为氨基酸分析

氨基酸分析仪分析的柱子为阳离子交换柱，要求分析之前要去除核酸，为什么呢？核酸对柱子有什么影响吗？还是说核酸的存在会影响氨基酸的测定？

近几年来由于饲料工业迅猛发展，对饲料产品的品质控制已经从常规的营养分析转到了微量分析，对饲料品质的评价已经从粗蛋白含量的高低，改为观测各种氨基酸含量是否符合要求，所以准确测定氨基酸含量就成了关键一环。本实验验证不同品牌的氨基酸分析仪在不同的实验室测定氨基酸含量是否有差别。

各位大侠：新来小弟请教各位，氨基酸全自动分析仪能否检测氨基酸里面的微量元素？谢谢！

氨基酸分析技术的特点与内涵文章来源：国家产品质量安全与法信息中心网 添加时间：2009-7-19 3:13:19 点击：1510摘要：在传统蛋白质分析技术基础上，结合现代分析仪器技术发展优势，针对氨基酸分析技术难点及存在问题，概括比较分析评价当前氨基酸分析技术特点。关键词：蛋白质 氨基酸 分析技术 研究进展1 前言迄今为止，自然界中已发现180多种氨基酸，其中参与蛋白质合成的氨基酸只有20多种，称为基本氨基酸。氨基酸主要有两种存在形式，一种是以游离态存在于生理体液(血浆、尿)、食品(酒、饮料)中；另一种是以结合态存在于肽和蛋白质中。蛋白质在乳中含量为3.0%~3.5%，是乳的主要成分，对乳品的理化特性和营养价值有重要的影响。由于国标法对蛋白的检测是通过检测样品含氮量而得到的，实际上是将样品消化分解，经蒸馏碱吸收后，测定的挥发性“氨基氮”，因而部分不法商贩用添加外源动植物蛋白粉或脲等含氮化合物（虚“氮”）来增加原料乳的氮含量，钻传统检测方法表征“虚氮”的漏洞，以蒙混过关。这些掺入水解动物蛋白或者含氮化合物的乳粉因其氨基酸的组成不合理，根本不能代表动、植物蛋白，不易消化，所以营养价值低下，导致人体吸收利用率降低，严重地影响到婴幼儿的生长发育和智力水平。因此，对氨基酸分析方法的研究与改进逐渐得到各国家、全社会的高度重视。在一般情况下，质量监督检验单位在市场上抽到产品进行检验所得的数据中，蛋白质含量实际上是用总氮含量表示的，所以在加工企业常规检验时、含氮化合物、水解动物蛋白等杂蛋白是测不出来的，因此需要建立快速分析、测定乳制品中蛋白质、氨基酸的检测方法，保障乳制品的质量与安全。,1958年，Spackman等首先提出了用阳离子交换色谱与柱后茚三酮衍生结合的方法分析蛋白质中的氨基酸，实现了氨基酸分析的自动化。其后，人们不断地发展新的氨基酸分析方法，柱前衍生反相高效液相色谱法、高效阴离子交换色谱-积分脉冲安培检测法、毛细管电泳法、蛋白质芯片技术等相继应用于氨基酸分析。现已是多种氨基酸分析方法并存、互补。本文就目前应用于氨基酸分析的主要方法作一比较分析。,,2 氨基酸分析技术的光谱分析优势及特点利用光谱探针方法定量分析蛋白质的研究在国际上十分活跃，其中，对有机染料(包括显色剂和荧光染料)结合分光光度法和金属离子-有机染料(包括显色剂和荧光染料)结合分光光度法的研究倍受重视。 2.1 有机染料结合分光光度技术因为有机染料结合分光光度法测定蛋白质操作简便，比较灵敏，又不需特别的仪器，方法应用比较广泛。现在研究较多的可作为探针的染料分子中，大部分都含有带正电荷的亲水性基团如羟基、磺酸基、酚羟基及不带电荷的疏水性基团，如苯环。这类方法的基础是在溶液pH小于等电点时，蛋白质的肽键亚胺和N端氨基质子化成阳离子，若有阴离子染料存在时，由于电荷作用，蛋白质便与染料结合沉淀或改变结合染料的光吸收特性，借染料颜色的减褪或变化的程度测定蛋白质的含量。已经应用的染料有酸性橙红、考马斯亮蓝G-250、溴甲酚绿、溴甲酚紫、埃铬青R和溴酚蓝。2.2金属离子-有机染料结合分光光度技术近几年发展了利用金属离子和有机染料特别是荧光染料形成配合物体系结合光光度法来测定蛋白质含量。金属离子与含有-OH或C=O的有机染料相遇时，氧原子中的孤对电子可顺利进人杂化轨道，形成稳定的配合体系，在酸性条件下，该体系遇到结构不对称的蛋白质分子时，互相极化产生静电作用而结合成新的大分子团，改变了原体系的光谱性能，从而能定量测定蛋白质的含量。该方法具有灵敏度高、线性范围广、干扰离子少、操作简单、快速及适用于常规应用等特点。2.3 荧光光度分析技术荧光法是定量测定蛋白质的另一种常用方法通常比分光光度法更灵敏。常用的方法有内源荧光法、荧光探针法、荧光偏振、时间分辨荧光法及激光诱导时间分辨免疫分析法。2.3.1 内源荧光分析技术蛋白质中存在着Tyr、Trp、phe残基，能够吸收270~300 nm的紫外光而发出紫外荧光。当测定体系中加入小分子配体（SM）时，SM与蛋白质发生相互作用，会导致蛋白质荧光的猝灭，利用SM对蛋白质内源荧光的猝灭这一现象可以确定蛋白质与SM的作用类型及其结合部位等。2.3.2 外源荧光分析技术对于蛋白质的研究仅利用其内源荧光是不够的，需要通过外源荧光性质的研究才能获得更多关于蛋白质分子的各种信息，这就使得荧光探针对蛋白质分析有着极其重要的意义，这已成为蛋白质微量检测及溶液的构相分析中不可缺少的手段之一。在外源荧光法中，又可分为有机荧光探针法和稀土荧光探针法。作为一个好的荧光探针应满足以下条件：探针分子与蛋白质分子的某一微区必需有特异性的结合，并且结合比较牢固；探针的荧光必须对环境条件敏感；蛋白质分子与探针结合后不影响其原来的结构和特性。在满足这些条件的基础上可进行蛋白质的测定和与金属离子结合的计量化学等。与光度法类似，蛋白质在和某些具有荧光特性的染料结合后，能引起荧光强度的变化，并且在一定浓度范围内与蛋白质浓度成正比，因此可用于蛋白质的测定。利用这些化合物在不同蛋白质分子中量子产率、峰位及谱带的变化，就可探测蛋白质分子结合区的极性、疏水性的大小，从而推论构象的稳定情况及变化等。2.3.3 荧光偏振分析技术利用荧光体在转动扩散速度上的差异而导致偏振荧光的差别，建立了荧光偏振测定法。利用荧光偏振还可以研究：酶与荧光底物的结合程度；蛋白质聚合与解离；蛋白质从螺旋到无规卷曲的研究。,3 氨基酸分析技术的色谱分析优势及特点3.1 柱后衍生高效阳离子交换色谱分析技术高效阳离子交换色谱（HPCEC）-柱后茚三酮衍生光度检测分离测定氨基酸是一种经典的氨基酸分析方法。此方法是利用氨基酸在酸性条件下形成阳离子而在阳离子交换柱中分离，分离后的氨基酸用茚三酮衍生、紫外可见光检测器检测。该方法以阳离子交换树脂为固定相、酸性缓冲液流动相，在柱后流出液中加入茚三酮使氨基酸生成具有可见光吸收的衍生物进行检测，具有重现性好、仪器稳定、结果可靠、适合于大量常规样品分析等优点。另外，由于衍生化反应发生在氨基酸与其物质分离之后，因而避免了其他物质的干扰，适合复杂样品中氨基酸的分析。其缺点是仪器复杂、体积大、费用高。此外，由于脯氨酸的测定波长在440nm，而其他氨基酸的测定波长为570nm，因脯氨酸不能和其他氨基酸同时测定。氨基酸分析自动仪就是基于阳离子交换色谱分离、柱后茚三酮衍生光度检测技术设计的。商品化的自动氨基酸分析仪是在20世纪60年代初问世，目前的自动氨基酸分析仪已实现了程控自动化和数据处理电脑化，分析时间已缩短至1 h以内。氨基酸自动分析仪实际上属专门用来分析氨基酸的高效液相色谱仪，其优点是高压、快速、灵敏，试剂和样品用量少、重现性好、分析结果稳定。广泛用于食品、医学、农业以及微生物等领域。3.2 柱前衍生反相高效液相色谱分析技术近20年来，柱前衍生反相高效液相色谱法（RP-HPLC）分析氨基酸得到了迅速发展，逐渐取代柱后衍生高效阳离子交换色谱（HPCEC）在许多领域中的应用。RP-HPLC分析方法更加快速灵敏。与专业氨基酸分析的自动分析仪不同，HPLC仪适用性更广、更灵活。RP-HPLC要求将氨基酸在柱前转化为适于反相色谱分离并能被灵敏检测的衍生物，柱前衍生的关键在于衍生试剂的选择。选择衍生试剂的标准是能与各氨基酸定量反应，每种氨基酸只生成一种化合物且产物有一定的稳定性，不产生或易于排除干扰物，操作简单，色谱分离分辨率高、检测灵敏度高，分析时间短，便于实现自动化和使产物能在不同型号的高效液相色谱仪上测定。目前比较常用的柱前衍生试剂有邻苯二甲醛（OPA）、异硫氰酸苯酯（PITC）、氯甲酸芴甲酯（FMOC-Cl）及丹酰氯（Dansyl-Cl）。衍生后的氨基酸一般键合在C18柱上，利用液液分配原理进行分离。流动相多以乙酸盐或磷酸盐缓冲液为主，以乙腈、甲醇或四氢氟喃为调节剂。由于氨基酸衍生物仍保留着两性化合物的特点，除改变调节剂之外，还可通过调节缓冲液pH值、离子强度、柱温等使之达到理想的分离。当然，不同衍生物所选用的柱型、流动相以及氨基酸的洗脱时间和顺序不尽相同。柱前衍生反相高效液相色谱法可用于分析蛋白质水解液、生理体液和食品等样品中的氨基酸。当与质谱技术结合时，采用电离喷雾质谱（ESI-MS）或电离喷雾串联质谱（ESI-MS/MS）联用技术方式，借助计算机的联机检索，可以实现高通量筛选和鉴定蛋白质混合体系。目前，，蛋白质组研究的高效液相色谱-质谱联用的方式有一维色谱-质谱联用技术、多维色谱-质谱联用技术以及亲和色谱-质谱联用技术等。一维色谱-质谱技术仅能分析一些不太复杂的蛋白质体系，而对复杂的多肽混合物常不能满足分离的要求。多维色谱分离的方法在某种程度上满足了对复杂蛋白质混合分离鉴定的要求。,,,3.3 两种氨基酸直接分析技术大多数氨基酸不具备生色团，因此无法利用分光光度法直接检测，故需采用化学衍生技术，使之生成可在紫外或可见光区有吸收的化合物，或者采用荧光法检测。但对于分析工作者来讲，尤其是在新化合物研制的过程中，面对多种未知的降解物，如采

最近忙氨基酸分析，用柱前衍生。发现样品有一个峰很高，尤其是水解之后更高。它不是17中氨基酸标准品中的一个，不知道是什么。。。。。。。。这样的话我怎么得知它是什么氨基酸呢？我算总量的时候可不可以用峰面积估算出这个峰代表的氨基酸的含量? 可不可以用质谱做？但是样品比较复杂。。。。。。。。。。。。。要怎么办呢？大侠们出手试试

氨基酸检测是不是只能用氨基酸分析仪，液相色谱检测氨基酸如何？前天来个天美公司的说代理日立氨基酸分析仪，报价真贵呀，买不起了，日立的氨基酸分析仪真有那么贵吗？求各位大侠帮助！

我单位新进日立L-8900氨基酸分析仪，主要分析浓缩果汁。前处理按照110度水解的办法48小时也不能处理好；后改用微波消解，使用6mol的盐酸，160度消解30分钟，仍然是黑乎乎的。请教分析过氨基酸的朋友，浓缩果汁的糖分含量一般较高，应该如何水解，如果用微波的话，应该怎么处理？

请版主谅解，实在没有找到氨基酸的专版，才发在液相版。问题：我们今年希望采购一台能分析游离氨基酸的氨基酸分析仪，主要是生物制品。之前有一台日立的L8900，请问有没有国内生产的氨基酸分析仪可以满足分析游离氨基酸要求的，谢谢。

请教各位老师一个问题。我们有一个混合氨基酸，想用氨基酸分析仪检测。但有的检测实验室讲，高纯度的氨基酸用氨基酸分析仪检测误差会比较大，这种说法有道理吗？谢谢！

[size=4]小可的单位近期计划采购一台氨基酸分析仪，目前正在选型阶段，碰到了一些问题请高手指点下。1.目前我们联系到的氨基酸分析仪厂家有2家，分别是日立和德国的塞卡姆。请问市面上比较好的氨基酸分析仪品牌都有哪些？2.就日立和塞卡姆的氨基酸分析仪相比较来说，哪个技术更成熟，口碑更好一些？3.在对比氨基酸分析仪优劣方面，我们应该主要看哪些指标？4.一台氨基酸分析仪的价位大概在多少钱？是不是必须要配浓缩仪？最后请给位给我们推荐一款氨基酸分析仪的牌子吧。更适合质检领域应用。因为为两家销售各执一词，我们对此也很困惑。快要决定了，比较着急，请各位不吝赐教。谢谢！[/size]

现有基因重组表达的糖蛋白想进行以下几项委托检测， C端氨基酸测序、氨基酸组分分析、肽图、质谱分子量、糖基化分析如果有意者请联系，将样品要求、检测费用以及合作流程发到邮箱，如有疑问可以加qq联系。 qq：278569901 邮箱：wbz5102@gmail.com

我这里将要分析氨基酸，我公司的色谱有两台，一个混合器，可以做梯度。我查资料看分析氨基酸有三种方法：柱前衍生，梯度；柱后衍生，梯度；氨基酸分析仪三种，我想问哪种分析方法最好？如果用液谱，那么具体条件是什么？柱前和柱后衍生又是怎么回事呢？我在色谱上安装衍生装置？还是有一个专门的衍生过程？分析氨基酸的具体方法是什么？

为什么氨基酸自动分析仪只能测定17种氨基酸，570nm下16种，440nm下1种，还有三种应该是天冬酰胺、谷氨酰胺、色氨酸，这三种测定不出的原因是什么？

http://www.dikma.com.cn/Goods/index/cid/154氨基酸组成测定是蛋白质组学、食品质量检测以及药品质量检测中的重要分析项目。由于该分析项目涉及的化合物种类繁多，且需要柱前或柱后衍生技术，对分析方法和分析产品具有较高要求。 下面列出氨基酸混标(18种)-详细信息货号中文名称英文名称CSA号规格53-AAS18-5ML 氨基酸混标(18种)-现货AMINO ACID STANDARD SOLUTION 5mL氨基酸均以 2.5 μmol/mL 浓度溶于 0.1N HCl 溶液，但L-胱氨酸浓度为 1.25μmol/mL53-A8949-10MGAsp(L-天冬氨酸)L-ASPARTIC ACID SIGMAULTRA56-84-8≥99% (TLC) 10mg12-O-74Glu(L-谷氨酸)L-(+)-Glutamic acid 56-86-02g56-84960-10GSer(L-丝氨酸)L-SERINE56-45- 119g12-O-37Gly(甘氨酸)Glycine56-40-65g53-H6034-25GHis(L-组氨酸)L-HISTIDINE NON-ANIMAL SOURCE CELL CUL71-00-125g[c

本标准规定了烟叶中游离氨基酸的氨基酸分析仪测定方法。

本标准规定了用氨基酸自动分析仪测定食物中氨基酸的方法

我是一个药厂的质控员，新近公司上了个氨基酸药品品种。群里有没有大侠用氨基酸分析仪检测氨基酸药品的，经验交流一下。

肥料中氨基酸分析应该怎样处理样品？[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱[/color][/url]检测需要的检测器是什么？效果和检出限怎样？目前最好的氨基酸检测手段又是什么？求教中。。。。。

我要用氨基酸分析仪测土壤中游离氨基酸的种类和含量.但不知道如何处理土壤样品 现在非常着急 不只那为好心人可知道如何做 谢谢

由于目前测定一种氨基酸(非人体必需),需购买一台氨基酸分析仪,但从目前调研来看,柱后衍生仪器的太贵,但一些采用柱前衍生的仪器不知又能不能保证测定这种氨基酸.请教大家有什么好办法啊.

氨基酸的测试和分析，应用方法和开发

刚买了氨基酸分析仪（日立的），请教如果要做海产品中的氨基酸，样品该如何前处理？？我的样品是虾，蟹，蛤等产品。

首先，我要开门见山的承认，我是某氨基酸分析仪代理公司的员工。此帖若与各位大虾的见解不同，还请指正。对论坛中有关氨基酸分析的帖子粗略浏览了一边，发现两个特点：一是到论坛中来发帖子的主要还是使用HPLC来做氨基酸分析，二是提到的专用氨基酸分析仪似乎只有“日立”。氨基酸分析无疑具有极高的价值（极端一些的说，大部分蛋白分析都是应该被氨基酸分析所取代的），同时也有相当的难度。正因为如此，国内的氨基酸分析发展才表现出一方面发展势头很好，另一方面真正把氨基酸分析工作做好的又不多。较HPLC而言，专用的氨基酸分析仪方法简单、单样成本低、干扰少、稳定性好，尽管仪器本身比HPLC要贵得多，也势必成为今后氨基酸分析的主力。有一篇帖子提到，“日立的氨基酸分析仪是世界上最好的”，真不知他/她是如何得来这个结论。没有调查就没有发言权，没有比较，如何能得出结论？做氨基酸分析的人基本都是知道日立的，因为日立做氨基酸分析仪已有几十年；然而，除了日立，他们还知道哪些氨基酸分析仪厂家呢？诸多原因导致欧美的氨基酸分析仪迟迟未能进入中国市场，而凭借日元贷款项目和援助项目的独有优势，日立在中国用户心目中已经悄然建立起“氨基酸分析仪＝日立”的心里暗示。但日立的氨基酸分析仪真的这么好吗？在北京一家同时拥有四种氨基酸分析仪（现在为3种）的单位，他们对日立L－8800的看法是“一般”，“分离效果和长期稳定性不如××仪器”……我不能说以偏概全，但对比总是难能可贵。我并非要写些东西来宣传我们的产品，因为好的东西总是需要经历一段必不可少的市场认可周期，但对于从事氨基酸分析工作的广大用户，他们需要中国的氨基酸分析仪市场是一个充满竞争的市场，而不是一家独“show”的市场，只有充分的竞争才能为他们带来技术更高、性价比更优的仪器。

我单位新进日立L-8900氨基酸分析仪，主要分析浓缩果汁。前处理按照110度水解的办法48小时也不能处理好；后改用微波消解，使用6mol的盐酸，160度消解30分钟，仍然是黑乎乎的。请教分析过氨基酸的朋友，浓缩果汁的糖分含量一般较高，应该如何水解，如果用微波的话，应该怎么处理？

首先，我要开门见山的承认，我是某氨基酸分析仪代理公司的员工。此帖若与各位大虾的见解不同，还请指正。 对论坛中有关氨基酸分析的帖子粗略浏览了一遍，发现两个特点：一是到论坛中来发帖子的主要还是使用HPLC来做氨基酸分析，二是提到的专用氨基酸分析仪似乎只有“日立”。 氨基酸分析无疑具有极高的价值（极端一些的说，大部分蛋白分析都是应该被氨基酸分析所取代的），同时也有相当的难度。正因为如此，国内的氨基酸分析发展才表现出一方面发展势头很好，另一方面真正把氨基酸分析工作做好的又不多。较HPLC而言，专用的氨基酸分析仪方法简单、单样成本低、干扰少、稳定性好，尽管仪器本身比HPLC要贵得多，也势必成为今后氨基酸分析的主力。 有一篇帖子提到，“日立的氨基酸分析仪是世界上最好的”，真不知他/她是如何得来这个结论。没有调查就没有发言权，没有比较，如何能得出结论？做氨基酸分析的人基本都是知道日立的，因为日立做氨基酸分析仪已有几十年；然而，除了日立，他们还知道哪些氨基酸分析仪厂家呢？诸多原因导致欧美的氨基酸分析仪迟迟未能进入中国市场，而凭借日元贷款项目和援助项目的独有优势，日立在中国用户心目中已经悄然建立起“氨基酸分析仪＝日立”的心里暗示。但日立的氨基酸分析仪真的这么好吗？在北京一家同时拥有四种氨基酸分析仪（现在为3种）的单位，他们对日立L－8800的看法是“一般”，“分离效果和长期稳定性不如××仪器”……我不能说以偏概全，但对比总是难能可贵。 我并非要写些东西来宣传我们的产品，因为好的东西总是需要经历一段必不可少的市场认可周期，但对于从事氨基酸分析工作的广大用户，他们需要中国的氨基酸分析仪市场是一个充满竞争的市场，而不是一家独“show”的市场，只有充分的竞争才能为他们带来技术更高、性价比更优的仪器。

-------氨基酸分析仪算是LC的种，所以我把帖子发到这里，如有违规，请版主处理。-------------单位准备进一台氨基酸分析仪，目前有两家提供资料，其中一家的分离柱填料颗粒较小，另一家填料颗粒较大，但这家的氨基酸谱图上cysthi , Hylys两种氨基酸均有分裂峰，按销售的说法是他的分离能力更高（从参数上看，分离度与第一家无明显区别）。按我对LC的理解，填料颗粒小分离能力应该更强，为什么会出现相反的情况？是第二家销售夸大其词吗？ 另外 ，这家销售说他的产品用的是陶瓷泵，在氨基酸高碱高脂环境下比第一家的不锈钢泵更有优势，貌似有些道理。请有经验用户给点意见。谢谢大家了！

有没有氨基酸分析的方法?最好是液相色谱法,天美的四元泵可以吗?

[img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=15864]氨基酸手性拆分[/url][img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=15865]氨基酸GC分析[/url][img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=15866]氨基酸的分析方法及其应用进展 ——《色谱》[/url]请用维普浏览器阅览！