分子量分布分析

目前我们实验室申请CNAS认证，涉及到GPC测量分子量及其分布不确定度分析，感觉重均分子量和分子量分布的公式建模比较复杂，推导不确定度不知从何下手。论坛里有做过相关工作的朋友吗

想买一台凝胶渗透色谱的，分析分子量分布的，我不太明白，都该买些什么?一台仪器要分成好几部分吗?想买WATERS的，具体的都买什么型号的好呢？请高手指教，谢谢。

请教硅油的液相色谱分析方法，或其分子量分布的测定方法

GPC送样分析，拿到了数据，横坐标是时间，纵坐标是Mv。请问如何处理数据才能得到分子量大小的分布呢？谢谢！

透明质酸钠是一种天然直链多糖，是由葡萄糖醛酸和乙酰氨基葡萄糖结合而成的双糖结构单元所组成，广泛分布于动物和人体皮肤、皮下组织、眼组织及关节滑膜组织、滑液等结缔组织，无种属差异。根据透明质酸钠结构单元的特性，对其进行深加工后制成的医用透明质酸钠凝胶是一种无种属特异性、无毒、溶解性能好、生物相容性良好的新型生物材料，被广泛用于多种眼科手术、防治外伤性或退变性骨关节炎、普通外科、妇产科等腹、盆腔手术、预防术后肠粘连和盆腔粘连及肌健、关节和神经手术预防组织粘连。透明质酸钠作为一种植人体内的医用生物材料，需要有与人体正常注射部位透明质酸钠更接近的分子量，以确保产品使用的安全性和有效性。光散射法是测定高聚物绝对分子量的方法，高分子溶液可视为不均匀介质，当光通过它时，入射光就会发生散射，且其散射光强度远高于纯溶剂，并且与高聚物的分子链形态、溶液浓度、散射光角度和折光指数增量（dn/dc）密切相关。因此由光散射法测得不同浓度的高聚物溶液在不同散射角下的散射光强数据后，即可求得其重均分子量。采用激光散射-凝胶渗透色谱联用法（LLS-GPC）得到分子量分布系数。色谱柱可采用SD805/806、TSK5000pw TSK6000，流动相推荐0.1 mol/L硝酸钠-0.02%叠氮化钠溶液。样品用上述流动相溶解并稀释至适宜浓度，用0.22pm滤膜过滤。折光指数增量（dn/dc）的测定：采用流动相稀释透明质酸钠凝胶至不同浓度梯度，在室温下，用激光检测同一波长测定。将色谱柱与激光散射仪，示差检测器连接，流动相冲洗至基线平稳后，取适量样品溶液进样，在规定流速、色谱柱温度条件下检测样品的分子量及分子量分布。检测完毕后，通过仪器配套的色谱分析软件确定样品的峰面积，输入dn/dc 值，根据软件要求设置其他相关参数，计算分子量及分子量分布系数并输出报告。

我公司现在使用GPC分析醋酸纤维素的分子量和分子量分布，但是由于杂质影响大，无法准确反应所需要的信息。所以象各位请教，还有什么仪器或设备可以测量醋酸纤维素的分子量、分子量分布，不胜感激！

本人学高分子材料的，对色谱分析一窍不通，公司有一台waters1515 、检测器为2414的GPC，之前用来测过TPU，后来闲置了两年之久，现在领导交给我负责（之前那个走了），现在把它利用起来。　　公司是主要做聚乙烯、聚丙烯热熔胶的材料，请问高手们，我们公司的这一台GPC能否测聚乙烯、聚丙烯的分子量及分子量分布？上网查了一下，好像高温GPC才能测试呀？　　GPC长久不用（如一两年也用不上），应该如何保养？　　另外，哪位高人有关于GPC的学习资料，给我发一份？不胜感激~~

我是水系的GFC，主要做环境水样的分子量分布。流动相是水，样品也是水。用的是示差检测器。我想问的是：常常会有比较脏的样品（比如说过完滤膜的城市污水），因为怕污染柱子，常稀释样品10倍，100倍的，发现稀释前后得到的分子量分布是很不相同的。我很疑惑，是这样的吗？如果稀释完进样不能反应原样品的分子量分布，难道我能把那么脏的水直接进柱子？

我是水系的GFC，主要做环境水样的分子量分布。流动相是水，样品也是水。用的是示差检测器。我想问的是：常常会有比较脏的样品（比如说过完滤膜的城市污水），因为怕污染柱子，常稀释样品10倍，100倍的，发现稀释前后得到的分子量分布是很不相同的。我很疑惑，是这样的吗？如果稀释完进样不能反应原样品的分子量分布，难道我能把那么脏的水直接进柱子？

最近有个实验，是测TPU中的分子量和分布。用DMF溶解后，用甲醇析出，但加了很多甲醇，呈乳白色，未见沉淀。请GGJJ帮忙。

各位老大，我要用凝胶色谱做聚氯乙烯的分子量分布，但不知道方法，请问有好的方法告诉我吗？

分享一个标准医用透明质酸钠凝胶，18角度激光光散射系统可以做重均分子量及分子量分布系数测定。

[font=&]分享一个标准医用透明质酸钠凝胶，18角度激光光散射系统可以做重均分子量及分子量分布系数测定。[/font]

我是做羟乙基淀粉的分子量与分子量分布的时候，已查到可以使用凝胶柱，用分子排阻法来检测。根据国家药典的要求，需要对该方法进行方法学研究，请教诸位大神，谁有过这方面的经验的？？

用的安捷伦的GPC，测出的分子量分布偏窄，实际的分子量分布在4，而测出的结果只有2，请教是什么原因

GPC测定聚合物分子量及分子量分布一、基本原理：CPC是一种特殊的液相色谱，所用仪器实际上就是一台高效液相色谱（HPLC）仪，主要配置有输液泵、进样器、色谱柱、浓度检测器和计算机数据处理系统。与HPLC最明显的差别在于二者所用色谱柱的种类（性质）不同：HPLC根据被分离物质中各种分子与色谱柱中的填料之间的亲和力不同而得到分离，GPC的分离则是体积排除机理起主要作用。GPC色谱柱装填的是多孔性凝胶（如最常用的高度交联聚苯乙烯凝胶）或多孔微球（如多孔硅胶和多孔玻璃球），它们的孔径大小有一定的分布，并与待分离的聚合物分子尺寸可相比拟。GPC仪工作流程图如下所示。http://www.591ceshi.cn/UploadImage/edit/images/gpc1.gif当被分析的样品通过输液泵随着流动相以恒定的流量进入色谱柱后，体积比凝胶孔穴尺寸大的高分子不能渗透到凝胶孔穴中而受到排斥，只能从凝胶粒间流过，最先流出色谱柱，即其淋出体积（或时间）最小；中等体积的高分子可以渗透到凝胶的一些大孔中而不能进入小孔，比体积大的高分子流出色谱柱的时间稍后、淋出体积稍大；体积比凝胶孔穴尺寸小得多的高分子能全部渗透到凝胶孔穴中，最后流出色谱柱、淋出体积最大。因此，聚合物的淋出体积与高分子的体积即分子量的大小有关，分子量越大，淋出体积越小。分离后的高分子按分子量从大到小被连续的淋洗出色谱柱并进入浓度检测器。浓度检测器不断检测淋洗液中高分子级分的浓度。常用的浓度检测器为示差折光仪，其浓度响应是淋洗液的折光指数与纯溶剂（淋洗溶剂）的折光指数之差，由于在稀溶液范围内，与溶液浓度成正比，所以直接反映了淋洗液的浓度即各级分的含量，下图是典型的GPC谱图。http://www.591ceshi.cn/UploadImage/edit/images/gpc2.gif图中纵坐标相当于淋洗液的浓度，横坐标淋出体积Ve表征着高分子尺寸的大小。如果把图中的横坐标Ve转换成分子量M就成了分子量分布曲线。为了将Ve转换成M，要借助GPC校正曲线。实验证明在多孔填料的渗透极限范围内Ve和M有如下关系：lgM=A－BVe式中A、B为与聚合物、溶剂、温度、填料及仪器有关的常数。用一组已知分子量的单分散性聚合物标准试样，在与未知试样相同的测试条件下得到一系列GPC谱图，以它们的峰值位置的Ve对lgM作图，可得如图3-6的直线，即GPC校正曲线：http://www.591ceshi.cn/UploadImage/edit/images/gpc3.gif有了校正曲线，即可根据Ve读得相应的分子量。一种聚合物的GPC校正曲线不能用于另一种聚合物，因而用GPC测定某种聚合物的分子量时，需先用该种聚合物的标样测定校正曲线。但是除了聚苯乙烯、聚甲基丙烯酸甲酯等少数聚合物的标样以外，大多数的聚合物的标样不易获得，多数时候只能借用聚苯乙烯的校正曲线，因此测得的分子量M值有误差，只具有相对意义。用GPC方法不但可以得到分子量分布，还可以根据GPC谱图求算平均分子量和多分散系数，特别是当今的GPC仪都配有数据处理系统，可与GPC谱图同时给出各种平均分子量和多分散系数，无须人工处理。二、主要药品与仪器：THF（流动相）1000ml聚合物样品（如PS）10mg样品瓶注射器（1ml）流动相脱气系统样品过滤头http://www.591ceshi.cn/UploadImage/edit/images/njstspy.gif三、实验步骤：（1）THF（流动相）的脱气THF过滤、真空脱气后，加入到流动相瓶中。（2）样品配制将10mg聚合物样品溶于1mlTHF中，过滤后置于样品瓶中。（3）用进样器取20m，从GPC仪的进样口注入。（4）在电脑数据系统的窗口上观察GPC曲线，处理数据。

[color=#444444]本人需要用高效液相色谱对酶解产物的分子量分布进行测定，第一次做完全不会啊，查阅了文献，流动相定为乙腈/水/三氟乙酸=45：55：0.1（v:v）,请问流动相是直接按比例混合在一起然后再进行抽滤就可以了吗？[/color][color=#444444]我们的样品已经冷冻干燥成粉末，直接配成1mg/ml溶液，离心后0.45um微孔过滤膜过滤后就能直接进样分析吗？求指教[/color]

目前在塑料领域大多用的是PS标准品和PET标准品，这两种标准品只需根据和被测物的相似结构进行选择吗？各有什么优缺点？还有更好的标准品吗？很多人说用GPC测分子量及分布误差很大，请教用什么设备最合适呢？u

分子量的分布状况怎么测试？用什么方法？什么仪器[color=Tomato]---------------------------------------------------------------------------------------------------------------高聚物的？[/color]

聚甲醛分子量及分子量分布用GPC该如何测？现在还不知道分子量范围和常温下的溶剂，所以毫无头绪！如果有人测过或知道请告知！万分感谢！

我们现在做丙烯酸树脂胶粘剂的合成，看见文献中有讲到可以通过GPC来做分子量分布，同时来测试样品中的单体来监控有多少单体未参与反应，请问有那位大神做过类似的方法可以借鉴，谢谢！

怎么用GPC软件计算分子量分布

玻璃酸钠分子量分布测定方法及谱图？

测试的样品为生物反应器的上清液，成分很多，主要为蛋白质，多糖以及腐植酸，主要想看上清液的分子量分布在文献中查到UV detector of the GPC mainly targeted to protein detection in SMP and refractive index detector of the GPC mainly targeted to polysaccharide detection in SMP。其中SMP的定义就为上清液因此试验采用若用示差检测器的话，测得是糖的分布；用紫外检测器，测得是蛋白质分布/////////////////////////////在昨天的发帖中“采用液相色谱测定分子量分布时，遇到的问题”有个回帖提到采用液相色谱做分子量分布，应该用示差检测器........，还有个回帖提到蛋白质UV有吸收，糖UV没有吸收？/////////////////////////////实在不明白了，关系到论文的内容，请大家帮忙，到底该怎么测分子量分布，试验室就紫外和示差两种检测器

测试水质样品中物质的分子量分布该使用什么方法？GPC可以吗？

2006年、2007年前后，postnova公司与美国陶氏化学聚烯烃研发中心合作开发出来高温非对称流动场场流分离仪HTAF4，很快，postnova公司在此基础上持续研展了高温的分离通道膜和过滤膜，并且与英国PL公司合作，从而实现了高温场流仪的商业化生产。该产品主要针对聚烯烃样品的分子量分布测试，可补充高温凝胶渗透色谱仪HT GPC 的不足，在超高分子量聚烯烃领域甚至可以完全替代HT GPC 。在稀溶液（分散态）——牛顿流体——条件下，聚烯烃样品的分子尺寸/流体力学体积非常大，至少是同等分子量的聚苯乙烯的两倍以上，甚至更大些。而同时，其特性粘度也非常大，稀溶液状态下的分子密度非常小。所以，聚烯烃样品分子很容易在GPC柱子里面发生堵塞（体积大、超过了GPC柱子的分离上限）、剪切甚至降解（分子密度小、分子密实性差），再加上含有的超大分子量组分尺寸太大，GPC柱子无法分离而引起的共馏出等等，都使得聚烯烃样品不适合高温凝胶渗透色谱柱的分离分析。而HT AF4采用的没有固定相填料的分离通道则很适合聚烯烃这类大尺寸、低密度样品。此外，聚烯烃类样品往往含有凝胶物质，这部分组分与橡胶中的凝胶物质一样，也是部分交联、但是尚且能够溶解的超大分子量组分。这部分组分在GPC柱子里往往会与凝胶填料发生吸附作用，使得GPC的分子量分布数据中看不到他们。而这部分组分其实分子量非常大，对材料加工性能影响也非常大，即使其含量往往非常微小。附件中的论文，就介绍了一个标样，其含有的0.45%的超千万Dalton的超大分子量组分，就完全改变了这个样品的材料加工性，而HT GPC的分离分辨率不如高温场流仪，因此根本无法测出来这部分组分，当然也就无法计算出正确的分子量数据和分布数据了。所以，在聚烯烃的HT GPC分析中，出现分子量数据与流变仪等材料试验仪器拟合的分子量数据偏差很大、小很多的情况，是经常发生的。但是当采用HT AF4之后，这种情况就好多了，用户可以完整的、真实地看到聚烯烃的分子量分布，包括了凝胶物质。如果结合多检测器技术，那么分析测试的信息量将是非常大的。可用于HT AF4的多检测器，包括：示差、四毛细管粘度、多角激光散射、红外和红外光谱，可组成五检测器串联/并联方式的HT AF4+HT GPC并联仪，通过内置的电磁阀实现分析系统在高温场流分离通道与高温GPC柱子之间的自动切换，无需降温至室温！ 附件的论文中，我用黄色标注了这些内容，大家可以特别注意一下。近年来，postnova公司持续不断研发新型高温过滤膜，使HT AF4对聚乙烯样品的分离下限已经降至了大约1000Dalton，这已经非常接近HT GPC的分离下限了，基本上可以做到保证样品分子全部被分离并被检测了。另外，补充一下，有人看到高温场流仪包含一个PL220高温GPC的主机箱子，就误认为PL220是主机，这其实是个误会。所有的流动场场流仪——包含室温型、中温型和高温型，都是以交叉流泵为主机的，全部数据都是从交叉流泵传输到控制电脑上的。在HT AF4中，PL220的机箱实际上只是自动进样器和柱温箱的作用。

实验室刚买了一台岛津的GPC，矫正方法使用的是窄分布矫正法，标样用的是聚苯乙烯。由于所测样品不是聚苯乙烯，所以按照操作流程应该改一下QF(单位链长分子量)因子比。第一次由于不熟悉，QF计算错误导致测的分子量很大，第二次改正后测得分子量又很小。问了其他课题组同学，他说不需要改这个，就按照聚苯乙烯的标准。希望有大佬能解决我这个疑惑。

[img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=157565]高聚物分子量及其分布的测定 虞志光[/url]题名/责任者: 高聚物分子量及其分布的测定/虞志光编 ISBN号: 7-5323-012 出版发行项: 上海-上海科学技术出版社 1984.7 载体信息: 447页 19cm ￥2.20 个人名称—等同责任者: 虞志光 中图图书分类法类号: O631.6 附注项: 本书主要介绍高聚物的分子量及分子量分布的测定. [img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=157565]高聚物分子量及其分布的测定_虞志光_[/url]

本人最近准备做“一种多聚核苷酸的分子量和分子量分布的检测方法”的建立研究工作，由于本人在此方面没有经验，希望大家帮帮小弟。分子量主要分布在20000-240000（30-400bp）（1）凝胶色谱柱的如何选择？（2）标准物质（DNA marker）的选择（3）紫外检测器和示差检测器是否均可使用？（4）流动相如何选择？（5）凝胶色谱仪型号的选购？

目前国内对于食源性低聚肽的分子量分布基本都是参考GBT22729-2008海洋鱼低聚肽粉的检测方法。对于食源性低聚肽的分子量分布检测方法，国外都用什么检测标准？有没有国际通用的标准可以用？