[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]预混液适用于多数DNA病毒项目的检测，在检测任务发生重大变化时，可以方便地调整检测项目，不必担心试剂不足或浪费情况的发生。[/color][color=black]6.2 阳性质控品制备方便[/color][color=black]猪伪狂犬病毒疫苗是较常用的动物免疫用疫苗，只需对疫苗进行含量测定，进行一定比例的稀释即可作为实验室内部的阳性质控品。[/color][color=black]6.3 适用性有待进一步验证[/color][color=black]尽管在构建新方法时，对适用性进行了验证，但由于缺少伪狂犬全基因疫苗，因此对于gE基因的适用性未对进行验证。对于其他毒株，尤其是较新型的变异株是否有效，尚有待进一步观察和验证。[/color][color=black]6.4 严格依法依规操作[/color][color=black]如果有关法律法规或上级有关部门出台政策，要求采用获批准的成品试剂盒用于检测，则实验室必须及时停止自建方法的使用。[/color]

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