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活体叶绿定仪

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活体叶绿定仪相关的论坛

  • 活体叶面积测定仪对花生不同播种期是怎么测定的?

    活体叶面积仪对花生不同播种期是怎么测定的? 绿叶是花生进行光合作用的重要的也是主要的载体,叶片面积的大小是生物量和产量高低的重要参考指标和影响因素。对于不同密度、施肥量或者是播种时期的变化都会引起花生产量的变化。为了提高产量在种植的过程中应该注重这些方面的控制和把握,应用活体叶面积仪及时测定叶片面积的大小,做好以上工作使得花生绿叶进行适合的光合作用。  叶面积指数随生育进程呈抛物线变化,在苗期发展缓慢,进入开花下针期以后,叶面积发展加快,到结荚期达到高峰,以后缓慢下降。不同施肥水平间叶面积指数差异明显,处理植株生长缓慢,发育迟缓,因而叶面积指数较小;处理由于施肥量较大,虽然田间叶面积指数较大,但由于叶片相互郁闭,不通风、不透光,因而出现功能叶片过早衰落而影响产量。密度过大或过小对合理叶面积指数动态发展不利。密度为16.5万株/hm2时,叶面积指数最高为4.25,未能充分利用光能,群体产量低;当密度为19.5万株/hm2时,活体叶面积测定仪测定计算最高叶面积指数为5.96,且能保持较长时间,能充分利用光能,通风透光良好,因而产量最高。密度为21.0万株/hm2时,结荚期的叶面积指数达7.39,然后到饱果成熟期迅速下降,这是由于密度过大,遮荫严重,导致下部叶片过早衰落的结果。对不同的播种期,活体叶面积测定仪每个时期的测量值具有一定的差距,同时随着播期的时间的推迟,叶面积指数自然也会跟着降低,但是成熟时随播期的推迟反而会越来越大,这主要是因为成熟时期花生的叶片已经基本上失去光合作用的能力,因此叶面积会逐渐的减少。

  • 活体荧光寿命光度测量系统

    [url=http://www.f-lab.cn/microscopes-system/tcspec.html][b]活体荧光寿命光度测量系统[/b][/url]能够同时[b]测量活体荧光寿命和光度值[/b],它采用时间[b]相关单光子计数TCSPC[/b]技术,非常适合动物活体荧光寿命测量和组织荧光寿命测量和光度测量。采用皮秒激光器和单光子计数探测器,集成高速电路,光学和光纤探测器,有力保证了荧光寿命测量。活体荧光寿命测量系统配备了灵活软件,使得用户随意移动动物,也可测量荧光寿命并记录光度值。而配备了4个光纤探测器确保了整套荧光寿命测量系统可以重复,长时间并且同时测量样品。[img=活体荧光寿命光度测量系统]http://www.f-lab.cn/Upload/tcspec.jpg[/img][b]活体荧光寿命测量系统特点[/b]采用TCSPC时间分辨单光子计数技术,时间通道宽度降低到813飞秒采样间隔高达10微秒皮秒脉冲激光光源可提供445nm, 473nm, 488nm, 515nm, 和640nm 波长供选择配备4个单光子计数探测器覆盖450-700nm能够与其它动物行为记录仪器和电生理学以及基因仪器同步使用方便移动,配备手推车[img=活体荧光寿命光度测量系统]http://www.f-lab.cn/Upload/fluorescence-lifetime-1.JPG[/img][b]活体荧光寿命测量的意义[/b]荧光强度揭示发光样品的相对丰度,而荧光寿命能够反映出直接生化环境(比如氧化,还原,PH值),分子交互作用(比如通过FRET释放小分子)以及分子内部变化。通过定量分析荧光寿命图像和光谱数据,就可知道功能荧光分子或荧光蛋白,这对于探索常规组织的活体生化化学,疾病机理以及研究药物对于组织影响非常重要。活体荧光寿命测量光度系统领先的技术这款活体荧光寿命测量系统结构紧凑,具有超高的时间分辨率,非常适合活体生物化学信号采集分析,广泛用于生命科学,医学,动物学,用于人类疾病临床前研究和药物研发以及生命科学和医学研究。这套系统采用时间分辨单光子计数技术,具有超高的时间分辨率(皮秒到纳秒),能够记录实时动态荧光信息,结合FRET技术和仪器,可提供2-8nm 尺度的超高孔径分辨率[img=活体荧光寿命光度测量系统]http://www.f-lab.cn/Upload/fluorescence-lifetime-2.JPG[/img][b]活体荧光寿命测量光度系统典型应用[/b]脑科学研究行为科学研究动态钙记录疾病机理研究神经学研究电生理学研究自由移动动物学研究[b]活体荧光寿命测量光度系统[/b]:[url]http://www.f-lab.cn/microscopes-system/tcspec.html[/url]

  • 活体电穿孔法介绍

    1、什么是活体电穿孔活体电穿孔法(in vivo electroporation) 是将外源基因通过电场作用,导入动物目标组织或器官。由于这种方法能有效导入外源基因,可在多种组织器官上应用,并且效率较高。活体电穿孔法的原理很简单,在直流电场作用的瞬间,细胞膜表面产生疏水或亲水的微小通道105~115μm ,这种通道能维持几毫秒到几秒,然后自行恢复。在此期间生物大分子如DNA 可通过这种微小的通道进入细胞。近年来活体电穿孔法用于转基因研究的报道不断增多,在基因治疗方面的优势也日趋显著,是一种很好的活体基因导入方法。活体电穿孔法可用于检测瞬时表达系统中载体的表达状况。大量的研究表明活体电穿孔法在基因治疗方面有非常好的应用前景。因此目前国内外对活体电穿孔法介导外源基因转移的研究越来越多。2、活体电穿孔的法的特点 活体电穿孔法基因导入和表达效率较高,它的特点主要在以下几个方面:首先,靶器官的选择面广,理论上任何组织和器官都可以作为活体电穿孔的靶器官。 在用于基因治疗方面,要考虑到靶器官组织生理特性。如果所选择的局部组织细胞不能把所转移基因的表达产物分泌到外周血液循环中,则在某种意义上说已失去了基因导入的价值,这在基因治疗中是关键性的问题。当使用组织特异性表达载体时,研究人员应根据所构建的表达载体来选择基因转移和表达的靶器官组织。例如鱼精蛋白21 启动子可指导外源基因在精母细胞中特异性表达,以小鼠的睾丸作为靶器官将含有鱼精蛋白21启动子的表达载体导入,获得外源基因的表达量远远高于该基因在肝脏和骨骼肌中的表达。其次,对导入的外源基因片段的大小没有限制,从几KB 或十几KB 的表达载体, 到100~200KB 的YAC、BAC基因组 ,都有成功导入并获得表达的报道。此外活体电穿孔法操作简单快速,电穿孔的时间只有几秒钟,而且DNA片段不需要特殊的纯化操作。但电穿孔法也存在一些的缺点:首先,外源基因表达持续的时间很短,虽然外源基因导入后最快可在215 小时有表达,但大多1~2 月后表达量降至很低。外源基因表达的时间主要由于所构建的表达载体和基因导入的靶细胞组织器官不同而存在巨大差异。由于应用不同的表达载体,Muramatsu 在小鼠肝脏进行电穿孔7天后则检测不到外源基因的表达,而Heller 21 天后还可以检测到外源基因的表达。如果选择代谢和酶活动旺盛的组织器官如肝脏,则表达持续时间会较短,表达时间在1 个月以内,但以骨骼肌为靶组织,表达可持续15个月。3、 活体电穿孔法与其他活体基因导入方法的比较 到目前为止,非病毒载体的活体基因导入方法有直接注射法、脂质体法、基因枪法、电穿孔法等。每一种方法都有其各自的特殊性,因此很难将这几种方法进行简单的比较。直接注射法:可将外源基因直接注射到靶位点或血管中,但此种方法不适合以肌肉作为靶器官,它的外源基因表达效率极低,仅为电穿孔法的百分之一。脂质体法:活体基因转移法中脂质体法更适宜较大面积组织的基因导入,但无法避免DNA浓度变低,在出血的情况下会使本来不高的DNA浓度更加降低,往往造成基因导入效率低。基因枪法:适合于DNA较易接触到的质地较坚韧的组织如皮肤,而视网膜、胚胎和禽类的胚盘等组织会由于机械刺激和出血造成器质性损伤或发育停滞,因而不能用基因枪法完成。DNA包裹的金属颗粒从基因枪发出到达组织表面大多只几百微米的距离,较深层的组织不易操作, 表达效率也较低。Muramatsu报道在材料一致的情况下,电穿孔法的基因导入和表达效率明显高于其它方法,而且电穿孔法适合多种组织的操作 。4 、活体电穿孔法施加条件的研究 波型的选择在电穿孔过程中方波较指数衰减波更能获得较高的基因表达。同时方波只要要求控制电压和时间,十分直观,而指数衰减波需要控制的电压、电容、电阻等参数,这样的条件摸索过程中,方波较指数衰减波更易得到高表达。

  • 双波长活体荧光成像系统特点

    [url=http://www.f-lab.cn/vivo-imaging/lab-flare.html][b]双波长活体荧光成像系统[/b][/url]是最先进的开放空间[b]近红外荧光成像系统[/b],能够真正同时获得彩色视频和两种不同波长的[b]近红外荧光图像,[/b]广泛用于[b]体外近红外荧光成像分析,活体近红外荧光成像分析,荧光造影剂研发,低温荧光层析成像[/b]等应用。双波长活体荧光成像系统是实验室近红外荧光成像研究的理想仪器,它提供A/D、D/A、TTL输入和输出,使复杂的重复实验自动化完成双波长活体荧光成像系统采用2个紧凑荧光成像头通过长距离六自由度运动支架和电磁制动臂连接到可移动的小车上,方便移动使用,并具有多种无菌操作和减少反射伪影的附件也可供使用。双波长活体荧光成像系统应用体外近红外荧光成像分析活体近红外荧光成像分析新型近红外荧光造影剂的研制低温荧光层析成像[img=双波长活体荧光成像系统]http://www.f-lab.cn/Upload/flare-open-imaging-R1.JPG[/img]双波长活体荧光成像系统规格参数视场 从0.9厘米到25.3厘米不等。工作距离 从12"到18"[b]不等[/b]分辨率 从50微米到500微米光照波段 3(彩色视频,近红外通道# 1、近红外通道# 2)同时成像通道 3通道(彩色视频,近红外通道# 1、近红外通道# 2)无菌使用 通过专有的悬垂/盾牌组合。见附件标签。可移植性好 4医用个人脚轮刹车运输 可重复使用,防水,防火,防震运输箱声明 仅用于实验室研究使用。不用于人类或动物诊断。[img=双波长活体荧光成像系统]http://www.f-lab.cn/Upload/FLARE-OPEN-imagin_300x239.png[/img][img=双波长活体荧光成像系统]http://www.f-lab.cn/Upload/FLARE-OPEN-imagin_300x239.png[/img]双波长活体荧光成像系统:[url]http://www.f-lab.cn/vivo-imaging/lab-flare.html[/url]

  • 近红外活体荧光成像系统介绍

    [url=http://www.f-lab.cn/vivo-imaging/fluobeam-imaging.html][b]近红外活体荧光成像系统[/b][/url]是开放式[b]活体荧光成像系统[/b]和[b]体内荧光成像系统[/b],是非侵入性[b]活体荧光成像系统品牌[/b]中具有适中的[b]活体荧光成像系统价格[/b],也可用于术中荧光成像.[b]近红外活体荧光成像系统[/b]fluobeam提供各种活体动物实时荧光图像和荧光成像视频,适合各种大小活体动物无创荧光成像,也可用于及手术或切除手术术中荧光成像.[b]近红外活体荧光成像系统[/b]fluobeam超级小巧而紧凑,适用于各种实验室研究,广泛兼容各种荧光探针,适用于不同的活体研究领域。[b]近红外活体荧光成像系统[/b]应用领域包括:• 肿瘤学淋巴结定位• 的分布和发展• 靶向探针• 心血管研究• 免疫学和传染病 [img=近红外活体荧光成像系统]http://www.f-lab.cn/Upload/fluoptics_system_imaging.jpg[/img][b]近红外活体荧光成像系统[/b]fluobeam不同波长选择:• fluobeam800• fluobeam700• fluobeam650• fluobeam600• fluobeam500[img=近红外活体荧光成像系统]http://www.f-lab.cn/Upload/fluobeam-results.png[/img]近红外活体荧光成像系统:[url]http://www.f-lab.cn/vivo-imaging/fluobeam-imaging.html[/url]

  • 德国开发出首台可观察活体细胞的超高分辨率生物显微镜

    近日,德国IBIDI公司成功开发出一款超高分辨率生物显微镜。该公司宣称基于新型随机光学重建显微技术“(d)STORM”,利用该公司独创的特殊塑料底板“μ-Slides”可实现超高分辨率观察活体细胞。 STED,SIM,(F)PALM 和(d)STORM等新型光学显微技术可有效避免衍射极限,获得纳米级水平的超高分辨率成像。这些超高分辨率显示技术可应用到生物实验研究,观察了解组织细胞分子结构。IBIDI公司采用了创新性的含有亲水性膜涂层的塑料材质底板“μ-Slides”替代传统玻璃底板,首次实现了“活体细胞”超高分辨率观察。这种被成为“ibi-Treat”的亲水性膜涂层性能可以与标准的细胞培养瓶和培养皿相媲美。 IBIDI公司相关研发工作受到了德国联邦教研部《生命科学领域光学技术—基本细胞功能》项目的资助。

  • 硝酸还原酶活力测定(活体法)

    一、原理硝酸还原酶(NR)是植物氮素同化的关键酶,它催化植物体内的硝酸盐还原为亚硝酸盐,产生的亚硝酸盐与对–氨基苯磺酸(或对–氨基苯磺酰胺)及α–萘胺(或萘基乙烯二胺)在酸性条件下定量生成红色偶氮化合物。其反应如下: http://tong.dxy.cn/upload/asset/2009/10/26/1256434988.jpg生成的红色偶氮化合物在540nm波长下有最大吸收峰,可用分光光度法测定。硝酸还原酶活性可由产生的亚硝态氮的量表示。一般以Nμg·g-1·h-1为单位。NR的测定可分为活体法和离体法。活体法步骤简单,适合快速、多组测定。离体法复杂,但重复性较好。二、仪器与用具分光光度计;真空抽气泵(或20ml注射器筒);天平;单面刀片;保温箱(或恒温水浴);刻度试管(15ml);移液管(5ml×2,2ml×8,1ml×2)。三、试剂1. 亚硝酸钠标准液 称取分析纯NaNO2 0.1000g水溶后定容至100ml,吸取5ml用水稀释定容至1000ml,即为每ml含NaNO2 5μg(亚硝态氮近似1μg/ml)的标准液。2. 0.1mol/L pH7.5的磷酸缓冲液:K2HPO4 19.24g,KH2PO4 2.2g,加水溶解后定容至1000ml。3. 1%(W/V)对-氨基苯磺酸溶液:称取1.0g加入25ml浓HCl中,用蒸馏水定容至100ml。4. 0.2%(W/V)α-萘胺溶液:称取0.2gα-萘胺溶于25ml冰醋酸中,用蒸馏水定容至100ml。5. 30%三氯乙酸溶液:75.0g三氯乙酸水溶后定容250ml。6. KNO3(0.1mol/L)、异丙醇(1% V/V)、磷酸缓冲液(0.1mol/L)混合液:称3.03g KNO3溶于300ml 0.1mol/L的磷酸缓冲液中,再加3ml异丙醇混匀。四、方法1. 标准曲线制作取7支洁净烘干的15ml刻度试管按表13-1顺序加试剂,即配成0-2.0μg的系列标准亚硝态氮溶液。摇匀后在30℃保温箱或恒温水浴中保温30min,然后在540nm波长下比色。以亚硝态氮(μg)为横坐标,光密度值为纵坐标绘标准曲线或建立回归方程。表13-1 各试剂加入顺序 http://tong.dxy.cn/upload/asset/2009/10/26/1256434989.jpg

  • 拉曼光谱仪无创活体检测

    请教一下各位老师学者,有没有做过用拉曼光谱仪进行人体活体检测的实验,例如,眼前房的房水葡萄糖浓度的在体测量,有的话不吝赐教!

  • TERESA——全球领先的活体基因导入专家

    TERESA®活体基因导入仪是目前国内唯一获准进入人体临床试验的活体电穿孔基因导入装置,系上海交通大学国家“863”成果转化项目,由上海塔瑞莎公司进一步深度开发,其独具的特异性技术参数可以显著提高DNA、RNA等核酸及蛋白、化学小分子物质的导入效率,增强基因表达水平及免疫反应。有别于传统基因导入装置,本产品高效、安全、便携且易于操作,特别适合于动物模型中的活体基因导入研究。(最新发表文章:Jingying Zhou, Allen K.L. Cheung,Zhiwei Chen, et al. PD1-based DNA vaccine amplifies HIV-1 GAG-specific CD8+ Tcells in mice. J Clin Invest.2013, doi:10.1172/JCI64704影响因子:15.43Jingying Zhou, Allen K.L. Cheung,Zhiwei Chen, et al. Potentiating Functional Antigen-specific CD8+ T CellImmunity by a Novel PD1 Isoform-based Fusion DNA Vaccine. Molecular Therapy ,2013, doi:10.1038/mt.2013.63)影响因子:7.04公司简介:上海塔瑞莎生物技术有限公司是坐落于上海张江国家自主创新高科技园区的高科技企业,专注于电脉冲导入技术平台开发近15年,与美国洛克菲勒大学、英国纽卡斯尔大学、中国科学院、清华大学等国内外顶尖科研单位开展了广泛合作,先后申请和获得专利等知识产权近40项,获得“国家十一五和十二五重大科技专项”、及“上海市科委国际合作项目基金”等资助。产品已广泛应用于HIV、HBV、结核、流感、肿瘤、糖尿病等多领域的动物、人类疾病防治研究。

  • 光镊技术成功捕获活体动物细胞

    为活体研究和临床诊断提供了一种全新的技术手段2013年05月09日 来源: 中国科技网 作者: 吴长锋 最新发现与创新 中国科技网讯 中国科学技术大学光学与光学工程系李银妹课题组,近日与上海交通大学魏勋斌教授合作,采用活体动物内的细胞,发展了动物体内细胞三维光学捕获技术。日前,国际著名学术期刊《自然·通讯》在线发表了这项研究成果,网站还以《医学研究:用光清除血管被堵塞的血管》为题对该研究工作进行报道。 在活的动物体内研究细胞生长、迁移、细胞及蛋白质间相互作用等生物学过程,对生命科学、医学研究及临床诊断具有重大意义,因此体内研究技术一直是活体研究热点之一。 李银妹课题组利用光镊技术,首次对活体动物内的细胞实现光学捕获。研究表明,光镊可以直接深入到活体内,对细胞进行有效操控。研究人员用光镊穿过小鼠耳朵真皮层,到达深度约50微米毛细血管中,捕获和操控血管中的红细胞。将光镊固定在血管中心,血管中快速流动的细胞经过光阱时被逐渐减速,直到一个细胞停留在光阱中,光镊将细胞捕获,并实现了三维操控。 课题组还利用光陷阱的作用聚集红细胞,人为制造出血管堵塞;针对血管中已聚集的细胞团簇,拖拽其中一个细胞引导疏通,使聚集的细胞逐渐疏散开,恢复正常血液流动,从而实施非接触手术式的血管疏通。 过去,光镊技术在生物医学领域的应用仅限于体外的单分子和细胞研究。李银妹课题组的这项研究技术能直接深入到动物活体内,对细胞进行实时观察、操控与测量,实施非接触式手术的实验取证,从而开拓了光镊技术研究活体动物新领域,为活体研究和临床诊断提供了一种全新的技术手段。(记者 吴长锋) 《科技日报》(2013-5-9 一版)

  • 活体显微镜

    [url=http://www.leica-microsystems.com/cn/%E4%BA%A7%E5%93%81/%E5%85%89%E5%AD%A6%E6%98%BE%E5%BE%AE%E9%95%9C/%E7%94%9F%E5%91%BD%E7%A7%91%E5%AD%A6%E7%A0%94%E7%A9%B6/%E5%80%92%E7%BD%AE%E6%98%BE%E5%BE%AE%E9%95%9C/the-leica-dmi8]活体显微镜[/url]用于对小动物活体进行观察,其可对小动物活体进行细胞级的研究。该显微镜可以将探头以满足微创的方式插入到动物体内任何部位进行观察,有些甚至可以在动物清醒的时候进行实验。该显微镜避免了做解剖切片的繁琐步骤,可以一直对同一动物进行研究,免除了因不同动物个体差异给实验带来的误差,简化并优化了实验步骤。目前该显微镜已应用于肿瘤,周围和中枢神经系统,心血管,干细胞,消化道以及药物研究等多个领域,很多著名高校和知名研究院所已经配备了这种高级显微镜。

  • 机器人可自动探查活体脑细胞内部运作

    中国科技网讯 据物理学家组织网近日报道,美国麻省理工学院和佐治亚理工学院研究人员开发出利用机器人操纵来自动发现和记录活体大脑中神经元信息的方法,即用一种全细胞膜片钳制动一个微小的空心玻璃针,在神经细胞的膜上开孔,以记录其内部电活性。该研究成果刊登在5月6日《自然·方法》期刊上。 这种深入大脑中神经元内部运作的方式可提供大量有用的信息,如电活性模式、细胞内部状况、甚至基因在某一时刻被闭合的剖面。然而,能够实现这个入口非常困难,目前世界上只有极少数实验室在进行尝试,这种自动发现和记录活体大脑中神经元信息的最新方法有望改变该领域研究现状。研究人员证明,在一个细胞检测的计算机程序的引导下,与人工相比,该自动装置识别和记录活老鼠大脑中的神经元信息具有更好的精度和速度。 采用新型自动化装置消除了对活体细胞的活动进行数月定向和长期搜索的需要。采用这种技术,科学家可将大脑中数千个细胞划分成不同类型,还可绘制其彼此之间的连接,并从正常细胞中找出病变细胞。 研究人员称,该方法在研究大脑疾病方面将会尤其有用,如精神分裂症、帕金森氏症、自闭症和癫痫。科学家们一直难以描述这些疾病中一个细胞与其具有电活回路和性能的分子集成。描绘出疾病如何改变活体大脑内特定细胞分子,将会更好地发现药物的靶标。 如果通过人工对这种精密仪器进行操作,需花上4个月的训练时间,最终还可能不是很精准,于是研究人员将这项任务交与机器人来操作,其机械手臂由计算机程序做指导。研究人员说,在神经科学中使用机器人来研究有生命的动物还仅仅是个开始,而像这样的机器人可能被用于在大脑中有目标点地注入药物,或提供基因治疗载体,希望新方法也能激励神经学家追求各类机器人自动化,例如在光遗传学方面,利用光有针对性地干扰神经回路和确定神经元在大脑功能中发挥的因果作用。(记者 华凌) 《科技日报》(2012-05-11 二版)

  • 【求助】植物活体取样 内吸杀虫剂

    老板最近产生了个新想法,想做活体检测蔬菜果实内的活内吸活体杀虫剂的残留。小弟不是分析科班出身,老板也没做过,非常迷茫。希望各位大侠帮帮忙。搜了搜文献,倒是有用微透析做取样的,但看上去挺麻烦,有没有人能给俺指条明路呢。。。

  • 活体光学成像技术专栏| 活体成像中荧光染料的选择与成像

    活体光学成像技术专栏| 活体成像中荧光染料的选择与成像

    [font='Times New Roman'][font=宋体]上期文章中,[/font][/font][font=宋体]我们介绍了活体成像实验中荧光蛋白的选择方法,荧光蛋白[/font][font=宋体]在[/font][font=宋体]肿瘤细胞株[/font][font=宋体]筛选[/font][font=宋体]、病毒载体[/font][font=宋体]表达[/font][font=宋体]、转基因小鼠[/font][font=宋体]构建[/font][font=宋体]等[/font][font=宋体]应用中被广泛使用[/font][font=宋体]([/font][font=宋体]链接[/font][font=宋体])[/font][font=宋体]。在药物分布、纳米颗粒示踪、干细胞追踪等实验中,往往需要使用荧光染料对材料或细胞进行标记。[/font][font=宋体]本期将为大家介绍[/font][font=宋体]活体成像实验中[/font][font=宋体]常用的荧光染料![/font][font=宋体][color=#ff0000]Cy5.5[/color][/font][font=宋体][color=#ff0000]([/color][/font][font=宋体][color=#ff0000]Ex/Em[font=宋体]:[/font][font=Times New Roman]678/701 nm[/font][/color][/font][font=宋体][color=#ff0000])[/color][/font][font=宋体][color=#ff0000][font=宋体]和[/font]Cy7[/color][/font][font=宋体][color=#ff0000]([/color][/font][font=宋体][color=#ff0000]Ex/Em[font=宋体]:[/font][font=Times New Roman]749/776 nm[/font][/color][/font][font=宋体][color=#ff0000])[/color][/font][font=宋体][color=#ff0000]是[/color][/font][font=宋体][color=#ff0000]对分子标记的[/color][/font][font=宋体][color=#ff0000]最优选择[/color][/font][font=宋体][color=#ff0000]之一;[/color][/font][font=宋体][color=#ff0000][font=宋体]而[/font]DiD[/color][/font][font=宋体][color=#ff0000]([/color][/font][font=宋体][color=#ff0000]Ex/Em[font=宋体]:[/font][font=Times New Roman]644/663 nm[/font][/color][/font][font=宋体][color=#ff0000])[/color][/font][font=宋体][color=#ff0000][font=宋体]、[/font]DiR[/color][/font][font=宋体][color=#ff0000]([/color][/font][font=宋体][color=#ff0000]Ex/Em[font=宋体]:[/font][font=Times New Roman]748/780[/font][/color][/font][font=宋体][color=#ff0000])[/color][/font][font=宋体][color=#ff0000]染料则常用于活体成像实验中对细胞进行标记。[/color][/font][font='Times New Roman'][color=#ff0000]Cy5.5 [/color][/font][font=宋体][color=#ff0000][font=宋体]、[/font]Cy7[/color][/font][font='Times New Roman'][font=宋体]避开[/font][/font][font=宋体]了[/font][font='Times New Roman'][font=宋体]可见光区[/font][/font][font=宋体],[/font][font='Times New Roman'][font=宋体]在生物组织中的穿透深度较大。水和血红蛋白[/font][/font][font=宋体]对[/font][font='Times New Roman']700[font=宋体]~[/font][font=Times New Roman]900 nm[/font][font=宋体]的[/font][/font][font=宋体]光[/font][font='Times New Roman'][font=宋体]吸收都很少,[/font][/font][font=宋体]使得[/font][font='Times New Roman'][font=宋体]近红外光可以[/font][/font][font=宋体]穿透[/font][font='Times New Roman'][font=宋体]组织内部多达[/font]15 cm[font=宋体]。同时,这类染料还拥有紫外光区染料和同位素标记无法具备的生物安全性。[/font][/font][font='Times New Roman'][font=宋体][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2020/10/202010261000471506_4987_1887_3.png!w575x363.jpg[/img][/font][/font][align=center][font=宋体]DiD[/font][font=宋体]、[/font][font=Times New Roman]DiR[/font][font=宋体]细胞膜荧光探针[/font][/align][font='Times New Roman'][/font][font='Times New Roman'][color=#191919]DiD[/color][/font][font=宋体][color=#191919][font=宋体](红色荧光染料)[/font][/color][/font][font='Times New Roman'][color=#191919][font=Arial]是亲脂性荧光染料家族成员之一,它可以用来[/font][/color][/font][font=宋体][color=#191919][font=宋体]标记[/font][/color][/font][font='Times New Roman'][color=#191919][font=Arial]细胞膜和其它脂溶性生物结构。当[/font]DiD[font=Arial]与细胞膜结合后其荧光强度大大增强,这类染料有着很高的淬灭常数和激发态寿命。一旦对细胞染色,这类染料在整个细胞膜上扩散,最佳浓度时可以使整个细胞膜染色。[/font][font=Times New Roman]DiD[/font][font=Arial]可以用来对活细胞进行成像和流式分析。[/font][/color][/font][font='Times New Roman'][color=#191919]DiR[/color][/font][font=宋体][color=#191919][font=宋体](近红外荧光染料)[/font][/color][/font][font='Times New Roman'][color=#191919][font=Arial]是一个亲脂性[/font][/color][/font][font=宋体][color=#191919][font=宋体]的[/font][/color][/font][font='Times New Roman'][color=#191919][font=Arial]花青[/font][/color][/font][font=宋体][color=#191919][font=宋体]染料[/font][/color][/font][font='Times New Roman'][color=#191919][font=Arial]。常用于标记细胞质膜。[/font]DiR [font=Arial]的两个[/font][font=Times New Roman]18-[/font][font=Arial]碳链插入到细胞膜,从而进行特定的、稳定的细胞染色,几乎不会发生细胞间的染料转移。[/font][/color][/font][font=Arial][color=#191919]DiR[font=Arial]和其他细胞膜荧光染料如 [/font][font=Times New Roman]DiI[/font][font=Arial](橙色荧光),[/font][font=Times New Roman]DiO[/font][font=Arial](绿色荧光),[/font][font=Times New Roman]DiD[/font][font=Arial](红色荧光)配合使用,为多色成像和流式细胞分析提供了有效的工具。[/font][/color][/font][font=Arial][color=#191919][font=Arial][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2020/10/202010261001339140_6935_1887_3.png!w572x222.jpg[/img][/font][/color][/font][font=Arial][font=宋体][font=宋体]当我们对分子或细胞成功标记后,需要选择合适的仪器进行成像获取实验数据。[/font][/font][/font]

  • 苏州纳米所等在硫化银近红外量子点活体成像研究中获进展

    随着生物医学影像技术的不断发展,近红外荧光成像技术在生物医学研究领域得到了越来越多的关注和应用。其中,近红外二区(1000 nm-1400 nm)荧光对生物组织穿透能力强,成像信噪比高,该区域荧光成像技术在生物活体成像领域已展现出巨大潜力。量子点(Quantum dots, QDs)作为一种新型的纳米荧光探针,具有亮度高、光稳定性强、光谱可调等传统荧光染料不可比拟的优势,在生物标记、成像与传感等方面得到了广泛应用,而开发具有近红外二区荧光发射、生物相容性好、量子产率高的QDs是当前其用于活体荧光成像所面临的重要挑战。 中科院苏州纳米技术与纳米仿生研究所王强斌研究员课题组在“单源前驱体制备Ag2S近红外量子点”(J. Am. Chem. Soc. 2010, 132, 1470–1471)的基础上,进一步优化制得了量子产率更高、生物相容性更好、尺寸均匀可控的Ag2S近红外QDs。通过与美国斯坦福大学戴宏杰教授课题组合作,利用Ag2S QDs进行了细胞成像与毒性研究。结果表明,在水溶性Ag2S QDs表面修饰不同的生物识别分子,可实现对不同细胞系的特异性标记,并且该Ag2S QDs几乎没有细胞毒性(ACS Nano 2012, 6, 3695–3702)。 在上述工作基础上,王强斌课题组与戴宏杰教授课题组继续合作,进一步将Ag2S QDs用于动物活体成像研究。结果表明,因肿瘤组织对大分子的高通透性和滞留效应(简称EPR效应),肿瘤对QDs具有很高的摄取(图2),该现象为肿瘤早期诊断以及手术的可视化提供了重要的技术基础。同时,他们对导入小鼠体内QDs的命运进行了追踪,发现除了富集于肿瘤部位的QDs外,其它QDs大部分在注射24小时后不断的随粪便和尿液排出;一周后,体内各个器官(肝和脾除外)的QDs均已基本排出(图3)。 该工作已在国际著名杂志Angewandte Chemie International Edition上发表。对Ag2S QDs的长期体内代谢、分布和毒理研究正在进行之中。 此项工作得到中科院“百人计划”、中科院先导专项、国家自然科学基金委和科技部等的大力支持。 原文链接http://www.cas.cn/ky/kyjz/201209/W020120921399246236683.gif 图1:(a)Ag2S QDs成像示意图,(b)和(c)分别为Ag2S QDs的实物和暗场中的荧光照片,(d)和(e)分别为吸收和荧光光谱,(f)为Ag2S QDs的TEM照片。http://www.cas.cn/ky/kyjz/201209/W020120921399246247360.gif图2:4T1肿瘤对Ag2S QDs的高效摄取http://www.cas.cn/ky/kyjz/201209/W020120921399246242640.gif图3:Ag2S QDs的活体滞留和排泄情况

  • 活体光学成像技术专栏| 活体成像中荧光蛋白的挑选指南

    活体光学成像技术专栏| 活体成像中荧光蛋白的挑选指南

    [font='Times New Roman'][font=宋体]引言[/font][/font][i][font='Times New Roman'][font=宋体]无数科学家的努力下,蛰居在水母的绿色荧光蛋白已经被导入到病毒、放线菌、酵母、植物、果蝇、线虫、小鼠、大鼠、人类细胞等几乎所有的模式生物,荧光蛋白的发现与应用被认为是点亮了生命科学,让黑暗中的生命活动被可视化的展示在科学家眼前。[/font][/font][/i][font='Times New Roman'][font=宋体]上期文章中,我们对比了活体光学成像的两种技术,生物发光和荧光成像的不同点。随着荧光标记技术的进一步发展,荧光成像的应用范围已经大大超过了生物发光,荧光成像已经可以满足绝大多数情况下的实验需求。[/font][/font][font='Times New Roman'][color=#ff0000][font=宋体]荧光成像需要对检测的细胞或分子进行荧光标记[/font][/color][/font][font='Times New Roman'][font=宋体]。目前,主要有两种标记方法,第一种利用[/font][/font][font='Times New Roman'][color=#191919][font=Arial]内源荧光信号[/font][/color][/font][font='Times New Roman'][color=#191919][font=宋体],在细胞中表达荧光蛋白进行标记。第二种利用荧光分子对细胞、药物或纳米颗粒等分子进行标记。[/font][/color][/font][font='Times New Roman'][font=宋体]本期将为大家介绍荧光蛋白[/font][/font][font=宋体][font=宋体]的[/font][/font][font='Times New Roman'][font=宋体]选择方法![/font][/font][align=center][img=,581,228]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2020/09/202009271417587236_9957_1887_3.png!w581x228.jpg[/img][font='Times New Roman'][color=#191919] [/color][/font][/align][align=center][font='Times New Roman'][color=#191919]Rainbow of fluorescent proteins [Tsien lab][/color][/font][/align][align=center][font='Times New Roman'][color=#191919][font=Arial]选择荧光蛋白建议考虑的参数[/font][/color][/font][/align][font='Times New Roman'][color=#191919]1. [/color][/font][font='Times New Roman'][color=#191919][font=Arial]激发波长[/font]/[font=Arial]发射波长[/font][/color][/font][font='Times New Roman'][color=#191919][font=Arial]:每一种荧光蛋白都有其独特的激发波长和发射波长,因此,选择的荧光蛋白必须是使用的[/font][/color][/font][font='Times New Roman'][color=#191919][font=宋体]成像[/font][/color][/font][font='Times New Roman'][color=#191919][font=Arial]系统能够激发和检测到的。比如,使用的[/font][/color][/font][font='Times New Roman'][color=#191919][font=宋体]成像系统只有两个激发光源:[/font][/color][/font][font='Times New Roman'][color=#191919]488 nm[font=Arial]和[/font][font=Times New Roman]561 nm[/font][/color][/font][font='Times New Roman'][color=#191919][font=宋体]。[/font][/color][/font][font='Times New Roman'][color=#191919][font=Arial]那就不能够选择远红外荧光蛋白。[/font][/color][/font][font='Times New Roman'][color=#191919][font=宋体]同时[/font][/color][/font][font='Times New Roman'][color=#191919][font=Arial]使用超过一个荧光蛋白时,必须确保发射波长没有重叠。[/font][/color][/font][font='Times New Roman'][color=#ff0000][font=宋体]荧光蛋白应用于活体成像实验时,尽量选择红色或近红外的荧光蛋白,这类荧光蛋白的发射波长较长,具有更好的[/font][/color][/font][font=宋体][color=#ff0000][font=宋体]组织[/font][/color][/font][font='Times New Roman'][color=#ff0000][font=宋体]穿透[/font][/color][/font][font=宋体][color=#ff0000][font=宋体]能力。[/font][/color][/font][font='Times New Roman'][color=#191919]2. [font=Arial]寡聚反应[/font][/color][/font][font='Times New Roman'][color=#191919][font=Arial]:[/font][/color][/font][font='Times New Roman'][color=#191919][font=宋体]早期开发的[/font][/color][/font][font='Times New Roman'][color=#191919][font=Arial]荧光蛋白易于寡聚化,[/font][/color][/font][font='Times New Roman'][color=#191919][font=宋体]与[/font][/color][/font][font='Times New Roman'][color=#191919][font=Arial]目的基因融合表达时可能会影响目的基因蛋白的生物学功能。[/font][/color][/font][font='Times New Roman'][color=#ff0000][font=宋体]因此[/font][/color][/font][font='Times New Roman'][color=#ff0000][font=Arial]建议使用单体的荧光蛋白,比如[/font]mCherry[font=Arial]。[/font][/color][/font][font='Times New Roman'][color=#191919]3[/color][/font][font='Times New Roman'][color=#191919]. [font=Arial]亮度[/font][/color][/font][font='Times New Roman'][color=#191919][font=Arial]:荧光蛋白的亮度值由消光系数与量子产率的乘积计算得出。在许多情况下,将荧光蛋白的亮度与[/font]EGFP([font=Arial]设定为[/font][font=Times New Roman]1)[/font][font=Arial]进行比较,有一些荧光蛋白非常暗淡(例如[/font][font=Times New Roman]TagRFP657[/font][font=Arial],其具有亮度只有[/font][font=Times New Roman]0.1[/font][font=Arial])[/font][/color][/font][font='Times New Roman'][color=#191919][font=宋体]。[/font][/color][/font][font='Times New Roman'][color=#ff0000][font=Arial]因此[/font][/color][/font][font='Times New Roman'][color=#ff0000][font=宋体]活体成像实验时,[/font][/color][/font][font='Times New Roman'][color=#ff0000][font=Arial]亮度也需要考虑。[/font][/color][/font][font='Times New Roman'][color=#191919]4[/color][/font][font='Times New Roman'][color=#191919]. pH[font=Arial]稳定性[/font][/color][/font][font='Times New Roman'][color=#191919][font=Arial]:如果计划在酸性环境中表达荧光蛋白,则此参数非常重要,一些荧光蛋白具有不同的[/font][/color][/font][font='Times New Roman'][color=#191919][font=宋体]激发[/font]/[font=宋体]发射[/font][/color][/font][font='Times New Roman'][color=#191919][font=Arial]光谱(例如[/font]mKeima[font=Arial])或在[/font][font=Times New Roman]pH[/font][font=Arial]变化时荧光强度会发生改变(例如[/font][font=Times New Roman]pHluorin[/font][font=Arial],[/font][font=Times New Roman]pHTomato[/font][font=Arial])。[/font][/color][/font][font=宋体][color=#191919]5.[font=宋体]避免自发荧光:[/font][/color][/font][font=宋体][color=#191919][font=宋体]生物体自身的很多物质具有较强的自发荧光,如指甲、毛发具有强烈的绿色背景信号,因此活体成像时需要对动物进行完全的脱毛处理或尽量避免绿色荧光蛋白,可选[/font][/color][/font][font='Times New Roman'][color=#191919]RFP[font=宋体]、[/font][font=Times New Roman]dsRed, mCherry, mTomato[/font][/color][/font][font=宋体][color=#191919][font=宋体]等荧光蛋白。[/font][/color][/font][b][font='Times New Roman'][color=#ff0000] [/color][/font][font='Times New Roman'][font=Arial]在选择好了荧光蛋白后,后续就是做实验、拿数据、发文章了![/font][/font][/b][font='Times New Roman'][font=Arial]可[/font][/font][font='Times New Roman'][color=#191919][font=Arial]是选用什么成像[/font][/color][/font][font=Arial][color=#191919][font=Arial]设备[/font][/color][/font][font='Times New Roman'][color=#191919][font=Arial]好呢?[url=http://dwz.date/cwes]点击了解更多详情![/url][/font][/color][/font]

  • 海水叶绿素现场分析仪定标问题

    我自己开发了一款海水水下叶绿素分析仪器,不知道如何对仪器进行定标,配置叶绿素标准曲线是采用丙酮为基体的叶绿素溶液呢还是培养活体藻类进行稀释测定?如果采用丙酮基体的溶液定标是不是会与实际值差距较大?

  • 【讨论】CRI(Cambridge Research&Instrumentation)活体成像,荧光,生物学发光

    CRI活体成像系统 CRI(Cambridge Research Instrumentation)公司的Maestro系统,是一套价格平易、性能杰出的活体成像系统。由于采用了多光谱成像及分析技术,因此大幅的提升可见光几近红外光标定是的灵敏度、多重染色应用的灵活度,以及定量的精确度。看得更清楚 自体荧光-从没有进行标定的组织所散发出的背景荧光-会使得较弱的荧光讯号变得模糊不清,因此也限制了传统的活体内荧光成像技术的应用。即使高灵敏度,、超低温的CCD也于事无补,因为它们只是更有效率地捕捉到自体荧光讯号。而Maestro系统使用独特的多光谱成像技术,能够实质性的去除自体荧光,将那些用其它方法所看不到的标定物体显示出来-在接近全黑的背景中呈现明亮的讯号。这在讯号∕噪声比的显著改善,可以将灵敏度增加好几倍,因此可以检测到更细小或更模糊的靶标记。看得更准确 准确且具重现性的测量,对于一个荧光成像系统来说,是项非常必要的功能。对于自体荧光讯号进行多光谱的去混合处理,使得特定讯号的量测变得更为准确。在光谱上有重叠的标定物,彼此之间的干扰情形,也可予以消除。对于经过去混合处理后的荧光讯号,加以定量量测,将会变得非常简单。因为此时的荧光讯号是在一个接近全黑的背景中,突显为非常明亮的区域,更加适合用于人工或自动的方式进行分类及分析。看得更多 Maestro系统的多光谱成像技术,将多重荧光探针的应用加以最佳化。 Maestro系统所得的去混合处理影像,把每一个标定物的讯号彼此独立出来(即使存在着非常明显的光谱重叠)。由于这个系统在光谱上的使用弹性,所有散射波长在420到950nm的标定物,都可以单独或合并使用。这些可用的标定物包括eGFP,dsRed,Cy5,Cy5.5,Cy7,ICG,IRDyeTM700,IRDyeTM800,以及其它如量子点quantum dot荧光试剂等。应用范围1.荧光肿瘤模式2.以抗体进行的检测3.分子标定试剂4.发炎区域染色定位5.光敏染料6.荧光药物之药物动力学7.血管生成标记有任何问题,请发邮件lovesparkle@126.com,我们会马上给您回复![img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=64217]CRI活体成像系统材料[/url][img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=64218]CRI活体成像材料-2[/url]

  • 美科学家使用数百万细菌创建“活体霓虹灯”

    http://www.biomart.cn//upload/userfiles/image/2012/01/1325747079.jpg据英国每日邮报报道,目前,美国加利福尼亚州大学圣地亚哥分校的研究人员能够“同步化”数百万细菌的生物时钟来形成一种新型生物广告牌,像霓虹灯广告牌一样闪烁发光。细菌体形式的“生物像素”像霓虹灯一样脉冲闪动,迄今为止,研究人员已创建由13000生物像素(大约6000万细菌)构成的发光芯片。这些闪光信息是通过在具有生物时钟的细菌体上附加荧光蛋白质形成的,在一个细菌群体中同步数千细菌的生物时钟,然后一致性地同步数千个闪光细菌群体同时发光或者停止。这个芯片通过诱导细菌群体内部彼此间进行化学通信来实现“同步效应”,之后诱导细菌群体释放气体与其他细菌群体进行通信。最终结果将形成一个缓慢的闪光效应,研究人员能够非常有效地进行控制,他们已使用这种方法来制作大学标语广告。研究人员称,很可能未来使用这种发光生物芯片可用于制作探测毒素物质的传感器,其有效性远超过竞选活动的高调广告牌,同时,“同步生物”性传感器远比当前使用的电子传感器更加灵敏有效。美国加利福尼亚州大学圣地亚哥分校生物工程师和生物学教授杰夫-哈斯蒂(JeffHasty)说:“这种类型的活体传感器颇具吸引力,人们可利用它作为不间断性监控器,长期呈现一种既定图案。”据悉,他是加利福尼亚州大学圣地亚哥分校生物科学系、生物电路学会研究小组负责人。由于这些细菌体将以不同方式响应不同浓度环境,因此可以改变它们的闪光模式频率,它们可以提供一种毒素的危害性的连续性变化,或者监控病原体产生的任何变化。

  • 活体光学成像技术专栏| 荧光成像与生物发光成像技术的比较

    [i][font='Times New Roman'][font=宋体]引言[/font][/font][/i][font='Times New Roman'][font=宋体]在上一期的专栏里[/font][/font][font=宋体],我们对荧光成像和生物发光的基本原理进行了对比。同时也留下了几个问题:[/font][font='Times New Roman'][font=宋体]针对我的课题[/font][/font][font=宋体],生物发光和荧光成像哪个好?什么情况下选择生物发光,什么情况下选择荧光成像。别急,今天将为大家解答关键问题:[/font][b][font=宋体][color=#ff0000]荧光成像和生物发光成像的优缺点是什么?[/color][/font][/b][align=center][font='Times New Roman']一、 [/font][b][font=宋体]荧光成像技术的优点[/font][/b][/align][font='Times New Roman'][font=宋体]相比生物发光成像[/font][/font][font=宋体],[/font][font='Times New Roman'][font=宋体]荧光成像技术的优势主要表现在[/font][/font][font=宋体]:[/font][font='Times New Roman']1. [/font][b][font='Times New Roman'][font=宋体]荧光蛋白及荧光染料的标记能力更强[/font][/font][font=宋体]。[/font][/b][font=宋体]荧光标记分子种类繁多,包括荧光蛋白、荧光染料、量子点标记等,可以对基因、蛋白、抗体、化合药物等进行标记。[/font][font=宋体][color=#ff0000]应用范围极广[/color][/font][font=宋体],可以对样本进行[/font][font=宋体][color=#ff0000]多色标记[/color][/font][font=宋体],一个样本同时获得多种细胞或药物的分布[/font][font=宋体]。[/font][font='Times New Roman']2. [/font][b][font='Times New Roman'][font=宋体]信号强度[/font][/font][font=宋体]高[/font][/b][font=宋体]由于荧光成像的[/font][font=宋体][color=#ff0000]光子强度较生物发光更强[/color][/font][font=宋体][font=宋体],持续时间长,对[/font]C[/font][font='Times New Roman']CD[/font][font=宋体]的灵敏度要求相对较低,不需要必须配备低温冷[/font][font='Times New Roman']CCD[font=宋体]即可获得清晰的成像结果,节省实验成本和购置成本。[/font][/font][font='Times New Roman']3. [/font][b][font='Times New Roman'][font=宋体]实验成本低[/font][/font][font=宋体],[/font][font='Times New Roman'][font=宋体]成像过程简单[/font][/font][/b][font='Times New Roman'][font=宋体]相比生物发光成像,成像前无需注射荧光素酶底物。有合适的激发光源照射就可以发出特定波长的发射光[/font][/font][font=宋体]。[/font][font='Times New Roman'][font=宋体]只要荧光基团稳定,就可实现[/font][/font][font='Times New Roman'][color=#ff0000][font=宋体]随时激发随时发光随时检测[/font][/color][/font][font='Times New Roman'][font=宋体]。[/font][/font][font='Times New Roman']4. [/font][b][font=宋体]从活体到离体均可成像[/font][/b][font=宋体][font=宋体]相比生物发光只能在活细胞内才会产生发光。荧光蛋白或荧光染料只需要保持荧光基团稳定即可稳定发光。可以在活体或离体组织器官进行观察,在实验前期荧光材料制备阶段,可以直接在[/font]E[/font][font='Times New Roman']P[font=宋体]管中进行成像观察[/font][/font][font=宋体]。[/font][font='Times New Roman']5. [/font][b][font=宋体]应用范围广[/font][/b][font=宋体]相比生物发光成像,荧光成像技术应用范围极广。在肿瘤生长与转移、药物的分布与代谢、纳米颗粒的靶向性与代谢、植物基因的表达、生物相容性材料开发、新型标记技术的开发等多个研究中均可用到荧光成像技术。([/font][font=宋体][color=#ff0000][font=宋体]点击了解[/font]FOBI[font=宋体]整体荧光成像在上述领域的应用[/font][/color][/font][font=宋体])[/font][align=center][font='Times New Roman']二、 [b][font=宋体]生物发光技术的优点[/font][/b][/font][/align][font='Times New Roman'][font=宋体]相比荧光成像[/font][/font][font=宋体],生物发光成像的主要优势表现在:[/font][b][font=宋体]1[font=宋体]、特异性强,无自发荧光[/font][/font][/b][font=宋体]以荧光素酶作为体内报告源的生物发光方法,特异性极强。由于动物本身没有任何自发光,使得生物发光具有极低的背景和极高的信噪比。[/font][b][font=宋体]2[font=宋体]、[/font][/font][font='Times New Roman'][font=宋体]高灵敏度[/font][/font][/b][font='Times New Roman'][font=宋体]由于生物体内很多物质在激发光的照射[/font][/font][font=宋体]下[/font][font='Times New Roman'][font=宋体]也会发出荧光[/font][/font][font=宋体],[/font][font='Times New Roman'][font=宋体]这些非特异性荧光背景会影响检测灵敏度[/font][/font][font=宋体],[/font][font='Times New Roman'][font=宋体]荧光成像的灵敏度最高可在动物体内检测到约[/font]10[/font][sup][font='Times New Roman']4[/font][/sup][font='Times New Roman'][font=宋体]细胞,而生物发光具有在动物体内监测[/font]10[/font][sup][font='Times New Roman']2[/font][/sup][font='Times New Roman'][font=宋体]数量级细胞的灵敏度。[/font][/font][b][font=宋体]3[font=宋体]、检测深度更高[/font][/font][/b][font='Times New Roman'][font=宋体]对于需要在深部[/font][/font][font=宋体]组织[/font][font='Times New Roman'][font=宋体]下进行的研究(检测的深度在[/font]3~4cm[font=宋体])[/font][/font][font=宋体],[/font][font='Times New Roman'][font=宋体]应用生物发光是最佳的选择[/font][/font][font=宋体]。[/font][b][font=宋体]4[font=宋体]、[/font][/font][font='Times New Roman'][font=宋体]精确定量[/font][/font][/b][font=宋体]由于荧光素酶基因是插入细胞染色体中稳定表达的,单位细胞的发光数量、发光条件相对稳定。即使标记细胞在动物体内有复杂的定位,亦可从动物体表的信号水平测量出发光细胞的相对数量。[/font][font='Times New Roman'][color=#ff0000][font=宋体]荧光成像和生物发光技术[/font][/color][/font][font=宋体][color=#ff0000],[/color][/font][font='Times New Roman'][color=#ff0000][font=宋体]是互为补充[/font][/color][/font][font=宋体][color=#ff0000],[/color][/font][font='Times New Roman'][color=#ff0000][font=宋体]分别满足不同的研究领域[/font][/color][/font][font=宋体][color=#ff0000]。对于不同的研究,可根据两者的特定及实验要求,选择合适的方法。[/color][/font][table][tr][td][font='Times New Roman'] [/font][/td][td][align=center][font='Times New Roman']优点[/font][/align][/td][td][align=center][font=宋体]缺点[/font][/align][/td][/tr][tr][td][align=center][font=宋体]荧光成像技术[/font][/align][/td][td][font=Wingdings][color=#333333]2 [/color][/font][font=Verdana][color=#333333]荧光染料、蛋白标记能力强,可用于多重标记[/color][/font][font=宋体][color=#333333],[/color][/font][font=Verdana][color=#333333]信号强度大,成像速度快[/color][/font][font=宋体][color=#333333]。[/color][/font][font=Wingdings][color=#333333]2 [/color][/font][font=Verdana][color=#333333]实验成本低[/color][/font][font=宋体][color=#333333]。[/color][/font][font=Wingdings][color=#333333]2 [/color][/font][font=宋体][color=#333333]体内、体外,器官、活体均可成像。[/color][/font][font=Verdana][color=#333333] [/color][/font][font=Wingdings][color=#333333]2 [/color][/font][font=Verdana][color=#333333]应用范围极广[/color][/font][/td][td][font=Wingdings][color=#333333]n [/color][/font][font=Verdana][color=#333333]非特异性荧光限制了灵敏度,体内检测最低约[font=Verdana]104[/font][font=宋体]细胞[/font][/color][/font][font=宋体][color=#333333]。[/color][/font][font=Wingdings][color=#333333]n [/color][/font][font=Verdana][color=#333333]检测深度受限制[/color][/font][font=宋体][color=#333333],[/color][/font][font=Verdana][color=#333333]较难精确体内定量[font=Verdana] [/font][/color][/font][font=宋体][color=#333333]。[/color][/font][/td][/tr][tr][td][align=center][font=宋体]生物发光技术[/font][/align][/td][td][font=Wingdings][color=#333333]2 [/color][/font][font=Verdana][color=#333333]特异性强,无自发荧光[/color][/font][font=宋体][color=#333333],[/color][/font][font=Verdana][color=#333333]背景低[/color][/font][font=宋体][color=#333333]。[/color][/font][font=Wingdings][color=#333333]2 [/color][/font][font=Verdana][color=#333333]高灵敏度,在体内可检测到几百个细胞[/color][/font][font=Wingdings][color=#333333]2 [/color][/font][font=Verdana][color=#333333]可精确定量[/color][/font][font=宋体][color=#333333]。[/color][/font][/td][td][font=Wingdings][color=#333333]n [/color][/font][font=Verdana][color=#333333]信号较弱,检测时间较长,需要灵敏的[font=Verdana]CCD[/font][font=宋体]镜头,仪器价格贵[/font][/color][/font][font=宋体][color=#333333]。[/color][/font][font=Wingdings][color=#333333]n [/color][/font][font=Verdana][color=#333333]要求高[/color][/font][font=宋体][color=#333333],[/color][/font][font=Verdana][color=#333333]需要注入荧光素,实验成本高[/color][/font][font=宋体][color=#333333]。[/color][/font][font=Wingdings][color=#333333]n [/color][/font][font=宋体][color=#333333]只能用于细胞标记,应用范围窄。[/color][/font][/td][/tr][/table][i][font=宋体]结束语[/font][/i][font=宋体]随着活体成像技术的发展特别是荧光标记技术的发展,越来越多的生物学研究需要用到活体光学成像的方法。无论大家是选择生物发光或者荧光成像技术,苦恼总是随之而来,例如:[/font][font=宋体][color=#ff0000]生物素在体内可以维持多长时间?荧光蛋白和染料种类繁多,我该怎样选择呀?[/color][/font][font=宋体][font=宋体]别急,下期我们继续为大家介绍关于活体成像技术应用与选择的问题与难点。[/font][/font][font=宋体][font=宋体][url=http://dwz.date/cwes]点击了解更多活体成像技术的应用与仪器信息![/url][/font][/font][align=center][font='Times New Roman'][font=宋体]参考文献[/font][/font][/align][font='Segoe UI'][color=#222222]1. [/color][/font][font='Segoe UI'][color=#222222]Su, Y., Walker, J.R., Park, Y. [/color][/font][i][font='Segoe UI'][color=#222222]et al.[/color][/font][/i][font='Segoe UI'][color=#222222] Novel NanoLuc substrates enable bright two-population bioluminescence imaging in animals. [/color][/font][i][font='Segoe UI'][color=#222222]Nat Methods[/color][/font][/i][font='Segoe UI'][color=#222222] [/color][/font][b][font='Segoe UI'][color=#222222]17, [/color][/font][/b][font='Segoe UI'][color=#222222]852–860 (2020). [/color][/font][font='Segoe UI'][color=#222222]2. [/color][/font][url=#!][font='Segoe UI'][color=#222222]M.Keyaerts[/color][/font][/url][url=#!][font='Segoe UI'][color=#222222]V.Caveliers[/color][/font][/url][url=#!][font='Segoe UI'][color=#222222]T.Lahoutte[/color][/font][/url][font='Segoe UI'][color=#222222] [/color][/font][url=https://www.sciencedirect.com/science/referenceworks/9780444536334][font='Segoe UI'][color=#222222]Comprehensive Biomedical Physics[/color][/font][/url][font=等线][color=#222222] [/color][/font][url=https://www.sciencedirect.com/science/referenceworks/9780128012383][font='Segoe UI'][color=#222222]Volume 4[/color][/font][/url][font='Segoe UI'][color=#222222], 2014, Pages 245-256.[/color][/font]

  • 活体细胞内实现DNA可擦写数据存储 或可成为研究癌症、衰老和有机体发展的强大工具

    中国科技网讯 据物理学家组织网5月21日报道,斯坦福大学生物工程系的科学家创建了一种新系统,能够重复编码、擦写和储存活体细胞DNA中的数据。他们表示,可编程的数据存储在活体细胞的DNA内,或可成为研究癌症、衰老和有机体发展等的强大工具。相关研究报告发表在同日出版的美国《国家科学院学报》上。 虽然基因物质本身就具备天然的数据存储介质,但支持科学家可靠且可逆地将信息写入活体DNA的工具仍十分匮乏。以前的研究虽可通过单个酶的表达朝一个方向翻转基因序列,但这一过程并不可逆,而科研人员需要不断翻转基因序列以创建可完全重复使用的数据存储器。 科学家坦言,虽然翻转DNA的截面至两个方向之一并不困难,但获取蛋白质水平的平衡却非易事。为了使新系统正常工作,研究团队需要精确控制微生物内两个对立蛋白质、整合酶和切除酶的动态。 他们经过3年多达750次的尝试,最终成功创建了相当于1比特(1位)的基因物质。相关人员解释说,如果DNA的截面指向一个方向,它就是0,如果指向另一个方向,其就是1。由此,科研人员能计算出细胞分裂的次数,这或将赋予科学家制止细胞癌变发生的能力。 研究小组将这款设备命名为“重组酶可寻址数据”模块(RAD)。RAD可借助改编自噬菌体的丝氨酸和切除酶来按需翻转和还原特定的DNA序列。这将形成类似于计算机领域的“永久性数据存储”,能在无功耗的情况下保留信息。随后,科研小组在单个微生物内对RAD模块进行了测试,其在缺乏基因表达的情况下也能被动存储信息,十分可靠。此外,它们能重复切换而不使性能发生退化,使科学家目睹细胞分裂100余次,这对支持组合化的数据存储十分重要。 研究人员表示,他们未来的目标是尽快创建可扩展的、可靠的生物位,实现1字节的可编程基因数据的存储,随后再逐步挖掘基因数据存储更广泛的应用范围。(记者 张巍巍) 《科技日报》(2012-05-23 二版)

  • 【原创大赛】来了一批活牛蛙——试论活体能否做为食品送检

    【原创大赛】来了一批活牛蛙——试论活体能否做为食品送检

    [align=center][b]来了一批活牛蛙——试论活体能否做为食品送检[/b][/align][align=left][/align][align=left] 我们部门负责样品制备,其中农产品制备尤其考验手工、刀工,不管是鱼、鸡,还是蟹、蹄,我们都是挥刀即取、根据实验需求制备出相应的样品。不想有天,居然来了批活的样品——牛蛙。[/align][align=left] 这可是新鲜玩意,样品制备间里瞬时大呼小叫、四处延请高手共商宰蛙,毕竟这是有四肢、会动会叫的活物。[/align][align=left] 当然最后这批样品顺利制备完毕,送交到检验员手上。[/align][align=left] 而我思考的是:牛蛙属于哪一类食品?食品送检能送活体吗?如果能,下次有人牵头活羊来送检,我们的技术力量看来还不够呀。[/align][align=left] 查阅《国家食品安全监督抽检实施细则》(2018年版)(以下简称《细则》)可知,牛蛙属于农产品中的水产品,在其他水产品类别中就包括了甲鱼、牛蛙、鱿鱼等。看来这牛蛙没抽错,可以抽。就是这甲鱼和牛蛙要都是活的送检,不好弄啊。以前我们对付的样品都是死的,这猛不丁来个活的——咱可是斯文人、不见血滴。[/align][align=left] 有没有法规、标准说到食品送检不能或能送活的呢?[/align][align=left] 百度下,食品指各种供人食用或者饮用的成品和原料以及按照传统既是食品又是中药材的物品,但是不包括以治疗为目的的物品。1994年《[url=https://baike.baidu.com/item/%E9%A3%9F%E5%93%81%E5%B7%A5%E4%B8%9A%E5%9F%BA%E6%9C%AC%E6%9C%AF%E8%AF%AD][color=windowtext]食品工业基本术语[/color][/url]》 对食品的定义为:可供人类[url=https://baike.baidu.com/item/%E9%A3%9F%E7%94%A8][color=windowtext]食用[/color][/url]或饮用的物质,包括加工食品,[url=https://baike.baidu.com/item/%E5%8D%8A%E6%88%90%E5%93%81/75390][color=windowtext]半成品[/color][/url]和未加工食品,不包括烟草或只作药品用的物质。[/align][align=left] 这个定义,不好界定活的动物是否属于未加工食品或者食品原料呢。[/align][align=left] 好在《细则》中P312对水产品的的抽样方法做了规定。“较大个体的水产品应[b][color=red]现场沿脊背剖开[/color][/b]分割为两部分,分别作为检验样品和复检备份样品;取多个个体时应[b][color=red]分别沿脊背剖开[/color][/b]分割为两部分,其中一部分组合为检验样品,另一部分组合为复检备份样品;对小个体产品如虾、贝等,取出足够数量样品,混合后采用四分法取样。”[/align][align=left] 看到这松了口气,看来根据《细则》要求,在抽样现场就应该把牛蛙宰杀分割好,不需要把活的牛蛙送到实验室来啦。[/align][align=left] 那个谁,把刀收好来。杀蛙焉用菜刀?![/align][align=left] [img=,690,451]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/07/201807012136144199_3900_1645752_3.jpg!w690x451.jpg[/img][/align][align=left][/align]

  • 活体光学成像技术专栏| 光学活体成像前动物脱毛的必要性与操作

    活体光学成像技术专栏| 光学活体成像前动物脱毛的必要性与操作

    [font=宋体]在[/font][font='Times New Roman'][font=宋体]上[/font][/font][font=宋体]几期的[/font][font='Times New Roman'][font=宋体]文章中,[/font][/font][font=宋体]我们[/font][font=宋体]分别[/font][font=宋体]介绍[/font][font=宋体]了荧光成像与生物发光成像的比较、荧光蛋白、荧光染料的挑选方法。当大家选择了合适的标记方法并建立成像模型(药物注射、肿瘤注射等)后,需要对实验动物进行活体成像观察。[/font][b][font=宋体][color=#ff0000]在成像前,对实验动物进行完全脱毛是非常重要的步骤,直接关系能否获得高质量的成像数据。[/color][/font][/b][font=宋体]今天将为大家详细介绍成像前动物脱毛处理的方法与注意事项。[/font][align=center][b][font=宋体]脱毛的必要性[/font][/b][/align][font=宋体]1[font=宋体]、[/font][/font][font=宋体][color=#ff0000]毛发会阻挡、吸收和散射光线。[/color][/font][font=宋体][font=宋体]特别是黑色毛发比其他颜色的毛发会吸收更多的光,即使是白色毛发也会吸收光线,导致很难检测到荧光信号。近红外波段([/font]NIR spectrum[font=宋体])的染料在组织中有最小的散射和吸收,但依然会被毛发显著的吸收和散射 [/font][font=Times New Roman][1-2][/font][font=宋体]。研究表明,毛发的存在使皮下注射部位的荧光强度降低了[/font][font=Times New Roman]50% [3][/font][font=宋体]。因此在使用活体成像系统检测前,有必要将实验动物进行完全脱毛以减少对成像信号的干扰。[/font][/font][font='Times New Roman']2[font=宋体]、[/font][/font][font=宋体][color=#ff0000]毛发会产生强烈的自发荧光。[/color][/font][font='Times New Roman'][font=宋体]动物组织特别是毛发和皮肤中存在内源性分子如弹性蛋白([/font][/font][font='Times New Roman']elastin[/font][font='Times New Roman'][font=宋体])、胶原蛋白([/font][/font][font='Times New Roman']collagen[/font][font='Times New Roman'][font=宋体])、色氨酸([/font][/font][font='Times New Roman']tryptophan[/font][font='Times New Roman'][font=宋体])、[/font][/font][font='Times New Roman']NADH[font=宋体]、[/font][/font][font='Times New Roman'][color=#333333][font=宋体]卟啉类化合物([/font][/color][/font][font='Times New Roman']porphyrins[font=宋体])[/font][/font][font='Times New Roman'][color=#333333][font=宋体]、[/font][/color][/font][font='Times New Roman'][color=#333333][font=宋体]黄素类([/font][/color][/font][font='Times New Roman']flavins[/font][font='Times New Roman'][color=#333333][font=宋体])[/font][/color][/font][font=宋体][color=#333333][font=宋体]在波长<[/font]600 nm[font=宋体]的激发光下会产生强烈的自发荧光[/font][font=Times New Roman][4][/font][font=宋体]。这些自发荧光物质非特异性地被激发光源激发,导致在成像时产生很强的背景信号,将毛发完全脱掉可以有效降低背景信号。[/font][/color][/font][align=center][b][font=宋体]脱毛的材料准备[/font][/b][/align][font=宋体]可以说,对实验动物完全脱毛是活体成像实验的必要步骤之一。首先我们需要准备以下材料备用:[/font][table][tr][td][font=宋体]物品[/font][/td][td][font=宋体]作用[/font][/td][/tr][tr][td][font=宋体]理发推剪[/font][/td][td][font=宋体]将大部分毛发进行去除[/font][/td][/tr][tr][td][font=宋体]脱毛膏[/font][/td][td][font=宋体]去除剩下的绒毛以完全脱毛[/font][/td][/tr][tr][td][font=宋体]棉签[/font][/td][td][font=宋体]用于涂抹和去除脱毛膏[/font][/td][/tr][tr][td][font=宋体]温水[/font][/td][td][font=宋体]用于清洗脱毛膏与绒毛[/font][/td][/tr][tr][td][font=宋体]纸巾或棉球[/font][/td][td][font=宋体]用于清洗脱毛膏和擦拭酒精[/font][/td][/tr][tr][td][font=宋体]75%[font=宋体]酒精[/font][/font][/td][td][font=宋体]用于皮肤消毒、消除脱毛膏的味道防止动物啃咬[/font][/td][/tr][tr][td][font=宋体]抗生素软膏(备选)[/font][/td][td][font=宋体]用于脱毛过程中偶尔的皮肤损伤消炎[/font][/td][/tr][/table][font=宋体][font=宋体]备注:脱毛膏可选进口品牌如[/font]Nair depilatory cream [font=宋体]、国产品牌如贞采源脱毛膏等均可。抗生素软膏可选进口的[/font][font=Times New Roman]Taro Pharmaceuticals[/font][font=宋体]三联抗生素、国产品牌如红霉素软膏均可。[/font][/font][align=center][b][font=宋体]脱毛的步骤[/font][/b][/align][font=宋体]在准备好材料后,按照以下步骤对实验动物进行完全的脱毛:[/font][font=宋体]1、[/font][font=宋体]动物麻醉,将实验动物使用麻醉机进行完全麻醉[/font][font=宋体]。[/font][font=宋体]2、[/font][font=宋体]理发推剪脱毛,将完全麻醉的动物使用理发推剪对感兴趣的成像区域进行脱毛,剔除大部分毛发。[/font][font=宋体]3、[/font][font=宋体][font=宋体]用棉签蘸取脱毛膏覆盖在脱毛区域,均匀涂抹后轻轻按摩数秒,等待[/font]30[font=宋体]秒[/font][font=Times New Roman]-1 [/font][font=宋体]分钟。[/font][/font][font=宋体]4、[/font][font=宋体][font=宋体]用纸巾或棉球用温水沾湿,将脱毛膏顺着毛发的生长方向进行清洗,完全去除绒毛。若此时仍有少量毛发残留,可重新蘸取少量脱毛膏涂抹在毛发上,等待[/font]30[font=宋体]秒后再清洗脱毛膏。[/font][/font][font=宋体]5、[/font][font=宋体][font=宋体]用纸巾或棉球蘸取[/font]75%[font=宋体]消毒酒精,对脱毛区域进行再次清洁,消除脱毛膏的味道。[/font][/font][font=宋体]6、[/font][font=宋体]若皮肤有受伤的部位,涂抹上抗生素软膏,将动物放置在加热垫上等待苏醒。[/font][align=center][b][font=宋体]其他注意事项[/font][/b][/align][font=宋体]1、[/font][font=宋体][font=宋体]脱毛膏已被证明是有效的、无创伤、无毒的,但是使用时依然需要注意时间,过长的涂抹时间会导致皮肤损伤。用[/font]75%[font=宋体]消毒酒精完全清洗脱毛膏的味道可以防止动物对脱毛部位的啃咬。[/font][/font][font=宋体]2、[/font][font=宋体]皮肤损伤会到导致成像时出现强烈的背景荧光,理发推剪要小心操作,尽量防止大面积的皮肤损伤。[/font][font=宋体]3、[/font][font=宋体]C57BL/6[font=宋体]小鼠[/font][font=宋体]脱毛后会扰乱正常的毛发生长周期,引起皮肤色素沉着,即皮肤变黑,导致成像信号被极大的衰减(可达到[/font]90%[font=宋体])[/font][font=Times New Roman][3][/font][font=宋体],因此脱毛步骤选择在成像前[/font][font=Times New Roman]1~2[/font][font=宋体]天进行最佳。此外,如果前期已经对[/font][font=Times New Roman]C57BL/6[/font][font=宋体]小鼠进行脱毛操作,则在成像前需要观察皮肤色素的沉着情况。[/font][/font][font=宋体]4[font=宋体]、可以用剃须刀片代替脱毛膏进行完全脱毛,但是需要练习和小心使用,否则容易割伤实验动物和实验人员。[/font][/font][font=宋体] [/font][font='Times New Roman'] [/font][align=center][b][font=宋体]毛发对成像质量的影响[/font][/b][/align][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2020/11/202011100939207430_3462_1887_3.png!w690x517.jpg[/img][font=宋体][font=宋体]如图所示,[/font]C57BL/6[font=宋体]小鼠通过尾静脉注射[/font][font=Times New Roman]ICG[/font][font=宋体]染料后使用理发推剪进行脱毛[/font][/font][font=宋体][font=宋体]。黄色框为剃毛较为干净的区域,蓝色框为残留有绒毛的区域,成像结果清楚显示:[/font]1[font=宋体]、脱毛更加干净的区域信号更强(平均荧光强度[/font][font=Times New Roman]5060[/font][font=宋体]);[/font][font=Times New Roman]2[/font][font=宋体]、残留绒毛的区域荧光信号由于被大量吸收,信号更低(平均荧光强度[/font][font=Times New Roman]1050.82[/font][font=宋体]);[/font][font=Times New Roman]3[/font][font=宋体]、颈部未脱毛区域,基本无无荧光信号(平均荧光强度[/font][font=Times New Roman]27.99[/font][font=宋体])【FOBI整体荧光成像系统拍摄】。[/font][/font][font=宋体]以上简单的例子即可表明毛发对成像质量的影响!以对腹腔中各脏器进行活体成像为例,标准的脱毛应该如下所示:完全去除绒毛并且脱毛范围需要稍大且不损伤小鼠皮肤。[/font][font=宋体][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2020/11/202011100939496128_1485_1887_3.png!w232x173.jpg[/img][/font][align=center][b][font=宋体]参考文献[/font][/b][/align][font='AdvTTe0754e31 \. B'][color=#131413]1[font=AdvTTe0754e31 . B]、[/font][/color][/font][font='Times New Roman'][color=#131413]Temporal Variations of Skin Pigmentation in C57Bl/6 Mice Affect Optical Bioluminescence[/color][/font][font='AdvTTe0754e31 \. B'][color=#131413] [/color][/font][font='Times New Roman'][color=#131413]Quantitation[/color][/font][font='AdvTTe0754e31 \. B'][color=#131413]. [/color][/font][font='Times New Roman'][color=#131413]Allison Curtis[/color][/font][font='AdvTTe0754e31 \. B'][color=#131413] [/color][/font][i][font='AdvTTe0754e31 . B'][color=#131413]et.al[/color][/font][/i][font='AdvTTe0754e31 \. B'][color=#131413]. [/color][/font][font='Times New Roman'][color=#131413]Mol Imaging Biol 13:1114Y1123[/color][/font][font='AdvTTe0754e31 \. B'][color=#131413].2011.[/color][/font][font='AdvTTe0754e31 \. B'][color=#131413]2[font=AdvTTe0754e31 . B]、[/font][/color][/font][font='Times New Roman'][color=#131413]Simple generation of hairless mice for in vivo imaging[/color][/font][font='AdvTTe0754e31 \. B'][color=#131413]. [/color][/font][font='Times New Roman'][color=#131413]Yoshikazu Hoshino[/color][/font][font='AdvTTe0754e31 \. B'][color=#131413].[/color][/font][font='Times New Roman'][color=#131413]Exp. Anim. 66(4), 437–445, 2017[/color][/font][font='AdvTTe0754e31 \. B'][color=#131413].[/color][/font][font='AdvTTe0754e31 \. B'][color=#131413]3[font=AdvTTe0754e31 . B]、[/font][/color][/font][font='Times New Roman'][color=#131413]Optical Imaging on the IVIS SpectrumCT System: General and Technical Considerations[/color][/font][font='AdvTTe0754e31 \. B'][color=#131413] [/color][/font][font='Times New Roman'][color=#131413]for 2D and 3D Imaging[/color][/font][font='AdvTTe0754e31 \. B'][color=#131413]. [/color][/font][font='Times New Roman'][color=#131413]Jen-Chieh Tseng[/color][/font][font='AdvTTe0754e31 \. B'][color=#131413]. [/color][/font][i][font='AdvTTe0754e31 . B'][color=#131413]et.al.[/color][/font][/i][font='AdvTTe0754e31 \. B'][color=#131413]4[font=AdvTTe0754e31 . B]、[/font][/color][/font][font='Times New Roman'][color=#131413]Hair Removal on Rodents[/color][/font][font='AdvTTe0754e31 \. B'][color=#131413]. [/color][/font][font='Times New Roman'][color=#131413]Johns Hopkins University Animal Care and Use Committee[/color][/font][font='AdvTTe0754e31 \. B'][color=#131413].[/color][/font]

  • 【转帖】走到濒危边缘的斑鳖:整个中国只剩两只活体

    你还记得《西游记》里,驮着唐僧师徒四人跨过通天河去西天取经的那只巨大的癞头鼋吗?它脾气暴躁,只因为师徒四人忘了替它给佛祖带句话,就一气之下将他们抛入水里。这巨大无比的癞头鼋并不仅仅存在于小说里,它其实一直生活在我们的身边。 它的名字叫斑鳖,是陆地上体积最大的一种龟鳖,体长可达1米多,重达100多公斤,寿命长达几百岁,不啻是现实版的“神兽”。 虽然斑鳖已经在地球上生活了数亿年,我们却只是在十几年前才为它验明正身,确定了它独一无二的身份。而此时,它早已走到了濒危的边缘——整个中国只剩下两只活体!好在它们正好是一“男”一“女”——为了不让这个星球上再多一种灭绝的生物,全世界的科学家都在绞尽脑汁,竭力让它们“延续香火”。 得名 曾经相见不相识 “我们一直把斑鳖当成了另外一种龟——鼋,而这也是它濒危的重要原因之一。”国际野生生物保护协会(WCS)中国两栖爬行类物种项目负责人吕顺清告诉本报记者。 关于鼋的记载,中国古籍当中有很多。《尔雅翼鼋》中就有说:“鼋,鳖之大者,阔或至一二丈。”可见在中国人的传统意识里,长得比较大的鳖就是鼋了。 而在鼋当中,还有一种格外大的,头颈布满黄色花纹,古人习惯叫它们“癞头鼋”。从古籍来看,它在江浙地区曾经广泛分布过,中国四大名著中有两本里都有它的身影:《西游记》里驮着师徒四人渡过通天河的是它,《红楼梦》里贾宝玉为了哄生了气的林妹妹开心,也曾经赌咒发誓:“好妹妹,千万饶我这一遭,原是我说错了。若有心欺负你,明儿我掉在池子里,叫个癞头鼋吞了去……” 其实,如果仔细观察,会发现这口耳相传中的“癞头鼋”和“鼋”有许多的不同,一般的鼋不可能超过100公斤重,而“癞头鼋”体重却可达100公斤以上,背甲长80厘米至110厘米或以上;癞头鼋的头部两侧有斑纹,鼋没有;癞头鼋有个“猪鼻子”,鼋也没有;癞头鼋有2块胼胝体,鼋却有4块…… 长久以来,这些明显的区别都被人们忽视了。 直到1873年,有一个英国学者率先发现了这“癞头鼋”有可能是一个独特的物种,他将其命名为“斯氏鳖(Osaria swinhoei)”,然而依然没有多少人注意到他的发现。 又过去了一百多年——1993年,苏州市科技学院生物系教授赵肯堂经过大量细致的研究,用大量的证据证明这“癞头鼋”实际上是一个十分独特的古老物种,它的名字应该叫“斑鳖”。 一夜之间,“癞头鼋”从鼋家族中独立而出,拥有了新名字——斑鳖。人们将其奉若国宝。然而,此时人们愕然地发现,这曾经在太湖流域做了上亿年湖底“霸主”的斑鳖,数量已经到了岌岌可危的地步——只剩下个位数了…… 为了保护斑鳖,赵肯堂教授奔走呼号,终于在2004年的第19届动物学大会上,全球有关专家决定采取行动拯救斑鳖。 濒危斑鳖敲响警钟 吕顺清告诉记者,在斑鳖曾经生活过的太湖流域,它是当之无愧的“霸主”,位于食物链的最顶端。湖底那些小鱼、小虾甚至是体积较小的龟鳖,都是它捕获的食物。然而,他一再强调,斑鳖生活的地方一定要有宽阔的水域:“这样它们才能躲避天敌。” 这实在令人疑惑:位于食物链最顶端的斑鳖又怎么会有天敌?到底是什么“天敌”可以置这巨大、好斗、并且有甲壳护卫的神兽于死地?吕顺清答道:“斑鳖的天敌只有一个,就是人类。” 必须承认的是:人类不仅蚕食污染着斑鳖世代生存的湖泊,更加对斑鳖进行过长期的捕杀——这是导致斑鳖数量急剧减少的重要原因。斑鳖的处境只是一个缩影:“事实上,中国几乎所有的野生龟鳖都处在濒危状态,必须引起人类重视。”吕顺清说。 海南师范大学生命科学学院的教授史海涛也赞成这种说法。他告诉记者,我国曾是龟资源很丰富的国家,有记录的龟类有30多种,仅海南就有龟类近20种之多。但今天在野外我们已经很难再发现它们的踪影了。 “与龟鳖曾共同生存过的恐龙早已灭绝,它们却奇迹般地延续至今。就个体而言,龟是现有生物种中生存力最顽强、寿命最长的动物之一。而它们的不幸也正源于长寿。”史海涛表示,中国人认为龟鳖是营养滋补和防治疾病的极好食品。这样的观念,加上商家受利益驱动一味渲染龟鳖的食用、强身和医疗价值,是导致中国龟鳖整体走向濒危的重要原因。 目前在中国野外,云南闭壳龟、金头闭壳龟、黑颈乌龟几乎已经灭绝;鼋四爪陆龟、潘氏闭壳龟、周氏闭壳龟、百色闭壳龟、山瑞鳖、凹甲陆龟、地龟、三线闭壳龟、黄缘盒龟、黄额盒龟等都处于濒危或者极度濒危的状态。就连最普通的乌龟也在急速消失。 因为中国本土的野生龟鳖几乎被吃光,出现在中国市场的野生龟鳖开始越来越多地来自越来越远的国家:孟加拉、巴基斯坦、印度、尼泊尔,甚至新几内亚、美国……史海涛告诉记者,1999年,他在金边参加的“亚洲龟类贸易研讨会”上,不同国家和地区的学者和政府官员根据各自掌握的贸易信息,画出了一幅世界范围内的野生龟鳖贸易路线图:“图上无数条箭头自印度尼西亚、马来西亚、菲律宾发出,最终却不约而同地指向了中国。” “最为讽刺的是,当野生龟鳖前赴后继地葬送于人类的贪欲,科学证据却表明,吃龟鳖不仅不会给人带来长寿,甚至还会威胁人的身体健康——龟鳖的长寿导致它们的体内沉积了大量的重金属,很多难以分解的有毒化学品(比如杀虫剂)大量集聚在野生龟鳖体内,对食用者造成伤害。 也许有一天——当所有的龟鳖都从这个星球上消失,我们只能在博物馆指着它们的化石标本,告诉孩子们:“这就是龟鳖,地球上最长寿的生物。”他们也许会发出疑问:“那它为什么会灭绝呢?” “这是我最不愿意见到的一幕。”史海涛说。濒危 国内最后一对斑鳖 在苏州动物园的池塘里有两只斑鳖,它们是国内最后的两只斑鳖。 它们一雄一雌,雄斑鳖已逾百岁,雌斑鳖年轻一些,也已至少八十高龄。 每年惊蛰前后,它们会结束长达四五个月的冬眠,从池底厚达半米的淤泥中苏醒而出。大部分的时间,它们会静静地呆在水中,游泳或潜伏。它们四肢的趾间都有满蹼,交替划水,速度比我们想象得要快很多。通常,被淹在水下的鳖头每隔2~3分钟才抬起一次,在呼气的同时喷射出含在口中的小股水柱,然后张嘴掀鼻进行吸气,10~15秒钟后又沉首水中,呼吸动作周而复始,循环不已。 中午,当和煦的阳光洒满大地,两只斑鳖会昂着小小的头,一前一后,缓缓游上岸,匍匐在池中的小岛上晒太阳,它们的四肢伸展开来,蹼也张开,尽情享受这一天当中最惬意的时光。“斑鳖是变温动物,它们需要用这样的方式来控制自己的体温,阳光中的紫外线还可以帮助它们杀灭病菌。”吕顺清这样解释斑鳖“晒背”的行为。 晒背对斑鳖十分重要,重要到如果它们的生活中缺少了这一环节,就意味着死亡。 事实上,它们对生活的环境要求的确很高:“首先要有洁净的水域,这样才能保证斑鳖的食物充足;水域要开阔,这样斑鳖才能潜伏起来躲避敌害,而且因为斑鳖领地感很强,两只雄性斑鳖遇到一起会打到你死我活的地步;不仅要有水域,而且还要有陆地。斑鳖要晒背,还要产卵,这些都要在陆地上才能进行……”吕顺清一一道来。 对于斑鳖来说,如此理想的生态环境被人类疯狂蚕食。江浙交界处的太湖流域曾经是它们的乐园,而如今,这片污染严重的水域里早已找不到任何斑鳖的行踪。 “在国内,人们已经很久没有在野外发现斑鳖的踪迹了。”吕顺清告诉记者,目前国内仅存的这两只斑鳖,雄性的那只,是上世纪30年代被人放生在苏州动物园的池塘里的(当时叫“昌善局”),雌性的那只则是建国前被一个马戏团老板在苏州买到的(也有一说是建国初期在黄浦江捕捉到的),在去年之前,它一直生活在长沙的动物园里。 几年前,当斑鳖的身份终于被学术界厘清,这两只斑鳖还曾有过另外几个散落四面八方的“难兄难弟”:一只在北京动物园,2005年,在它刚刚被验明正身之后不久便寿终正寝;一只在上海动物园,已经两百多岁了,但是没有活过2006年的冬天;苏州西园寺的放生池里也曾经有过斑鳖——据说上个世纪50年代的时候还有十几只——然而,2007年,随着最后一只名叫方方的斑鳖“撒手人寰”,静静的池塘里,再也没有斑鳖出现过……

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