孔雀石绿测定仪

测定水产补品中孔雀石绿和隐性孔雀石绿时，只出一个峰，帮帮忙出点主意

由于孔雀石绿和无色隐性孔雀石绿均为脂溶性化合物,在鱼体内和环境中残留时间长,并有致突变、致畸和致癌的危险性,因此其是否可作为水产养殖业中使用的兽药在国际上引起了争论。加拿大于1992 年就禁止其作为鱼场杀菌剂使用,且加拿大和美国均规定在食用鱼等水产品中禁止检出孔雀石绿和无色隐性孔雀石绿。欧盟于2002 年6 月颁布法令禁止其在作为食品鱼的鱼场中使用, 我国也于2002 年5 月将孔雀石绿列入《食品动物禁用的兽药及其化合物清单》中。但是,事实上,包括我国和英国在内的许多禁用孔雀石绿的国家,从对市场上销售的鱼类等水产品中孔雀石绿的监测情况来看,仍有在鱼场中非法使用孔雀石绿的现象。 基于这些在水产养殖业中非法使用孔雀石绿的现象,各国政府和消费者密切关注，由此引发各国加大力度进行孔雀石绿的监督检查,同时形成一些标准的检测体系。(一)我国的检测标准【 标准编号 】GB/T 19857—2005 【 标准名称 】水产品中孔雀石绿和结晶紫残留量的测定【 英文名称 】 Determination of malachite green and crystal violet residues in aquatic product【 起草单位 】上海出入境检验检疫局；厦门出入境检验检疫局；广东出入境检验检疫局；福建出入境检验检疫局；江苏出入境检验检疫局；北京出入境检验检疫局；宁波出入境检验检疫局。【 发布日期 】 2005-09-05【 实施日期 】 2005-09-05 【 标准编号 】 SC/T 3021-2004【 标准名称 】 水产品中孔雀石绿残留量的测定.液相色谱法【 英文名称 】 Determination of malachite green residues in fishery products High-performance of liquid chromatography【 起草单位 】 中国海洋大学 国家水产品质量监督检验中心【 发布日期 】 2004-01-17【 实施日期 】 2004-03-01 【 标准编号 】SN/T 1479-2004【 标准名称 】进出口水产品中孔雀石绿残留量检验方法【 发布日期 】2004-11-17【 实施日期 】2005-04-01【 发布单位 】国家质量监督检验检疫总局（二）美国的检测标准1.美国FDA规定的孔雀石绿及其代谢产物实验室检测标准 【 标准编号 】 LIB4363【 标准名称 】鱼和虾中孔雀石绿和隐性孔雀石绿的LC-VIS法和[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]LC-MS[/color][/url]n法【 英文名称 】 Quantitative and Confirmatory Analyses of Malachite Green and Leucomalachite Green Residues in Fish and Shrimp【 起草单位 】U.S. Food and Drug Administration, Animal Drugs Research Center, Denver, CO【 发布日期 】 2005-11 【 标准编号 】LIB4333【 标准名称 】测定和确认鲑鱼中隐性孔雀石绿的[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]LC-MS[/color][/url]方法【 英文名称 】Determination and Confirmation of Leucomalachite Green in Salmon: Laboratory Information Bulletin 4333【 起草单位 】Animal Drugs Research Center, Food and Drug Administration, Denver, CO【 发布日期 】2004-11 【 标准编号 】LIB4334【 标准名称 】快速液相色谱法测定鲑鱼中孔雀石绿和隐性孔雀石绿的方法【 英文名称 】Determination of Malachite Green and Leucomalachite Green in Salmon with In-Situ Oxidation and Liquid Chromatography with Visible Detection【 起草单位 】Food and Drug Administration, Animal Drugs Research Center Denver Federal Center, P.O. Box 25087 Denver, CO 80225-0087【 发布日期 】2004-11 【 标准名称 】美国FDA关于孔雀石绿检测方法4333和4334的补充【 英文名称 】Amendment: Application of Laboratory Information Bulletins 4333 and 4334 for the Determination of Leucomalachite Green and Malachite Green Residues in Catfish, Basa, Tilapia, Trout, and Shrimp 【 发布日期 】 2005-10 2. 美国AOAC协会期刊规定的液相色谱检测方法（J.AOAC Int.1995,78(6):1388-1393 ） 该方法常被等同采用。（三）日本修订孔雀石绿限量标准2006年5月30日，日本厚生劳动省发布食安发第0530002号通知，根据食品卫生法（1947年第233号法律）第11条第1项的规定，规定动物用医药品孔雀石绿是一种食品中不得含有的成分，并制定了孔雀石绿的试验方法，且试验方法的分析对象为孔雀石绿及隐性孔雀石绿。 该修订公布六个月后生效，即2006年11月30日起生效。 此次修订重新制定了孔雀石绿的试验方法，同时向《修订后食品卫生法第11条第3项的相关法令的调整》（2005年11月29日食安发第1129001号当职通知）的附表3中追加如下内容，自2006年11月30日起生效。 农药名称 检出界限（ppm） 孔雀石绿* 0.002 *孔雀石绿的分析对象包括：孔雀石绿及无色孔雀石绿（孔雀石绿的代谢物） 此次修订生效前，暂且施行厚生劳动省制订的一项标准，限量0.01ppm（2005年厚省劳动省告知第497号）。

最近发现的，跑氘代孔雀石绿、隐色孔雀石绿内标时（里面不含孔雀石绿和隐色孔雀石绿）竟然出现了孔雀石绿和隐色孔雀石绿本底，响应值还不低，这是怎么回事？？[font=&]配置了一个乙腈+水+2种内标混标，内标能打出来的同时，也能打出不低响应值的孔雀石绿和隐色孔雀石绿，但是乙腈+水进样，就没有任何本底了。[/font][font=&]之前怀疑是标的问题，可是换了另一家的还是一样啊。[/font][font=&]只要加了氘代孔雀石绿、隐色孔雀石绿内标，就能出孔雀石绿、隐色孔雀石绿的峰。求救！[/font]

[img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=152821]饲料中孔雀石绿和隐形孔雀石绿含量的液相色谱-串联质谱测定方法[/url]摘要建立了超高效液相色谱一串联四级杆质谱法测定饲料中孔雀石绿和隐性孔雀石绿的含量。用乙腈提取，提取液经蒸干浓缩后用中性氧化铝和阳离子交换固相萃取柱净化，使用u．PLC—MS／M进行检测。色谱条件：ACQUITY uPLC M BEH C】8柱(2．1 innl×100 rain i．d．，1．7 )，流动相乙腈0．1％甲酸溶液，梯度洗脱流速O．3 mL／min。采用电喷雾串联四极杆质谱检测。结果表明，孔雀石绿和隐性孔雀石绿的浓度为1～500 ng／mL时线形良好，在1～100 g／kg的添加水平条件下平均回收率为68．5％ ～91．6％ ，该方法的检测限为1．0／zg,／kg。

最近最孔雀石绿实验，是用乙腈提取，过酸式氧化铝柱，液质分析，分别加孔雀石绿、隐性孔雀石绿各20ppb，最终结果孔雀石绿6ppb，隐性孔雀石绿26ppb，这个结果怎么解释？是孔雀石绿转化了吗。在第二天又单独加一个孔雀石绿回收，孔雀石绿4ppb，隐性孔雀石绿几乎没有，这个又怎么解释呢。

孔雀石绿、无色孔雀石绿，结晶紫、无色结晶紫；丙烯酰胺测定资料有需要的与我联系！QQ：93737852e-mail:lanshuyan@163.com

（现行有效）GB/T19857-2005 水产品中孔雀石绿和结晶紫残留量的测定（现行有效）GB/T20361-2006 水产品中孔雀石绿和结晶紫残留量的测定 高效液相色谱荧光检测法（现行有效）NY/T1756-2012 饲料中孔雀石绿的测定（现行有效）SN/T1768-2006 水产品中孔雀石绿和结晶紫及其代谢产物的快速测定方法（现行有效）SN/T3540-2013 出口食品中多种禁用着色剂的测定 液相色谱-质谱/质谱法（现行有效）SC/T3021-2004 水产品中孔雀石绿残留量的测定 液相色谱法（现行有效）DB13/T1358-2011 养殖用水中孔雀石绿快速测定方法 激光拉曼光谱法（现行有效）DB21/T2288-2014 养殖水体中孔雀石绿残留量的测定 液相色谱串联质谱法（现行有效）DB22/T1617-2012 饲料中孔雀石绿、隐色孔雀石绿、结晶紫和隐色结晶紫的测定液相色谱-质谱/质谱法（暂无文本）（现行有效）DB34/T1421-2011 水产品中孔雀石绿及其代谢物残留量的快速筛选测定 酶联免疫法（现行有效）DB37/T1780-2011 水产苗种中孔雀石绿、结晶紫、亚甲基蓝及其代谢物残留量的测定 液相色谱法（暂无文本）（已作废）NY/T1756-2009 饲料中孔雀石绿的测定（已废止）SN/T1479-2004 进出口水产品中孔雀石绿残留量检验方法（已废止）DB33/T598-2006 水产品中孔雀石绿及其代谢物残留量的测定——液相色谱-串联质谱法（已废止）DB44/T526-2008 水产种苗中孔雀石绿残留量的测定 液相色谱荧光法（2016-10-31废止）（暂无文本）（已废止）DB44/T539-2008 水产品中孔雀石绿残留量的快速测定 液相色谱法（2016-10-31废止）（暂无文本）（已废止）DB44/T570-2008 水体中孔雀石绿残留量的测定—液相色谱荧光法（2016-10-31废止）（暂无文本）（已废止）DB44/T573-2008 底泥中孔雀石绿残留量的测定—液相色谱荧光法（2016-10-31废止）（暂无文本）

最近做孔雀石绿等项目，发现孔雀石绿、隐色孔雀石绿都不存在空白干扰问题，但这两者的内标，空白干扰太高了。用全新的乙腈，直接装入进样小瓶，也会出很高的峰。考虑过仪器污染的问题，但孔雀石绿和隐色孔雀石绿反而没有干扰，所以目前还找不到原因。有版友遇到过吗？

今天做孔雀石绿 有些关于质谱的问题 想请教一下流动相是 乙腈：5mM乙酸铵 混标包括：孔雀石绿 银色孔雀石绿 结晶紫 隐色孔雀石绿-d55ppb是出峰正常，基线很平但做到0.5ppb或者更低时出现问题：1. 结晶紫 372-356 出峰后基线一路往上漂 飘得很高（杂峰很多）2.隐色孔雀石绿 331-316 基线及噪音很高 把峰给抬高很多求解答 谢谢

我用SN/T 1768-2006 水产品中孔雀石绿和结晶紫及其代谢产物的快速测定方法检测（质谱法） 检出隐色孔雀石绿，但是没有检出孔雀石绿，而且查不到相关的限量，或者是怎样转化为孔雀石绿，，有没有大侠帮下小弟

本人新人一枚，正在做孔雀石绿的[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]液质[/color][/url]方法。结果发现无论是氘代孔雀石绿还是孔雀石绿都有很严重的拖尾现象（10 ng/ml），但隐形孔雀石绿没有。尝试过调整乙酸铵的比例，进样量，标准品浓度，结果都没有解决。请各位大神给点意见。前一个峰为孔雀石绿，后一个为隐形孔雀石绿。[img]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/01/201801241936445882_6318_3255643_3.jpeg[/img]

本人需要求购测定孔雀石绿的材料,是用国标法测定的,测定所需柱要国产的.希望供应商能给我一个带价格的清单和联系电话,联系邮箱:pength_123@163.com.多谢帮忙!!!

SN/T 1768-2006 水产品中孔雀石绿和结晶紫及其代谢产物的快速测定方法 [img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=65371]孔雀石绿行标[/url]

[img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=102826]高效液相色谱法同时测定海水中孔雀石绿和无色孔雀石绿[/url]

我们公司现在是做水产的，现在检查项目有孔雀石绿，但是我们感觉做孔雀石绿不好做，效果不是很好，现在我们是用1%甲酸-乙腈提取离心后过中性氧化铝柱装进样瓶进样。图谱走出了效果还不错但是对柱子影响太大，一根柱子用不了三个月就坏了，现在想请教大家你们是怎么做孔雀石绿的啊

[color=#dc143c][size=2]维权声明：本文为rogersw原创作品，本作者与仪器信息网是该作品合法使用者，该作品暂不对外授权转载。其他任何网站、组织、单位或个人等将该作品在本站以外的任何媒体任何形式出现的，均属侵权违法行为，我们将追究法律责任。[/size][/color][align=center][b][size=5][font=宋体]水产品中孔雀石绿[/font][font=Times New Roman],[/font][font=宋体]隐色孔雀石绿残留量[/font][/size][/b][/align][align=center][b][size=5][font=宋体]测定方法验证报告[/font][/size][/b][/align][size=3][font=Times New Roman]1[/font][font=宋体].[/font][font=宋体]目的[/font][font=宋体]验证水产品中孔雀石绿残留量测定的方法（[/font][font=Times New Roman]GB/T 19857-2005[/font][font=宋体]）在本试验室的适用性。[/font][font=宋体]2.[/font][font=宋体]方法内容[/font][font=宋体]2.1 [/font][font=宋体]范围[/font][font=宋体]本方法规定了[/font][font=宋体]水产品中孔雀石绿[/font][font=Times New Roman],[/font][font=宋体]隐色孔雀石绿残留量测定的方法[/font][font=宋体]。[/font][font=宋体]2.2[/font][font=宋体]试剂[/font][font=宋体]同[/font][font=Times New Roman]GB/T 19857-2005[/font][font=宋体]方法中3.2中试剂。[/font][font=宋体]2.3[/font][font=宋体]仪器[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]高效液相色谱仪：WATERS2695带2996二极管阵列检测器。[/font][font=宋体]2.4 [/font][font=宋体]分析步骤[/font][font=宋体]同[/font][font=Times New Roman]GB/T 19857-2005[/font][font=宋体]方法中[/font][font=Times New Roman]3.4[/font][font=宋体]中分析步骤[/font][font=Times New Roman]2.5[/font][font=宋体]色谱条件：[/font][font=宋体]色谱柱：NovapakC-18 3.9mm(i.d)×150mm,5um加柱后氧化柱[/font][font=宋体]留动相：乙腈+乙酸铵（0.05mol/L,PH=4.5）=65+35[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]流量：1.0ml/min[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]进样量：50ul[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]二极管阵列检测器，波长扫描范围：200nm～650nm，定量波长618nm。[/font][font=宋体]3. [/font][font=宋体]验证结果[/font][font=宋体]3.1[/font][font=宋体]线性范围[/font][font=宋体]吸取1000.0ug/ml的孔雀石绿，隐色孔雀石绿储备液,分别配制0.01ug/ml，0.04ug/ml，0.1ug/ml，0.4ug/ml，1.0ug/ml，5个浓度系列的标准工作液。按照方法仪器条件,注入高效液相色谱仪，以峰面积比较进行定量，作绘制成标准曲线。[/font][/size][size=3][font=宋体]表1：孔雀石绿标准回归[img=700,400]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2010/07/201007161645_231077_1627713_3.gif[/img][/font][/size]

亲爱的小伙伴们，你们做完孔雀石绿的瓶子都用什么洗的呀？我这试剂空白和样品空白都有孔雀石绿是被污染了么？做的时候还挺注意的呢，都是一次性的吸管不重复使用。

求助各位大虾，孔雀石绿出峰后，为什么在隐性孔雀石绿的rt上又出了一次峰？调整流动相也消除不了，哪位能给解答一下呢？到底是什么原因？

我们现在开始做孔雀石绿！想用阳性交换固相萃取小柱的方法，但国际太麻烦了，我曾经听说，有方法可以直接提取样品后，把样品液过固相萃取小柱就可以的，请问谁知道呢？我试做了很多方法，但回收很不稳定！而且结晶紫和隐色结晶紫的回收率和孔雀石绿和隐色孔雀石绿的内标回收率不一致，造成结晶紫的结果不准确？请问有谁做过的呢？

我用高效液相做孔雀石绿有一段时间，但总是不能把隐色孔雀石绿和隐色结晶紫的峰分开，请教各位专家有什么方法可以将其分开

流动相：乙酸铵：乙腈（0.1%甲酸）配标溶液：乙腈图1:8月15日配制跑的图的定量图图2:流动相图3:10月31日隐性孔雀石绿100ug/ml定性图（重新称量配制，之前冰箱停电7天，储备液不能用）图4:单标隐性孔雀石绿100ug/ml定量图图5:单标隐性孔雀石绿100ug/ml定量图，但是却检出孔雀石绿隐性孔雀石绿开封后用封口膜封上，常温干燥器中保存也容易氧化降解吗？[img=,690,517]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/10/202210311313178837_3987_5595741_3.png[/img][img=,690,517]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/10/202210311313306243_2274_5595741_3.png[/img][img=,690,517]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/10/202210311314034736_9324_5595741_3.png[/img][img=,690,517]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/10/202210311314105064_2880_5595741_3.png[/img][img=,690,517]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/10/202210311314377934_6486_5595741_3.png[/img]

液谱条件：流动相：乙腈：水=9：1 流速：1.00ml/min 检测波长：618nm 柱温：室温 柱子：C18为什么检测不出孔雀石绿呢？（决不是浓度的问题） 我购买的孔雀石绿的分子量为什么是927这与它的分子式不符呀

水产品中孔雀石绿残留量的测定 液相色谱法[img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=15011]SC/T 3021—2004[/url]说明一下：柱后氧化柱好象安谱有得卖，没有柱后氧化柱可以做孔雀石绿，但是不能做隐色孔雀石绿。

求助！！问题1：检测孔雀石绿时加入盐酸羟胺溶液是为了防止隐形孔雀石绿氧化成孔雀石绿吗？问题2：加入对甲苯磺酸这个离子对试剂是什么作用？问题3：检测时水溶液的PH要控制在什么范围？是不是碱性条件下孔雀石绿就生成了醇碱了，影响结果？求大神解答！！！

Hp[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]LC-MS[/color][/url]/ms中孔雀石绿与隐色孔雀石绿检测问题　　去年底换了个新柱子，跟以前一模一样的，这几个月来孔雀石绿的回收率都好低，隐色的倒很好，新配的孔雀石绿和隐色孔雀石绿的标准品(外标)，本来是孔雀石绿的色谱峰响应值比隐色孔雀石绿的大，但是放一个(4度下)晚上，就倒过来了，请问各位朋友，怎么样校正下能使孔雀石绿的回收率提高?谢谢了!

[color=#f10b00]去年底换了个新柱子，跟以前一模一样的，这几个月来孔雀石绿的回收率都好低，隐色的倒很好，新配的孔雀石绿和隐色孔雀石绿的标准品（外标），本来是孔雀石绿的色谱峰响应值比隐色孔雀石绿的大，但是放一个（4度下）晚上，就倒过来了，请问各位朋友，怎么样校正下能使孔雀石绿的回收率提高？谢谢了！[/color]

孔雀绿与孔雀石绿是不是同一种物质？如果不是同一物质，请老师给出它们的结构式。非常感谢！

有这样一个问题请教各位老师。孔雀石绿（包括显性及阴性孔雀石绿和结晶紫）在水产品中的残留，除了养殖和运输过程中用药导致有残留，还有没有可能在加工生产过程中有污染？如果有，一般是什么途径？大家是否遇到过此类问题？查一些资料，说是，记号笔等都有可能污染，不知道大家的情况怎样？