微生物空样器

实验室里面有很多微生物培养箱，它自身已经是有温度指示器，再用一个数显温度计监控温度是否多余。且培养箱温度一般要求±1℃，大多数显温度计还达不到这个要求，这样监控温度意义是否不大？再者，我们会做期间核查监控培养箱温度，还要期间核查买的温度计，增加工作量。感觉温度监控是否可以直接看培养箱上面的温度指示器，而不需要额外买数显温度计，这样做合规吗？

现在做生物传感器的，生物芯片的，微流控芯片的人非常多，有的时候觉得大家对于这些东西的界限似乎不是分得很开，希望自己对于这个领域的小小体会能够给大家帮助！生物传感器：利用生物元件（酶、核酸、细胞、组织等）对特定物质的生物识别功能，通过将这种识别转化成声光电磁信号，对该物质进行分析的器件。个人感觉现在做生物传感器大部分局限在电化学上面，可能是因为电化学的仪器比较容易集成。生物芯片/微流控芯片：似乎现在有的人对于生物芯片与微流控芯片的区别不是很明白，特此将比较一下两者的区别：生物芯片和微阵列芯片的意思应该是一样的，但是生物芯片并不是一个被广大学者认同的名词，主要是一些媒体在报道的时候为了简单和通俗使用了这个词，所以专业上来讲，生物芯片应该叫做微阵列芯片。其发展历史比较悠久，而且现在已经有商品化的产品。微流控芯片是通过微加工的方法制作出微米级别的通道，通过通道的设计将分析的各种基本过程如样品前处理，分离，分析检出集成在一个小小的基片上，她也叫做芯片实验室。这个的发展要晚于微阵列芯片，现在有很多的研究不仅仅局限在分析化学领域。对于微尺度上的流体行为，流体的操作也是物理学研究的热点，是一个交叉了物理、化学、生物、计算机、微加工等领域的学科。国内做的比较好的是浙江大学的方肇伦院士，国外有很多组，以后我会不断增加！

对于微生物培养，大家常用的是恒温培养箱、霉菌培养箱、震荡培养箱、恒温水浴箱、发酵罐等，满足了日常工作需要；当然，这都是针对好氧菌而言。 而对于厌氧菌和兼性好氧菌，则需要考虑选用合适的厌氧、微好氧/低氧培养装置（如厌氧培养盒/袋、厌氧罐以及专业的厌氧培养箱、厌氧工作站、微好氧/低氧培养箱、厌氧发酵罐/反应池等）。 常规的动物细胞培养，一般选用CO2培养箱、滚瓶培养装置、悬浮培养装置、生物反应器/细胞培养罐等。为更接近或模拟体内微环境，三气培养箱（即CO2培养箱加配O2传感器）逐渐为人们所熟知！当然，更专业的Biospherix 系列O2/CO2控制器加培养盒、H35微好氧/低氧细胞培养箱、X vivo 一体化细胞工作站等三气培养装置也给大家提供了更多的选择！

微生物控制验证计划1 范围本标准规定了公司生产过程中的微生物控制要求以及验证计划。本标准适用于公司食品生产过程中对微生物控制的验证活动。2 规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本均适用于本标准。GB 5749 生活饮用水卫生标准GB 14881 食品企业通用卫生规范GB 15980 一次性使用医疗用品卫生标准GB 4789.2 食品安全国家标准 食品微生物学检验 菌落总数测定GB 4789.3 食品安全国家标准 食品微生物学检验 大肠菌群计数GB 4789.10食品安全国家标准 食品微生物学检验 金黄色葡萄球菌检验GB 4789.15食品安全国家标准 食品微生物学检验 霉菌和酵母计数Q/QL G06.034-2011 卫生标准操作程序（SSOP）3 职责工厂品管部对车间卫生状况进行监控，定期开展微生物验证，并根据检验结果对车间卫生进行管控，必要时，委托化验室抽样检测。4 术语与定义4.1食品接触面 指生产过程中与所生产食品直接接触的设备、工器具、人、水、空气、包材等；或间接接触的门把手、电源开关等。

老百姓对自己吃的食品越来越关注，包子馒头、速冻水饼等等，而利用臭氧来对食品微生物进行杀灭控制就是基础的卫生知识。 近年来，臭氧迅速用于食品加工业，特别是车间空气消毒灭菌，效果十分显著；臭氧对食品原材料、包装容器、管路、设备的消毒也取得令人满意的效果。 臭氧是一种强氧化剂，灭菌过程属于生物化学氧化反应，灭菌原理是：氧化分解细菌内部葡萄糖代谢所需的酶，使细菌失活死亡；渗透胞膜组织，侵入细胞膜内，作用于外膜的脂蛋白和内部的脂多糖，使细菌发生通透性畸变，溶解死亡；直接与细菌病毒作用，破坏它们的细胞器和DNA、RNA、使细菌的新陈代谢受到破坏，导致其死亡。臭氧灭菌属溶菌级，杀菌彻底，同时还具有很强的除霉、腥、臭等异味的功能。臭氧机能迅速弥漫到整个灭菌空间，无死角，很快自行分解并结合成氧分子，不存在任何残留，它是无污染的环保型灭菌剂。 以臭氧对空间消毒，效果显著，在室温15oC、湿度73％、臭氧浓度0.08-0.6ppm时，维持30分钟，可杀灭空气中的99.99％白色葡萄球菌；臭氧对大肠杆菌的杀灭率为100％；对金黄色葡萄球菌的杀灭率为95.9％；对绿脓杆菌的杀灭率为89.8％；以每立方米5.5毫克的臭氧作用45分钟，可将100毫升塑料瓶内滴染的枯草杆菌黑色变种芽胞100％地杀灭；在1立方米试验柜内，每小时开启500毫克的臭氧发生器60分钟，对空气中的枯草杆菌黑色变种芽胞杀灭率99.95％；臭氧浓度13.6mg/m3时使用30分钟，使乙型肝炎表面抗原破坏99.99％。 食品需要经过发酵、酿造、加工、灌封、包装等一系列的生产工艺，在过去只注意食品内容物和灌包装容器的灭菌，主要是加热灭菌，对环境空气的灭菌传统做法是化学熏蒸和紫外线照射，这些灭菌方法，都存在杀菌不彻底，有死角，工作量大，有化学残留污染，有异味等缺陷。还有对于来自空气的污染被轻视了，使加工好的食品在冷却、包装等工序再次染菌，至今已研究了2000多种食品的变质现象，变质的原因菌，污染源的90%是以某种形态存在的空中浮游微生物造成，在食品生产中，严格控制细菌超标是食品加工业首要关注的问题。 臭氧对几乎所有病菌、霉菌、真菌及原虫，卵囊都有明显的灭活效果，并可以破坏肉毒杆菌毒素。臭氧的灭菌速度极快，是氯的300～600倍，紫外线的3000倍。臭氧的高氧化还原电位，决定了它在氧化、脱色、除味、保鲜方面的应用。臭氧溶解于水中，能消杀水中对人体的有害物质，如铁、锰、铬、铅、氧化物等，还可以分解有机物及灭藻。 我国现在对食品行业实行QS质量安全认证，强调食品的安全性。食品生产、包装车间的空气灭菌做为关键控制点，会得到食品生产厂的高度重视，例如对车间的空间灭菌过程中，采用了先进的臭氧杀菌设备。我国食品要参与国际竞争，就必须提高卫生质量，完善食品安全质量保证体系，达到HACCP标准，臭氧将会发挥强有力的作用。

求《微生物干粉培养基质控图解手册》，还有《常见细菌及检验实用技术》，都是陆桥出版微生物检测技术工具书。

微生物培养的仪器问题对于微生物的研究，拥有大量的实验材料是十分必要的，这就需要进行微生物的培养。而且，对于某些微生物病原体的检测，也是需要进行微生物的培养。所以微生物培养用的培养基的制作也就成为了最基本的实验技术。 然而现今培养基已经可以工业化生产，技术也比较成熟，也就对培养基不是那么重视了。常识性的，培养基分为天然的（Defined Media）和合成的（Complex Media） 。天然培养基是提供接近于微生物生长的自然环境的营养物质，然而为此付出的代价是我们并不完全清楚其中的物质的组成或其含量，这种培养基可以用于实验用基本培养基和生产，但在作某些实验时得到的数据会不稳定。合成的培养基是用多种高纯化学试剂配制成的，各种成分和含量都是已知的。虽然制作成本高，也很烦琐，但成分精确，重复性强，用于对于营养、代谢、生理生化特性的研究等要求较高的工作。然而可以在这种微生物培养基上生长的微生物十分有限，原应是许多微生物的生长代谢我们并不完全了解，无法配出微生物满意的营养基质。现在的微生物培养技术已经相当成熟了，然而其中总有令人不满的地方。比如，无论何时空气中总有微生物，无论是制作培养基过程中还是将微生物接种到培养基上时总会和空气接触，很容易想到不久后长出的菌落到底是谁的，样品的？还是空气的？这些也许是无法避免的，但确实会带来很多麻烦。整个过程充满着失败的可能性，没有先进的仪器设备就无法降低这种可能性，对于研究这种时时处处在身边的小东西我们总显得有点力不从心。用铁丝接种环划线就很容易弄坏培养基，更别说分离出单菌落了。这需要经验和技术，对于一个研究微生物的人来说本不该去关心的经验和技术。前人也许是这样的，但我们未必也需要这样。对于无法用肉眼观察的东西，研究和培养是很困难的，尤其是没有先进的仪器设备的时候，那种痛苦是可想而知的。我们现在用的固体培养基大都是用琼脂。在琼脂发现以前，想要做细菌的纯培养是非常困难的，那时候只有液体培养基，根本无法进行纯培养。后来用凝胶培养基，但很多细菌都无法在基质上正常生长，直到琼脂被用来做固体培养基的基质，才解决了这个难题。应为琼脂是多聚糖的硫酸盐，其中主要是D-半乳糖，一般微生物很难分解利用它。这在微生物培养上是一次很大的革新。由于材料容易获得，而且本身的特性又很好，所以至今仍在使用。然而，微生物的培养依旧受到很大限制。我们对微生物的了解还不够多，许多微生物的培养只能用天然培养基，这在要求可重复的实验中会带来很大的麻烦；另外，条件的限制导致很多实验都无法达到无菌环境，实验结果有多少是可靠的，很难说明。微生物的培养只是一种手段，但却是一种很重要的手段。虽然只要能说明研究成果就可以了，但在实际操作中也确实有着非常繁琐，难以操作的地方存在，只要做过微生物培养的实验便可以知道，想要做出漂亮的结果是非常困难的，其中需要改进的地方有很多，比如有没有办法就算再不是无菌的环境下也能尽量减少空气中细菌的干扰，可不可以用更柔软的材料做接种环来划线，有没有其他的方法来给涂布棒灭菌。不然实验失败很难找出其中的原因。虽然实验失败的可能性很多，但我们至少应该减少它发生的可能性。微生物培养基是微生物实验必不可少的组成，它以及与它有关的组成构成了微生物培养的装置，这些仪器和操作中的不确定因素太多，这样做出的实验结果是没有说服力的。这些仪器和操作有待于改进。（因为我的基础太差，所以无法指出其中需要改进的地方到底应该改成怎样，但已经明显体会到了这些仪器以及操作的不足之处。）

1主题内容和适用范围1．1主题内容本标准规定了测定水和污水中生化需氧量（BOD）的微生物传感器快速测定法。本标准规定的生物化学需氧量是指水和污水中溶解性可生化降解有机物在微生物作用下所消耗溶解氧的量。1．2适用范围本标准适用于地表水、生活污水和不含对微生物有明显毒害作用的工业废水中BOD的测定。的测定。 1．3干扰及消除水中以下物质对本方法测定不产生明显干扰的最大允许量为：Co2+5mg/l；Mn2+5mg/l；Zn2+4mg/l；Fe2+5mg/l；Cu2+2mg/l；Hg2+2mg/l ；Pb2+5mg/l；Cd2+5mg/l；Cr6+0.5mg/l；CN-0.05mg/l；悬浮物250mg/l。对含有游离氯或结合氯的样品可加入1.575g/l的亚硫酸钠溶液使样品中游离氯或结合氯失效，应避免添加过量，对微生物膜内菌种有毒害作用的高浓度杀菌剂、农药类的污水不适用本测定方法。 2术语2．1生化需氧量在一定条件下，微生物分解存在于水中的某些可被氧化物质，特别是有机物所进行的生物化学过程中消耗溶解氧的量。2．2微生物菌膜将丝孢酵母菌在保持其生理机能的状态下封入膜中，称之为微生物菌膜或固定化微生物膜。2．3微生物传感器微生物传感器是由氧电极和固定化微生物膜组成。可检测微生物在降解有机物时引起的氧浓度的变化。2．4流通式水样或清洗液在蠕动泵的作用下连续不断的将样品或清洗液在单位时间内按一定量比送入测量池中。2．5间断式（加入式）将缓冲溶液加入到测量池中，使微生物传感器（微生物菌膜）与缓冲溶液保持接触状态，然后加入定量的被测水样，测得被测水样的BOD值。2．6恒温控制装置微生物电极的反应性能依赖于一定的温度条件，因此要求在试验过程中要有一稳定的温场，该装置在仪器中称之为恒温控制装置。2．7清洗液（缓冲溶液）清洗液是由磷酸二氢钾和磷酸氢二钠配置而成。其主要作用是作为缓冲液调节样品的PH值，清洗和维持微生物传感器使其正常工作，并具有沉降重金属离子的作用。 3原理测定水中BOD的微生物传感器是由氧电极和微生物菌膜构成，其原理是当含有饱和溶解氧的样品进入流通池中于微生物传感器接触，样品中溶解性可生化降解的有机物受到微生物菌膜中菌种的作用，而消耗一定的氧，使扩散的氧电极表面上氧的质量减少。当样品中可生化降解的有机物向菌膜扩散速度（质量）达到恒定时，此时扩散到氧电极表面上氧的质量也达到恒定，因此产生一个恒定电流。由于恒定电流的差值与氧的减少量存在定量关系，据此可换算出样品中生化需氧量。 4试剂分析纯试剂和蒸馏水，蒸馏水使用前应煮沸2-5min左右，放置室

食品车间环境微生物失控怎么办一，食品加工过程微生物监控参考食品生产通用卫生规范 GB14881-2013的要求，食品加工过程中的微生物监控情况如下：从上表可以看出食品接触面、临近食品接触面及环境空气是监控重点，食品厂应该按照规定频率进行微生物检测，并且结合实际情况确定监控限值二，环境微生物失控车间的产品出现了批量微生物不合格，直接影响了成品的质量，环境表面检测多处不合格，这种情况即出现了微生物失控的情况三，原因分析及如何解决1、如果是成品的微生物不合格，应该根据车间生产工艺向前追溯查找，车间前面的半成品生产工序是否有微生物不合格，通过半成品分工序取样检测，确定半成品污染的环节。进而确定此环节半成品污染的原因，确定解决办法。2、通过表面环境微生物检测查找可能的污染源通过对车间的重点工序表面进行取样检测，对重点环节的食品接触面进行取样，进行微生物实验，确定污染的环节，进行重点清洗消毒3、车间整体大环境空间内有气溶胶或液溶胶附着了微生物，导致气融胶或液溶胶附着在产品或食品接触面上，导致产品被污染，引起了成品的微生物不合格4、确定原因后需要对被污染工序和表面进行彻底杀菌消毒（奥克泰士消毒剂）。之后取样进行跟踪验证，并且应该对整体车间大环境进行彻底消杀（奥克泰士消毒剂）四，预防控制微生物控制的根本在于预防，应该做到预防为主，防治结合。预防控制措施如下：1、原料的微生物控制，对原料进行取样检测，确定原料消毒的2、工人按照规定频率洗手消毒，消毒做到彻底，可进行表面检验验证。3、车间环境进行喷雾消毒（奥克泰士消毒剂），结合紫外灯消毒或者臭氧杀菌消毒，在车间班前或者班后按照频率进行消毒。4、食品接触面按照规定频率消毒，保证车间的接触面微生物合格。5、车间使用的设备及设备内表面进行消毒杀菌，确保设备合格，注意使用无腐蚀性的食品级消毒剂。6、根据产品生产工艺确定容易引起微生物不合格的环节，进行重点微生物控制。转

微生物培养的污染因素及预防方法随着现代生物学研究的发展，微生物培养成为了重要的实验手段之一。然而，在进行微生物培养过程中，存在着许多污染因素，这些污染因素可能会对实验结果产生影响或者导致实验结果不准确。下面将介绍一些常见的微生物培养的污染因素以及相应的预防方法。1、风速与风向培养箱内的风速和风向对于保持温度的均一性以及避免污染都非常重要。一般来说，适当的风速和风向可以帮助培养箱内的温度保持均一，有利于微生物的正常生长。然而，当风速过大时，可能会导致培养基干裂，从而影响培养结果的准确性。另外，药典要求培养皿倒置培养，这是因为经过多次验证发现，当培养箱运行时的风向与培养皿盖的朝向不一致时，容易引入空气中的灰尘、杂菌等，从而污染培养物。因此，在使用培养箱的过程中，需要注意风速和风向的控制，并尽量与培养皿盖的朝向一致。2、培养皿的密闭性培养皿由平底和盖组成，一些微生物实验室常用的培养皿直径为90mm，采用顶盖封装。然而，由于不同厂家制造的培养皿的成型工艺和参数不同，平底和盖之间的间隙也存在差异。这些间隙虽然能够满足需氧型微生物对氧气的需求，但也增加了污染的可能性。经过实验证实，在同样的培养条件下，间隙大的培养皿比间隙小的培养皿更容易受到污染。此外，间隙的大小不同还会导致培养皿内培养基的水分蒸发不一致，从而影响培养结果数据的一致性。因此，在使用培养皿的过程中，需要选择质量可靠的培养皿，并注意平底和盖之间的间隙情况。3、培养箱内的湿度微生物生长需要一定的湿度条件。湿度对微生物生长的影响是通过影响微生物细胞内水分活度进而影响其新陈代谢来实现的。不同微生物的生长对湿度有一定的要求，一般来说，细菌最为敏感，酵母和霉菌次之。降低湿度会使微生物的水分活度降低，从而减慢其生长速度。因此，在微生物培养的过程中，需要保持适宜的温度和湿度，以有利于微生物的生长。培养箱内湿度的来源主要有培养基的水分散失、湿度自动调控系统以及培养箱所在的环境。因此，在使用培养箱的过程中，需要控制湿度，保持适宜的生长环境。4、培养物溢洒培养物溢洒是指含有生物危险物质的液体或固体物质意外与包装材料分离的过程。一旦发生生物危害物品的溢出，尤其是含有病原微生物的培养物的溢出时，会导致微生物的生长和繁殖，从而引起培养箱的污染。为了预防交叉污染，当发生培养物溢洒时，需要及时清理和消毒培养箱。应该使用有效的消毒剂对培养箱的内壁以及接触溢出物品的材料进行消毒或高压灭菌。此外，如果溢洒物中含有破碎的玻璃等材料，不得直接用手取走或弃置，应该使用硬纸板和镊子等工具处理，并将处理物放置在安全的废弃物容器中。最后，对清洁工具也需要进行消毒处理，以确保卫生安全。5、自然环境污染培养箱需要放置在洁净、干燥、通风良好的自然环境中。如果环境中空气洁净度不够高，容易滋生细菌、真菌和病毒等微生物，并通过平底和盖之间的间隙污染培养基，从而影响培养结果数据的准确性。因此，在使用培养箱的过程中，需要注意放置环境的卫生和通风状况，尽量避免自然环境的污染。综上所述，微生物培养过程中存在着多种污染因素，这些因素可能会对实验结果产生影响或导致实验结果不准确。为了保证实验结果的准确性，需要在使用培养箱进行微生物培养时，注意控制风速和风向、选择合适的培养皿、控制湿度、避免培养物溢洒以及注意自然环境的卫生状况。只有这样，我们才能够获得可靠且准确的微生物培养结果。

食品工业界在继续发展现有控制微生物控制方法的同时，正研究新技术以保证食品的微生物安全，同时也为消费者提供稍需加工或不需加工的高质量食品。这些年，辐照、高强度电子场、脉冲光、紫外线、高压加工和臭氧已作为消灭微生物的非加热方法。然而，在商业上运用这些技术仅在最近几年。尽管这些新技术以及其它方法看起来能达到预期结果，但通常也受到限制而不能应用于实际生产。因此在现有食品加工中采用上述新技术时，必须理解每个方法的优点、缺点和由那些要求。一、辐照 伽玛射线 加速电子 辐射消毒（灭菌） 针对性的辐射杀菌 有选择的辐射杀菌　　辐照是消灭微生物的一种方法，通常是用来描述一个产品暴露在离子射线下的常用术语。1．伽玛射线和加速电子射线　　我们可能熟悉的一些普通形式的离子射线有Ｘ－射线，微波和紫外线，这些射线都已在食品中应用，但这部分我们将集中讨论两种其它形式的射线，伽玛射线和加速电子射线。这两种射线在消灭和减少食品中的微生物方面有着实际应用实例。　　美国FDA已批准对猪肉、牛肉、禽肉、羊肉、香料、调味品进行辐照，也可以用于水果、蔬菜和谷物。有关食品辐照的要求在21CFR PART179可以查到。　　每种技术都有自已的术语，辐照也不例外。KILOGRAY是个用于食品加工业中描述辐照量值的术语。　　影响微生物抵抗辐照的一些因素包括： 细菌的数量 细菌的类型 细菌的年龄 氧气的存在与否 食品的特征　　数量是主要的，存在的微生物越多，就需越多的射线消灭它们。　　一般而言： 芽胞比繁殖体对辐照更有抵抗性。 革兰氏阳性菌比革兰氏阴性菌对辐照更有抵抗性。 酵母比霉菌对辐照更有抵抗性。 微生物在生长期时对辐照更敏感。 生物体对辐照的敏感性在无氧时更大。 高蛋白食物和干燥食品能对微生物抵抗辐照提供更多的保护作用。　　辐照过程必须科学地设计以保证用最少量的射线最理想的减少微生物。2．辐射消毒（灭菌）　　辐射消毒（灭菌）类似商业无菌。食品暴露在30～40千戈瑞之间的射线水平下被认为是商业无菌消毒。　　暴露在2.5～10千戈瑞辐照水平将消除大部分食物的所有病原菌的繁殖体。这种辐照水平称为针对性辐射杀菌，类似于巴氏杀菌。　　暴露在0.75～2.5千戈瑞辐照水平将消灭大部分食物中的腐败性微生物。这个过程称为有选择的辐射杀菌。　　钴60或铯137　　食品的商业辐射通常取决于伽玛射线和加速电子。伽玛射线辐照是用钴60或铯137作为射线源来进行的。　　用钴60为辐照源的设备适合大批量产品的辐照，提供伽玛射线的钴棒，约有一支铅笔大，贮存在深约30英尺的去离子水的防护池的中心。钴辐照用10英尺厚的混凝土墙，且用一个系统复杂的锁和其他安全措施以保护员工们及防止其他外界射线进来。自外运来的食品，送到周围暴露放射源料的固定位置。对暴露的食品射击线量值由对伽玛射线源暴露的单位部分的存放时间而定。 　　用铯为伽玛源的设备可以是小型的，含自我保护装置，而不需要外部防护。伽玛源的防护用钢作单元部分而组成的，这个单元被用来设计以处理一盘食品。当食品放在地上封闭的辐照源的房间里，带有铯的板会从地下室移上来在要处理食品的周围。　　伽玛射线的优点在于伽玛射线事实上可以穿透所有材料并且能完成对厚的食品的辐照。　　认可的辐照机构必须建立科学的伽玛射线辐照程序。 这是FDA法规的要求，21CFR PART139----食品生产、加工和处理的辐照。应严格按照确定的程序进行，且应仔细监控。关键控制点包括辐照暴露的时间，辐照源的定位和产品装运方式，钴60随时间衰变，要确定产品暴露时间必须计算这种辐照源衰变期。最后，必须正确处理对射线敏感的可见指示器具和剂量仪器，并作为公司质量保证计划的一部分。　　伽玛射线系统也有不足之处。辐照不能直接用于存放在特定区域的已包装好的食品。这些系统设计用作连续操作且无法关掉辐照源。伽玛射线系统很贵且有辐照源的处理，安全和有关环境的问题。3．电子束设备　　用于电子束的设备通常不如伽玛射线设备应用广泛，他们适合处理单个的或小批量产品的辐照。电子束的优点是辐照能直接射向食品的具体区域----象种X射线仪-----以具体部位为目标。这种方法暴露在射线敏感区域的射线最少。当不用时，可以关掉电子束，且不存在处理有关危害废物的问题。　　然而，象伽玛辐照过程一样，认可的辐照机构也必须确定电子束处理程序。必须确定关键处理参数并加以控制。这包括发射速度，电子束特征和产品装运方式。对关键控制的要求与伽玛辐照相似。　　用电子束也有一些不足之处，穿透厚的产品受限，使该过程对许多类型的食品不适合。　　一些食品由于会改变风味、结构或其他质量特征，既不能暴露在伽玛射线，也不能在电子束下。所需的营养成分的丢失也是个问题，尤其是维生素B1对射线非常敏感。辐照能导致射线副产品的产生，称为射线性化合物。这些副产品被认为是食品添加剂，必须评估其是否安全。　　最后，食品使用辐照要求被辐照的食品通过标签或其它适当地标识说明经过辐照。辐照杀死微生物的优缺点 优 点 缺 点 对所有类型微生物都有效 可能比其他现有技术更昂贵 可能对一些热敏感食品损坏较少 可能引起食品的变化且必须被认可在产品上作食品添加剂 将延长产品的货架期 伽玛射线设备可能引起安全及环境问题 伽玛射线能穿透厚的材料，能处理大包装的产品 电子束不能穿透厚的产品 必须克服公众对辐照的认识

微生物知识、消毒与灭菌知识填空试题一、填空题（每空2分、共50分）1．微生物（microorganism, microbe）是一些肉眼看不见的 的总称。2．微生物按其结构、化学组成及生活习性等差异可分成三大类： 、 、 。　3．微生物的形态结构： 、 、 、 、 。　4．微生物的营养包括： 、 、 、 、 。　5．对______ 和______ 进行更加严格的控制对于针剂生产洁净室非常重要。6．辐射灭菌法：辐射有两种类型：一种是______ ，如紫外线、红外线、微波；一种是______ ，如可引起被照射物电离的X射线、γ射线。7．过滤除菌的效果与滤膜的______ 、______ 、______ 、______ 等因素有关。　8．高压蒸汽灭菌法：超过一个大气压时，水的沸点高于______ ，反之亦然。此法适用于　______ 和______ 的物品。 有兴趣的跟帖做一下，标准答案以后帖出。建议版主：如答案全对者能否适当给加分！

不知道各位检测微生物的版友们怎么做微生物检测室的质控，我们好像是在检测室的四角放培养皿，然后进行培养，有没有类似的？正确的操作应该是怎么做呢？

吴清平研究员：饮用水微生物安全风险控制饮用水的安全，国内外面均有资料报道。WHO认为，全球有88%的疾病应该归咎于不安全的用水和缺乏相关的卫生设施。WHO的饮用水准则已经证实了与饮用水有关的卫生问题大多来自微生物，比如说细菌、病毒、原生动物或其他生物来源。从国内外来看，饮用水微生物的问题也比较多，无论是国内外的品牌都有这种情况。　　我们即将执行的新的矿泉水国家标准，2003年2004年就开始讨论了，一直下不来，最后因消毒副产物溴酸盐的问题，一下子就推出来了，但是还是有一些不完善。我们跟CAC有一些微生物指标不完全一样，至少它还是比较不错的，比如说粪链球菌就是粪便污染的一个指标，产气荚膜梭菌是微生物抗消毒剂的一个指标，跟国际接轨了。这次国标最大的一个改变，把细菌总数不作为产品质量控制指标，我们国家大桶装的饮用水不设细菌总数作为微生物污染的控制指标，没有经验数据，桶是回收的，跟国外的情况不一样，当时我们建议，这不可以完全的参照CAC。我们国家以前不把致病菌作为出厂检测来做，现在就把铜绿假单胞作为出厂检测的基本标准。　　饮用水中微生物污染状况　　最近我们调查了16家矿泉水厂，主要是在南方地区。45份水源水中11份样品检出铜绿假单胞；在成品水中也存在这个问题，30份有问题成品水中铜绿假单胞阳性率为10%。说明当时做这个标准的时候还是对的，应该把它作为一个基本标准。瓶装饮用水有一个很大的问题，就是桶的重复利用。现在新国标中新增了溴酸盐指标，在满足溴酸盐限量标准时，往往会暴露出微生物的安全问题。工厂原来采用比较简单的办法，就是把臭氧浓度都打到很高，这样就把微生物问题给掩盖了，但现在增加了溴酸盐指标，限制臭氧用量，就会暴露微生物问题。管网水、高层水箱中霉菌检出率在66.7%和75%之间。饮用水受到微生物污染是世界性的问题，不单单是我们国家的问题。　　饮用水相关标准中的微生物指标　　在标准里面，国际标准中微生物的指标，上午介绍得比较多，我不进行详细介绍。刚才我已经把矿泉水原来的标准跟今年10月1号将要执行的的标准的差别讲了一下。上午叶教授讲了标准跟CAC里面有一点点不一样。从专业角度判断，这个准则还是比较符合国情，而且对目前的国情还是适合的。　　纯净水第六届卫生部的卫生标准化委员会会议的时候提到了，纯净水这部分饮用水不准备增加溴酸盐的指标，但是山泉水，包括桶装饮用水都要加这个指标。　　饮用水中污染的微生物　　水里面污染的微生物，有细菌、病毒和原生动物，当然真菌也有一些。近些年来，诺如病毒也非常严重，我的一个学生做这个调研的时候，发现在水体里面有污染，尤其是在城市周边的河涌，污染还是相当严重的。　　我们团队瓶（桶）装饮用水中污染的微生物的调查数据显示，不同工厂，微生物区系不一样，感染微生物的指标也不一样。因为长期使用消毒剂等等，革兰氏阳性杆菌和霉菌的污染也是比较厉害的。　　这几年我们也做了自来水O3/BAC安全性的分析。首先用臭氧来氧化水里的微生物，把水里有机大分子氧化成小分子，然后采用生物活性炭进行降解。我们采用电子显微镜观察发现，空白的活性炭是看不到微生物的，而BAC的炭样就看到了微生物；在生物滤池中可以看到2到5公分，50到53公分的BAC表面，微生物都非常丰富；这表明活性炭在降解有机小分子方面有非常大的帮助，断面100厘米以上都含有微生物；而运行了18个月以后不同深度BAC，大量的微生物附着在表面。叶教授跟杨教授演讲时提到，它的除去比较困难，以后我们在溴酸盐控制也会选择性的应用。　　我们对活性炭表面的微生物进行分离鉴定发现，在活性炭上面主要是阴性杆菌占主体，未检测出常见的食源性致病菌，但是发现存在嗜水气单胞菌等条件致病菌。　　分离鉴定了19个属的细菌，优势菌属包括食酸菌属、短波单胞菌属、短杆菌属、丛毛单胞菌属、金黄杆菌属和鞘氨醇单胞菌属。泄露的细菌对供水管网中污染微生物指标有影响，今后要注意这个问题。我们在注意的同时，另一方面也有很多的潜力可以挖，在BAC上面的微生物应该有效地选择它们，现在我们是自然的富集；如果我们可以找到占主流的可降解特定有机物的的细菌的话，分离培养增菌后，再挂膜；如果不可以分离培养，我们可以按照环境治理那样，采用定向人工富集方法来解决这个问题，这样的效果可能会更好。　　致病微生物对人体的危害　　对健康危害较大的水源性致病细菌，为主要引起消化道传染病的肠道类致病菌。现在军团菌，特别是冷冻系统的军团菌还是相当严重，我们在广东进行了调查，情况很严重。对于今后高层楼层的饮用水来说，应该引起比较大的重视。现在没有小区的，楼顶上有水池的，问题就特别大。新小区的搞了集中的二次供水工程，这样还好一点，如果是老居民区，问题就更大了。　　现在讲一下矿泉水新的国家标准里面的三种致病菌。铜绿广泛存在于土壤里面，这类致病菌，地下水抽上来的时候一定要检测，水源水这块还是比较严重。它会引起呼吸道感染、心内膜炎。不是食源性致病菌，是条件致病菌。粪链也是一个致病菌，这个感染也是比较严重。产气荚膜梭菌是一种革兰氏阳性菌，主要是检测消毒后的耐药性。　　饮用水微生物污染的控制　　饮用水实际上主要有两种。一个是现在的自来水，第二是瓶装饮用水，相同点要建立水源保护区，水处理系统的控制、工厂卫生管理与个人卫生以及质量检验方面的管理。但是瓶装水和自来水水源不一样，控制也不一样。我比较赞成张岚教授提出的，我们做标准指标的时候，检测指标要根据我们国家的国情是来做。矿泉水为什么不需要这么多呢？因为有水源保护区，是地下水，不需要这么多，做标准的时候必须汲取前面调查出来的经验数据。刚刚王教授说的国际上已发现水中有2221种化学污染物，那我们随便筛选都做不完，我们只有发现问题了就不断的加，如溴酸盐指标。所以，饮用水源有比较良好的控制，就不一定需要有这么多的指标来控制。　　比较典型的矿泉水工艺，说起来也不是很复杂。主要是原水，曝气，微滤，臭氧混合塔，罐装等等。这里面有很多要做的，现在工厂长期没有对自己的水井进行消毒，矿泉水水源尤其很多南方地区是在地下接近100米的岩层，你怎么消毒呢？对底下水量多大，地下的水池多大容量可以抽干它，你会保留多长时间？还有一个打井的时候套管，是新井还是老井，套管如何消毒呢？消毒对锰砂的破坏作用应该是毁灭性的，二氧化氯也好，过氧乙酸也好，整个锰砂都失效，基本上所有工厂都没有消毒。如果你把臭氧降了以后，原来污染存在的地方也没有找出最有效的办法，那后面的微生物安全问题就很严重了。　　纯净水比较容易做的是反渗透，一般都是管网的自来水，然后反渗透，它没有营养，这对微生物的控制比较有利。溴酸盐的问题基本不存在。2007年抽查的时候，发现一、两家有，不知道怎么带进去的，或者说整个反渗透的效果不好，或者是桶没有洗干净，可能是这些环节带进来的。

一、罐头食品前加工过程中微生物污染的控制用作罐头食品的原料必须新鲜、洁净、卫生，对于肉类食品原料必须来自健康动物产尽可能避免污染，对于果蔬制品原料，要剔除因机械摩擦、压迫等造成压坏、擦伤、裂痕，脱水的果蔬。清洗是罐头前加工过程中的重要工序。清洗不仅去除了原料表面泥土和污物，还能减少表面的微生物，所以清洗用水必须干净卫生，否则，若被微生物污染则反而会加重食品的污染。罐头食品与其它食品一样，加工环境、机械设备、加工用水、撼料及操作人员都可能成为微生物污染源。尤其是加工设备可能成为嗜热性微生物的重要污染源，因此要特别注意这些方面的卫生管理。二、罐头食品加工过程中微生物污染的控制前已述及罐头食品微生物污染的最主要来源就是杀菌不彻底和发生漏罐，因此，控制罐头食品污染最有效的方法就是切断这两个污染源，这便涉及到罐头食品的制作工艺和杀菌过程，在保持罐头食品营养价值和感官性状正常的前提下，应尽可能地杀灭罐内存留的微生物。尽可能减少罐内氧气的残留量，热处理后的罐头须充分冷却，使用的冷却水一定要清洁卫生。另外封罐一定要严，切忌漏罐发生。三、罐头食品贮存和销售过程中微生物污染的控制罐头食品在贮存和销售过程中，切忌粗暴装卸，罐头应贮存于清洁、干燥、通风、阴凉的地方，不可靠热源太近，贮存温度应控制在20℃以下，有条件的可置冰柜中存放。在贮藏和销售过程中发现罐听锈蚀、变形、罐壁裂缝等情况的不得出售并禁止食用。

1．1主题内容本标准规定了测定水和污水中生化需氧量（BOD）的微生物传感器快速测定法。本标准规定的生物化学需氧量是指水和污水中溶解性可生化降解有机物在微生物作用下所消耗溶解氧的量。1．2适用范围本标准适用于地表水、生活污水和不含对微生物有明显毒害作用的工业废水中BOD的测定。的测定。 1．3干扰及消除水中以下物质对本方法测定不产生明显干扰的最大允许量为：Co2+5mg/l；Mn2+5mg/l；Zn2+4mg/l；Fe2+5mg/l；Cu2+2mg/l；Hg2+2mg/l ；Pb2+5mg/l；Cd2+5mg/l；Cr6+0.5mg/l；CN-0.05mg/l；悬浮物250mg/l。对含有游离氯或结合氯的样品可加入1.575g/l的亚硫酸钠溶液使样品中游离氯或结合氯失效，应避免添加过量，对微生物膜内菌种有毒害作用的高浓度杀菌剂、农药类的污水不适用本测定方法。2术语2．1生化需氧量在一定条件下，微生物分解存在于水中的某些可被氧化物质，特别是有机物所进行的生物化学过程中消耗溶解氧的量。2．2微生物菌膜将丝孢酵母菌在保持其生理机能的状态下封入膜中，称之为微生物菌膜或固定化微生物膜。2．3微生物传感器微生物传感器是由氧电极和固定化微生物膜组成。可检测微生物在降解有机物时引起的氧浓度的变化。2．4流通式水样或清洗液在蠕动泵的作用下连续不断的将样品或清洗液在单位时间内按一定量比送入测量池中。2．5间断式（加入式）将缓冲溶液加入到测量池中，使微生物传感器（微生物菌膜）与缓冲溶液保持接触状态，然后加入定量的被测水样，测得被测水样的BOD值。2．6恒温控制装置微生物电极的反应性能依赖于一定的温度条件，因此要求在试验过程中要有一稳定的温场，该装置在仪器中称之为恒温控制装置。2．7清洗液（缓冲溶液）清洗液是由磷酸二氢钾和磷酸氢二钠配置而成。其主要作用是作为缓冲液调节样品的PH值，清洗和维持微生物传感器使其正常工作，并具有沉降重金属离子的作用。3原理测定水中BOD的微生物传感器是由氧电极和微生物菌膜构成，其原理是当含有饱和溶解氧的样品进入流通池中于微生物传感器接触，样品中溶解性可生化降解的有机物受到微生物菌膜中菌种的作用，而消耗一定的氧，使扩散的氧电极表面上氧的质量减少。当样品中可生化降解的有机物向菌膜扩散速度（质量）达到恒定时，此时扩散到氧电极表面上氧的质量也达到恒定，因此产生一个恒定电流。由于恒定电流的差值与氧的减少量存在定量关系，据此可换算出样品中生化需氧量。[/fon

呵呵，帮个忙，想问下疾控微生物检验方面比较好的仪器及厂家，比如PCR，荧光定量PCR, 凝胶电泳（最新）等等

请教各位，质量控制的结果评价有哪些标准可以作为依据呢？尤其是微生物的项目，人员比对、方法比对、设备比对？

一、质量控制相关定义质量控制：满足质量要求的操作技术和活动。质量保证：为了满足实验室质量要求 ，制定相应的计划，实施证明（记录）所进行的一系列的系统活动。外部质量控制：通过互相校准和/或检验对实验室的操作和结果所进行的控制。内部质量控制：实验室内部采取的以对比分析、跟踪以及相关方法，对实验室工作的连续性控制计划。质量手册：是描述质量系统元素的文件或文件的集合。 二、实验室要求按国家实验室认可的概念，是指一个能够承担法律责任的实体。这里所指的是实验室（微检室）内建立的质量管理的保证体系。人员、房屋、设备满足检测工作需要。1、人员要求实验室人员的分类：管理人员、技术人员、技术支持人员等。相应岗位的人员，应具备相应的技术能力，相应的技术能力证明（证书及证件）。微生物检验室因有相应技术能力的人负责室内的技术工作，并设立质量监督员。2、房屋条件要求房屋要求：具有适宜、足够宽敞、通风有良好的照明。房屋内墙面及地等应采用易于清洁的材料，保持房间清洁。房间的设置，以其开展的工作内容加以分用，设立专用房间。房间的大小还应根据从事实验人员的进入数量上加以考虑。3、环境设施要求专用房间的温湿度控制与记录（样品存放室）。特殊环境的微生物指标控制与记录（无菌室等）。专用工作室的标准操作规程和定期的检测校准程序（洁净室等）。特殊环境中的专用设施质量控制应符合有关要求（净化工作台）。 三、设备控制和程序微生物检验常用需监控的设备和仪器：1）培养箱（生化培养箱或CO2培养箱等）、干燥箱、高压灭菌锅、净化工作台、pH计、 冰箱，（低温冰箱或冷柜）温度计、紫外灯、显微镜、离心机、天平。2）小计量容器。3）微生物测定仪器、微生物检定仪器、空气采样器、酶标仪专用等。1、高压灭菌锅的温度控制高压灭菌锅；生物指示菌法（常用）、化学变色纸片及高压灭菌锅温度计等方法进行检测。生物指示菌法是一种高压灭菌锅的效果显示法。高压灭菌锅由专人按作业指导书操作，并做好每一次的作业记录。高压灭菌锅使用时，内置物品不能太多，单位体积内的内容物（每瓶内的培养基）不能太多。同时应注意内容物不同耐受温度。总的暴露时间最好不要超过45min。高压灭菌锅日常工作记录应包含以下信息：高压灭菌的材料、开始时间、压力/温度、取出时间、高压灭菌胶带的颜色变化（日常常用无菌培养代替）。高压灭菌锅温度波动范围：110，115和121±2℃。高压灭菌锅校准周期一般在半年。2、干燥灭菌箱温度控制干燥灭菌箱日常工作记录中应包括以下信息：开始的时间、到达灭菌温度时的时间、取出的时间（或关闭时间）。干燥灭菌箱的温度校准；用参考温度计进行温度测试。干燥灭菌箱温度要求与精确度：160±5 ℃或180 ±5 ℃。前者为灭菌2h，后者为30min。干燥灭菌箱校准时间一般为一年。3、培养基配制用蒸馏水的控制对于蒸馏水器来说：按设备说明，定期清洁离子交换器和更换离子交换材料。检测要求：西欧标准为微生物检验用蒸馏水的特定电导率＜0.5ms/m；细菌数＜50cfu/ml。我们日常用的标准为 ＜10ms/m，未见有细菌指标。检测频率：1次/每月。蒸馏水定点供应，并做好相应的质量控制，记录检测结果。4、天平的管理天平放置要求：无振动、无气流影响及水平台面上。天平要有使用及运行检查记录。天平作为计量仪器是列入国家强制检定的范围，一般1次/年进行检定。运行检查频率按运行计划或按产品（天平生产厂家）给出的标准重量单位进行对照。5、pH计pH计使用前应用标准液进行校准。缓冲液使用有效期：PH4.00 约1年PH7.00 约6个月pH9.00 约6个月pH计的维护：电极外表的定期清洗；电极敏感性检测及极性恢复。6、净化工作台的控制水平流净化工作台工作区域，要求洁净度为100级。空气沉降30min，细菌数＜1个/皿。垂直流净化工作台，细菌数＜0.49个/皿。净化工作台运行检查频次：1次/月主要是细菌沉降检测。净化工作台高效过滤膜一般为一年更换一次，并同时进行粒子与细菌沉降检测。7、紫外线灯的控制检测方法：仪器测试法和生物测试法。前者是通过专用仪器检测紫外灯管发射的紫外光强度。国家消毒技术规范中表明在距离照射无1米处，要求其强度为90。生物测试法：采用一定的菌培养物，经一定比例稀释，菌量控制在200-250个/0.5ml，涂布平板在紫外灯光下照射，2min，同时设置普通光源的对照组，后置37℃48h，计算其杀灭率。要求杀灭率达99%。8、显微镜的控制显微镜应制定作业指导书，日常维护记录及自校记录。显微镜应置于无振动，避免灰尘，防潮等要求的环境。9、其它微生物检测专用仪器的控制细菌鉴定仪、酶标仪等设备，工作中常用阳性对照检测其功能正常性。仪器的检定则按有关的部门检定或按自校作业指导书进行。仪器的使用登记、校准计划、校准记录等文件存档。仪器专人使用、操作者应取得相应的岗位培训合格，持证上岗。 四、检测质量保证定期使用有证标准物质和次级标准物质（参考物质）进行内部质量控制。实验室间的比对或能力验证，利用相同或不同方法进行重复检测，对留存的样品进行在检测。

微生物采样器的简介　　六级空气微生物采样器为六级筛孔撞击式空气微生物采样器，是一种双功能阶式多级撞击采样器，可广泛地用于卫生防疫、生物洁净、制药、发酵工业等环境中的监测以及有关研究教学部门作空气微生物的采样研究，空气微生物采样器（六级）为评价空气环境微生物污染危害及其防治措施提供依据。微生物采样器的工作原理　ZR-2000型便携式多功能微生物采样器除了能够测定空气微生物的数量之外，它独有的特性还能测出这些粒子的大小，而后者是判定空气微生物危害的重要指标之一。它是由六个撞击器组合成一体，每一级实际是一个单级采样器，利用6次反复撞击原理，绝大部分粒子特别是在气管及肺沉降的粒子基本都撞击下来，因而它采集到的粒子大小范围自然比单级的广，这是一些单级撞击采样器所无法比拟的，而且采样器的圆形喷口比裂隙等喷口有更高的采样效率。采样时相对湿度逐级地增高（由第一级的39%增至第六级的88%），这十分有利于脆弱的病原微生物，特别是病毒粒子的存活。由于它这些与众不同的特点，使它广泛而有效地应用于空气微生物的监测，自问世以来常用不衰。被专家推荐为国际标准采样器。六级空气微生物采样器模拟人呼吸道的解剖结构和空气动力学生理特征，采样惯性撞击原理而将悬浮在空气中的微生物粒子分等级地收集到采样介质表面上，然后供培养及微生物学分析。微生物采样器的部件　　六级空气微生物采样器整个仪器是由采样器（六级安德森采样器、二级安德森采样器、撞击式吸收瓶）、主机、三脚架组成。微生物采样器的使用原理　　撞击器是6层有微小孔眼的铝合金圆盘。圆盘下放琼脂平皿，每圆盘间有密封胶圈，在通过三个弹簧挂钩把圆盘牢固地联在一起。每个圆盘上有400个成环行排列、逐层减小，标准采样流量为1立方呎（28.3L/min）。当含有微生物粒子的气流进入最上层的采样口后，由于气流的逐层增高，不同大小的微生物离子按空气动力学特征分别撞击在相应的琼脂表面上。捕获在各级上的粒子大小范围是由该级孔眼的气流速度和上一级的粒子截阻率而决定的。第一、二级类似人的上呼吸道捕获的粒子，第3-6级类似人的下呼吸道捕获的粒子，这就相当程度上复制了这些粒子在呼吸道的穿透作用和沉着部位。六级空气微生物采样器可以提供加装好普通营养琼脂的平皿。微生物采样器技术参数　　 测量范围捕获率：≥98%捕获粒子范围第一级：＞7.0um 孔径：1.18mm 　　第二级：4.7um ～7.0um 孔径：0.91mm 　　第三级：3.3um ～4.7um 孔径：0.71mm 　　第四级：2.1um ～3.3um 孔径：0.53mm 　　第五级：1.1um ～2.1um 孔径：0.34mm 　　第六级：0.65um～1.1um 孔径：0.25mm采样流量28.3L/min 可调节精度≤5%噪声≤60 db电子定时器范围1-24小时，精度＜1%工作电源220V/AC功率≤45 W

做一种茶饮料，为了保证口感，必须将PH调制7左右，但是这样的PH条件下微生物很难杀灭，一般的防腐剂在中性条件下的作用也大大折扣，请问做饮料的朋友们，一般中型饮料的防腐应该才用什么样的方法，仅仅只能控制灌装前的灭菌吗？！！！麻烦各位高手帮忙解决一下！

制药纯化水系统通常应用连续的方法控制微生物，并进行周期性消毒。以热系统、冷系统以及常温系统讲述制药纯化水设备系统在不同温度时对连续微生物控制的影响。1.“热”系统防止细菌生长的最有效和最可靠的方法是在高于细菌易存活的温度下操作。如果制药纯化水设备分配系统维持在热状态下，常规的消毒可以取消。有很多的历史数据表明系统在80℃的温度下操作，能防止微生物的生长。目前很多企业在70℃的温度下验证水系统。在较低的温度下操作的优点包括节约能源、对人体伤害风险低、减少红锈的生成。系统在这个范围内的较高温度下操作在微生物污染方面具有更高的安全性。但在80℃以下的有效性必须在实例的基础上用检测数据来证明，需要注意的是，这个温度范围不会去除内毒素。2.“冷”系统通常情况下，“冷”系统是在4～l0℃(我国药典附录中提及的是低于4℃)的温度下操作。在15℃ 以下，微生物的生长率明显降低，因此与常温系统相比，冷系统的消毒频率可能要降低。特定温度下的有效性与否，在任何特殊系统中相关的消毒频率必须在实例的基础上通过统计分析来确定。虽然“冷”系统被证明是有效的，但是其需要能耗及与其相关的成本很高。3.“常温”系统任何制药用水系统的循环温度都是通过需要达到的微生物标准或需要达到的使用温度来确定的。在行业中，“常温”的纯化水设备系统通常使用臭氧或热消毒，与“热”或“冷”系统相比，通常需要较低的生命周期成本，并且还减少了能量消耗。然而，在没有提高系统消毒水平的情况下，在储罐和分配循环中缺少温度控制会导致系统内生物膜的形成，偶尔或不可预测地产生微生物不符合规定的水，以及导致不在计划内的水系统停机。

1．分批培养（batchculture）将微生物置于一定容积的培养基中，经培养，最后一次收获，谓分批培养。在分批培养中，培养基一次加入，不予补充，不再更换。由于营养消耗，代谢产物积累，对数生长期不能长期维持。2．连续培养（continuous culture）在培养器中不断补充新鲜营养物质，并不断排出部分培养物（包括菌体和代谢产物），以保持长时间生长状态的一种培养方式。主要有恒浊连续培养和恒化连续培养两类。恒浊连续培养通过不断调节流速，使培养液浊度保持恒定，因而可不断提供具有一定生理状态的细胞，并可得到以最高生长速率进行生长的培养物。恒化连续培养通过控制恒定的流速使营养物浓度基本恒定，从而使微生物保持恒定的生长速率。用不同浓度的限制性营养物进行恒化培养，可得到不同生长速率的培养物。3．半连续培养（semi－continuous culture）在发酵罐中的一部分发酵液保留下来作为菌种液，放出其余部分进入提练加工工序，在剩余的培养液中加满新的未接种的培养液，继续培养，如此反复，谓之半连续培养。4．补料分批培养（fed－batch culture）补料分批培养又称半分批培养，是指在分批培养过程中，间歇或连续地补加新鲜培养液，但不取出培养物。待培养到适当时期，将其从反应器中放出，从中提取目的生成物（菌体或代谢产物）。若放出大部分培养物后，继续进行补料培养，如此反复进行，则称为重复补料分批培养（repeated fed－batch culture）。与传统分批发酵相比，补料分批发酵的优点在于使发酵系统中的基质浓度维持在低水平，这有以下优点：①可除去快速利用碳源的阻遏效应，并维持适当的菌体浓度，以减轻供氧矛盾；②避免有毒代谢物的抑菌作用；③大为减少了无菌操作要求十分严格的接种的次数。与连续发酵相比，补料分批培养不会产生菌种老化和变异等问题。故其应用范围十分广泛。5．同步培养 能使培养的微生物处于较一致的，生长发育在同一阶段上的培养方法叫同步培养法。利用同步培养法控制细胞的生长，使它们处于同一生长阶段，所有细胞都能同时分裂，这种生长方式叫同步生长（图3—4）。用同步培养法得到的培养物叫同步培养物（synchronous culture）。这样，群体和个体行为一致，即可用研究群体的方法来研究个体水平上的问题。由于同步群体的个体差异，同步生长往往最多维持2个～3个世代，然后又逐步变为随机生长。

[align=left]文/姜文生（华测检测 食药农化事业部）[/align][align=left] 食品微生物检测是运用微生物学的理论与方法，检验食品中微生物的种类、数量、性质及其对人的健康的影响，以判别食品是否符合质量标准的检测方法。食品微生物检验是贯彻"预防为主"的方针，可以有效地防止或者减少食物人畜共患病的发生，保障人民的身体健康。食品微生物检验是衡量食品安全的重要指标之一，也是判定被检食品是否食用的科学依据之一。为了提高微生物检测的工作质量，保证检测结果的真实、准确，实验室需要加强微生物检测的质量控制工作。[/align] 为了保证微生物检验结果的准确性和可靠性，微生物实验室必须建立完整的质量控制体系，充分考虑到影响检验结果的因素并加以控制，提高微生物检验工作的质量。影响检测结果的主要因素包括如下部分：[b]1 人员[/b]与理化领域检测相比较，微生物检测更依赖工作人员的认知能力，因此，微生物检测人员应具有相应的微生物专业教育或培训经历，具备相应的资质和能力，能够正确理解标准并正确的实施检验，掌握实验室生物[s]检验[/s]安全操作知识和消毒知识；在检验过程中能遵守相关安全措施的规定，确保自身安全；有颜色视觉障碍的人员是不能参与涉及辨色的实验的；微生物检测人员要求数量要充足，要有一定的学习能力，正确的工作态度和强的责任心。人员管理上首先要识别岗位的需求，招聘合适的人员，对人员进行管理要求和相应专业知识的培训及考核评价，对其能力进行确认后，进行授权及上岗，工作期间，要对其的专业知识和技术的持续能力进行确认，所有记录均需要归入人员的技术档案中。[b]2 设备[/b]实验设备应满足检测工作的需要。设备所处环境适宜，便于维护、清洁、消毒与校准，并保持整洁与良好的工作状态；定期进行检查、检定（加贴标识）、维护和保养，以确保工作性能和操作安全。日常的监控和使用要有记录。避免起因于仪器的交叉污染，适当的时候对所使用的仪器设备和重复使用的玻璃器具进行清洁和灭菌。设备管理除上述要求外，还要求设备有相应的管理制度和操作的作业指导书，授权操作，并建立设备档案。2.1 常用主要设备日常管理中注意的事项如下：l 高压灭菌锅：要定期校准，关注时间和温度是否满足要求；[s]按照规定期限[/s]进行灭菌效果的验证，验证的方式有生物指示剂和化学指示剂两种。l 超净工作台：要定期进行校准，关注气流，紫外强度是否满足要求；按照规定的期限采用平板沉降法等方式进行微生物的检测，采用紫外辐照计对紫外灯辐照强度是否满足要求进行检测。l 生物安全柜：要定期进行校准，关注气流，紫外强度是否满足要求；除按照超净台的要求进行日常的监控外，还要定期更换滤网，确保设备运行的有效。2.2 标准菌株管理标准菌株作为微生物检测特殊的一类设备，需要进行严格的管控，双人双锁进行管理，确保可溯源，应有文件化的程序管理标准菌种（原始标准菌种、标准储备菌株和工作菌株），涵盖菌种申购、保管、领用、使用、传代、存储等诸方面，确保溯源性和稳定性。每一支标准菌种都应以适当的标签、标记或其它标识方式来表示其名称、菌种号、接种日期和所传代数，要定期进行期间核查，核查的指标包括：存活性、纯度、检验关键诊断指标等。根据标准菌株的危害级别，分别于相应级别的生物安全实验室进行操作，废弃时需要进行灭活处理。标准菌株的基本作用如下：a)用于实验室的内部质量控制，证明结果的准确性；b)证实方法的有效性，评价检测方法的准确度；c)用于培养基及试剂的验收；d）制备实验室的内部质控样品。[b]3 培养基和试剂耗材[/b]实验室要有培养基和试剂耗材进行验收、接受/拒收和贮存的程序和标准，对每一批新购入的培养基和试剂耗材进行验收，确保其在检测过程中满足检验的要求。具体的验收方法依据GB 4789.28-2013《食品安全国家标准 食品微生物学检验 培养基和试剂的质量要求》进行；对于检测过程中所使用的培养基及相关试剂、质控材料等要建立相应的台账，记录批号、实验室接收日期及投入使用的日期等，确保试剂耗材的先进先出。[b]4 检测标准和方法[/b]微生物检测选择方法的优先顺序为：a)客户指定的方法；b)法律法规规定的标准方法；c)国家标准、国际标准；d)行业标准、地方标准、标准化主管部门备案的企业标准；e)非标方法、允许偏离的标准方法。无论选择那种方法进行检测，在使用前均需要进行方法验证和确认，通过人员培训和能力确认、设备配备、培养基、环境条件等方面的确认，阳性对照等模拟样品的检测，确保采用的方法能够正确的在实验室得以实施。[b]5 环境要求[/b]实验室的工作面积和总体布局应能满足从事检验工作的需要，实验区域应与办公区域明显分开，布局应采用单方向工作流程，避免交叉污染和影响检验结果的准确性；实验室内环境的温度、湿度、照度、噪声和洁净室等应符合工作要求；食品样品检验应在洁净区域进行，洁净区域应有明显的标识，洁净室的评价可参考GB 50333-2002《医院洁净手术室建筑技术规范》和GB 50687-2011《食品工业洁净用房建筑技术规范》的要求。病原微生物分离鉴定工作应在二级以上生物安全实验室（Biosafety level 2,BSL-2）进行，避免对人员造成的伤害；生物安全二级实验室的评价可依据GB 50346-2004《生物安全实验室建筑技术规范》要求进行；要定期通过空气沉降和表面擦拭等方法，对洁净室和生物安全实验室的洁净度进行监控并记录。[b]6 测试过程的要求[/b]6.1 样品采集和交接样品采集时必须无菌操作，避免杂菌污染。盛装检样的容器要确保洁净无菌，避免破碎，确保安全。采集完毕后需对样品进行标识，注明样品信息，编号等关键信息；并在规定的时间内（一般不超过3～4h）送达实验室，有特殊运输要求的样品需按照要求进行运送。样品交接时，样品接收人员要核对样品的数量和状态是否满足要求，[s]样品[/s]满足要求的，样品接收人员方可在样品交接单上签字，同时进行[s]检样[/s]登记。不满足要求的样品必须拒收并予以记录。6.2 检测过程的控制微生物检测过程开始前，要对洁净区进行消毒灭菌，培养基要进行充分的灭菌，所用的器材，必须清洁无菌。进入无菌室前所有的准备工作要充分，避免因物品准备不足而反复进出洁净室。检测过程要依据客户及标准要求的方法进行，注意操作的规范性，整个检测过程的时间不宜过长，同时要避免交叉污染。检测过程中的日常质量控制方式包括：阴性对照、空白对照、阳性对照。检测工作结束后，要及时清理洁净室和生物安全实验室，对检测剩余的样品进行单独的存放，待报告出具后，再进行相应的处理。若有阳性检出的样品，需进行无害化处理；检测过程用到的器具需进行灭菌后再清洗，检测过程中产生的增菌液等需进行灭菌后处理。6.3 报告出具通过空白等质控方式严谨地分析实验结果，真实准确的记录实验数据，判定检测结果的合理性，出具准确可靠的报告。除了上述各要素的控制外，实验室还可以通过实验室内部质量控制和实验室外部质量控制对微生物的检测过程进行控制。实验室内部的质量控制手段要依据微生物检测的项目类别、检测频次，人员能力等编制实验室内部质量控制计划，内容包括项目、频次、评价方式和评价依据等，微生物检测的主要质控方式有空白试验、质控样品、实操考核、比对实验等方式。常用的质控手段的评价方式如下：空白试验用来监测环境和操作过程的规范性，如空白试验有生长，则证明检测环境或检测过程不满足要求，实验失败。质控样品是由质控样品提供者给予参照值，实验室进行检测后，与参照值进行比较，评价是否在质控样品参照值允许的范围内，如在允许的范围内即为合格，如超出允许的范围，则证明检测过程不合格，检测过程异常。实操考核是指由质量监督员等对检验员针对考核的项目制定考核评价表，对操作过程进行打分，最终依据总得分判定被考核人员的能力是否满足要求。比对实验一般是指用同一方法检测同一样品、由相同或不同的操作者使用相同或者不同设备所得到的两个单次实验结果进行比较，来评价人员操作的重复性和复现性是否满足要求，比对的评价可参考ISO 4833-1:-2013或SN/T 1800-2006，即：重复性：使用相同方法，在同一实验室检测同一种物质，由同一操作者使用同一操作者使用同一设备在短时间内的两次独立的单次结果（以10为底的每毫升中微生物计数的对数）的绝对差值，不应大于重复性限，r=0.25（概率为95%的重复性临界差），复现性：用同一方法检测同一样品、在不同实验室由不同操作者使用不同设备所得到的两个单次实验结果（以10为底的每毫升中微生物计数的对数）之间的绝对差值，不应大于复现性限，R=0.45（概率为95%的再现性临界差）。例如：A=3*10[sup]5[/sup]CFU/g； B=7*10[sup]5[/sup]CFU/g如A和B的检测结果为同一人，则A与B两次检测结果是否有差异？如A和B的检测结果非同一人，则A与B两次检测结果是否有差异？评价结果如下：Log[sub]10[/sub]A ≈ 5.47，Log[sub]10[/sub]B ≈ 5.85， Log[sub]10[/sub]A -Log[sub]10[/sub]B ≈ 0.37如A和B的检测结果为同一人，则依据重复性测试要求A与B两次重复检测结果计算所得0.370.25,两次测试的结果存在有差异；如A和B的检测结果非同一人，则依据复现性测试要求A与B两次检测结果计算所得0.371时，结果不满意。总之，完善的实验室管理体系，良好的质量控制，才能保证检测结果的准确行和可靠性。

[b][color=#444444]微生物实验用的均质器和匀浆仪是一样的吗？求助！！！[/color][/b]

纺织品微生物质量控制计划和记录如何做？和纺织品的一样吗？需要En值或Z比分验证吗？

今天食药局一行人来我们公司检查，在我们实验室询问有没有留样，不过没有深究，我们这有一个留样室，不过一般储存生产的样品，做保质期留样，我们微生物实验严格意义来说没有专门的留样室，不过我把每天检测完的样单独包装起来，整理排序，专门保存在留样室一个角落里，平常取样检测的料液或者水样，我一般检测完后置于冰箱保存一周左右，（一般半月清理冰箱）我这种做法也没太多依据，自己总结的。今天被提到这个问题，正好请教一下：1 食品企业留样室一般需要什么条件，可以参考什么标准2. 微生物室需要留样吗，一般有什么要求3.微生物检测，如果留样，留的样品是检测剩下的，还是另外取样

今天食药局一行人来我们公司检查，在我们实验室询问有没有留样，不过没有深究，我们这有一个留样室，不过一般储存生产的样品，做保质期留样，我们微生物实验严格意义来说没有专门的留样室，不过我把每天检测完的样单独包装起来，整理排序，专门保存在留样室一个角落里，平常取样检测的料液或者水样，我一般检测完后置于冰箱保存一周左右，（一般半月清理冰箱）我这种做法也没太多依据，自己总结的。今天被提到这个问题，正好请教一下：1 食品企业留样室一般需要什么条件，可以参考什么标准2. 微生物室需要留样吗，一般有什么要求3.微生物检测，如果留样，留的样品是检测剩下的，还是另外取样

请问大家公司微生物实验室的一些试剂有做质控后再使用的么？我公司微生物的一些试剂很难买，有些买了就用一次，又很容易就过期了。可以做了质控合格再延期么？延期的期限有规定么？