菌落技术分析仪

我们想买一台菌落计数仪,查了一下,有SC-2010型系列全自动彩色菌落计数仪和SCAN-500型自动影像分析菌落计数仪以及手动菌落计数器等.有没有谁用过这些仪器?感觉如何?价格大概多少呢?谢谢.

http://www.instrument.com.cn/show/Breviary.asp?FileName=C56942%2Ejpg&iwidth=200&iHeight=200 杭州迅数科技有限公司 的 迅数_G6型全自动菌落分析仪(G6型)已参加“国产好仪器”活动并通过初审。自上市以来，这款产品已经被多家单位采用，如果您使用过此仪器设备或者对其有所了解，欢迎一起聊聊它各方面的情况。您还可以通过投票抽奖、参与调研等方式参与活动，并获得手机电子充值卡。【点击参与活动】 仪器简介： G6全自动菌落分析仪是迅数公司推出的旗舰型产品，融合了迅数最新技术精华：可变光比的宽光带悬浮式暗视野；1000 万像素的CMOS；Colonfast菌落智能识别技术，不仅保证了菌落识别的精准，更细腻体现菌落的每一个细节。G6同时具备自动抑菌圈测量、抗生素效价测定、舒巴坦敏感β-内酰胺酶检验功能，为高级科研、检测机构在微生物领域提供了最佳的操作平台。 菌落形态数字化分析的利器 真实展现菌落每个细节 G6采用了F/1.4大光圈镜头，其锐利的光学影像通过1000万像素的真彩CMOS转化为数字影像，超清晰展现培养皿表层和深层的细微菌落。 全封闭、宽光带、悬浮式暗视野照明系统 保证菌落计数精度的基本要求是获得清晰、背景平整的图像，消除外界杂散光的干扰。迅数公司对G系列的照明系统进行精密的设计，上下光源采用了宽光带的LED柔光系统，并结合专利设计的悬浮式暗视野，不仅消除了玻璃培养皿的折射光斑，通过改变光比，使得菌落表面的皱折、凹陷、边缘的锯齿更富立体感。 菌落形态自动分析，描述每个菌落的数字特征 系统能瞬间分析出每个菌落的直径、圆度、面积、周长等特征，所有数据可以导出到excell表，为深入分析研究提供帮助。 综合的智能分析系统 “迅数colonfast菌落智能识别技术，统计结果更精准 自动菌落计数准确与否的关键是算法，作为研究级的旗舰，G6采用“迅数专利的colonfast菌落智能识别技术，融合了通用分割、多通道分割、同色分割等多种图像处理算法，适合各种复杂的培养皿。 21种图像处理功能，为科研的特殊要求提供强大的工具 菌落分析过程中经常会有这样的现象：深层的浅菌落被遗漏；为避免污染，不开盖计数时，会发现菌落图像模糊；或因为培养过程在培养皿上盖形成的水气，菌落轮廓不清……G6具有的21种图像处理功能就为解决上述类似情况提供了很好的帮助。 针对FDA标准设计的螺旋菌落分析功能，支持所有品牌的螺旋接种仪 “迅数螺旋平皿分析系统最大特点是它的包容性，不仅严格按照美国FDA螺旋计数法则设计，而且已经纳入中华人民共和国出入境检验检疫行业标准《食品和化妆品中的细菌计数检验法－－螺旋平板法》，可以适应所有品牌螺旋接种仪的接种模式要求。 灵活的分类统计功能，自动筛选出培养皿中....【了解更多此仪器设备的信息】

全自动菌落计数仪因其使用的自动化程度高、分析结果可核对、样品信息可留存等，已逐渐被越来越多的科研院所、卫生疾控部分所喜爱。如何选型，才能获得性能卓越的菌落计数仪，并取得高性价比呢?这得从该类仪器的原理来解释。现今面市的所有全自动菌落计数仪器均是采用成像分析法实现自动计数的，即由【成像硬件+分析软件】所组成，这二块内容的任何一块上出现失分，都会严重影响计数分析结果的稳定性。　　一、成像硬件的选型　　成像硬件用于获得清晰有效的菌落图像，以便分析计数。现今的成像硬件有拍照成像的、扫描成像的。由摄像头拍照成像的优点是：成像速度快，能确保在0.5秒内获得菌落图像。由单反相机、卡片机拍照成像的优点是：能自动对焦、且像素分辨率一般更高，但其成像需要3～4秒的时间。然而，拍照成像的致命弱点是：成像环境中的光线强度，无论是暗视野，还是背光，想要做到图像中心与边缘保持完全一致，是不可能的。从而引起平皿上亮度的不一致，这就严重干扰了菌落目标的自动识别。因此，如果要选购拍照成像的，其分析软件就一定要具有背景矫正功能，以便自动改善成像的效果。扫描成像与在灯箱中营造均匀面光源不同，是将线光源通过移动变成面光源的，因此光线强度非常均匀，其均匀度通常比拍照灯箱的面光源要高一个数量级，从成像硬件的根本上解决了菌落目标的亮度不匀问题，因此计数分析非常稳定。目前，以300dpi分辨率(3482×2396像素成像)扫描6个90mm直径平皿的速度，暗视野成像约12秒、背光成像约20秒，就其成像速度而言，与单反相机、卡片机拍照成像的速度相当。由于扫描成像的光线均匀度远远高于拍照成像，为获得高质量的成像效果，以便实现“傻瓜式”分析。扫描成像的另一优点是：成像分辨率可调，单平皿成像最高可达4800dpi(即：25.4/4800=0.00529mm/像素)，是任何拍照成像远不及的。可以预期：扫描成像将很快成为主流选择。　　二、分析软件的选型　　分析软件是全自动菌落计数仪的另一块核心成分。因为菌落生物的存在多样性，在培养基上的表现或显像不可能大体一致，针对这类变化，在分析软件选型上要考虑：对于各类成像干扰的自动排出能力。比如：是否能自动矫正背景，等等。另外，对于严重粘连在一起的团装、链状分布菌落，将其自动分割开来的水平，也是评价分析软件的考量指标。尤其是：对于同类菌落的“一键”化的智能分类计数能力，以及对于菌落计数分类的自动识别学习能力，更是评价分析软件的关键考量指标。现在比较好的分析软件，还集成了对6个90mm直径平皿的抑菌圈全自动测量功能，以及对抗生素效价分析、药敏分析功能，可避免用户重复购置成像用的硬件。一般分析软件都具应具备对于分析结果和标记图像的保存、查看功能。　　三、精准、稳定的傻瓜式操作　　全自动菌落计数仪就是为了减轻工作人员工作强度的，在现今的高技术下，若还需要估算才能测出菌落数的话，应是比较落后了。最好的是：能“不变应变”精准、稳定地傻瓜式操作的分析软件，其对于菌落形态和样品状态的不确定性，能够自动适应，以避免不断地调节菌落分割参数，其最多由对话交互来擦除那些个污染部分，即可。

RTAC-1型全自动菌落计数器是瑞韬科技根据多年技术积累产品经验，专为基层实验室设计的一款经济实用型菌落计数器，能轻松胜任大多数场合的基本计数：高精度的CCD镜头、全封闭自动定位样品仓、高效准确的菌落分析软件,性价比突出。

[align=center][/align][font=Tahoma, Helvetica, SimSun, sans-serif][size=18px][color=#444444]菌落总数就是指在一定条件下（如需氧情况、营养条件、pH、培养温度和时间等）每克（每毫升）检样所生长出来的菌落数。菌落总数测定是用来判定食品被细菌污染的程度及卫生质量，它反映食品在生产过程中是否符合卫生要求，以便对被检样品做出适当的卫生学评价。菌落总数的多少在一定程度上标志着食品卫生质量的优劣。菌落总数超标的食品，可能会引起急性中毒、呕吐、腹泻等症状，危害人体健康安全。那么，菌落总数超标的原因及其解决方案有哪些呢？下面我们就从六个方面角度来逐个分析。人员食品生产运输销售的各个环节员工的不正确行为都有可能导致菌落总数超标，而其中较为普遍的可能为：1、负责清洗消毒工作的人员对清洗消毒的频率及要求执行不到位或不了解，可能出现生产环境卫生状况不良，生产设备连续使用未进行清洗消毒，对生产设备清洗不干净或消毒不严，产生微生物滞留和滋生等情况造成食品污染，进而导致菌落总数超标。2、生产操作人员不按生产要求进行操作。如负责杀菌工序的人员对杀菌的参数及要求执行不到位或不了解，可能导致杀菌不彻底.03、员工培训不到位，缺乏卫生意识。如加工过程中生熟不分发生交叉污染，进而导致菌落总数超标。设备设备设施的能力和状态也可能与菌落总数超标有关。此处我们以杀菌设备和包装机为例。包装后需进行杀菌的产品，若杀菌设备性能不足、温度计未校准导致杀菌不彻底都有可能引起菌落总数超标。针对杀菌设备，我们可以通过做热力分布和热穿透测试，验证杀菌釜的性能以及定期使用温度记录仪，跟踪杀菌过程产品温度的变化、做好温度计的校准等工作来避免菌落总数超标。同样的，包装机若密封性能不足，可能导致产品在杀菌和后期的贮存过程中出现被污染的情况。针对包装机，我们可以通过建立包装机性能验证，确保密封性良好，同时做好内包车间和包装机的清洁卫生来减少菌落总数超标的可能。物料物料主要包括各种原辅料、内包材、生产用水和冰等，若各种料原始微生物含量较高，还是有增加后期产品菌落总数超标的风险；因此我们应有针对性的对原辅料包材进行评估，制定一定的验收要求并对原辅料包材进行对应的检测，并在贮存和加工过程中做好温湿度控制和环境管理。另外，内包材在使用前还可考虑采取紫外灯或臭氧进行消毒。对于生产用水和冰，可以采取每周一次的频率对其微生物状况进行验证。方法方法主要指的各种有关微生物措施制定的合理性。如，设备设施、环境、人员清洗消毒的频率及方法是否合理？杀菌公式的设定是否合理？生产过程中环境温湿度的控制是否合理？食品储存和运输中设定的条件（如冷链）是否合理等。这种情况，可以采取的措施就是验证。通过对事前事后进行微生物实验，将得出的数据进行比对，确认方法是否可行。除此之外，我们还可以通过调整一定的参数并采集实验数据来对方法进行优化，进而确定最合适的方法。环境从原辅料的运输、贮存、加工成成品以及销售等各个环节场所的不当，都有可能导致产品菌落总数超标。如包装车间卫生不当、生产环境温湿度控制不当、废料间卫生间位置设施不当等等。针对环境，我们可以采取的措施是合理考虑各个场所的布局、严格控制各个环节的温湿度以及持续保持各个场所的卫生等。流通若在流通环节检出多种食品存在菌落总数超标的情况，则问题极有可能是销售方未按照规定要求存储、摆放食品，比如个别超市不具备低温冷藏设施却销售需冷藏的食品，有的食品标签标注储存条件为避光，销售者却将食品置于阳光直射条件下等。[/color][/size][/font]

在菌落总数的计数中有这样的描述:如果所有的稀释度的菌落数均30,则按最低稀释倍数的结果报告.现在有这样的一个结果:0,0[10-1]；0，0[10-2]；2，1[10-3]；3，0[10-4]；那么我最后报告的结果应是多少呢？

一、实验原理稀释平板测数是根据微生物在高度稀释条件下固体培养基上所形成的单个菌落是由一个单细胞繁殖而成这一培养特征设计的计数方法，即一个菌落代表一个单细胞。计数时，首先将待测样品制成均匀的繁殖稀释液，尽量使样品中的微生物细胞分散开，使其成单个细胞存在，否则一个菌落就不只是代表一个细胞，再取一定稀释度、一定量的稀释液接种到平板中，使其均匀分布于平板中的培养基内。经培养后，由单个细胞生长繁殖形成菌落，统计菌落数目，即可计算出样品中的含菌数。此记数方法所计算的菌数是培养基上长出来的菌落数，故又称活菌计数。一般用于某些产品检定，如根瘤菌剂等产品检定，生物制品检验，土壤含菌量测定及食品、水源的污染程度的检验。自然条件下，微生物常以群落状态存在，这种群落往往是不同种类微生物的混合体。为了研究某种微生物的特性或者要大量培养和使用某种微生物，必须从这些混杂的微生物群落中获得纯培养，这种获得纯培养的方法称为微生物的分离与纯化。在自然界中，土壤是微生物生活的良好环境，其中生活的微生物数量和种类都是极其丰富的，因此土壤是人类开发利用微生物资源的重要基地。土壤中的微生物数量、种类与土壤肥力有关，肥沃的土壤中多，贫瘠土壤中少。其生理类群则与土壤的其它理化性质，如通气、pH有关，例如在通气良好的菜园土中，好气性微生物占有绝对优势。本实验以菜园土为材料分离土壤中的好气性细菌，并进行数量测定。分离微生物时，一般是根据该微生物对营养、pH、氧气等要求的不同，供给它们适宜的生活条件，或加入某种抑制剂造成只利于该菌种生长，不利于其它菌种生长的环境，从而淘汰不需要的菌种。分离微生物常用的方法有稀释平板分离法和划线分离法，根据不同的材料，可以采用不同方法，其最终目的是要在培养基上出现欲分离微生物的单个菌落，必要时再对单个菌落进一步分离纯化。在用稀释平板分离微生物时，还可以同时测定待分离的微生物的数量。放线菌与细菌同属原核微生物，是重要的抗生素产生菌，在土壤中的数量仅次于细菌，尤其是在有机质丰富、透气性好的中性到微碱性土壤中的数量较多。本实验采用高氏一号琼脂培养基分离和计数菜园土中的放线菌。真菌在土壤中的数量次于细菌和放线菌，主要在有机质丰富、透气性好的偏酸性土壤中较多。分离土壤中的真菌并不难，但由于其菌落大，容易扩展，计数准确性较低。本实验采用加有氯霉素或庆大霉素和孟加拉红的马丁氏培养基分离及计数菜园土中的真菌。按一般资料介绍为链霉素，但此种抗生素要先配成一定浓度的溶液，且应于倒平板前才加入培养基中。在此培养基上，放线菌和细菌被氯霉素或庆大霉素和孟加拉红所抑制，但大多数真菌能够生存，且其菌落受孟加拉红的抑制而较小，从而避免了某些真菌的扩散蔓延而带来的数量上的误差。

[em61] 全自动菌落计数仪是利用光学成像系统获得培养皿或者一次性培养测试纸片（如3M菌落测试纸）的图像。 图像显示的作用首先是放大，放大后看菌落就轻松许多； 图像的第二个好处是可点击鼠标进行标记； 图像的第三个好处是可以借助软件自动统计，几百个菌落在1秒内数完。 所谓的全自动菌落是指菌落计数的自动完成，成像还是要手动完成的。另外，软件的自动统计准确率受各种因素的影响，一般情况下，都不能完成100％计数。但是，在菌落生长正常，大小基本一致，无大面积粘连的情况下，可实现95％左右的识别。此准确度完全满足一般的菌落计数统计要求，可用于微生物培养研究，食品卫生检测等。 博黛生物科技 BioDit 专业开发全自动菌落计数仪

一般我们做液体样品的菌落总数检测，菌落在平板上都很细小，有时一眼看上去根本没有，非常仔细看才能看到很小的小点点在培养够48h的情况下，这样的算不算到有效菌落的统计里？如果要计数的话，很难判断是菌落还是别的什么，而且即使用菌落计数器数也很伤眼睛如果不计数的话，多培养几天后有些菌落会长大一点点，感觉的确是菌落那这些细小的点点算不算到菌落总数里呢

出口食品平板菌落计数 中华人民共和国进出口商品检验行业标准 SN 0168-92代替 ZB X09 001-86 Plate count for bacterial colonies in food for export 1　主题内容与适用范围　　本标准规定了出口食品平板菌落计数的方法。　　本标准适用于各种出口食品及其原料,有专门规定检验方法的除外。2　设备和材料2.1 工作台：超净工作台或放于清洁、光线充足的实验室里的水平工作台。琼脂平板在工作台上暴露15 min,每平板不得超过15个菌落。2.2　恒温培养箱：36±1℃。2.3　恒温水浴箱：45±1℃。2.4　均质器。 2.5　振荡器。2.6　吸管：1、10和25mL,具0.1mL刻度。2.7　平皿：直径为90 mm。2.8　稀释瓶：广口瓶或三角烧瓶,容量为200 mL和500 mL。2.9　玻璃珠：直径为5mm左右。 2.10 天平：感量0.1g。3　培养基和试剂 3.1　平板计数琼脂。3.2 75％乙醇。3.3　稀释剂：磷酸盐缓冲稀释液。4　操作程序 4.1　样品制备 4.1.1　以无菌操作取有代表性的样品盛于灭菌容器内,如有包装,则用75％乙醇在包装开口处擦拭后取样。4.1.2　制备样品匀液4.1.2.1　固体或半固体食品：以无菌操作取25 g样品,放入装有225mL稀释剂的灭菌均质杯内,于8000r/min均质1～2min,制成1:10的样品匀液。如样品均质时间超过2min,应在均质杯外加冰水冷却。4.1.2.2　干燥或干粉食品：以无菌操作取25 g样品,放入装有225mL稀释剂和适量玻璃珠的500 mL稀释瓶中。迅速振摇,将样品混匀,制成1 : 10的样品匀液。振摇时,幅度为30cm,7s内振摇25次,也可用机械振荡器振荡15s代替手摇。4.1.2.3　液体食品: 用灭菌吸管吸取25mL样品, 放入装有225mL稀释剂的500mL稀释瓶中,按4.1.2.2条中所述方法迅速振摇,制成1:10的样品匀液。吸取样品时,吸管插入液面下不要超过2.5cm。吸管内液体要在2～4s内完全排入稀释剂中。不要在稀释剂中吹洗吸管。4.2　稀释样品匀液 4.2.1　用10 mL灭菌吸管准确吸取1:10的样品匀液10 mL,放入装有90 mL稀释剂的200mL, 稀释瓶中。按4.1.2.2条中所述的方法,迅速振摇。制成1:100的样品液。从容器中吸取样品匀液和以后的稀释操作中,吸管尖不要碰着瓶口。吸入的液体应先高于所要求的刻度,然后提起吸管使其尖端离开液面并贴在容器内壁将液体调至所要求的刻度。4.2.2　分别用10mL灭菌吸管按4.2.1条所述方法将样品匀液制成10倍递增稀释的样品液,如10**-3、10**-4、10**-5……。4.3　平板接种4.3.1　对于每一个样品,选用合适的三个连续稀释度的样品液进行平板计数。 4.3.2　分别用灭菌吸管吸取1mL样品液放入作了适宜标志的平皿内。每个稀释度的样品液用两个平皿。如果某一样品液在取出供试部分前的放置时间超过3 min,应按4.1.2.2条所述方法再振摇该样品液。4.3.3　分别加12～15mL平板计数琼脂(已放45＋1℃的水浴中恒温)到各平皿内。立即将平皿内的样品液和琼脂培养基充分混合。混合方法是将平皿倾斜和旋转。要防止把混合物溅到平皿壁和盖上。同时将平板计数琼脂倾入加有1 mL稀释剂的另一灭菌平皿作空白对照。将样品液加入平皿后应立即倾注琼脂培养基,每个样品从开始稀释到倾注最后一个平皿所用的时间不得超过20min。4.4　培养 　　待琼脂凝固后将平皿翻转,立即放进36±1℃的恒温培养箱内培养48±2h。培养箱应 保持一定的湿度,经48h培养的琼脂培养基的失重不得超过15％。4.5　菌落计数和记录4.5.1　培养后,立即计数每个平板上的菌落数。25～250个菌落为合适范围。如果不能立即计数,应将平板存放于0～4℃,但不得超过24 h。 4.5.2　如只有一个稀释度的两个平板上的菌落在合适范围内, 先计算两个平板的平均值,再将平均值乘以相应稀释倍数,作为每克(毫升)样品中平板菌落数(下表,样品1)。4.5.3　如有两个稀释度在合适范围内,先计算每个稀释度两个平板的平均值,再计算两个稀释度的平均值,然后计算每克(毫升)样品中平板菌落数(下表,样品2)。4.5.4　当最低稀释度的两个平板上都少于25个菌落时,计数这一稀释度两个平板上的实际菌落数,计算两个平板上的平均菌落数,将平均菌落数乘以稀释倍数,得到估计的平板菌落数。给这个数注上星号(*), 表明该数系从菌落数在25～250这一范围之外的平板估计所得(下表,样品3)。4.5.5　当所有平板上的菌落都超过250时,则应将最高稀释度的两个平板的平均菌落数乘以稀释倍数,得到估计的平板菌落数。给这个数注上星号(*) (意义同4.5.4)(下表,样 品4)。4.5.6　如果所有稀释度的平板都没有菌落,则以小于1乘以最低稀释倍数报告平板菌落数。给这个数注上星号(*) (意义同4.5.4条) (下表,样品5)。4.5.7　同一稀释度的两个平板中,一个有25～250个菌落,另一个的菌落多于250个,两个平板都要计数。计算方法同4.5.2条(下表,样品6)。4.5.8　两个连续稀释度中的每个稀释度都有一个平板的菌落数在25～250个范围内,而另一个的菌落数高于250或低于25,四个平板都要计数。计算方法参照4.5.2条和4.5.3条(下表,样品7)。 4.5.9　某稀释度的两个平板都有25～250个菌落,而另一稀释度的两个平板中只有一个平板的菌落数在 25～250范围内。四个平板都要计数,计算方法参照4.5.2条和4.5.3条 (下表,样品8、9)。4.5.10 蔓延生长菌落 通常有三种不同类型的蔓延生长菌落。第一种类型是链状菌落,菌落之间没有明显界线,这些菌落是当琼脂和试验物混合时,一个细菌块被分散所致；第二种类型是在琼脂和 平皿底之间形成的水膜样菌落；第三种是在平皿边缘或琼脂表面形成的水膜样菌落。如果所选择的平板出现过量的蔓延菌落生长,以致a.被蔓延菌落盖住的地方,包括由于蔓延菌落造成的抑制生长区面积超过平板面积的50％,或b.由于蔓延菌落造成的抑制生长区面积超过平板面积的25％,这样的平板报告为“蔓延菌落”,不予计数。计数其他平板上的菌落数,将这些数值的算术平均值报告为平板菌落数（下表,样品10）。　　当有必要计数除以上a.和b.外的蔓延生长菌落时,将三种不同类型的蔓延菌落分别计数。对于第一种类型,如果仅有一条链,将它作为一个菌落计。如果有来源不同的几条链, 将每条链作为一个菌落计,不要把链上生长的各个菌落分开来数。第二种和第三种类型的蔓延生长形成易于鉴别的菌落,即按一般菌落计数,把计数的蔓延生长菌落数同一般菌落数加在一起,计算平板菌落数。4.5.11 操作者对同一平板复核自己的计数结果,其差异应在5％之内,而其他人对这一平板重复计数,其差异应在10％之内。否则,应找出原因,加以校正。 4.6　计算和记录数字　　适宜稀释度的两个平板的菌落数平均值或两个稀释度的平板菌落数平均值乘以相应稀释倍数计算出每克(毫升)样品中平板菌落数。　　记录时,只有在换算到每克(毫升)样品中平板菌落数时,才能定下两位有效数字,第三位数字采用四舍五入的方法记录。也可将样品的平板菌落数记录为10的指数形式(见下表中的例子)。5　结果报告 　　报告每克(毫升)样品中平板菌落数或估计的平板菌落数。　　　　　　　　　　　　　　平板菌落数计算 样品号 菌 落 数 平板菌落数/g(mL) 1:100 1:1000 1:10000 1 多不可计 175 16 多不可计 208 17 190000(1.9×10**5) 2 多不可计 224 25 多不可计 245 30 250000(2.5×10**5)* 3 18 2 014 0 0 1600(1.6×10**3)* 4 多不可计 多不可计 523多不可计 多不可计 487 5100000(5.1×10**6)* 5 0 0 00 0 0 ＜100 (＜1.0×10**2)* 6 多不可计 245 23 多不可计 278 20 260000(2.6×10**5) 7 多不可计 225 21多不可计 255 40 270000(2.7×10**5) 8 多不可计 210 18多不可计 240 28 230000(2.3×10**5) 9 多不可计 260 30 多不可计 230 28 270000(2.7×10**5) 10 多不可计 245 35多不可计 230 蔓延菌落 290000(2.9×10**5) 注:带星号*者为估计数。附 录 A 培养基制备 (补充件) A1　平板计数琼脂 　　胰蛋白胨　　　　　 5.0g 　　酵母浸膏　　　　　 2.5g 　　葡萄糖　　　　　　 1.0g 　　琼　脂 　　　　　　15.0g 　　蒸馏水 　　　　　　1000mL 　　将各成分加于蒸馏水中,煮沸溶解。分装试管或烧瓶,121℃高压灭菌15min。最终pH7.0±0.1。A2　磷酸盐缓冲稀释液 贮存液：　　　　　磷酸二氢钾(KH2PO4) 34.0g 　　蒸馏水　　　　　　 500mL 　　用大约175 mL的1mol/L氢氧化钠溶液调节pH至7.2,用蒸馏水稀释至1000 mL后贮存于冰箱。 稀释液：用蒸馏水稀释1.25mL贮存液至1000mL,分装于合适容器,121℃高压灭菌15min。附加说明：　　本标准由中华人民共和国国家进出口商品检验局提出。　　本标准由中华人民共和国河南进出口商品检验局、湖南进出口商品检验局负责起草　　　　本标准主要起草人李志培、邓明义。　　本标准主要参考美国食品和药物管理局(FDA)《细菌学分析手册》第6版第4章(1984年)。 中华人民共和国国家进出口商品检验局1992-12-28批准 1993-05-01实施

出口食品平板菌落计数 中华人民共和国进出口商品检验行业标准 SN 0168-92代替 ZB X09 001-86 Plate count for bacterial colonies in food for export 1　主题内容与适用范围　　本标准规定了出口食品平板菌落计数的方法。　　本标准适用于各种出口食品及其原料,有专门规定检验方法的除外。2　设备和材料2.1 工作台：超净工作台或放于清洁、光线充足的实验室里的水平工作台。琼脂平板在工作台上暴露15 min,每平板不得超过15个菌落。2.2　恒温培养箱：36±1℃。2.3　恒温水浴箱：45±1℃。2.4　均质器。 2.5　振荡器。2.6　吸管：1、10和25mL,具0.1mL刻度。2.7　平皿：直径为90 mm。2.8　稀释瓶：广口瓶或三角烧瓶,容量为200 mL和500 mL。2.9　玻璃珠：直径为5mm左右。 2.10 天平：感量0.1g。3　培养基和试剂 3.1　平板计数琼脂。3.2 75％乙醇。3.3　稀释剂：磷酸盐缓冲稀释液。4　操作程序 4.1　样品制备 4.1.1　以无菌操作取有代表性的样品盛于灭菌容器内,如有包装,则用75％乙醇在包装开口处擦拭后取样。4.1.2　制备样品匀液4.1.2.1　固体或半固体食品：以无菌操作取25 g样品,放入装有225mL稀释剂的灭菌均质杯内,于8000r/min均质1～2min,制成1:10的样品匀液。如样品均质时间超过2min,应在均质杯外加冰水冷却。4.1.2.2　干燥或干粉食品：以无菌操作取25 g样品,放入装有225mL稀释剂和适量玻璃珠的500 mL稀释瓶中。迅速振摇,将样品混匀,制成1 : 10的样品匀液。振摇时,幅度为30cm,7s内振摇25次,也可用机械振荡器振荡15s代替手摇。4.1.2.3　液体食品: 用灭菌吸管吸取25mL样品, 放入装有225mL稀释剂的500mL稀释瓶中,按4.1.2.2条中所述方法迅速振摇,制成1:10的样品匀液。吸取样品时,吸管插入液面下不要超过2.5cm。吸管内液体要在2～4s内完全排入稀释剂中。不要在稀释剂中吹洗吸管。4.2　稀释样品匀液 4.2.1　用10 mL灭菌吸管准确吸取1:10的样品匀液10 mL,放入装有90 mL稀释剂的200mL, 稀释瓶中。按4.1.2.2条中所述的方法,迅速振摇。制成1:100的样品液。从容器中吸取样品匀液和以后的稀释操作中,吸管尖不要碰着瓶口。吸入的液体应先高于所要求的刻度,然后提起吸管使其尖端离开液面并贴在容器内壁将液体调至所要求的刻度。4.2.2　分别用10mL灭菌吸管按4.2.1条所述方法将样品匀液制成10倍递增稀释的样品液,如10**-3、10**-4、10**-5……。4.3　平板接种4.3.1　对于每一个样品,选用合适的三个连续稀释度的样品液进行平板计数。 4.3.2　分别用灭菌吸管吸取1mL样品液放入作了适宜标志的平皿内。每个稀释度的样品液用两个平皿。如果某一样品液在取出供试部分前的放置时间超过3 min,应按4.1.2.2条所述方法再振摇该样品液。4.3.3　分别加12～15mL平板计数琼脂(已放45＋1℃的水浴中恒温)到各平皿内。立即将平皿内的样品液和琼脂培养基充分混合。混合方法是将平皿倾斜和旋转。要防止把混合物溅到平皿壁和盖上。同时将平板计数琼脂倾入加有1 mL稀释剂的另一灭菌平皿作空白对照。将样品液加入平皿后应立即倾注琼脂培养基,每个样品从开始稀释到倾注最后一个平皿所用的时间不得超过20min。4.4　培养 　　待琼脂凝固后将平皿翻转,立即放进36±1℃的恒温培养箱内培养48±2h。培养箱应 保持一定的湿度,经48h培养的琼脂培养基的失重不得超过15％。4.5　菌落计数和记录4.5.1　培养后,立即计数每个平板上的菌落数。25～250个菌落为合适范围。如果不能立即计数,应将平板存放于0～4℃,但不得超过24 h。 4.5.2　如只有一个稀释度的两个平板上的菌落在合适范围内, 先计算两个平板的平均值,再将平均值乘以相应稀释倍数,作为每克(毫升)样品中平板菌落数(下表,样品1)。4.5.3　如有两个稀释度在合适范围内,先计算每个稀释度两个平板的平均值,再计算两个稀释度的平均值,然后计算每克(毫升)样品中平板菌落数(下表,样品2)。4.5.4　当最低稀释度的两个平板上都少于25个菌落时,计数这一稀释度两个平板上的实际菌落数,计算两个平板上的平均菌落数,将平均菌落数乘以稀释倍数,得到估计的平板菌落数。给这个数注上星号(*), 表明该数系从菌落数在25～250这一范围之外的平板估计所得(下表,样品3)。4.5.5　当所有平板上的菌落都超过250时,则应将最高稀释度的两个平板的平均菌落数乘以稀释倍数,得到估计的平板菌落数。给这个数注上星号(*) (意义同4.5.4)(下表,样 品4)。4.5.6　如果所有稀释度的平板都没有菌落,则以小于1乘以最低稀释倍数报告平板菌落数。给这个数注上星号(*) (意义同4.5.4条) (下表,样品5)。4.5.7　同一稀释度的两个平板中,一个有25～250个菌落,另一个的菌落多于250个,两个平板都要计数。计算方法同4.5.2条(下表,样品6)。4.5.8　两个连续稀释度中的每个稀释度都有一个平板的菌落数在25～250个范围内,而另一个的菌落数高于250或低于25,四个平板都要计数。计算方法参照4.5.2条和4.5.3条(下表,样品7)。 4.5.9　某稀释度的两个平板都有25～250个菌落,而另一稀释度的两个平板中只有一个平板的菌落数在 25～250范围内。四个平板都要计数,计算方法参照4.5.2条和4.5.3条 (下表,样品8、9)。4.5.10 蔓延生长菌落 通常有三种不同类型的蔓延生长菌落。第一种类型是链状菌落,菌落之间没有明显界线,这些菌落是当琼脂和试验物混合时,一个细菌块被分散所致；第二种类型是在琼脂和 平皿底之间形成的水膜样菌落；第三种是在平皿边缘或琼脂表面形成的水膜样菌落。如果所选择的平板出现过量的蔓延菌落生长,以致a.被蔓延菌落盖住的地方,包括由于蔓延菌落造成的抑制生长区面积超过平板面积的50％,或b.由于蔓延菌落造成的抑制生长区面积超过平板面积的25％,这样的平板报告为“蔓延菌落”,不予计数。计数其他平板上的菌落数,将这些数值的算术平均值报告为平板菌落数（下表,样品10）。　　当有必要计数除以上a.和b.外的蔓延生长菌落时,将三种不同类型的蔓延菌落分别计数。对于第一种类型,如果仅有一条链,将它作为一个菌落计。如果有来源不同的几条链, 将每条链作为一个菌落计,不要把链上生长的各个菌落分开来数。第二种和第三种类型的蔓延生长形成易于鉴别的菌落,即按一般菌落计数,把计数的蔓延生长菌落数同一般菌落数加在一起,计算平板菌落数。4.5.11 操作者对同一平板复核自己的计数结果,其差异应在5％之内,而其他人对这一平板重复计数,其差异应在10％之内。否则,应找出原因,加以校正。 4.6　计算和记录数字　　适宜稀释度的两个平板的菌落数平均值或两个稀释度的平板菌落数平均值乘以相应稀释倍数计算出每克(毫升)样品中平板菌落数。　　记录时,只有在换算到每克(毫升)样品中平板菌落数时,才能定下两位有效数字,第三位数字采用四舍五入的方法记录。也可将样品的平板菌落数记录为10的指数形式(见下表中的例子)。5　结果报告 　　报告每克(毫升)样品中平板菌落数或估计的平板菌落数。　　　　　　　　　　　　　　平板菌落数计算 样品号 菌 落 数 平板菌落数/g(mL) 1:100 1:1000 1:10000 1 多不可计 175 16 多不可计 208 17 190000(1.9×10**5) 2 多不可计 224 25 多不可计 245 30 250000(2.5×10**5)* 3 18 2 014 0 0 1600(1.6×10**3)* 4 多不可计 多不可计 523多不可计 多不可计 487 5100000(5.1×10**6)* 5 0 0 00 0 0 ＜100 (＜1.0×10**2)* 6 多不可计 245 23 多不可计 278 20 260000(2.6×10**5) 7 多不可计 225 21多不可计 255 40 270000(2.7×10**5) 8 多不可计 210 18多不可计 240 28 230000(2.3×10**5) 9 多不可计 260 30 多不可计 230 28 270000(2.7×10**5) 10 多不可计 245 35多不可计 230 蔓延菌落 290000(2.9×10**5) 注:带星号*者为估计数。附 录 A 培养基制备 (补充件) A1　平板计数琼脂 　　胰蛋白胨　　　　　 5.0g 　　酵母浸膏　　　　　 2.5g 　　葡萄糖　　　　　　 1.0g 　　琼　脂 　　　　　　15.0g 　　蒸馏水 　　　　　　1000mL 　　将各成分加于蒸馏水中,煮沸溶解。分装试管或烧瓶,121℃高压灭菌15min。最终pH7.0±0.1。A2　磷酸盐缓冲稀释液 贮存液：　　　　　磷酸二氢钾(KH2PO4) 34.0g 　　蒸馏水　　　　　　 500mL 　　用大约175 mL的1mol/L氢氧化钠溶液调节pH至7.2,用蒸馏水稀释至1000 mL后贮存于冰箱。 稀释液：用蒸馏水稀释1.25mL贮存液至1000mL,分装于合适容器,121℃高压灭菌15min。附加说明：　　本标准由中华人民共和国国家进出口商品检验局提出。　　本标准由中华人民共和国河南进出口商品检验局、湖南进出口商品检验局负责起草　　　　本标准主要起草人李志培、邓明义。　　本标准主要参考美国食品和药物管理局(FDA)《细菌学分析手册》第6版第4章(1984年)。 中华人民共和国国家进出口商品检验局1992-12-28批准 1993-05-01实施

全自动菌落计数器因其计数准确、自动化程度高、可留存样品信息、使用方便，一般可在数秒内统计出样品菌落数、性价比高等优点，而受到众多企业、医院、科研院所的喜爱，但是由于全自动菌落计数器的科技含量较高，如果选型出现问题，对日后的检验、科研工作会带来很大不便，所以最好的办法就是在挑选时一定要挑选一台满足使用需求的菌落计数器，那如何选购一款优质的菌落计数器呢? 　　一、根据实际使用需求来确定CCD传感器的档次 　　很多用户偏向于选择像素高的菌落计数器，却没考虑到检验和科研的实际应用需求，所以用户在选购前就要确定好自己要买多少像素的CCD传感器。 　　二、看图像采集通道功能，指标越多越好 　　所谓"图像采集通道"，就是菌落计数器对于样品信息的获取能力，也就是标志着菌落计数器开始计数统计前的初始信息是否真实可靠。如果图像采集通道功能过于单一，那当后期计数时时会很容易出现误判，所以"图像采集通道"指标越多越好。指标响应时间越小，则标志着该菌落计数器获取样品信息的能力越强。 　　三、看最小菌落分辨率为多少 　　一般入门级菌落计数器最小菌落分辨率多半有0.1mm左右的效果，中等机型有0.05mm的水准，若实际比较入门、高阶机型的图档显示能力，拥有高分辨率的计数器，在菌落较小时效果会更明显。 　　四、看有没有数据及报表管理功能 　　在选购菌落计数器时一定要选有具有数据及报表管理功能的设备，于由微生物的不可复检性，对于以往检验数据的管理和回溯极为重要，不然在实际开展工作时繁杂的统计数据和报表管理会耗尽科研人员的精力。 　　五、不要指标高的，就要效果好的 　　现在有些菌落计数器在给用户介绍时，会宣传他们的产品有多少多少功能，多高多高的指标，实际上等真正买回家，根本用不到这么多功能，最重要的还是要统计菌落的实际效果好不好，不能为了过多的功能而买一个效果不是很好的设备。而统计效果的好坏关键在于算法是否合理。 　　六、看使用是否方便 　　全自动菌落计数器的一个主要优点在于它降低了人工统计菌落的工作量，减轻了工作人员的工作强度，但由于菌落形态和样品状态的不确定性，市面上大多数菌落计数器都较为强调通过人工干预来提高准确度。用户在选购设备时应注意操作是否简便、是否符合工作人员的操作习惯和操作思路。一般来说，需要的人工干预越小，使用越简便。

[em06] 由于我实验室没有菌落计数器。而且我刚接触微生物（原来我做理化）。所以计数这方面比较麻烦。前天因为菌落长的比较小，因此我多放置培养了一个晚上。结果多得不可计数了。按我的理解，时间放久了，对结果应该没什么 影响，只是菌落会长得比较大而已。请问是这样吗？欢迎大家来讨论！[em26] [em26] [em01]

[font=SimSun, STSong, &]最近几次产品做的菌落总数，总是出现蔓延状态，同时做几组不同产品，固定的一种产品出现这种情况（之前没有出现蔓延的情况），麻烦大家分析一下，谢谢！[/font]

一、菌落总数介绍：　　菌落是指细菌在固体培养基上生长繁殖而形成的能被肉眼识别的生长物，它是由数以万计相同的细菌集合而成。当样品被稀释到一定程度，与培养基混合，在一定培养条件下，每个能够生长繁殖的细菌细胞都可以在平板上形成一个可见的菌落。　　菌落总数就是指在一定条件下（如需氧情况、营养条件、pH、培养温度和时间等）每克（每毫升）检样所生长出来的细菌菌落总数。按国家标准方法规定，即在需氧情况下，37℃培养48h，能在普通营养琼脂平板上生长的细菌菌落总数，所以厌氧或微需氧菌、有特殊营养要求的以及非嗜中温的细菌，由于现有条件不能满足其生理需求，故难以繁殖生长。因此菌落总数并不表示实际中的所有细菌总数，菌落总数并不能区分其中细菌的种类，所以有时被称为杂菌数，需氧菌数等。　　菌落总数测定是用来判定食品被细菌污染的程度及卫生质量，它反映食品在生产过程中是否符合卫生要求，以便对被检样品做出适当的卫生学评价。菌落总数的多少在一定程度上标志着食品卫生质量的优劣。二、检验方法　　菌落总数的测定，一般将被检样品制成几个不同的10倍递增稀释液，然后从每个稀释液中分别取出1mL置于灭菌平皿中与营养琼脂培养基混合，在一定温度下，培养一定时间后（一般为48小时），记录每个平皿中形成的菌落数量，依据稀释倍数，计算出每克（或每ml）原始样品中所含细菌菌落总数。　　基本操作一般包括：样品的稀释－－倾注平皿－－培养48小时－－计数报告。　　国内外菌落总数测定方法基本一致，从检样处理、稀释、倾注平皿到计数报告无何明显不同，只是在某些具体要求方面稍有差别，如有的国家在样品稀释和倾注培养进，对吸管内液体的流速，稀释液的振荡幅度、时间和次数以及放置时间等均作了比较具体的规定。　　检验方法参见：　　GB4789.2-94 《中华人民共和国国家标准 食品卫生微生物学检验 菌落总数测定》　　SN0168-92 《中华人民共和国进出口商品检验行业标准 出口食品菌落计数》三、说明（一）样品的处理和稀释：　　1．操作方法：以无菌操作取检样25g（或25ml)，放于225mL灭菌生理盐水或其他稀释液的灭菌玻璃瓶内（瓶内预置适当数量的玻璃珠)或灭菌乳钵内，经充分振要或研磨制成1：10的均匀稀释液。　　固体检样在加入稀释液后，最好置灭菌均质器中以8000~10000r/min的速度处理1min，制成1：10的均匀稀释液。　　用1ml灭菌吸管吸取1：10稀释液1ml，沿管壁徐徐注入含有9ml灭菌生理盐水或其他稀释液的试管内，振摇试管混合均匀，制成1：100的稀释液。　　另取1ml灭菌吸管，按上项操作顺序，制10倍递增稀释液，如此每递增稀释一次即换用1支1ml灭菌吸管。　　2．无菌操作：操作中必须有“无菌操作”的概念，所用玻璃器皿必须是完全灭菌的，不得残留有细菌或抑菌物质。所用剪刀、镊子等器具也必须进行消毒处理。样品如果有包装，应用75%乙醇在包装开口处擦拭后取样。　　操作应当在超净工作台或经过消毒处理的无菌室进行。琼脂平板在工作台暴露15分钟，每个平板不得超过15个菌落。　　3．采样的代表性：如系固体样品，取样时不应集中一点，宜多采几个部位。固体样品必须经过均质或研磨，液体样品须经过振摇，以获得均匀稀释液。　　4．样品稀释误差：为减少样品稀释误差，在连续递次稀释时，每一稀释液应充分振摇，使其均匀，同时每一稀释度应更换一支吸管。　　在进行连续稀释时，应将吸管内液体沿管壁流入，勿使吸管尖端伸入稀释液内，以免吸管外部粘附的检液溶于其内。　　为减少稀释误差，SN标准采用取10mL稀释液，注入90mL缓冲液中。　　5．稀释液：样品稀释液主要是灭菌生理盐水，有的采用磷酸盐缓冲液（或0.1％蛋白胨水），后者对食品已受损伤的细菌细胞有一定的保护作用。如对含盐量较高的食品（如酱油）进行稀释，可以采用灭菌蒸馏水。（二）倾注培养　　1．操作方法：根据标准要求或对污染情况的估计，选择2~3个适宜稀释度，分别在制10倍递增稀释的同时，以吸取该稀释度的吸管移取1ml稀释液于灭菌平皿中，每个稀释度做两个平皿。　　将凉至46℃营养琼脂培养基注入平皿约15ml，并转动平皿，混合均匀。同时将营养琼脂培养基倾入加有1ml稀释液（不含样品）的灭菌平皿内作空白对照。　　待琼脂凝固后，翻转平板，置36±1℃温箱内培养48±2h，取出计算平板内菌落数目，乘以稀释倍数，即得每克（每毫升）样品所含菌落总数。　　2．倾注用培养基应在46℃水浴内保温，温度过高会影响细菌生长，过低琼脂易于凝因而不能与菌液充分混匀。如无水浴，应以皮肤感受较热而不烫为宜。　　倾注培养基的量规定不一，从12~20ml不等，一般以15ml较为适宜，平板过厚可影响观察，太薄又易于干裂。倾注时，培基底部如有沉淀物，应将底部弃去，以免与菌落混淆而影响计数观察。　　3．为使菌落能在平板上均匀分布，检液加入平皿后，应尽快倾注培养基并旋转混匀，可正反两个方向旋转，检样从开始稀释到倾注最后一个平皿所用时间不宜超过[

用GB/T4789.2-2010分析菌落总数的时候，是先加1mL稀释样液到培养皿中，再往培养皿中倒入10～15mL的营养琼脂，如果我是先加入10～15mL的营养琼脂，再加入1mL稀释样液到培养皿中，有区别吗？谢谢

[align=center]平皿计数法测菌落总数验证[/align][align=center]化工室：张苗苗[/align]一、 范围及定义1、范围 本标准规定了用平皿计数法测定生活饮用水及其水源水中的菌落总数。2、定义 菌落总数是指水样在营养琼脂上有氧条件下37℃培养24h后，所得1mL所含菌落的总数。二、仪器1、高压蒸汽灭菌器2、生化培养箱3、菌落计数器4、pH计或精密pH试纸5、灭菌试管、平皿，刻度吸管，采样瓶等。三、检验步骤1、以无菌操作方法用灭菌吸管吸取1mL充分混匀的水样，注入灭菌平皿中，倾注约15ml以融化并冷却到45℃左右的营养琼脂培养基，并立即旋摇平皿，使水样与培养基充分混匀。每次检验时应做一平行接种，同时另用一个平皿只倾注营养琼脂培养基作为空白对照。2、待冷却凝固后，翻转平皿，使底面向上，置于37℃培养箱培养24h，进行菌落计数，即为水样1mL中的菌落总数。四、菌落计数作平皿菌落计数时，可用菌落计数器检查，以防遗漏，在记下各平皿的菌落数后，应求出同稀释度的平均菌落数，供下一步计算时应用。再求同稀释度的平均数时，若其中一个平皿有较大片状菌落生长时，则不宜采用，而应以无片状菌落生长的平皿作为该稀释度的平均菌落数。若片状菌落不到平皿的一半，而其中一半中菌落数分布又很均匀，则可将此平皿计数后乘2以代表全皿菌落数。然后再求该稀释度的平均菌落数。五、计算和报告计数结果不同稀释度的选择1、首先选择平均菌落数在30～300之间者进行计算，若只有一个稀释度的平均菌落数符合此规范时，则将该菌落数乘以稀释倍数报告之（见表1中实例1） 2、若有两个稀释度，其生长的菌落数均在30～300之间，则视二者之比值来决定，若其比值小于2应报告两者的平均数（如表1中实例2）若其比值大于2应报告其中稀释度较小的菌落总数（如表1中实例3）。若等于2应报告其中稀释度较小的菌落数（如表1中实例4）.3、 若所有的稀释度的平均菌落数均大于300，则应按稀释度最高的平均菌落数乘以稀释倍数报告之（见表1中实例5）4、 若所有的稀释度的平均菌落数均小于30，则应按稀释度最低的平均菌落数乘以稀释倍数报告之（见表1中实例6）5、 若所有的稀释度的平均菌落数均不在30～300之间，则应以最接近30或300的平均菌落数乘以稀释倍数报告之（见表1中实例7）6、 菌落计数的报告：菌落数在100以内时按实有数报告；大于100时，采用两位有效数字，在两位有效数字后面的数值以四舍五入方法计算。为了缩短数字后面的零数也可用10的指数来表示。 [b]表1 稀释度选择及菌落总数报告方式[/b][table][tr][td=1,2][align=center]实例[/align][/td][td=3,1][align=center]不同稀释度的平均菌落数[/align][/td][td=1,2][align=center]两个稀释度菌落数之比[/align][/td][td=1,2][align=center]菌落总数/（CFU/mL）[/align][/td][td=1,2][align=center]报告方式/（CFU/mL）[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]10[sup]-1[/sup][/align][/td][td][align=center]10[sup]-2[/sup][/align][/td][td][align=center]10[sup]-3[/sup][/align][/td][/tr][tr][td][align=center]1[/align][/td][td][align=center]1365[/align][/td][td][align=center]164[/align][/td][td][align=center]20[/align][/td][td][align=center]-[/align][/td][td][align=center]16 400[/align][/td][td][align=center]16 000或1.6×10[sup]4[/sup][/align][/td][/tr][tr][td][align=center]2[/align][/td][td][align=center]2760[/align][/td][td][align=center]295[/align][/td][td][align=center]46[/align][/td][td][align=center]1.6[/align][/td][td][align=center]37 750[/align][/td][td][align=center]38 000或3.8×10[sup]4[/sup][/align][/td][/tr][tr][td][align=center]3[/align][/td][td][align=center]2890[/align][/td][td][align=center]271[/align][/td][td][align=center]60[/align][/td][td][align=center]2.2[/align][/td][td][align=center]27 100[/align][/td][td][align=center]27 000或2.7×10[sup]4[/sup][/align][/td][/tr][tr][td][align=center]4[/align][/td][td][align=center]150[/align][/td][td][align=center]30[/align][/td][td][align=center]8[/align][/td][td][align=center]2[/align][/td][td][align=center]1 500[/align][/td][td][align=center]1 500或1.5×10[sup]3[/sup][/align][/td][/tr][tr][td][align=center]5[/align][/td][td][align=center]多不可计[/align][/td][td][align=center]1650[/align][/td][td][align=center]513[/align][/td][td][align=center]-[/align][/td][td][align=center]513 000[/align][/td][td][align=center]510 000或5.1×10[sup]5[/sup][/align][/td][/tr][tr][td][align=center]6[/align][/td][td][align=center]27[/align][/td][td][align=center]11[/align][/td][td][align=center]5[/align][/td][td][align=center]-[/align][/td][td][align=center]270[/align][/td][td][align=center]270或2.7×10[sup]2[/sup][/align][/td][/tr][tr][td][align=center]7[/align][/td][td][align=center]多不可计[/align][/td][td][align=center]305[/align][/td][td][align=center]12[/align][/td][td][align=center]-[/align][/td][td][align=center]30 500[/align][/td][td][align=center]31 000或3.1×10[sup]4[/sup][/align][/td][/tr][/table]对自来水的检测结果如下：[table][tr][td]接种量[/td][td]10[sup]-1[/sup][/td][td]10[sup]-2[/sup][/td][td]10[sup]-3[/sup][/td][td]10[sup]-1[/sup][/td][td]10[sup]-2[/sup][/td][td]10[sup]-3[/sup][/td][td]10[sup]-1[/sup][/td][td]10[sup]-2[/sup][/td][td]10[sup]-3[/sup][/td][/tr][tr][td]计数结果[/td][td]26[/td][td]10[/td][td]3[/td][td]23[/td][td]9[/td][td]3[/td][td]25[/td][td]10[/td][td]2[/td][/tr][tr][td]菌落总数CFU/mL）[/td][td=3,1]260[/td][td=3,1]230[/td][td=3,1]250[/td][/tr][/table]六、结论 此方法均符合GB/T5750.12-2006七、注意事项 1、所有玻璃器皿如试管、平皿，刻度吸管，采样瓶等都应灭菌。 2、做样品稀释的液体，每批都要有空白对照。 3、计数时应仔细观察

Spiral DS+ 全自动快速螺旋接种仪 Spiral.方法容许迅速落菌计数，避免全部或部分中间稀释。 一个用对数减少容量的样品被分配在阿基米德旋腺旋转的有盖培养皿表面。 有盖培养皿上每个点的容量都能被校准并知晓。 菌落浓度由分离菌落数量决定，这些菌落是通过培养皿相同区域中容量的分配来发现的。 特色： 不锈钢制，易于清理 节省有盖培养皿、琼脂、吸量管 100%自动样品采集、消毒、冲洗 连续器皿：5*50ul电镀，在一个回圈中250ul 的标本被 采集 50或100ul标本被分注于同一器皿中，样本浓度更强 操作模式：自动、半自动、手动 镀层模式：标准指数、慢指数、成比例、均衡和菌台 许多安全特色 高消毒和液体储存容量 计数范围： 90mm有盖培养皿：200到400,000cfu/ml 150mm有盖培养皿：达到4,000,000 应用领域： 食品控制、杀菌、MIC、药物、化妆品（盘查检验）等 技术规格： 微电脑处理盘子直径：90至150mm 分注量：20至100ul 计数范围(cfu/ml)：约4.10. 分注时间：8秒 真空要求：50至70cm/Hg 重量：22kg 尺寸（长*宽*高）：60*28*40cm 电源：220V/50Hz/150VA CE -------------------------------------------------------------------上海智理科学仪器有限公司 http://www.wisdomsci.net 021-51695868

菌落总数的快速测定方法1 适用范围：可用于各类食品及原料中菌落总数的测定。也可用于与食品接触的容器、操作台和其他设备表面的卫生检测。2 方法原理：将营养培养基、凝胶和氯化三苯基四氮唑（TTC）显色剂等加载在试纸片，经加样、培养后，细菌菌落在测试片上显现出红色菌斑，通过计数报告结果。3 操作方法3.1样品处理：无菌称取样品25g（或25mL）放入含有225mL无菌生理盐水的采样瓶或均质杯内，经充分振摇（均质）做成1:10的稀释液。用1mL灭菌吸管吸取1:10稀释液1mL，注入含有9mL灭菌生理盐水的试管内，用1mL灭菌吸管反复吸吹制成1:100的稀释液。以此类推，做出1:1000等稀释度的稀释液，每个稀释度更换一支灭菌吸管。3.2接种：一般食品选2～3个稀释度进行检测，含菌量少的液体样品（如食用纯水和矿泉水等）可直接用原液检测。将测试片放在水平台面上，揭开上面的透明薄膜，用灭菌吸管吸取样品原液或稀释液1mL，均匀加到中央的纸片上，轻轻将上盖膜放下，静置5 min使培养基凝固，最后用手轻轻地压一下。每个稀释度接种两片。3.3培养：将测试片叠在一起放回原自封袋中，透明面朝上水平置于恒温培养箱内，堆叠片数不超过12片。培养温度为36℃±1℃，培养15～24h。4 结果判断与计数：4.1细菌在纸片上生长后会显示红色斑点，选择菌落数适中（10个～100个）的纸片进行计数，乘以稀释倍数后即为每克（或毫升）样品中所含的细菌菌落总数。菌落数在100以内时，按实有数报告。大于100时，用二位有效数字，二位有效数字后面的数字，以四舍五入方法计算，并以10的指数来表示。4.2计数原则与报告方式4.2.1通常选择菌落在10个～100个之间的纸片进行计数，乘以稀释倍数报告之（见下表中例次1）。国家标准菌落总数报告方式术语为cfu/g或mL，cfu的含义为菌落形成单位。4.2.2若有两个稀释度的菌落数在10个～100个之内，两者的比值小于2，则取其平均数，若大于2，则采用稀释度小者报告（见下表中例次2和例次3）。4.2.3若三个稀释度的菌落数都有在10个～100个之内时，应选择二个低数值的平均数（见下表中例次4）。4.2.4若三个稀释度的菌落数均小于10个或大于100个时，应重新试用更低或更高的稀释度进行菌落计数；或采用均小于数量标准的最小值，或采用均大于数量标准的最大值（见下表中例次5和例次6）。 例次稀释度两稀释 度之比选定计数 稀释度报告方式 （个/g或 个/mL）10-110-210-31 2 3 4 5 6158 208 265 98 8 295

全自动菌落计数器因其计数准确、自动化程度高、可留存样品信息、使用方便，一般可在数秒内统计出样品菌落数、性价比高等优点，而受到众多企业、医院、科研院所的喜爱，但是由于全自动菌落计数器的科技含量较高，如果选型出现问题，对日后的检验、科研工作会带来很大不便，所以最好的办法就是在挑选时一定要挑选一台满足使用需求的菌落计数器，那如何选购一款优质的菌落计数器呢？ 一、根据实际使用需求来确定CCD传感器的档次很多用户偏向于选择像素高的菌落计数器，却没考虑到检验和科研的实际应用需求，所以用户在选购前就要确定好自己要买多少像素的CCD传感器。 二、看图像采集通道功能，指标越多越好所谓"图像采集通道"，就是菌落计数器对于样品信息的获取能力，也就是标志着菌落计数器开始计数统计前的初始信息是否真实可靠。如果图像采集通道功能过于单一，那当后期计数时时会很容易出现误判，所以"图像采集通道"指标越多越好。指标响应时间越小，则标志着该菌落计数器获取样品信息的能力越强。

请问一下，有做过粪大肠菌群菌落计数的么？结果是用CFU/g(ml)表示的。有看到说是用BAM Chapter 4 里的方法，但我看了，只有大肠菌群和E.coli的菌落计数方法，没有说粪大肠的啊！救命～～～

如题，目前国家没有关于菌落计数器的校准规程，有的校准机构使用JJG 511-1987对菌落计数器进行校准，但我认为这个跟照度计是八字都打不到一块去的东西，这样的校准无任何意义！还有的校准规程使用什么线性校准内容，结果把我这个外行给忽悠了！那么请教一下校准行业的专家学者，请问校准领域内对菌落计数器是如何规定？大家一般都采用什么校准规程合适呢？既然国家没有菌落计数器的校准规程，是否可以对菌落计数器不进行校准呢？请专家解释说明一下！

我都不知道该怎么说好，我们局长不知道从哪弄了个什么项目，是关于上游水库的，让我们给分析，昨天晚上送来三个，是临时用车里的矿泉水瓶子采的样，本来说没带无菌瓶就不分析总大肠菌群和菌落总数了，可是今天早上又变卦了，又要分析这两荐，我和科长跟他争辩，不用无菌瓶采数值做出来也不准，局长告诉我们，不管那些，只要做出数就行。我当时感叹了一句：[color=#827e7f][size=5]这是上帝派来整我的啊[/size][/color]。[img]http://simg.instrument.com.cn/bbs/images/brow/em09501.gif[/img]没办法，我又现烘的管子，现配的试剂，终于在下午14：30分析完毕。这水样是前一天采的，放在保鲜柜里了，然后第二天下午分析总大肠菌群和菌落总数，你们说这数能准吗？

做菌落计数时有的点很小，要计吗？有的在表面，有的在培养基下面，这些菌有区别吗，是否和氧的需求有关，都要计数吗？因为听过一种理论说抹不掉的就不要计。以上，烦请指教。

菌落计数器是全自动较好还是计数的好

aColyte 自动菌落计数仪，大家有人在用吗？ 可以分享一下用后感么。。。。。。

请问各位同行，菌落总数检测，10的负2结果为菌落蔓延，10的负3结果 15 28，最后的报告是要以负2 还是负3的为准。。。。。

怎样选全自动菌落计数器

RTAC-1型菌落计数仪为我公司推出的普及型菌落计数仪。其目标是在保证计数快速准确的同时，为客户提供满足基本菌落技术需求的经济、高效、可靠的设备。 RTAC-2型菌落计数仪是一款一体型菌落计数系统，采用嵌入式一体化设计，集成运算和显示系统（10.4寸彩色触摸显示屏）用户无需另行配置计算机，体积小，占用空间少，适合于面积有限的实验室。计数准确快捷，新增一键计数模式，对于污染较重的平皿也能有效识别。价位适中，由于一体化设计，提高了性价比，能满足用户对设备计数快速、使用方便、性能稳定的需求。 RTAC-3型菌落计数仪是瑞韬科技2010年新推出的工业级高效菌落计数装置。独家采用大范围宽光带，大容量样品仓，可同时对多个平皿进行计数。大大提高了计数效率，减轻了检验人员的工作量。适合单批处理平皿数大于200的生产型企业及检验机构。

本课内容：菌落总数测定的一些要点根据食品卫生标准要求和对样品污染情况的估计，选择2~3个稀释度。加入样品时要注意外来的污染。培养基倾注的温度与厚度是实验正确与否的关键。（倾注的温度：一般35~45℃，温度过高会造成已受损伤的菌细胞死亡。厚度：直径9cm的平皿一般要求15~20mL培养基，若培养基太薄，在培养过程中可能因水分蒸发而影响细菌的生长）。为防止细菌增殖及产生片状菌落，在加入样液后，应在15min内倾注培养基。检样与培养基混匀时，可先向一个方向旋转，然后再向相反方向旋转。旋转中应防止混合物溅到皿边的上方。l培养基凝固后，应在尽快将平皿翻转培养，保持琼脂表面干燥，尽量避免菌落蔓延生长，影响计数。l为控制污染，在实验过程中，应在工作台上打开一块琼脂平板，其暴露时间应与检样从制备、稀释到加入平皿时所暴露的最长时间相当，然后与检样一同培养，以了解检样在操作过程中有无受到来自外界的污染。培养温度:每种不同样品中的细菌都有一定的生理特性，培养时应用不同的营养条件及生理条件可能得出不同的结果，因而应根据检测标准的要求选择适当的培养温度和培养时间。l食品：36±１℃，48±2h 。l饮用水：36±１℃，48h 。l水产品：30±１℃，72±3h。(36℃培养和30℃培养结果差别较大，同样水产品48h结果和72h也有差别。对照试验：l检样的稀释液中往往带有食品颗粒，在这种情况下，为避免与细菌菌落混淆，可作一检样对照，不经培养，置4℃环境放置，在计数时用于对照。l或可选用TTC营养琼脂作培养基。菌落计数：l如果高稀释度平板上的菌落数比低稀释度平板上的菌落数高，则说明检验过程中可能出现差错或样品中含抑菌物质，这样的结果不可用于结果报告。l如果平板上出现链状菌落，菌落间没有明显的界限，这可能是琼脂与检样混匀时，一个细菌块被分散所造成的。一条链作为一个菌落计。若培养过程中遭遇昆虫侵入，在昆虫爬行过的地方也会出现链状菌落，也不应分开计数。l如果平板上菌落太多，不能计数时，不能用多不可计作报告。应在最高稀释度平板上任意选取2个1cm2的面积，计算菌落数，除2求出每cm2面积内平均菌落数，乘以63.6(皿底面积cm2数)。l如果检样是微生物类制剂（酸牛奶、酵母制酸性饮料等），在进行菌落计数时应将有关微生物（乳酸菌、酵母菌）排除，不可并入检样的菌落总数内作报告。每个样品从开始稀释到倾注最后一个平板的时间不得超过15min,目的是为了使菌落能在平板上均匀分布，否则，时间放长了，样液可能由于干燥而贴在平板上，倾注琼脂后不易摇开，容易产生片状菌落，影响菌落计数。另外，琼脂凝固后不要在室温长时间放置，应及时将平皿倒置培养，可避免菌落的蔓延生长。检验过程中应用稀释液做空白对照，用以判定稀释液、培养基、平皿或吸管可能存在的污染。同时，检验过程中应在工作台上打开一块空白的平板计数琼脂，其暴露时间应与检验时间相当，以了解检样在检验过程中有无受到来自空气的污染。检样稀释液有时带有食品颗粒，为避免与细菌发生混淆，可以作一检样稀释液与平板计数琼脂混合的平皿，不经培养，于4℃冰箱放置，以便在计数时用作对照。另外也可以在已熔化而保温在45℃水浴内的平板计数琼脂中，按100ml加1ml0.5%氯化三苯四氮唑（TTC）水溶液，培养后食品颗粒不变色，细菌为红色。