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气相氨基

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气相氨基相关的论坛

  • 【谱图】氨基甘油的气相检测方法

    我最近在做残留溶剂的检测,里面有一项是氨基甘油的检测项目,但我做了很多方法都不能成功,是不是沸点太高的缘故,有265℃,又或者是氨基的影响?我用的是FID检测器,有哪位大虾做过这样的溶剂,请指点一下?

  • 【原创】氨基色谱柱 与 液相仪器 咨询

    1,现在准备分析含2,3单糖的寡糖,waters氨基柱比较贵,4660,能推荐其他厂家的、质量还行的氨基柱吗,比如原装kromasil的怎样?2,想配制总价在100-160K 的液相,做前期探索实验;单泵,手动进样,紫外检测器,配国产柱温箱;如果条件许可想换四元泵。(大实验室另有Agilent1100,自动进样,四元泵,紫外阵列,荧光)。岛津LC-20A相对便宜,服务好像不太好,岛津以前的质量还行(以前课题组一GC用了10多年),现在不知道怎样?。Agilent比较贵。选择岛津还是Agilent比较好?大家帮助分析一下。

  • 【第三届原创大赛】氨基酸也可以用气相来检测,有图有真相!

    【第三届原创大赛】氨基酸也可以用气相来检测,有图有真相!

    [color=#fe2419][size=2]维权声明:本文为lpr20原创作品,本作者与仪器信息网是该作品合法使用者,该作品暂不对外授权转载。其他任何网站、组织、单位或个人等将该作品在本站以外的任何媒体任何形式出现均属侵权违法行为,我们将追究法律责任。[/size][/color][color=#0084a0][size=3][size=2]一 氨基酸的性质[/size][/size][/color] [size=2] 氨基酸,英文名称amino acid ,是指同时含有一个或多个氨基和羧基的脂肪族有机酸,是生物功能[color=#000000]大分子[/color]蛋白质的基本组成单位,是构成动物营养所需蛋白质的基本物质。根据氨基和羧基的位置,有α氨基酸和β氨基酸等类型。参与蛋白质合成的常见的是20种L-α-氨基酸。 天然氨基酸均为α-氨基酸。[color=#0084a0]二 氨基酸的理化性质[/color] (1)都是无色结晶。熔点约在230°C以上,大多没有确切的熔点,熔融时分解并放出CO2;都能溶于强酸和强碱溶液中,除胱氨酸、酪氨酸、二碘甲状腺素外,均溶于水。 (2)具有两性。大多数氨基酸都呈显不同程度的酸性或碱性,呈显中性的较少。所以既能与酸结合成盐,也能与碱结合成盐。 (3)由于有不对称的碳原子,因此具有旋光性,由于空间的排列位置不同,有两种构型:D型和L型,组成蛋白质的氨基酸,都属L型。[color=#0084a0]三 目前的主要检测方法[/color] 目前氨基酸的检测主要可以分两大类:化学法和色谱法。 其中化学法有很多种类,详见[/size][url=http://baike.baidu.com/view/15155.htm][size=2]氨基酸的化学检测法[/size][/url][size=2],色谱法主要是[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱[/color][/url]结合电化学检测器,这个在学校的时候做过一段时间,分离度、定量都不错,不过仪器价格挺贵的,用的是戴安600,据老师说价格好贵,没具体问多钱。[color=#0084a0]四 本实验前言[/color] 样品是公司科研部门送来检测一下纯度,首先确定方法。化学法太麻烦,很多都是显色反应,显色剂手头又没有,如果打申购购买的话来不及了,而且本实验室又没有[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱[/color][/url],所以就想用手头有的[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相[/url]来试试。[color=#0084a0]五 实验的准备工作[/color] 从氨基酸的理化性质可以看出,直接用GC肯定是不行的,高温熔融即分解,所以考虑用衍生化处理的办法,氨基酸不是有羧基吗?这玩意儿上面的氢应该很活泼,用硅烷化把那个氢保护了应该就稳定了,做[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相[/url]应该问题不大,说干就干,手头有高活性的硅烷化试剂(具体名称略去,反正呢是很贵的那种,极高活性的,常温即可上保护基),处理后用手头的色谱柱进行分离,结果如下。========================================================仪器型号:GC-2014C载气:He分析柱:DB-1检测器:FID柱温程序:60度,10度/min升温样品:L-丙氨酸(样品需经硅烷化衍生化具体过程:取大约20mg样品至样品瓶中,加入硅烷化试剂0.2ml,用60度水浴加热60分钟,如果溶解性差,可以滴加3-5滴的DMF,如果处理后还有未溶解样品,过滤,将清液进样检测)参考图如下[/size]=========================================================================[img]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2010/09/201009291326_247968_1621482_3.jpg[/img]=====================================================================================[size=2][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相[/url]分离后,经过GC-MS确认结构,图上1.87的峰为样品羧基被硅烷化后的产物,3.83的产物是羧基和氨基(一个氢)都被硅烷化的产物。[color=#fe2419]六 实验存在的问题[/color]1.由于柱子是DB-1,不是手性柱子,因此不同构型的氨基酸无法分离,即不能确定是L型的还是D行的氨基酸,如果两个构型混合则无法分离,只能分离其他杂质。2. 即使用的是活性极高的硅烷化试剂,溶解性能也很有限,并且放置时间要长,甚至还需要适当的加热,但是温度不宜过高,过高硅剂易分解。3.定量略显粗糙,我就用面积归一化法简单定了一下,好多杂质种类未知,因此很难校正。由于上述三个因素,实际上本实验的实际应用价值很有限,拿出来和大家分享,大家讨论是否还有上升空间。=============================================[color=#d6006d]特别感谢[b]pingguwu版友提供的文献,文献提供了另外的一种衍生化方法,以丁醇酯化,三氟乙酸酐酰化的办法来衍生化氨基酸,GCMS来测定,大家可以结合讨论。[/b][/color][/size]

  • 【分享】氨基酸分析方法及仪器比较

    一、氨基酸分析方法分类氨基酸分析按其分离和检测方法的不同可分为三大类型。第一类是基于阳离子交换柱分离、柱后茚三酮衍生、光度法测定的离子交换色谱法(IEC)。此类方法由Stein和Moore两人1958年发明,并于1972年获诺贝尔奖,是当今国际标准和国家标准以及仲裁和涉外的方法。第二类是所有基于反相色谱分离、柱前衍生、荧光或紫外检测的高效液相法(HPLC)。第三类是阴离子交换分离直接安培法检测的离子色谱法IC,严格说来,阴离子交换和阳离子交换都叫“IEC”,在此将阴离子交换分离、安培检测的方法归类为IC,是因为这类仪器实际上就是离子色谱仪,只不过配置侧重点为氨基酸分析。本文中对三类方法多用简称。http://www.foodmate.net/file/upload/201012/14/15-45-33-33-510998.jpg

  • [求助]氨基柱走酸性流动相,这样的搭配行吗?痛苦中……

    分析一酸性样品,一方法是用氨基柱,但流动相是乙腈:0.1%TFA,pH在2-3之间。这样的条件柱子受的了吗?我看到论坛说氨基柱一般适于pH6-8间。还有关键问题:用蒸发光检测器,新的氨基柱用这样的流动相根本无法显示信号,只有HI,是氨基流失了吗?这个条件是厂家一直在用的,问他们,他们说没遇到过检测器信号高居不下的情况。各位前辈,我的实验无法进行了啊![em63]

  • 液相色谱测定氨基酸

    使用液相-紫外测定氨基酸。发现使用AQC衍生测定时AMQ峰很高,但是氨基酸的峰很低,且我的氨基酸的浓度已经很大了,100ppm,我开始以为我加的AQC浓度太大了,所以降低了AQC的量,但是发现基线很飘,所以问一下各位大神,有什么方法可以改善,或是什么细节需要特别注意的,或是使用其他衍生化试剂的效果更好,因为只有紫外检测器。。。谢谢大家啦!

  • 液相氨基甲酸酯

    液相氨基甲酸酯

    大家好,我第一次做氨基甲酸酯方面。用液相荧光柱后衍生做氨基甲酸酯,不出峰,是因为衍生的问题吗?衍生试剂是0.05mol/l氢氧化钠和opa。这台仪器的柱后衍生装置差不多有半年多没用了。梯度洗脱程序试过761标准上的和其他帖子里看到的洗脱程序,都没用。波长330.465。用的是wsters e2695仪器。下面传图[img=,690,517]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/06/201806211539161124_9322_1644380_3.jpg!w690x517.jpg[/img][img=,690,388]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/06/201806211539142564_2247_1644380_3.jpg!w690x388.jpg[/img]

  • 【求助】高效液相检测饲料种氨基酸

    [size=4]1、谁有高效液相检测饲料种氨基酸检测方法?2、检测饲料种氨基酸 用到的液相是什么配置 啊? 什么检测器?自动进样还是手动进样?需要柱温箱吗?柱前衍生还是柱后衍生及他们的区别?3、配手动进样多少钱? 配自动进样多少钱?[/size]

  • 【实战宝典】如何采用液相色谱测定氨基酸?

    [b][font=宋体]问题描述:如何采用液相色谱测定氨基酸?对仪器配置有哪些要求?有哪些注意事项?[/font][font=宋体]解答:[/font][/b][font=宋体]([/font]1[font=宋体])液相色谱通常无法直接测定氨基酸,需要对氨基酸进行衍生,衍生的方式可采用柱前衍生和柱后衍生,柱前衍生有专门的试剂包,许多分析仪器厂家有相关的应用资料;柱后衍生需要相应的衍生装置和衍生试剂。[/font][font=宋体]([/font]2[font=宋体])仪器配置方面,液相色谱仪首先需要具有梯度洗脱功能;防止温度波动导致保留时间的漂移,因此需要配备柱温箱。氨基酸衍生产物具有紫外和荧光响应,可以配置紫外检测器、二极管阵列检测器或荧光检测器进行检测。如果采用在线柱后衍生方式进行测定,还需配备柱后衍生装置。[/font][font=宋体]([/font]3[font=宋体])由于氨基酸测定种类较多(通常是[/font]18[font=宋体]种游离氨基酸),另外样品基质较为复杂,采用液相色谱测定氨基酸时,通常会出现保留时间漂移、分离度下降、杂质干扰等现象。[/font][font=宋体]([/font]4[font=宋体])液相色谱法测定食品中的氨基酸含量,可以参考:[/font]SN/T 5223-2019[font=宋体]《蜂蜜中[/font]18[font=宋体]种游离氨基酸的测定[/font][font=宋体]高效液相色谱[/font][font=宋体]-[/font][font=宋体]荧光检测法》、[/font]QB/T4356-2012[font=宋体]《黄酒中游离氨基酸的测定[/font][font=宋体]高效液相色谱法》。[/font][font='微软雅黑','sans-serif'][color=black][back=white]领取更多《实战宝典》请进:[url]http://instrument-vip.mikecrm.com/2bbmrpI[/url][/back][/color][/font][font='微软雅黑','sans-serif'][color=black][back=white] [/back][/color][/font]

  • 液相做氨基甲酸酯

    用液相做氨基甲酸酯,单进样的时候还出峰了,过了1个小时再进样,就不出峰了。进的都是标准品。仪器是出什么问题了吗?

  • 【求助】氨基酸液相检测

    大家好!有哪位大侠能帮忙,告知氨基酸在液相上的检测方法。氨基酸就是常见的18种氨基酸。我们有氨基柱。最好是一般的ODS柱方法

  • 【分享】氨基柱的使用和保养

    氨基柱是同时可以用于正相条件和反相条件的这一点很多用户都已经知道;但是要注意到的是:正相溶剂和反相溶剂往往是不互溶的,对这一点的忽略可能会带给使用者一些麻烦。对于新购买到的柱子,首先请注意打开分析测试说明书,了解柱子的保存溶剂。如果保存溶剂与你将要使用的流动相极性不同不会互溶,请先用异丙醇过渡。过渡过程中注意因异丙醇粘度较大,会导致柱压很高,适当调低流速即可。如果要使用的流动相中还含有缓冲盐类,建议在用分析流动相之前,先用不含缓冲盐的同比例流动相过渡,这样可避免缓冲盐在分析柱内的析出。柱效检测:我用于判断一个用户是否有经验的指标之一,是用户是否习惯配制一些柱效检测标准溶液。说到柱效检测,我可以向大家提供一个方法,而且很通用,你也可以用同样的标准溶液和流动相来检测硅胶柱和氰基柱。流动相:10%乙酸乙酯+90%正己烷 流速1.0标准溶液:乙苯(如乙苯找不动就用甲苯代替呗)+苯甲酸甲酯检测波长254nm这个方法特别适用于新购柱子(新购柱子往往保存在正相溶剂中)时即进行检测,如有问题,可及时与供应商沟通。也适合在柱子在准备放置相当长一段时间之前进行充分清洗后进行检测作为记录留档。在平常的使用过程中,如果分析物是固定重复的,我们当然可以从对分析物的分离分析情况来作出判断;但如果分析物和分析条件不同时,定期检测柱效可以避免柱效下降导致分离不佳再分析查找原因这样浪费人力物力的过程。不过特别要注意的是,当氨基柱(或氰基柱)在反相条件中使用时,如用该条件检测,请注意流动相的换相过渡问题。 氨基柱的使用:需要注意的是,氨基柱的键合官能团氨丙基要比C18,C8柱的键合官能团C18,C8要容易水解,所以首先要做好其使用寿命稍逊的心理准备,特别是当你的使用条件是反相条件下时。反相条件下使用时,要特别注意控制PH值范围,PH值越低越有发生水解的危险,流动相中水的比例越高当然也越有发生水解的危险。所以,在使用后以及准备长时间放置该柱时,必要的清洗和将氨基柱保存于纯的有机溶剂中是很好的保养措施。有一种情况是,当使用氨基柱进行酸性物质如果汁的分析时(分析其中的糖份),酸性物质的存在意味着质子的存在,可能会使略带负电荷的氨基官能团质子化,导致使用一段时间后对于某些类的分析物保留性质有所改变或表现在柱效下降。这时,Kromasil专家所给的建议是:用5-10倍的柱体积的含0.5-1.0%NH3的50-50乙腈-水溶液冲洗该柱(冲洗后当然要再用不含碱的流动相洗去多余氨),之后再进行分析这类酸性分析物时建议在流动相中略微添加少许氨如0.1%。氨基柱的清洗简单说起来,正相条件下使用的氨基柱你就参照硅胶柱的清洗方法;反相条件下使用的氨基柱你就参照C18的清洗方法。平时在正相条件下使用:首先用50倍柱体积的异丙醇清洗,因异丙醇粘度较大可适当放低流速;之后,用50倍的甲醇清洗;之后,用异丙醇过渡回到平常使用的正相流动相,即可。平时在反相条件下使用:缓冲盐应及时冲洗,以及不能直接用纯甲醇冲洗缓冲盐等,属常识就不作特别交待了。用50倍纯甲醇冲洗;之后,用异丙醇过渡后,用二氯甲烷冲洗色谱柱;之后,再用异丙醇过渡回来到甲醇条件下。这些清洗方法,主要是针对当样品中有杂质逐步吸附累积到填料上时的处理方法,色谱柱表现行为为诸如柱压增高柱效降低等LUNA氨基柱的使用方法1. 氨基柱既可以正相使用,也可以反相使用,但是要注意到的是:正相溶剂和反相溶剂往往是不互溶的,正常情况新氨基柱保存在正相环境中,例如LUNA 氨基柱保存在正己烷-乙腈(99:1)中。2. 正相使用2.1 新柱子可直接用流动相。推荐先用正己烷-乙腈(99:1)以0.5ml/min的流速冲10倍柱体积,再根据流动相选用极性相近的氯仿或二氯甲烷以相同的流速冲10倍柱体积,最后换成流动相。2.2 正相使用时,不宜分析含醛基、羰基的化合物,不可用于还原糖的分析;流动相要彻底脱气,并不得含有羰基化合物和过氧化物(质量不好的乙醚、四氢呋喃含有少量)。2.3 任何时候更换流动相时都要确保新流动相与柱子原保存液可互溶。3 反相使用3.1 先用正己烷-乙腈(99:1)以0.5ml/min的流速冲10倍柱体积,再依次以相同的流速相同的用量用氯仿、异丙醇、甲醇、甲醇-水(50:50)冲柱子。3.2 以0.5ml/min的流速用30倍柱体积的pH11.0的氢氧化钠(LUNA)水溶液冲柱子(注意pH值切不可超过11.0),立即用水( 0.5ml/min的流速,30倍柱体积)冲洗,再换成流动相。3.3 配制流动相时,应各组分分别量取,比例较小的组分要精密量取,需调pH值时要精密到0.1。3.4 反相条件下使用时,要特别注意控制pH值范围,pH值越低越有发生水解的危险,流动相中水的比例越高当然也越有发生水解的危险。最理想的pH范围在pH 3.0-7.03.5 如果要使用的流动相中还含有缓冲盐类,建议在用分析流动相之前,先用不含缓冲盐的同比例流动相过渡,这样可避免缓冲盐在分析柱内的析出。3.6 有一种情况是,当使用氨基柱进行酸性物质的分析时,酸性物质的存在意味着质子的存在,可能会使略带负电荷的氨基官能团质子化,导致使用一段时间后对于某些类的分析物保留性质有所改变或表现在柱效下降。建议:用5-10倍的柱体积的含0.5-1.0%NH3的乙腈-水(50:50)溶液冲洗该柱(冲洗后当然要再用不含碱的流动相洗去多余氨),之后再进行分析这类酸性分析物时建议在流动相中略微添加少许氨如0.1%。4 色谱柱的冲洗:简单说起来,正相条件下使用的氨基柱就参照硅胶柱的清洗方法;反相条件下使用的氨基柱就参照C18的清洗方法。5 色谱柱的保存 5.1 正相使用时,将柱子冲洗干净后,用正己烷-乙腈(99:1)保存。5.2 反相使用时,如短期不用,可用甲醇或乙腈保存;长期不用时需将甲醇依次用异丙醇、氯仿置换,最后用正己烷保存。6 色谱柱的再生6.1 方案1:依次用甲醇、异丙醇、氯仿、正己烷、氯仿、异丙醇、甲醇冲柱子(各以0.5ml/min的流速,20倍柱体积),再换流动相。这些清洗方法,主要是针对当样品中有杂质逐步吸附累积到填料上时的处理方法,色谱柱表现行为为诸如柱压增高柱效降低等。6.2 方案2:NH2柱用于反相条件时,NH2键会水解,尤其是在该柱子pH范围以外,在极端酸性和碱性条件下柱寿命会下降很快,如果在这个条件下使用需要清洗一下,需要用10倍柱体积溶液冲洗,如下:95%水/5%乙腈THF四氢呋喃95%乙腈/5%水并保持95%乙腈/5%水继续冲洗,以低流速0.2-0.5mL/min过夜冲洗。6.3 方案3:柱子使用一定时间后,柱效下降,老化,也可清洗一下柱子恢复柱性能,清洗时依次用10倍柱体积的下列溶液冲洗:95%水/5%乙腈THF四氢呋喃95%乙腈/5%水再走流动相即可

  • 我在用高效液相测氨基酸

    [color=#444444]我在用高效液相测氨基酸,样品在色谱柱上没有保留怎么办?样品的峰在一分钟之内都出来了,我开始用的85%buffer,和15%的甲醇,峰有重叠的,后来用90%的buffer,峰都重叠在一起了,我应该怎么办呢?[/color]

  • [转帖]氨基柱的使用和保养--来自液相版面

    氨基柱是同时可以用于正相条件和反相条件的这一点很多用户都已经知道;但是要注意到的是:正相溶剂和反相溶剂往往是不互溶的,对这一点的忽略可能会带给使用者一些麻烦。 对于新购买到的柱子,首先请注意打开分析测试说明书,了解柱子的保存溶剂。如果保存溶剂与你将要使用的流动相极性不同不会互溶,请先用异丙醇过渡。过渡过程中注意因异丙醇粘度较大,会导致柱压很高,适当调低流速即可。如果要使用的流动相中还含有缓冲盐类,建议在用分析流动相之前,先用不含缓冲盐的同比例流动相过渡,这样可避免缓冲盐在分析柱内的析出。 柱效检测: 我用于判断一个用户是否有经验的指标之一,是用户是否习惯配制一些柱效检测标准溶液。说到柱效检测,我可以向大家提供一个方法,而且很通用,你也可以用同样的标准溶液和流动相来检测硅胶柱和氰基柱。 流动相: 10%乙酸乙酯+90%正己烷 流速1.0 标准溶液: 乙苯(如乙苯找不动就用甲苯代替呗)+苯甲酸甲酯 检测波长254nm 这个方法特别适用于新购柱子(新购柱子往往保存在正相溶剂中)时即进行检测,如有问题,可及时与供应商沟通。也适合在柱子在准备放置相当长一段时间之前进行充分清洗后进行检测作为记录留档。在平常的使用过程中,如果分析物是固定重复的,我们当然可以从对分析物的分离分析情况来作出判断;但如果分析物和分析条件不同时,定期检测柱效可以避免柱效下降导致分离不佳再分析查找原因这样浪费人力物力的过程。不过特别要注意的是,当氨基柱(或氰基柱)在反相条件中使用时,如用该条件检测,请注意流动相的换相过渡问题。 氨基柱的使用: 需要注意的是,氨基柱的键合官能团氨丙基要比C18,C8柱的键合官能团C18,C8要容易水解,所以首先要做好其使用寿命稍逊的心理准备,特别是当你的使用条件是反相条件下时。 反相条件下使用时,要特别注意控制PH值范围,PH值越低越有发生水解的危险,流动相中水的比例越高当然也越有发生水解的危险。所以,在使用后以及准备长时间放置该柱时,必要的清洗和将氨基柱保存于纯的有机溶剂中是很好的保养措施。 有一种情况是,当使用氨基柱进行酸性物质如果汁的分析时(分析其中的糖份),酸性物质的存在意味着质子的存在,可能会使略带负电荷的氨基官能团质子化,导致使用一段时间后对于某些类的分析物保留性质有所改变或表现在柱效下降。这时,Kromasil专家所给的建议是:用5-10倍的柱体积的含0.5-1.0%NH3的50-50乙腈-水溶液冲洗该柱(冲洗后当然要再用不含碱的流动相洗去多余氨),之后再进行分析这类酸性分析物时建议在流动相中略微添加少许氨如0.1%。 氨基柱的清洗 简单说起来,正相条件下使用的氨基柱你就参照硅胶柱的清洗方法;反相条件下使用的氨基柱你就参照C18的清洗方法。 平时在正相条件下使用: 首先用50倍柱体积的异丙醇清洗,因异丙醇粘度较大可适当放低流速;之后,用50倍的甲醇清洗;之后,用异丙醇过渡回到平常使用的正相流动相,即可。 平时在反相条件下使用: 缓冲盐应及时冲洗,以及不能直接用纯甲醇冲洗缓冲盐等,属常识就不作特别交待了。 用50倍纯甲醇冲洗;之后,用异丙醇过渡后,用二氯甲烷冲洗色谱柱;之后,再用异丙醇过渡回来到甲醇条件下。 这些清洗方法,主要是针对当样品中有杂质逐步吸附累积到填料上时的处理方法,色谱柱表现行为为诸如柱压增高柱效降低等 LUNA氨基柱的使用方法 1. 氨基柱既可以正相使用,也可以反相使用,但是要注意到的是:正相溶剂和反相溶剂往往是不互溶的,正常情况新氨基柱保存在正相环境中,例如LUNA 氨基柱保存在正己烷-乙腈(99:1)中。 2. 正相使用 2.1 新柱子可直接用流动相。推荐先用正己烷-乙腈(99:1)以0.5ml/min的流速冲10倍柱体积,再根据流动相选用极性相近的氯仿或二氯甲烷以相同的流速冲10倍柱体积,最后换成流动相。 2.1 正相使用时,不宜分析含醛基、羰基的化合物,不可用于还原糖的分析;流动相要彻底脱气,并不得含有羰基化合物和过氧化物(质量不好的乙醚、四氢呋喃含有少量)。 2.3 任何时候更换流动相时都要确保新流动相与柱子原保存液可互溶。 3 反相使用 3.1 先用正己烷-乙腈(99:1)以0.5ml/min的流速冲10倍柱体积,再依次以相同的流速相同的用量用氯仿、异丙醇、甲醇、甲醇-水(50:50)冲柱子。 3.2 以0.5ml/min的流速用30倍柱体积的pH11.0的氢氧化钠(LUNA)水溶液冲柱子(注意pH值切不可超过11.0),立即用水( 0.5ml/min的流速,30倍柱体积)冲洗,再换成流动相。 3.3 配制流动相时,应各组分分别量取,比例较小的组分要精密量取,需调pH值时要精密到0.1。 3.4 反相条件下使用时,要特别注意控制pH值范围,pH值越低越有发生水解的危险,流动相中水的比例越高当然也越有发生水解的危险。最理想的pH范围在pH 3.0-7.0 3.5 如果要使用的流动相中还含有缓冲盐类,建议在用分析流动相之前,先用不含缓冲盐的同比例流动相过渡,这样可避免缓冲盐在分析柱内的析出。 3.6 有一种情况是,当使用氨基柱进行酸性物质的分析时,酸性物质的存在意味着质子的存在,可能会使略带负电荷的氨基官能团质子化,导致使用一段时间后对于某些类的分析物保留性质有所改变或表现在柱效下降。建议:用5-10倍的柱体积的含0.5-1.0%NH3的乙腈-水(50:50)溶液冲洗该柱(冲洗后当然要再用不含碱的流动相洗去多余氨),之后再进行分析这类酸性分析物时建议在流动相中略微添加少许氨如0.1%。 4 色谱柱的冲洗:简单说起来,正相条件下使用的氨基柱就参照硅胶柱的清洗方法;反相条件下使用的氨基柱就参照C18的清洗方法。 5 色谱柱的保存 5.1 正相使用时,将柱子冲洗干净后,用正己烷-乙腈(99:1)保存。 5.2 反相使用时,如短期不用,可用甲醇或乙腈保存;长期不用时需将甲醇依次用异丙醇、氯仿置换,最后用正己烷保存。 6 色谱柱的再生 6.1 方案1:依次用甲醇、异丙醇、氯仿、正己烷、氯仿、异丙醇、甲醇冲柱子(各以 0.5ml/min的流速,20倍柱体积),再换流动相。这些清洗方法,主要是针对当样品中有杂质逐步吸附累积到填料上时的处理方法,色谱柱表现行为为诸如柱压增高柱效降低等。 6.2 方案2:NH2柱用于反相条件时,NH2键会水解,尤其是在该柱子pH范围以外,在极端酸性和碱性条件下柱寿命会下降很快,如果在这个条件下使用需要清洗一下,需要用10倍柱体积溶液冲洗,如下: 95%水/5%乙腈 THF四氢呋喃 95%乙腈/5%水 并保持95%乙腈/5%水继续冲洗,以低流速0.2-0.5mL/min过夜冲洗。 6.3 方案3:柱子使用一定时间后

  • 液相测定氨基酸时流动相PH的选择

    我在测定氨基酸时,面积特别不稳定,流动相的PH是3.2,氨基酸的等电点是5.2。我不知道是不是应该再调节一下流动相的PH,是往酸了调还是往碱调?哪种PH下氨基酸才会更稳定?求大神指导指导

  • 网络讲堂:9月12日 日立氨基酸分析仪和液相色谱在氨基酸分析中的解决方案

    网络讲堂:9月12日 日立氨基酸分析仪和液相色谱在氨基酸分析中的解决方案

    http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/01/201701191656_647481_2507958_3.gif日立氨基酸分析仪和液相色谱在氨基酸分析中的解决方案时间:2014年9月12日 10:00讲师:牟晓丽 目前负责日立氨基酸分析仪和液相色谱的技术支持及市场工作讲座内容: 蛋白质是生命的物质基础,是构成细胞的基本有机物,是生命活动的主要承担者,没有蛋白质就没有生命。而蛋白质又是由氨基酸组成的,由此可见氨基酸对人体的重要性。人体可以通过进食粮食、水果、动物制品补充氨基酸,也可通过摄取含氨基酸的功能食品补充氨基酸。 在制药行业,以氨基酸药物为重要组成的生物制药也越来越得到大家的关注。所以,对氨基酸进行分析是非常有必要的。氨基酸的分析方法有柱前衍生法和柱后衍生法,分析仪器既有专门的氨基酸分析仪又有液相色谱仪。 在此,我们跟大家介绍使用日立氨基酸分析仪L-8900和液相色谱仪,通过柱前和柱后衍生法对氨基酸进行分析。-------------------------------------------------------------------------------1、报名条件:只要您是仪器网注册用户均可报名参加。2、报名并参会用户有机会获得100元手机充值卡一张哦~3、报名截止时间:2014年9月12日 9:304、报名参会:http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2014/08/201408011630_508801_2507958_3.jpghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/01/201701191656_647481_2507958_3.gif

  • 【分享】奶粉打假,测氨基酸更精确

    为制定国家标准提供依据,减少假冒的婴幼儿配方奶粉;运用植物-土壤相互作用,治理湘江流域矿区重金属污染……昨日,在中南林业科技大学召开的产学研工作会议上,一项项该校的科技成果成为关注焦点。省教育厅厅长张放平说,2006年至2009年,全省高校共计转让技术创新成果1319项,为企业提供技术服务3041项,自办企业转让科研成果683项,总计新增产值1134亿元,为全省经济发展注入了源头活水和强劲动力。 研究婴幼儿配方奶粉的中南林业科技大学食品科学与工程学院的任国谱老师对记者说,婴幼儿配方奶粉中蛋白质含量是一个宏观指标,可以通过添加很多非乳蛋白来实现,客观上给造假者提供了机会。而蛋白质是由氨基酸构成的,直接检测氨基酸的组成模式,要比对蛋白质的检测精确和可靠得多。为了寻找婴幼儿配方奶粉中必需氨基酸的打假模式,他们的项目根据中国奶牛品种和地域的分布,采集相应的生鲜奶样,分析其氨基酸组成,规定婴幼儿配方奶粉的必需氨基酸模式,大大减少假奶粉的机会。 中南林业科技大学联合湖南省环境保护研究所,围绕湘江流域污染治理、农村重金属污染治理等开展合作,技术成果“景观型-组合人工湿地污水处理技术”目前已在长沙市河西先导区洋湖、梅溪湖、雨花区圭塘河、湘潭市水府庙水库、昆明滇池等地进行推广应用。

  • 氨基酸液相检测讨论

    我查了一下,氨基酸检测大部分都采用柱前衍生化法,感觉操作比较繁琐,我想问下氨基酸检测有没有不衍生就能测得的液相方法?

  • 3氨基金刚烷醇气相方法开发问题求助

    3氨基金刚烷醇气相方法开发问题求助

    新手,最近在做中控方法开发,原料为金刚烷胺盐酸盐,产品为3氨基金刚烷醇,查到了原料的药典标准,进样口220,程序升温70,5min,10度的速率升到250,保持17min,总共40min,用的TCD检测器,药典里用的FID,因为还有别的项目在做所以一起用的TCD,温度300。柱子用的SE30,原料能出峰,但是产品会在运行结束之后过一段时间才出峰,请问大家怎么调方法,能让这俩物质一起出峰。。。金刚烷醇熔点大概266左右[img=,690,516]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/03/202203301000579912_59_3989875_3.png[/img]

  • 液相法测氨基酸

    新手求助!!! 液相测饲料中氨基酸含量,待测样品如何进行前处理???

  • 【分享】邻氨基苯甲醚同分异构体的分离

    【分享】邻氨基苯甲醚同分异构体的分离

    邻氨基苯甲醚同分异构体的分离摘要:为了实现邻氨基苯甲醚同分异构体的完全分离,作者采用气相色谱-质谱联用方法,通过改进色谱条件,使其取得了完全分离。试验表明采用气-质联用方法可以实现邻氨基苯甲醚同分异构体的完全分离。关键词:邻氨基苯甲醚;分离;异构体The Separation of O-Anisidine and Its isomersAbstract: In order to achieve the complete separation of o-anisidine and its isomers, the authors used gas chromatography - mass spectrometry methods, by improving the chromatographic conditions, so as to achieve their complete separation. The results showed that the gas-chromatography-mass spectrometry method can achieve the complete separationof o-anisidine and its isomers. Keywords: o-Anisidine; separation; isomers 1 前言采用气相色谱-质谱联用方法检测染料产品中23种有害芳香胺含量,按照现行国家标准GB/T17592-2006《纺织品禁用偶氮染料的测定》中提供的色谱条件,不但检测时间很长,而且大多数同分异构体保留时间相同或非常接近,同时这些异构体的质谱图又非常相似,从而造成无法使用特征离子对其进行定性和定量。如采用其它分析手段共同鉴别,如薄层色谱、液相色谱等,需要重新寻找条件,而且更换仪器费时费力,且多数实验室不一定同时具备这些设备。作者对芳香胺邻氨基苯甲醚及其异构体分离的问题进行了研究,其中,邻氨基苯甲醚属于有害芳香胺,而其同分异构体不属于有害芳香胺。作者通过改进色谱条件,使以上化合物达到很好的分离,提高了检测效率,减少了检测过程中的假阳性检出。2 试验2.1 仪器与试剂气相色谱-质谱联用仪(GC-MS):Agilent 7890A/5975C,美国Agilent公司毛细管柱:DB-17MS柱(30m×0.25mm×0.25μm)乙醚、硫酸亚铁等以上试剂均为分析纯;甲醇 色谱纯 美国Fisher公司旋转蒸发仪 上海亚荣生化仪器厂邻氨基苯甲醚及其同分异构体均为德国Dr.Ehrenstorfer公司。2.2 仪器操作条件色谱柱:DB一17MS 30m×0.25mm×0.25μm;温度:进样口220℃ ;辅助器280℃;离子源230℃ ;四极杆温度:150℃;柱温:40℃保持2分钟,以15℃/分钟升温至85℃ ,保持20分钟,再以30℃/分钟升至280℃,保持0分钟;载气:He;流速:1.0ml/分钟;离子化方式:EI;质量扫描范围:35—350;进样方式:不分流进样;进样0.2μL。2.3 执行标准试样处理按国标GB/T17592-2006执行。3 结果与讨论http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2010/11/201011021932_256750_1604317_3.jpg图1 邻(间、对)氨基苯甲醚总离子流图由图1可以看出,邻氨基苯甲醚及其异构体在本实验条件下,可以得到很好的基线分离。保留时间分别为:邻氨基苯甲醚(27.115分钟);间氨基苯甲醚(28.509分钟);对氨基苯甲醚(28.146分钟)。在对染料产品中23种有害芳香胺含量的测定过程中,由于异构体的存在,并且多数异构体的质谱图很相似,如果保留时间相同,往往会形成假阳性结果的产生。当前针对有害芳香胺的气相色谱/质谱检测方法,大多采用非极性或极性较弱的色谱柱,如HP-5MS,DB-5MS,DB-35MS,这些色谱柱普遍存在的缺点是对常见的芳香胺异构体不能很好的分离。本方法通过使用中等极性色谱柱DB-17MS(固定相等同于50%苯甲基聚硅氧烷),同时使用三阶程序升温,很好的解决了这个问题。通过上面的数据与国标GB/T17592-

  • 液相色谱测氨基酸

    用[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱仪[/color][/url]安捷伦1260测氨基酸,柱前衍生法。色谱条件:激发330,发射450,流动相A:甲醇和乙腈溶液67:33,流动相B:40nmol/L的磷酸二氢钾,梯度洗脱,流速为1ml/min今天测氨基酸标准品时,出峰不正常,具体如下图,有没有懂朋友能看看是什么原因,谢谢[img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/09/202209231459343338_5818_5613962_3.png[/img]

  • 【讨论】安捷伦氨基固相萃取柱的应用

    大家好,我要用NY761/2008法液相柱后衍生做氨基甲酸酯类农药检测,前处理需要用氨基柱做净化,我购买了安捷伦的氨基固相萃取柱,但不会用,哪位大侠做过,请指教!

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