一培养系统

新型细胞培养系统研制成功作者：张笑 来源：科学网美国威斯康辛大学麦迪逊分校的科学家们近日开发出一套新细胞培养系统，有望为细胞治疗提供更加一致和安全的细胞培养物。11月14日的《自然—方法学》刊登了这一成果。领导这项研究的Laura Kiessling教授表示这套系统并不昂贵，可承担多能细胞培养中的大量预估工作。这项技术“很简单”，“任何人都能使用”。目前，大部分人类胚胎干细胞的培养都是作为实验室研究用途的，而通常所采用的培养方法又容易造成各种污染。这套新系统采用一种化学合成制得的可与干细胞相结合的蛋白片段底物，并通过与特定培养基结合，可将细胞培养固定在未分化阶段达三个月或者更长时间。据报告显示，该系统亦可用于诱导多功能干细胞培养。“科学家现在普遍采用的培养系统都有着非特定的缺点，并且缺乏一致性，以致出现质量差异”， 领导这项研究的Laura Kiessling教授解释，“我们研发的这套系统特定性很好，而且并不贵”。（科学网 张笑/编译）相关仪器及方法：新型细胞培养系统 IX81显微镜 7500 Fast实时PCR系统 发光光度计

谁能提供下厌氧培养系统[em09510]谢谢

哪位大虾有关于培养基制备系统相关的资料，原理、应用、品牌、技术对比等越详细越好，哪位大虾愿意分享啊

因环境监测需要定期配制大量营养琼脂平皿，手动分装工作量大而且易污染，故有意求购培养基分装系统，有意者请联系

微载体培养技术（micro-carrier culture technique）于1967年被用于动物细胞大规模培养。经过三十余年的发展，该技术日趋完善和成熟，广泛应用于生产疫苗、基因工程产品等。微载体培养是目前公认最具发展前途的一种动物细胞大规模培养技术，其兼具悬浮培养和贴壁培养的优点，且容易放大。该技术已广泛用于培养各类型细胞，如293细胞、成肌细胞、Vero细胞、CHO细胞。一、微载体 微载体是指直径60-250 μm，能适用于贴壁细胞生长的微珠。一般是由天然葡聚糖或者各种合成的聚合物组成。常用商品化微载体有三种：Cytodex1、2、3，Cytopore和Cytoline。二、微载体培养原理与操作 其原理是将对细胞无害的微载体颗粒加入培养容器的培养液中，作为载体，使细胞在微载体表面附着生长，同时通过持续搅动使微载体始终保持悬浮状态。 贴壁依赖性细胞在微载体表面上的增殖，要经历黏附贴壁、生长和扩增三个阶段。细胞只有贴附在固体基质表面才能增殖，因此细胞在微载体表面的贴附是进一步铺展和生长的关键。细胞主要通过静电引力和范德华力与微载体黏附，这取决于细胞与微载体的接触概率和相融性。 由于动物细胞无细胞壁，对剪切力敏感，因此微载体培养在操作中对搅拌转速及搅拌方式的要求都十分严格。微载体培养要求搅拌的速度非常慢，最大速度75 r/min。细胞微载体培养通常分为三个时期：贴壁期，过渡期和培养期。贴壁期和过渡期可以使用超低速细胞磁力搅拌系统进行培养，该系统具有超低的搅拌速度，剪切力小且能在低速下充分混匀细胞。三、微载体培养的优势产业化细胞培养首先需要提供足够大的细胞生长面积，使培养容器单位容积所提供的细胞生长面积有所增加，从而提高疫苗和生化制剂的产量；其次需要加强和改善细胞培养的环境，有利于细胞生长；第三，细胞的均一化程度要高，在一个大发酵罐内培养细胞，生长环境需一致。要满足以上三点要求，常规的培养瓶静态培养，甚至是转瓶都很难满足，而微载体培养技术则能很好的解决这些问题。总结 综上所述，微载体的优势可以归纳为以下几点：表面积/体积大，单位体积培养液的细胞产率高；把悬浮细胞和贴壁细胞培养融合在一起，兼有两者的优点；可用简单的显微镜观察细胞在微珠表面的生长情况；简化细胞生长过程中对各种环境因素的检测和控制，重现性好；培养基利用率较高；放大容易；细胞收获过程不复杂；劳动强度小；培养系统占地面积和空间小等。

1．分批培养（batchculture）将微生物置于一定容积的培养基中，经培养，最后一次收获，谓分批培养。在分批培养中，培养基一次加入，不予补充，不再更换。由于营养消耗，代谢产物积累，对数生长期不能长期维持。2．连续培养（continuous culture）在培养器中不断补充新鲜营养物质，并不断排出部分培养物（包括菌体和代谢产物），以保持长时间生长状态的一种培养方式。主要有恒浊连续培养和恒化连续培养两类。恒浊连续培养通过不断调节流速，使培养液浊度保持恒定，因而可不断提供具有一定生理状态的细胞，并可得到以最高生长速率进行生长的培养物。恒化连续培养通过控制恒定的流速使营养物浓度基本恒定，从而使微生物保持恒定的生长速率。用不同浓度的限制性营养物进行恒化培养，可得到不同生长速率的培养物。3．半连续培养（semi－continuous culture）在发酵罐中的一部分发酵液保留下来作为菌种液，放出其余部分进入提练加工工序，在剩余的培养液中加满新的未接种的培养液，继续培养，如此反复，谓之半连续培养。4．补料分批培养（fed－batch culture）补料分批培养又称半分批培养，是指在分批培养过程中，间歇或连续地补加新鲜培养液，但不取出培养物。待培养到适当时期，将其从反应器中放出，从中提取目的生成物（菌体或代谢产物）。若放出大部分培养物后，继续进行补料培养，如此反复进行，则称为重复补料分批培养（repeated fed－batch culture）。与传统分批发酵相比，补料分批发酵的优点在于使发酵系统中的基质浓度维持在低水平，这有以下优点：①可除去快速利用碳源的阻遏效应，并维持适当的菌体浓度，以减轻供氧矛盾；②避免有毒代谢物的抑菌作用；③大为减少了无菌操作要求十分严格的接种的次数。与连续发酵相比，补料分批培养不会产生菌种老化和变异等问题。故其应用范围十分广泛。5．同步培养 能使培养的微生物处于较一致的，生长发育在同一阶段上的培养方法叫同步培养法。利用同步培养法控制细胞的生长，使它们处于同一生长阶段，所有细胞都能同时分裂，这种生长方式叫同步生长（图3—4）。用同步培养法得到的培养物叫同步培养物（synchronous culture）。这样，群体和个体行为一致，即可用研究群体的方法来研究个体水平上的问题。由于同步群体的个体差异，同步生长往往最多维持2个～3个世代，然后又逐步变为随机生长。

污染是导致细胞培养失败的一个主要因素，因而，二氧化碳培养箱的制造商们设计了多种不同的装置去减少和防止污染的发生，其主要途径都是尽量减少微生物可以生长的区域和表面，并结合自动排除污染装置来有效防止污染的产生。例如，鉴于CO2培养箱在使用过程中有时会伴有霉菌生长，为确保培养箱免受污染并且保证仪器箱体内的生物清洁性，相继问世了多种消毒灭菌方式，如带有紫外消毒功能的CO2培养箱；还有的设计生产了HEPA过滤器能过滤培养箱内空气，可过滤除去99.97%的0.3微米以上的颗粒；此外，还开发设计了能使箱内达到高温湿热的环境从而杀死污染微生物，达到消毒灭菌目的的培养箱。这些装置对于细胞培养来说是必不可少，但选择何种清洁装置呢？首先，我们考虑的当然是各种方式的灭菌能力，紫外消毒能力是与紫外灯距离目标的距离的二次方成反比，距离越远，消毒能力越差，所以紫外消毒方式有其局限性，难以达到彻底灭菌的要求；HEPA过滤器由于受到过滤膜孔径的影响，无法去除病毒和一些微小细菌，也有其局限性；相比较而言，高温消毒是目前比较有效消毒灭菌的方法，高温消毒又分为两类，一是传统的高温干热消毒，另一种是先进的高温湿热灭菌。接下来我们重点说一下高温干热和高温湿热两种方法的优劣。高温湿热由于蒸汽潜热大，穿透力强，容易使蛋白质变性或凝固，因此该法的灭菌效率比干热灭菌法高。其原因有三：①蛋白质凝固所需的温度与其含水量有关，含水量愈大，发生凝固所需的温度愈低。湿热灭菌的菌体蛋白质吸收水分，所以较同一温度的干热空气中易于凝固。②湿热灭菌过程中蒸汽放出大量潜热，加速提高湿度。因而湿热灭菌比干热所需温度低，如在同一温度下，则湿热灭菌所需时间比干热短。③湿热的穿透力比干热大，使其深部也能达到灭菌温度，故湿热比干热收效好一些。所以高温消毒并不是简单的看消毒温度，主要是看是否湿热消毒。另外，从使用角度看，湿热消毒一般控制在90°C就能达到很彻底的消毒效果，整个消毒过程中培养箱内的所有附件都不用取出，可以全部进行消毒；而干热消毒为了达到较好的效果，温度一般都在100°C以上，在这种温度下消毒培养箱内的传感器、HEPA过滤器等都要在消毒过程中取出，等消毒结束再装上，这样即麻烦，附件又不能同时消毒，而且增加二次污染的几率，再者要达到100°C以上的高温，培养箱的加热系统的电热丝必然要加粗，这会导致培养箱的温度控制难度增加，均一性变差。所以我们建议用户在选购二氧化碳培养箱时选择含高温湿热灭菌方式的培养箱。

厌氧培养箱简介该培养箱是一种可在无氧环境下进行细菌培养及操作的专用装置，可培养最难生长的厌氧生物，又能避免往厌氧生物在大气中操作时接触氧而死亡的危险性。　　结构特点：　　该产品由恒温培养室、厌氧操作室、取样室、气路及电路控制系统、箱架、瓶架、熔蜡消毒器等部分组成。设备具有以下主要　　特点：　　※ 使用科学先进手段达到高精度、恒温的厌氧环境，便于操作者在厌氧环境中进行操作和对厌氧菌培养。　　※ 温控采用微电脑智能控温仪，能准确直观地反映箱内实际温度，加上有效的限温保护装置，安全可靠。　　※ 箱内装有紫外线杀菌灯，气体经过滤后进入箱内，可有效地避免细菌污染。　　※ 气路装置，可任意调节流量，能任意输入各种所需气体。　　※ 操作室均由不锈钢板制成，其前窗采用厚透明耐冲击特种玻璃板制成，操作使用专用手套可靠舒适、灵活，使用方便。　　※ 操作室内备有特殊接种棒灭菌器，并附设有试管架、熔蜡消毒装置，还装有除氧催化器。　　技术指标　　取样室形成厌氧状态时间 12小时　　培养室使用温控范围 室温 +3～50℃　　培养室温度波动 ±0.3℃　　培养室温度均匀性 ±1℃　　电源/功率 220，50Hz/600W　　净重/毛重（Kg） 240/320　　培养室内尺寸（cm） 25×19×29 操作室尺寸（cm） 90×65×65　　外形尺寸（cm） 132×75×140　　包装箱尺寸（cm） 145×94×158

问：生化培养箱和一般培养箱有什么不同?答：1.最简单的说法就是：生化培养箱可以代替普通的恒温培养箱！它可以制冷，也可以制热！而一般的恒温培养箱只可以制热。2.一般的食品企业用不上生化的培养箱对不对? 3.一般做生化的时候就要用到的！具体看你们要检测什么了？如果就做细菌和大肠菌群，一般恒温培养箱就可以了！4.关键要看环境温度是多少，如果培养温度高于环境温度，一般培养箱就可以了，如果培养温度低于环境温度，必须要用生化培养箱，因为它有制冷功能，比如一般霉菌酵母的培养温度是27度左右，我们就可以用生化培养箱。5.我们这一般夏天有30多度，如果你处的地方长年低于25度……那么一般食品企业用普通的培养箱比生化培养箱用起来更不容易坏。6.我用的生化培养箱制冷功能坏了，做霉菌酵母的培养温度是27度左右，温度精度要求不是很高，培养温度低于环境温度我用空调来保证温度。 7.做霉菌酵母培养要求用恒温恒湿培养箱。8.生化培养箱的“恒湿”是如何实现的。我们的生化培养箱没有“恒湿”这功能的。有可以“恒湿”的生化培养箱吗？9.恒温也只是一定范围内的恒温，就是在设定的温度范围处波动（如设定为25度，它会在24.5-25.5之间波动，当然其波动范围也是通过调节设定的，可以设为1度、2度或0.5度等）。以前我用的老式恒温培养箱是用夹层中通入自来水或恒温循环水实现的 。10.恒湿是可以有的，不过那就是不是生化箱了，而是人工气候箱。具体的原理就是：1。湿度高时，需要除湿，是通过压缩机来作用的。2。干燥时，需要加湿，是通过外接的家用加湿机，就可以实现了。11.做霉菌培养时，由于压缩机的作用，培养箱内会比较干燥，这样不利于霉菌的培养。可以在培养箱内放置一只装满水的烧杯就可以了！12.正在郁闷这个问题呢。我们做霉菌和酵母菌数检查也是用的普通的霉菌培养箱，没有湿度控制的，不知道是否符合法规的要求？箱体内部湿度只有20％，但是实际用平皿培养的时候，三天内应该说里面都有冷凝水的，是否说明里面的适度依然保持在90％以上，满足检查需要呢？ 13.还有控温精度不一样，生化培养箱精度要求很高，大约正负0.1度，恒温培养箱正负1度！14.霉菌培养时，培养皿内冷凝水比较多，应该不会很干燥的吧。15.学习了，一直在用，但是没想到还有这么多学问的，以后要多多观察了。还以为生化培养箱是要做生化试验的呢，呵呵16.霉菌和菌落总数放在一个培养箱培养行的通吗？我们霉菌培养放在霉菌培养箱里的。

3.相对湿度控制：培养箱内相对湿度的控制是非常重要的，维持足够的湿度水平才能保证不会由于过度干燥而导致培养失败。大型的二氧化碳培养箱是用蒸汽发生器或喷雾器来控制相对湿度水平的，而大多数中、小型培养箱则是通过湿度控制面板（humidity pans）的蒸发作用产生湿气的（其产生的相对湿度水平可达95-98％）。一些培养箱有一个能在加热的控制面板上保持水份的湿度蓄水池（humidity reservoir），这样可以增强蒸发作用，此蓄水池能增加相对湿度水平达97-98％。但是，这个系统也更复杂，由于复杂结构的增加一些难以预料的问题也会在使用过程中出现。 4.微处理控制系统：每一个使用者都希望所用的仪器能够方便好用，微处理控制系统和其它各种功能附件（如高温自动调节和警报装置、CO2警报装置、密码保护设置、自动校准系统等等）的运用，就使得二氧化碳培养箱的操作和控制都非常的简便。微处理控制系统是维持培养箱内温度、湿度和CO2 浓度稳态的操作系统。例如PIC微处理器控制系统，它能严格控制气体的浓度并将其损耗降至极低水平，以保证培养环境恒定不变，且能保证长期培养过程中箱内温度精确，并有LED 显示，可设置、校正温度和CO2浓度。不同的微处理系统虽然名字不相同，但是其原理与控制效果则无甚区别，选购时不必太在意它们名字上的区别，关键是要自己觉得使用起来方便，容易操作，而且要能够达到所需的控制精度。此外，我想一个报警系统也是不可少的吧，它能让你及时知道培养箱出现的情况，并做出反应，从而最大限度地降低了损失，保证实验的连续性。有些培养箱有声/光报警装置，温度变化达±0.5℃，或CO2 浓度变化达±5%时，即会自动报警；有些具有CO2浓度异常报警显示功能。这些装置都是为了方便使用者，以减少繁琐枯燥的实验过程而设计的。5.污染物的控制：污染是导致细胞培养失败的一个主要因素，因而，二氧化碳培养箱的制造商们设计了多种不同的装置去减少和防止污染的发生，其主要途径都是尽量减少微生物可以生长的区域和表面，并结合自动排除污染装置来有效防止污染的产生。例如，鉴于CO2培养箱在使用过程中有时会伴有霉菌生长，为确保培养箱免受污染且保证仪器箱体内的生物清洁性，有些公司开发设计了带有紫外清洁功能的增强型CO2培养箱；还有公司设计的特有铜外壳HEPA滤器能过滤培养箱内空气，可过滤除去99.97%的0.3um以上的颗粒，并能有效杀死过滤时被挡在滤器内的微生物颗粒；此外，自动杀菌装置能使箱内温度达到90℃从而杀死污染微生物，当它与HEPA系统结合使用就能够极大的减少污染。这些装置对于细胞培养来说是必不可少，但选择何种清洁装置呢？当然功能越多越好的最适用，但是价格也会随之上升。如果经费有限，只能选择一个价格较便宜的，这时就应该配合使用一些消毒剂和除菌剂，经常进行消毒灭菌，也能达到贵仪器的效果，只是比较麻烦一点而已。总之，无论选择何种装置，都要时刻注意保持培养箱的清洁，经常清理箱体，这样才能增加仪器的使用寿命，并使实验顺利进行，保证结果的可靠性。6.其它因素：每一类型的二氧化碳培养箱温度、湿度和CO2 浓度的控制范围和控制精确度、均一度都有所不同。此时，购买仪器之前就要对自己实验室的要求有一定的了解：控制范围是多大呢？控制精度要求非常准确，还是可以有一定的浮动范围呢？因为有时太高的精度也好像没有太大的意义。只有对自己所需的产品有全面的了解才能选到自己的最佳“伙伴”。生物通龙虎榜为您提供了一些公司二氧化碳培养箱的具体参数，从中您可以得到一个具体的比较和分析，说不定里面会有您心仪的仪器呢。培养箱的容积也是一个不可忽略的因素，买小了不够用，大了又浪费又占地方。二氧化碳培养箱的可选容积非常广，包括小型（700升），而且每种类型又有不同的容积可选。此时，就需要您在选购前对所需培养箱容积的范围有一个比较准确的了解，并在此基础上多预留一点空间，以保证不时之需。此外，有些二氧化碳培养箱还具有许多特别的功能，如有Thermogard 风扇管理系统，从而实现了风量的智能化调节；有单通道循环系统，以确保培养箱内部温度的均一性，同时也降低了污染；LCD（液晶）显示系统，硅树脂温度传感器测量温度等等。这些各种各样的附件装置的选择都是为了方便选购者的选择和使用。从技术角度来选择二氧化碳培养箱由于动物细胞培养液一般使用碳酸盐pH缓冲系统，要求培养环境中维持一定浓度的CO2，所以动物细胞的培养一般需要CO2培养箱。 　　CO2培养箱采用两种不同的CO2维持系统。一种方式是通过使用空气泵，将CO2和空气按一定比例混合后吹入培养箱。另一种方式是通过一个自动的CO2检测控制系统，在检测到CO2浓度低于要求浓度时打开CO2气阀充入CO2。由于前一种方法耗费CO2而且不容易精确控制CO2浓度，先进的CO2培养箱都采用自动监控系统来维持CO2的浓度。　　配有自动CO2检测控制系统的培养箱需要根据生产厂家的说明，定期做CO2浓度的测试和矫正。 　　CO2培养箱的隔热采用水套式和气套式两种类型。水套式需要用户在安装培养箱时培养箱壁的空间内灌入大量蒸馏水。由于水的比热容很高，水套式的优点是有助于均匀散热和避免形成冷区，以及在断电后能够比较好的减缓培养箱内温度的降低。　　目前大多数实验室都使用进口的细胞培养箱。虽然进口的产品质量上比较有保障，但价格很贵，而且售后服务不是很方便。　　CO2培养箱一般配一个水盘，用以维持很高的湿度。水盘内的水要定期添加，水盘也要定期清洗以避免微生物的生长。 　　为了减少微生物的污染，有一些CO2培养箱提供灭菌功能。有的可以加热到比较高的温度来灭菌，有的则通过让空气循环通过一个紫外线腔体的办法来灭菌，这样就灭菌时就不需要中断细胞的培养。

作者： 陈文庆 王建超 刘华杰 高飞 张韧 （北京清大天一科技有限公司 102200 ） （《中国兽药杂志》 2010.44 （ 10 ）： 37-41 ）【摘要】 采用反应器全悬浮培养BHK21细胞生产口蹄疫病毒与微载体悬浮培养Vero细胞生产狂犬病毒分别与相应的转瓶培养工艺生产案例对比分析，比较悬浮培养工艺与转瓶培养工艺的生产效益。分析显示，与转瓶培养工艺相比，反应器悬浮培养工艺获得的细胞密度、病毒效价、产品的产量和质量明显提高，生产时的能耗和劳动力需求明显降低。结果表明悬浮培养工艺的生产效益明显高于转瓶培养工艺，适宜于国内生物制品工业化生产的升级换代。【关键词 】 细胞培养；生物反应器；悬浮培养；微载体细胞悬浮培养技术是指细胞在生物反应器中自由悬浮于培养液内生长增殖的一种培养方法。根据细胞是否贴壁，又分为全悬浮细胞培养和贴壁细胞微载体培养。国际上该项技术发展较快，已趋向成熟，是疫苗、抗体等生物制品生产的普遍生产工艺模式。与转瓶培养技术相比，该工艺具有操作简单、产率高、容易放大等优点，本文结合口蹄疫病毒和狂犬病毒的生产，分别对细胞悬浮培养工艺与转瓶培养工艺的经济效益等进行了分析和分析。1. 全悬浮培养口蹄疫病毒与转瓶培养案例对比高效、安全的病毒性疫苗是防止口蹄疫情发生的最有效方法。BHK21细胞是繁殖FMDV的理想宿主，早在1962年Capstick PB等就实现FMDV的悬浮培养。1965年Telling, R.C.等实现在不锈钢发酵罐中悬浮培养BHK21细胞生产口蹄疫疫苗。目前国外（Intervet公司、Merial公司）普遍已经采用2000~5000L反应器悬浮培养BHK21细胞生产口蹄疫苗。本文就本公司自主研发的650L生物反应器和无血清培养基进行悬浮培养BHK21细胞生产口蹄疫疫苗与转瓶培养工艺进行比较和分析。1.1主要材料细胞株：BHK21贴壁细胞株（中国兽医药品监察所）毒 株：FMDV-O型（某兽用疫苗企业）培养基：低血清MEM培养基(产品代号MD611)、BHK21细胞无血清培养基（北京清大天一科技有限公司）血 清：特级新生牛血清（杭州四季青生物工程材料有限公司）仪 器：5 L反应器（德国贝朗），120L和650LCLAVORUS ® 生物反应器（北京清大天一科技有限公司）1.2实验方法1.2.1转瓶培养BHK21细胞生产口蹄疫病毒将复苏的BHK21细胞在T75培养瓶中使用低血清培养基（含5％牛血清）培养，连续传代扩增接种15L转瓶，37 ℃培养48小时，传代比例为1:8-1:10，按常规方法接种病毒及维持液，细胞病变90%左右收获病毒液。1.2.2反应器全悬浮无血清培养BHK21细胞生产口蹄疫病毒（1）贴壁细胞悬浮驯化培养：用BHK21细胞无血清培养基在恒温摇床或者方瓶中无血清驯化贴壁BHK21细胞，可采用直接驯化或者逐级降低血清驯化等方法，每代观察细胞数量和细胞活率，直至BHK21细胞在无血清培养基中的生长增殖速率正常，细胞活率达95%以上，并可连续稳定传代，说明细胞已适应无血清悬浮培养。（2）反应器用种子细胞扩增：采用反应器罐倒罐逐级放大技术，细胞从摇瓶→5 L反应器→120 L反应器→650 L反应器进行逐级放大培养。细胞培养方式为批培养，控制反应器各参数在正常范围：温度37.0 ℃、pH7.2~7.4、溶氧（DO）20~70%、搅拌转速50~150 r/min。（3）反应器培养口蹄疫病毒：待650 L反应器中细胞达到一定密度，提高培养pH至7.5左右，按一定比例直接接种口蹄疫病毒进行病毒维持培养，控制温度、pH、DO、搅拌转速等参数在合适范围，在线无菌间隔取样判断细胞病变情况并检测病毒毒价（LD50,TCID50），确定收获的最佳时间。1.3 细胞培养结果对比分别对低血清培养基15 L转瓶培养的贴壁BHK21细胞进行观察和细胞计数，反应器全悬浮培养的BHK21细胞取样进行数量和活率检测。培养条件和结果对比见表1。表1 转瓶培养和反应器全悬浮培养BHK21细胞对比http://img.dxycdn.com/trademd/upload/userfiles/image/2013/10/A1380442105_small.jpg http://img.dxycdn.com/trademd/upload/userfiles/image/2013/10/A1380442106_small.jpg http://img.dxycdn.com/trademd/upload/userfiles/image/2013/10/A1380442107_small.jpg 图1 转瓶BHK21细胞低血清培养48 hr，100X 图2 反应器全悬浮无血清培养48 hr，100X 结果显示，转瓶培养的BHK21细胞，培养48小时显微镜观察成致密单层，见图1，96小时细胞开始出现脱落死亡；反应器无血清全悬浮培养BHK21细胞48小时的细胞显微镜观察状态如图2，生长至96小时细胞密度可达5.4x106 cells/ml，活率维持在94%左右。从细胞数量比较，650L反应器培养一批的细胞数量相当于500～700个15 L转瓶培养的细胞总量。1.4 病毒培养效果对比两种不同培养工艺，细胞在满足活力要求的基础上，以同等条件分别接种FMDV病毒，取样测定病毒毒价，结果见表2。 表2 转瓶和反应器全悬浮培养BHK21细胞病毒毒价对比http://img.dxycdn.com/trademd/upload/userfiles/image/2013/10/A1380442112_small.jpg结果表明，无血清悬浮培养的口蹄疫病毒毒价（TCID50和LD50）检测不低于转瓶培养工艺。根据反应器低血清悬浮培养BHK21细胞生产口蹄疫完整病毒粒子（146S）检测较转瓶高10倍左右的情况，应用无血清悬浮培养工艺，杂蛋白含量更少，口蹄疫完整病毒粒子和口蹄疫疫苗质量均提高。1.5 反应器和转瓶经济效益估算对比依据培养BHK21细胞生产口蹄疫病毒工艺过程要求，从细胞密度、病毒毒价、产品效力、资源环境、劳动力等方面进行简单对比，借以一窥二者的经济效益差别（见表3）。 表3 反应器无血清悬浮培养与转瓶培养BHK21细胞经济效益对比http://img.dxycdn.com/trademd/upload/userfiles/image/2013/10/A1380442114_small.jpg*按照反应器无血清悬浮培养一条生产线（5L-120L-650L）、转瓶体积15 L进行对比按照目前培养BHK21细胞生产口蹄疫病毒质量要求，对悬浮无血清培养工艺的产能进行预估，一条5L-120L-650L的反应器生产线年生产病毒量约为2.1亿毫升，生产疫苗量约为4.2亿毫升。2. 人狂犬病毒微载体培养与转瓶培养的对比我国是受狂犬病危害最为严重的国家之一，近年报告狂犬病死亡人数均在2400人/年以上，一直位居我国各类传染病报告死亡数的前三位，根据有关国家成功控制狂犬病的经验，世界卫生组织提出倡议，到2020年消除人狂犬病。我国距此倡议目标还有大量工作要做，国内也对人用和兽用狂犬病疫苗的生产做了大量研究工作。下面就120L反应器微载体培养Vero细胞生产狂犬病毒效果与转瓶培养工艺和培养效果比较分析。2.1主要材料细胞株：Vero细胞株毒 株：aG株（细胞株和毒株均来自某人用疫苗企业）培养基：低血清199培养基（产品代号MD504）、 Vero细胞反应器培养用培养基（产品代号MD505）, 均来自北京清大天一科技有限公司仪 器：5 L反应器（德国贝朗）、120LCLAVORUS ® 生物反应器（北京清大天一科技有限公司）血 清：特级新生牛血清（杭州四季青生物工程材料有限公司）微载体：Cytodex 1 （美国GE

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低温培养箱制冷工作原理：制冷循环采用逆卡若循环，该循环出两个等温过程和两个绝热过程组成，其过程如下：制冷剂经压缩机绝热压缩到较高的压力，消耗了的功使排气温度升高，之后制冷剂经冷凝器等温地和四周介质进行热交换将热量传给四周介质。后制冷剂经截流阀绝热膨胀做功，这时制冷剂温度降低。最后制冷剂通过蒸发器等温地从温度较高的物体吸热，使被冷却物体温度降低。此循环周而复始从而达到降温之目的。本试验箱之制冷系统采用1套法国产泰康全封闭压缩机所组成的二元复叠氟利昂制冷系统。制冷系统的设计应用能量调节技术,既能保证制冷机组正常运行,又能对制冷系统的能耗及制冷量进行有效的调节，使制冷系统保持在最佳的运行状态。采用平衡调温（BTHC）,既在制冷系统在连续工作的情况下，控制系统根据设定之温度点通过PID自动运算输出的结果去控制加热器的输出量，最终达到一种动态平衡。低温培养箱 操作流程： 控制面板 1、电源开关: “POWER”，打开开关，使之处于“I”位置。 2、温度：“SET TEMPERATURE”，数字显示和UP/DOWN标志用来设定温度和校正温度。 3、超温保护：“SET OVERTEMPERATURE”，刻度为“0”到“10”可调，独立超温保护为设定的温度提供双重保护。4、加热灯：“HEATING ACTIVATED”，灯亮表示正在加热。 5、超温保护灯：“OVERTEMPERATURE ACTIVATED”，灯亮表示超温保护正在起作用，即超温保护装置限制了温度的上升。 6、日间/夜间程序控制器：24小时刻度被分为2个12小时，分别表示日间和夜间。在日间和夜间间转换。 7、光照控制器：24小时刻度持续控制光照或黑暗模式。8、保险：位于底部电源线入口附近，为电压波动时提供保护，是自动高温限制的补充。如保险丝被烧，仪器将停止运转，需更换保险。低温培养箱 基本操作规程1、接通电源，打开开关，将超温保护选钮用硬币顺时针旋到最大。 2、将一支精确的温度计放在培养箱中央供校正用，注意不要碰到搁板或者内壁。 3、为使温度均匀性达到最好，培养箱周围必须空气流通。 4、培养箱底部多余的霜会影响温度均匀性，所以箱内不要放置无盖的液体容器，箱内湿气的蒸发只会增加霜的产生。 5、温度设置：进入温度设置界面，按住面板上的UP或DOWN，数字显示开始闪烁，闪烁时显示的数字为设定值。要改变设定值，按住UP或DOWN调整。如超过五秒未有任何操作，数字停止闪烁，此时显示的数字为箱内实际温度。运行24小时以上达到稳定。 6、校正：建议安装时，并稳定数小时后进行校正，待温度稳定后，将显示温度与温度计测得的实际温度比较，如有不能接受的误差，则需要进行校正：同时按住UP和DOWN五秒进入校正模式，数字开始闪烁，按住UP或DOWN将温度设置成与实际温度一致。待培养箱再次稳定后，必要时重新校正。 7、超温保护：首先将超温保护旋钮顺时针旋到最大，待温度稳定后，逆时针旋转至超温保护灯亮， 然后顺时针旋至灯刚巧熄灭，再顺时针旋两小格，这样就使超温保护超过设定值1℃左右。 8、时间：“SET DAY/NIGHT”、“SET LIGHT TIME”是两个独立的时间控制器，且都是顺时针方向。每个刻度盘分为96小格，每格代表15分钟。 a、设置时间：每个刻度盘被分为两个12小时，分别表示日间和夜间。将时间调整正确。 b、温度：黄色部分在外时，日间温度起作用；黄色部分被覆盖时，夜间温度起作用。 c、光照：黄色部分在外时，灯亮；黄色部分被覆盖时，灯灭。 9、外接设备：培养箱内可外接不超过1A的设备，但设备可能会产生多余的热量，影响培养箱的温度范围，建议检查培养箱和附加设备以确保运行条件满足要求。 10、正常条件下，培养箱外壁会高于常温。

**提供生化培养箱使用于环境保护、卫生防疫、药检、农畜、水产等科研、院校、生产部门。是水体分析和BOD测定，细菌、霉菌、微生物的培养、保存、植物栽培、育种试验的专用恒温设备。用途： SP型智能生化培养箱是具有制冷，加热控制的高精度恒温设备，是细菌，微生物培养试验的恒温培养装置，适用于生物工程，医学研究，卫生防疫，环境保护，药检，畜牧，水产，高校院校，科研机构等领域从事科研和生产使用的理想设备。特点：1 箱体采用优质制作而成，表面喷塑，内胆采用医用镜面不锈钢，易清洁，箱内搁板间距可调，大视角观察窗口;2微电脑智能数显控温仪，PID控制，触摸型按键，同时显示设定温度和箱内温度，控温精度可靠，具有定时功能，并具有超温保护装置，声光报警功能；3 采用品牌压缩机，环保制冷剂，效率高，能耗低，促进节能。4名牌微风机组成合理先进的温度循环系统，使箱内小试均匀。5箱内有照明灯，可观察箱内培养物；6可配RS-485接口，可连接打印机和计算机，记录温度参数的变化情况（选配）生化培养箱使用说明： 1、接通电源，合上电源开关，整机通电，开关内的电源指示灯亮。 2、控温设定请参照智能型数字温度控制器说明书。 3、如需照明打开照明开关。 4、本培养箱有断点保护功能及一分半钟左右延时功能，压缩机停机后再次启动要达一分半钟左右。 生化培养箱维护和培养： 1、培养箱外壳应可靠接地。 2、培养箱要放置在阴凉、干燥、通风良好、远离热源和日晒的地方。放置平稳，以防震动发生噪音。 3、为保证冷凝器有效地散热，冷凝器与墙壁之间距离应大于100mm。箱体侧面应有50mm间隙，箱体顶部至少应有300mm空间。 4、培养箱在搬运、维修、保养时，应避免碰撞，摇晃震动;最大倾斜度小于45度。 5、仪器突然不工作，请检查熔丝管(箱后)是否烧坏，检查供电情况。 6、本生化培养箱制冷工作时，不宜使箱内温度与环境温度之差大于25度。

细胞培养FAQ： 1 冷冻管应如何解冻？ 取出冷冻管后， 须立即放入37 °C 水槽中快速解冻， 轻摇冷冻管使其在1 分钟内全部融化， 并注意水面不可超过冷冻管盖沿， 否则易发生污染情形。另冷冻管由液氮桶中取出解冻时， 必须注意安全， 预防冷冻管之爆裂。 2 细胞冷冻管解冻培养时， 是否应马上去除DMSO？ 除少数特别注明对DMSO 敏感之细胞外， 绝大部分细胞株（包括悬浮性细胞）， 在解冻之后， 应直接放入含有10-15ml新鲜培养基之培养角瓶中， 待隔天再置换新鲜培养基以去除DMSO 即可， 如此可避免大部分解冻后细胞无法生长或贴附之问题。 3 可否使用与原先培养条件不同之培养基？ 不能。每一细胞株均有其特定使用且已适应之细胞培养基， 若骤然使用和原先提供之培养条件不同之培养基， 细胞大都无法立即适应， 造成细胞无法存活。 4 可否使用与原先培养条件不同之血清种类？ 不能。血清是细胞培养上一个极为重要的营养来源， 所以血清的种类和品质对于细胞的生长会产生极大的影响。来自不同物种的血清， 在一些物质或分子的量或内容物上都有所不同，血清使用错误常会造成细胞无法存活。 5 何谓FBS, FCS, CS, HS ? FBS (fetal bovine serum) 和FCS (fetal calf serum) 是相同的意思， 两者都是指胎牛血清， FCS 乃错误的使用字眼， 请不要再使用。CS (calf serum) 则是指小牛血清。HS (horseserum) 则是指马血清。 6 培养细胞时应使用5 % 或10% CO2？或根本没有影响？ 一般培养基中大都使用HCO3-/CO32-/H+ 作为pH 的缓冲系统， 而培养基中NaHCO3 的含量将决定细胞培养时应使用的CO2 浓度。当培养基中NaHCO3 含量为每公升3.7 g 时，细胞培养时应使用10 % CO2；当培养基中NaHCO3 为每公升1.5 g 时， 则应使用5 % CO2 培养细胞。 7 何时须更换培养基？ 视细胞生长密度而定， 或遵照细胞株基本数据上之更换时间，按时更换培养基即可。 8 培养基中是否须添加抗生素？ 除于特殊筛选系统中外， [font=宋

霉菌培养箱是适合培养霉菌等真核微生物的试验设备，因为大部分霉菌适合在室温(25摄氏度)下生长，且在固体基质上培养时需要保持一定的湿度。霉菌培养箱由制冷系统、制热系统、空气加湿器和培养室、控制电路和操作面板等部分组成，并使用温度传感器和湿度传感器来维持培养室内的温度和湿度的稳定。 霉菌培养箱采用国内首创流线圆弧型设计，外壳采用冷轧钢板制造、表面静电喷塑；工作内腔采用镜面不锈钢材质。霉菌培养箱外表采用烤漆亚光镀层避免光辐射，内胆镜面不锈钢，隔板可以任意调节；观察窗采用独创的复门设计，观察内腔培养物品时可打开复门观察，不用观察时可关闭复门。霉菌培养箱具有因停电、死机状态数据丢失而保护的参数记忆，来电恢复功能；采用微电脑智能控制，液晶显示控制温度、时间，具有超温报警功能。 霉菌培养箱可以设定温度湿度随培养时间变化，是水体分析和 BOD 测定细菌、霉菌、微生物的培养、保存、植物栽培、育种实验的专用恒温、恒温振荡设备，可应用于各种霉菌、组织细胞、微生物、抗生物的培养，也可用于昆虫、小动物的饲养及其它用途的恒温试验。霉菌培养箱广泛应用于环境保护、卫生防疫、农畜、药检、水产等科研、院校实验、生产部门、生物工程、饮料等科研部门、大专院校的理想之选。

[color=#111111]培养箱是培养微生物的主要设备，可用于细菌、细胞的培养繁殖。其原理是应用人工的方法在培养箱内造成微生物和细胞、细菌生长繁殖的人工环境，如控制一定的温度、湿度、气体等。 [/color][color=#111111]目前使用的培养箱主要分为四种：直接电热式培养箱、隔水电热式培养箱、生化培养箱和二氧化碳培养箱。 [/color][color=#111111](一) 电热式和隔水式培养箱 [/color][color=#111111]电热式和隔水式培养箱的外壳通常用石棉板或铁皮喷漆制成，恒温培养箱内层为紫铜皮制的贮水夹层，电热式培养箱的夹层是用石棉或玻璃棉等绝热材料制成，以增强保温效果，培养箱顶部设有温度计，用温度控制器自动控制，使箱内温度恒定。隔水式培养箱采用电热管加热水的方式加温，电热式培养箱采用的是用电热丝直接加热，利用空气对流，使箱内温度均匀。 [/color][color=#111111](二) 生化培养箱 [/color][color=#111111]生化培养箱具有制冷和加热双向调温系统，温度可控的功能，是生物、遗传工程、医学、卫生防疫、环境保护、农林畜牧等行业的科研机构、大专院校、生产单位或部门实验室的重要试验设备，广泛应用于低温恒温试验、培养试验、环境试验等。生化培养箱控制器电路由温度传感器、电压比较器和控制执行电路组成。这种培养箱同时装有电热丝加热和压缩机制冷。因此可适应范围很大，一年四季均可保持在恒定温度，因而逐渐普及。 该培养箱使用与维修保养类似电热式培养箱。由于安装有压缩机，因此也要遵守冰箱保养的注意事项， 如保持电压稳定， 不要过度倾斜， 及时清扫散热器上的灰尘等。 [/color][color=#111111]应用范围 [/color][color=#111111]生化培养箱广泛适用于环境保护、卫生防疫、药检、农畜、水产等研究、院校、生产部门、是水体分析和BOD测定，细菌、霉菌、微生物的培养、保存、植物栽培、育种实验的专用恒温设备。 [/color][color=#111111](三) 二氧化碳培养箱 [/color][color=#111111]二氧化碳培养箱是通过在培养箱箱体内模拟形成一个类似细胞/组织在生物体内的生长环境，培养箱要求稳定的温度（37°C）、稳定的CO2水平（5%）、恒定的酸碱度（pH值：7.2-7.4）、较高的相对饱和湿度（95%），来对细胞/组织进行体外培养的一种装置。 [/color][color=#111111]应用范围 [/color][color=#111111]其广泛应用于细胞、组织培养和某些特殊微生物的培养，常见于细胞动力学研究、哺乳动物细胞分泌物的收集、各种物理、化学因素的致癌或毒理效应、抗原的研究和生产、培养杂交瘤细胞生产抗体、体外授精（IVF）、干细胞、组织工程、药物筛选等研究领域。 [/color][color=#111111]二氧化碳培养箱（基于微流控芯片的细胞长期培养装置，可以为微流控芯片提供温度、湿度、二氧化碳、流体控制环境，从而可以满足细胞长期培养的需求，可以应用在药筛和药代等领域。）[/color]

[em17] 二氧化碳培养箱的选购与使用 在过去的数十年间，细胞生物学、分子生物学、药理学等的研究领域都有了惊人的长足进步，同时，这些领域中的技术应用也不得不跟上“脚步”。虽然典型的生命科学实验室设备有了很大的改变，但二氧化碳培养箱依然是实验室中的主要组成部分，其使用的最终目的都是维持和促使细胞和组织更好地生长。然而，随着技术的进步，其功能和运作都变得越来越精确、可靠和方便。如今，二氧化碳培养箱已成为实验室最普遍使用的常规仪器之一，已广泛应用于医学、免疫学、遗传学、微生物、农业科学、药物学的研究和生产。 CO2培养箱是通过对周围环境条件的控制制造出一个能使细胞/组织更好地生长的环境，条件控制的结果就会形成一个稳定的条件：如恒定的酸碱度（pH值：7.2-7.4）、稳定的温度（37°C）、较高的相对湿度（95％）、稳定的CO2水平（5％），这就是为什么上述领域的研究员如此热衷于使用方便稳定可靠的二氧化碳培养箱。此外，由于增加了二氧化碳浓度控制，并且使用微控制器对培养箱温度进行精确控制，使生物细胞，组织等的培养成功率、效率都得到改善。总之，二氧化碳培养箱是普通电热恒温培养箱不可替代的新型培养箱。 使用者对二氧化碳培养箱的选购最关心的当然就是其可靠性、污染物的控制和使用方便。CO2培养箱主要控制模拟活体内环境相关的3个基本变量：稳定的CO2水平、温度、相对湿度。要有稳定的培养环境，就要考虑这三方面的影响因素，选购时，就应该对这些“重中之重”有一定的了解才能选到适合自己的仪器。但是，其它的一些方面的“小”因素也不能忽略，因为这些都会影响仪器的使用价值和寿命。选购时，就应该从各方面的因素加以考虑。温度控制： 保持培养箱内恒定的温度是维持细胞健康生长的重要因素。当选购二氧化碳培养箱时，有两种类型的加热结构可供选择：气套式加热和水套式加热。虽然这两种加热系统都是精确和可靠的，但是它们都有着各自的优点和缺点。水套式培养箱是通过一个独立的热水间隔间包围内部的箱体来维持温度恒定的。热水通过自然对流在箱体内循环流动，热量通过辐射传递到箱体内部从而保持了温度的恒定。独特的水套式设计有其优点：水是一种很好的绝热物质，当遇到断电的时候，水套式系统就能更可靠地长久保持培养箱内的温度准确性和稳定性（维持温度恒定的时间是气套式系统的4-5倍）。如果您的实验环境不太稳定（如有用电限制，或者经常停电）并需要保持长时间稳定的培养条件，此时，水套式设计的二氧化碳培养箱就是您最好的选择。而气套式加热系统是通过箱体内的加热器直接对箱内气体进行加热的。气套式设计在箱门频繁开关引起的温度经常性改变的情况下能够迅速恢复箱体内的温度稳定。因此，气套式与水套式相比，具有加热快，温度的恢复比水套式培养箱迅速的特点，特别有利于短期培养以及需要箱门频繁开关的培养。此外，对于使用者来说气套式设计比水套式更简单化（水套式需要对水箱进行加水、清空和清洗，并要经常监控水箱运作的情况）。在购买气套式培养箱时，要注意的是：为了不影响培养，培养箱还应该有一个风扇以保证箱内空气的流通和循环，此装置还有助于箱内温度、CO2和相对湿度的迅速恢复。 此外，有些类型的二氧化碳培养箱还具备外门及辅助加热系统，这个系统能加热内门，提供给细胞良好的湿度环境，保证细胞渗透压维持平衡，且可有效防止形成冷凝水以保持培养箱内的湿度和温度。如果您的培养环境需要精确的控制，那么这个辅助系统则是必不可少的。CO2控制： CO2 浓度探测可通过两种控制系统——红外传感器（IR）或热传导传感器（TC）进行测量。当二氧化碳培养箱的门被打开时，CO2从箱体内漏出，此时传感器就会探测到CO2浓度的降低，并做出及时的反应，重新注入CO2使其恢复到原先预设的水平。热传导传感器（TC）监控CO2浓度的工作原理是通过测量两个电热调节器（一个调节器暴露于箱体环境内，另一个则是封闭的）之间的电阻变化来实现的。箱内CO2浓度的变化会改变两个电热调节器间的电阻，从而促使传感器产生反应以达到调节CO2水平的作用。TC控制系统的一个缺点就是箱内温度和相对湿度的改变会影响传感器的精确度。当箱门被频繁打开时，不仅CO2浓度，温度和相对湿度也会发生很大的波动，因而影响了TC传感器的精度。当需要精确的培养条件和频繁开启培养箱门时，此控制系统就显得不太适用了。红外传感器（IR）作为另一个可选择的控制系统比TC系统具备更精确的CO2控制能力，它是通过一个光学传感器来检测CO2水平的。IR系统包括一个红外发射器和一个传感器，当箱体内的CO2吸收了发射器发射的部分红外线之后，传感器就可以检测出红外线的减少量，而被吸收红外线的量正好对应于箱体内CO2的水平，从而可以得出箱体内CO2的浓度。因为IR系统不会因温度和相对湿度的改变而受到影响，所以它比TC系统更精确，特别适用于需要频繁开启培养箱门的细胞培养。然而，此系统比TC系统更贵，这时就要结合经费预算进行考虑了。

在自然条件下，微生物常常在各种生态系统中群居杂聚。为了研究某种微生物的特性，或者大量培养和利用某一种微生物，必须事先从有关的生态环境中分离出所需的菌株，获得纯培养。获得纯培养的方法，称为微生物的纯种分离法，这一过程称为微生物的分离和纯化。欲从含有多种微生物的样品中直接辨认出，并且取得某种所需微生物的个体，进行纯培养，那是困难的。由于微生物可以形成菌落，而每个单一菌落常常很可能是由一种个体繁殖而成。不同微生物的菌落是可以识别和加以鉴定的。因些将样品中不同微生物个体在特定的培养基上培养出不同的单一菌落，再从选定的某一所需菌落中取样，移植到新的培养基中去，就可以达到分离纯种的目的。这也就是常用纯种分离法的原理。在微生物的分离和纯培养过程中，必须使用无菌操作技术。所谓无菌操作，就是在分离、接种、移植等各个操作环节中，必须保证在操作过程中杜绝外界环境中的杂菌进入培养的容器或系统内，从而污染培养物。具体操作方法见本实验有关部分和教师作示范。获得微生物纯培养的常用方法有稀释平板分离法和平板划线分离法等。有条件的单位也可用显微操纵器单细胞分离法。针对不同的分离材料和条件，可以采用不同的分离方法。一、目的要求1. 初步掌握微生物的分离、培养和菌种保藏的基本方法。2. 练习微生物接种、移植和培养的基本技术，掌握无菌操作技术。二、实验材料样品：新鲜土壤。培养基：灭菌的牛肉膏蛋白胨琼脂培养基、淀粉琼脂培养基、马铃薯蔗糖培养基（10mL装）。无菌水：带有玻璃珠装有45mL无菌水三角瓶、装有9 mL无菌水的试管。其它：无菌培养皿、无菌吸管、无菌三角玻棒、台天平、记号笔、接种环、酒精灯、火柴、标签纸、胶水、水泡锅。试剂：5000U/mL链霉素液0.5％重铅酸钾液。

二氧化碳培养箱广泛应用于医学、免疫学、遗传学、微生物、农业科学、药物学的研究和生产，已经成为上述领域实验室最普遍使用的常规仪器之一，其通过在培养箱箱体内模拟形成一个类似细胞/组织在生物体内的生长环境如恒定的酸碱度(pH值：7.2-7.4)、稳定的温度(37°C)、较高的相对湿度(95%)、稳定的CO2水平(5%)，来对细胞/组织进行体外培养的一种装置。用户对二氧化碳培养箱都有两条最基本的要求，一是要求二氧化碳培养箱能够对温度、二氧化碳浓度和湿度提供最精确稳定的控制，以便于其研究工作的进展；二是要求二氧化碳培养箱能够对培养箱内的微生物污染进行有效的防范，并且能够定期消除污染，以保护研究成果，防止样品损失。所以，选购二氧化碳培养箱的老师最关心的当然就是其高可靠性、对污染的防范和控制及使用方便。一、加热方式的区分：气套式加热和水套式加热，两种加热系统都是精确和可靠的，同时它们都有着各自的优点和缺点。水套式加热是通过一个独立的水套层包围内部的箱体来维持温度恒定的，其优点：水是一种很好的绝热物质，当遇到断电的时候，水套式系统就可以比较长时间的保持培养箱内的温度准确性和稳定性(维持温度恒定的时间是气套式系统的3-4倍)，有利于实验环境不太稳定(如有用电限制，或者经常停电)并需要保持长时间稳定的培养条件的用户选用。气套式加热是通过遍布箱体气套层内的加热器直接对内箱体进行加热的，又叫六面直接加热。气套式与水套式相比，具有加热快，温度的恢复比水套式CO2培养箱迅速的特点，特别有利于短期培养以及需要箱门频繁开关的培养。此外，对于使用者来说气套式设计比水套式更简单化(水套式需要对水箱进行加水、清空和清洗，并要经常监控水箱运作的情况)。二、二氧化碳浓度控制1. 两种控制系统：红外传感器(IR)或热导传感器(TCD)进行测量。两种传感器都是准确的，但都各有优缺点。热导传感器监控CO2浓度的工作原理是基于对内腔空气热导率的连续测量,输入CO2气体的低热导率会使腔内空气的热导率发生变化,这样就会产生一个与CO2浓度直接成正比的电信号。红外传感器(IR)它是通过一个光学传感器来检测CO2水平的。IR系统包括一个红外发射器和一个传感器，当箱体内的CO2吸收了发射器发射的部分红外线之后，传感器就可以检测出红外线的减少量，而被吸收红外线的量正好对应于箱体内CO2的水平，从而可以得出箱体内CO2的浓度。由于IR系统是通过红外线减少来确定箱内CO2浓度，而箱体内颗粒物能够反射或部分吸收红外线，使得IR系统对箱体内颗粒物的多少比较敏感，因此IR传感器应用在含HEPA高效空气过滤器的培养箱内比较合适。2. CO2测量系统自动校准功能：无论哪种CO2测量系统在使用一段时间后都会产生漂移，而产生漂移后直接会导致箱体内二氧化碳浓度不能稳定在我们的设定值，致使培养失败，所以我们在这里强烈建议用户在选购培养箱时必须要选择带有CO2测量系统自动校准功能的培养箱。三、相对湿度箱内湿度对于培养工作来说是一项非常重要然而又经常被忽略的因素。维持足够的湿度水平并且要有足够快的湿度恢复速度(如在开关门后)才能保证不会由于过度干燥而导致培养失败。目前大多数的二氧化碳培养箱是通过增湿盘的蒸发作用产生湿气的(其产生的相对湿度水平可达95%左右，但开门后湿度恢复速度很慢)。我们在此建议用户在选购二氧化碳培养箱的时候尽量选择湿度蒸发面积大的培养箱，因为我们知道湿度蒸发面积越大，越容易达到最大相对饱和湿度并且开关门后的湿度恢复的时间越短。

导读：隔水式恒温培养箱应用广泛，为了能够让其发挥到最好的状态，了解其结构形式和注意事项对隔水式恒温培养箱的应用有很大的帮助，下面小编就给大家介绍一下隔水式恒温培养箱。一、结构隔水式恒温培养箱（以下简称培养箱）外形为立式。箱体和外箱门采用优质钢板、表面喷塑，箱门采用钢化玻璃观察窗，能清晰直接观察箱内的培养物品，工作室（内胆）采用不锈钢亚弧焊接制成，可任意改变搁板的高度。外门与箱体磁性门封条，以保证工作室的密封性。工作室采用“U”型水箱隔水加热，箱体左上侧有一加水口，左下侧有一放水口，左背后有一溢水橡皮管。工作室后背装有一只低噪声小型风机，保证箱内温度均匀性。箱体外壳和工作室间填充超细玻璃棉隔热。控温系统由传感器（Pt100铂电阻）、温度控制器、加热器等组成，当温度控制器接受传感器输出电阻信号（0℃时为100Ω，0.3Ω/℃）后，在PV屏显示工作室内测量实际温度，当输入信号小于设定值时，功率管（双向可控硅）导通，使加热器获得足够的电功率产生热量。反之，功率管无电功率输出加热器不加热。温度控制器具有PID调节输出特性、电功率输出大小可调、测量温度的误差校正、定时控制及改变等功能及超温或高、低水位有灯光及自动切断输出报警的安全功能。

上海产霉菌培养箱是一种常用的培养箱产品，但它不是生化培养箱、也不是隔水式培养箱，是水体分析和 BOD 测定细菌、霉菌、微生物的培养、保存、植物栽培、育种实验的专用恒温振荡[u]设备[/u]。今天我们主要来介绍一下霉菌培养箱的特点及使用注意事项，希望可以帮助用户更好的应用产品。霉菌培养箱的特点1、本机温控系统采用微电脑单片机技术，控温精度高 2、具有温度、时间调节控制，触摸式键盘设定调节 3、带有超强的紫外灭菌功能，保证纯净的培养环境 4、机体外壳采用喷塑处理，整机造型美观大方 5、内胆均为镜面不锈钢材料制成 6、工作室内装照明装置，大视角保温真空钢化玻璃，便于观察。霉菌培养箱的使用注意事项1、此[u]控制器[/u]的特点是，先控制温度，待温度基本稳定后再控制湿度，故刚开机或重新设定温度后，既无加湿也无除湿是正常现象，待温度达到设定温度，加湿和除湿才会工作。2、对于加湿器的使用，先将加湿器雾量控制旋钮顺时针旋到中间处，不宜过大防止湿度过冲，若加湿器通过连续加湿20分钟也达不到所设定的湿度值，此时才可渐渐将加湿器雾量控制旋钮顺时针旋至最大。3、对于箱体加热和制冷功率的匹配，一般250L的箱体，加热功率建议选用500W左右，制冷功率建议选用180W左右 150L的箱体，加热功率建议选用350W左右，制冷功率建议选用140W左右。

如何有效管理微生物实验室干粉培养基在微生物检验中，培养基的质量关乎微生物的检验结果。加强对培养基的质量管理，能够有效提升微生物检验结果的准确性和科学性，因此需要注重培养基的质量管理工作。?本文从培养基的采购验收、质量控制、培养基制备后的质量控制以及培养基的灭菌和储存等环节简要分析了培养基的质量控制工作。1、培养基供应商选择培养基应当从可靠的供应商处采购，必要时应当对供应商进行评估。评估应确定其生产工艺，运输条件是否符合规定，资质是否齐全，质量保证能力和生产能力是否符合需求。如果新增培养基供应商，应对该厂家所生产的不同批次的培养基理化及微生物指标进行检测，并进行审计评估，评估合格后才可以将该品牌纳入合格供应商名录。2、培养基初步验收在培养基到达实验室后，应安排专业的人员对培养基进行验收，首先查看培养基的名称是否正确、配方是否符合药典或国标等相应的法规文件的要求、是否临近有效期、生产批号是否清晰、能否提供商品质检报告、检查包装是否完整，规格、数量是否与采购申请一致。在接收完毕后安排管理人员进行入库保存，并尽快安排对培养基进行入厂检测。3、培养基理化及微生物检测培养基的理化指标主要包括pH值、澄明度以及凝胶强度（琼脂类），培养基的微生物指标一般包括：灵敏度、促生长能力、抑制能力以及指示特性，即培养基适用性检查。这些指标供应商在培养基出厂前就已经进行了检测，合格后放行。使用单位验收时仍需进行培养基适用性检查，并与厂家提供的质检报告进行对比，看与报告内容是否一致。使用单位也可采用有资质的第三方检测报告。4、干粉培养基储存对入库保存的培养基应张贴标签，以区分验收与未验收的培养基，避免混淆与差错。在此为大家提供一个简单的标签，仅供参考：?点击重新加载使用单位存储培养基时标签也可以做编号处理，例如购进100瓶TSB，产品号为11104，其编号为11104-100-1、11104-100-2、...、11104-100-100按照流水号领用培养基，可减少对培养基的盘点，方便管理。培养基的储存条件一般为常温、干燥、密闭，当然不同供应商的存储条件稍有差别，按照标识执行即可。称量后应及时旋紧瓶盖，避免后期存储因空气湿度较大受潮或结块，如出现结块现象，该瓶培养基不可继续使用。培养基开瓶后在称量和存储的过程中会不可避免的吸收空气中的水分，而水分含量的增加，培养基的微生物负载可能亦随之增大，进而影响到干粉培养基的质量。所以干粉培养基在开瓶后，应定期进行复检，并对复检结果进行统计分析，确定开瓶有效期。如果实验室所在地区湿度较大（相对湿度高于75%），开瓶后的培养基应采取适宜的保护措施，如果数量较少，可放置于干燥器内，如果数量较多，可使用封口膜瓶口位置缠绕数匝。5、培养基配制--称量培养基的制备环节，应当严格按照培养基配方制备，在培养基的称量过程中，建议在干爽、无风的区域或者通风柜中进行，这样能够避免培养基吸潮使称量结果不准。应当选择灵敏度较高的称重天平，这样能够保证称量的准确性，同时称量过程中要选择专用的称量匙，避免其他杂质混入培养基中。操作人员应当对称量过程进行详细的记录，记录中应该体现培养基名称、批号、称量数量、具体配制方法、制备人姓名日期、复核人姓名日期等信息，方便后期的溯源调查。6、培养基配制--容器和水配制培养基所用的容器不得影响培养基质量，一般为玻璃容器，培养基配制所用的容器和配套器具应洁净，可用纯化水冲洗玻璃器皿以消除清洁剂和外来物质残留。在大体积配制培养基时，企业也可根据自己的情况采用不锈钢容器，建议专锅专用，且容器应洁净。不建议使用陶瓷或搪瓷容器。培养基用水是培养基制备过程中非常重要的一个物质。不可以使用自来水，自来水中的杂质可能会对检验结果有一定的影响。许多法规在培养基配方中采用蒸馏水作为配制用水，实际上纯化水的洁净程度不差于蒸馏水，甚至更优，所以不必单独制备蒸馏水，直接使用纯化水即可，配制用纯化水应按药典的要求定期进行检测。在制备过程中，可先加入培养基，再将纯化水倒入容器内，同时需要将器具内壁上的培养基粉末一同带到容器中，然后根据说明书的要求进行操作。涉及到大体积配制后要分装的培养基（例如TSA、TSB、FTM等），分装前一定要将培养基加热至完全溶解，避免后续可能会出现的瓶间差异。7、培养基的灭菌培养基的灭菌过程是影响培养基质量的关键环节。大部分培养基需要高温高压湿热灭菌，但部分选择性培养基由于一些组分不可高温高压灭菌，所以会采用煮沸灭菌，因此灭菌前应阅读培养基使用说明。?点击重新加载培养基灭菌应采用验证过的灭菌程序，灭菌参数应通过无菌性试验和促生长试验的验证。此外，对高温高压灭菌器的蒸汽循环系统也要加以验证，以保证其在一定装载方式下的正常热分布。温度缓慢上升的高压灭菌器可能导致培养基过度加热，过度灭菌会影响绝大多数的细菌和真菌培养基的促生长质量。灭菌器中培养基的容积和装载方式也会影响加热的速度。因此应根据灭菌培养基的特性，进行全面的灭菌程序验证。煮沸灭菌的培养基建议现配现用，高温高压湿热灭菌的培养基可以大量配制，在适宜的条件下储存，固体培养基灭菌后只允许一次再融化。灭菌后培养基的储存效期应进行验证。制备好的培养基，使用前需进行pH的监测。对于固体培养基pH监测，可使用平头电极或固液两用电极。

CO2培养箱广泛应用于医学、免疫学、遗传学、微生物、农业科学、药物学的研究和生产，已经成为上述领域实验室最普遍使用的常规仪器之一，其通过在培养箱箱体内模拟形成一个类似细胞/组织在生物体内的生长环境如恒定的酸碱度(pH值：7.2-7.4)、稳定的温度(37°C)、较高的相对湿度(95%)、稳定的CO2水平(5%)，来对细胞/组织进行体外培养的一种装置。 CO2培养箱主要控制模拟活体内环境相关的3个基本变量：稳定的CO2水平、温度、相对湿度。要有稳定的培养环境，就要考虑这三方面的影响因素，选购时，就应该对这些“重中之重”有一定的了解才能选到适合自己的仪器。但是，其它的一些方面的“小”因素也不能忽略，因为这些都会影响仪器的使用价值和寿命。选购时，就应该从各方面的因素加以考虑。 1.温度控制： 保持恒温培养箱内恒定的温度是维持细胞健康生长的重要因素。当选购二氧化碳培养箱时，有两种类型的加热结构可供选择：气套式加热和水套式加热。虽然这两种加热系统都是精确和可靠的，但是它们都有着各自的优点和缺点。水套式培养箱是通过一个独立的热水间隔间包围内部的箱体来维持温度恒定的。热水通过自然对流在箱体内循环流动，热量通过辐射传递到箱体内部从而保持了温度的恒定。独特的水套式设计有其优点：水是一种很好的绝热物质，当遇到断电的时候，水套式系统就能更可靠地长久保持培养箱内的温度准确性和稳定性(维持温度恒定的时间是气套式系统的4-5倍)。如果您的实验环境不太稳定(如有用电限制，或者经常停电)并需要保持长时间稳定的培养条件，此时，水套式设计的二氧化碳培养箱就是您最好的选择。而气套式加热系统是通过箱体内的加热器直接对箱内气体进行加热的。气套式设计在箱门频繁开关引起的温度经常性改变的情况下能够迅速恢复箱体内的温度稳定。因此，气套式与水套式相比，具有加热快，温度的恢复比水套式培养箱迅速的特点，特别有利于短期培养以及需要箱门频繁开关的培养。此外，对于使用者来说气套式设计比水套式更简单化(水套式需要对水箱进行加水、清空和清洗，并要经常监控水箱运作的情况)。在购买气套式培养箱时，要注意的是：为了不影响培养，培养箱还应该有一个风扇以保证箱内空气的流通和循环，此装置还有助于箱内温度、CO2和相对湿度的迅速恢复。 此外，有些类型的二氧化碳培养箱还具备外门及辅助加热系统，这个系统能加热内门，提供给细胞良好的湿度环境，保证细胞渗透压维持平衡，且可有效防止形成冷凝水以保持培养箱内的湿度和温度。如果您的培养环境需要精确的控制，那么这个辅助系统则是必不可少的。 2.CO2控制： CO2 浓度探测可通过两种控制系统——红外传感器(IR)或热传导传感器(TC)进行测量。当二氧化碳培养箱的门被打开时，CO2从箱体内漏出，此时传感器就会探测到CO2浓度的降低，并做出及时的反应，重新注入CO2使其恢复到原先预设的水平。热传导传感器(TC)监控CO2浓度的工作原理是通过测量两个电热调节器(一个调节器暴露于箱体环境内，另一个则是封闭的)之间的电阻变化来实现的。箱内CO2浓度的变化会改变两个电热调节器间的电阻，从而促使传感器产生反应以达到调节CO2水平的作用。TC控制系统的一个缺点就是箱内温度和相对湿度的改变会影响传感器的精确度。当箱门被频繁打开时，不仅CO2浓度，温度和相对湿度也会发生很大的波动，因而影响了TC传感器的精度。当需要精确的培养条件和频繁开启培养箱门时，此控制系统就显得不太适用了。红外传感器(IR)作为另一个可选择的控制系统比TC系统具备更精确的CO2控制能力，它是通过一个光学传感器来检测CO2水平的。IR系统包括一个红外发射器和一个传感器，当箱体内的CO2吸收了发射器发射的部分红外线之后，传感器就可以检测出红外线的减少量，而被吸收红外线的量正好对应于箱体内CO2的水平，从而可以得出箱体内CO2的浓度。因为IR系统不会因温度和相对湿度的改变而受到影响，所以它比TC系统更精确，特别适用于需要频繁开启培养箱门的细胞培养。然而，此系统比TC系统更贵，这时就要结合经费预算进行考虑了。 3.相对湿度控制： 培养箱内相对湿度的控制是非常重要的，维持足够的湿度水平才能保证不会由于过度干燥而导致培养失败。大型的二氧化碳培养箱是用蒸汽发生器或喷雾器来控制相对湿度水平的，而大多数中、小型培养箱则是通过湿度控制面板(humidity pans)的蒸发作用产生湿气的(其产生的相对湿度水平可达95-98％)。一些培养箱有一个能在加热的控制面板上保持水份的湿度蓄水池(humidity reservoir)，这样可以增强蒸发作用，此蓄水池能增加相对湿度水平达97-98％。但是，这个系统也更复杂，由于复杂结构的增加一些难以预料的问题也会在使用过程中出现。 4.微处理控制系统： 每一个使用者都希望所用的仪器能够方便好用，微处理控制系统和其它各种功能附件(如高温自动调节和警报装置、CO2警报装置、密码保护设置、自动校准系统等等)的运用，就使得二氧化碳培养箱的操作和控制都非常的简便。微处理控制系统是维持培养箱内温度、湿度和CO2 浓度稳态的操作系统。例如PIC微处理器控制系统，它能严格控制气体的浓度并将其损耗降至极低水平，以保证培养环境恒定不变，且能保证长期培养过程中箱内温度精确，并有LED 显示，可设置、校正温度和CO2浓度。不同的微处理系统虽然名字不相同，但是其原理与控制效果则无甚区别，培养箱选购时不必太在意它们名字上的区别，关键是要自己觉得使用起来方便，容易操作，而且要能够达到所需的控制精度。 此外，我想一个报警系统也是不可少的吧，它能让你及时知道培养箱出现的情况，并做出反应，从而最大限度地降低了损失，保证实验的连续性。有些培养箱有声/光报警装置，温度变化达±0.5℃，或CO2 浓度变化达±5%时，即会自动报警；有些具有CO2浓度异常报警显示功能。这些装置都是为了方便使用者，以减少繁琐枯燥的实验过程而设计的。 5.污染物的控制： 污染是导致细胞培养失败的一个主要因素，因而，二氧化碳培养箱的制造商们设计了多种不同的装置去减少和防止污染的发生，其主要途径都是尽量减少微生物可以生长的区域和表面，并结合自动排除污染装置来有效防止污染的产生。例如，鉴于CO2培养箱在使用过程中有时会伴有霉菌生长，为确保培养箱免受污染且保证仪器箱体内的生物清洁性，有些公司开发设计了带有紫外清洁功能的增强型CO2培养箱；还有公司设计的特有铜外壳HEPA滤器能过滤培养箱内空气，可过滤除去99.97%的0.3um以上的颗粒，并能有效杀死过滤时被挡在滤器内的微生物颗粒；此外，自动杀菌装置能使箱内温度达到90℃从而杀死污染微生物，当它与HEPA系统结合使用就能够极大的减少污染。这些装置对于细胞培养来说是必不可少，但选择何种清洁装置呢？当然功能越多越好的最适用，但是价格也会随之上升。如果经费有限，只能选择一个价格较便宜的，这时就应该配合使用一些消毒剂和除菌剂，经常进行消毒灭菌，也能达到贵仪器的效果，只是比较麻烦一点而已。总之，无论选择何种装置，都要时刻注意保持培养箱的清洁，经常清理箱体，这样才能增加仪器的使用寿命，并使实验顺利进行，保证结果的可靠性。 6.其它因素： 每一类型的二氧化碳培养箱温度、湿度和CO2 浓度的控制范围和控制精确度、均一度都有所不同。此时，购买仪器之前就要对自己实验室的要求有一定的了解：控制范围是多大呢？控制精度要求非常准确，还是可以有一定的浮动范围呢？因为有时太高的精度也好像没有太大的意义。只有对自己所需的产品有全面的了解才能选到自己的最佳“伙伴”。生物通龙虎榜为您提供了一些公司二氧化碳培养箱的具体参数，从中您可以得到一个具体的比较和分析，说不定里面会有您心仪的仪器呢。 培养箱的容积也是一个不可忽略的因素，买小了不够用，大了又浪费又占地方。二氧化碳培养箱的可选容积非常广，包括小型(700升)，而且每种类型又有不同的容积可选。此时，就需要您在选购前对所需培养箱容积的范围有一个比较准确的了解，并在此基础上多预留一点空间，以保证不时之需。 此外，有些二氧化碳培养箱还具有许多特别的功能，如有Thermogard 风扇管理系统，从而实现了风量的智能化调节；有单通道循环系统，以确保培养箱内部温度的均一性，同时也降低了污染；LCD(液晶)显示系统，硅树脂温度传感器测量温度等等。这些各种各样的附件装置的选择都是为了方便选购者的选择和使用。

1、光照培养箱　　　　光照培养箱是具有光照功能的高精度恒温设备，是细菌、霉菌、微生物的培养及育种试验的专用恒温培养装置，特别实用于生物工程、医学研究、农林科学、水产、畜牧等领域从事科研和生产使用。光照培养箱外壳一般是冷轧钢板、表面采用静电喷涂工艺、内胆为工程塑料或不锈钢、保温层由聚脂发泡形成，透光窗采用双层中空玻璃以确保箱内的保温性能，箱体内部有冷、热气风道箱内气体循环流畅、温度更加均匀。　　　　2、微生物培养箱　　　　微生物培养箱适用于环境保护、卫生防疫、农畜、药检、水产等科研、院校实验和生产部门。是水体分析和BOD测定细菌、霉菌、微生物的培养、保存、植物栽培、育种实验的专用恒温，恒温振荡设备。　　　　3、植物培养箱　　　　植物培养箱实际就是一个有光照的带湿度恒温培养箱，其中的光照、温度、湿度等条件能够满足植物的生长需求。植物培养箱原理是几组灯管和一套控温装置(通常5-50度)。　　　　4、人工气候室　　　　可人工控制光照、温度、湿度、气压和气体成分等因素的密闭隔离设备小型的称“人工气候箱”。　　　　5、恒温恒湿培养箱　　　　恒温恒温箱可以准确地模拟恒温、恒湿等复杂的自然状环境的，有着精确的温度和湿度控制系统的一种箱体，实验室一般用在用于植物培养、育种试验，细菌、微生物培养，用作育种、发酵、微生物培养、各种恒温试验、环境试验、物质变性试验和培养基、血清、药物等物品的储存等。可广泛适用于药物、纺织、食品加工等无菌试验、广泛应用于医疗卫生、生物制药、农业科研、环境保护等研究应用领域。恒温恒湿箱工业一般用在适用于电子电工、家用电器、汽车、仪器仪表、电子化工、零部件、原材料及涂层、镀层进行高低温,高低湿的实验、在航天、航空、船舶、兵器、电子、石化、邮电、通讯、汽车、等领域倍受青睐。　　　　几种常见培养箱的区别和联系：　　　　微生物培养箱和光照培养箱的联系：　　　　光照培养箱主要是用来做植物的培养，微生物培养箱根据所培养的微生物种类的不一样又有不同种类，大致有氧和厌氧两种。　　　　恒温培养箱和霉菌培养箱的区别：　　　　恒温培养箱：分隔水式电热恒温培养箱和电热恒温培养箱两种　　　　隔水式电热恒温培养箱：水套遇断电时仍能较好地恒温，采用微电脑智能控温仪和双金属片调节器两种控温方式。温控范围：室温+5℃-60℃，只能把温度稳定在室温以上，不带制冷。　　　　霉菌培养箱：由于霉菌适宜的生长温度是22～28℃，所以霉菌培养箱要有双制式冷热控温，当夏天室温高于30℃，为了保证霉菌适宜生长，就要制冷，把温度下调，当冬天室温低于10℃，为了保证霉菌适宜生长，就要加热，把温度上调。所以容积差不多大的霉菌培养箱和恒温培养箱，霉菌培养箱更贵一些。　　　　生化培养箱和霉菌培养箱的联系与区别：　　　　生化培养箱生化箱广泛应用于细菌、霉菌、微生物、组织细胞的培养保存以及水质分析与BOD测试，适合育种试验、植物栽培。是生物、遗传工程、医学、卫生防疫、环境保护、农林畜牧等行业的科研机构、大专院校、生产单位或部门实验室的重要试验设备。

微生物培养的污染因素及预防方法随着现代生物学研究的发展，微生物培养成为了重要的实验手段之一。然而，在进行微生物培养过程中，存在着许多污染因素，这些污染因素可能会对实验结果产生影响或者导致实验结果不准确。下面将介绍一些常见的微生物培养的污染因素以及相应的预防方法。1、风速与风向培养箱内的风速和风向对于保持温度的均一性以及避免污染都非常重要。一般来说，适当的风速和风向可以帮助培养箱内的温度保持均一，有利于微生物的正常生长。然而，当风速过大时，可能会导致培养基干裂，从而影响培养结果的准确性。另外，药典要求培养皿倒置培养，这是因为经过多次验证发现，当培养箱运行时的风向与培养皿盖的朝向不一致时，容易引入空气中的灰尘、杂菌等，从而污染培养物。因此，在使用培养箱的过程中，需要注意风速和风向的控制，并尽量与培养皿盖的朝向一致。2、培养皿的密闭性培养皿由平底和盖组成，一些微生物实验室常用的培养皿直径为90mm，采用顶盖封装。然而，由于不同厂家制造的培养皿的成型工艺和参数不同，平底和盖之间的间隙也存在差异。这些间隙虽然能够满足需氧型微生物对氧气的需求，但也增加了污染的可能性。经过实验证实，在同样的培养条件下，间隙大的培养皿比间隙小的培养皿更容易受到污染。此外，间隙的大小不同还会导致培养皿内培养基的水分蒸发不一致，从而影响培养结果数据的一致性。因此，在使用培养皿的过程中，需要选择质量可靠的培养皿，并注意平底和盖之间的间隙情况。3、培养箱内的湿度微生物生长需要一定的湿度条件。湿度对微生物生长的影响是通过影响微生物细胞内水分活度进而影响其新陈代谢来实现的。不同微生物的生长对湿度有一定的要求，一般来说，细菌最为敏感，酵母和霉菌次之。降低湿度会使微生物的水分活度降低，从而减慢其生长速度。因此，在微生物培养的过程中，需要保持适宜的温度和湿度，以有利于微生物的生长。培养箱内湿度的来源主要有培养基的水分散失、湿度自动调控系统以及培养箱所在的环境。因此，在使用培养箱的过程中，需要控制湿度，保持适宜的生长环境。4、培养物溢洒培养物溢洒是指含有生物危险物质的液体或固体物质意外与包装材料分离的过程。一旦发生生物危害物品的溢出，尤其是含有病原微生物的培养物的溢出时，会导致微生物的生长和繁殖，从而引起培养箱的污染。为了预防交叉污染，当发生培养物溢洒时，需要及时清理和消毒培养箱。应该使用有效的消毒剂对培养箱的内壁以及接触溢出物品的材料进行消毒或高压灭菌。此外，如果溢洒物中含有破碎的玻璃等材料，不得直接用手取走或弃置，应该使用硬纸板和镊子等工具处理，并将处理物放置在安全的废弃物容器中。最后，对清洁工具也需要进行消毒处理，以确保卫生安全。5、自然环境污染培养箱需要放置在洁净、干燥、通风良好的自然环境中。如果环境中空气洁净度不够高，容易滋生细菌、真菌和病毒等微生物，并通过平底和盖之间的间隙污染培养基，从而影响培养结果数据的准确性。因此，在使用培养箱的过程中，需要注意放置环境的卫生和通风状况，尽量避免自然环境的污染。综上所述，微生物培养过程中存在着多种污染因素，这些因素可能会对实验结果产生影响或导致实验结果不准确。为了保证实验结果的准确性，需要在使用培养箱进行微生物培养时，注意控制风速和风向、选择合适的培养皿、控制湿度、避免培养物溢洒以及注意自然环境的卫生状况。只有这样，我们才能够获得可靠且准确的微生物培养结果。

霉菌箱是培养微生物的主要设备，可用于细菌、细胞的培养繁殖。原理是应用人工的方法在培养箱内造成微生物和细胞、细菌生长繁殖的人工环境，如控制一定的温度、湿度、气体等。 　　霉菌培养箱一般应用于医疗卫生、生物制药、农业科研、环境保护等研究应用领域,是水体分析、BOD测定，细菌、菌种、微生物的培养、保存和植物栽培、育种实验生物培养的专用设备。 　　1、插上电源插座(电源应有良好接地)，按下电源开关，显示屏亮，此时显示屏所显示的是培养箱室内的实际温度和湿度。 　　2、如箱内不需杀菌时，应将面板上的杀菌开关置于“关”的位置。 　　3、若湿度长期不用时，请将盒内水倒尽。 　　4、当温度设定好之后，不能随便将控温旋钮来回多次旋转，以免压缩机启动频繁，造成压缩机出现过载现象，影响压缩机的使用寿命。 　　5、当使用温度较低时，应定期倒掉位于箱内底部积水盘内的积水。 　　6、本机背部装有二组保险盒，2A?为制冷加热负载保险丝盒，8A?为控制电源保险丝盒，若机器运转出现故障，例如控温失灵，不加热或不制冷，须切断电源，分别检查保险丝是否完好，再检查相应部位。 　　7、搬运时必须小心，搬运时与水平面的夹角不得小于45°。 　　8、用霉菌培养箱底部调节螺钉调节高度，使箱体安置平稳。 　　9、当湿度传感器长时间处于高湿状态，会形成结露即湿度显示值会居高不下，若需要准确的湿度显示值，则应关机后，将培养箱箱门打开，让湿度传感器处于室温中，自然干燥后，即可继续使用。 　　10、温度调节：按下温度设定按钮，数字显示即为设定值，旋转温度调节电位器到所需温度值，松开按钮，数字显示即为培养室内的实际温度。此时如培养箱内的实际温度比设定温度小，加热指示灯亮，加热器开始加热;如培养箱内的实际温度比设定温度大，制冷指示灯亮，制冷系统开始制冷;如加热指示灯与制冷指示灯均暗，则培养箱处于恒温状态。 　　11、加湿器若有故障，请按加湿器使用说明书上的保修点，就近修理。 　　12、当仪器在停止使用时，应拔掉电源插头。请各位客户在使用霉菌培养箱过程中，能注意以上几点，做好霉菌培养箱日常维护. 　　13、为了保持设备的美观，不准用酸或碱及其它腐蚀性物品来擦表面，箱内可以用干布定期擦干。 　　14、加湿器的安装：将加湿器的电源插头插在仪器背面的电源插座上，再将仪器的加湿管与加湿器相连，相连处一定要紧密连接。加湿器水箱里加水一定要按说明书上正确操作。 　　15、湿度调节：按下湿度设定按钮，数字显示即为设定值，旋转湿度调节电位器到所需湿度值，松开按钮，数字显示即为霉菌培养箱内的实际湿度。当培养室内的实际湿度比设定的湿度小时，此时加湿对培养室内加湿，加湿指示灯亮;当培养室内的实际湿度比设定的湿度值大时，此时加湿器停止工作，加湿指示灯灭。

由于动物细胞培养液一般使用碳酸盐pH缓冲系统，要求培养环境中维持一定浓度的CO2，所以动物细胞的培养一般需要CO2培养箱。 　　CO2培养箱采用两种不同的CO2维持系统。一种方式是通过使用空气泵，将CO2和空气按一定比例混合后吹入培养箱。另一种方式是通过一个自动的CO2检测控制系统，在检测到CO2浓度低于要求浓度时打开CO2气阀充入CO2。由于前一种方法耗费CO2而且不容易精确控制CO2浓度，先进的CO2培养箱都采用自动监控系统来维持CO2的浓度。　　配有自动CO2检测控制系统的培养箱需要根据生产厂家的说明，定期做CO2浓度的测试和矫正。 　　CO2培养箱的隔热采用水套式和气套式两种类型。水套式需要用户在安装培养箱时培养箱壁的空间内灌入大量蒸馏水。由于水的比热容很高，水套式的优点是有助于均匀散热和避免形成冷区，以及在断电后能够比较好的减缓培养箱内温度的降低。　　目前大多数实验室都使用进口的细胞培养箱。虽然进口的产品质量上比较有保障，但价格很贵，而且售后服务不是很方便。　　CO2培养箱一般配一个水盘，用以维持很高的湿度。水盘内的水要定期添加，水盘也要定期清洗以避免微生物的生长。 　　为了减少微生物的污染，有一些CO2培养箱提供灭菌功能。有的可以加热到比较高的温度来灭菌，有的则通过让空气循环通过一个紫外线腔体的办法来灭菌，这样就灭菌时就不需要中断细胞的培养。

[color=#333333]使用生化培养箱是不是要做生化试验的呢？其实不然，关键要看环境温度是多少，如果培养温度高于环境温度，一般培养箱就可以了，如果培养温度低于环境温度，必须要用生化培养箱，因为它有制冷功能，比如一般霉菌酵母的培养温度是27度左右，我们就可以用生化培养箱。[/color][color=#333333]zui简单的区别方法就是：生化培养箱可以代替普通的恒温培养箱！生化培养箱可以制冷，也可以制热！而一般的恒温培养箱只可以制热。[/color][color=#333333]还有控温精度不一样，生化培养箱精度要求很高，大约正负0.1度，恒温培养箱正负1度！恒温也只是一定范围内的恒温，就是在设定的温度范围处波动(如设定为25度，它会在24.5-25.5之间波动，当然其波动范围也是通过调节设定的，可以设为1度、2度或0.5度等)。[/color][color=#333333]常州高德仪器制造的智能型生化培养箱采用LCD大屏幕背光液晶显示屏显示各设定参数和实测参数，可用于植物的发芽、育苗、微生物的培养，以及其他用途的恒温试验，组合式生化培养箱每一工作仓有独立的门可开关，上下工作仓采用蜂巢式保温层，有效的解决了工作仓与工作仓之间串温问题，控温更精准。多个温区可同时运行，也可其中一个或二个工作，便于节约能源；当一个工作区工作有障碍时，可将此工作区关闭而不妨碍其他实验，提高可靠性。[/color]