微生物限度仪

我是微生物的初学者，请问大家微生物限度检测是在什么时候呢 ？用显微镜观察是什么菌的时候用的是染色法吗？ 我想请问初始污染菌是不是就是微生物的限度检测？这个是要必须检测的吗？

1、目的：建立微生物限度检查规程，规范微生物限度检查。2、范围：本公司成品、中间体、产品用原料、辅料、内包材。3、责任人：QC检验员。4、正文：4.1简述：微生物限度检查系指非规定灭菌制剂及其原、辅料受到微生物污染程度的一种检查方法。包括染菌量及控制菌的检查。4.2仪器与用具：生化培养箱、微生物限度检查室、蒸汽灭菌器、玻璃器皿（试管、量筒、三角瓶、刻度容量瓶等）、手术镊、剪刀、酒精灯、脱脂卫生棉。4.3试液与试药：培养基、稀释剂、对照用菌液等。4.4试液、试药的制备。4.4.1培养基及其制备方法：4.4.1.1营养琼脂培养基取本品３１克，加蒸馏水1000毫升,浸泡数分钟后，加热至全部溶解，分装，经121℃15分钟灭菌后备用。 4.4.1.2玫瑰红钠琼脂培养基取本品30克，加蒸馏水1000毫升，加热至全部溶解，分装，经115℃15分钟灭菌后备用。4.4.1.3胆盐乳糖培养基(BL)取本品36克，加1000毫升蒸馏水，加热至全部溶解，分装，经115℃15分钟灭菌后备用。4.4.1.4曙红美亚甲蓝琼脂培养基(EMB)取本品42克，加蒸馏水1000毫升，混合，放置10分钟，经115℃15分钟1、目的：建立微生物限度检查规程，规范微生物限度检查。2、范围：本公司成品、中间体、产品用原料、辅料、内包材。3、责任人：QC检验员。4、正文：4.1简述：微生物限度检查系指非规定灭菌制剂及其原、辅料受到微生物污染程度的一种检查方法。包括染菌量及控制菌的检查。4.2仪器与用具：生化培养箱、微生物限度检查室、蒸汽灭菌器、玻璃器皿（试管、量筒、三角瓶、刻度容量瓶等）、手术镊、剪刀、酒精灯、脱脂卫生棉。4.3试液与试药：培养基、稀释剂、对照用菌液等。4.4试液、试药的制备。4.4.1培养基及其制备方法：4.4.1.1营养琼脂培养基取本品３１克，加蒸馏水1000毫升,浸泡数分钟后，加热至全部溶解，分装，经121℃15分钟灭菌后备用。 4.4.1.2玫瑰红钠琼脂培养基取本品30克，加蒸馏水1000毫升，加热至全部溶解，分装，经115℃15分钟灭菌后备用。4.4.1.3胆盐乳糖培养基(BL)取本品36克，加1000毫升蒸馏水，加热至全部溶解，分装，经115℃15分钟灭菌后备用。4.4.1.4曙红美亚甲蓝琼脂培养基(EMB)取本品42克，加蒸馏水1000毫升，混合，放置10分钟，经115℃15分钟

[font=SimSun, STSong, &]微生物限度检查的内容有：[/font][font=SimSun, STSong, &]1）微生物限度计数[/font][font=SimSun, STSong, &]计数方法适用性试验[/font][font=SimSun, STSong, &]供试品的微生物限度计数[/font][font=SimSun, STSong, &]2）微生物限度控制菌检查[/font][font=SimSun, STSong, &]控制菌检查方法适用性试验[/font][font=SimSun, STSong, &]供试品微生物限度控制菌检查[/font][font=SimSun, STSong, &]除了这些还有吗？具体怎么操作？每次实验都需要质控吗？[/font]

count all colonies on the membrane when there are 1-2 or fewer, colonies per square.是微生物限度检查中的薄膜过滤法的计数判断，请大家帮忙译一下，谢谢

我有一个固体样品需要测定微生物限度，不知道取样是否需要特殊的取样器具和环境？谢谢！

抗生素的口服制剂，在测微生物限度时，有什么特殊要求吗

微生物限度和初始污染菌是一个概念吗？做限度的时候需不需要做阳性对照的呢？谢谢。

有谁在做微生物限度方法学验证，有没有什么资料或者注意的，谢谢

最近实验室的微生物限度室要启用了，根据产品（化学原料药），需要做内毒素和微生物限度实验，无菌现在可能还不用，但以后还是要用的。现在情况：实验室已经建好（我还没完全了解，了解了再和大家讨论布局方面的问题），但仪器设备、人员还没到位。采购方案：内毒素实验需采购：？？？微生物限度实验需采购：？？？无菌实验需采购：？？？那么，现在就和大家一起讨论一下，我需要购买什么东西呢？http://simg.instrument.com.cn/bbs/images/brow/em09505.gif

产品的微生物限度的验证报告，05版已经做过了，如果10版没有变化，是否还需要重新验证

1. 包装材料的大肠埃希菌检查？答：根据包装材料的不同，大肠埃希菌的检查方法大致有两种，一种是将浸提液合并后，取一部分，接种胆盐乳糖培养基进行检查；另一种是将浸提液合并后，薄膜过滤，然后按规定的方法检验。2. 抗真菌药品的微生物限度检查法答：这类产品的霉菌和酵母菌计数方法需要进行调整，可以根据产品剂型的不同，选择薄膜过滤法或培养基稀释法等方法。3. 为什么在日常样品检测中还需要做阳性对照（国外不需要）？答：为了确保每一次检测对可能存在的微生物都是有效的。4. 对于同一个品种，药典为什么不规定统一的检测方法？答：本版药典进行过这样的尝试，也有某些品种已经收载了统一的检测方法，如注射用头孢类抗生素的无菌检查。之所以没有大量收载，主要是由于检测方法还没有经过必要的复核。将微生物检验的统一方法收载在品种的各论项下，始终是努力的方向。5. 梭菌检查中需置厌氧条件下培养48小时，是否指在厌氧培养箱中？答：需要在厌氧培养装置中进行培养，未必一定是厌氧培养箱。6. 控制菌检查方法验证时，采用多种方法均未检出控制菌，如何处理？答：在确保所使用的各种方法都没有错误的情况下，如果仍无法使试验菌生长，则应该采用薄膜过滤法进行检查。理由是该方法能够最大程度地去除产品的抑菌作用。7. 常规的监督抽样检品（包括原料）在进行微生物限度检查时，是否一定要进行活螨检查并在原始记录与报告书中体现？答：需要进行检查。可以在原始记录中体现，报告书上可以不出现，除非当发现有活螨检出。8. 药包材微生物限度检查规定了合格质量水平，通常产量下取样8个，要求8个瓶子均符合规定，如何进行？答：每个瓶子分别进行实验。9. 大肠埃希菌具体操作规程？答：参见中国药品检验标准操作规程。10. 动物组织及动物类原药材的提取物入药，是否需要检沙门菌？答：需要进行沙门菌检查。11. 关于中国药典菌落计数结果的判断还存在疑义，望能举例说明。答：不清楚所指的存在疑义是指哪方面。2010年版对结果报告进行了较大篇幅的修订，目前的规定应该比05版更为清晰、明确。12. 需做沙门菌检验样品量的确定？答：10g（ml）用于样品计数检验和其他控制菌检查，10g（ml）用于沙门菌检查，10g（ml）用于沙门菌检查的阳性对照。需要进行沙门菌检查的样品，检验用量应为30g（ml）。13. 日常的实验室装备能否达到梭菌无氧的培养要求？答：完全可以。可以采用厌氧培养盒（罐）。14. 如果一个产品有两个规格，是否可以取其中之一做阳性对照？答：每个规格均需进行阳性对照。15. 细菌数为100g/g的，样品稀释级只做1:10,1:100的倍数就可以了吗？答：可以。16. 培养时间3天，5天，可理解为72小时，120小时吗？答：可以。这样更为严谨。17. 中国药品检验标准操作规范“已做验证试验的供试品，在检查时刻不必再做阳性对照”如何理解？答：该标准操作规范中在无菌检查法中规定“供试品无菌检查应进行阳性对照试验”，表明不论是否进行了方法验证，在产品的每一次检验过程中，还必须进行阳性对照。在控制菌检查的大肠埃希菌项下，指出“已做验证试验的供试品，在该供试品检查时不必再作阳性对照”。该规定仅适用方法验证与供试品检查同时开展的情况。2005年版药典和2010年版药典在控制菌检查中均对阳性对照试验有明确规定，“进行供试品控制菌检查时，应做阳性对照试验。”产品检验中应以药典规定为准。18. 无菌检查和微生物限度检查中，产品中规定的溶解液是否可以换成其他的溶液？答：可以。19. 制剂通则中，没有微生物检查项目的，是否可不进行微生物项目检测？答：可以。主要是二部制剂通则中口服片剂、胶囊剂、丸剂和颗粒剂。20. 在细菌、霉菌和酵母菌计数中，适用性检查细菌是培养48小时，霉菌和酵母菌是培养72小时，供试品检查中细菌是培养3天，霉菌和酵母菌是培养5天，那方法验证中应参照哪个时间进行培养。答：应按照供试品检验时的条件，即细菌3天，霉菌和酵母菌5天。21. 测定纯化水微生物限度时，每张滤膜过滤量是多少合适？需要先稀释吗？过滤完后需不需要冲洗？假如我取10ml纯化水通过双杯体封闭式薄膜过滤器过滤，每张滤膜上的计数是以5ml为单位还是10ml为单位？答：过滤量应以培养后出现的微生物数不超过100cfu/膜为标准。一般可不稀释。不需要冲洗。每张滤膜的过滤量为5ml。22. 药典中关于纯化水的微生物限度是：细菌、霉菌及酵母菌总数每1ml不得过100个。这句话的意思是细菌总数每1ml不得过100个，霉菌及酵母菌总数不得过100个，还是细菌+霉菌+酵母菌总数每1ml不得过100个。如果是三者总数的话，那细菌总数限度是多少？霉菌及酵母菌总数限度又是多少？答：是总数不得过100个。没有必要考虑各自的限度值。

我公司现在计划将发酵法生产的β-胡萝卜素在技术监督局备档并力为国标,现在微生物限度项目不知道要怎么样参考,也不知道食品添加剂类有没有一个明文统一的对微生物限度的指标的要求.我手头有食品添加剂微生物检测的使用手册,但是没有限度要求.在这里发帖希望各位大虾能够帮我说说有没有这方面的材料可以参考的.

请问：纯化水的微生物限度检测，取样后多久必须检测？也就样品允许放置的时间是多长？什么法规中对此有规定？

请问2005版药典中纯化水的微生物限度检查中的薄膜过滤法使用的仪器在哪里可以买到以及价钱是多少?谢谢!!!!

大家有没有在中药材质量标准中制定过微生物限度指标呢？如果按照原料药来规定的话，好多药材达不到标准，而且药材还要进行前处理才能变成原料药，期间有可以杀灭大部分微生物。国家也没有相关的规定，该如何制定其限度指标呢？欢迎大家都来讨论讨论。。。

EP中微生物限度检查：控制菌大肠埃希菌接种在麦康凯肉汤中培养于42-44℃下培养，为什么选这个温度？有什么讲究？不选一般细菌最适温度。

做微生物限度的验证，如做沙门的验证为什么要做金黄色葡萄球菌的试验？

请教各位：水溶性差的样品，做微生物限度检查时，加入pH7.0氯化钠-蛋白胨缓冲液后，供试液下层有不溶性沉淀，是否可直接取上层清液进行试验？

为什么检水微生物限度用0.45微米滤膜？为什么不强制要求0.22或则0.2以下呢？

大家帮下忙，哪位知道微生物限度标准在EP和USP药典中的哪个地方呢，太难找了，中国药典里是找到了的。就是细菌总数小于定于1000cfu/g，霉菌酵母菌总数小于等于100cfu/g，大肠不得检出/g。

请教各位高手： 本实验现急需购买一套微生物限度检测的膜过滤系统，请问各位高手给点意见，那种比较好用。电话：13828759450，QQ:240100912

请教各位大侠：微生物限度检验的实验室都需要哪些具体的仪器设备？我们是作原料药的，成品要检验霉菌、酵母菌、大肠杆菌。另外要作空气中的浮游菌和沉降菌检验，但是具体的比较先进的仪器设备都需要哪些啊？非常感谢能有高人帮忙！！！！

微生物限度检查方法验证模板

微生物限度检查及控制_王旭[img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=173895]微生物限度检查及控制_王旭.rar[/url]

响应大家的要求！传一份"微生物限度检查方法的验证"请大家一切分享！ [img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=23248]微生物限度检查方法的验证[/url]

微生物限度检验 征求意见稿 谁看过

药品包装对包装药品的质量和使用安全起着十分重要的作用，因药品包装应能保证药品在生产、运输、贮存及使用过程中的质量，并便于临床使用。本章所述的药品包装是指直接与药品接触的内包装，这些包装材料和容器，简称药包材。药包材的微生物污染直接影响药品质量，可引起药品发霉、腐败，从而造成药品变质失效，特别是含有营养成分的药物制剂更易遭受污染、霉变，若温度适宜，空气中湿度又较高，则更有利于微生物的生长繁殖。因此，对微生物污染的监控是药包材质量和安全性评价的重要指标。一、分类 常用的药品包装材料、容器按材质成分可分为：塑料、玻璃、橡胶、金属及上述成分的组合材料。按包装的形状划分可分为：①容器，如口服固体药用高密度聚乙烯瓶等。②片、膜、袋，如聚氯乙烯固体药用硬片和药品包装用复合膜、袋等。③塞，如药用氯化丁基橡胶塞。④盖，如口服液瓶撕拉铝盖。⑤辅助用途。二、检验量 检验量是一次试验所用的供试量（瓶、支或cm2）。膜、袋、铝箔、复合硬片等的检验量为100cm2；软膏管、铝塑封口垫片检验量为10支（片）。三、微生物限度检查1.滴眼剂瓶（1），取数个试瓶，加入1/2标示容量的0.9﹪无菌氯化钠溶液，将盖旋紧，振摇1min，提取液进行薄膜过滤，按照微生物限度检查法测定。（2），标准：细菌数：每瓶不得过100个霉菌、酵母菌：不得检出金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌：不得检出2液体药用瓶（1），取数个试瓶，加入1/2标示容量的0.9﹪无菌氯化钠溶液，将盖旋紧，振摇1min，提取液进行薄膜过滤，按照微生物限度检查法测定。（2），标准 项目 口服液体药用瓶 外用液体药用瓶 细菌数个/瓶 ≦1000 ≦100 霉菌、酵母菌个/瓶 ≦100 ≦100 大肠埃希菌 不得检出 — — 金黄色葡萄球菌 — — 不得检出 铜绿假单胞菌 — — 不得检出 3口服固体药用瓶（1），取数个试瓶，加入1/2标示容量的0.9﹪无菌氯化钠溶液，将盖旋紧，振摇1min，提取液进行薄膜过滤，按照微生物限度检查法测定。（2），标准：细菌数：每瓶不得过1000个霉菌、酵母菌：每瓶不得过100个大肠埃希菌：不得检出4药品包装用复合膜、袋、铝箔、复合硬片（1）取试样用开孔面积20cm2的消毒过无菌的金属模板压在内层面上，将无菌棉签用氯化钠注射液稍沾湿，在板孔范围内擦抹5次，换[/c

USP微生物限度及无菌检验方法

关于微生物限度检查中MVD（最大有效稀释倍数）：指试验中供试品溶液被允许达到的最大稀释倍数。这个稀释指的是单次最大允许稀释的倍数还是可以多次稀释但每次最多稀释一倍？

讨论一下：微生物限度检查是否都需要取连续2-3个稀释级？