乙酰胆碱受体

请问有做胆碱和乙酰胆碱传感器的吗？有知道胆碱酯酶和乙酰胆碱酯酶的化学结构的吗？最好有分子结构，给出个图片来比较直观一些。还有就是这些蛋白的性质，它们的圆二色谱数据什么的。谢谢！

我要做农药残留检测，找不到乙酰胆碱酯酶，可直接用酶片（京蓬生物科研有限公司产的）代替吗？[em63]

与乙酰胆碱酯酶活性位点结合的荧光探针有哪些 ?9-CHLORO-N-METHYLACRIDINIUM IODIDE 这种物质可以做乙酰胆碱酯酶的荧光谈探针不？谢谢!!!

与乙酰胆碱酯酶活性位点结合的荧光探针有哪些 ?9-CHLORO-N-METHYLACRIDINIUM IODIDE 这种物质可以做乙酰胆碱酯酶的荧光谈探针不？谢谢!!!

与乙酰胆碱酯酶活性位点结合的荧光探针有哪些 ?9-CHLORO-N-METHYLACRIDINIUM IODIDE这种物质可否做乙酰胆碱酯酶的荧光探针？它的相关性质有哪些？

氯化乙酰胆碱 对照液的配制前需干燥至恒重50℃干燥了3小时，放入干燥器冷却后，发现称量杯内壁出现小液珠刚取出来的时候并未见液珠。请问各位大虾，该如何干燥？我不确定液珠是否是水珠。

与乙酰胆碱酯酶活性位点结合的荧光探针有哪些 ?谢谢！

藏红T是荧光物质，请问它能否做乙酰胆碱酯酶的荧光探针呢？急用！谢谢好心人的帮忙

我要做农药残留检测实验，需要购买乙酰胆碱酯酶，但不知道向谁购买。我找到有进口的，但超出预算，需要改购国内的，谁可以提供点国内有卖这种产品的厂家信息吗? 急！谢谢！[em63]

请问现在检测农药用的快速检测仪器需要用到乙酰胆碱脂酶和丁酰胆碱酯酶二者有什么区别吗，哪个效果更好些？国标上有没有规定必须用哪种酶呢？

哪位前辈能告诉我什么是酶抑制法（乙酰胆碱酯酶）？

我试过好多从小麦中提取胆碱酯酶的方法，但是提取的酶，在用碘化硫代乙酰胆碱（BuTCI）做底物的时候，对农药的敏感性不高；而用靛酚乙酸酯做底物的时候，对农药的敏感性还可以，不知道为什么？如果我要坚持用碘化硫代乙酰胆碱（BuTCI）做底物，从哪些材料里提取会更好？欢迎有相关经验的同仁进行交流探讨！

1 神经毒素神经毒素主要包括：鱼腥藻毒素如鱼腥藻毒素-a (Anatoxin-a)、鱼腥藻毒素-a(s) (Anatoxin-a(s))、高类鱼腥藻毒素-a (Homoanatoxin-a)；麻痹性或瘫痪性贝毒素(Paralytic Shellfish Poisoning, PSP)如石房蛤毒素(Saxitoxin)、新石房蛤毒素(Neosaxitoxin)和膝沟藻毒素(Gonyautoxin)等；腹泻性贝毒素(Diarrhetic Shellfish Poisoning, DSP)如大田软海绵酸(Okadaic acid, OA)和鳍藻毒素1-3(Dinophysistoxin, DTX)等；记忆丧失性贝毒素(Amnesic Shellfish Poisoning, ASP)；神经性贝毒素(Neurotoxic Shellfish Poisoning, NSP)及西加鱼毒素(Ciguatera Fish Poisoning, CFP)( 尹伊伟，2000)。鱼腥藻毒素-a是一种低分子质量的生物碱(图1-2)，相对分子质量为165(Hitzfeld B C, 2000-II)。目前发现鱼腥藻、颤藻、束丝藻(Aphanizomenon)、柱孢藻(Cylindrospermum)和微囊藻可以产生鱼腥藻毒素-a。高类鱼腥藻毒素-a (图1-3)是从美丽颤藻(O. formosa)中分离到的一种鱼腥藻毒素-a的同系物，它用丙酰基替代了鱼腥藻毒素-a中C-2上的乙酰基。鱼腥藻毒素-a是神经递质乙酰胆碱的类似物，它可与乙酰胆碱受体结合，但乙酰胆碱酯酶或真核生物中的任何酶均不能降解它。它与乙酰胆碱受体结合后可使肌肉因过度兴奋而痉挛，如果动物的呼吸系统受到影响，动物会因窒息而死亡。鱼腥藻毒素-a(s)是N-羟基鸟嘌呤的单磷酸酯(图1-4)，到目前为止仅从北美洲发现，由水华鱼腥藻(A.flos-aquae)和A.Lemmermannii产生。鱼腥藻毒素-a(s)可以阻止乙酰胆碱酯酶对乙酰胆碱的降解，使肌肉因过度兴奋而痉挛(Henriksen P, 1997)。 图1-2 鱼腥藻毒素-a分子结构图Figure 1-2 Structure of anatoxin-a 图1-3 高类鱼腥藻毒素-a分子结构图Figure 1-3 Structure of homoanatoxin-a 图1-4 鱼腥藻毒素-a(s)分子结构图Figure 1-4 Structure of anatoxin-a(s)麻痹性贝毒素是一类烷基氢化嘌呤化合物，形似三环化合物，是一种非蛋白质毒素。分子结构如图1-5所示。类似于具有两个胍基(guanidyl)的嘌呤核，为非结晶、水溶性、高极性、不挥发的小分子物质，在酸性条件下稳定，碱性条件下发生氧化，毒性消失；毒素遇热稳定，并不被人的消化酶所破坏。其中毒性最强的为STX、neoSTX、GTX1、GTX3和dcSTX(1300Mu• μmol-1)，但其他几种毒素很容易水解成毒性成份。其来源生物均为甲藻，如有毒膝沟藻(Gonyaulax)、亚历山大藻(Alexandrum)和Pyrodinium等。麻痹性贝毒的强度是通过转换成STX的毒性来表达的。这些毒素主要是由海洋中的赤潮藻甲藻产生的，可在贝类中累积进而危害人类。由于这些毒素最早是从摄食有毒藻类的贝类体内发现，故被称作贝毒。在淡水中PSP主要存在于水华束丝藻(Aph. flos-aquae)、卷曲鱼腥藻(A.circinalis)、Lyngbyawollei和C. raciborskii中(Bialojan C, 1988)。麻痹性贝毒素也是到目前为止赤潮藻毒素中分布最广、危害最大的一类，主要包括石房蛤毒素及其四氢呋喃衍生物，发现的有近三十种(表1-1)，由分子结构中R4基团的不同，可分为四类：氨基甲酸酯类、N-磺酰氨甲酰基类、脱氨甲酰基类和脱氧脱氨甲酰基类。其中石房蛤毒素(STX)已被收入《化学武器公约》中禁止化学品的第二类清单。我国也将PSP毒素列为贝类产品的常规检测指标之一。 图1-5 麻痹性贝毒素分子结构图Figure 1-5 Structures of Paralytic Shellfish Poisons (PSPs)麻痹性贝毒是一类神经肌肉麻痹剂，可以作用于细胞膜上的钠通道使之关闭，抑制动作电位的产生，使乙酰胆碱不能释放，从而导致神经麻痹。其毒理作用为阻断细胞钠离子通道，造成神经系统传输障碍而产生麻痹作用。对人体的中毒量为600~5000Mu，致死量为3000~30000Mu，目前尚无对症解毒剂。PSP的毒性为LD50=3.4×10-9。联合国卫生组织规定，100g贝类可食部分的PSP毒力超过80ug(400Mu)时不得食用(丘建文，1991)。海洋生物中，由于贝类对麻痹性贝毒具有极强的抵抗性，因此这种毒素就在贝类体内储存积累，人类或动物食用这些有毒贝类会产生一系列神经麻痹症状，严重的可能致命。由于其对人类健康造成危害，因此成为赤潮毒素中最受关注的一种，许多国家已在贝类生产、贸易过程中，对此毒素制订了严格的监测和管理条例。与贝类相比，鱼类对这种毒素却极为敏感。腹腔注射时，其对鱼类的半致死剂量(LD50)为(4~12)×10-6，口服为(100~750)×10-6，给药后5~15min，鱼类即失去平衡，0~60min就出现死亡。因此，在此类赤潮发生时，常出现鱼类大量死亡现象，欧洲的北海及北美的东北海岸都曾发生因麻痹性贝毒中毒的大规模死鱼事件，死亡的鱼类有玉筋鱼和鲱鱼等。值得注意的是，本来源于藻类的贝毒，许多是通过浮游动物的摄食而传递给鱼类，从而引起鱼类的死亡。因此，麻痹性贝毒对鱼类的危害，既可通过藻细胞本身的胞外分泌物也可通过摄食染毒的其他动物使鱼类中毒。不过由于麻痹性贝毒对鱼类的毒性很高，毒素不会在鱼体内大量残留，中毒死亡鱼体肌肉内的残留毒素含量很低。我国虽未有因麻痹性贝毒中毒而引起鱼类死亡的报道，但已有产生这类毒素的藻类赤潮发生，而且能产生麻痹性贝毒的藻类在我国海域普遍存在，因此，应高度警惕这类赤潮的发生(尹伊伟，王朝晖等，2000)。2 脂多糖内毒素脂多糖内毒素是蓝藻细胞壁的组成部分，由脂A、核心寡糖和O特异多糖组成，其中脂A分子结构式如图1-6所示。目前已从裂须藻(Schizothrix calcicola)，颤藻，鱼腥藻，微囊藻和Anacystis中分离到。蓝藻脂多糖内毒素的脂A与格兰氏阴性细菌的脂多糖不完全相同，种类更多，而且往往含有少量的磷酸。脂多糖内毒素包括细胞毒性生物碱(Alkaloid)、皮肤毒性生物碱和刺激性毒物——脂多糖(Lipopolysaccharides, LPS) (Metcalf J S, 2004)。

L-半胱胺酸(L-cys)能否作为纳米金粒子和乙酰胆碱酯酶的连接剂？理论上其中的SH与金纳米结合，COOH与乙酰胆碱酯酶中的羟基作用。但具体怎样结合?哪位大侠可以告诉我它的具体操作步骤？谢谢！

RT谢谢！

L-半胱胺酸(L-cys)能否作为纳米金粒子和乙酰胆碱酯酶的连接剂？理论上其中的SH与金纳米结合，COOH与乙酰胆碱酯酶中的羟基作用。但具体怎样结合?哪位大侠可以告诉我它的具体操作步骤？谢谢！

哪位牛人知道蛋白质的二级结构的数据库啊？现在急用胆碱氧化酶和乙酰胆碱酯酶的二级结构，就是关于螺旋多少，折叠多少的数据，希望帮忙啊！

[size=16px][font=宋体]随着我国人民生活水平的提高，市民对餐桌上的安全问题也越来越关注，农药残留、兽药残留更是关注重点，接下来，会针对[font=宋体]目前[/font]农[/font][font=宋体]药残留快检仪器应用展开讨论，希望能抛砖引玉，吸引其他朋友一起分享目前国内外快检市[/font][font=宋体]场发展进程。[/font][font=宋体]关于农药残留快速检测技术的讨论篇（一）[/font][font=宋体]——酶抑制法的影响因素及基本分类[/font][font=Calibri][font=宋体]酶抑制法是是相对成熟的农药残留速测技术原理，适用于有机磷和氨基甲酸酪类农药[/font][/font][font=宋体]。[/font][font=宋体][font=Calibri]一、影响因素[/font][font=Calibri][/font][/font][font=Calibri][font=宋体]（1）[/font][/font][font=Calibri][font=宋体]温度：[/font][font=宋体]酶的活性都随着温度的升高，先升后降[/font]；[/font][font=Calibri][font=宋体]（2）[/font][font=Calibri]PH；[/font][/font][font=Calibri][font=宋体]（3）[/font][font=Calibri]反应[/font][font=Calibri]时间；[/font][/font][font=Calibri][font=宋体]（4）测试[/font][font=宋体]农药的品种；[/font][/font][font=宋体]二、分类[/font][font=Calibri]∶[/font][font=宋体]1.胆碱酯酶法[/font][font=宋体][font=Calibri]1.1 原理：乙酰胆碱酯酶（AChE）抑制法的检测原理以乙酰胆碱为底物，在AChB的作用下，乙酰胆碱水解成胆碱和乙酸，胆碱和二硫对硝基苯甲酸（DT[/font][font=宋体]N[/font][font=Calibri]B）产生显色反[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]应，使反应液呈黄色。[/font][/font]1.2、注意事项：[font=Calibri][font=宋体]各种农药因其化学结构和作用不同对[/font]AChE [font=宋体]的抑制能力也不相同：[/font][/font][font=Calibri][font=宋体]（1）硫代型有机磷农药；的抑制能力较差，最小检出浓度较高[/font][/font][font=Calibri] [/font][font=Calibri][font=宋体]（2）氧化型有机磷农药；的抑制能力较强，[/font][font=宋体]灵敏度较高，最小检出浓度较低[/font][font=Calibri]；[/font][/font][font=Calibri][font=宋体]（3）辛硫磷类农药：因为含有肟基选择毒力大大增强，最小检出浓度较低[/font][/font][font=宋体]；[/font][font=Calibri][font=宋体]（4）对氨基甲酸酯类农药：检测灵敏度相对较高。[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]2、植物酶抑制法[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]2.1、原理：[/font][/font][font=宋体]利用植物酯酶水解[/font][font=Calibri]2[/font][font=宋体]，[/font][font=Calibri]6-[/font][font=宋体]二氯乙酰靛酚，水解产物[font=宋体]靛[/font]蓝色，[/font][font=宋体]根据反应溶液在水解前后颜色的变化，用目测/仪器来判定农药对酶的抑制程度从而判断有机磷或氨基[/font][font=宋体]甲酸酯类农药的残留量。[/font][/size][font=宋体][size=16px]2.2、注意事项：[font=宋体]植物酷酶方法的精确度和灵敏度不及乙酰胆碱酯酶法，乙酰胆碱酯酶法的检出限可至ppb量级（部分）[/font][font=宋体]，而植物菌酶法只能在[/font][font=Calibri][/font][font=宋体]ppm[/font][font=宋体]级，[/font][font=宋体]灵敏度相对较低，但[/font][/size][/font][font=宋体][size=16px]是在生产成本[/size][/font][font=宋体][size=16px]上有优势。[/size][/font]

有机磷杀虫药（organophosphorous insecticides）对人畜的毒性主要是对乙酰胆碱酯酶的抑制，引起乙酰胆碱蓄积，使胆碱能神经受到持续冲动，导致先兴奋后衰竭的一系列的毒蕈碱样、烟碱样和中枢神经系统等症状；严重患者可因昏迷和呼吸衰竭而死亡，有机磷杀虫药大都呈油状或结晶状，色泽由淡黄至棕色，稍有挥发性，且有蒜味。除敌百虫外，一般难溶于水， 不易溶于多种有机溶剂，在碱性条件下易分解失效。常用的剂型有乳剂、油剂和粉剂等。R和R′为烷基、芳基、羟胺基或其他基因，X为烷氧基、丙基或其他取代基，Y为氧或硫。　　【临床表现】　　一、急性中毒 急性中毒发病时间与毒物品种、剂量和侵入途径密切相关。经皮肤吸收中毒，一般在接触2～6d扣发病，口服毒在10min至2h内出现症状。一旦中毒症状出现后，病情迅速发展。　　（一）毒蕈碱样症状 这组症状出现最早，主要是副交感神经末梢兴奋所致，类似毒蕈碱作用，表现为平滑肌痉挛和腺体分泌增加。临床表现先有恶心、呕吐、腹痛、多汗、尚有流泪、流涕、流涎、腹泻、尿频、大小便失禁、心跳减慢和瞳孔缩小。支气管痉挛和分泌物增加、咳嗽、气急，严重患者出现肺水肿。　　（二）烟碱样症状 乙酰胆碱在横纹肌神经肌肉接头处过度蓄积和刺激，使面、眼睑、舌、四肢和全身横纹肌发生肌纤维颤动，甚至全身肌肉强直性痉挛。患者常有全身紧束和压迫感，而后发生肌力减退和瘫痪。呼吸肌麻痹引起周围性呼吸衰竭。　　交感神经节受乙酰胆碱刺激，其节后交感神经纤维末梢释放儿茶酚胺使血管收缩，引起血压增高、心跳加快和心律失常。　　（三）中枢神经系统症状 中枢神经系统受乙酰胆碱刺激后有头晕、头痛、疲乏、共济失调、烦躁不安、诡妄、抽搐和昏迷。　　乐果和马拉硫磷口服中毒后，经急救后临床症状好转，可在数日至一周后突然再次昏迷，甚至发生肺水肿或突然死亡。症状复发可能与残留在皮肤、毛发和胄肠道的有机磷杀虫药重新吸收或解毒药停用过早或其他尚未阐明的机制所致。　　急性中毒可分为三级：①轻度中毒：有头晕、头痛、恶心、呕吐、多汗、胸闷、视力模糊、无力、瞳孔缩小。②中度中毒：除上述症状外，还有肌纤维颤动、瞳孔明显缩小、轻度呼吸困难、流涎、腹痛、腹演、步态蹒跚，意识清楚。③重度中毒：除上述症状外，并出现昏迷、肺水肿、呼吸麻痹、脑水肿。　　急性中毒一般无后遗症。个另患者在急性重并中毒症状消失后2～3周可发生迟发性神经病，主要累及肢体末端，且可发生下肢瘫痪、四肢肌肉萎缩等神经系统症状。目前许可证为这种病变不是由胆碱酯酶受抑制引起的，可能是由于有机磷杀虫药抑制神经靶酯酶（NTE，原称神经毒酯酶）并使其老化所致。　　在急性中毒症状缓解后和迟发性神经病发病前，一般在急必中毒后24～96d突然发生死亡，称“中间型综合征”。其发病机制与胆碱酯酶受到长期抑制，影响神经-肌肉接头处突触后的功能。死亡前可先有颈、上肢和呼吸肌麻痹、上肢和呼吸肌麻痹。累及颅神经者，出现睑下垂、眼外展障碍和面瘫。　　二、局部损害 敌敌畏、敌百虫、对硫磷、内吸磷接触皮肤后可引起过敏性皮炎，并可出现水泡和脱皮。有机磷杀虫药滴入眼部可引起结合膜充血和瞳孔缩小。　　【治疗】　　一、迅速清除毒物 立刻离开现场，脱去污染的衣肥，用肥皂水清洗污染的皮肤、毛发和指甲。口服中毒者用清水、2%碳酸氢钠溶液（敌百虫忌用）或1：5000高锰酸钾溶液（对硫磷忌用）反复洗胄，直至洗清为止。然后再给硫酸钠导泻。眼部污染可用2%碳酸氢钠溶液或生理盐水冲洗。在迅速清除毒物的同时，应争取时间及早用有机磷解毒药治疗，以挽救生命和缓解中毒症状。　　二、解毒药的使用　　（一）胆碱酯酶复活药 肟类化合物能使被抑制的胆碱酯酶恢复活性。其原理是肟类化合物的吡啶环中的氮带正电荷，能被磷酰化胆碱酯酶的阴离子部位所吸引；而其肟基与磷原子有较强的亲和力，因而可与磷酰化胆碱酯酶中的磷形成结合物，使其与胆碱酯酶的酯解部位分离，从而恢复了乙酰胆碱酯酶中的磷形成结合物，使其与胆碱酯酶的酯解部位分离，从而恢复了乙酰胆碱酯酶活力。常用的药物有①解磷定（pyraloxime methiodide,PAM-1）和氯磷定（pyraloxime methylchloride,PAM-Cl）,h此外还有双复磷（obidoxime chloride ,DMO4）和双解磷（trimedoxime,TMB4）。　　胆碱酯酶复活药对解除烟碱样毒作用较为明显，但对各种有机磷杀虫药中毒的疗效并不完全相同，解磷定和氯磷定对内吸磷、对硫磷、甲胺磷、甲拌磷等中毒的疗效好，对敌百虫、敌敌畏等中毒疗效差，对乐果和马拉硫磷中毒疗效可疑。双复磷对敌敌畏及敌敌百虫毒效果较解磷定为好。胆碱酯酶复活药对已老化的胆碱酯酶无复活作用，因此对慢性胆碱酯酶抑制的疗效不理想。对胆碱酯酶复活药疗效不好的患乾，应以阿托品治疗为主或二药合用。　　胆碱酯酶复活药使用后的副作用有短暂的眩晕、视为模糊的复视、血压升高等。用量过大，可引起癫痫样发作和抑制胆碱酯酶活力。解磷定在剂量较大时，尚有口苦、咽痛、恶心。注射速度过快可导致暂时性呼吸抑制。双复磷副作用较明显，有口周、四肢及全身发新村的灼热感，恶心、呕吐和颜面潮红。剂量过大可引起室性早搏和传导阻滞。个别患者发生中毒性肝病。　　（二）抗胆碱药阿托品 阿托品有阻断乙酰胆碱对副交感神经和中枢神经系统毒蕈碱受体的作用，对缓解毒蕈碱样症状和对抗呼吸中枢抑制有效，但对烟碱样症状和恢复胆碱酯酶活力没有作用。阿托品剂量可根据病情每10～30min或1～2d给药一次，直到毒蕈碱样症状明显好转或患者出现“阿托品化”表现为止。阿托品化即临床出现瞳孔较前扩大、口干、皮肤干燥和颜面潮红、肺湿啰音消失及心律加快。即应减少可托品剂量或停用。如出现瞳孔扩大、神志模糊、狂躁不安、抽搐、昏迷和尿潴留等，提示阿托品中毒，应停用阿托品。对有心动过速及高热患者，阿托品应慎用。在阿托品应用过程中应密切观察患者全身反应和瞳孔大小，并随时调整剂量。　　有机磷杀虫药中毒的治疗最理想是胆碱酯酶复活药与阿托品二药合用。轻度中毒亦可单独使用胆碱酯酶复活药。两种解毒药合用时，阿托品的剂量应减少，以免发生阿托品中毒。　　三、对症治疗 有机磷杀虫药中毒主要的死因是肺水肿、呼吸肌瘫痪或呼吸中枢衰竭。休克、急性脑水肿、心肌损害及心跳骤停等亦是重要死因。因此，对症治疗应以维持正常呼吸功能为重点，例如保持呼吸道通畅，给氧或应用人工呼吸器。肺水肿用阿托品。休克用升压药，脑水肿应用脱水剂和肾上腺糖皮质激素，以及按情况及时应用抗心律失常药物等。危重病人可用输血疗法。为了防止病情复发，重度中毒患者，中毒症状缓解后应逐步减少解毒药用量，直至症状消失后停药，一般至少观察3～7。

一、农药分类 农药是用于防治危害农作物及农副产品的病虫害、杂草及其他有害生物的化学药剂的统称。其分类方法有多种，常见的几种分类如下： 1、 根据防治对象的不同，分为杀虫剂、杀螨剂、杀菌剂、除草剂、杀鼠剂等。常将防治害虫的称为杀虫剂，防治红蜘蛛的称为杀螨剂，防治作物真菌、细菌及病毒的称为杀菌剂，防治杂草的称为除草剂，防治鼠类的称为杀鼠剂。 2、 根据农药的作用方式分为胃毒剂、触杀剂、熏蒸剂、内吸剂、引诱剂、驱避剂、拒食剂、不育剂等。 3、 根据农药的化学组成和结构可分为有机农药和无机农药两大类。农药中除少部分的无机物外，大部分都为有机化合物，其中有元素有机化合物、金属有机化合物及一般有机化合物之分。我们所测试的有机磷属于元素有机化合物之类。 另外还有根据农药的来源、农药的使用方法、防治原理等来分类。 二、生化分析适用于什么农药 绝大多数化学农药之所以能杀虫、螨、或者有效的主要原因就在于它们对生物内的靶酶有不同程度的抑制作用。因此，利用生化分析测试的农药应该是生物体内某种酶的抑制剂（激活剂），使得这些酶失去正常的生理作用，从而使生物表现出中毒的症状。当然，基于目前的研究水平，有些农药虽然知道它对某种酶有不利的影响，但是该酶的提取，保存等因素的原因也制约着用生化方法来测试该种农药。所以虽然生物体内酶的种类很多，化学农药作用原理也大多基于对生物体内酶的作用，但利用生化分析的农药种类并不多。 三、测试农药残留有哪些方法 农药残留的测试方法，总的来说可以分为常规测试方法和速测方法。常规的测试方法有气 象色谱、凝胶色谱及薄层色谱法。这些方法都是利用农药在不同载体中的分配系数不同而得到分离，从而定性和定量来测试农药的种类及含量。速测方法主要有速测卡法和酶抑制率法两种。无论是速测卡法还是酶抑制率法，其都是利用酶活性被抑制原理。 四、乙酰胆碱酯酶对乙酰胆碱的作用原理 乙酰胆碱酯酶和乙酰胆碱作用时，首先形成一个酶底物的络合物，接着乙酰胆碱上的酰基转移到酶分子上,形成乙酰化酯酶。乙酰化酯酶很不稳定，极易水解，其半衰期约为0.1毫秒。乙酰化酯酶水解后又释放出酶分子，从而使酶复活，再循环利用。 五、有机磷及氨基甲酸酯类农药对乙酰胆碱酯酶的抑制过程，什么是可逆抑制 有机磷及氨基甲酸酯类农药是乙酰胆碱酯酶的底物胆碱酯的结构类似物。它们同乙酰胆碱酯酶作用时，首先形成非共价的中间复合物，然后被水解，水解的同时，磷酰基与胆碱酯酶活性中心丝氨酸羟基作用生成以共价结合的磷酰化酶。磷酰化酶中的磷酰化基很难水解，所以磷酰化酶很稳定，其稳定性是乙酰化酶的107倍以上。因此，可以说有机磷对乙酰胆碱酯酶的抑制是不可逆的。不可逆抑制是指抑制剂与酶分子上的某些基团以牢固的共价键结合使酶失活，它的特点是随时间的延长会逐渐的增加抑制，最后达到完全抑制。而可逆抑制是指抑制剂与酶分子结合是可逆的，不会产生不可逆的共价修饰等作用。 六、米氏常数的含义 米氏常数km表示酶与底物的复合物的离解常数，每一种酶对于特定的底物，都有自己特定 的km。1/km称为酶与底物结合的亲和常数。米氏常数也可以定量为在一定的酶浓度下，酶触反应速度为最大反应速度一半时底物的浓度。 七、预反应过程中，影响农药对乙酰胆碱酯酶的抑制率的因素 农药对乙酰胆碱酯酶的抑制率的大小主要取决于农药的分子结构。当农药分子中含有起作用的强吸电子基团时，磷酰基与乙酰胆碱酯酶的丝氨酸羟基就愈容易结合，在一定时间内，抑制率就愈大。当然，对于一定的农药，在预反应中，抑制环境温度和抑制时间及农药浓度等都是影响抑制率大小的因素。所以在预反应中，应尽可能地保证环境温度、抑制时间以及农药浓度的一致。有些农药刚配制好时测试的抑制率较大，几天后同样农药同样条件再测试时可能抑制率又降低，这就是因为部分农药已经降解，起不到抑制作用所致。 八、预反应结束后，影响抑制率测定的因素 酶抑制率法测试农药残留的过程中，预反应完成后，再加入底物进行显色反应。测试根据为体系中颜色变化的情况来决定抑制率的大些所以在测试一批待测样时，加入底物和上机测试的过程应尽量快，且加入底物的量一定要一致，也不得有任何溶液的损失，否则测出的数据时不可靠的。 九、试样提取中应该注意些什么 有些果蔬如葱、蒜、萝卜、韭菜、芹菜、香菜、茭白、蘑菇、番茄等中含有对酶有影响的植物次生质，有些蔬菜中叶绿素的含量太高，影响比色反应。所以对于以上种类的果蔬，应尽可能的采取整株（体）浸提的办法来消除干扰。另外，由于同一株（个）待测样品，其不同部位的农药含量不同，因此，进行重复性测试时，最好为同一个待测液的不同次数测定，否则可能会出现因取样不同出现重现性不好的情况。 十、药剂应怎样保存 酶抑制率测试法所用的试剂大多为生化试剂，因此它们的保存条件较为苛刻。对于粉剂化的酶及底物应保存在-20℃环境中。对于已经配制成溶液的药剂如酶液、底物溶液、显色剂溶液等应置于0-4℃环境中保存。而浸提剂无论配制成溶液与否，在常下密封保存即可。 十一、国家对农药残留速测有哪些指标，其测试方法有哪几类 目前国家对农药残留速测出台的标准有《中华人民共和国国家标准》和《中华人民共和国农业行业标准》两个标准。这两个标准规定了测试结果的判断标准及以及常见农药如甲胺磷、氧化乐果、克百威、敌敌畏等农药的最低检出限。不同的标准，根据所用酶的种类及方法，规定的各种农药的检出限量和判断标准也不同。例如，农业行业标准判断依据为抑制率大于70%时不合格，而国标有规定抑制率大于50%为不合格，有规定吸光度值大于0.9为不合格。两种标准所使用的方法都是利用酶被农药抑制，活性降低原理。其中国家标准中，有使用乙酰胆碱酯酶，也有使用植物酯酶—面粉酶，而行业标准则使用的是丁酰胆碱酯酶。 十二、本残留仪的主要特点有哪些 1. 强大的测试功能：具有生化分析和理化分析两种功能，从其测试项目来看，它既能测农残，还能测试重金属和亚硝酸盐，土壤各种养分。 2. 适应多种测试方法：可以适于国家标准、行业标准、地方标准等规定的各种不同的测试方法，如酶抑制法、酶抑制率法、吸光度法，动力学法或终止反应法。 3. 完备的测试条件保证：生化分析受温度影响极大，要求在恒温下进行预反应，.本残留仪从功能上来看，它不但具有测试功能，而且还有恒温水浴，定时等功能。保证预反应条件、提高精确度；另外，使用本仪器很方便，不用调整波长，只需按键就能选择自己所需的测试波长。 4. 灵活可任意设置的用户平台：本仪器的有关测试参数可以根据用户选用的酶源、方法和标准或者所测试的蔬菜种类等客观要求来自行设置。该仪器是目前国内唯一兼具科学实验功能的且适应性最宽农药残留速测仪。 5. 测试通道多，测试效率高：结果不用人工计算，仪器自动判断一目了然。 6. 汉字显示，宽屏幕，界面友好，便于使用。

我们是一家经销商，主要做农业系统的仪器，我主要负责仪器安装及培训，就当前遇到的问题与大家讨论一下。现在检测农残方面主要是农业部门，检测方法也多以速测为主，多做初筛来用，接触时间长了就发现很多厂家的仪器标准不一，比如：有的厂家推荐用乙酰胆碱酯酶国标中是乙酰胆碱酯酶，但有的推荐用丁酰胆碱酯酶，查找了一些资料说丁酰胆碱酯酶灵敏度要比乙酰胆碱酯酶高，但是无论是哪种酶，文献上所说的最佳反应条件大概是温度37-40，时间大概10分钟，但是现实当中厂家仪器都推荐在室温下，反应1-3分钟。。。等等问题吧，这些公说公有理婆说婆有理的厂家让人一时摸不着头脑，感觉农残速测领域让人很怀疑他的可靠性。希望大家都各抒己见讨论下。

根据土壤环境质量GB 15618-1995；有机物 GB/T 5750-2006等，酶标仪可以应用如下：无机污染物：1）硝酸盐NO3(-)和亚硝酸盐NO2(-)的含量；光吸收2）硫酸盐；光吸收3）氯化物；光吸收4）氰化物；光吸收5）重金属离子（铬、砷）； 光吸收有机污染物:1）苯并芘；光吸收2）苯胺类化合物；光吸收3）有机磷农药残留；光吸收动力学 法（乙酰胆碱酯酶）4）其他农药；ELISA5) 兽药残留(①抗生素类;②驱肠虫药类;③生长促进剂类;④抗原虫药类;⑤灭锥虫药类;⑥镇静剂类;⑦β-肾上腺素能受体阻断剂) ELISA微生物病原菌:1)TRF法检测大肠杆菌O157:H7（环境和食品）；TRF1） 内毒素检测重要性：细菌内毒素是革兰氏阴性菌细胞壁上的一种脂多糖（LPS）和蛋白的复合物，当细菌死亡或自溶后便会释放出内毒素。内毒素大量进入血液就会引起发热反应—“热原反应”。 因此，快速检测血液、脏器内毒素含量可以为临床相关疾病的诊断预后提供参考。2） 内毒素检测方法（鲎试剂法）： 动态浊度法；光吸收 终点显色法；光吸收 动态显色法；光吸收

有谁做过磷脂酰胆碱的啊？请问色谱条件是什么？用的是硅胶柱还是C18柱？我用硅胶柱做的时候标准品怎么会出现两个峰啊？

日前，蓬莱市京蓬生物药业股份有限公司研制生产的“快速检测农药残留的乙酰胆碱酯酶检测仪”通过省科技厅鉴定，农药检测仪及脱水机达到国内领先水平，均填补国内空白。来自：农村大众

[size=18px]　　农产品检测仪检测原理　　农产品检测仪的检测原理主要可以归纳为以下几种：　　一、光学原理　　测量光在物质中的传输特性：农产品检测仪中的光学系统通过测量光在物质中的传输特性来检测农产品中的农药残留。这个过程包括光源照射农产品表面，样品吸收部分光线并反射部分光线。　　光电转换：经过透镜聚焦后的光线进入检测器，被检测器转化为电信号。　　信号处理：电信号经过处理，由计算机系统转化为数字信号。　　结果分析：通过比对和分析这些数字信号，可以得出农产品中农药残留的含量。　　二、化学原理　　样品前处理：涉及样品分散、去杂、分储等步骤，目的是为后续的化学分析做好准备。　　农药提取：将农产品中的化学成分(如农药)提取出来。　　蒸发浓缩：将提取得到的溶液浓缩至一定体积，便于后续分析。　　色谱分析：依据成分的物理化学特性分离并检测成分。通过色谱分析，可以准确检测出农产品中的农药残留。　　三、酶抑制率法　　抑制原理：基于有机磷和氨基甲酸酯类农药可以抑制昆虫神经中枢和四周神经系统中乙酰胆碱酯酶的活性。这种抑制率与农药浓度呈正相关。　　反应过程：在正常情况下，酶催化神经传导代谢产物(乙酰胆碱)水解，其水解产物与显色剂反应，产生黄色物质。当存在农药残留时，酶的活性受到抑制，导致产生的黄色物质减少。　　结果判定：通过测量吸光度随时间的变化值，计算出抑制率，从而判断出样品中是否含有有机磷或氨基甲酸酯类农药的残留。　　四、光电比色法　　光电比色法是在一定条件下，通过测量样品中特定物质的吸光度来定量分析其含量。在农药残留检测中，它主要用于检测有机磷和氨基甲酸酯类农药对胆碱酯酶的抑制程度，从而判断农药残留情况。　　总结：农产品检测仪的检测原理主要基于光学原理、化学原理和酶抑制率法等多种方法。通过这些方法的综合运用，可以实现对农产品中农药残留的快速、准确检测，为农产品安全提供有力保障。[/size]

如果用L-半胱氨酸，理论上它的羧基与乙酰胆碱酯酶的羟基结合，巯基与纳米金粒子结合，但具体先与哪个基团结合？怎样保护另一个基团不被破坏？具体操作？有谁知道请指点一下!谢谢！

考生饮食：补充大脑活动所需的营养成分，以水溶性维生素和磷脂最为重要。磷脂是与记忆有关的神经递质乙酰胆碱的合成原料，在蛋黄、大豆中最为丰富。