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快速蛋白

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快速蛋白相关的论坛

  • 粗蛋白快速测定仪

    求购一台粗蛋白快速测定仪,用于饲料厂检测原料,要求快速,结果准确(跟凯斯定氮仪结果比对)。

  • 【讨论】乳制品中蛋白质及非蛋白氮快速检测技术

    对于乳制品中蛋白质及非蛋白氮的检测方法,国家在2008年发布了GB/T 21704-2008《乳与乳制品中非蛋白氮含量的测定》和NY/T1678-2008《乳与乳制品中蛋白质的测定 双缩脲比色法》,但GB/T 21704-2008是采用滴定的方法,NY/T1678-2008是双缩脲比色法,检测时间比较长,均无法实现乳制品中蛋白及非蛋白氮的快速检测,造成在鲜奶收购中检测速度慢,运奶车等待时间比较长的现象,是否有一种方法或仪器可快速定量的检测上述物质呢,最好分析时间控制在15分钟以内。

  • 【原创大赛】饲料粗蛋白的快速测定

    饲料粗蛋白的快速测定1 实验意义 饲料是畜牧养殖生产中的重要生产资料,饲料中蛋白质含量是判定饲料营养价值的一项重要指标,对饲料质量进行监管检测十分必要。本文开发了饲料粗蛋白的快速测定方法,比常用的国标法、凯氏定氮法以及强碱蒸馏法更加方便、快捷。采用双氧水—硫酸法是消解饲料样品,减少了消化时间。在我公司饲料快速检测仪特定波长下进行比色测定,根据溶液吸光度(颜色深度)与浓度呈正比关系,转换出粗蛋白含量,,无需滴定,适合实际检测使用。2 测定原理 浓硫酸和30%浓度的双氧水都是强氧化剂。饲料中的有机物接触到浓硫酸便会被脱水炭化,但是在高温条件下,往未被硫酸氧化完全的饲料中加入30%的双氧水,会使饲料中的有机物彻底氧化、分解,放出CO2、SO2,而释放出的氨气则和硫酸结合生成硫酸铵。NH-4+-N在碱性条件下与纳氏试剂络合生成黄色络合物,在特定波长下进行比色测定,氮含量和溶液吸光度(颜色深度)呈线性关系。3 操作步骤 取样品0.2±0.0002g于100ml三角瓶中,后各加入2ml浓硫酸摇匀,管口放一只弯颈小漏斗,三角瓶内放3-4颗玻璃珠,放在电炉上加热,使瓶内液体保持微沸,硫酸大量冒烟,消化液呈酱油色时,将三角瓶取下冷却至不烫手,向管内加入30%双氧水30-40滴,加热消化。反复多次,直至管内溶液澄清透明为止。消化结束后冷却,分别过滤转移至100ml容量瓶中,加水定容至刻度。再各从中吸取2ml定容至另一100ml容量瓶,为待测液。显色后测定吸光度。4 回收率试验 用该方法进行了添加实验和测试结果与常规的比对试验,结果表明,方法回收率在90%—110%之间,与常规测试结果绝对差值符合《GB/T18823-2002饲料检测结果判定的允许误差》标准要求,有关的数据如下:4.1 样品添加实验数据: 样品量mg添加量mg添加后mg回收率%4.4510.4615.76108.134.3310.8015.68105.097.5511.4418.9699.747.21 11.1918.1797.9411.83 11.4423.2599.9111.6311.4423.0699.914.2 速测结果与常规测试结果比对数据: 测试方法样品1样品2样品3速测法蛋白含量41.2%40.5%47.3%常规法蛋白含量40%41%46%绝对误差(%)1.20.51.35 结论 [size=

  • 【转帖】FPLC快速蛋白液相色谱

    FPLC简介 FPLC全称为快速蛋白液相色谱(Fast protein liquid chromatography),其原理与高效液相色谱理论类似,是由经典的液体柱层析引入[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]理论,并且对相体进行了改革,配用高压输液泵,采用高灵敏检测器、梯度洗脱装置、自动收集装置和微机等发展起来的现代液相色谱。FPLC是专门用来分离蛋白质、多肽及多核苷酸的系统,是HPLC近年来的一项重要革新,它不但保持了HPLC的快速、高分辨率等特性,而且还具有柱容量大、回收效率高及不易使生物大分子失活等特性。因此在近年来在分离蛋白质、多肽及寡核苷酸等方面得到了广泛应用随着HPLC的发展,出现了两种新型填料:薄壳型填料和双扩散灌流型填料,它们对大分子物质的分离具有独特的优越性,从而使FPLC的应用领域得以拓展。其可应用于蛋白、有机化合物的分离纯化,能定量测定蛋白的含量和和确定蛋白的分子量,因此可应用于生物学领域和化学领域的研究。 The Pharmacia fast protein liquid chromatography (FPLC) system is used for methods developmnent and the purification of large quantities of various biomolecules (i.e., protein and DNA). The system includes two pumps capable of continuous flow to the purification columns (vary by user) , a peristaltic pump may be used for column equilibration, a UV monitor to detect biomolecules on the column, a mixer to produce elution gradients, motor valves may be used to assist with sample injection, column selection or flow reversal, and a controller with an integration function for computerized operation of various programs directing flow to the pumps and controlling the motor valves. A chart recorder is the typical mode of 'run' documentation.

  • 铁蛋白,C反应蛋白,心肌三项检测试剂

    北京易斯威特生物医学科技有限公司产品介绍 铁蛋白(FER)检测试剂盒 (胶体金法)1.国内第一家免疫层析法检测FER的产品。2.本产品应用世界上最先进的单克隆抗体技术结合胶体金(纳米金)免疫层析技术,以双抗体夹心法快速定性检测人血清,血浆中的铁蛋白,适用于急性贫血,肝脏损伤等相关疾病的辅助诊断3.最快速准确的辅助诊断方法。4.血清铁蛋白是血液去铁蛋白和铁核心Fe3+形成的复合物。是检查体内铁缺乏的最灵敏的指标。血清铁蛋白测定在临床上常用于缺铁性贫血的诊断。简单 便捷 快速 灵敏 环保 肌红蛋白/肌酸激酶/心肌肌钙蛋白I,心梗三项检测试剂盒(胶体金法)1.本产品应用世界上最先进的单克隆抗体技术结合胶体金(纳米金)免疫层析技术,以双抗体夹心法快速定性检测人血清,血浆中的肌红蛋白,肌酸激酶,心肌肌钙蛋白I检测,用于临床快速诊断急性心肌梗塞(AMI).2.最快速准确的辅助诊断方法。3.肌红蛋白:是心肌梗死的标志物,增高表示冠状动脉堵塞引起心肌严重缺血造成心肌梗死;4.肌钙蛋白:是一种心肌蛋白,升高见于心肌损伤,多见于心肌梗死,也见于心肌炎和心肺复苏后患者,特异性较高,阳性的话一般可确诊心肌损伤,阴性的话不能排除,因为肌钙蛋白的升高出现在心肌梗塞3-6小时之后,之前可能出现阴性。肌酸激酶敏感性较高,特异性较低,升高也出现在心梗3-8小时之后。5.肌酸激酶:主要存在于骨骼肌和心肌,在脑组织中也存在,是参与体内的能量代谢的一种酶。在临床上主要用于诊断心肌梗塞。心肌梗塞患者发病后2-4小时,血液中此酶活动即开始升高。比血清中谷草转酸酶和乳酸脱氢酶的活力变化都出现得早。 简单 便捷 快速 灵敏 环保 C反应蛋白(CRP)检测试剂盒(胶体金法)1.国内第一家免疫层析法检测CRP的产品。2.本产品应用世界上最先进的单克隆抗体技术结合胶体金(纳米金)免疫层析技术,以双抗体夹心法快速定性检测人血清,血浆中的C反应蛋白,适用于感染,炎性疾病,组织损伤,手术创伤及组织坏死等病变情况的辅助诊断3.最快速准确的辅助诊断方法。4.是一种能与肺炎球菌C多糖体反应形成复合物的急性时相反应蛋白。可用于细菌和病毒感染的鉴别诊断简单 便捷 快速 灵敏 环保

  • 蛋白修饰与蛋白质鉴定

    现在,在实验研究基础上,借助多方面的生物信息学方法,可以快速高通量的预测和进行蛋白质鉴定蛋白翻译后修饰。分泌蛋白和膜相关蛋白附着于细胞膜上的或将被排泄出去的蛋白质是由细胞内质网膜上附着的核糖体合成。附着有核糖体的内质网被称为糙面型内质网。这类蛋白质都含有一个N-末端(或氨基端),我们称之为信号序列或信号肽。这个信号肽通常情况下含有13-36个主要疏水性残基,同时它含有多蛋白复合物,我们称之为信号识别粒子(SRP)。这种信号肽在通过内质网膜之后会被去除。信号肽的去除过程是在信号肽酶催化作用下完成的。含有一个信号肽的蛋白质被称为前蛋白,有别于原蛋白。然而,某些用于分泌的蛋白在分泌之后会进一步被蛋白水解,因此包含有原蛋白的序列。这类蛋白质被称为前原蛋白。蛋白水解性裂解许多蛋白质在翻译之后会经历水解性裂解过程。其中最为简单的形式是去除起始蛋氨酸。许多蛋白质合成了不活跃的前体细胞,这些细胞只能在合适的生理条件下通过限制性蛋白水解过程产生活性。在凝血过程中使用到的胰腺酶和酶类就是后者的例证。多肽去除时产生活性的不活跃的前体蛋白,我们称之为原蛋白。前原蛋白的翻译后加工过程的一个复杂的例子就是脑垂体分泌合成的前阿黑皮素原的裂解过程(有关前阿黑皮素原的讨论,见肽类激素页)。这类前原蛋白经过复杂的裂解,根据合成的前阿黑皮素原的细胞定位而不同,其路径也有所不同。另一个前原蛋白的例子就是胰岛素。由于胰岛素是由胰腺分泌的,因此它有一个前肽。随着含24个氨基酸的信号肽的裂解,这类蛋白也折叠成了胰岛素原。胰岛素原进一步分裂,产生活跃的胰岛素,它包含两个肽链,由二硫键进行连接。但仍有其他的蛋白(酶类)被合成为非活跃的前体细胞,被称为酶原。酶原在蛋白水解性裂解时会产生活性,在凝血串联蛋白质链的若干蛋白质中都会发生这种现象。甲基化作用蛋白翻译后的甲基化过程主要发生在氮原子和氧原子上。活性甲基供体是活性腺苷甲硫胺酸(SAM)。最常见的甲基化作用发生在赖氨酸残基的ε-amine上。脱氧核糖核酸组蛋白中赖氨酸残基的甲基化作用可调节核染色质结构,因此可调节其转录活性。赖氨酸原本被认为是一种常设共价标记,可提供长期信号,甚至包括转录记忆时的组蛋白依赖机制。然而,最近的临床研究表明赖氨酸甲基化作用与其他共价修饰体相似,作用时间短,并能通过反脱甲基化活动进行动态调节。最近的组学研究发现表明,赖氨酸残基的甲基化作用不仅发生在核染色质层面,而且还通过修订转录因子影响基因表达。组氨酸的咪唑环,精氨酸的胍基部分以及谷氨酸盐和天冬氨酸盐的R组酰胺(R-group amides )上,都发现了额外的氮甲基化作用。谷氨酸盐和天冬氨酸盐的R组羧化物也会发生氧甲基化作用并形成甲基酯。蛋白可能在半胱氨酸的R[

  • 儿童缺铁性贫血(铁蛋白检测试剂)以及C反应蛋白,心肌三项检测试剂

    铁蛋白,C反应蛋白,心肌三项检测试剂北京易斯威特生物医学科技有限公司产品介绍 铁蛋白(FER)检测试剂盒 (胶体金法)1.国内第一家免疫层析法检测FER的产品。2.本产品应用世界上最先进的单克隆抗体技术结合胶体金(纳米金)免疫层析技术,以双抗体夹心法快速定性检测人血清,血浆中的铁蛋白,适用于急性贫血,肝脏损伤等相关疾病的辅助诊断3.最快速准确的辅助诊断方法。4.血清铁蛋白是血液去铁蛋白和铁核心Fe3+形成的复合物。是检查体内铁缺乏的最灵敏的指标。血清铁蛋白测定在临床上常用于缺铁性贫血的诊断。简单 便捷 快速 灵敏 环保 肌红蛋白/肌酸激酶/心肌肌钙蛋白I,心梗三项检测试剂盒(胶体金法)1.本产品应用世界上最先进的单克隆抗体技术结合胶体金(纳米金)免疫层析技术,以双抗体夹心法快速定性检测人血清,血浆中的肌红蛋白,肌酸激酶,心肌肌钙蛋白I检测,用于临床快速诊断急性心肌梗塞(AMI).2.最快速准确的辅助诊断方法。3.肌红蛋白:是心肌梗死的标志物,增高表示冠状动脉堵塞引起心肌严重缺血造成心肌梗死;4.肌钙蛋白:是一种心肌蛋白,升高见于心肌损伤,多见于心肌梗死,也见于心肌炎和心肺复苏后患者,特异性较高,阳性的话一般可确诊心肌损伤,阴性的话不能排除,因为肌钙蛋白的升高出现在心肌梗塞3-6小时之后,之前可能出现阴性。肌酸激酶敏感性较高,特异性较低,升高也出现在心梗3-8小时之后。5.肌酸激酶:主要存在于骨骼肌和心肌,在脑组织中也存在,是参与体内的能量代谢的一种酶。在临床上主要用于诊断心肌梗塞。心肌梗塞患者发病后2-4小时,血液中此酶活动即开始升高。比血清中谷草转酸酶和乳酸脱氢酶的活力变化都出现得早。 简单 便捷 快速 灵敏 环保 C反应蛋白(CRP)检测试剂盒(胶体金法)1.国内第一家免疫层析法检测CRP的产品。2.本产品应用世界上最先进的单克隆抗体技术结合胶体金(纳米金)免疫层析技术,以双抗体夹心法快速定性检测人血清,血浆中的C反应蛋白,适用于感染,炎性疾病,组织损伤,手术创伤及组织坏死等病变情况的辅助诊断3.最快速准确的辅助诊断方法。4.是一种能与肺炎球菌C多糖体反应形成复合物的急性时相反应蛋白。可用于细菌和病毒感染的鉴别诊断简单 便捷 快速 灵敏 环保

  • 【原创大赛】近红外光谱快速检测人血白蛋白原液蛋白质含量的建模研究

    【原创大赛】近红外光谱快速检测人血白蛋白原液蛋白质含量的建模研究

    [url=https://insevent.instrument.com.cn/t/1p][color=#3333ff]近红外光谱[/color][/url]快速检测人血白蛋白原液蛋白质含量的建模研究摘要:本研究建立[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/1p][color=#3333ff]近红外光谱[/color][/url]定量分析模型,对浓缩液蛋白含量进行快速及有效的测定。在实验室条件下配置不同浓度的蛋白样品,建立用于蛋白含量测定的定量分析模型,以实现浓缩液蛋白含量的快速及有效的判断。关键词:[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/1p][color=#3333ff]近红外光谱[/color][/url]分析技术;人血白蛋白;定量分析模型1材料1.1 试剂供试品:人血白蛋白原液;生理盐水。1.2 仪器和软件AntarisⅡ傅里叶变换[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/1p][color=#3333ff]近红外光谱仪[/color][/url](美国Thermo Fisher scientific公司);内径4×50 mm的玻璃小管(Kimble Chase,德国); MATLAB 2015a(美国Mathworks公司);PLS_Toolbox工具箱(美国Eigenvector Research公司)。2方法2.1 蛋白含量的测定及样品溶液的配制2.1.1 蛋白质含量的测定取生产过程中超滤浓缩后的人血白蛋白原液为实验供试品,用半微量凯氏定氮法测定蛋白质浓度,浓度应不低于26.5%。2.1.2样品溶液的配制根据试验需要,将供试品溶液用生理盐水进行稀释得到多个不同蛋白质浓度的实验样品。2.2 样品光谱的采集本实验使用AntarisⅡ傅里叶变换[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/1p][color=#3333ff]近红外光谱仪[/color][/url],采用透射分析模块,采用仪器自带的RESULT-Intergration软件编写采集光谱的工作流程。光谱分辨率为8 cm-1,扫描范围为10000-4000 cm-1,扫描次数为32次,用偏最小二乘回归(Partial Least Squares Regression, PLSR)方法建立定量模型。2.3 校正集和验证集的划分校正集中的样品应包含使用该模型预测的未知样品的所有化学成分。且校正集中的样品的化学成分浓度范围应覆盖使用该模型预测的未知样品中可能存在的浓度范围。而且验证集中的样品应涵盖使用模型分析的待测样品中的化学组成,测定浓度范围也应尽可能覆盖该模型分析的待测样品可能存在的浓度范围,且分布均匀。所以,需要选择合理的样品集划分方法,以提高模型的应用性及准确性。2.4 预处理方法的选择为了消除噪声和产生的基线漂移,提高模型的预测能力,得到稳健的模型,需要在模型建立前对样品的原始光谱进行预处理,常用的谱图处理方法有均值中心化(Mean Center)、标准化(Auto scale)、平滑和导数等。导数是常用的基线校正和光谱分辨预处理方法,但也会放大噪声的信号,降低光谱的信噪比;为消除光谱变换带来的噪声,常对原始光谱进行平滑后求导,能有效提高信噪比;均值中心化可增大不同样品之间的差异,从而使模型的稳健性和预测能力得到提高;标准化可以使光谱中所有波长变量的权重相同,增加光谱之间差异化,适合于低浓度成分的建模。本研究中对Auto scale、Mean Center、一阶导数(First Derivative,FD)SG13点平滑、二阶导数(Second Derivative,SD)SG13点平滑等预处理方法进行了考察,以模型的RMSEP为指标,选择最合适的预处理方法。2.5 光谱区间的选择[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/1p][color=#3333ff]近红外光谱[/color][/url]信息十分复杂,在建立校正模型的过程中选择有效的建模变量是十分必要的。本研究选用间隔偏最小二乘法(Interval Partial Least Squares Regression, iPLS)),以RMSECV值为评价标准,选择变量区间以建立最佳的定量模型。3 实验结果3.1 蛋白质含量的测定结果采用半微量凯氏定氮法进行蛋白含量的测定,测定得到17个样品的蛋白含量。用生理盐水稀释样品,共得到49个不同蛋白质含量的样品。3.2 样品的原始光谱图1为49个蛋白样品的原始光谱,原始光谱图中可见各样品的光谱差异不明显,因此需要使用化学计量学方法对样品光谱进行处理。[align=center][img=,494,237]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/09/201709151606_01_1626619_3.png[/img][/align][align=center]图1 样品原始光谱图[/align]3.3 校正集和验证集的划分结果本研究采用Kennard-Stone(K-S)分类的算法,按照2:1的比例进行样品集的划分,划分为33个校正集样品和16个验证集样品。图2为校正集样品和验证集样品的主成分得分图,图中灰色点为校正集样品,红色点为验证集样品,从主成分得分图中可以看出,校正集样品和验证集样品分布比较均匀,且验证集样品比较均匀的分布在校正集样品之间,符合理想校正集和验证集的要求。[align=center] [img=,467,301]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/09/201709151608_01_1626619_3.png[/img][/align][align=center]图2 样品主成分得分图[/align]3.4 光谱预处理的结果建模过程中,分别采用各种方法对光谱数据进行预处理,包括标准化(Auto scale)、均值中心化(Mean Center)、一阶导数(First Derivative,FD)、SG13点平滑、二阶导数(Second Derivative,SD)等处理方法,以RMSEP作为评价模型的参数,通过对比预处理后的建模结果,选出最合适的预处理方法。表1列出了预处理后各模型的评价参数,通过比对,可以较直观的选出一阶导数SG13点平滑和Mean Center的组合为最佳预处理方法。图3所示为用经过一阶导数SG13点平滑和Mean Center 预处理后的光谱所建立的模型的结果,从图3中可以看出,建模效果较好,预测能力较高,Rc2=0.994,Rp2=0.986,RMSEC=0.1993%,RMSEP=0.2585%,RMSECV=0.2518%。[align=center]表1 不同预处理后各模型参数[/align][align=center][img=,629,241]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/09/201709151613_01_1626619_3.png[/img][/align][align=left]FD+SG:一阶导数+SG13点平滑[/align][align=left]SD+SG:二阶导数+SG13点平滑[/align][align=center][img=,572,305]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/09/201709151616_01_1626619_3.png[/img][/align][align=center]图3 一阶导数+SG平滑+ Mean Center[/align]3.5 光谱区间的选择结果通过筛选光谱区间,可以选择与样品白蛋白含量相关性大的光谱变量进行建模,去掉大量无关信息,减少模型的计算量,使得模型的效果更好。本实验采用iPLS进行变量的选择。将光谱进行SG13点平滑+一阶导数+ Mean Center预处理后,分别采用Forward iPLS和Reverse iPLS方法选择最佳的光谱区间,改变窗口宽度,分别选择最佳变量,以RMSECV为标准选择谱区。3.5.1Forward iPLS选择波段采用FiPLS的方法以RMSECV为标准选取最佳的光谱区间,分别选择50、100、200个变量进行自动选择,如表2所示窗口宽度为100个变量时建模结果较佳,结果图4所示。[align=center]表2 Forward iPLS结果[/align] [align=center][img=,645,163]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/09/201709151618_01_1626619_3.png[/img][/align][align=center][img=,517,246]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/09/201709151619_01_1626619_3.png[/img][/align][align=center]图4 Forward iPLS波段结果图[/align]由图4中可以看出,绿色部分为建模的波段,图5为建模预测结果图。[align=center][img=,551,291]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/09/201709151620_01_1626619_3.png[/img] [/align][align=center]图5 Forward iPLS建模结果图[/align]3.5.2 Reverse iPLS选择波段采用Reverse iPLS的方法选取最佳的光谱区间,同样,分别选择50、100、200个变量进行自动选择,如表3所示窗口宽度为50个变量时建模结果较佳,波段选择结果如图6所示。[align=center]表3 Reverse iPLS结果[/align][align=center][img=,652,456]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/09/201709151622_01_1626619_3.png[/img][/align] [align=center]图6 Reserve iPLS 选波段结果图[/align]如图6中所示,其中绿色部分为建模波段,图7为预测结果。[align=center][img=,520,228]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/09/201709151624_01_1626619_3.png[/img][/align][align=center]图7 Reserve iPLS 建模结果图[/align]通过采用Forward iPLS和Reservei PLS波段选择方法建立PLSR模型,经过两种方法中选择的最优变量的对比(见表4),选择窗口宽度为100变量的Forward iPLS变量选择方法建立的模型最佳。最终建立的PLSR模型结果:模型的参数为Rc2=0.997,Rp2=0.987,均方根误差RMSEC=0.1394%,RMSEP=0.2560%,RMSECV= 0.1831%,建模结果较好。[align=center]表4不同变量选择方法的建模结果[/align][align=center][img=,641,142]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/09/201709151629_01_1626619_3.png[/img][/align]3.6 一级数据与预测值比较对16个验证集样品的传统方法获得的蛋白含量和NIRS蛋白含量预测值进行偏差分析,结果见表5所示。蛋白含量一级数据和预测值的平均偏差和相对平均偏差的计算公式见式1和式2,蛋白含量NIRS的预测值和一级数据间的平均偏差为0.17,相对平均偏差为0.81,两者都较低,说明了NIRS和传统的凯氏定氮法结果相差较小,表明NIRS用于蛋白含量测定的准确性和可靠性。[align=center][img=,372,89]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/09/201709151631_01_1626619_3.png[/img][/align]式中yi, actual为传统凯氏定氮方法得到的一级数据值,yi, predicted为NIRS得到的预测值,n为验证集样品数量。[align=center]表5 验证集样品方法结果比较表[/align][align=center][img=,585,86]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/09/201709151632_01_1626619_3.png[/img][/align]3.7 预测值的精密度通过重复测量光谱计算,建立的蛋白含量校正模型的预测精密度。随机选取验证集样品中的1号、15号、35号、42号和47号样品,每个样品重复测量10次,然后采用建立的蛋白含量模型采集以上样品的光谱,得到样品的预测值。然后计算每个样品预测值的平均值、标准偏差和相对标准偏差,用这些指标来表示预测的精密度,结果见表6。如表中所示, RSD值均在1.0%以下,远远低于5.0%,证明了模型的精密度良好。[align=center]表6 模型精密度考察结果[/align][align=center][img=,584,394]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/09/201709151636_01_1626619_3.png[/img][/align]4结论和讨论本研究建立了人血白蛋白生产过程中蛋白含量测定的近红外定量模型,用于人血白蛋白原液蛋白质含量的测定,为下一步原液的生产配制提高依据。首先,取生产过程中的样品17个,用凯氏定氮法测得各个样品的蛋白含量,然后在实验室条件下,用生理盐水配制成49个不同浓度的蛋白样品。对49个样品进行[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/1p][color=#3333ff]近红外光谱[/color][/url]的采集,然后对样品进行校正集和验证集的划分,对光谱进行预处理方法和不同的变量选择方法进行了考察;采用Kennard-Stone(K-S)分类的算法,按照2:1的比例进行样品集的划分,优先选出Mean Center +一阶导数SG13点平滑的预处理方法,并采用窗口宽度为100变量的Forward iPLS变量选择方法选出变量区间,最终建立最佳的近红外定量模型。最终建立的PLSR模型结果:Rc2=0.997,Rp2=0.987,均方根误差RMSEC=0.1394%,RMSEP=0.2560%,RMSECV= 0.1831%。除此之外,对模型进行了重复性考察,从结果可知模型具有较好的重复性。在模型的建立中,选用Kennard-Stone(K-S)分类的算法进行样品集的划分,通过PCA分析得到具有代表性的校正集和验证集样品。在预处理方法的选择中,分别选用Autoscale、Mean Center、SG平滑一阶导数以及各预处理方法的组合进行预处理方法的考察,其中SG平滑中,不同的窗口宽度会对平滑产生不同的效果,窗口宽度越宽平滑效果越好,但也会丢掉有用的信息,经过考察选择13点平滑时结果较佳。参考文献吴清, 周法根. 脑梗死治疗中白蛋白应用价值的探讨 . 心脑血管病防治, 2005, 5(2): 49-50.王华平, 米宇俊. 人血白蛋白治疗肾综合征出血热低血压休克患者疗效观察 . 医师进修杂志, 2001, 24(8):20-21.郑红光, 杨志藩, 关欣. 静脉输注人血白蛋白对肾病综合征的正负临窗效应观察 . 中国实用内科杂志, 2003, 23(1):25-27.刘丽萍. 人血白蛋白在肝硬化资料中的应用 . 中国医院用药评价与分析, 2013, 13(5):388-390.常花蕾, 史涛. 人血白蛋白临床不合理应用及改进措施 . 中国药物应用与监测, 2014, 11(1): 52-54.孙世光, 余明莲, 王建民, 张国辉. 人血白蛋白的临床应用误区及其对策 .解放军药学学报, 2009, 25(4):366-368.

  • 牛奶蛋白质分析仪可以用于检测乳蛋白制品嘛

    牛奶蛋白质分析仪可以用于检测乳蛋白制品。以下是详细解释和相关信息:  功能与应用:牛奶蛋白质分析仪是一种专门用于分析牛奶及其制品中蛋白质含量的仪器。它基于先进的生化分析技术,如比色法、光谱法或电化学法等,能够准确、快速地检测样品中的蛋白质含量。  乳蛋白制品的检测:乳蛋白制品,如奶粉、酸奶、奶酪等,其蛋白质含量是产品质量和营养价值的重要指标。牛奶蛋白质分析仪可以有效地检测这些乳蛋白制品中的蛋白质含量,为生产厂家提供准确的质量控制手段。  优点与特点:  准确性高:牛奶蛋白质分析仪具有高灵敏度和高准确性,能够确保测量结果的可靠性。  快速便捷:该仪器操作简单,使用方便,可以快速得出测量结果,提高检测效率。  适用范围广:除了牛奶及其制品外,还可以用于其他含蛋白质样品的检测,如豆类制品、肉制品等。  在乳品工业中的重要性:随着乳品市场的不断扩大和消费者对乳制品质量要求的提高,牛奶蛋白质分析仪在乳品工业中的重要性日益凸显。它可以帮助乳品企业提高产品质量、降低生产成本,同时为消费者提供更加安全、健康的乳制品。  综上所述,牛奶蛋白质分析仪是一种功能强大、应用广泛的检测仪器,完全可以用于检测乳蛋白制品中的蛋白质含量。[img=,690,690]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2024/05/202405271615421543_8284_6238082_3.jpg!w690x690.jpg[/img]

  • 汉邦科技蛋白纯化仪

    汉邦科技蛋白纯化仪

    [size=18px] 汉邦全自动蛋白纯化系统是公司自主研发的一款高效、快速、可靠的全自动蛋白纯化系统。可用于微克到克级水平的蛋白、多肽和核酸等生物分子的快速高效纯化。该系统采用模块化设计、配套智能化软件并结合公司的各类层析柱,可满足实验室各类生物大分子的纯化需求。它的模块化设计、智能化软件并结合汉邦科技的各类层析柱,可以满足实验室中各类生物大分子的纯化挑战! 欢迎来电咨询:18952338196 [img=,690,469]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/05/202205261525020323_4695_2788731_3.jpg!w690x469.jpg[/img][/size]

  • 什么是蛋白标签?蛋白标签在重组蛋白生产中有什么作用?

    [font=宋体][font=宋体]蛋白标签([/font][font=Calibri]Protein Tag[/font][font=宋体])又称为标签蛋白,是利用[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]体外重组技术,将目的蛋白与其融合表达形成的一种多肽或蛋白。这种标签有助于目的蛋白的表达、检测、示踪和纯化等操作。随着技术的不断进步,研究人员已经成功开发出了具有各种不同功能的蛋白标签。然而,由于不同的蛋白标签具有各自的特性,因此在质粒构建过程中常常会遇到多种问题。今天,我们将深入探讨蛋白标签的各个方面。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]蛋白标签类型[/b][/font][font=宋体]蛋白标签主要分为三类,适用于不同的应用场景:表位标签、亲和标签和荧光标签。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]①表位标签往往是短肽序列,可用于免疫学应用,如 [/font][font=Calibri]Western Blot [/font][font=宋体]和免疫共沉淀。最常用的表位标签有[/font][font=Calibri]His[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]FLAG[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]HA[/font][font=宋体]等。[/font][/font][font=宋体][font=宋体]②亲和标签一般较长,可增加蛋白溶解度,广泛应用于重组蛋白的纯化,如[/font][font=Calibri]SUMO[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]Trx[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]MBP[/font][font=宋体]等。[/font][/font][font=宋体][font=宋体]③荧光标签可用于活细胞和死细胞检测,最常用的荧光蛋白包括绿色荧光蛋白([/font][font=Calibri]GFP[/font][font=宋体])、橙色荧光蛋白([/font][font=Calibri]OFP[/font][font=宋体])、红色荧光蛋白([/font][font=Calibri]RFP[/font][font=宋体])和黄色荧光蛋白([/font][font=Calibri]YFP[/font][font=宋体])。它们被广泛用于影像学研究,如细胞定位和共表达实验。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b][font=宋体]蛋白标签在重组蛋白生产中有什么作用[/font][font=Calibri]?[/font][/b][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]1[/font][font=宋体]、识别:给蛋白加标签使其易于识别,进而快速鉴定感兴趣的蛋白质。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]2[/font][font=宋体]、纯化:利用标签蛋白对目的蛋白进行纯化。例如,[/font][font=Calibri]His6[/font][font=宋体]是一种由六个组氨酸残基组成的融合标签,可以插入目的蛋白的[/font][font=Calibri]C[/font][font=宋体]末端或[/font][font=Calibri]N[/font][font=宋体]末端。组氨酸残基侧链与固态的镍有强烈的吸引力,这使得[/font][font=Calibri]His6[/font][font=宋体]标签可用于固定化金属螯合层析[/font][font=Calibri](IMAC)[/font][font=宋体],从而对重组蛋白进行分离纯化。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]3[/font][font=宋体]、定量:通过量化标签来确定目的蛋白的存在量。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]4[/font][font=宋体]、定位:通过定位标签蛋白定位到目标蛋白在细胞中的特定位置,进而研究其生理功能、信号通路等。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]5[/font][font=宋体]、跟踪:在细胞、组织和生物体中,通过追踪标签蛋白质追踪目的蛋白,以研究它们的表达、分布、代谢等生物学过程。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]总之,蛋白标签在重组蛋白生产中扮演着重要的角色,它们不仅提高了生产效率,还为蛋白的检测、纯化和示踪提供了便利。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]常用的[url=https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review/protein-tag][b]蛋白标签[/b][/url]有:[/font][font=Calibri]His-Tag[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]FLAG-Tag[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]HA-Tag[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri][url=https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review/myc-tag-protein-production][b]Myc-Tag[/b][/url][/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]SUMO-Tag[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]Trx-Tag[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]GST-Tag[/font][font=宋体]……义翘神州不仅可提供重组蛋白表达定制服务,也可提供对应标签抗体产品及融合蛋白标签切除常用工具酶,如[/font][font=Calibri]EK[/font][font=宋体]蛋白酶、[/font][font=Calibri]3C[/font][font=宋体]蛋白酶等。下图是具体蛋白标签的序列和大小介绍,详情可以关注:[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review/protein-tag[/font][/font]

  • 【分享】高效毛细管电泳法测定畜禽肌肉中肌红蛋白和血红蛋白

    采用P/ACETM MDQ高效毛细管电泳仪,电泳缓冲液为50mmol/L 柠檬酸-20mmol/L 柠檬酸三钠,pH2.6,电泳温度25℃,电压22kV,紫外检测波长196nm。结果表明:肌肉中肌红蛋白和血红蛋白含量测定结果相对标准偏差为0.69% 和0.90%,后加标准品和前加标准品回收率分别为93.26%~97.84%、90.32%~97.46% 和79.89%~84.14%、79.52%~83.65%。该方法简单、快速、对同时测定畜禽肌肉色素物质肌红蛋白和血红蛋白含量准确度良好,是评价肉品质参数的一种值得推广应用的新方法。

  • 蛋白复性液稀释沉淀如何去除,0.22过滤不掉 啊

    蛋白复性液稀释沉淀如何去除,0.22过滤不掉 啊我的蛋白复性液稀释后还有一部分沉淀析出,但是沉淀过滤去除不了啊,请大家帮忙啊? 蛋白复性液稀释沉淀如何去除,0.22过滤不掉 啊,除了高速离心有什么好的办法吗,快速或量大点的处理方法,

  • β-乳球蛋白属于乳白蛋白还是属于乳球蛋白里面的一种成分?

    β-乳球蛋白属于乳白蛋白还是属于乳球蛋白里面的一种成分?最近看到有两种版本,其一,说是属于乳白蛋白里面的一种成分,乳白蛋白包括α-乳白蛋白、β-乳球蛋白和血清白蛋白。乳球蛋白即免疫球蛋白。其二,乳白蛋白包括α-乳白蛋白和血清白蛋白,乳球蛋白包括β-乳球蛋白和免疫球蛋白。现在不知道哪种说法对,请各位指教!!!谢谢!!!

  • 【求助】富硒蛋白饮料的消解

    有两个问题请教前辈们一:我的样品数量很多,溶液呈溶液状态有没有快速批量消解的方法?存在的问题是样品中富含有机蛋白跟水样有很大区别,因此感觉如果使用水中硒含量的测定方法会不适合。双氧水+硝酸加热可以消解完全吗?如果可以该多少温度还有多久可以?二,我们用的蛋白粉中的硒含量应该怎样消解?部里只有电热板,以前做都是先加浓硝酸静置一夜(肉眼看已经澄清透明),第二天电热板消解1h,接着赶酸后加入4M的盐酸还原。最后铁氰化钾稀盐酸定容原子荧光测量。但是总感觉定容后溶液中有少许纤维状沉淀,搞不清楚是什么东东,担心数据有问题啊。[em09501]希望有有经验的达人们帮忙解决一下[em09511]

  • 尿微量蛋白(尿微量白蛋白/蛋白尿)试验

    尿微量蛋白(尿微量白蛋白/蛋白尿)试验(也称“白蛋白试验”,“尿微量白蛋白”和“蛋白尿”试验)何为尿微量白蛋白(白蛋白)试验?尿微量白蛋白试验是对尿液中的蛋白质进行测定的筛选试验。人体血液中有一种蛋白质称为白蛋白。在正常情况下,几乎无法在尿液中检测到。只有在肾脏受损,尤其是损伤早期,它可以优先于其他肾损伤标志物在尿液中被检测出,因此,尿微量白蛋白在诊断肾脏疾病、早期肾损伤等方面具有重要意义。此项试验有何目的?蛋白质是人体的基本构成“材料”,具备一些重要的功能和作用,可结合营养物质将其运输至各个组织,,并将人体中循环的体液量维持在适当水平。肾脏功能正常时,蛋白质几乎无法通过肾脏进入尿液(仅会排出血液循环产生的废料)。然而,如果人的肾功能受损或衰竭,该肾脏对蛋白质的过滤能力将有所下降,因而一些蛋白质将会透过肾脏而出现在尿液中,称为尿微量蛋白。尿微量白蛋白与蛋白尿有何不同?白蛋白是一种大量存在于血液中的典型蛋白质。因其分子个头小,当肾脏功能出现问题时,白蛋白是能够率先通过肾脏进入尿液的几种蛋白质之一。尿液中出现少量白蛋白的情况称为尿微量白蛋白。若肾脏功能受损严重,尿液中的白蛋白数量呈现出增长趋势,这种症状被改称为蛋白尿。尿微量白蛋白/蛋白尿有何症状?病症早期,并无明显症状或征兆显现。随着肾功能衰竭的加重,大量蛋白质出现在尿液中,手脚、腹部和面部可能出现肿胀。如果蛋白尿的情况加重,可能会造成永久性肾功能损伤,有些病人可能需要做透析或肾移植。不论上述症状是否存在,尿蛋白测定是确定有多少蛋白质进入尿液的唯一办法。蛋白尿还可能引发心血管疾病。血管受损除了会引发肾脏疾病外,还可能会造成窒息和心力衰竭。患蛋白尿(症)的高危人群有哪些?患有糖尿病、高血压、心血管疾病和其他类型肾脏疾病等慢性病的病人易出现蛋白尿。老年人、肥胖人群以及有肾脏疾病家族史的人群。其

  • 多肽和小蛋白的快速分离

    多肽和小蛋白的快速分离

    11种多肽和小蛋白在60s内被一根50mm长的色谱柱以0.8cm/sec的流速完成分离。在使用传统全多孔结构的色谱柱时,人们通常不会用超过0.5cm/sec的流速以避免过多的分离度损失。但是由于HALO核壳技术的设计,是的其在高流速下使用而不牺牲分离度。实验条件:色谱柱:HALO peptide es-c18,4.6*50mm流动相:A=0.1%TFA水溶液:乙腈90::10 B=乙腈:0.1%TFA水溶液70:30梯度洗脱:0-87.5%B,1min流速:5.0ml/min温度:60样品1.Gly-Tyr2.Val-Tyr-Val3.Angiotensin 1 and 2 (1-7) amide4.Met-enk5.Angiotensin 1 and 2 (2-8) amide6.Angiotensin 117.Leu-enk8.Ribonuclease A9.Angiotensin (1-12)(human)10.Angiotensin (1-12)(mouse)11.Porcine insulinhttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/01/201501201649_532804_2952777_3.jpg

  • 蛋白胨和胰蛋白胨

    本文引用自cheney《蛋白胨和胰蛋白胨简介》蛋白胨是将肉、酪素或明胶用酸或蛋白酶水解后干燥而成的外观呈淡黄色的粉剂,具有肉香的特殊气息。蛋白质经酸、碱或蛋白酶分解后也可形成蛋白胨。蛋白胨富含有机氮化合物,也含有一些维生素和糖类。它可以作为微生物培养基的主要原料,在抗生素、医药工业、发酵工业、生化制品及微生物学科研等领域中的用量均很大。不同的生物体需要特定的氨基酸和多肽,因此存在着各种蛋白胨,一般来说,用于蛋白胨生产的蛋白包括动物蛋白(酪蛋白、肉类)和植物蛋白(豆类)等两种。能为微生物提供C源、N源、生长因子等营养物质。因此,蛋白胨从来源上可分为动物性蛋白胨和植物性蛋白胨。胰胨、肉胨、骨胨等都是动物性蛋白胨,而大豆蛋白胨等则是植物性蛋白胨。动物性来源的蛋白胨还有:蚕蛹蛋白胨、血液蛋白胨等。   不同来源的蛋白质和不同的水解条件,其水解物中组成可千差万别。所以胨往往是一个复杂的多肽混合物。可溶于水,过热不凝固,在饱和硫酸铵中不发生沉淀但可为蛋白质沉淀剂所沉淀。可用作微生物和动物细胞培养基、特种功能性食品和化妆品的配料,也有用作啤酒等产品的稳定剂。胰蛋白胨,又称胰酪蛋白胨(Casein Tryptone)、胰酶消化酪蛋白胨(Pancreatic digest of casein),是一种优质蛋白胨,是以新鲜牛肉和牛骨经胰酶消化,浓缩干燥而成的浅黄色粉末。具有色浅、易溶、透明、无沉淀等良好的物理性状。含有丰富的氮源、氨基酸等,可配制各种微生物培养基,用于细菌的培养、分离、增殖、鉴定,以及无菌试验培养基、厌氧菌培养基等细菌生化特性试验用培养基的配置。胰蛋白胨还广泛应用于高品质的抗生素、维生素、医药工业,氨基酸、有机酸、酶制剂、黄原胶等发酵工业,生化制品及微生物学科研等领域中的用量均很大,临床用于抗炎消肿,工业上用于皮革制造,生丝处理,食品加工。在国际市场上,胰蛋白胨也属于货紧价昂的短线品种之一。   胰酪蛋白胨质量标准及其检验标准:   常规各项理化指标:   1. 澄清度(磷酸盐、碱性沉淀):无沉淀、澄清   2. 2%水溶液:透明   3. 酸碱度:6-7   4. 氨基氮:≥3%   5. 色氨酸:≥0.8%   6. 胨含量:≥80%   7. 总氮:≥13%   8. 水份:≤5%   9. 灰份:≤6%   10. 氯化钠:≤0.2%胰蛋白胨特指用胰蛋白酶酶解酪蛋白生成的蛋白胨产物,与一般蛋白胨的区别在于酶解工艺处理上,属于水解度更高、胨分子量更小更均衡的蛋白胨。

  • 重组蛋白是什么?融合蛋白和重组蛋白的区别

    [font=宋体][b]什么是重组蛋白?[/b][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体][url=https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review/protein-production][b]重组蛋白[/b][/url]的产生是应用了重组[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]或重组[/font][font=Calibri]RNA[/font][font=宋体]的技术从而获得的蛋白质。体外重组蛋白的生产主要包括四大系统:原核蛋白表达,哺乳动物细胞蛋白表达,酵母蛋白表达及昆虫细胞蛋白表达。生产的蛋白在活性和应用方法方面均有所不同。根据自身的下游运用选择合适的蛋白表达系统,提高表达成功率。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]融合蛋白和重组蛋白的区别[/b][/font][font=宋体][font=Calibri]1[/font][font=宋体]、重组蛋白[/font][/font][font=宋体]重组蛋白是指应用基因重组技术,获得连接有可以翻译成目的蛋白的基因片段的重组载体,之后将其转入可以表达目的蛋白的宿主细胞从而表达特定的重组蛋白分子。融合蛋白表达只是重组蛋白表达的一种策略,融合表达是一种方法。因为融合表达具有表达效率高、产物稳定而且水溶性好、易于鉴定和纯化等优点,现已被广泛采用。[/font][font=宋体][font=Calibri]2. [/font][font=宋体]融合蛋白[/font][/font][font=宋体][font=宋体]融合蛋白是指通过重组[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]技术将你要表达的目的蛋白基因同表达载体上融合蛋白基因相连,这样表达出的蛋白质就会是同时具有目的基因蛋白和融合基因蛋白两个部分的重组蛋白。[/font][/font][font=宋体][font=宋体]融合蛋白与重组蛋白不是一个层次上对立的概念,融合蛋白表达只是重组蛋白表达的一种策略,融合表达是一种方法。因为融合表达具有表达效率高、产物稳定而且水溶性好、易于鉴定和纯化等优点,现已被广泛采用。融合蛋白又称标签([/font][font=Calibri]Tag[/font][font=宋体]),常用的[/font][font=Calibri]His[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]GST[/font][font=宋体]等。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]总结:在生物制药领域,重组蛋白具有较高的活性和纯度,更易吸收,安全性也更高的特点。重组蛋白的利用率也更高。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]为了生产重组蛋白,基因被分离并克隆到表达载体中。重组蛋白的生产需要蛋白表达系统、蛋白纯化系统和蛋白识别系统。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]获取重组蛋白的基本步骤:[/b][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]1.[/font][font=宋体]目标基因的扩增。[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]2.[/font][font=宋体]插入克隆载体。[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]3.[/font][font=宋体]亚克隆到表达载体中。[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]4.[/font][font=宋体]转化到蛋白表达宿主中[/font][font=Calibri]([/font][font=宋体]细菌[/font][font=Calibri]([/font][font=宋体]大肠杆菌[/font][font=Calibri])[/font][font=宋体]、酵母细胞、哺乳动物细胞或杆状病毒[/font][font=Calibri]-[/font][font=宋体]昆虫细胞系统[/font][font=Calibri])[/font][font=宋体]。[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]5.[/font][font=宋体]重组蛋白鉴定试验[/font][font=Calibri](Western blot[/font][font=宋体]或荧光[/font][font=Calibri])[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]6.[/font][font=宋体]大规模生产。[/font][font=Calibri]([/font][font=宋体]大规模发酵[/font][font=Calibri])[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]7.[/font][font=宋体]分离和纯化。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]需要考虑多种因素:[/font][font=宋体][font=Calibri]1.[/font][font=宋体]选择哪个宿主系统?[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]2.[/font][font=宋体]如何分离和纯化重组蛋白?[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]选择适当的表达宿主或使用正确的纯化方法并不容易,应考虑目标重组蛋白的性质。下面列出了一些重要因素:[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]? 膜结合[/font][font=宋体]? 溶解度[/font][font=宋体]? 单或多结构域[/font][font=宋体][font=宋体]? 大小[/font][font=Calibri]([/font][font=宋体]分子量[/font][font=Calibri])[/font][/font][font=宋体]? 表达位置[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]对于大多数没有足够经验来表达和分离重组蛋白的人来说,重组蛋白的生产是非常耗时的。许多生物公司为各种不同规模的重组蛋白表达提供良好的服务,例如义翘神州[/font][font=Calibri]([/font][font=宋体]参考重组蛋白生产的详细服务清单)[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]义翘神州提供重组蛋白和[url=https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review/fusion-protein][b]融合蛋白[/b][/url]等相关信息,详情可以关注[/font][font=宋体][font=宋体]融合蛋白:[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review/fusion-protein[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]重组蛋白生产:[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review/protein-production[/font][/font]

  • 重组蛋白是什么?重组蛋白的生产、应用及选择

    [font=宋体][font=宋体]重组蛋白([/font][font=Calibri]recombinant protein[/font][font=宋体])是指应用重组 [/font][font=Calibri]DNA [/font][font=宋体]或重组 [/font][font=Calibri]RNA [/font][font=宋体]技术而获得的蛋白质。重组蛋白工程先应用基因克隆或化学合成技术获得目的基因([/font][font=Calibri]gene of interest[/font][font=宋体],[/font][font=Calibri]GOI[/font][font=宋体]),连接到适合的表达载体,导入到特定的宿主细胞,利用宿主细胞的遗传系统,表达出有功能的蛋白质分子。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]重组蛋白的产生是应用了重组[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]或重组[/font][font=Calibri]RNA[/font][font=宋体]的技术从而获得的蛋白质。体外重组蛋白的生产主要包括四大系统:原核蛋白表达,哺乳动物细胞蛋白表达,酵母蛋白表达及昆虫细胞蛋白表达。生产的蛋白在活性和应用方法方面均有所不同。根据自身的下游运用选择合适的蛋白表达系统,提高表达成功率。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]其获得途径可以分为体外方法和体内方法。两种方法的前提都是应用基因重组技术,获得连接有可以翻译成目的蛋白的基因片段的重组载体,之后将其转入可以表达目的蛋白的宿主细胞从而表达特定的重组蛋白分子。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体][b]当前重组蛋白的生产主要有四大系统[/b]:原核表达系统:最常用的大肠杆菌蛋白表达,真核表达系统如酵母,哺乳动物细胞蛋白表达(常用的细胞[/font][font=Calibri]CHO[/font][font=宋体],[/font][font=Calibri]HEK293[/font][font=宋体])及、昆虫细胞蛋白表达系统。重组蛋白的产生尚可利用转基因动物的乳腺或者植物产生,产生的重组蛋白作为生物制药的产物,在医学中作用显著。利用基因工程技术,可以使细胞或者动物本身变成“批量生产药物的工厂”。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]以利用转基因动物的乳腺表达重组蛋白为例:其方法是将药用蛋白基因与乳腺蛋白基因的启动子等调控组件重组在一起,通过显微注射等方法,导入哺乳动物(哺乳动物才会泌乳)的受精卵中,然后,将受精卵送入母体内,使其生长发育成转基因动物。转基因动物进入泌乳期后,可以通过分泌的乳汁来生产所需要的蛋白质药品,因而称为动物乳腺生物反应器或乳房生物反应器。科学家已在牛和山羊等动物的乳腺生物反应器中表达出了抗凝血酶、血清白蛋白、生长激素和[/font][font=宋体]α[/font][font=Calibri]-[/font][font=宋体]抗胰蛋白酶等重要的医药产品。[/font][/font][font=宋体]重组蛋白在制药工业上主要是指表达获得的细胞因子、凝血因子或者人工设计的蛋白分子。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]目前,重组蛋白试剂已被广泛应用于生物药、细胞免疫治疗及诊断试剂的研发和生产中。其中重组蛋白药物是生物药物的重要组成成分,常被被广泛应用于医疗领域[/font][font=Calibri],[/font][font=宋体]包括肿瘤治疗、免疫调节、神经保护、结缔组织疾病、肾病治疗等。包括细胞因子类、抗体治疗性疫苗、激素及酶等。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]义翘神州致力于提供[url=https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review/protein-production][b]重组蛋白生产[/b][/url]、[url=https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review/protein-expression][b]重组蛋白表达[/b][/url]及[url=https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review/protein-production-systems][b]重组蛋白系统[/b][/url]详情的咨询与解决方案。为实验中特定的应用选择正确的表达系统是成功的关键所在。在选择表达系统时,蛋白溶解度、功能、纯化速度和产量通常是必须考虑的重要因素。此外,每个表达系统都有其独特的优势和挑战,这一点在选择时也需着重考虑。我们的专业团队将为您提供个性化的建议,以帮助您根据实验需求选择最合适的表达系统。[/font][font=宋体][font=宋体]更多详情可以关注:[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review/protein-production[/font][/font][font=Calibri] [/font]

  • 奶粉蛋白质快速检测仪适用范围

    奶粉蛋白质快速检测仪的适用范围主要包括但不限于以下方面:  牛奶及其相关产品:包括纯奶、核桃奶、燕麦奶、红枣牛奶、牛初乳等各种类型的牛奶,以及奶粉(包括牛初乳粉)等。  豆制品:如豆浆粉、豆奶粉等,这些产品中的蛋白质含量也是检测的重要内容。  鸡蛋等其他食品:对于含有蛋白质的其他食品,如鸡蛋等,也可以使用该仪器进行检测。  此外,该仪器在测定过程中,能够真实反映样品中蛋白质的含量,并且不受非蛋白氮(如三聚氰胺、甘氨酸、尿素、化肥等)的干扰。同时,它适用于实验室的快速定量检测,每个样品的检测时间通常只需5~10分钟,大大提高了检测效率。  因此,奶粉蛋白质快速检测仪在食品生产和质量控制中发挥着重要作用,能够帮助生产厂家快速、准确地检测产品中的蛋白质含量,确保产品质量符合标准。[img=,690,690]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2024/05/202405151304429851_1379_4214615_3.jpg!w690x690.jpg[/img]

  • 水解蛋白类物质的检测

    用硝酸汞沉淀除去乳酪蛋白,但水解蛋白不会被除去,与饱和苦味酸产生沉淀反应。 试剂配制 除蛋白试剂:硝酸汞14g,加入100mL蒸馏水,加浓硝酸约2.5mL,加热助溶,待试剂全部溶解后加蒸馏水至500mL。溶液出现混浊等污染现象停止使用。 饱和苦味酸溶液:称取2 克固体苦味酸于烧杯中,用冷却的蒸馏水定容至100mL,后将定容好的溶液倒入烧杯中煮沸(沸腾即可),然后将液体冷却,待结晶析出后将上清液倒入试剂瓶中。 样品处理奶粉样品的处理: (1)将样品旋转振荡,使之充分混合; (2)准确称取6g 样品,加入50ml 中性温水(60℃左右),充分溶解样品。 原料奶样品:将样品充分混合即可。 操作方法 取5mL 待检处理过的样品,放入干净干燥的平皿或其他容器内,加除蛋白试剂5mL 混合均匀,边加边摇动,不可产生大体积蓄状物,将摇匀的液体用快速定量滤纸过滤于试管中,收集滤液约3mL左右。 然后沿试管壁慢慢加入饱和苦味酸溶液约0.5mL(每加0.5mL约需要30-40秒),切勿使滤液与苦味酸混合(加入的苦味酸溶液层不超出总液体体积的1/3)。 结果判断 方法判定一(沉淀圈判定):加入苦味酸后,在10 秒内逆光或在黑色背景下)上下左右移动不同方位观察产生沉淀圈情况,无沉淀圈判定为阴性,有明显沉淀圈判定为阳性。 按产生沉淀圈情况进行“阴性、阳性”判定:

  • 水解蛋白类物质的检测

    原理 用硝酸汞沉淀除去乳酪蛋白,但水解蛋白不会被除去,与饱和苦味酸产生沉淀反应。 试剂配制 除蛋白试剂:硝酸汞14g,加入100mL蒸馏水,加浓硝酸约2.5mL,加热助溶,待试剂全部溶解后加蒸馏水至500mL。溶液出现混浊等污染现象停止使用。 饱和苦味酸溶液:称取2 克固体苦味酸于烧杯中,用冷却的蒸馏水定容至100mL,后将定容好的溶液倒入烧杯中煮沸(沸腾即可),然后将液体冷却,待结晶析出后将上清液倒入试剂瓶中。 样品处理奶粉样品的处理: (1)将样品旋转振荡,使之充分混合; (2)准确称取6g 样品,加入50ml 中性温水(60℃左右),充分溶解样品。 原料奶样品:将样品充分混合即可。 操作方法 取5mL 待检处理过的样品,放入干净干燥的平皿或其他容器内,加除蛋白试剂5mL 混合均匀,边加边摇动,不可产生大体积蓄状物,将摇匀的液体用快速定量滤纸过滤于试管中,收集滤液约3mL左右。 然后沿试管壁慢慢加入饱和苦味酸溶液约0.5mL(每加0.5mL约需要30-40秒),切勿使滤液与苦味酸混合(加入的苦味酸溶液层不超出总液体体积的1/3)。 结果判断 方法判定一(沉淀圈判定):加入苦味酸后,在10 秒内逆光或在黑色背景下)上下左右移动不同方位观察产生沉淀圈情况,无沉淀圈判定为阴性,有明显沉淀圈判定为阳性。 按产生沉淀圈情况进行“阴性、阳性”判定:

  • 无细胞蛋白表达系统优缺点详解

    [font=宋体][font=宋体]无细胞蛋白表达系统([/font][font=Calibri]Cell-Free Protein Expression System[/font][font=宋体])是一种基于原核和真核细胞提取物构建的体外蛋白表达系统。它具有许多优点,例如可以在短时间内生产大量的蛋白质,同时避免了细胞内的复杂调控机制和翻译后修饰等繁琐过程。因此,无细胞蛋白表达系统在生物制药、生物材料、生物燃料等领域具有广泛的应用前景。本文将详细介绍无细胞蛋白表达系统的优缺点。[/font][/font][font=宋体][b]一、无细胞蛋白表达系统的优点[/b][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]1.[/font][font=宋体]高效性:无细胞蛋白表达系统具有高表达效率的优点,这是由于体外体系中不存在靶蛋白累积所需的细胞分裂和细胞复杂代谢反应。此外,由于无细胞蛋白表达系统不受到细胞毒性和免疫反应的限制,可以实现大规模的蛋白质表达。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]2.[/font][font=宋体]灵活性:无细胞蛋白表达系统可以使用一系列不同的原核和真核细胞提取物作为反应体系,例如[/font][font=Calibri]E.coli[/font][font=宋体]、小麦胚芽和人类细胞等。这意味着可以根据不同的实验目的和需求进行合理的选择,以适应多样化的研究需要。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]3.[/font][font=宋体]易操作性:无细胞蛋白表达系统非常容易操作。与传统的细胞表达系统相比,无细胞蛋白表达系统不需要细胞培养、生长和繁殖。此外,无细胞蛋白表达系统可以快速进行,通常只需要数小时至几天即可完成目标蛋白的表达。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]4.[/font][font=宋体]简单纯化:由于无细胞蛋白表达系统可以避免有机溶剂和离子交换剂等复杂的步骤,从而使目标蛋白的纯化工作更加简便和迅速。例如,可以使用亲和柱、凝胶过滤和电泳分析等方法来快速分离和纯化蛋白质。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]二、无细胞蛋白表达系统的缺点[/b][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]1.[/font][font=宋体]成本较高:尽管无细胞蛋白表达系统可以大规模进行蛋白质表达,但是所需的原核和真核细胞提取物通常需要较高的成本。此外,涉及到的一些试剂和设备也比较昂贵,使得无细胞蛋白表达系统在应用过程中存在一定的经济压力。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]2.[/font][font=宋体]表达限制:由于无细胞蛋白表达系统缺乏复杂的代谢反应和细胞分化机制,因此它不适用于某些特定类型的蛋白。例如,它无法表达复杂的膜蛋白和困难的药物蛋白等。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]3.[/font][font=宋体]不稳定性:无细胞蛋白表达系统通常具有一定的稳定性问题。由于缺乏细胞膜的保护,无细胞蛋白表达体系会更容易受到外部条件的影响,如温度、[/font][font=Calibri]pH[/font][font=宋体]、离子浓度等,从而导致蛋白质的不稳定性、聚集和降解等现象。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]4.[/font][font=宋体]不适合复杂蛋白结构:无细胞蛋白表达系统对于复杂蛋白结构的模拟效果不佳。例如,膜蛋白、多肽和糖蛋白等复杂蛋白质可能会被无细胞蛋白表达系统无法很好地复制,从而限制了其应用范围。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]无细胞蛋白表达系统具有高效、灵活、易操作、简单纯化等优点,但同时也存在着成本较高、表达限制、不稳定性和不适合复杂蛋白结构等缺点。在实际应用中,需要根据具体的研究目的和需求进行选择,并结合其他技术手段来弥补其不足之处。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]义翘神州提供[url=https://cn.sinobiological.com/services/cell-free-protein-synthesis-service][b]无细胞蛋白表达服务[/b][/url],服务优势:[/font][font=宋体]①快速、高效 ②高成功率 ③一致性 ④高难度抗体表达[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]详情可以咨询,具体[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/services/cell-free-protein-synthesis-service[/font][/font]

  • 【资料】《乳与乳制品中蛋白质的快速测定方法》进行审查

    12月17日,河北省质量技术监督局组织有关专家对衡水市承担的省地方标准《乳与乳制品中蛋白质(非氮元素)的快速测定方法》进行了审查。  与会专家对标准文本和编制说明进行了逐字逐句的审定。专家们一致认为:该标准的编写规则符合国家有关方针、政策、法律和法规,与国家有关标准协调一致;该标准创新设置了适合现场和实验室快速定量的甲醛值法和紫外分光光度法相结合测定蛋白质快速新方法,具有很高的实用性,简便、快速,在防止乳与乳制品掺假实际工作中有很大的作用。现场和实验室原料乳及液态奶(非氮元素)的快速定量,可有效防止原料乳及液态奶蛋白质掺假,对促进乳品行业健康发展具有很大的社会效益和经济效益。  同时,专家认为该标准应在适用范围上做进一步调整,建议调整为原料乳及液态奶;标准内容应增加甘氨酸、水解动植物蛋白液的掺假定性试验;提供其他实验室对检验方法的验证试验数据。[color=#DC143C][size=4]谁有具体方法?[/size][/color]

  • 跨膜蛋白与通道蛋白的区别:跨膜蛋白制备平台详解

    [font=宋体]跨膜蛋白是生物体内广泛存在的一类蛋白质,它们在细胞膜上以不同的方式与其相互作用,从而发挥各种生物学功能。根据不同的结构和功能,[/font][b][font=宋体]跨膜蛋白可以分为三种类型:通道型跨膜蛋白、受体型跨膜蛋白和泵型跨膜蛋白。[/font][/b][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]通道型跨膜蛋白是跨膜蛋白中最为简单的类型,它们主要的功能是在细胞膜上形成一些具有选择性通透性的孔道,使得离子和小分子物质能够通过。通道型跨膜蛋白具有多个跨膜域,通常由[/font] [font=宋体]α 螺旋和 β 折叠两种二级结构组成。α 螺旋通道如 [/font][font=Calibri]K+ [/font][font=宋体]通道能够容纳阳离子,β 折叠如离子泵[/font][font=Calibri]Na+/K+-ATPase [/font][font=宋体]能够承载各种离子。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]受体型跨膜蛋白是一类比较复杂的蛋白质,它们能够接受信号分子的结合,从而调节细胞内的生物学路径。受体型跨膜蛋白通常由单个跨膜域和两个不同构的端基组成,其中一个端基是细胞外的受体结构域,能够特异性地与信号分子结合;另外一个端基是细胞内的调节结构域,能够将受体活性传递到细胞内部。受体型跨膜蛋白具有多种作用方式,如酪氨酸激酶受体,转录因子受体等。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]泵型跨膜蛋白是一类能够通过能量输入来驱动物质运输的蛋白质。它们能够将离子或者小分子物质从低浓度区域转运到高浓度区域,从而维持细胞内的化学平衡和稳态。泵型跨膜蛋白一般由多个跨膜域组成,并能借助外源性能量如[/font][font=Calibri]ATP[/font][font=宋体]进行运输。常见的泵型跨膜蛋白有[/font][font=Calibri]Na+/K+-ATPase, H+/K+-ATPase[/font][font=宋体]等。[/font][/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体][font=宋体]义翘神州提供跨膜蛋白制备平台,包括:[/font][font=Calibri]VLP[/font][font=宋体]技术平台[/font][font=Calibri]/[/font][font=宋体]去垢剂技术平台[/font][font=Calibri]/Nanodisc[/font][font=宋体]技术平台。[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]VLP[/font][font=宋体]技术平台[/font][/font][/b][font=宋体][font=宋体]正确折叠的膜蛋白在细胞膜上表达,类病毒颗粒[/font][font=Calibri]VLP[/font][font=宋体]通过出芽的方式包裹上携带有靶标蛋白的细胞膜,形成包膜的[/font][font=Calibri]VLP[/font][font=宋体]。它是由病毒的衣壳蛋白通过自组装而形成的纳米级颗粒(直径约[/font][font=Calibri]100[/font][font=宋体]~[/font][font=Calibri]300[/font][font=宋体]纳米),不含病毒核酸,不能进行自主复制,生产操作过程中较为安全。产生的[/font][font=Calibri]VLP[/font][font=宋体]蛋白可直接像可溶蛋白一样进行包被进行[/font][font=Calibri]ELISA[/font][font=宋体]检测。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]义翘神州已成功开发[/font][font=Calibri]VLP[/font][font=宋体]技术平台,它可以将完整天然构象的膜蛋白展示在类病毒颗粒表面,这种方法不仅可以保留膜蛋白的完整结构,同时也能够真实地模拟其在细胞膜上的位置和构象。[/font][/font][font=宋体][font=宋体]利用[/font][font=Calibri]VLP[/font][font=宋体]平台制备跨膜蛋白具有以下优势:[/font][/font][font=宋体]? 全长跨膜蛋白,保持完整的天然构象[/font][font=宋体][font=宋体]? 适用于动物免疫、[/font][font=Calibri]ELISA[/font][font=宋体]检测、[/font][font=Calibri]CAR[/font][font=宋体]阳性率检测、抗体筛选等。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]义翘神州搭建了基于[/font][font=Calibri]HEK293[/font][font=宋体]表达系统的[/font][font=Calibri]VLP[/font][font=宋体]([/font][font=Calibri]virus-like particle[/font][font=宋体])技术平台,能够将目的膜蛋白完整展示在[/font][font=Calibri]VLP[/font][font=宋体]表面,使其能够像普通蛋白一样进行检测,义翘神州目前可以为客户提供膜蛋白定制服务,助力药物研发进程。[/font][/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体]去垢剂技术平台[/font][/b][font=宋体][font=宋体]由于存在疏水结构域,跨膜蛋白与膜的结合非常紧密,需要用去垢剂([/font][font=Calibri]detergent[/font][font=宋体])才能从膜上洗涤下来,[/font][font=Calibri]Detergent[/font][font=宋体]作为一种两亲性分子,疏水尾部包裹目的蛋白的疏水区域,亲水头部位于与溶液接触的界面。微团的形成是膜蛋白增溶的基础,当去垢剂浓度高于[/font][font=Calibri]CMC[/font][font=宋体]([/font][font=Calibri]Critical micelle concentration[/font][font=宋体],临界胶束浓度)时会形成微团,增溶后,去垢剂将蛋白周围的磷脂置换,从而实现收集目标膜蛋白的目的,后续再进行蛋白纯化,最终蛋白呈现在含有[/font][font=Calibri]Detergent[/font][font=宋体]的溶液中。义翘神州成功搭建了去垢剂技术平台,利用该平台可有效提高跨膜蛋白的产量和纯度。[/font][/font][font=宋体]去垢剂技术平台的优势:[/font][font=宋体]? 可精确定量[/font][font=宋体]? 胶束为膜蛋白疏水基团提供保护并稳定构象[/font][font=宋体][font=宋体]? 适用于动物免疫、[/font][font=Calibri]ELISA[/font][font=宋体]检测、[/font][font=Calibri]SPR/BLI[/font][font=宋体]检测等[/font][/font][b][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]Nanodisc[/font][font=宋体]技术平台[/font][/font][/b][font=宋体][font=Calibri]Nanodisc[/font][font=宋体]结构稳定,与天然的生物膜非常相似,使得[/font][font=Calibri]Nanodisc[/font][font=宋体]能够很好地应用于膜蛋白的研究。目前[/font][font=Calibri]Nanodisc[/font][font=宋体]平台有[/font][font=Calibri]2[/font][font=宋体]种方式,一种是基于苯乙烯马来酸酐共聚物([/font][font=Calibri]SMA[/font][font=宋体])组装的[/font][font=Calibri]SMA-Nanodisc[/font][font=宋体]平台,如下图(左)所示,它可以直接从细胞膜上提取膜蛋白,使其变为可溶性蛋白,组装完成的蛋白样品很稳定,更能维持蛋白的天然构象。另一种是基于膜骨架蛋白([/font][font=Calibri]MSP[/font][font=宋体])的[/font][font=Calibri]MSP-Nanodisc[/font][font=宋体]平台(下图右),它需要先将膜蛋白利用去垢剂制备出来,然后再加入磷脂分子和[/font][font=Calibri]MSP[/font][font=宋体]进行组装。通过调整磷脂、[/font][font=Calibri]MSP[/font][font=宋体]和待组装膜蛋白三者的比例,可以使得待组装膜蛋白在[/font][font=Calibri]Nanodisc[/font][font=宋体]中呈不同聚集状态。义翘神州已成功搭建了[/font][font=Calibri]Nanodisc[/font][font=宋体]技术平台,利用跨膜蛋白与磷脂结合能够维持其良好活性的特性,制备出稳定的产品,满足动物免疫、抗体筛选、[/font][font=Calibri]cell-based assays[/font][font=宋体]等场景。[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]SMA-Nanodisc[/font][font=宋体]技术平台的优势:[/font][/font][font=宋体]? 可精确定量[/font][font=宋体][font=宋体]? [/font][font=Calibri]SMA[/font][font=宋体]共聚物包裹的膜蛋白稳定性更好,有助于更好地研究膜蛋白的结构和功能[/font][/font][font=宋体][font=宋体]? 适用于动物免疫、[/font][font=Calibri]ELISA[/font][font=宋体]检测、[/font][font=Calibri]SPR/BLI[/font][font=宋体]检测、[/font][font=Calibri]CAR[/font][font=宋体]阳性率检测及细胞实验等[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]更多[url=https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review/transmembrane-proteins][b]跨膜蛋白[/b][/url]详情可以关注:[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review/transmembrane-proteins[/font][/font][font=Calibri] [/font]

  • 膜联蛋白(Annexin)是什么?膜联蛋白v染色原理及应用

    [font=宋体][font=宋体]膜联蛋白([/font][font=Calibri]Annexin[/font][font=宋体])是一类分布广泛的钙依赖性磷脂结合蛋白,与磷脂酰丝氨酸([/font][font=Calibri]PS[/font][font=宋体])能特异性结合,参与一系列[/font][font=Calibri]Ca2+[/font][font=宋体]依赖型的膜相关的过程,包括细胞的胞吐和内吞作用、囊泡运输、调节血液凝固以及炎症反应等多种生物学事件,在许多人类疾病的发病机制或进展中起着非常重要的作用。膜联蛋白[/font][font=Calibri]V[/font][font=宋体]([/font][font=Calibri]Annexin V[/font][font=宋体])染色是检测细胞凋亡的常用方法。[/font][/font][b][font=宋体][font=宋体]膜联蛋白[/font][font=Calibri]V[/font][font=宋体]染色原理及应用[/font][/font][/b][font=宋体] [/font][b][font=宋体][font=宋体]一、膜联蛋白[/font][font=Calibri]V[/font][font=宋体]染色原理[/font][/font][/b][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]膜联蛋白[/font][font=Calibri]V[/font][font=宋体]染色,也称为[/font][font=Calibri]Annexin V[/font][font=宋体]染色,是一种用于检测细胞凋亡的方法。其核心原理基于细胞凋亡过程中的一种生物化学变化。在正常细胞中,磷脂酰丝氨酸([/font][font=Calibri]PS[/font][font=宋体])只分布在细胞膜脂质双层的内侧。然而,当细胞开始凋亡时,这一分布会发生改变,磷脂酰丝氨酸会从细胞膜内侧翻到外侧。膜联蛋白[/font][font=Calibri]V[/font][font=宋体]是一种能够与这种外翻的磷脂酰丝氨酸特异性结合的蛋白。通过结合荧光物质,这种结合可以被检测和观察,从而确定哪些细胞正在经历凋亡。[/font][/font][b][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]二、膜联蛋白[/font][font=Calibri]V[/font][font=宋体]染色的应用[/font][/font][/b][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]①流式细胞术:膜联蛋白[/font][font=Calibri]V[/font][font=宋体]染色常用于流式细胞术中,以检测和分类正常细胞和凋亡细胞。通过流式细胞仪,可以快速分析大量细胞,并准确地识别出凋亡细胞。[/font][/font][font=宋体][font=宋体]②光学显微镜成像:膜联蛋白[/font][font=Calibri]V[/font][font=宋体]染色也可用于光学显微镜成像技术,这使得研究者能够在显微镜下直接观察细胞的形态变化,从而对凋亡过程有更深入的理解。[/font][/font][font=宋体][font=宋体]③与其他染色方法的结合:膜联蛋白[/font][font=Calibri]V[/font][font=宋体]染色可以与其他染色方法如碘化丙啶[/font][font=Calibri](PI)[/font][font=宋体]染色结合使用。[/font][font=Calibri]PI[/font][font=宋体]是一种能够进入凋亡晚期细胞核的染料,因此可以用于区分凋亡早期和晚期细胞。这种联合使用的方法能提供更全面的细胞凋亡信息。[/font][/font][font=宋体][font=宋体]④临床应用:膜联蛋白[/font][font=Calibri]V[/font][font=宋体]染色在许多临床领域中都有应用,例如肿瘤学、血液学和药理学等。它可以帮助研究者深入理解疾病的发展过程,评估新药物对细胞凋亡的影响,以及监测疾病的进展和治疗的效果。[/font][/font][font=宋体][font=宋体]总的来说,膜联蛋白[/font][font=Calibri]V[/font][font=宋体]染色是一种强大的工具,可以帮助科学家们更好地理解细胞凋亡的过程,从而为疾病的治疗和药物研发提供有价值的信息。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]更多关于膜联蛋白详情可以关注[url=https://cn.sinobiological.com/][b]义翘神州[/b][/url]![/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体][font=宋体]义翘神州:蛋白与抗体的专业引领者,欢迎通过百度搜索[/font][font=宋体]“义翘神州”与我们取得联系。[/font][/font][/b]

  • 如何明辨重组蛋白、融合蛋白与天然蛋白:重组蛋白常见问题详解

    [font=宋体][b]重组蛋白、融合蛋白与天然蛋白的区别:[/b][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]重组蛋白是利用基因工程技术产生的,通常是由转基因动物的乳腺产生,其作为生物制药在医学领域中作用显著。利用基因工程技术,可以使哺乳动物本身变成[/font][font=宋体]“批量生产药物的工厂”。方法:是将药用蛋白基因与乳腺蛋白基因的启动子等调控组件重组在一起,通过显微注射等方法,导入哺乳动物(哺乳动物才会泌乳)的受精卵中,然后,将受精卵送入母体内,使其生长发育成转基因动物。转基因动物进入泌乳期后,可以通过分泌的乳汁来生产所需要的蛋白质药品,因而称为动物乳腺生物反应器或乳房生物反应器。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]融合蛋白又称为[/font][font=宋体]“标签蛋白”,常用的标签有[/font][font=Calibri]His[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]GST[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]Strep[/font][font=宋体]标签。融合蛋白是通过[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]重组技术将要表达的目的蛋白基因和表达载体上融合蛋白基因相连,通过这种方式表达出来的蛋白质,就是既含有目的基因蛋白又含有融合基因蛋白的重组蛋白。融合蛋白表达是重组蛋白表达的一种策略,融合表达是一种方法。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]天然蛋白质是在自然界中存在的,不经过人工的任何修饰或加工,比如大豆中的蛋白质和病毒表面的蛋白质。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]重组蛋白常见问题解析:[/b][/font][font=宋体][font=Calibri]1.[/font][font=宋体]蛋白为什么要冻干?冻干对蛋白的影响有哪些?[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]蛋白质对热敏感,冻干能使绝大部分蛋白质的活性保留下来,提高蛋白的稳定性并延长保存时间,同时降低运费。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]2.[/font][font=宋体]冻干前为什么向蛋白溶液中加保护剂?一般冻干保护剂有哪几种?[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]保护剂是用来在冻干和储存过程中保护蛋白的。常用的保护剂或稳定剂有糖类,多元醇,聚合物,表面活性剂,某些蛋白和氨基酸等。我们通常加[/font][font=Calibri]8%[/font][font=宋体](质量比体积)的海藻糖和甘露醇作为冻干保护剂。海藻糖可明显阻止蛋白质二级结构改变以及冻干过程中蛋白质的伸展和聚集;甘露醇也是一种普遍应用的冻干保护剂和填充剂,可以降低某些蛋白的冻干后聚集情况。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]温馨提示:对于大多数蛋白,重悬后在[/font][font=Calibri]4[/font][font=宋体]℃仅能短期保存[/font][font=Calibri]([/font][font=宋体]约[/font][font=Calibri]1[/font][font=宋体]周[/font][font=Calibri])[/font][font=宋体]。如想长期保存,请先配制成稀释液[/font][font=Calibri]([/font][font=宋体]其中必须含有载体蛋白,如[/font][font=Calibri]0.1% BSA[/font][font=宋体],[/font][font=Calibri]5%HSA[/font][font=宋体],或[/font][font=Calibri]10% FBS)[/font][font=宋体],然后分装冻存于[/font][font=Calibri]-20[/font][font=宋体]℃或[/font][font=Calibri]-80[/font][font=宋体]℃。一定要避免反复冻融,因每次冻融均会引起蛋白的部分失活。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]3.[/font][font=宋体]如何重构冻干粉?[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]请查看您的货物随附的分析证书以获取有关重构的确切说明,因为并非所有产品都在相同条件下重构。一般来说,我们建议使用无菌水进行复溶。将推荐体积的无菌水加入小瓶中,轻轻摇晃以完全溶解蛋白质。不要涡旋。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]4.[/font][font=宋体]为什么我的管内几乎看不见蛋白产品?[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]蛋白产品中不含载体蛋白或其它添加物[/font][font=Calibri]([/font][font=宋体]如牛血清白蛋白[/font][font=Calibri](BSA)[/font][font=宋体],人血清白蛋白[/font][font=Calibri](HSA)[/font][font=宋体]和蔗糖等,并以最低含盐量的溶液进行冻干时,常常不能形成白色网架结构,而是微量的蛋白在冻干过程中沉积在管内,形成很薄或肉眼不可见的透明蛋白层。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]5.[/font][font=宋体]应如何确定细胞因子的种属交叉活性?[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]1) [/font][font=宋体]除少数例外,大多数人类细胞因子对小鼠细胞均有活性。[/font][font=Calibri]2) [/font][font=宋体]许多小鼠细胞因子也可作用于人类细胞,但比活性可能低于对应的人类细胞因子。 [/font][font=Calibri]3) IL-7[/font][font=宋体]等为数不多的人类细胞因子作用于小鼠细胞时比对应的小鼠细胞因子活性更强。[/font][font=Calibri]4) [/font][font=宋体]干扰素,[/font][font=Calibri]GM-CSF, IL-3[/font][font=宋体]和[/font][font=Calibri]IL-4[/font][font=宋体]等细胞因子种属特异,对非同源细胞几乎没有活性。[/font][font=Calibri]5) [/font][font=宋体]相反,成纤维细胞生长因子[/font][font=Calibri](FGFs)[/font][font=宋体]和神经营养素[/font][font=Calibri](neurotrophins)[/font][font=宋体]高度保守,在不同动物种属细胞上均具有很好的活性。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]6.[/font][font=宋体]什么是载体蛋白?[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]载体蛋白如[/font] [font=Calibri]HSA [/font][font=宋体]或 [/font][font=Calibri]BSA [/font][font=宋体]用于提高重组蛋白的稳定性,并有助于避免产品粘在小瓶壁上。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]7.[/font][font=宋体]我应该如何储存重组蛋白?[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]对于长期储存,蛋白质溶液应与载体蛋白(例如[/font] [font=Calibri]0.1% BSA [/font][font=宋体]或 [/font][font=Calibri]0.1% HSA[/font][font=宋体])分装保存,并在 [/font][font=Calibri]-20[/font][font=宋体]°[/font][font=Calibri]C [/font][font=宋体]下冷冻保存。请记住,每个冷冻[/font][font=Calibri]/[/font][font=宋体]解冻循环都可能导致蛋白质变性。除非分析证书上另有说明,否则大多数重组蛋白的保质期为一年。如果将它们保存在分析证书上所述的最佳存储条件下,则提供此保证。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]8.[/font][font=宋体]如何确定重组蛋白的数量?为什么我的检测产生的蛋白质数量与您的结果不同?[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]我们通过[/font][font=Calibri]BCA[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]SDS-PAGE[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]HPLC[/font][font=宋体]等方法确定重组蛋白的数量。不同的测定产生不同的量化结果。有时,如果您进行不同的检测,差异可能会很大。蛋白质也有可能在储存过程中形成聚集体,在重组和离心后导致损失。我们对每批产品进行质量控制测试,但是,同一批次中的一些小瓶可能与其他小瓶不同(这种情况很少发生)。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]更多关于[url=https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review][b]重组蛋白资源[/b][/url]详情可以查看:[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review[/font][/font]

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