微生物无菌仪

微生物实验室无菌评价方法,包括高压灭菌锅、操作台、紫外灯、无菌室及干热灭菌箱。

无菌操作技术不仅在微生物学研究和应用上起着举足轻重的作用，在许多生物技术中也被广泛应用，例如转基因技术、单克隆抗体技术等。 无菌室，微生物实验室内专辟的一个小房间，室外设一个缓冲间，缓冲间的门和无菌室的门不要朝向同一方向，以免气流带进杂菌。无菌室和缓冲间都必须密闭，无菌室内的地面、墙壁必须平整，不易藏污纳垢、便于清洗，室内装备的换气设备必须有空气过滤装置。工作台的台面应该处于水平状态，无菌室和缓冲间都装有紫外线灯（距离工作台面1米），工作人员进入无菌室应穿戴灭过菌的服装、帽子。 超净台，主要功能是利用空气层流装置排除工作台面上部包括微生物在内的各种微小尘埃，通过电动装置使空气通过高效过滤器具后进入工作台面，使台面始终保持在流动无菌空气控制之下。在条件较困难的地方，也可以用木制无菌箱代替超净台（正面开有两个洞，不操作时用推拉式小门挡住，操作时可以将双臂伸进去；正面上部装有玻璃，便于在内部操作，箱内部装有紫外线灯，从侧面小门可以放进去器具和菌种、细胞株等）。 微生物的培养 在微生物的培养过程中，要保持培养物纯净性；培养微生物的要领，是为所需要的微生物提供良好的生存环境，同时阻止或抑制其他微生物的生长。 （一）培养基1.认识培养基的基本组成成分，从生物体构成的基本元素这一角度理解培养基中为什么都需要具备这些基本成分。2.培养基的用途和种类：液体和固体两大类。3.不同的微生物往往需要采用不同的培养基配方；尽管培养基的配方各不相同，但是其基本成分都包括水、碳源、氮源和无机盐。4.培养基是否合格（无菌试验）：培养基在恒温箱中保温1～2d后无菌落生长（液体不变浑浊），说明培养基的制备是成功的，否则需要重新制备。 （二）无菌技术 1. 无菌技术的概念无菌操作泛指在培养微生物的操作中，所有防止杂菌污染的方法。日常的生活环境中，每时每刻每处都存在着微生物，任何一个不经意的动作都可能将某种微生物引入到培养物中。在具备无菌环境和获得无菌材料后，还要始终保持无菌状态，才能对某种特定的已知微生物进行研究或利用它们的功能，否则外界的各种微生物很容易混入。外界不相干的微生物混入的现象，在微生物学叫做污染杂菌。防止污染是微生物学工作中十分关键的技术：彻底灭菌和防止污染是无菌技术的两个方面。此外，要有效避免操作者自身被微生物感染，还要防止所研究的微生物，特别是致病微生物或经过基因工程改造了的本来自然界不存在的微生物从我们的实验容器中逃逸到外界环境中去（生物安全）。无菌操作非常重要，无论是倒平板、平板划线操作，还是平板稀释涂布法，其操作中的每一步都需要做到“无菌”，只有熟练、规范地进行无菌操作，才可能成功地培养微生物。 2. 消毒与灭菌的概念（1）培养细菌用的培养基与培养皿（需要灭菌）（2）玻棒、试管、烧瓶和吸管（需要灭菌）（3）实验操作者的双手（需要消毒）（4）接种环、针、涂布棒：灼烧灭菌（外焰）。 3.倒平板（1）灭菌后，培养基冷却到55 [font='宋

微生物实验室，分无菌室和普通微生物室，致病菌在无菌室做，大肠杆菌啥的在普通微生物室，可以吗？做房间压差只做无菌室那个屋就行对吗？画圈的是无菌室，放2级生物安全柜[img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/12/202212021054348591_8820_5632371_3.png[/img]

微生物无菌室的灭菌通常采用多种方法，主要包括物理方法和化学方法两大类。以下是一些常用的灭菌方法： 1. 干热灭菌法：使用恒温干燥箱在160℃～170℃下保持90～120分钟，适用于玻璃器皿、金属器械等不易被高温损坏的物品1。 2. 湿热灭菌法：通常使用高压蒸汽灭菌器，通过0.10-0.11MPa的压力和121℃的温度维持20～30分钟来灭菌，适合布类、器皿、金属器械等1。 3. 过滤除菌法：通过0.22～0.45μm的微孔滤膜过滤液体或气体，阻留大于滤膜孔径的微生物颗粒，适用于对热敏感的试剂、酶液、血清等1。 4. 射线灭菌法：使用紫外线灯照射30分钟进行空气、地面、操作台面的灭菌，但需注意紫外线对人体和实验材料的潜在伤害1。 5. 化学消毒剂消毒法：使用70%～75%乙醇、过氧乙酸、来苏尔水等化学消毒剂，适用于不能使用物理方法灭菌的物品、空气、工作面等1。 6. 抗生素抑菌法：主要用于培养液，如青霉素、链霉素和新霉素等，作为培养过程中预防微生物污染的手段2。 7. 熏蒸灭菌：使用高锰酸钾和甲醛的混合物对无菌室进行熏蒸，适用于长期停用的无菌操作室的灭菌1。 8. 低温法抑菌：通过冷冻抑制微生物的生长和繁殖，适用于食品工业中的保存4。 9. 辐射灭菌：利用紫外线、X射线或γ射线等电磁辐射杀死微生物，适用于医疗器械、食品等的灭菌4。 在选择灭菌方法时，需要考虑无菌室内物品的材质和特性，以及灭菌后对实验操作的影响。同时，应定期对灭菌程序进行验证和监控，确保灭菌效果符合规定23。

（1）[b]薰蒸：[/b]这是无菌室彻底灭菌的措施。无菌室使用了较长时间，污染比较严重时，应进行薰蒸灭菌。可用甲醛、乳酸或硫磺薰蒸。（2）[b]喷雾：[/b]在每次使用无菌室前进行。喷雾可促使空气中微粒及微生物沉降，防止桌面、地面上的微尘飞场，并有杀菌作用。可用5%石炭酸喷雾。（3）[b]紫外线照射：[/b]在每次使用无菌室前进行。紫外线有较好的杀菌效果。通常应开启紫外线灯照射30～60min。

我在朋友公司看到他们做微生物试验的时候，有灌装好的9.9ml/瓶的无菌水，用移液枪取0.1ml加进去，刚好是稀释了100倍，非常方便，本想购买，无奈朋友他们公司的药剂全部是总部发过来的，他也不知道从哪里购买的。因此，特来论坛求助，不知谁知道哪里有卖？

一．前言我们所生活的环境中，到处都存在着大量的微生物。在一般空气中，微生物达800~3500个/m3，在土壤中达1~500×108个/g，在严重污染的水中可达107个/ml。（饮用水要求细菌总数≤100个/ml，大肠杆菌≤3个/ml。经水塔或贮水池贮存后，短期内可繁殖至105~106个/ml。）人的头皮上有140万个/cm2，两手上约有4~40万个，1g指甲污垢有38亿个，1g粪便可达10~1000亿个。可以说微生物是无处不在，无处不有。许多以前被人们认为是极端（高温、高压、强酸、强碱、低温等）甚至是致死的环境，现在已发现生活着各种类型的微生物（称为极端微生物）。事实说明，微生物有特别顽强的生存、繁殖和变异能力来适应环境。微生物种类繁多，有的对人有益，有的有害，有的无益也无害。但在药品生产过程中，不可能对环境中的各种微生物加以区别对待，为保证药品的安全有效，需要对其进行控制。空气中的微生物多数附着在灰尘上，或以芽孢形式悬浮于空气中，1μm以下者处于悬浮状态，10μm以上者会逐渐沉下来而形成菌尘。所以也要对尘粒进行控制。大量临床资料表明，注射剂（尤其是静脉注射剂）如污染了7~12μm的尘粒，可导致热原反应、肺动脉炎、微血栓或异物肉芽肿等，严重的还会致人死命。而如果污染了细菌，轻则局部红肿化脓，重则引起全身细菌性感染。因此，对微生物和尘粒进行更加严格的控制对于针剂生产洁净室非常重要。人是洁净室最大的污染源，占90%左右。一般男性每人每分钟向周围排放1000个以上的含菌粒子，女性为750个以上。穿无菌服时，静止时的发菌量为10~300个/min，一般活动时发菌量为150~1000个/min，行走时发菌量为900~2500个/min。咳嗽一次发菌量为70~700个/min，喷嚏一次为4000~60000个/min。所以在洁净室中，人的数量和活动应有特别严格的限制。

中国药典2005年版无菌、微生物限度及细菌内毒素检查方法学验证内容简介[img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=117279]无菌、微生物限度及细菌内毒素检查方法学验证[/url]

[img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=54999]微生物及无菌知识培训[/url]

微生物无菌室要求的压差10帕是正压还是负压啊？无菌室压力要小于外面房间压力吗？[img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/12/202212021712136070_8478_5632371_3.png[/img]

USP微生物限度及无菌检验方法

微生物限度检验可以用无菌检验代替吗？为什么？微生物和无菌检验有什么不同？

问: 做无菌验证时阳性对照菌是怎么加入的？可以在加完培养基后用无菌的注射器把菌液注入吗？答:严格的说是要在最后一遍冲洗液中加入阳性对照菌的,这主要是考量滤膜对于阳性菌的截留性～但是滤器如果可以提供滤膜对于阳性菌的充分截留的话在最后的培养体系中加入阳性菌也是未尝不可的. 如果供试品没有抑菌作用,可以在加完培养基后用无菌的注射器把菌液注入,摇匀如果供试品有抑菌作用,正如安哥洛卡所讲,在最后一次冲洗液中加入阳性对照菌,摇匀,抽虑,加培养基. 无菌检查，加入阳性的方法可以有许多种，可以根据个人的习惯。只是注意：1、避免人为污染。2、阳性菌加入数量，符合“2005版中国药典XIJ微生物限度检查法”的规定。关键词:阳性对照菌 问: 离心沉淀法的原理、操作和注意事项是什么? 答:原理:利用沉降系数的差异将供试品和微生物进行分离; 操作:取规定量的供试液，3000转/分离心20分钟（供试液如有沉淀，先以500转/分离心5分钟，取全部上清液再离心），弃去上清液，留底部集菌液约2ml，加稀释剂至原规定量. 注意事项:真菌由于沉降系数比较小, 500r/min离心5min，黑曲霉、白色念珠菌回收率为20%,因此其检查不适宜用低速离心沉淀法. [col

我们是引用水分析实验室，在实验室的建设规划图上，看到在微生物区域的无菌操作室，也就是放超净工作台的房间，设置了镜检及细菌，大肠菌的培养箱。第一次看到感觉很吃惊，一般说来，培养箱都是放在外面的，我个人认为既然是无菌室，还在里边培养细菌，进行镜检，那还能是无菌室吗？简单的紫外照射可以去除空气中因培养镜检所带入的污染源吗？不知道这种安排出于什么理论，请大家赐教。

普通微生物检测，如霉菌，哪些步骤需要在无菌室里操作？还有显微镜需要什么样的，体式，普通显微镜或生物显微镜？

无菌检查法和微生物限度检查是一回事吗

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求购微生物实验用的无菌均质机和重金属实验用的微波消解炉，请尽快回复。rogersw@163.com

[color=#444444]酸奶检测菌落总数为[/color][color=#444444]0[/color][color=#444444]，还需要做商业无菌检测吗？菌落总数包括所有微生物，那没有菌落生长是不是就代表无菌？[/color]

无意间在某网站发现一些无菌及微生物检查方面的视频，看了下感觉挺好，转来让大家看看1.[url]http://player.56.com/v_14249594.swf[/url]2.[url]http://player.56.com/v_14249605.swf[/url]3.http://player.56.com/v_14249620.swf4.http://player.56.com/v_14249630.swf5.http://player.56.com/v_14249641.swf

2010年版药典附录无菌检查和微生物限度检查方法增修定内容

药典附录中规定的无菌检查方法中化学制剂和生物制品的检查方法不同，其中生物制品无菌要求样品分三份，过滤后一份加改良马丁，另两份加硫乙醇酸盐，一份30-35度培养，一份硫和一份改25-28度培养。而二部无菌只需要各做一份，分两种温度培养。为什么呢？生物制品多做个硫，有什么意义吗？

请教各位老师：食物中毒等应急事件采样，理化样品可以使用微生物的无菌采样袋进行取样吗？还是有专门用来理化采样的塑料袋？如果使用玻璃器皿的话很不方便，谢谢大家！

每个公司的质检部门肯定都在做上市药品的稳定性考察，如果是口服药，有效期是3年，长期稳定性考察的频率为3、6、9、12、18、24、36、48个月，那么检测微生物限度的频率是12、24、36、48个月，还是仅在效期的36个月和效期后一年的48个月？如果是注射剂，有效期是2年，无菌检查是12、24、36个月都做，还是仅在效期的24个月和效期后一年的36个月做呢？药典上和GMP中都没有明确说明。

有关无菌室和微生物实验室认证、认可时考察的重点和容易被遗忘的问题有哪些？请教大家！

我想询问一下,我厂是生物制品厂,我是无菌实验操作员,那里有关于无菌操作及培养基的介绍?

无菌口罩需要检测哪些项目，最后判定无菌吗？在线等十分感谢

[img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=157531]药品微生物限度与无菌检查方法验证实验的要点及体会[/url]

微生物实验室,必须达到一定程度的无菌状态,避免微生物污染。假如在一个不洁的实验室或者早先打翻过样品的地方做微生物实验,引入新的微生物污染样品的几率是很大的。微生物的实验可以分为两大部分：前期准备和样品检验。事实上，保持整个实验室清洁是非常重要的，这样就不用在灭菌前担心太多了，然而，灭菌后必须保证样品或者培养基免受污染。其实，可以把灭菌想像成”一扇门”，在培养基中或者一些设备比如吸管的微生物都在灭菌过程中被杀死了，没有微生物困扰实验了。必须保证灭菌后的环境(门后的部分)的洁净，杜绝灭菌后的培养基和设备受到污染。无菌的重要性1. 无菌技术 – 高压湿热灭菌要点描述原理在压力下产生的湿热的蒸汽杀死微生物的营养体和孢子。密封灭菌锅必须密闭以阻隔外部空气， 避免空气的存在会影响压力并降低灭菌锅里面的温度。灭菌压力在灭菌锅内， 合适的灭菌温度是通过压力达到的， 压力对于灭菌没有效用但是使蒸汽温度上升。 对于标准操作来说，15lbs/inch2时的121℃并赶走所有空气可以达到灭菌的效果。灭菌时间当到达一定的温度和压力时， 需要保持一定的时间来达到效果，为了杀灭微生物，121℃必须保持至少15分钟。培养基灭菌大部分情况下， 实验室配置培养基后应灭菌，灭菌时应根据供应商指导， 使用合适的温度时间； 有些培养基不适合灭菌的。器皿灭菌当灭菌器皿时，需要考虑使用数量，比如，一天用10根吸管，在灭菌时， 一般就可以以10根为一包， 这样可以减低器皿在使用过程中遭受微生物的污染的可能性。灭菌条在灭菌过程中， 可以用灭菌条来监控效果， 灭菌条在灭菌前是有颜色的，灭菌后会变成黑色。重新灭菌假如一次灭菌无效， 可以重新进行灭菌过程， 但是，培养基是不可以进行第二次灭菌的， 应抛弃。储存灭菌完成后， 培养基和器皿应妥善储存。 一般来说， 培养基应存放于避光的洁净空间，同时应参照供应商的指示。2.无菌技术 – 过滤 (Filtration)要点描述简述物理分离方法， 使用高效过滤将微生物从液体培养基分离。由于不需要加热和冷却过程，过滤比高温湿热灭菌省时间。过滤头0.2微米的过滤头可以分离所有的细菌营养体, 把它安装在针筒末端。3.无菌过程注意点要点描述综述一旦培养基或者器皿经过灭菌过程, 这种灭菌状态应保持直到实验结束。区域最好能把培养基准备区域(门外)和实验区域(门内)之间应该设有缓冲间。工作台面工作前必须消毒, 可以用70%的酒精, 也可以用含氯的消毒剂。消毒时间不管使用何种消毒剂， 需要提供充分的消毒时间来杀灭微生物，一般5-10分钟， 可以用纸巾擦干表面。洁净台必须有2个光源：普通照明用和杀菌紫外光。紫外灯用于保持工作台面免于微生物污染， 在使用前仍然需要使用消毒剂清洁。摆放应该有好习惯把工作桌面的物品摆放好,，把移动放到最低限度， 避免带来污染。镊子如果使用薄膜过滤法， 需要准备一个小烧杯并有少量酒精， 镊子不用时就放在杯子里。培养基培养基使用前， 应该有相关日期， 比如配置日期， 或者实验室收到日期(直接使用的培养基)。假如没有所需日期, 这个培养基不能使用。实验服穿着干净的实验服， 袖子应卷起至肘部以避免碰到培养基或样品带来污染，当然。做实验前要洗手。4. 实验的无菌技术注意点采样个人酒精灯样品应无菌采得，使用无菌采样袋或者采样瓶，采样员应戴防护手套, 在采样前烧采样口，样品容器应紧闭并安全储存。万一培养基或者样品溅到实验服上应在做完一个实验后换上干净的。咳嗽或者鼻塞可能会带来微生物并影响实验，应戴好防护手套面罩 。使用本森灯或者酒精灯, 在实验前点燃。火焰在实验区域产生一个防层， 可以防止那些悬浮在空气中的微生物掉落在工作台面上或者培养基上。开瓶瓶口培养皿开瓶前， 应用清洁剂的纸巾清洁瓶盖和附近区域，除去盖子上可能留存的微生物。盖子打开后，玻璃瓶口应进行灭菌，可以在酒精灯上方旋转瓶口和螺纹， 一般2-3秒。当打开培养皿时, 不能完全移除盖子, 而应该保持在培养皿的上侧, 从而能够倒入培养基或者样品, 这样可以减少空气灰尘或者微生物的污染。倒完培养基或者样品后, 瓶口重新过火, 盖盖子, 用消毒剂清洁。滤膜镊子打开薄膜装， 绝对不能碰到薄膜!用镊子把薄膜移除包装并放到过滤头上， 过滤的漏斗不能完全移开，只需移开一点点放入滤膜即可，过滤完后，用镊子把滤膜转到培养皿中， 放置于中间。用镊子转移滤膜过火时，拿住镊子的尾部， 放到火焰上， 保持一下能够到火好， 时间太长会在尖部结碳，拿镊子的时候， 尾部向上直至烧完。实验结束打扫废弃物实验结束后，培养皿放入培养箱；剩余的培养基可以放回储存区域， 盖子必须盖紧。抛弃废弃物，比如样品袋 可回用的物品放在远离工作区域的地方以回收, 清洗, 灭菌。用含有消毒剂的纸巾清洁工作台面。在实验过程中暴露于微生物的物品应作为有害废弃物这些废弃物可能含有微生物并致病 假如含有致病菌可能会产生公共卫生的事件.最好废弃物能够进行湿热灭菌从微生物的实验室布局角度一个设计合理的实验室能提供一个合格的环境以支持实验能够安全有效地进行。 首先，需要为实验室选择一个合适的物理位置：远离其他操作区域，比如，生产或者储运；没有从其他区域进入实验室的直接入口；实验室必须是微生物实验专用；应有专门微生物检测无菌间，并通过缓冲间与准备间等进行区隔。通风和气流安保工作区域微生物实验室应该有单独的通风系统, 与其他操作区域的空气供给分开；空调系统的排气必须直接排出实验室, 空调系统应定时清洗, 并关注空气过滤器的清洁。实验室应该是限制进入的, 可以是卡片控制或者其他方式, 只有那些被允许进入实验室的人员才能进入。实验室人员应该有充足的工作区域, 从GLP标准来说, 每人应有20平方米的区域. 充足的工作区域可以避免工作中人员的碰撞, 也避免了交叉污染。易清洁照明反馈实验室的墙面, 屋顶和门都应该是平滑的, 光洁易于清洗消毒的；墙的接缝包括强和墙之间, 强和地面之间应该是弧形的；任何地方都应该不能聚集灰尘, 例如窗台或者窗帘；柜子应该是可移动的或者是不着地的以方便清扫。实验室应有充足的照明, 包括不间断电源或者备用发电机.反馈遵照GLP相关的安全规则1. GLP要点 – 工作区域要点描述总体安排实验前应做好仪器, 试剂和培养基的所有准备工作, 这样可以合理利用时间并得到稳定的实验结果。桌面安放多余的培养皿, 烧瓶或者滤纸可能会干扰实验并带来潜在的溅出, 打碎或者交叉污染。实验前消毒在配制培养基或者开始试验前, 应该清洁并消毒工作桌面。 可以采用70%的酒精溶液, 含氯水的溶液, 或者其他消毒剂。清洁后, 应等待几分钟以使有充分的时间杀灭微生物。试验后消毒实验结束后, 彻底清洁工作区域, 仍然使用70%酒精溶液或者其他消毒剂, 保持一段时间, 然后擦干。有害废弃物的处置必须有效管理微生物的有毒废弃物, 任何和微生物培养或者培养基相关的物品都应被看作有害物质 因为他们可能含有致病菌, 需要小心处理。废弃物的灭菌湿热灭菌是最简单也是最有效的处理污染物质和有害物质的方法。 用过的培养皿应放在灭菌袋中。 灭菌后, 可以当作一般废弃物处理。重复使用器皿的灭菌当需要对小件物品(比如移液管)灭菌时, 可以根据实际用量分组包装。 湿热灭菌后, 袋包装冷却并保存。避免浪费合理安排是非常重要的 实验室工作需要精准, 但是有时候我们也需要快速工作, 因为花非常多时间会延长设备, 培养基, 或者样品暴露在环境中的时间。 把需要用的物品放在手边可以用的地方可以节约时间并提高工作的有效性。2. GLP要点 – 洁净工作台简介使用监控洁净工作台提供了控制来自环境的污染并提供工作区域的洁净空气. 洁净空气吹向工作区域, 同时, 可以避免外部空气进入工作区域使用时, 紫外光线(或者紫外灯)应关闭, 但是使用后应打开. 如果紫外灯没有打开工作台没有开启, 工作台不能开始使用 必须清洁工作台, 开启电源并打开紫外灯, 保持30分钟.洁净工作台需要进行日常的确认, 一般有第三方公司进行一个有效的实验室应该是一个安全的实验室。假如疏忽安全的话，许多每天使用的培养基或者设备会产生危害。减少这些危害带来的风险不仅仅保护了工作场所，更重要的是，保护了自身免于危险。利用常识并遵照GLP相关的安全规则,我们就能把由于微生物相关的行为带来的潜在危害降低到最小。安全用品移动安全用品包含口罩, 手套和眼部防护。口罩防止培养基和样品受到污染, 可能来自于咳嗽或者鼻涕 根据当地的要求和习惯, 每个实验室会有不同的要求。戴手套是为了防止培养基或者其他刺激性物质接触皮肤 在从湿热灭菌锅内取出容器或则器皿时, 需要戴防热手套。在配置培养基和实验中佩戴防护眼镜是一个很好的习惯, 能够购买带有屈光度的防护眼镜为佳。当移动培养基或者样品时, 应小心注意以避免溅出或者泼出；突然的移动会产生安全危害或者导致实验无效；不要使用夸张的动作或者行为同时, 不要把任何东西, 比如吸管, 放到嘴里。明火湿热灭菌锅实验中需要用到酒精灯或其他明火, 但是假如使用不当会带来比较高的安全危险；确保酒精灯不用时完全关闭, 当有阀门时经常检查垫圈是否有裂痕或者泄露；操作酒精灯时, 应确保火焰不会接触衣物或者皮肤. 可燃物品, 比如记录本, 应远离火焰以避免意外点燃；同时, 要注意可燃液体的容器. 每次使用后应盖好盖子并远离酒精灯火焰；使用火焰进行灭菌工作时, 可使用镊子. 把镊子放在含有95%酒精的烧杯中, 使用时, 把镊子在火焰上灼烧1-2秒, 移开镊子并等待火焰熄灭；拿着镊子是尖端应向下, 使热的酒精不会流到手上。湿热灭菌锅使用高压下产生的蒸汽, 温度可达1210C, 杀死了微生物, 同样可以带来人类组织的灼伤, 所以必须特别小心地操作 如此高的温度以及蒸汽能带来极大的潜在伤害, 即使是残留的蒸汽也能带来很大的危险. 打开灭菌锅时需要特别小心, 站在边上避免面对热量和蒸汽, 缓慢的打开门, 同时, 戴好防热手套.把需要灭菌的培养基和器皿平均放置在托盘上, 大的物品放在边上, 确保物品不会相互碰撞. 这样可以是热量均匀扩散并平衡整个托盘洁净台样品操作在洁净台工作时必须关闭紫外灯. 紫外光线是危险的；不要把手或者手指放在紫外灯下, 以免灼伤皮肤；不要直接看紫外光线以免损伤眼睛。培养基和样品: 用火焰灼烧瓶口时, 停留4-5秒, 旋转使整个表面都能被灼烧, 不要停留太久, 不要溅出样品或者培养基；假如样品是瓶装的, 不要直接灼烧以免爆开. 可以取2个烧杯, 倒入70%酒精, 把瓶子倒置放入一个烧杯中, 使盖子和瓶颈的2.5厘米处能浸没在酒精中, 拿出瓶子用干净的布擦干 同理, 放入第二个烧杯, 拿出瓶子直立待酒精自然蒸发；开瓶时应特别小心不能污染样品, 可以用消毒纸巾开旋盖的瓶子 用浸没在95%酒精并灼烧的开瓶器打开压盖瓶；打开瓶子后, 使用相同的方法灼烧瓶口, 并确保用于消毒的酒精完全挥发；拉罐可以使用相同的程序或者用含70%酒精的棉球擦拭顶部, 假如罐子必须用开罐器, 这个开罐器操作同开瓶器；无菌包装的产品用含70%酒精的棉球擦拭。微生物防护用具1.一级防护（设备）①移液辅助器，如[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/9p][color=#3333ff]移液器[/color][/url]②生物安全柜③一次性塑料接种环、电热接种环④螺口盖试管及瓶子⑤高压灭菌器⑥一次性塑料移液管2.二级防护（人员）①工作服、防护服②手套（乳胶手套等）③安全眼镜、面罩或其他防护用品检测中常见问题解答细菌和霉菌培养箱必须分开放置吗？在CNAS-CL01-A001-2018《检测和校准实验室能力认可准则在微生物检测领域的应用说明》有此规定：6.3.4 b)检测样品中的霉菌时，要有适当的措施控制孢子在空气中的扩散。但未见到明确规定细菌培养箱和霉菌培养箱不能在同一房间的规定。一般实验室都有三种培养箱，结构设计上分为两种，一种是内部循环风温度平衡的，第二种是内外热空气流动自动平衡型的，另外第三种是热辐射温度平衡型的。有网友认为，第一种和第三种应该可以放在一个实验室，保持一定距离即可。第二种培养箱应该不能放在一个实验室。据说，CNAS现场评审，会提出细菌和霉菌培养箱分开放置要求。

USP61 非无菌药品的微生物测试--微生物计数法--USP33 英文版最后一段： Interpretation of the Results The total aerobic microbial count (TAMC) is considered to be equal to the number of cfu found using Soybean–Casein Digest Agar; if colonies of fungi are detected on this medium, they are counted as part of TAMC. The total combined yeasts and molds count (TYMC) is considered to be equal to the number of cfu found using Sabouraud Dextrose Agar; if colonies of bacteria are detected on this medium, they are counted as part of TYMC. When the TYMC is expected to exceed the acceptance criterion due to the bacterial growth, Sabouraud Dextrose Agar containing antibiotics may be used. If the count is carried out by the MPN Method, the calculated value is TAMC.When an acceptance criterion for microbiological quality is prescribed, it is interpreted as follows: · 101 cfu: maximum acceptable count = 20; · 102 cfu: maximum acceptable count = 200; · 103 cfu: maximum acceptable count = 2000; 该段中关于细菌总数的计数方法是否是——凡是在大豆酪蛋白胨消化琼脂上生长的都是，而在沙氏葡萄糖琼脂培养基上长出的菌落都记作霉菌和酵母菌的菌落数？而后面紫色字部分又是怎样解释的呢？ 最后三句又该怎么解释呢，10个菌落数：最大可接受数目=20？这么翻译怎么也看不明白是什么。· 101 cfu: maximum acceptable count = 20; · 102 cfu: maximum acceptable count = 200; · 103 cfu: maximum acceptable count = 2000; 英语不好呀，怎么都弄不明白这段究竟怎么翻译才是通的，或者我理解有问题？所以，恳请各位帮帮忙啊，十月份新药典要出来，公司赶着弄文件，谢谢各位啦^^。