电泳凝胶检测仪

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电泳凝胶检测仪相关的厂商

  • 400-860-5168转2077
    北京君意东方电泳设备有限公司由1993年成立的北京君意机电技术公司与1982年成立的北京东方特力科贸公司组建而成,企业历史已达30余年。“君意东方”属北京中关村高科技园区高新技术企业,于2002年既通过了ISO9001:2000国际质量管理体系认证,并先后荣获北京质量技术监督局颁发的《CMC制造计量器具许可证》、北京药品监督管理局颁发的《医疗器械生产企业许可证》和《医疗器械产品注册证》、“自主进出口经营权”、出口安全标准“CE认证”、“高新技术企业证书”、“君意注册商标”、多项“软件著作权”、多项“专利证书”等资质,以及“中国仪器仪表行业协会会员”、“实验室仪器分会理事会理事”、“实验室仪器标准委员会会员”、“质量、信誉双保障示范单位”、多项“自主创新奖”等殊荣。“君意东方”凭借自主创新精神、秉承“为客户提供高标准、规范化、专业品质的产品和服务”的发展宗旨,开发制造不同实验用途的电泳仪器,现已形成品种丰富、规格齐全的JY系列电泳产品,产品不但涵盖常规的核酸、蛋白电泳,还具有国内企业独领风骚的脉冲场电泳、变性梯度电泳等系统,以及与电泳配套的仪器设备,如快速成像仪、凝胶成像分析系统等。“君意东方”从保障售后服务的责任出发,将建立办事处作为渠道发展目标,先后设立了15个办事处,使“君意牌”业已成为于国内知名品牌,在政府统一招标采购中屡屡中标,产品遍及全国各地的国家重点院校、科研单位。“君意东方”不但延续着30余年的企业历史,还坚持定期参加国内外一系列的展览会,依靠综合优势带动发展和维护合作伙伴,使“君意牌”产品广泛受到海外厂商的垂青,为世界500强企业(美国Bio-rad公司)做OEM生产,而且已经形成稳定的外销渠道和出口量,产品远销至欧、美、亚、非洲等众多国家。发展宗旨:为顾客提供高标准、规范化、专业品质的产品和服务。 企业理念:凭借优异的品质和周到的服务,“君意东方”的朋友遍天下!
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  • 济宁儒佳检测仪器有限公司是专业的多功能磁粉探伤仪,工业X射线探伤机,X射线探伤机厂家及模拟超声波探伤仪厂家,主要产品有:多功能磁粉探伤仪,工业X射线探伤机,X射线探伤机,模拟超声波探伤仪等,是一家集科、工、贸于一体的专业无损检测器材及理化设备供应商。公司员工专科以上学历占90%以上,公司具有雄厚的科研力量,与国内外院校及科研单位有着广泛的合作。 公司致力于做好超声波测厚仪、超声波探伤仪、磁粉探伤仪、X射线探伤机、观片灯、黑白密度计、全自动洗片机、胶片烘干箱、里氏硬度计、超声波探头的基础上,还代理了国内外知名品牌的相关仪器,并拥有国内众多知名工业领域产品的中国区代理权和一支的国际采购团队,为国内企业客户提供高性能的国产及进口工业设备。
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  • 沧州瑞行检测仪器有限公司是集研发、生产与销售为一体高科技实体。有科技人员九十多名,公司产品以达上百种,主要产品有混凝土水泥试验仪器、公路土工试验仪器、沥青防水试验仪器、化学分析仪器、试验机、天平、各种砂浆、混凝土试模、筛具等。我们可为公路、铁路、桥梁、搅拌站、市政、大专院校、工程质量检测中心提供试验室全套试验仪器与检测仪器设备。同时有专业技术人员提供仪器咨询、技术讲解、安装调试、设备维修等。
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电泳凝胶检测仪相关的仪器

  • 最为巧妙的DNA凝胶纯化方法E-Gel™ SizeSelect™ 琼脂糖凝胶是二代测序的得力助手,无需切胶和纯化试剂盒,即可从凝胶中回收您感兴趣的DNA条带,适用于1kb DNA片段的分离,纯化的DNA片段可直接用于二代测序平台文库的构建或下游克隆实验。通过三个简单的步骤完成DNA的凝胶纯化E-Gel SizeSelect琼脂糖凝胶为双梳凝胶。将样品加到上面一排孔中,开始电泳,直至条带迁移至底部一排孔中。然后只需用移液器将您的纯化DNA条带吸出,便可用于克隆。整个过程就是这样简单,无需再采用其他纯化试剂盒或步骤。使用E-Gel iBase™ 电源系统(带有内置式电源的自备装置)和E-Gel Safe Imager™ 实时透射仪,运行并显示E-Gel Sizeselect琼脂糖凝胶。 此方法比传统的凝胶电泳和回收试剂盒的方法快10倍。我们提供2%浓度的E-Gel SizeSelect凝胶,可高效精确地回收150-200bp大小的DNA片段。一旦DNA片段回收,在下一步文库构建之前不再需要其他的纯化步骤。E-Gel SizeSelect系统已经成功用于以下平台的文库构建:Illumina’s Genome Analyzer Fragment Library ConstructionIllumina’s Genome Analyzer Paired-end Library ConstructionIon TorrentABI’s SOLiD Fragment Library Construction
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  • 全球唯一的电泳+凝胶成像+图像分析全自动一体机高分辨、高灵敏:如,可以实现多肽的寡糖的电泳分离免染色-脱色:在电泳的同时直接实时成像分析,将整个电泳加凝胶成像分析时间从两小时缩短为30分钟;省成本:免除电泳染色-脱色环节,免除有毒有害试剂使用,免除凝胶成像、实验通风橱以及污水收集设施,减少了电泳废弃物环保处理费用; 电泳图谱与实际考马斯染色一致,与色谱一致,不改变用户习惯;适用范围: 蛋白PAGE凝胶电泳,核酸PAGE凝胶电泳,核酸琼脂糖凝胶电泳蛋白抗体药物纯度检测、蛋白抗体药物定量分析,杂质蛋白定量检测,蛋白质分子量检测,Western Blotting,生命科学基础研究。 技术性能: 蛋白PAGE凝胶电泳:分辨率:高于常规凝胶电泳1.5-2倍稳定性RSD:4.5%以内灵敏度:LOD: 20 ng检测线性范围:50~5000 ng激发光源:275nm 核酸PAGE凝胶电泳:分辨率:对于50bp以下分辨达到2bp激发光源:470nm灵敏度:100bp检测限500pg检测线性范围:0.1-12.5ng/ul
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  • 等电聚焦凝胶电泳 400-860-5168转0422
    仪器简介:英国SCIE-PLAS公司主要从事电泳及相关实验设备的生产,它为许多分子生物仪器供应商,如Advanced Biotechnologies, Anachem, Belle Technology Binding Site, Bioscience Services, Fisher Scientific, Merck, Philip Harris, Sigma Aldrich, Ultra Violet Products等制造仪器。  利用特殊的一种缓冲液(两性电解质)在凝胶(常用聚丙烯酰胺凝胶)内制造一个pH梯度,电泳时每种蛋白质就将迁移到等于其等电点(pI)的pH处(此时此蛋白质不再带有净的正或负电荷),形成一个很窄的区带。  pH梯度制作利用的两性电解质(ampholyte,商品名为ampholine),是脂肪族多胺和多羧类的同系物,他们具有相近但不同的pKa和pI值。在外电场作用下,自然形成pH梯度。  凝胶可用:聚丙烯酰胺凝胶、琼脂糖凝胶、葡聚糖凝胶等技术参数:在电泳槽内利用两性介质形成等电点梯度,当具有一定等电点的蛋白质迁移到该部分时就停止下来,从而达到分离不同等电点蛋白的目的。凝胶面积:37.5*40.5*10通量:1200ml主要特点:标准配置:running tankcooling plateclass electrode frame and electrodes
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电泳凝胶检测仪相关的资讯

  • 远慕技术:电泳后的凝胶染色实验
    实验概要本文介绍了电泳后主要的凝胶染色方法,包括:标准考马斯亮蓝染色法、快速考马斯亮蓝染色法、凝胶铵银染色法、凝胶中性银染色法及凝胶铜染色法。实验步骤1. 标准考马斯亮蓝染色法 1) 电泳后,将凝胶转入一洁净的玻璃或塑料容器中。加入5倍于凝胶体积的0.25%考马斯亮蓝R-250(溶解于50%甲醇和10%乙酸中); 2) 室温下振摇温育4h至过夜; 3) 去除染色液,收集保存可重复使用20-40次; 4) 依次在25%甲醇和7.5%乙酸中室温振摇下脱色。灵敏度为0.1-0.5ug蛋白/每条带。注:使用加热的染色液或脱色液可以缩短染色或脱色时间。将染色液或脱色液在微波炉或水浴中加热,(大约50-60℃),染色时间可缩短至20min,脱色时间约 1-2h。2. 快速考马斯亮蓝染色法 1) 电泳后,将凝胶转入一洁净的玻璃或塑料容器中。加入5倍于凝胶体积的0.25%考马斯亮蓝R-250(溶解于50%三氯yi酸中); 2) 室温下振摇温育20min; 3) 去除染色液,收集保存可重复使用多次; 4) 加入数倍体积的脱色液(25%甲醇、7%乙酸)室温振摇下脱色。必要时可更换脱色液。灵敏度为1.0ug蛋白/每条带。3. 凝胶铵银染色法 1) 电泳后,将凝胶转入一洁净的玻璃或塑料容器中。加入5倍于凝胶体积的50%乙醇和10%乙酸,振摇30min至过夜; 2) 去除50%乙醇和10%乙酸,用去离子水清洗凝胶。加入20%乙醇, 室温振摇30min; 3) 去除20%乙醇,再加5倍体积的20%乙醇,室温振摇30min; 4) 去除20%乙醇,将凝胶转入通风柜内,加入5倍体积的用去离子水配制的5%戊二醛,室温振摇30min; 5) 去除戊二醛,用去离子水清洗凝胶。加入5倍体积的20%乙醇,室温振摇20min; 6) 去除20%乙醇,重复6两次; 7) 去除20%乙醇,用去离子水清洗凝胶。再加入5倍体积的用去离子水,室温温育10min; 8) 去除去离子水,加入4倍体积新鲜配制的氨水/银溶液,室温振摇30min。配制100ml:加1.4ml 14.8mol/L氢氧化铵到100ml水中,再加入190ul 10mol/L氢氧化钠;放置涡旋器上缓缓加入1ml新鲜配制的硝酸银溶液(0.8g硝酸银/ml水),直至出现沉淀物,但很快溶解。 9) 去除氨水/银溶液,用去离子水清洗凝胶20min以上,其间更换水数次; 10) 去除水,加入5倍体积新鲜配制的0.005%柠檬酸,0.019%的甲醛。轻柔混匀,数分钟内条带即显现出。当背景开始变化时,去除显影剂,用用去离子水清洗凝胶。在10%乙酸和20%乙醇中温育凝胶,以终止反应。灵敏度为1-10ng蛋白/每条带。注:操作时,应戴手套并使用洁净的玻璃器皿,以免污染,影响反应的灵敏度。4. 凝胶中性银染色法 1) 电泳后,将凝胶转入一洁净的玻璃或塑料容器中。加入5倍于凝胶体积的30%乙醇和10%乙酸,振摇30min至过夜; 2) 去除乙醇/乙酸溶液,加入5倍体积的30%乙醇, 室温振摇30min; 3) 去除乙醇,再加5倍体积的30%乙醇,室温振摇30min; 4) 去除乙醇,加入10倍体积的去离子水,室温振摇10min;重复用去离子水清洗两次; 5) 去除去离子水,加入4倍体积新鲜配制的0.1%硝酸银溶液(用室温下贮存于棕色瓶内的20%原液稀释而得),室温振摇30min; 6) 去除硝酸银溶液,用去离子水清洗凝胶20s; 7) 去除水,加入5倍体积的2.5%碳酸钠和 0.02%的甲醛(pH4.0),室温振摇温育,数分钟内条带即显现出。当背景开始变黑时,停止温育; 8) 在1%乙酸内清洗,停止反映。用去离子水清洗,更换数次,每次10min 灵敏度为1-10ng蛋白/每条带。5. 凝胶铜染色法凝胶铜染色法为考马斯亮蓝或银染色法的替代染色方法。将凝胶氯化铜溶液中温育,在Tris和SDS同时存在时可形成明显的白色不透明的沉淀物。蛋白条仍然清晰,留下一个多肽分离模式的附染图象。由于蛋白质未结合在凝胶上,可通过EDTA去除Cu离子而得以洗脱,因而该方法特别适合需快速定位蛋白条带用于免疫反应,或进一步进行蛋白质化学研究。其染色模式如同考马斯亮蓝或银染色法的凝胶,易进行拍照。 1) 电泳后,凝胶用蒸馏水短时清洗数次,每次30s,勿洗过长时间; 2) 将凝胶转入一洁净的玻璃或塑料容器中。加入5倍于凝胶体积的0.3mol/L CuCl2; 3) 室温振摇5min,较厚的凝胶可适当延长时间。当CuCl2进入凝胶时,在不含蛋白的区域会出现白色沉淀; 4) 用蒸馏水清洗数分钟,在黑色背景下观察结果。灵敏度为10-100ng蛋白/每条带(0.5mm厚的凝胶)或1ug蛋白/每条带(1mm厚的凝胶)。注:将凝胶在0.25mol/L EDTA、0.25mol/L Tris溶液中温育可使铜染逆转。
  • 凝胶电泳实验操作中的小技巧
    1、让凝胶电泳变得更快,更漂亮方法改进:将电泳电压进行定时变化,例如可以在开始时将电泳电压调节至 100V,大约 15min。使条带的确可以因为自身片段大小不同而产生较大差别的泳动速度,从而将片段分离,然而现在的分离或许会间距较小,从而图片很不漂亮,或者不易观察.可以紧接着进行 120V-130V 的电压进行较小差 异电泳,但是由于电泳电压较大,可以避免过大的片段残存在胶孔不易泳动的情况.结果:这样两个电压进行配合电泳,便可以得到非常漂亮的电泳条带,并且可以节省 1/5-2/5 左右 的时间.2、RNA 电泳如何得出漂亮的条带方法改进:1.电泳槽,制胶器,梳子等的清洗:去污剂浸泡过夜——自来水冲洗干净——ddH20 冲洗——3%H2O2 灌满浸泡过夜——灭活的 0.1%DEPC水冲洗干净——超净台内紫外线照射过夜. 2.烧瓶,烧杯,药匙,量筒等制胶器械的清洗:0.1%DEPC 水浸泡过夜后高压消毒灭活,烘箱烘干.或 者 ddH20 清洗干净, 超净台内紫外线照射过夜. 3.电泳缓冲液必须是 RNase free . 4.预电泳 5-10min 减少了非特异 RNA 条带的出现,有利于分离和纯化,同时可根据电泳仪是否冒泡判断电 泳仪装置是否有误. 5.样品是在电泳缓冲液液略低于胶表面而不是在高过胶面时加进齿槽,避免了加样 时 RNA 的扩散,加样后 RNA 从齿槽逸出造成 RNA 的弥散及定位不良等现象. 6.电泳 3-5min 让 RNA 进入凝胶后再加电泳缓冲液液高过表面,确保了加到每个槽中的 RNA 量及定位的准确性,从而有利于 DNA 的鉴定和纯化.3、如何提高 SDS-PAGE 的分辨率方法改进:借鉴 Tricine-SDS-PAGE 中添加甘油或者尿素来提高分辨率的成功经验,在普通的 SDS-PAGE 中加入约 13%的甘油,同样可以提高分辨率,有效防止小分子量蛋白的弥散.只要把原来 配方中的水换成 60%的甘油,就可以了.结果:加入甘油之后,条带较细,分得更开.4、改进一点点,我们能得到更加美观的 SDS-PAGE 胶方法改进:所做的改进很简单却很有效,加完分离胶后,用移液枪吸取酒精(浓度没有特别要求, 干净无污染就好)加到分离胶上至覆盖界面,静置片刻后放到 37℃恒温箱中可加速胶的凝固.待到分 离胶完全凝固之后倒去上层的酒精,就可以看到齐平漂亮的界面啦!改进二:脱色 背景:给染色结束的 SDS-PAGE 胶脱色往往需要比较长的时间,否则会由于脱色不完全而导致条 带不清晰,影响到拍照的效果.方法改进:改进的方法很简单易行——取一张我们常常随身携带的面巾纸,打个结放入盛有脱色液 的大培养皿里放到脱色摇床上,这样一来,原来过夜脱色达到的效果现在只需要短短的 3,4 个小时就 可以轻松实现了. PS:希望大家这个时候用的面巾纸是质量比较好不容易掉屑的...
  • 辐照食品-单细胞凝胶电泳法 国标审定
    受中国标准化研究院委托,河北省质量技术监督局于2009年1月8日在石家庄组织召开了《辐照食品的鉴定——单细胞凝胶电泳法(筛选法)》国家标准审定会。审定会专家组由中国检验检疫科学研究院、河北省分子细胞生物学重点实验室、中国疾病预防控制中心、北京市食品安全监控中心、中国标准化研究院、中国药品生物制品检定所、河北出入境检验检疫局检验检疫技术中心、国家农副产品及果品质量监督检验中心、农业部畜禽产品质量安全监督检验测试中心的各位专家组成。  该标准由国家环保产品质量监督检验中心研究起草。专家组认真听取了标准起草小组关于标准起草过程的介绍,对标准的具体技术内容、文本格式逐条进行了审查,经充分的讨论和质询,提出了修改意见,并形成了如下结论:  1、该标准提交的材料齐全、数据详实可靠,编写格式符合GB/T1.1-2000《标准化工作导则 第1部分:标准的结构和编写规则》的要求。  2、该标准是根据国内外辐照食品检测需要,参照欧盟 BS EN 13784:2002标准,在实验条件摸索和方法验证等研究结果的基础上而制定。  3、该标准技术内容先进,能满足国内对含DNA辐照食品的快速筛选要求,填补了国内空白,达到国际先进水平。

电泳凝胶检测仪相关的方案

  • 水平式琼脂糖凝胶电泳法检测DNA实验
    水平式琼脂糖凝胶电泳是基因工程操作中最常规的实验方法,它简单易行,只需少量的DNA就能检测,其分辨效果比分光光度计法与溴化乙啶-标准浓度DNA比较法更高,更直接,检测DNA范围更广,其原理是溴化乙啶在紫外光照射下能发射荧光,当DNA样品在琼脂糖凝胶中电泳时,琼脂糖凝胶中的EB就插入DNA分子中形成荧光络合物;使得DAN发射的荧光,增强几十倍。而荧光的强度正比于DNA的含量,如将已知浓度的标准样品做琼脂糖凝胶电泳的对照,就可比较出待测样品的浓度。若用薄层分析扫描仪检测,则可精确地测得样品的浓度。电泳后的琼脂糖凝胶块直接在紫外光下照射拍照,只需5~10ng DNA ,就可以从照片上比较鉴别。如肉眼观察,可检测到0.01~0.1ng的DNA。
  • 质粒DNA提取及琼脂糖凝胶电泳检测
    实验方法原理:1、碱变性法提取质粒DNA:细菌培养物加入SDS和NaOH碱性溶液处理后,菌体裂解,可使细菌的质粒DNA、染色体DNA和RNA一起从细胞内释放出来,经琼脂糖凝胶电泳,因各种核酸分子的迁移率不同将上述核酸分成不同的带。用溴化乙锭(EB)染色后,在紫外线灯下可看到各种核酸带发出的荧光。根据荧光的位置,可区分不同的核酸带。2、琼脂糖凝胶电泳:琼脂糖凝胶电泳技术(Agarosegelelectroghoresis)是分离、鉴定和提纯DNA片断的有效方法。凝胶分辨率决定于使用材料的浓度,并由此决定凝胶的孔径。琼脂糖凝胶可分辩0.1——6.0kb的双链DNA片段。琼脂糖凝胶电泳是一个电场作用。它首先利用琼脂糖的分子筛效应,此外,在弱碱性条件下,DNA分子带负电荷,从负极向正极移动。根据DNA分子大小、结构及所带电荷的不同,它们以不同的速率通过介质运动而相互分离。借助溴化乙锭(EB)能与双链DNA结合的作用,利用EB染色,并通过紫外线激发即可观察被分离DNA片段的位置。
  • 凝胶电泳条带模糊不清的原因+解决方法
    凝胶电泳是一种常用的DNA分子检测方法,可用于鉴定DNA分子的序列和结构。但在实际操作中,我们常常会遇到电泳条带模糊不清的情况,这会影响到检测结果的准确性。

电泳凝胶检测仪相关的资料

电泳凝胶检测仪相关的试剂

电泳凝胶检测仪相关的论坛

  • 凝胶电泳仪简介

    凝胶电泳(英语:Gel electrophoresis)或称胶体电泳 是一大类技术,被科学工作者用于分离不同物理性质(如大小、形状、等电点等)的分子。凝胶电泳通常用于分析用途,但也可以作为制备技术,在采用某些方法(如质谱(MS)、聚合酶链式反应(PCR)、克隆技术、DNA测序或者免疫印迹)检测之前部分提纯分子。凝胶电泳仪 - 使用方法凝胶电泳被广泛用于分子生物学、遗传学和生物化学:1.大的DNA或者RNA分子通常利用琼脂糖凝胶电泳(agarose gel electrophoresis)分离,也可以使用聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)。2.蛋白质的凝胶电泳通常在加入十二烷基硫酸钠的聚丙烯酰胺凝胶中进行(SDS-PAGE),或者非变性凝胶电泳,或二维电泳。 SDS-PAGE 蛋白质凝胶电泳图。 3.毛细管电泳  4.酶谱法(zymography) 5.变性梯度胶凝电泳(Denaturing Gradient Gel Electrophoresis,DGGE) 琼脂糖和聚丙烯酰胺可以制成各种形状、大小和孔隙度。琼脂糖凝胶分离DNA片度大小范围较广,不同浓度琼脂糖凝胶可分离长度从200bp至近50kb的DNA片段。琼脂糖通常用水平装置在强度和方向恒定的电场下电泳。聚丙烯酰胺分离小片段DNA(5-500bp)效果较好,其分辩力极高,甚至相差1bp的DNA片段就能分开。聚丙烯酰胺凝胶电泳很快,可容纳相对大量的DNA,但制备和操作比琼脂糖凝胶困难。聚丙烯酰胺凝胶采用垂直装置进行电泳。目前,一般实验室多用琼脂糖水平平板凝胶电泳装置进行DNA电泳。 琼脂糖主要在DNA制备电泳中作为一种固体支持基质,其密度取决于琼脂糖的浓度。在电场中,在中性pH值下带负电荷的DNA向阳极迁移,其迁移速率由下列多种因素决定:1、 DNA的分子大小。度琼脂糖凝胶中的迁移速率与DNA分子量对数成反比,分子越大则所受阻力越大,也越难于在凝胶孔隙中蠕行,因而迁移得越慢。 2、 琼脂糖浓度 一个给定大小的线状DNA分子,其迁移速度在不同浓度的琼脂糖凝胶中各不相同。DNA电泳迁移率的对数与凝胶浓度成线性关系。凝胶浓度的选择取决于DNA分子的大小。分离小于0.5kb的DNA片段所需胶浓度是1.2-1.5%,分离大于10kb的DNA分子所需胶浓度为0.3-0.7%, DNA片段大小间于两者之间则所需胶浓度为0.8-1.0%。 3、 DNA分子的构象DNA分子处于不同构象时,它在电场中移动距离不仅和分子量有关,还和它本身构象有关。相同分子量的线状、开环和超螺旋DNA在琼脂糖凝胶中移动速度是不一样的,超螺旋DNA移动最快,而开环双链DNA移动最慢。如在电泳鉴定质粒纯度时发现凝胶上有数条DNA带难以确定是质粒DNA不同构象引起还是因为含有其他DNA引起时,可从琼脂糖凝胶上将DNA带逐个回收,用同一种限制性内切酶分别水解,然后电泳,如在凝胶上出现相同的DNA图谱,则为同一种DNA。

  • 毛细管凝胶电泳技术

    毛细管凝胶电泳技术

    毛细管电泳技术(Capillary Electrophoresis, CE)又称高效毛细管电泳(HPCE)或毛细管分离法(CESM),是一类以毛细管为分离通道、以高压直流电场为驱动力,根据样品中各组分之间迁移速度和分配行为上的差异而实现分离的一类液相分离技术,迅速发展于80年代中后期,它实际上包含电泳技术和色谱技术及其交叉内容,是分析科学中继高效液相色谱之后的又一重大进展。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2013/08/201308081111_456810_2646159_3.jpg1987年,Cohen发表了毛细管凝胶电泳的工作。当电泳从凝胶板上移到毛细管中以后,发生了奇迹般的变化:分析灵敏度提高到能检测一个碱基的变化,分离效率达百万理论塔板数;分析片段能大能小,小到分辨单个核苷酸的序列,大到分离Mb的DNA;分析时间由原来的以小时计算缩减到以分、秒计算。CE可以说是经典电泳技术与现代微柱分离技术完美结合的产物。 一.毛细管凝胶电泳的原理 不同分子所带电荷性质、多少不同,形状、大小各异。一定电解质及PH的缓冲液或其它溶液内,受电场作用,样本中各组分按一定速度迁移,从而形成电泳。电泳迁移速度(v)可用下式表示:v=uE其中E为电场强度(E=V/L,V为电压,L为毛细管总长度)。u为电泳淌度。毛细管凝胶电泳是将板上的凝胶移到毛细管中作支持物进行的电泳。凝胶具有多孔性,起类似分子筛的作用, 溶质按分子大小逐一分离。凝胶粘度大, 能减少溶质的扩散, 所得峰形尖锐, 能达到CE中最高的柱效。电流通过导体时产生焦耳热。传统平板凝胶电泳的最大局限性在于其无法克服两端高电压带来的焦耳热所产生的负面影响。焦耳热可使筛分介质内部出现温度、粘度及分离速度的不均一,影响迁移、降低效率、使区带变宽。由于这种负面影响与电场强度成正比,所以极大地限制了高电压的引入。也难以提高电泳速度。毛细管电泳使样品在一根极细的柱子中进行分离。细柱可减小电流,使焦耳热的产生减少;同时又增大了散热面积,提高散热效率,大大降低了管中心与管壁间的温差,减少了柱子径向上的各种梯度差,保证了高效分离。因此可以加大电场强度,达到100~200V/cm,全面提高分离质量。在进行分析时将毛细管内充满了凝胶,毛细管两端通高压电,使凝胶内带电分子移到毛细管相反电荷的一端。因为不同分子的大小对电荷比不同,就以不同的速率在管中移动,达到毛细管终点也有快有慢。毛细管电泳即依此探测、分离不同分子。 二.毛细管凝胶电泳的特点 1.所需样品量少、仪器简单、操作简便。2.分析速度快,分离效率高,分辨率高,灵敏度高。3.无需核酸染料,安全无毒。4.无需制胶,省时省力。5.无需照胶,杜绝人工分析结果误差。6.自动出结果,包括片段大小和样品浓度,软件可输出电泳峰图、凝胶电泳图、DNA片段碱基差异分析、相对定量分析。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2013/08/201308081111_456811_2646159_3.jpg三.毛细管凝胶电泳的应用1.PCR条件的优化及多重PCR的检测2.高分辨率的检出,相差1-4bp的DNA片段的差异,及相同长度不同序列的差异3.动态检测酶切体系的进程4.评估基因组DNA质量高低5.HLA分型6.STR分析7.质粒的纯度分析8.DNA/DNA杂交9.DNA/蛋白互作

  • 水平凝胶电泳仪特色及参数说明

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