蛋白质与色谱固定相之间的吸附为多位点吸附,什么叫多位点吸附?
现有一个测定吸附率的方法如下,各位高手看看此方法是否可行啊?或者哪里需要改进啊?1. 配置样品标准溶液(A)以及空白溶液(B)2. 把样品标注液(A)进样到色谱系统,待得出结果3. 第二次将样品标准液(A)进样到色谱系统,待得出结果4. 用空白液(B)将定量环清洗干净5. 将空白液(B)进样到色谱系统,待得出结果如果色谱柱对样品有吸附,那么在第5步将空白液(B)进样到色谱系统时,会将吸附的样品洗脱出来,对照第2步和第3步的结果,可以推算出吸附率。
1. 吸附剂的选择及处理 吸附剂分为无机吸附剂如硅胶、氧化铝、活性炭、氧化镁、碳酸钙、磷酸钙,有机吸附剂如纤维素、淀粉、蔗糖、聚酰胺等。一般来说,所选择吸附剂应有较大的比表面积和足够的吸附能力:对欲分离的不同物质应有不同的吸附能力,即有足够的分辨力;与洗脱剂、溶剂及样品组分不会发生化学反应;吸附剂颗粒均匀。 吸附剂一般先经过筛获得均匀的颗粒(100-200目),对含有杂质的吸附剂可用有机溶剂如甲醇、乙醇、乙酸乙酯等浸泡处理或提取除去,有些吸附剂可用沸水洗去酸碱使呈中性,有些需经加热处理活化。 2. 溶剂与洗脱剂 两者常为同一组分,但用途不同。习惯上把用于溶解样品的溶液称为溶剂,把用于洗脱洗脱柱的溶液称洗脱剂。原则上所选的溶剂和洗脱剂要求纯度高,与样品和吸附剂不起化学反应,对样品的溶解度大,粘度小,易流动,易与洗脱的组分分开。常用的溶剂和洗脱剂有饱和碳氢化合物、醇、酚、醚、卤化烷、有机酸等。 3. 柱的装填和样品的加入 色谱柱一般为玻璃或有机玻璃管制成,柱下端装上一块2-4号烧结玻璃或垫一层玻璃丝以支持吸附剂,管内装吸附剂。有条件可附加压或减压装置,使流速保持恒定,色谱柱外也可配恒温管套。 装柱的方法通常是将一种在适当溶剂中的吸附剂调成糊状,慢慢地倒入关闭了出水口的柱中,同时不断搅拌上层糊状物,赶去气泡,并使装填物均匀的自然下降,装置所需要的高度后,打开出水口,让溶剂流出。注意柱的任何部分不能流干,即是说、再柱的表面始终保持着一层溶剂。 小心地用移液管把样品液绕柱内壁小心地加入,不要冲击着吸附剂的表面。加样的另一个办法是用一个注射器和蠕动泵把样品直接送到柱表面上。 3. 洗脱 在整个洗脱过程中,要使洗脱液通过柱时保持恒定的流速,可以用调节"操作压"来调控(操作压相当于在柱上面的贮液瓶中溶剂的水平和柱出口位置的水平之差)。另一个方法是时用蠕动泵。 洗脱过程中柱内不断发生溶解(解吸),吸附,在溶解,在吸附。被吸附的物质被溶剂解吸,随着溶剂向下移动,又遇到新的吸附剂又把该物质自溶剂中吸附出来,后来流下的新溶剂又在使该物质溶解而向下移动。如此反复解析,吸附,经过一段时间后,该物质向下移动至一定距离,此距离的长短与吸附剂对该物质的吸附力及溶剂对该物质的溶解能力有关,分子结构不同的物质溶解度和吸附能力不同,移动距离也不同,吸附较弱的就易溶解,移动距离较大。经过适当时间后,各物质就形成了各种区带,,每一区带可能是一种纯物质,如果被分离物质是有色的,就可以清楚地看到色层。随着洗脱剂向下移动,最后各组份按吸附力的不同顺序流出色谱柱,以流出体积对浓度作图,可得由一系列峰组成的曲线,每一峰可能相当于一个组分。
色谱柱有没有死吸附?
液相色谱是分配色谱还是吸附色谱啊
高效液相色谱法按组分在固定相和流动相两者间分离机理不同可分为,液固吸附色谱。液液分配色谱,化学键合相色谱法。离子交换色谱法,凝胶色谱法。我疑问的是,我们平时用的ODS-C18柱是固液吸附色谱柱吗???但是好像跟化学键合相色谱也相符合。毕竟色谱柱也是以硅胶为基质键合的C18填料柱。所以我们平时用的这个C18柱是哪一种呢?
吸附色谱和分配色谱有什么不同?
Porapak Q色谱柱本身会不会吸附甲醛,吸附二氧化碳?
哪位高手能用简单的语句(或举例)形象的说一下分配色谱与吸附色谱的区别呢只是知道正相HPLC与反相HPLC分别属于分配与吸附,怎么理解???还有,小弟在做HPLC时,处理极性很强物质的分离时,不知道如何选择柱子,用反相柱吧,保留时间太短,用正相柱吧,流动相又不好溶解样品感谢上天又给我一次机会可以向你们请教
[font=宋体]链接:[/font]https://bbs.instrument.com.cn/topic/5876480问题描述:[font=宋体]吸附柱色谱分离有哪几个步骤?[/font]解答:a)[font=宋体]吸附剂的选择及处理:吸附剂分为无机吸附剂如硅胶、氧化铝、活性炭、氧化镁、碳酸钙、磷酸钙,有机吸附剂如纤维素、淀粉、蔗糖、聚酰胺等。一般来说,所选择吸附剂应有较大的比表面积和足够的吸附能力:对欲分离的不同物质应有不同的吸附能力,即有足够的分辨力;与洗脱剂、溶剂及样品组分不会发生化学反应;吸附剂颗粒均匀。吸附剂一般先经过筛获得均匀的颗粒([/font]100-200[font=宋体]目),对含有杂质的吸附剂可用有机溶剂如甲醇、乙醇、乙酸乙酯等浸泡处理或提取除去,有些吸附剂可用沸水洗去酸碱使呈中性,有些需经加热处理活化。[/font]b)[font=宋体]溶剂与洗脱剂选择:两者常为同一组分[/font],[font=宋体]但用途不同。习惯上把用于溶解样品的溶液称为溶剂,把用于洗脱洗脱柱的溶液称洗脱剂。原则上所选的溶剂和洗脱剂要求纯度高,与样品和吸附剂不起化学反应,对样品的溶解度大,粘度小,易流动,易与洗脱的组分分开。常用的溶剂和洗脱剂有饱和碳氢化合物、醇、酚、醚、卤化烷、有机酸等。[/font]c)[font=宋体]柱的装填和样品的加入:色谱柱一般为玻璃或有机玻璃管制成,柱下端装上一块[/font]2-4[font=宋体]号烧结玻璃或垫一层玻璃丝以支持吸附剂,管内装吸附剂。有条件可附加压或减压装置,使流速保持恒定,色谱柱外也可配恒温管套。[/font]d)[font=宋体]洗脱:在整个洗脱过程中,要使洗脱液通过柱时保持恒定的流速,可以用调节[/font]"[font=宋体]操作压[/font]"[font=宋体]来调控(操作压相当于在柱上面的贮液瓶中溶剂的水平和柱出口位置的水平之差)。另一个方法是时用蠕动泵。[/font]以上内容来自仪器信息网《样品前处理实战宝典》
我做的是吸附实验,用液相色谱测试一系列物质吸附前后的浓度,计算动力学,准二级方程中的k2有的为负数,从而导致初始吸附速率计算结果为负数,这个属于正常吗,我分析的时候是看负数还是他的绝对值呢?谢谢大家
请问哪些牌子(国外)的流动色谱法吸附仪(用于测催化剂的比表面积和孔结构)比较好?请推荐几家,谢谢。
各位版友,我实验室是做VOC和SVOC检测的,准备购买一台气相色谱仪加热脱附装置,有个厂家给我推荐一款进样口内置的吸附热解析装置的气相色谱仪,这样可以节省一台热脱附装置的费用,因为以前没接触过这类仪器,所以问问各位版友,这样产品怎样?有在使用的版友吗?先谢谢各位了。
使用[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]检测样品,样品进样后峰面积逐渐增大,连续进样10多针,前几针峰面积增长速度较快,后几针增长速度较慢。进样后进空白溶剂,空白溶剂中有较大的样品峰,连续进空白,峰在逐渐减小。所检测的样品是一个分子量为1万左右的聚合物。请大佬帮忙分析一下引起此吸附残留的原因,以及有什么办法可以消除此吸附。另外补充一点,经过排查,该样品残留在[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相[/color][/url]系统中各个部位,包括进样器和色谱柱。
请教一下各位:琼脂糖凝胶氢键吸附色谱介质,用于色谱柱中,请问哪里可以检测,主要检测PH、微球直径分布、澄清度、含硫量、胶强度,非常感谢!
《环境空气 苯系物的测定 固体吸附/热脱附-气相色谱 》 HJ 583-2010标准简介:为贯彻《中华人民共和国环境保护法》和《中华人民共和国大气污染防治法》,保护环境,保障人体健康,规范环境空气中苯系物的测定方法,制定本标准。本标准规定了测定环境空气及室内空气中苯、甲苯、乙苯、邻二甲苯。间二甲苯。对二甲苯、异丙苯和苯乙烯的固体吸附/热脱附——气相色谱法。本标准是对《空气质量 甲苯、二甲苯和苯乙烯的测定 气相色谱法》(GB/T 14677-93)的修订。本标准适用于环境环境空气及室内空气中苯、甲苯、乙苯、邻二甲苯。间二甲苯。对二甲苯、异丙苯和苯乙烯的测定。本标准也适用于常温下低浓度废气中苯系物的测定。(注:全文见资料库)
如题,一直用的是安捷伦的C18色谱柱分析DNA,在连续使用一段时间后出现色谱柱对DNA不保留的情况,并且伴有非常严重的柱内扩散。因此采用,乙腈—异丙醇—乙腈对色谱柱进行再生。再生后,色谱柱进样样品峰形较比以前好,但是用色谱柱分析DNA却不出峰了。之前乙腈:水,梯度洗脱,乙腈从5%-15% ,10min内出峰。但是现在,水,梯度洗脱,乙腈从5%-40% ,20min内无DNA色谱峰出现?采用荧光标记的DNA进行了确认,发现DNA被色谱柱死吸附了,根本没有冲出来。不知道是不是C18色谱柱不适用于DNA的分析,或是什么其他原因导致的,还请大神解答!在此感激不尽!!
色谱法化学吸附仪在催化剂行业2013无机及同位素质谱会2014环境监测仪器形势大好第我国研制超分辨显微镜打破国际技食药总局发布组织申报国家科技计划欧盟成功研制出低成本便携式石棉检广东H7N9禽流感卷土重来疾控整站优化:最给力的优化编者按:在多相催化中,由于反应体系的复杂性,使得再解释催化活性及其机理上遇到了困难,因而妨碍了对特定化学过程最佳催化剂的选择。在以往工作的基础上,研究人员提出了用气象色谱(GC)对催化反应、化学吸附和气体扩散进行联合研究的设计,建立了相应的装置,并拟投入定型化仪器生产。
吸附效应对色谱分析的影响大吗?如何避免
[img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=45530]吸附剂的活性与相对湿度对薄层色谱的影响[/url]
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在[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp][color=#3333ff]气相色谱[/color][/url]中对分离起主要作用的是固定相,可分为固体固定相和液体固定相,分别对应气固色谱法和气液色谱法,前者主要用于气体和低沸点化合物的分离。固体固定相有两类,分别由无机材料(包括以其为基质用化学键合方法制备的键合固定相)和有机化合物聚合制成。固体固定相的保留和选择性取决于两个因素:①材料的化学结构(极性),即表面官能团的类型和数目,与分子间相瓦作用有关。②几何结构(孔结构和分布),也即比表面积。在使用固体固定相时,应注意三个方面:①使用前要进行活化,使用时要避免一些有反应性或腐蚀性的气体使之失活。②对组分吸附性太强时,会发生不可逆吸附。在某些情况下,在固体固定相表面上涂渍少量固定液,不仅可减少吸附,而且可改变选择性,改进特定组分的分离。③不同批次的产品色谱性能有差异(特别是无机材料制成的产品)。[b]无机吸附剂[/b]由无机材料制成的吸附剂,用于色谱法的有分子筛、硅胶、氧化铝和碳素。[b]1、分子筛[/b]分子筛是天然或人工合成的硅铝酸盐,化学组成是[M[sub]2[/sub]M']OAl[sub]2[/sub]O[sub]3[/sub]xSiO[sub]2[/sub]yH[sub]2[/sub]O,其中M为Na[sup]+[/sup]、K[sup]+[/sup]、Li[sup]+[/sup]等一价阳离子,M'是Ca[sup]2+[/sup]、Ba[sup]2+[/sup]、Sr[sup]2+[/sup]等二价阳离子,分子筛Na型与Ca型之分在于前者1/4~3/4的Na[sup]+[/sup]被Ca[sup]2+[/sup]置换:X、Y型之分是Al[sub]2[/sub]O[sub]3[/sub]与SiO[sub]2[/sub]的比例有不同,其中数字表明平均孔径的大小(单位为?,1?=0.1nm,下同)。[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp][color=#3333ff]气相色谱[/color][/url]中最常用的分子筛为5A与13X型分子筛,前者由Ca-Al-Si的氧化物组成,有效孔径为5?:后者则由NA-AL-Si氧化物组成,有效孔径为10?。分子筛可能是吸附剂中极性最强的,因此CO[sub]2[/sub]、H[sub]2[/sub]O应从载气中除去。同时使用前要活化好,否则分离性能不好,柱中的水量将影响CO和CH[sub]4[/sub]的分离状况及流出次序。活化方法是在550℃活化2h(或在减压下于350℃活化2h;300℃活化4h;250℃活化12h)。分子筛因吸水而失活,在250℃通载气一夜可除去吸附水。分子筛受欢迎是由于它们分离O[sub]2[/sub]/N[sub]2[/sub]的独特能力,在通常的长度(1~2m)和正常的操作温度(室温~100℃)即可。它们也能用于分离H[sub]2[/sub]、CH[sub]4[/sub]、CO、NO和惰性气体He、Ne、Ar、Kr、Xe等。5A分子筛适于分离Ar与O[sub]2[/sub],13X分子筛则特别适于C[sub]6[/sub]~C[sub]11[/sub]烃的族分析。[b](二)硅胶[/b]硅胶由硅酸凝胶制成,化学成分是SiO[sub]2[/sub]nH[sub]2[/sub]O,分析C1~C4烷烃和SO[sub]2[/sub]、H[sub]2[/sub]S、COS、SF[sub]6[/sub]等气体硫化物。新购入的硅胶要用盐酸(1:1)浸泡2h,然后用水洗涤至无Clˉ。使用前于160℃左右活化2h。硅胶的缺点是分离性能不稳定,不同批次生产的性能不一样。硅胶曾用于分离CO[sub]2[/sub]和其他永久性气体,CO[sub]2[/sub]在C[sub]2[/sub]H[sub]6[/sub]后流出,因而在多柱系统中很有用。但是,现在这方面的应用大多数已由多孔聚合物代替。新一代硅胶基质的固定相如Spherosil和Porasil有较好的标准化的色谱性能,这些材料是多孔小球,无论是否涂固定液均可使用。Chromosil特别适于痕量硫化物的分析。[b](三)氧化铝[/b]氧化铝的化学组成是Al[sub]2[/sub]O[sub]3[/sub],其晶型有五种,[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp][color=#3333ff]气相色谱[/color][/url]法常用的为y型,其次为a型使用前要使用水、液体固定相或无机盐(如KCl或Na[sub]2[/sub]SO[sub]4[/sub])失活。氧化铝是轻烃分析的理想色谱柱,缺点是对极性化合物如醇、醛、酮等有很强的保留,即使在200℃,它们仍流不出来。因此,要防止高沸点化合物或极性不纯物进入柱子。即使用了KCl失活,H[sub]2[/sub]O和CO仍被Al[sub]2[/sub]O[sub]3[/sub]吸附导致保留时间减小。如果样品中水含量大于1μL/L,保留时间将减少,选择性发生变化。此时,柱子可在200℃以上活化15~30min再生柱子。第一次使用时需在450~1350℃活化2h。氧化铝具有中等吸附性,主要用于分离烃,它对不饱和烃异构体如C[sub]4[/sub]不饱和烃有独特的分离能力。经KCl改性的Al[sub]2[/sub]O[sub]3[/sub]PLOT柱稳定性大大提高,可进行C[sub]1[/sub]~C[sub]9[/sub]烃的分离分析。此外,Al[sub]2[/sub]O[sub]3[/sub]还能用于分离氢的自旋异构体。[b](四)碳素[/b]碳素的化学组成是碳,[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp][color=#3333ff]气相色谱[/color][/url]法使用的有活性炭、碳分子筛及石墨化炭黑。活性炭由果壳或木材烧制而成,结构为无定形碳(微晶碳),具高比表面积(800~1500m[sup]2[/sup]/g),用于分析永久性气体及C[sub]1[/sub]~C[sub]2[/sub]烃类。新购的活性炭要用等体积的苯冲洗3次,通空气吹干后,改用水蒸气于450℃活化2h,降温至150℃用空气再吹干。再生时可不用苯处理。活性炭由于宽的孔分布和组成差异,制备重复性差使得色谱性能难重复,其吸附性能强使分离的组分拖尾严重,不太适合做[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp][color=#3333ff]气相色谱[/color][/url]固定相。活性炭由于其批与批之间再现性差,在色谱上使用有限。Kaiser利用聚偏二氯乙烯高温热解灼烧后得到的残留物,发展了一个类似于分子筛孔结构的碳材料,称为碳分子筛,比表面积一般在400~1200m/g。与活性炭相反,孔径分布较窄。活化方法为在180℃通氮气4h。它对分离气体和很短链化合物有用。一根单柱就能分离永久性气体和C[sub]1[/sub]~C[sub]3[/sub]烃。分离O[sub]2[/sub]、N[sub]2[/sub]、CO[sub]2[/sub]具独特能力,也能用于H[sub]2[/sub]O、SO[sub]2[/sub]、H[sub]2[/sub]S等气体的分析,特别适于分析在有机物之前流出的微量水。烃根据其不饱和程度分离,饱和烃后出峰。石墨化炭黑是炭黑在惰性气体中于2500~3000℃煅烧而成的结晶形碳,比表面积为5~260m[sup]2[/sup]/g活化方法与活性炭相同。表面几乎完全除去了不饱和键、弧电子对、自由基和离子。吸附主要由色散力引起,其大小很大程度上取决于吸附剂表面和被吸附分子间的距离。因此,石墨化炭黑尤其适合于分离几何结构和极化率上有差异的分子。如用Carbopack或F-SL可将8个C[sub]5[/sub]醇异构体分离开;用Carbograph ISC可把SF[sub]6[/sub]、SO[sub]2[/sub]、H[sub]2[/sub]S、COS、硫醇、二硫化合物很好地分离开。能使难分离化合物如间/对二甲酚、戊醇的所有八个异构体得以分离,同时对C[sub]1[/sub]~C[sub]10[/sub]范围的有机物如游离脂肪酸、醇、胺、烃等有杰出的分离能力,也能分离含硫小分子,许多在普通条件下易被吸附的痕量化合物可流出,出峰次序取决于几何结构和极化率。石墨化炭黑的缺点是机械强度较低。石墨化炭黑的吸附性能比活性炭小,最好在分析酸性物质时,用磷酸作削尾处理;分析碱性物质时,用碳酸钠处理。还可以用苦味酸、Carbowax1500、Carbowax 20ML改性。
5A色谱柱吸附CO2后如何处理?有没有影响?
仪器:福立9790II(改装过)、国产色谱工作站分析条件:柱温60℃(保持10min,然后5℃/min至120℃,保持15min) 检测器120℃进样方式:六通阀进样流程:见下图http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/07/201507131055_555162_2895125_3.jpg 分析流程图(手绘图,见谅) 这个流程是分析BF3中多样的杂质,分析柱I主要分析H2、O2、N2、CH4、CO等物质,分析柱II主要分析SO2、CO2、C2-C3等杂质。本文主要是探讨,在BF3中分析中,管路对SO2的吸附问题。首先我们看一下在安装调试阶段做的谱图:http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/07/201507131056_555163_2895125_3.jpg第一次进样分析谱图http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/07/201507131057_555164_2895125_3.jpg第二次进样分析谱图http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/07/201507131057_555165_2895125_3.jpg第三次进样谱图http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/07/201507131058_555166_2895125_3.jpg第四次进样谱图http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/07/201507131058_555167_2895125_3.jpg第五次进样谱图http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/07/201507131058_555168_2895125_3.jpg第六次进样谱图http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/07/201507131208_555193_2895125_3.jpg六次进样谱图比较图连续进了六次标样以后,发现第一次的峰面积只有7760,第六次的峰面积达到了45540,相差了33780,我们坐一下初步的计算与统计。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/07/201507131109_555169_2895125_3.jpg通过表格统计,添加趋势线:http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/07/201507131122_555171_2895125_3.jpg由曲线图我们可以得知,随之进样次数的增多,SO2被系统吸附的能力越来越小,峰面积会在某一数值保持不变,然后再计算RSD。计算样品中SO2的含量。我们在实验分析中,吸附性气体很难有很好的定量结果,偏差都比较大,为了缩短分析时间,保证分析的准确性和高效性,我们需要注意的地方:1、管路的选择 在不需要加热的区域,最好选择PEEK材质的管路和阀。但在高温区域内,需要选择不锈管的管路,根据VALCO的分类: a、AP级管路:只是经过简单的酸洗或钝化,取出残存的颗粒,降低了部分活性; b、BA级管路:经过高温处理,在内壁形成一层钝化膜,减少了活性; c、EP级管路:内表面光洁度增加,内表面形成了氧化铬膜,活性接近于合金。 再有条件的情况下,我们可以选择活性低的不锈钢管。2、色谱柱的选择 在分析中,色谱柱的吸附远远大于管路的吸附,选择经过钝化去活性处理的担体。色谱柱的管路可以选择聚四氟管,但是由于底气是BF3,在分析一次样品后,需要高温排除参与的BF3及高沸点杂质,所以建议选择不锈钢管。最好选择电抛光无缝硅钢管。3、取样阀 从标气瓶和样品到取样阀这一段,是最容易被吸附,每一次进样前,都需要对取样阀进行置换。4、进样间隔 分析有吸附性气体或者高纯气分析,进样间隔尽量时间长一点
既然是死吸附,那就是冲不下来。。如果能冲下来,那就不叫死吸附,那应该叫吸附的物质。。所以,普通的冲柱,是无法搞定死吸附的。。能影响死吸附的,就是样品的性质。。一旦样品进去了,一切就都注定了。。我这么理解没错吧?补充小S观点:月旭的柱子,如果是因为死吸附的原因出现问题,一般工程师会直接将柱头填料抠掉,填入新的填料,因为一般很难处理。
现在[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相[/url]室的味道很大,老板让我查说明书吸附分流出去溶液的吸附材料是什么打电话找仪器公司换,可是我在说明书上没找到。请教一下[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]分流出去的溶液是用什么吸附的,叫什么名字?
各位大虾:请问,同一根色谱柱,对标样和样品的相同目标峰的吸附能力是否一样?
[b][color=#444444]在吸附色谱分离中,聚酰胺、硅胶、硅藻土所起的作用分别是什么?[/color][/b]
《环境空气 挥发性有机物的测定 吸附管采样热脱附/气相色谱-质谱法》(征求意见稿)大家看看,新标准有什么问题?