淀粉酶活性的测定实验方案
α -淀粉酶及β -淀粉酶,各有其一定的特性,如β -淀粉酶不耐热,在高温下易钝化而α -淀粉酶不耐酸,在pH3.6以下则发生钝化,通常提取液同时有两种淀粉酶存在,测定时,可根据它们的特性分别加以处理,钝化其中之一,即可测出另一酶的活性。将提取液加热到70℃维持15分钟以钝化β -淀粉酶,便可测定α -淀粉酶的活性。或者将提取液用pH3.6之醋酸在0℃加以处理,钝化α -淀粉酶的活性,以测出β -淀粉酶的活性。淀粉酶水解淀粉生成的麦芽糖,可用3,5-二硝基水杨酸试剂测定。由于麦芽糖能将后者还原生成3-氨基-5-硝基水杨酸的显色基团,在一定范围内其颜色的深浅与糖的深度成正比,故可求出麦芽糖的含量,以麦芽糖的毫克数表示淀粉酶活性的大小。