硅胶固相萃取柱 500mg/3mL 和500mg/6ml 有什么区别 可以互用吗 还有 实验中 这些柱子怎么选择,规格比如柱容量 和体积
GPC凝胶净化色谱/SPE固相萃取/定量浓缩联用仪,在实验室内的前处理效果不知道怎么样?瑞士布奇有一款多样品定量浓缩仪,不知道这款仪器的使用效果怎么样,是不是比GPC凝胶净化色谱/SPE固相萃取/定量浓缩联用仪的前处理效率更高呢?望老师们给予建议。谢谢!!!
买液相色谱的时候一起给了几盒silica硅胶固相萃取柱,但不知道可以用来做什么项目?网上只查到说用来萃取极性物质。
http://simg.instrument.com.cn/bbs/images/brow/em09511.gif大家有使用固相萃取和凝胶净化设备中,对各个步骤,及分离效果,回收率有问题的可以咨询我哦
有文献标准提到先用微波萃取或者超声波萃取,后用硅胶固相萃取小柱净化咨询各位大神两个问题,1. 微波萃取和超声波萃取都能使用的话,是不是超声波萃取仪价格更低,能否用超声波清洗仪替代。2. 硅胶固相萃取小柱是不是必须连接固相萃取仪使用,活化、上样或净化怎么操作。谢谢
最近单位在做农残的测量,请问下毛细柱和填充柱前处理的区别很大么,我们现在买了固相萃取柱,规格为1000mg/6ml,能否代替凝胶净化装置,样品如何处理。
国标5009.19中食品中有机氯农药多组分残留量的测定中,采用凝胶色谱层析纯化,用哪种固相萃取柱可替代?
使用固相萃取C18小柱萃取尿液中多环芳烃,使用了超纯水、甲醇活化,甲醇和超纯水的混合液平衡,加入5mL尿液,之后用正己烷洗脱,收集的液体进行氮吹,但是有好像凝胶一样的东西氮吹不掉。不知道什么原因,恳请各位前辈指点迷津!!!
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兽药残留引发的畜产品安全问题已成为公认的食品安全问题,引起社会的广泛关注。建立简便、快速、灵敏的兽药残留检测方法无疑成为检测和控制兽药残留的重要前提。兽药残留分析是复杂混合物中痕量组分的分析技术,最显著的特点是需要严格的样本前处理步骤。在兽药残留检测中60%~80%的工作量和操作成本花在样品前处理。样品前处理包括液液萃取、离心、沉淀、蒸馏等传统技术和固相萃取、凝胶净化、分子印迹等现代分离技术。传统方法由于自动化程度低、净化效率低、选择性差、成本高、劳动强度大、环境污染严重等缺点而逐渐不能满足兽药残留分析的发展要求。 固相萃取技术由于其溶剂使用量少、操作简单、选择性高、重现性好,已发展成为分离和浓缩各种样品中痕量分析物质的一种强有力的工具。1978 年商用固相萃取柱问世以后,固相萃取技术更被广泛应用于复杂基质的前处理,目前已成为兽药残留分析前处理的主流技术。 1 固相萃取技术基本原理 固相萃取(Solid Phase Extraction,SPE)技术基于液相色谱原理,可近似看作一个简单的色谱过程。原理是利用固体吸附剂将液体样品中的目标化合物吸附,与样品的基体和干扰化合物分离,然后再用洗脱液洗脱或加热解吸附,达到分离和富集目标化合物的目的。固相萃取可分为在线萃取和离线萃取。前者萃取与色谱分析同步完成,而后者萃取与色谱分析分步完成,两者在原理上是一致的。 2 基本操作过程 2.1 柱预处理(柱活化) 用适当的溶剂淋洗SPE 柱,以使吸附剂保持湿润,可以吸附目标化合物或干扰化合物。不同模式固相萃取小柱活化用的溶剂不同,其目的有2 个:一是除去填料中可能存在的杂质;二是使填料溶剂化,提高固相萃取的重现性。 2.2 上样 将液态或溶解后的固态样品倒入预处理后的SPE 柱,然后利用抽真空、加压或离心的方法使样品通过SPE 柱,在该步骤中,分析物被保留在吸附剂上。 2.3 淋洗和洗脱 样品进入SPE 柱、目标化合物被吸附后,视分离模式和样品性质而定,可采用适当的洗脱剂将目标化合物直接淋洗下来;也可先将干扰化合物淋洗掉,再用适当的洗脱剂将目标化合物洗脱,通常采用后一种方法更有利于样品的净化。淋洗和洗脱同上所述,可采用抽真空、加压或离心的方法使淋洗液或洗脱液流过吸附剂。 3 影响因素 3.1 吸附剂 目前常用的吸附剂有正、反相吸附剂、离子交换吸附剂和抗体键合吸附剂等,试验时尽量选择与目标化合物极性相似的吸附剂,其用量大小与目标物性质(极性、挥发性)及其在水样中的浓度直接相关。 3.2 洗脱溶剂 在SPE 中,洗脱溶剂的选择与目标物性质及使用的吸附剂有关,楼蔓藤等给出了常见有机溶剂的极性和洗脱强度,试验过程中可根剧被测物的物理、化学性质选用。洗脱剂体积应以淋洗完全为前提,体积最小的为最佳,可通过多次洗脱法(小体积),根据回收率的变化曲线找到最佳的洗脱液体积,显然,洗脱体积越小富集倍数越高。 3.3 保留体积在加样过程中,保留体积是SPE 技术的关键因素之一,它代表了进行痕量富集时能有效处理的水样体积。根据色谱分析仪的最小检出量和水样中有机物的浓度,可以估算出欲富集的最小水样体积。另外,样液的pH 值也影响样品的吸附效率。 3.4 流速 流速的控制对SPE 至关重要,流速过大将引起SPE 柱的穿漏,流速太小则处理速度太慢。柱预处理过程中流速适中,保证溶液充分湿润吸附剂即可,上样和洗脱过程则要求流速尽量慢些,以使分析物尽量保留在柱内或达到完全洗脱,否则会导致分析物流失,影响回收率的大小。尤其离子交换过程,进行比较缓慢,应采用较低的流速(0.5~2.0 mL/min)。 4 结语固相萃取技术以其既可用于复杂样品中微量或痕量目标化合物的提取,又可用于净化、浓缩或富集的优势,不仅在兽药残留分析领域中担任重要的角色,而且在农药残留中也成为主要的前处理工具。随着人们对食品安全问题的关注,固相萃取技术不断得到发展与完善,多样化、标准化、仪器化和自动化的SPE 样品处理技术越来越成熟,将会更加广泛地应用于复杂样品的前处理中,成为目前样品前处理的主流技术。
固相萃取技术(Solid Phase Extraction, SPE)液液分配(LLE)有许多局限性,例如需要大量不互溶溶剂;样品处理步骤复杂;样品回收率和精密度不理想;处理过程中乳液的形成,和溶剂蒸发时产生的样品损失等等。固相萃取(SPE)主要用于样品分析前的净化或浓缩富集。与传统的液-液萃取相比,由于其采用了高效、高选择性的固定相,能显著减少溶剂用量,简化样品预处理过程,同时所需费用也有所减少,一般来说,固相萃取所需时间为液-液萃取的1/12,费用为液液分配的1/5。固相萃取能用于气相色谱、液相色谱、红外光谱、质谱、核磁、紫外和原子吸收等各种分析方法的样品预处理。正因为固相萃取柱独特的性能,自70年代问世以来,其全球需求量迅速增长。总的来讲,固相萃取法改进了样本制备技术:1可批量进行;2节省时间;3减少溶剂使用和废物产生;4多种键合固定相选择性;5可富集痕量分析物;6可消除乳化现象;7易于自动化;8回收率高、重现性好。一个固相萃取柱由三部分组成:(l)柱管;(2)烧结垫;(3)固定相。柱管由血清级的聚丙烯制成,一般做成注射器形状。一些厂家也提供玻璃的柱管。柱管下端有一突出的头,此头的尺寸已标准化,可用于各种不同的固相萃取多管真空装置。烧结垫除能固定固定相外,也能起一些过滤作用。聚乙烯是常见的烧结垫材料,对于特殊要求也可采用特氟隆或不锈钢片。固定相是固相萃取柱中最重要的部分。最常见的固相萃取固定相是键合的硅胶材料。一般采用孔径60A不规则形状的40u硅胶微粒作为原材料,然后将各种官能团键合上去。也有一些非硅胶基质的固定相被广泛应用。其一般操作步骤是:液态或溶解后的固态样品倒入活化过的固相萃取柱,然后利用抽真空、加压或离心等方式使样品进入固定相。为了同时处理多个样品,往往需要一个固相萃取柱多管真空装置。一般来说,固相萃取柱将保留所需要的组分和类似的其他组分,并尽量减少不需要的样品组分的保留。弱保留组分的样品可用一溶剂冲洗掉,然后用另一溶剂把感兴趣的分析物从固定相上洗脱下来。另外,也可让感兴趣的组分(分析物)直接通过固定相而不被保留,同时大部分干扰物质被保留在固定相上,从而得到分离。在多数情况下,使分析物得到保留更有利于样品净化。固相萃取柱类型1. 键合相技术 (固相分配柱技术)2. 固相吸附柱技术在细的、分散的载体(或固定相)表面涂有一层与流动相互不相溶的固定液或化学键合相,当液体流动相流经固定相时,由于有很大的界面,使分析物和提取物在两相间按分配系数分配。分析物与提取物的分离能力取决于:1.两相间极性的差异 2.物质在两相间的亲和力和溶解度是一种液液分配色谱技术固定相:涂渍在惰性载体上的液体或化学键合在载体上的各种有机基团流动相:与固定相互不相溶的液体流动相中的样品组分在两相间进行平衡分配,由于样品组分在两相中的相对溶解度不同,以不同的速度流出色谱柱而得到分离。选择适宜的固定相和流动相,可对非常广泛样品类型进行分离。目前常用的多为化学键合固定相是利用化反应的方法,通过化学键把不同极性化合物键合到载体表面。先将硅胶进行酸洗、中和、干燥活化,使其表面保持自由硅醇基,如酯化键合:又如聚合键合固定相: 〡 〡 〡 Cl3SiR 〡 〡 〡[
另外,我做固相萃取,结果氮吹仪坏了,固相萃取已经到最后一步了,就差氮吹仪吹干后再用0.25%甲酸溶解了,有什么方法可以替代氮吹仪浓缩的?还有,我的标本做固相萃取,是用2%的甲酸甲醇将我要的蛋白从柱子上洗脱下来的,但是我发现将其置于-80摄氏度的冰箱里竟然不凝固!完全液体状态!这是为什么?甲酸甲醇在零下80℃不凝固的?
一 固相萃取固相萃取(Solid Phase Extraction,SPE)是一种基于液-固分离萃取的试样预处理技术,由柱液相色谱技术发展而来。SPE技术自70年代后期问世以来,由于其高效、可靠及耗用溶剂量少等优点,在环境等许多领域得到了快速发展。在国外已逐渐取代传统的液-液萃取而成为样品预处理的可靠而有效的方法。SPE技术基于液相色谱的原理,可近似看作一个简单的色谱过程。吸附剂作为固定相,而流动相是萃取过程中的水样。当流动相与固定相接触时,其中的某些痕量物质(目标物)就保留在固定相中。这时用少量的选择性溶剂洗脱,即可得到富集和纯化的目标物。固相萃取可分为在线萃取线萃取前者萃取与色谱分析同步完成;而后者萃取与色谱分析分步完成,两者在原理上是一致的。一般固相萃取的操作步骤包括固相萃取柱(即吸附剂)的选择、柱子预处理、上样、淋洗、洗脱。在实验过程中需要具体考虑的因素如下:1)吸附剂的选择a.传统吸附剂在环境分析中最为常用的反相吸附剂较适用于水样中的非极性到中等极性的有机物的富集和纯化。其中有代表性的键合硅胶C18和键合硅胶C8等。该类吸附剂主要通过目标物的碳氢键同硅胶表面的官能团产生非极性的范德华力或色散力来保留目标物。正相吸附剂包括硅酸镁、氨基、氰基、双醇基键合硅胶及氧化铝等,主要通过目标物的极性官能团与吸附剂表面的极性官能团的极性相互作用(氢键作用等)来保留溶于非极性介质的极性化合物。由于其特殊的作用原理,在环境分析中常用于与其它类型的吸附柱联用,吸附去除干扰物,实现样品纯化。离子交换吸附剂则主要包括强阳离子和强阴离子交换树脂,这些树脂的骨架通常为苯乙烯-二乙烯基苯共聚物,主要是通过目标物的带电荷基团与键合硅胶上的带电荷基团相互静电吸引实现吸附的。b.抗体键合吸附剂(Immunosorbents-IS)这类新型吸附剂充分利用了生物免疫抗原-抗体之间的高灵敏性和高选择性,尤其适应于水中痕量有机物的富集与分离。其特点为,由于绝大多数有机污染物为低分子量物质,不能在动物体内引发免疫反应,所以需把待定污染物键合到牛血清白蛋白的生物大分子载体上,使其具有免疫抗原活性,再注入纯种动物体内(如兔或羊),产生抗体,经杂交瘤技术制得相应于该有机污染物的单克隆抗体。将抗体键合到反相吸附剂的硅胶表面或聚合物表面(如C18固定相),就制得了抗体键合吸附剂,可用于分离、富集特定污染物。研制开发能专门检测各种优先污染物的单克隆抗体或多克隆抗体已成为SPE技术的前沿研究领域。抗体键合吸附剂洗脱时一般可采用20%~80%的甲醇-水溶液,该类吸附剂经冷藏保存可多次使用。进行SPE操作时应根据目标物的性质选择适合的吸附剂。表1- 1给除了常用的吸附剂类型及其相关的分离机理、洗脱剂性质和待测组分的性质。吸附剂的用量与目标物性质(极性、挥发性)及其在水样中的浓度直接相关。通常,增加吸附剂用量可以增加对目标物的保留,可通过绘制吸附曲线确定吸附剂用量。
固相萃取(Solid Phase Extraction,简称SPE)是从八十年代中期开始发展起来的一项样品前处理技术。由液固萃取和液相色谱技术相结合发展而来。主要用于样品的分离,净化和富集。主要目的在于降低样品基质干扰,提高检测灵敏度。SPE技术基于液-固相色谱理论,采用选择性吸附、选择性洗脱的方式对样品进行富集、分离、净化,是一种包括液相和固相的物理萃取过程;也可以将其近似地看作一种简单的色谱过程。SPE是利用选择性吸附与选择性洗脱的液相色谱法分离原理。较常用的方法是使液体样品溶液通过吸附剂,保留其中被测物质,再选用适当强度溶剂冲去杂质,然后用少量溶剂迅速洗脱被测物质,从而达到快速分离净化与浓缩的目的。也可选择性吸附干扰杂质,而让被测物质流出;或同时吸附杂质和被测物质,再使用合适的溶剂选择性洗脱被测物质。填料保留杂质固相萃取操作一般有三步(见图2):l活化--除去柱子内的杂质并创造一定的溶剂环境。l上样--将样品转移入柱,此时大部分目标化合物会随样品基液流出,杂质被保留在柱上,l故此步骤要开始收集l洗脱---用小体积的溶剂将组分淋洗下来并收集,合并收集液。此种情况多用于食品或农残分析中去除色素
在做农残检测时,遇到用硅胶萃取柱(淋洗液和洗脱液一样,这不会导致回收率低吗?标准是23200.57),HLB固相萃取柱主要用于除去什么干扰物?它的作用机理是什么?望路过的高手和前辈们指点
对于固相萃取柱不太了解,想问下大家,标准中只说明使用的是填料为苯磺酸强阳离子交换吸附剂,规格为500mg/3ml,这样的话应该选那种固相萃取柱呀?是以硅胶为基质的还是有机聚合物基质的固相萃取柱?谢谢原文是这样的,大家帮忙判断一下吧,谢谢。Pipet 2.0 mL of this solution into a freshly conditioned solid phase extraction column containing benzenesulfonic acid strong cation-exchange packing with a sorbent-mass to column volume ratio of 500 mg per 3 mL, or equivalent, and elute into a 5-mL volumetric flask.
固相萃取(Solid Phase Extraction SPE)就是利用固体吸附剂将液体样品中的目标化合物吸附,与样品的基体和干扰化合物分离,然后再用洗脱液洗脱或加热解吸附,达到分离和富集目标化合物的目的。 与液-液萃取相比固相萃取有很多优点:固相萃取不需要大量互不相溶的溶剂,处理过程中不会产生乳化现象,它采用高效﹑高选择性的吸附剂(固定相),能显著减少溶剂的用量,简化样品于处理过程,同时所需费用也有所减少。一般说来固相萃取所需时间为液-液萃取的1/2,费用为液-液萃取的1/5。其缺点是:目标化合物的回收率和精密度要低于液-液萃取。一. 固相萃取的模式及原理 固相萃取实质上是一种液相色谱分离,其主要分离模式也与液相色谱相同,可分为正相(吸附剂极性大于洗脱液极性),反相(吸附剂极性小于洗脱液极性),离子交换和吸附。固相萃取所用的吸附剂也与液相色谱常用的固定相相同,只是在粒度上有所区别。 正相固相萃取所用的吸附剂都是极性的,用来萃取(保留)极性物质。在正相萃取时目标化合物如何保留在吸附剂上,取决于目标化合物的极性官能团与吸附剂表面的极性官能团之间相互作用,其中包括了氢键,π—π键相互作用,偶极-偶极相互作用和偶极-诱导偶极相互作用以及其他的极性-极性作用。正相固相萃取可以从非极性溶剂样品中吸附极性化合物。 反相固相萃取所用的吸附剂通常是非极性的或极性较弱的,所萃取的目标化合物通常是中等极性到非极性化合物。目标化合物与吸附剂间的作用是疏水性相互作用,主要是非极性-非极性相互作用,是范德华力或色散力。 离子交换固相萃取所用的吸附剂是带有电荷的离子交换树脂,所萃取的目标化合物是带有电荷的化合物,目标化合物与吸附剂之间的相互作用是静电吸引力。固相萃取中吸附剂(固定相)的选择主要是根据目标化合物的性质和样品基体(即样品的溶剂)性质。目标化合物的极性与吸附剂的极性非常相似的时,可以得到目标化合物的最佳保留(最佳吸附)。两者极性越相似,保留越好(即吸附越好),所以要尽量选择与目标化合物极性相似的吸附剂。例如:萃取碳氢化合物(非极性)时,要采用反相固相萃取(此时是非极性吸附剂)。当目标化合物极性适中时,正﹑反相固相萃取都可使用。吸附剂的选择还要受样品的溶剂强度(即洗脱强度)的制约。 样品溶剂的强度相对该吸附剂应该是较弱的,弱溶剂会增强目标化合物在吸附剂上的保留(吸附)。溶剂强度在正﹑反固相萃取中的顺序是不同的(见图3—13)。如果样品溶剂的强度太强,目标化合物将得不到保留(吸附)或保留很弱。例如:样品溶剂是正己烷时用反相固相萃取就不合适了,因为正己烷对反相固相萃取是强溶剂(见图3—13),目标化合物将不会吸附在吸附剂上;当样品溶剂是水时就可以用反相固相萃取,因为水对反相固相萃取是弱溶剂,不会影响目标化合物在吸附剂上的吸附。固相萃取选择分离模式和吸附剂时还要考虑以下几点:1. 目标化合物在极性或非极性溶剂中的溶解度,这主要涉及淋洗液的选择。2. 目标化合物有无可能离子化(可用调节pH 值实现离子化),从而决定是否采用离子交换固相萃取。3. 目标化合物有无可能与吸附剂形成共价键,如形成共价键,在洗脱时可能会遇到麻烦。4. 非目标化合物与目标化合物在吸附剂上吸附点上的竞争程度,这关系到目标化合物与干扰化合物是否能很好分离。二. 固相萃取常用的吸附剂(固定相) 鉴于固相萃取实质上是一种液相色谱的分离,故原则上讲,可作为液相色谱柱填料的材料都可用于固相萃取。但是,由于液相色谱的柱压可以较高,要求柱效较高,故其填料的粒度要求较严格,过去常用10μm粒径填料,现在高效柱多用5μ的m填料,甚至用了3μm的填料(随着HPLC泵压的提高,填料的粒径在逐渐减小)。对填料的粒径分布要求也很窄。固相萃取柱上所加压一般都不大,分离目的只是把目标化合物与干扰化合物和基体分开即可,柱效要求一般不高,故作为固相萃取吸附剂的填料都较粗,一般在40μm即可用,粒径分布要求也不严格,这样可以大大降低固相萃取柱的成本。常用于固相萃取的吸附剂类型及用途参见表3—4。三. 固相萃取的装置及操作程序最简单的固相萃取装置就是一根直径为数毫米的小柱(图3—14),小柱可以是玻璃的,也可以是聚丙稀﹑聚乙烯﹑聚四氟乙烯等塑料的,还可以是不锈钢制成的。小柱下端有一孔径为20μm的烧结筛板,用以支撑吸附剂。如自制固相萃取小柱没有合适的烧结筛板时,也可以用填加玻璃棉来代替筛板,起到既能支撑固体吸附剂,又能让液体流过的作用。在筛板上填装一定量的吸附剂(100㎎~1000㎎,视需要而定),然后在吸附剂上再加一块筛板,以防止加样品时破坏柱床(没有筛板时也可以用玻璃棉替代)。目前已有各种规格的﹑装有各种吸附剂的固相萃取小柱出售,使用起来十分方便(图3—15)。 固相萃取的一般操作程序如下:1.活化吸附剂:在萃取样品之前要用适当的溶剂淋洗固相萃取小柱,以使吸附剂保持湿润,可以吸附目标化合物或干扰化合物。不同模式固相萃取小柱活化用溶剂不同:(1)反相固相萃取所用的弱极性或非极性吸附剂,通常用水溶性有机溶剂,如甲醇淋洗,然后用水或缓冲溶液淋洗。也可以在用甲醇淋洗之前先用强溶剂(如己烷)淋洗,以消除吸附剂上吸附的杂质及其对目标化合物的干扰。(2)正相固相萃取所用的极性吸附剂,通常用目标化合物所在的有机溶剂(样品基体)进行淋洗。(3)离子交换固相萃取所用的吸附剂,在用于非极性有机溶剂中的样品时,可用样品溶剂来淋洗;在用于极性溶剂中的样品时,可用水溶性有机溶剂淋洗后,再用适当PH 值的﹑并含有一定有机溶剂和盐的水溶液进行淋洗。为了使固相萃取小柱中的吸附剂在活化后到样品加入前能保持湿润,应在活化处理后在吸附剂上面保持大约1ml活化处理用的溶剂。 2.上样:将液态或溶解后的固态样品倒入活化后的固相萃取小柱,然后利用抽真空(图3—16),加压(图3—17)或离心(图3—18)的方法使样品进入吸附剂。 3. 洗涤和洗脱:在样品进入吸附剂,目标化合物被吸附后,可先用较弱的溶剂将弱保留干扰化合物洗掉,然后再用较强的溶剂将目标化合物洗脱下来,加以收集。淋洗和洗脱同前所述一样,可采用抽真空,加压或离心的方法使淋洗液或洗脱液流过吸附剂。如果在选择吸附剂时,选择对目标化合物吸附很弱或不吸附,而对干扰化合物有较强吸附的吸附剂时,也可让目标化合物先淋洗下来加以收集,而使干扰化合物保留(吸附)在吸附剂上,两者得到分离。图3—19给出了两种方法的示意图。在多数的情况下是使目标化合物保留在吸附剂上,最后用强溶剂洗脱,这样更有利于样品的净化。图3—20给出了固相萃取所采用的一般程序示意图。 为了方便固相萃取的使用,很多厂家除了生产各种规格和型号的固相萃取小柱之外,还研制开发了很多固相萃取的专用装置,使固相萃取使用起来更加方便简单。如Supelco公司提供了给单个固相萃取小柱加压的单管处理塞(图3—21),可方便的与固相萃取小柱配套使用。又如,为了能使多个固相萃取小柱同时进行抽真空,Supelco公司提供了12孔径和24孔径的真空多歧管装置(图3—22),可同时处理多个固相萃取小柱。我国中科院大连化学物理研究所,国家色谱研究分析中心也研制开发了真空固相萃取装置。
固相萃取的使用方法第一、参考固相萃取柱的类型及应用,选择适当的填料类型,然后选择固相萃取柱的大小和填料量。 选择固相萃取柱的大小和填料量。 样品量 萃取柱的大小 1L和要求高样品容量 90mm 反相、正相和吸附类型的过程: 被萃取样品的质量不超过柱中填料量的5%,也就是说,如果您用100毫克/1ml的固相 萃取柱,分析物质不超过5毫克。 离子交换过程: 您必须考虑离子交换的容量: SAX和SCX其吸附剂容量为0.2毫当量/克。 图一 第二、选择好萃取柱后,按图一所示的四个步骤进行萃取过程: 步骤一:预处理萃取柱。 在萃取样品之前,为了湿润固相萃取柱填料,用一满管溶剂冲洗管子。 反相类型硅胶和非极性吸附剂介质,通常用水溶性有机溶剂如甲醇预处理,然后用水或缓冲溶液。甲醇湿润吸附剂表面和渗透键合烷基相,以允许水更有效地湿润硅胶表面。有时前预处理溶剂使用在甲醇 之前。这些溶剂通常是与洗脱溶剂一样,是用之消除固相萃取管上的杂质及其对分析物的干扰,也可能该杂质只溶于强洗脱溶剂。 正相类型固相萃取硅胶和极性吸附剂介质,通常用样品所在的有机溶剂来预处理。 离子交换填料将用于非极性有机溶剂中的样品,其用3-5ml的去离子水或低浓度的离子缓冲溶液来预处理。 为了使固相萃取填料从预处理到样品加入时都保持湿润,允许大约1毫升的预处理溶剂在管过滤片(frit)或萃取片表面之上。如果样品是从一个贮液管或过滤管引入固相萃取管,则多加入0.5毫升最后的预处理溶剂到1毫升的固相萃取管中,如果是2毫升到3毫升的萃取柱中,多加入4升到6毫升管中等等。这是为了保证在样品加入之前萃取柱湿润。如果在样品加入之前,萃取柱中的填料干了,重复预处理过程。在重新引入有机溶剂之前,用水冲洗柱中缓冲溶液的盐。 步骤二:加入样品. 将样品装入萃取柱,此时,固相萃取小柱中的填料会吸附样品中所感兴趣的化合物或者样品中的杂质。这样,当样品流出时,所选择的化合物(包括杂质)被留在萃取柱上。 步骤三:冲洗填料. 用一种强得能洗脱杂质而又弱得能保留感兴趣的化合物的冲洗液来冲洗杂质。 步骤四:洗脱感兴趣的化合物。 用溶剂将被吸附在萃取柱上的化合物洗脱在溶液里。
hotdoglet发表了比较全面的样品前处理方法作品。本人分别对目前应用较多的固相萃取和较有潜力的固相微萃取应用中的概念性原理性的知识稍作详细深入地介绍一下。(禁止转载,欢迎收藏)一 固相萃取固相萃取(Solid Phase Extraction,SPE)是一种基于液-固分离萃取的试样预处理技术,由柱液相色谱技术发展而来。SPE技术自70年代后期问世以来,由于其高效、可靠及耗用溶剂量少等优点,在环境等许多领域得到了快速发展。在国外已逐渐取代传统的液-液萃取而成为样品预处理的可靠而有效的方法。SPE技术基于液相色谱的原理,可近似看作一个简单的色谱过程。吸附剂作为固定相,而流动相是萃取过程中的水样。当流动相与固定相接触时,其中的某些痕量物质(目标物)就保留在固定相中。这时用少量的选择性溶剂洗脱,即可得到富集和纯化的目标物。固相萃取可分为在线萃取线萃取前者萃取与色谱分析同步完成;而后者萃取与色谱分析分步完成,两者在原理上是一致的。一般固相萃取的操作步骤包括固相萃取柱(即吸附剂)的选择、柱子预处理、上样、淋洗、洗脱。在实验过程中需要具体考虑的因素如下:1)吸附剂的选择a.传统吸附剂在环境分析中最为常用的反相吸附剂较适用于水样中的非极性到中等极性的有机物的富集和纯化。其中有代表性的键合硅胶C18和键合硅胶C8等。该类吸附剂主要通过目标物的碳氢键同硅胶表面的官能团产生非极性的范德华力或色散力来保留目标物。正相吸附剂包括硅酸镁、氨基、氰基、双醇基键合硅胶及氧化铝等,主要通过目标物的极性官能团与吸附剂表面的极性官能团的极性相互作用(氢键作用等)来保留溶于非极性介质的极性化合物。由于其特殊的作用原理,在环境分析中常用于与其它类型的吸附柱联用,吸附去除干扰物,实现样品纯化。离子交换吸附剂则主要包括强阳离子和强阴离子交换树脂,这些树脂的骨架通常为苯乙烯-二乙烯基苯共聚物,主要是通过目标物的带电荷基团与键合硅胶上的带电荷基团相互静电吸引实现吸附的。
固相萃取(SPE)被日趋认为是一个非常有用的样品处理技术,专门用来进行分析前的 样品纯化和浓缩。使用固相萃取法能避免液-液萃取所代来的许多问题,比如,易于乳化, 不完全的相分离,较低的定量分析回收率,昂贵易碎的玻璃器皿和大量的有机废液。与液- 液萃取相比,固相萃取更有效,容易达到定量萃取,快速和自动化,同时也减少了溶剂用量和 工作时间。 固相萃取(SPE)通常是用于液体样品的准备和不易或不挥发样品的萃取,但是 也用于能预先提取到溶液里的固体样品。固相萃取产品对样品的萃取,浓缩和净化都非常好。 它们提供给您多种的化学性质,吸附剂类型和大小。针对您的需要及样品性质,选择适当的产 品是非常重要的。 固相萃取柱的类型及应用 硅胶的填料(60A,40um) ODS(C18) 硅胶上键合十八烷基 反相萃取,适合于非极性到中等极性的化合物,比如,抗菌素, 巴比妥酸盐,酞嗪,咖啡因,药物,染料,芳香油,脂溶性, 维生素,杀 真菌剂,锄草剂,农药,碳水化合物,对羟基甲苯酸取代酯,苯酚, 邻苯二甲酸酯,类固醇,表面活化剂,茶碱 ,水溶性维生素。 Octyl (C8) 硅胶上键合辛烷 反相萃取,适合于非极性到中等极性的化合物,比如,抗 菌素, 巴比妥酸盐,酞嗪,咖啡因,药物,染料,芳香油,脂溶性维生素,杀 真菌剂,锄草剂,农药,碳水化合物,对羟基甲基酸取代酯,苯酚,邻 苯二甲酸酯,类固醇,表面活化剂,水溶性维生素。 Ethyl (C2) 硅胶上键合乙基 相对C18和C8,因为短链,保持作用小的多,适合非极性化合物。 Phenyl 硅胶上键合苯基 相对C18和C8,反相萃取,适合于非极性到中等极性的化物, Silica 无键合硅胶 极性化合物萃取,如乙醇,醛,胺,药物,染料,锄草剂,农药,酮,含氮类化合物,有机酸,苯酚,类固醇 Cyano(CN) 硅胶上键合丙氰基烷 反相萃取,适合于中等极性的化合物,正相萃取,适合于极性 化合物,比如,黄曲霉毒素,抗菌素,染料,锄草剂,农药,苯酚,类 固醇。弱阳离子交换萃取,适合于碳水化合物和 阳离子化合物。 Amino(NH2) 硅胶上键合丙氨基 正相萃取,适合于极性化合物。弱阴离子交换萃取,适合于 碳水化合物,弱性阴离子和有机酸化合物。 Strong Anion Exchange(SAX) 硅胶上键合卤化季氨盐 强阴离子交换萃取,适合于阴离子,有机酸,核酸,核苷酸, 表面活化剂。容量:0.2毫当量/克。 Strong Cation Exchange(SCX) 硅胶上键合磺酸钠盐 强阳离子交换萃取,适合于阳离子,抗菌素,药物,有机碱,氨基酸,儿茶酚胺,锄草剂,核酸碱,核苷,表面活化剂。 容量:0.2毫 当量/克。 AL2O3填料 Alumina A(acidic) 酸性 PH ~5 极性化合物离子交换和吸附萃取,如维生素. Alumina B(basic) 碱性 PH~8.5 吸附萃取和阳离子交换。 Alumina N(neutral) 中性 PH~6.5 极性化合物吸附萃取。调节pH,阳和阴离。 子交换.适合于维生素,抗菌素,芳香油,酶,糖苷,激素 Florisil填料-硅酸镁 Florisil 极性化合物的吸附萃取,如乙醇,醛,胺,药物,染料,锄草剂,农药,PCBs,酣,含氮类化合物,有机酸,苯酚,类固醇
安谱固相萃取(Solid Phase Extraction)简介固相萃取(SPE)是一种广泛使用的样品前处理技术,适用于样品的分离或纯化。在过去的20多年里,固相萃取技术发展非常迅速,SPE的使用不但增加了色谱系统的使用寿命,同时提高了分析物的定量限。使用固相萃取法能避免液-液萃取所带来的许多问题,比如,不完全的相分离,较低的定量分析回收率,昂贵易碎的玻璃器皿和大量的有机废液。与液-液萃取相比,固相萃取更有效,容易达到定量萃取、快速和自动化,同时也减少了溶剂用量和工作时间。SPE主要用于从各类复杂的基质中提取目标分析物,使目标物在色谱分析前达到浓缩或纯化的目的,各类基质包括生物流体(血液和尿液)、水样、土壤、食品等。固相萃取小柱CNW可提供两个系列的SPE小柱:CNWBOND 系列包括硅胶基质和吸附类型的SPE小柱,这两类小柱是使用最广泛的SPE。CNWBOND 系列的SPE小柱纯度高、重现性好,使样品的纯化效果达到最佳以便可直接用于下一步的色谱进样分析。Poly-Sery 系列是聚合物基质的SPE,包括了不同功能性基团修饰的共聚物类型。这种类型的小柱由于其快速的操作、高稳定性、强保留性和选择性、以及更广的pH耐受性等特殊的性质,越来越多地被现代SPE技术所采用,使您的方法开发变得更简单、更快捷、更高效。一些常用的小柱填料基质反相正相离子交换硅胶C18氨基SCX 强阳离子C8氰基WCX 弱阳离子苯基PSASAX 强阴离子C4硅胶WAX 弱阴离子无机吸附材料 -
对于固相萃取柱不太了解,想问下大家,标准中只说明使用的是填料为苯磺酸强阳离子交换吸附剂,规格为500mg/3ml,这样的话应该选那种固相萃取柱呀?是以硅胶为基质的还是有机聚合物基质的固相萃取柱?谢谢原文是这样的,大家帮忙判断一下吧,谢谢。Pipet 2.0 mL of this solution into a freshly conditioned solid phase extraction column containing benzenesulfonic acid strong cation-exchange packing with a sorbent-mass to column volume ratio of 500 mg per 3 mL, or equivalent, and elute into a 5-mL volumetric flask.
固相萃取技术(Solid Phase Extraction, SPE)液液分配(LLE)有许多局限性,例如需要大量不互溶溶剂;样品处理步骤复杂;样品回收率和精密度不理想;处理过程中乳液的形成,和溶剂蒸发时产生的样品损失等等。固相萃取(SPE)主要用于样品分析前的净化或浓缩富集。与传统的液-液萃取相比,由于其采用了高效、高选择性的固定相,能显著减少溶剂用量,简化样品预处理过程,同时所需费用也有所减少,一般来说,固相萃取所需时间为液-液萃取的1/12,费用为液液分配的1/5。固相萃取能用于[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]、液相色谱、红外光谱、质谱、核磁、紫外和[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Wp][color=#3333ff]原子吸收[/color][/url]等各种分析方法的样品预处理。正因为固相萃取柱独特的性能,自70年代问世以来,其全球需求量迅速增长。总的来讲,固相萃取法改进了样本制备技术:1可批量进行;2节省时间;3减少溶剂使用和废物产生;4多种键合固定相选择性;5可富集痕量分析物;6可消除乳化现象;7易于自动化;8回收率高、重现性好。一个固相萃取柱由三部分组成:(l)柱管;(2)烧结垫;(3)固定相。柱管由血清级的聚丙烯制成,一般做成注射器形状。一些厂家也提供玻璃的柱管。柱管下端有一突出的头,此头的尺寸已标准化,可用于各种不同的固相萃取多管真空装置。烧结垫除能固定固定相外,也能起一些过滤作用。聚乙烯是常见的烧结垫材料,对于特殊要求也可采用特氟隆或不锈钢片。固定相是固相萃取柱中最重要的部分。最常见的固相萃取固定相是键合的硅胶材料。一般采用孔径60A不规则形状的40u硅胶微粒作为原材料,然后将各种官能团键合上去。也有一些非硅胶基质的固定相被广泛应用。其一般操作步骤是:液态或溶解后的固态样品倒入活化过的固相萃取柱,然后利用抽真空、加压或离心等方式使样品进入固定相。为了同时处理多个样品,往往需要一个固相萃取柱多管真空装置。一般来说,固相萃取柱将保留所需要的组分和类似的其他组分,并尽量减少不需要的样品组分的保留。弱保留组分的样品可用一溶剂冲洗掉,然后用另一溶剂把感兴趣的分析物从固定相上洗脱下来。另外,也可让感兴趣的组分(分析物)直接通过固定相而不被保留,同时大部分干扰物质被保留在固定相上,从而得到分离。在多数情况下,使分析物得到保留更有利于样品净化。固相萃取柱类型 1. 键合相技术 (固相分配柱技术) 2. 固相吸附柱技术在细的、分散的载体(或固定相)表面涂有一层与流动相互不相溶的固定液或化学键合相,当液体流动相流经固定相时,由于有很大的界面,使分析物和提取物在两相间按分配系数分配。分析物与提取物的分离能力取决于: 1.两相间极性的差异 2.物质在两相间的亲和力和溶解度是一种液液分配色谱技术固定相:涂渍在惰性载体上的液体或化学键合在载体上的各种有机基团流动相:与固定相互不相溶的液体流动相中的样品组分在两相间进行平衡分配,由于样品组分在两相中的相对溶解度不同,以不同的速度流出色谱柱而得到分离。选择适宜的固定相和流动相,可对非常广泛样品类型进行分离。目前常用的多为化学键合固定相是利用化反应的方法,通过化学键把不同极性化合物键合到载体表面。先将硅胶进行酸洗、中和、干燥活化,使其表面保持自由硅醇基,如酯化键合:又如聚合键合固定相: 〡 〡 〡 Cl3SiR 〡 〡 〡 Cl3SiR -Si-O-Si-O-Si- -Si- O – Si-O-Si- 〡 〡 〡 〡 \ / OH OH OH OH Si / OH R R R R R ∣ ∣ ∣ ∣ HO-Si-OH Si - O – Si – O - Si ∣ / \ / O O O O O ∣ ∣ ∣ ∣ ∣ -Si - O – Si - O – Si - - O – Si - O – Si – ∣ ∣ ∣ ∣ ∣R为十八烷基(-C18),辛烷基(-C8),苯基(C6)或C2等,采用极性强的溶剂做流动相,如水、甲醇、乙腈等。R也可以是CN、苯基等基团,采用极性弱的溶剂为流动相。正相色谱与反相色谱的区别可用下表来说明:正相反相固定相极性极性大或中等极性小或中等(C-18柱)溶剂极性极性小或中等极性大或中等样本洗脱次序非极性先出来极性强先出来增加溶剂极性降低洗脱时间增加洗脱时间(即加水)固定相的分离选择性决定于可被保留组分的保留强度;所以固定相的选择将取决于分析物质和样品溶剂的性质。分析物的极性与固定相极性非常相似时,可得到分析物的最佳保留,两者极性越相似保留越好,所以要尽量选择极性相似的固定相。正相固定相如CN、Si、NH2都是极性的,用来保留(萃取)极性物质。而C18、C8、C2、PH等都是反相固定相,用来保留(萃取)非极性分析物。当分析物极性适中时,正、反相固定相都可使用。固定相的选择还受样品溶剂强度的制约,弱溶剂会增强分析物在吸咐剂上的保留,样品溶剂强度相对该固定相应该较弱。对于正相和反相来说,组分在固定相上的保留或洗脱直接与溶剂极性有关,溶剂的极性决定溶剂的强度。在洗脱被保留组分时,强溶剂的用量比弱溶剂小。对于正相固定相,溶剂强度随其极性增加而增加。对于反相固定相,溶剂强度随其非极性增加而增加。常用的溶剂有水、甲醇、异丙醇和乙腈,有时也用丙酮和二氯甲烷。溶剂的流出强度次序极性溶剂溶剂强度大正相固定相反相固定相非极性溶剂溶剂强度大水已烷强甲醇异辛烷强异丙醇-2甲苯乙腈氯仿丙酮二氯甲烷乙酸乙酯四氢呋喃乙醚乙醚四氢呋喃乙酸乙酯二氯甲烷丙酮氯仿乙腈甲苯异丙醇异辛烷甲醇弱已烷水弱离子交换固定相的行为更多地取决于溶剂的pH值、离子强度和反离子强度,而与溶剂强度关系不大。常用的固相萃取固定相及其机理类型固定相溶质官能团洗脱液非极性十八烷基C18疏水性物质甲醇辛烷基C8芳环乙腈乙基C2烷烃类乙酸乙酯环己烷基CH苯基PH氯仿氰基CN正己烷极性氰基CN亲水性物质甲醇二醇基Diol羟基异丙醇硅胶Si胺丙酮氨基NH2杂环阳离子交换苯丙磺酸SCX阳离子碱性缓冲液丙磺酸PRS胺甲羧酸CBA嘧啶阴离子交换三甲基丙基胺SAX阴离子酸性缓冲液二乙基丙基胺羧酸一元或二元胺基磺酸固相萃取的四个步骤1. 柱子预处理conditioning(固定相活化)(Column solvation/pre-equilibration)活化的目的是创造一个与样品溶剂相容的环境并去除柱内所有杂质。通常需要两种溶剂来完成上述任务,第一个溶剂(初溶剂)用于净化固定相,另一个溶剂(终溶剂)用于建立一个合适的固定相环境使样品分析物得到适当的保留。每一活化溶剂用量约为1-2ml/100mg固定相。终溶剂不应强于样品溶剂,若使用太强的溶剂,将降低回收率。通常采用一个弱于样品溶液的溶剂不会有什么问题。值得注意的是,在活化的过程中和结束时,固定相都不能抽干,因为这将导致填料床出现裂缝,从而得到低的回收率和重现性,样品也没得到应有的净化。如果在活化步骤中出现干裂,所有活化步骤都得重复。2. 上样load sample(Apply sample)上样步骤指样品加入到固相萃取柱并迫使样品溶剂通过固定相的过程,这时分析物和一批样品干扰物保留在固定相上。为了保留分析物,溶解样品的溶剂必须较弱。如果溶剂太强,分析物将不被保留,结果回收率将会很低,这一现象叫穿漏(breakthrough)。尽可能使用最弱的样品溶剂,可以使溶质得到最强的保留或者说最窄的谱带。只要不出现穿漏,允许采用大体积的上样量(0.5-1L)。有时候固体样品必须用一个很强的溶剂进行萃取,这样的萃取液是不能直接上样的。所以萃取液要用一个弱溶剂稀释以得到一个合适的溶剂总强度进行上样。例如一个土壤样品,采用50%甲醇萃取,得到2ml萃取液,用8ml水稀释,得到10%的甲醇溶液,这样就可以直接上反相固相萃取柱而不存在穿漏问题。3. 淋洗Rinse(Interference elution)分析物得到保留后,通常需要淋洗固定相以洗掉不需要的样品组分,淋洗溶剂的洗脱强度是略强于或等于上样溶剂。淋洗溶剂必须尽量地弱以洗调尽量多的干扰组分,但不能强到可以洗脱任何一个分析物的程度。溶剂体积可为0.5-0.8ml/100mg 固定相。淋洗时不宜使用太强溶剂,太强溶剂会将强保留杂质洗下来。使用太弱溶剂,会使淋洗体积加大。可改为强、弱溶剂混用;但混用或前后使用的溶剂必须互溶。4. 洗脱Analyte Elution淋洗过后,将分析物从固定相上洗脱,洗脱溶剂用量一般为0.5-0.8ml/100mg固定相。而溶剂必须进行认真选择,溶剂太强,一些更强保留的不必要组分将被洗出来;溶剂太弱.就需要更多的洗脱液来洗出
固相萃取吸附剂与目标化合物之间的作用机理固相萃取主要是通过固相吸附剂上的官能团与目标化合物的官能团之间的作用力来保留/吸附的,这种作用力可分为非极性作用力、极性作用力、离子作用力、共价作用力等。非极性作用力:对于键合硅胶及聚合物吸附剂而言,非极性作用力产生于固相萃取材料官能团上的碳氢键与目标化合物的碳氢键之间,常常被用于从样品基质中吸附分离具有非极性结构的目标化合物。如Welchrom? C18、Welchrom? C8、Welchrom? Phenyl等。极性作用力:极性作用力发生在许多固相萃取材料极性表面与样品中目标化合物的极性官能团之间,常见的具有极性作用力的吸附剂在色谱中一般都称为正相色谱吸附剂。常见的极性固相萃取材料包括:硅胶、氧化铝、弗洛里硅土及含有氰基、氨基、二醇基的键合硅胶。离子作用力:离子作用力发生在带相反电荷的目标化合物与固相萃取吸附剂官能团之间。如强阳离子交换剂 Welchrom? SCX、强阴离子交换剂Welchrom? SAX、弱阳离子交换剂Welchrom? WCX等。共价作用力:共价作用力发生在共价填料与目标化合物之间,共价键不易被打断,但有的官能团形成的共价键在改变溶剂环境的条件下是可逆的,如苯硼酸基。
谁知道固相萃取仪比液液萃取的优点在何处
SPE技术处理复杂基质样品的洗脱原理是通过固体填料的选择性吸附和淋洗液洗脱将液体样品中的目标化合物与干扰杂质分离,以达到富集、分离、净化样品的目的。SPE是一个包括[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相[/color][/url]和固相的物理萃取过程,在固相萃取过程中,固体填料对目标化合物的吸附力大于样品母液,当样品通过SPE柱时,目标化合物被吸附在固体填料表面,其他组分则随样品母液通过柱子,之后再用适当的溶剂将目标化合物洗脱并收集,然后进行色谱分析。固相萃取的填料主要分为两部分,一部分是基质,另一部分是作用基团。按照基质分类,SPE小柱可以分为硅胶基质小柱,聚合物基质小柱和吸附型小柱。顾名思义,硅胶基质小柱就是以硅胶为支撑基质的固相萃取填料,它的基本骨架是利用硅-氧-硅键相连;而聚合物基质小柱是以高分子聚合物作为基质交联而成;吸附性小柱包括佛罗里硅土,石墨化碳,氧化铝等小柱。聚合物基质相对于硅胶基质有较大的优势,其应用pH适用范围广,可以在全pH值范围内使用,同时具有超强的作用位点,因此具有相对宽泛的应用领域。
最近单位招标了买了一台 固相萃取仪,是赛芬的,我想要的是全自动的,可是代理商说赛芬没有全自动固相萃取仪,我比较疑惑。有没有谁对赛芬的仪器比较熟悉?另外有谁使用过赛芬的固相萃取仪,效果怎么样
活化:是除去柱内所有杂质并创造一个与样品溶剂相容的环境。加样:试样倒入活化过的固相萃取柱,使样品进入固定相淋洗:分析物得到保留后,通常需要淋洗固定相以洗掉不需要的组份洗脱: 淋洗过后,将分析物从固定相上洗脱固相萃取不是目标物被洗脱下来,干扰物被固定相吸附吗?
[align=center][/align][align=center][/align][align=center][/align][align=center][size=56px]固相萃取柱(SPE)[/size][/align][size=18px]姓 名:[/size][size=18px] [/size][size=18px] [/size][size=18px]马啸 [/size][size=18px] [/size][align=center][font='times new roman'][size=21px][color=#2f5597]目录[/color][/size][/font][/align][font='times new roman'][size=16px]1[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]1[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]2[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]3[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]3[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]4[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]4[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]4[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]5[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]5[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]5[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]6[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]6[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]7[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]7[/size][/font][align=center][font='times new roman'][size=21px]第一章 [/size][/font][font='times new roman'][size=21px]固相萃取柱基本概述[/size][/font][/align][font='times new roman'][size=18px]第1[/size][/font][font='times new roman'][size=18px].1[/size][/font][font='times new roman'][size=18px]节 [/size][/font][font='times new roman'][size=18px]固相萃取柱([/size][/font][font='times new roman'][size=18px]SPE[/size][/font][font='times new roman'][size=18px])[/size][/font][font='times new roman'][size=18px]基本介绍[/size][/font]固相萃取法是利用选择性吸附与选择性洗脱的[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]法分离原理,使液体样品通过吸附剂保留其中某一或某些组分,再选用适当溶剂冲去杂质,然后用少量溶剂迅速洗脱,从而达到快速分离、净化与浓缩的目的。“保留”是一种存在于吸附剂和分离物分子之间吸引的现象,在成当样品溶液通过吸附剂床时分离物在吸附剂上不移动。“洗脱”是一种保留在吸附剂上的分离物从吸附剂上去除的过程,这要通过加入一种对分离物的吸引比吸附剂更强的容积来完成。[align=center][img]" style="max-width: 100% max-height: 100% [/img][size=13px]图[/size][size=13px]1-1 [/size][size=13px]常见的一些固相萃取柱[/size][/align][align=center][/align]一般的SPE柱由三部分组成:柱管、烧结垫、固定相。其中柱管由血清级的聚丙烯制成,一般做成注射器的形状;烧结垫除了能固定固定相之外还能起到一定的过滤的作用;固定相则是SPE柱中最重要的部分,起到分离的效果。现在SPE柱的形式有柱形式和膜片型。膜片型SPE材料是以聚四氟乙烯纤维薄膜为骨架,纤维之间载有很小的色谱吸附剂颗粒(直径约为12 μm)。[align=center][img]" style="max-width: 100% max-height: 100% [/img][size=13px]图[/size][size=13px]1-2 [/size][size=13px]SPE柱的构成[/size][/align][align=center][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/11/202211231716124687_3336_5853070_3.png[/img][size=13px]图[/size][size=13px]1-3 [/size][size=13px]膜片型固相萃取柱[/size][/align][font='times new roman'][size=18px]第1[/size][/font][font='times new roman'][size=18px].2[/size][/font][font='times new roman'][size=18px]节[/size][/font][font='times new roman'][size=18px] 固相萃取柱([/size][/font][font='times new roman'][size=18px]SPE[/size][/font][font='times new roman'][size=18px])[/size][/font][font='times new roman'][size=18px]基本原理[/size][/font]SPE技术给予[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]的原理,可以近似看作成一个简单的色谱过程。SPE法是根据被萃取组分与样品基质以及其他成分在固定相填料上作用力强弱的不同而是他们彼此分离。固相萃取装置之所以能够将目标化合物从样品的基质中分离出来,主要靠故乡吸附剂上的官能团与目标化合物的官能团之间的作用力将目标化合物保留在故乡吸附剂上,而没有保留的样品基质则通过固相萃取装置。其中作用力包括非极性作用力、极性作用力、离子作用力和共价作用力等等。较常用的方法有正相萃取、反向萃取、离子交换萃取。正相萃取是使液体样品溶液通过吸附剂,保留其中被测物质,再选用适当强度溶剂冲去杂质,然后用少量溶剂迅速洗脱被测物质或加热解附,二者间作用力包括偶极对、氢键、电子对。。反相固相萃取是利用固定相上非极性的吸附剂,将有机溶质从极性相中分离出来,非极性物质间作用力为范德华引力,吸附剂对溶质的亲和力主要靠其疏水性。离子交换型固相萃取是以离子间高能量的相互作用而达到分离的目的。强极性的溶质可以从极性强的水或其他溶剂中分离出来,强离子交换树脂的交换容量不受pH值影响,弱离子交换树脂则依赖pH值的变化。[font='times new roman'][size=18px]第1[/size][/font][font='times new roman'][size=18px].3节[/size][/font][font='times new roman'][size=18px] [/size][/font][font='times new roman'][size=18px]固相萃取柱([/size][/font][font='times new roman'][size=18px]SPE[/size][/font][font='times new roman'][size=18px])[/size][/font][font='times new roman'][size=18px]基本操作[/size][/font]首先,对SPE柱进行预处理,在萃取实验之前向萃取柱中加入足量的溶剂,其目的为:(1)除去填料中可能存在的杂质,(2)使填料溶剂化,提高固相萃取的重现性;第二,进行样品的添加;第三,继续加入溶剂对柱中存在的干扰物进行进一步的洗出;第四,对分析物进行洗脱和收集。[align=center][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/11/202211231716127073_8404_5853070_3.png[/img][size=13px]图[/size][size=13px]1-4 [/size][size=13px]SPE基本操作示意[/size][/align][font='times new roman'][size=18px]第1[/size][/font][font='times new roman'][size=18px].4节[/size][/font][font='times new roman'][size=18px] [/size][/font][font='times new roman'][size=18px]萃取条件的选择[/size][/font]对于萃取条件的选择可以分为固定相的选择和溶剂的选择。固定相的选择原则有:(1)凡是极性基体中含有待分析脂溶性化合物都可以用反相柱处理;(2)对于含有极性基团的脂溶性化合物,可用极性的键合固相柱处理;(3)对于含有可电离的离子基团的有机物,如果碳键很长或碳数很多,可直接用反相固定相处理;如果在反相柱中保留很小,则可采用反相离子对萃取;对于含有多种离子基团的有机物,则用离子交换固定相;(4)如果样品组分中同时含有离子型化合物和中性分子,可采用离子对SPE萃取,当然也可以分别处理;(5)非极性基体中的极性化合物,要用正相固定相萃取,其中基体也可以是弱于所萃取物的弱极性溶液;(6)对于离子性的化合物,象无机离子等,包括反相离子对SPE不能解决的,就要采用离子交换固定相。对于溶剂的选择原则是根据萃取的不同步骤的要求来决定的:在预处理阶段初溶剂应与洗脱溶剂一样强或强于洗脱溶剂,终溶剂应该与样品溶剂性质相似;在加样阶段溶解样品的剂必须较弱;在淋洗阶段淋洗溶剂要略强于或等上样,但不 淋洗溶剂要略强于或等上样,但不能强到可以洗脱任何一个分析组的程度;在洗脱阶段选择的溶剂不能太强。[align=center][font='times new roman'][size=21px]第二章[/size][/font][font='times new roman'][size=21px] [/size][/font][font='times new roman'][size=21px]商品化固相萃取柱[/size][/font][font='times new roman'][size=21px]分类[/size][/font][/align]现阶段商品化固相萃取柱主要根据其固定相的填料不同来进行分类,主要有:硅胶基质SPE柱、无机基质SPE柱、聚合物基质SPE柱以及其他专用SPE柱。[font='times new roman'][size=18px]第[/size][/font][font='times new roman'][size=18px]2[/size][/font][font='times new roman'][size=18px].1节[/size][/font][font='times new roman'][size=18px] 硅胶基质SPE柱[/size][/font]硅胶基质SPE柱采用单分散球形硅胶填料,通过键合不同基团从而实现正相、反相和离子交换等种类SPE柱,是经典的固相萃取选择。SPE柱的硅胶上可键合的基团分为:极性官能团、非极性/弱极性官能团、可发生离子交换集团。其中极性官能团包括氰丙基、氨丙基、二醇基等;非极性/弱极性官能团有:苯基、C[font='times new roman'][sub][size=16px]18[/size][/sub][/font]、C[font='times new roman'][sub][size=16px]8[/size][/sub][/font]、C[font='times new roman'][sub][size=16px]4[/size][/sub][/font]、C[font='times new roman'][sub][size=16px]2[/size][/sub][/font]等;可发生离子交换集团有:磺酸基、三甲基氨基等。常见的硅胶基质SPE柱有Supelclean[font='times new roman'][sup][size=16px]TM[/size][/sup][/font] ENVI-18 SPE小柱、Sep-Park C8 SPE小柱等。[font='times new roman'][size=18px]第[/size][/font][font='times new roman'][size=18px]2[/size][/font][font='times new roman'][size=18px].2节[/size][/font][font='times new roman'][size=18px] 无机基质SPE柱[/size][/font]无机基质固相萃取材料主要是无机氧化物和石墨烯类无机物。这些无机材料的共同特点是表面具有活性羟基,可以用于正相萃取。常见的无机基质有:氧化铝、硅胶、硅酸镁、石墨化碳黑等。其中氧化铝基质在不同的 pH 条件下有不同的吸附活性:当 pH8.5 时其更容易保留显正价的物质或发生阳离子交换;当基质显中性时可作为强极性吸附剂。常见的无机基质SPE柱有迪马科技 ProElut AL-A 氧化铝小柱、岛津SHIMSEN Styra AL-B碱性氧化铝小柱、纳谱分析 SelectCore Alumina N 氧化铝小柱、岛津SHIMSEN Styra GAC活性炭小柱 石墨化碳黑小柱、Supelclean[font='times new roman'][sup][size=16px]TM[/size][/sup][/font] LC-Si 正相硅胶固相萃取小柱等。[font='times new roman'][size=18px]第[/size][/font][font='times new roman'][size=18px]2[/size][/font][font='times new roman'][size=18px].3节[/size][/font][font='times new roman'][size=18px] 聚合物基质SPE柱[/size][/font]聚合物基质SPE的填料是在聚苯乙烯/二乙烯基苯聚合物基质上键合不同的官能团得到。与键合硅胶填料比较,聚合物填料的耐酸碱性要好很多。聚合物基质SPE柱可分为HLB、MCX、MAX、WCX、WAX等。[font='times new roman'][size=16px]2[/size][/font][font='times new roman'][size=16px].3.1 HLB[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]聚合物基质小柱[/size][/font]疏水性的二乙烯基苯结构保留非极性化合物,亲水性的N-乙烯基吡咯烷酮结构保留极性化合物。该填料具有良好的水润湿性,可通过水相调节亲水-亲脂平衡,从而获得理想的选择性[align=center][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/11/202211231716129383_6429_5853070_3.png[/img][size=13px]图[/size][size=13px]3-1 [/size]HLB固定相结构示意图[/align][font='times new roman'][size=16px]2[/size][/font][font='times new roman'][size=16px].3.2 MCX[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]聚合物基质小柱[/size][/font]MCX是将磺酸基键合在高度交联的PS/DVB表面得到的混合型强阳离子交换吸附剂,具有反相和阳离子交换双重保留性能,对碱性化合物有良好的保留能力。[align=center][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/11/202211231716117719_3272_5853070_3.png[/img][size=13px]图[/size][size=13px]3-2 [/size]MCX固定相结构示意图[/align][font='times new roman'][size=16px]2[/size][/font][font='times new roman'][size=16px].3.3 MAX[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]聚合物基质小柱[/size][/font]MAX是将季铵基键合到高度交联的PS/DVB表面得到的混合型强阴离子交换吸附剂,具有强阴离子交换和反相保留作用,适合酸性化合物的萃取。[align=center][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/11/202211231716119872_1089_5853070_3.png[/img] [size=13px]图[/size][size=13px]3-3 MAX[/size]固定相结构示意图[/align][font='times new roman'][size=16px]2[/size][/font][font='times new roman'][size=16px].3.4 WCX[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]聚合物基质小柱[/size][/font]WCX是以大孔PS/DVB为基质,经羧基修饰的混合型弱阳离子吸附剂,其苯环具有较强的疏水相互作用,羧基提供了弱阳离子交换能力。[align=center][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/11/202211231716121064_5867_5853070_3.png[/img] [size=13px]图[/size][size=13px]3-4 WCX[/size]固定相结构示意图[/align][font='times new roman'][size=16px]2[/size][/font][font='times new roman'][size=16px].3.5 WAX[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]聚合物基质小柱[/size][/font][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/11/202211231716135132_8128_5853070_3.png[/img]WAX是以大孔PS/DVB为基质,经三级胺基修饰的混合型弱阴离子交换吸附剂,其苯环具有较强的疏水相互作用,三级胺基提供了弱阴离子交换能力。[align=center] [size=13px]图[/size][size=13px]3-5 WAX[/size]固定相结构示意图[/align][font='times new roman'][size=18px]第2.4节[/size][/font][font='times new roman'][size=18px] [/size][/font][font='times new roman'][size=18px]专用SPE柱[/size][/font]专用小柱多出现于各类免疫亲和小柱、多功能净化柱等中,其主要作用是对目标物质进行特异性结合或仅对目标物质不吸附。常见的免疫亲和小柱有河豚毒素免疫亲和柱、黄曲霉毒素 M1免疫亲和柱、中检维康CNtest 呕吐毒素免疫亲和柱等。常见的多功能净化柱有岛津SHIMSEN Styra AFTQ黄曲霉毒素净化柱、真菌毒素多功能净化柱(AFT ZEN DON)、展青霉素分子印迹亲和柱。该文章的参考主要来源于课程和如下方式。SPE固相萃取小柱报价_SPE固相萃取小柱厂家_供应_仪器信息网 [EB/OL]. https://www.instrument.com.cn/consumable/hc/m-19.html
[~113872~]固相萃取(Solid-Phase Extraction 简称SPE)是 近年发展起来一种样品预处理技术, 由液固萃取和柱液相色谱技术结合发展而来 , 主要用于样品的分离、纯化和浓缩,与传统的液液萃取法相比较可以提高分析物的回收率、更有效的将分析物与干扰组分分离减少样品预处理过程,操作简单,省时,省力。广泛的应用在医药、食品、环保、商检、农药残留等领域原理:固相萃取是一个包括液相和固相的物理萃取过程。在固相萃取过程中,固相对分析物的吸附力大于样品母液,当样品通过固相萃取柱时,分析物被吸附在固体表面,其他组分则随样品母液通过柱子,最后用适当的溶剂将分析物脱下来 SPE操作步骤: I 柱的预处理 为了获得高的回收率和良好的重现性,固相萃取柱在使用之前必须用适当的溶剂进行预处理,预处理除去填料中可能存在的杂质,另一个目的是使填料溶剂化,提高固相萃取的重现性 II 样品的添加 预处理后,试样溶液被加至并以一定的流速通过柱子。在该步骤分析物被保留在吸附剂上。III 柱的洗涤 在样品通过萃取柱时,不仅分析物被吸附在柱子上,一些杂质也同时被吸附,选择适当的溶剂,将干扰组分洗脱下来,同时保持分析物仍留在柱上IV 分析物的洗脱 用洗脱剂将分析物洗脱在收集管中,为了提高分析物的浓度或为以后分析调整溶剂杂质,可以把收集到的分析物积分用氮气吹干,再溶于小体积适当的溶剂中。 Mediwax 固相萃取仪 Mediwax固相萃取装置(SPE Manifolds)有12、24管和相应吹扫装置(Dry Attachment)可供选择 Ordering informations 货 号 装 置 价格(元) 优惠价 M0401001 Mediwax 12管SPE萃取装置( 12-port vaccum spe manifold) 7000 5800 M0404001 Mediwax 24管SPE萃取装置( 24-port vaccum spe manifold) M0401002 Mediwax 12管SPE吹干装置( 12-port Drying Attachment ) 12000 7000 M0404002 Mediwax 24管SPE吹干装置( 24-port Drying Attachment ) SPE吹扫装置 M0503001 大容量采样器 4/pk (large volume system) 1350 1000 M050001 固相萃取堆叠适配接头10/PK ( Adapter Cap) GM-0.33II隔膜真空泵 1600 1200 各类SPE固相萃取装置配件请垂询 特点:◆经典的12、24管真空固相萃取装置◆标配StopCock阀,精确控制流速◆试管架高度可调,满足不同需要◆压力表放空阀侧面设计,使用方便◆设计合理,防止交叉感染◆性能价格比极高 吹扫装置 ▲ 与Mediwax装置联合使用▲ 良好的浓缩样品效果▲ 操作简单、经济实惠 ▲供应各种原装备件: Stopcock、Retaining clip、Cap、 Needle、 Support Post、 Leg、 Plates、 Guage、 valve、 Glass tank 、cove、Adapter cap、 large volume system 固相萃取装置选配方案: A:基本型: Mediwax 12管(或24管)固相萃取装置+ 无油真空泵 B:标准型: Mediwax 12管(或24管)固相萃取装置+ 无油真空泵+适配接头+固相萃取小柱(按需选取)+大容量采样器 C:多功能型 Mediwax 12管(或24管)固相萃取装置+ 无油真空泵+适配接头+固相萃取小柱(按需选取)+大容量采样+Mediwax12管(或24管)吹扫装置