二酚高效检测

高效液相色谱检测幼儿配方奶粉中维生素添加剂 烟酸也称作维生素B3，它是人体必需的13种维生素之一，烟酸可在人体内转化为烟酰胺，烟酰胺是辅酶Ⅰ和辅酶Ⅱ的组成部分，参与体内脂质代谢，组织呼吸的氧化过程和糖类无氧分解的过程。二者统称维生素PP，用于抗糙皮病、血扩张药，大量用于食品、饲料生产的添加剂，在乳制品生产中也有使用。 这两种物质对人体虽然也有正面作用，但也得限定摄入量，控制饲料、食品等生产的添加就显得尤为重要。本方法采用高效液相色谱法检测幼儿配方奶粉中烟酸、烟酰胺两种成分含量。实验部分原理取适量该品加水超声波震荡提取，经进样器进入高效液相色谱系统，色谱柱分离，紫外检测器检测，保留时间定性，峰面积定量计算。标准品溶液配制 精密称取烟酸及烟酰胺标准品适量，分别配制1.0 mg/mL标准品储备液和40 μg/mL标准品中间液。烟酸及烟酰胺混合标准系列测定液分别准确吸取烟酸及烟酰胺混合标准中间液0.0 mL、1.0 mL、2.0 mL、5.0 mL、10.0 mL于50 mL 容量瓶中，用水定容。该标准系列浓度分别为0.00 μg/mL、0.80 μg/mL、1.60 μg/mL、4.00 μg/mL、8.00 μg/mL。有了保证标准品溶液变质，尽量临用前配。样品溶液配置 不含淀粉的试样：称取混合均匀固体试样约3.0g（精确到0.0001 g）加入约25 mL的水，于150 mL 锥形瓶中，振摇，需充分溶解，并冷却至室温。 提取：将上述锥形瓶置于超声波振荡器中振荡约10 min。 沉淀及定容：待试样溶液降至室温后，用盐酸（2.4mol/L）调节试样溶液的pH值至1.7±0.1，放置约2 min 后，再用氢氧化钠溶液（2.5mol/L）调节试样溶液的pH值至4.5±0.1。混匀后经滤纸过滤，用水反复冲洗锥形瓶，滤液合并于50mL容量瓶中，用水定容至刻度，滤液再经0.45 μm 微孔滤膜加压过滤，即为试样待测液。分析条件检测器：紫外检测器色谱柱：C18[/size

高效液相色谱法快速检测徐长卿中丹皮酚 药材徐长卿，这个药名很像人名，属于萝藦科（这个叫法也很特别）植物徐长卿的干燥根和根茎。具有祛风、化湿、止痛、止痒等药物功效。可用于治疗风湿痹痛、胃胀疼痛、牙痛腰痛、跌打伤痛、风疹湿疹等病症，效果较好。 下面我们重点介绍下高效液相色谱法检测徐长卿药材中丹皮酚含量及色谱条件的改变对色谱效果的影响。实验部分【原理】 精密称取适量徐长卿样品（粉末）经甲醇溶解，超声提取后注入高效液相色谱系统，C18色谱柱分离，紫外检测器检测，外标法（保留时间定性，峰面积定量）计算，得出该样品中丹皮酚含量。【仪器及试剂】 仪器：高效液相色谱仪（紫外检测器+等度泵+柱温箱+在线脱气机等），超声波清洗仪，溶剂过滤器，电子天平（0.0001），药典筛（五号筛）等。 试剂：甲醇（色谱纯）， 超纯水等。【样品制备】 对照品溶液制备：准确称取丹皮酚对照品2mg于100ml容量瓶中，加甲醇溶解、定容，制成20ug/ml丹皮酚对照品溶液，备用。 供试品溶液制备：取徐长卿样品适量，充分粉碎后过药典筛五号筛，准确称取过筛粉末0.5g，置具塞锥形瓶中，精密加入50ml甲醇，称定重量并记录，超声处理30分钟，放冷，再次称定重量，用甲醇补足减少的重量，摇匀，0.45um微膜滤过。精密量取1ml续滤液于10ml容量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，待测。【色谱条件】检测器：紫外检测器检测波长：274nm色谱柱：Promosil C18 ( 250 mm X 4.6mm，5μm )流动相：甲醇：水=45：55（V：V）流速：1.0ml/min柱温：30℃进样量：10μl【色谱图】对照品溶液色谱图： http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/09/201509071520_564858_2536753_3.png供试品溶液色谱图：http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/09/201509071520_564859_2536753_3.png 这个检测效果还可以，样品中干扰物很少，分离度很好，准确度也很高，该方法适合该样品中丹皮酚含量检测。这个检测效果还可以，但检测时间太长了点，太浪费时间。再三考虑后，决定改变下色谱条件，争取缩短些时间。 首先换一根150mm长其它规格相同的色谱柱，其它色谱条件不变，看下色谱效果。【色谱图】对照品溶液色谱图：http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/09/201509071520_564860_2536753_3.png 供试品溶液色谱图： http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/09/201509071520_564861_2536753_3.png 效果不错，达到了预期效果。 如果实验室没有合适的色谱柱，那也没关系，我们可以通过改变流动相，也能取得很好的效果。下面我们把流动相改为甲醇：水=65：35（V：V），看下效果。【色谱图】对照品溶液色谱图： http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/09/201509071520_564862_2536753_3.png供试品溶液色谱图： http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/09/201509071520_564863_2536753_3.png 这个效果也不错吧，检测时间已经比较短了，分离度、色谱峰形也相当不错，这个方法也是相当理想的检测方法。 当然我们还可以通过增加色谱泵流速，提高柱温箱温度等色谱条件来缩短检测时间，效果也都相当不错。在这需要注意的是，色谱泵流速一般情况下不要变，因为每一规格色谱柱的内径及填料颗粒等因素决定了只有一个流速最适合它。它在这个流速下色谱峰展宽、峰对称性等效果最好，而且使用寿命最长，因此能通过改变其它色谱条件达到目的的，尽量不改变该条件。【结论】1. 以上几种方法检测徐长卿药材中丹皮酚含量结果都较准确，效果都不错，都适合该项目检测。2. 检测时间长的话可通过改变色谱柱长度，流动相中有机相含量，柱温箱温度，色谱泵流速等色谱条件缩短检测时间，但一定得注意样品中各成分的分离度，及检测结果的准确性。3. 综合考虑，选择一款较短的色谱柱是比较理想的，它既能缩短检测时间，对色谱系统产生的压力小，色谱柱价格一般还较便宜。如果换用较短的色谱柱后检测时间还较长，再适当改变流动相，这样效果会更好。4. 照抄一个方法是最简单的选择，一般都能顺利的完成实验，但实验效果不一定理想。如果这个检测项目批量比较大，参考方法检测的效果又一般，我们不防优化下色谱条件，争取达到更完美的结果。5. 优化色谱条件时一定得考虑样品情况、实验室具体条件及检测结果准确性要求等，切不可盲目追求某一指标而影响其它效果。

作者：果崇慧; 刘德艳; 何国云;（河北省秦皇岛市工人医院; 河北省秦皇岛市山海关区人民医院;）摘要：目的建立一种灵敏、专属的高效液相色谱-紫外检测法,用于测定乌拉地尔在人体内的血药浓度。方法色谱柱为DiamonsilC18柱(200mm×4.6mm,5μm),流动相为乙腈-0.5mol/L磷酸二氢铵缓冲液(20∶80,V/V),流速1.0mL/min,检测波长268nm,内标为丁咯地尔。结果测得血浆中乌拉地尔质量浓度的线性范围为10～600ng/mL,最低定量限为10ng/mL。结论高效液相色谱-紫外检测法用于测定乌拉地尔在人体内的血药浓度,方法灵敏、专属、可靠。谱图：http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/08/201208271014_386285_1606903_3.jpg

高效液相色谱法更快检测非法添加剂 吊白块又称雕白粉或雕百块，俗称二水甲醛合次硫酸氢钠,常用作工业还原剂及漂白剂,多用于印染行业。 该物为半透明白色结晶或小块,易溶于水有机溶剂,高温下具有极强的还原性,同时释放出有毒气体，有漂白、保鲜作用。绝对不可用于食品添加剂(或食品漂白剂). http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2014/11/201411292020_525190_2498430_3.png http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2014/11/201411292020_525191_2498430_3.jpgfile:///C:/Users/HJJ/AppData/Local/Temp/ksohtml/wps8F73.tmp.png 中毒表现：打喷嚏、咳嗽、胸痛、声音沙哑、没食欲、发烧、头晕、头痛、恶心、呕吐、疲乏无力、四肢疼痛、血管水肿、血压下降等. 严重时会有危险，对人体的肾、肝、中枢神经、免疫功能、消化系统等均有不同程度的损害,并有一定的致癌性。 如吃了某些食品出现了以上症状,要及时就医或采取合理的应急治疗。 现在有一些不法分子为了减少生产成本,增白食品色泽及食品保鲜，常在食品生产过程中添加该物,危害消费者的身体健康, 带来不良的社会影响。现在已发现过的典型的案例有在腐竹、粉丝、米线、米粉、面粉、竹笋、白糖、大米、鱼干、肉制品、腌制品等食品中的添加。所以买东西不要一味的追求外观,以防上当受骗,并造成不必要的损失和麻烦。如果不幸受到这方面的损失及伤害,需要维权的话,可以多关注些类似的法律及相关的检测方法及规定。实验部分检测原理 利用吊白块易溶于水/甲醇/乙腈等溶剂的性质，溶解萃取,高效液相色谱柱分离,紫外检测器检测,外标法（保留时间定性，峰面积定量）计算. 主要仪器及试剂高效液相色谱仪(等度泵+紫外检测器或二极管检测器+柱温箱)超声波清洗仪[font='

高效方法检测名贵药材 名贵药材很多种，有一种叫木香。 它花色艳丽，形状各异，香味迷人，漂亮极致。根、茎、叶也有着非常不菲的药用价值和营养成分。 药用部分主要来自根部，它气香特异，味微苦，含有丰富的去氢木香内酯，木香烯内脂，木香萜醛，木香内酯，二氢木香内酯，α-环木香烯内酯，β-环木香烯内酯，土木香内酯等药物成分。另外根部还含天冬氨酸，谷氨酸，甘氨酸，甘氨酸，瓜氨酸等20多种氨基酸，营养成分也非常丰富。 叶含蒲公英甾醇，α-香树精硬脂酸酯，β-香树精棕榈酸酯，羽扇醇棕榈酸酯等多种香精、香料成分。 木香具有行气、止痛、止血、健脾、消炎、抗菌、降压等多种药物功效，可用于多种疑难病症治疗。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/10/2015081418455848_01_0_3.jpghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/10/2015081418460455_01_0_3.jpghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/10/2015081418462259_01_2536753_3.jpeghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/08/201508141901_560867_2536753_3.png说明：以上几张图片是网上截图，不是本人所拍，在这只是为了说明下木香药材的外观及美感，希望大家能够理解。 既然木香价值这么高，检测它就显得尤为重要，方法选择尤为关键。下面我们就介绍几种高效液相色谱法检测该药材中木香烃内酯、去氢木香内酯方法。1.实验部分1.1原理 精密称取该药品适量，超声波提取后经进样器注入高效液相色谱系统，通过C18色谱柱分离，紫外检测器检测，外标法（保留时间定性，峰面积定量）计算，得出所测成分含量。1.2 仪器及试剂 仪器：高效液相色谱仪（紫外检测器+高压恒流泵+柱温箱），四号筛（药典筛），超声波清洗器，溶剂过滤器，电子天平（0.0001级）等。 试剂：甲醇（色谱纯），超纯水1.3样品制备 对照品溶液制备：准确称取木香烃内酯对照品、去氢木香内酯对照品各5mg于50ml容量瓶中，加甲醇至刻度，配制成含木香烃内酯对照品、去氢木香内酯各0.1mg/ml的混合对照品溶液，备用。 供试品溶液制备：取本品适量充分粉碎后过四号筛，准确称取过筛粉末0.3g，置于具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50ml，密塞，称定重量，放置过夜后超声处理30分钟，放冷，再次称定重量，用甲醇补足减少的重量，摇匀，0.45μm微膜滤过，待测。1.4 色谱条件检测器：紫外检测器检测波长：225nm色谱柱：Promosil C18，4.6 X 250mm，5μm流动相：甲醇-水(65：35)流速：1.0ml/min柱温：室温进样量：10μl2、实验过程及色谱图对照品色谱图http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/10/2015081418542201_01_0_3.pnghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/10/2015081418545304_01_2536753_3.png供试品色谱图:http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/10/2015081418542563_01_0_3.pnghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/10/2015081418545925_01_2536753_3.png 计算公式：样品中各物质的含量计算公式：http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/10/2015081418541866_01_2536753_3.pngD----供试品中被测物含量，以（%）表示V----供试品稀释的总体积，单位（mL）P3----供试品溶液被测物峰面积值P4-----对照品溶液被测物峰面积值ρ2----对照品被测物浓度。单位为mg/mlm2----样品质量，单位（mg） 通过计算木香烃内酯的含量大概是0.8%，去氢木香内酯的含量大概是1.6%，总含量2.4%，远大于药典中要求的1.8%，该木香药材满足药典要求，属合格品。 这个检测时间有点长，我们不防改变下色谱条件，缩短些时间。那就把柱温调整到40℃，看下结果。对照品色谱图：http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/10/2015081418542990_01_2536753_3.png供试品色谱图:http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/10/2015081418543464_01_2536753_3.png 看来有效果，检测时间是短了，但分离度也相对差了点，不够理想。那我们再不防改变下色谱条件，争取把分离度效果弄好些。那就调整下流动相，甲醇-水(60：40)，看下结果。对照品色谱图： http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/10/2015081418544178_01_2536753_3.png供试品色谱图:http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/10/201508141854474

检测成功关键，固相萃取富集高效液相检测法 莠去津是一种广谱除草剂，可预防和除杀一年生禾本科杂草和阔叶杂草，对某些多年生杂草也有一定的抑制作用，在我国很多地区都有较多使用，尤其是在玉米、甘蔗产地用量更大。但该物却是一种潜在致癌和内分泌干扰物，目前已被列为国际环境优先控制污染物。 由于莠去津的大量使用，导致我国及国标某些地区的粮食中含有微量的该物质残留，该地区的土壤和水质也有不同程度的污染，严重的危害这我们的幸福生活和身体健康。 为了预防和控制这种污染，检测是很重要的一个环节。下面我们就着重介绍下高效液相色谱法检测饮用水中莠去津含量。实验部分原理 取适量饮用水水样萃取、浓缩，再固相萃取富集浓缩、定容、滤过，由进样系统进样，色谱柱分离，紫外检测器检测，保留时间定性，峰面积定量计算。仪器 液相色谱仪（等度+紫外检测器+柱温箱），氮吹装置，溶剂过滤器，超声波振动仪，KD浓缩器，固相浓缩装置及SPE柱（硅酸镁净化柱）试剂 石油醚、乙醚、甲醇（色谱纯）、二氯甲烷、无水硫酸钠、氯化钠、高纯氮气、正己烷样品制备 标准品制备：准确称取0.01g莠去津标准样品，用少量二氯甲烷溶解后，再用甲醇准确定容至100ml，该溶液为100μg/ml储备溶液，备用。 样品前处理：分两步走。 第一步样品预处理：准确量取100ml水样于250ml分液漏斗中，加入5g氯化钠,待氯化钠完全溶解后加入10ml二氯甲烷萃取1min，注意及时放气，静置分层后，转移出上层有机相，再加入10ml二氯甲烷萃取，分层，合并有机相，有机相经过无水硫酸钠脱水后转入浓缩瓶中。用KD浓缩器将萃取液浓缩至近干，取下浓缩瓶，备用。 第二步固相萃取富集（采用SPE柱净化）：将浓缩至干的样品用10mL正己烷溶解；用适量石油醚预淋洗净化柱，弃去淋洗液。当硫酸钠刚好露出，将样品萃取液加入净化柱中，随即用20mL石油醚冲洗。将洗脱流量调至5mL/min，再用20mL的乙醚-石油醚（1+1）洗脱液洗脱；将洗脱液用KD浓缩器浓缩至近干后，用氮气刚好吹干，最后用甲醇定容至1mL，过0.45μm滤膜过滤，待测。色谱条件检测器：紫外检测器色谱柱：C18，（5μm，4.6×250mm)色谱柱波长：254nm流动相:甲醇：水=:80:20（V:V）流量：1.0mL/min柱温：40℃进样量：10μL标准品色谱图： http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2014/10/201410202218_519227_2498430_3.png某水样样品色谱图： http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2014/10/201410202218_519228_2498430_3.png 通过以上色谱图我们不难看出，该方法检测饮用水中莠去津准确、可靠、效果好。 该方法成功的关键在于样品前处理固相萃取富集过程，固相萃取有效的去除了目标物的干扰物，保证了检测结果的准确、可靠性；富集使样品浓缩程度更高，这样就大大的提高了方法检出限，是检测成功的另一关键因素。