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生物样品理仪

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生物样品理仪相关的论坛

  • 【求助】哪里能做生物样品的透射电镜

    请问一下哪里能做生物样品的透射电镜啊,我的样品时酿酒酵母,前处理很复杂,要固定,包埋,切片,染色等,请问一下那有专业一点的能做制样和透射都做得,还有请问一下怎样收费。谢谢

  • 【原创大赛】生物样品的管理

    [align=center]生物样品的管理[/align][align=center]西安国联质量检测技术股份有限公司[/align][align=center]安评中心:卫柯[/align]国联安评中心的分析测试部,拥有一支优秀的骨干人才队伍,已经开展了多个PK实验。生物样品的管理是开展PK实验关键的环节之一。1. 生物样品的接收委托方在提供生物样品之前,以电子或纸质形式告知样品具体信息。或者是本机构自己做动物实验,提供的生物样品,也要提前告知管理员样品的信息。管理员接收时,应检查包装和容器,是否完整、密闭,有无破损和污染;验收质量,根据提供的样品信息,核对名称、规格、数量,核对标识、状态、来源,转运方式等信息。如果发现包装破损,内容物明显受到污染,转运方式未按照储存条件进行,应及时联系项目负责人和委托方。验收合格后,对样品进行编号,贴上防水的标签,并填写生物样品接收记录。2. 生物样品的储存按照委托方提供的储存条件,对生物样品进行合理的保存。常见的生物样品类型:全血,血清,血浆,尿液,脑脊液、肝、脑等。如果委托方没有要求储存条件,一般来说,短期内可以开展实验的生物样品,于-20℃保存;短期内开展不了实验的,于-80℃保存。保存生物样品的冰箱应该上锁。3. 生物样品的申请、发放、使用和归还需要生物样品时,项目负责人可以自己领取,也可指定实验员领取。但应提前通知管理员。领取、发放、归还等应记录在表格上。样品应及时归还。4. 生物样品的处理如果委托方要求返还,在试验完成后,按照要求返还委托方。如无需返还,将生物样品储存于-80℃冰箱中保存至少五年,五年后按照环保要求处理。生物样品的管理过程很重要,要严格按照各中心的SOP的要求进行管理。

  • 【实战宝典】实验室里剩余的生物样品该如何处置?

    问题描述:实验室里剩余的生物样品该如何处置?解答:[font=宋体]含有病原微生物的样品必须遵守感染性废弃物的处理原则,所有潜在感染危险物品的处理,必须先去污染,未经消毒不能拿出实验室,液体废弃物经离心后上清液,感染细胞培养的营养液和洗涤液等必须收集在防漏、未破损的容器内,经高浓度的化学消毒剂作用。对于剩余样品,接种过的培养基、菌种等,在丢弃之前均需采用适当方法消毒;特别是来源于分枝杆菌、真菌和病毒实验者,应在实验室内经高压蒸气灭菌后方可拿出实验室,对于任何有污染的锐器处理前不要用手接触。这些物品应置于盛有消毒液的硬壁容器内,最好经高压蒸气灭菌后丢弃或再处理保存。[/font]以上内容来自仪器信息网《样品前处理实战宝典》

  • 【讨论】原子力做生物样品如DNA或pro的

    本人厦大,vecco原子力,做DNA纳米阵列。有没有人做生物样品的,,本人技术不成熟啊,能否留下来联系方式,大家讨论啊我加你们为好友,可建群把你们加进去呀谢谢啊

  • 生物电镜样品的入门资料

    有没有什么生物样品的系统性介绍?比如在TEM下看到很多结构,有生物背景的一看就知道这是线粒体啊,那是细胞啊,神经啊之类的。看生物样品时看的我一头雾水,只觉得图片很好看,但看的是什么,没一点线索。不知道有没有什么入门级的关于生物电镜样品的资料?谢谢

  • 生物样品前处理方法?

    求助一下各位 测定生物样品中的重金属 前处理方法是怎么样的呀?有没有国标之类的 谢谢大家 !比如鸡 玉米 红薯 萝卜之类的里面的镉等金属!前处理是咋弄啊?

  • 生物利用度及生物等效性研究中试验样品的提供与管理

    生物利用度(BA)及生物等效性(BE)研究中的试验样品包括试验制剂和参比制剂。试验样品的真实可靠是对试验研究结果进行评价的前提。在药品注册涉及的BA及BE研究中,国内常见情况是注册申请人提供给试验机构(临床药理基地)的样品(包括试验制剂及参比制剂)仅可满足试验研究用量,即使使用后有剩余量,也常常由试验机构退还申请人。对试验样品的这种提供和管理模式,使得试验样品的真实性及其监管核查无从保障。为切实保证BA及BE研究结果的准确可靠、可追溯,有必要提高对相关试验样品提供和管理的要求。 对于BA及BE研究中试验样品如何提供和管理的问题,我国2005年颁布的《化学药物制剂人体生物利用度和生物等效性研究技术指导原则》中未专门讨论。美国食品药品管理局(FDA)于2004年5月颁布了关于BA及BE研究中试验样品处理及保存要求的技术指导原则《Guidance for industry-handling and retentionof BAand BE testingsamples》(以下简称FDA指导原则),该指导原则中对试验样品的提供和管理有明确的要求。在我国相关指导原则出台之前,建议注册申请人参照FDA指导原则的要求向试验机构提供样品,同时建议试验机构对样品的抽样和保留样品的保存也参照FDA的上述指导原则进行。

  • 生物样品喷金还是喷碳?喷镀仪哪种好?

    请教各位大侠:小弟刚开始接触扫描电镜,老板让买喷镀仪。头大——不知道哪种好,各位有用过的麻烦推荐一下。我们通常做生物样品较多,一般是细菌、细胞、切片等。另请教做生物样品喷金效果好,还是喷碳效果好。还有比如金、铂、金钯合金、铂钯合金这些靶哪种比较好

  • 生物样品的EDS能谱分析

    生物样品的EDS能谱分析

    生物类样品由于有他样品本身的特殊性,比如导电性差、易损伤甚至含水。应用而生的就是生物类电镜,低电压优势明显或者有低真空有冷台等等,很多生物行业即使配备扫描或透射电镜也很少关注能谱的功能。但是目前,由于电镜及能谱技术的提高,即使导电性差的样品做能谱分析也足够满足计数率要求了。最近在上海某生物所参观,看到该所配备的150mm2的能谱探测器检测植物样品基本不费吹灰之力。(但这里请注意,该生物样品是经过冷冻处理后做能谱分析的)给大家再展示一些生物类样品的能谱面分布的结果,其实很多样品能谱已经完全hold的住了。如下面是小麦种子的样品,小麦种子是毫米级样品,选取其中单个晶粒做mapping。该样品环氧树脂镶嵌且以Os酸染色。采集的加速电压为4kV(低电压)http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2013/12/201312301224_485506_2512186_3.jpg通过EDS观察可以很明显看到如果仅以传统小面积SDD(电制冷)能谱采集,几乎都是零散的噪点,没有任何意义。而能谱的晶体面积提高到150mm2,采集一帧(single frame)即可看到几百纳米的P(轻元素)的分布情况,如果多帧叠加效果更加清晰,但对比第一帧的mapping已经足够体现几乎所有特征点的分布了。也就是说如果样品导电性过差或超级易损伤,那仅采集一帧也可以描述出样品中多种元素的分布情况了。若条件允许多帧叠加,可以很清晰的获得包括轻元素在内的多种元素面分布。该结果已足以媲美导电性较好的金属或半导体样品了。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2013/12/201312301229_485507_2512186_3.jpg

  • 【实战宝典】生物样品的保存如何开展?常见生物样品在存储时该注意哪些事项?

    [font=宋体]链接:[/font]https://bbs.instrument.com.cn/topic/7136347问题描述:生物样品的保存如何开展?常见生物样品在存储时该注意哪些事项?解答:1.[font=宋体]保存方法[/font][font=宋体]([/font]1[font=宋体])冷藏或冷冻:短期保存时,可以保存到[/font]4[font=宋体]℃[/font][font=宋体]冰箱中,长期保存时,需要放置到[/font]-20[font=宋体]℃[/font][font=宋体]~[/font]-80[font=宋体]℃[/font][font=宋体]冰箱或者液氮中。[/font][font=宋体]([/font]2[font=宋体])去活性:为防止含有酶的样品在保存过程中,酶对于被检测组分进一步代谢,采样之后必须终止酶的活性。方法包括:液氮中快速冷冻、微波照射、加入酶活性抑制剂、样品煮沸等。[/font]2.[font=宋体]血液、尿液样品的保存[/font][font=宋体]对于不能立刻进行检测分析的血液、尿液样品,可根据检测的要求分别做如下的处理:[/font][font=宋体]([/font]1[font=宋体])样品测定前需要消化处理的,在采集的样品中,可加入适量的硝酸,混匀后放置在低温处保存。[/font][font=宋体]([/font]2[font=宋体])样品测定前需要水解处理的,在采集的样品中,可加入适量盐酸或硫酸,混匀后放置在低温处保存。[/font][font=宋体]([/font]3[font=宋体])全血样品要开展无火焰[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Wp][color=#3333ff]原子吸收光谱[/color][/url]法测定时,样品应放置于[/font]-10[font=宋体]~[/font]-4[font=宋体]℃[/font][font=宋体]保存。[/font][font=宋体]([/font]4[font=宋体])尿样中含有五氯酚时,尿样必须储存于玻璃瓶中,并在[/font]4[font=宋体]℃[/font][font=宋体]冷藏温度下一周内分析,否则五氯酚含量将会明显下降。[/font][font=宋体]([/font]5[font=宋体])尿样中含有苯酚时,尿样可收集于塑料瓶中,并在[/font]4[font=宋体]℃[/font][font=宋体]冷藏温度下保存,如果一周内不进行分析,需要冷冻保存。[/font]3.FFPE[font=宋体]样本保存[/font][font=宋体]恒温恒湿保存在蜡块柜中至少[/font]15[font=宋体]年[/font]4.[font=宋体]组织切片[/font](1)[font=宋体]未染色的切片实验前置于室温不宜超过[/font]6[font=宋体]周,以防抗原丢失。[/font][font=宋体]([/font]2[font=宋体])完成检测的切片,[/font]IHC[font=宋体]和亮视野原位杂交可按恒温恒湿长期保存,[/font]FISH[font=宋体]结果应立即照相存档并长期保存,[/font]FISH[font=宋体]切片建议于[/font]-20[font=宋体]℃[/font][font=宋体]保存至少[/font]3[font=宋体]个月备查。[/font]以上内容来自仪器信息网《样品前处理实战宝典》

  • 生物样品预处理方法

    生物样品预处理方法 生物样品的前处理是体内药物分析的一个重要环节,也是整个分离分析过程中最繁琐的一个步骤。与原料药物和制剂相比,生物样品更为复杂:微量药物分布在大量生物介质中,对分析仪器的灵敏度提出了更高的要求;样品中含有大量内源性物质,不仅能与药物及其代谢物结合,而且常干扰测定。因此,生物样品中的药物必须经过分离、纯化与浓集,必要时还需对待测组分进行化学改性处理,从而为最后测定创造良好的条件。传统的样品前处理方法仍为溶剂萃取法,方法耗时、危害人体、污染环境,萃取使用大量溶剂,分析时需浓缩,会导致有效组分的损失。本文仅对近年相关文献报道的几种药物分析过程中生物样品预处理技术及应用进行综述。一、超临界流体萃取技术超临界流体萃取( supercritical fluid extraction ,SFE) 是环保型分离浓集技术,具有萃取效率和选择性高、省时、萃取溶剂(如CO2 ) 便于挥发、提取物较为“干净”、环境污染少、操作条件易于改变等特点,不仅广泛应用于食品、化妆品、环境、医药及一些天然产物的分析,在生物体内药物分析方面也显示出一定的优势。超临界流体萃取技术的原理是控制超临界流体在高于临界温度和临界压力的条件下,从目标物中萃取成分,当恢复到常压和常温时,溶解在超临界流体中的成分立即与气态的超临界流体分开。该技术对于挥发性成分、脂溶性成分、小分子萜类及热敏物质等的提取,较传统方法有很多优越性。常用萃取剂为CO2。由于超临界流体CO2是非极性溶剂,对于低极性和非极性的化合物表现出优异的溶解性能,而对于大多数无机盐、极性较强的物质几乎不溶。通过添加改性剂,如甲醇、乙醇、丙酮、乙酸乙酯和水等,并通过加压改善其溶解性能,使超临界流体萃取技术对生物碱类、黄酮类、皂甙类等的应用也日趋普遍。针对生物样品中通常含有不同极性组分或含有大量脂溶性成分干扰的特点[font=Times New Rom

  • 【实战宝典】生物样品如何规范地进行接收和分类存放?

    [font=宋体]链接:[/font]https://bbs.instrument.com.cn/topic/4968491问题描述:生物样品如何规范地进行接收和分类存放?解答:[font=宋体]以团体标准《风湿与自身免疫性疾病生物样本及相关信息采集、处理、保存规范》([/font]T/CMBA009—2020[font=宋体])中对样本的接收要求为例,接收样品和清点入库应做到以下几个方面,并根据情况进行调整:[/font][font=宋体]生物样品尤其是临床样品,可能涉及知情同意和伦理准则,接收样品前应确保样品收集范围和种类,已经伦理委员会或学术委员会批准,方可进入后续流程。在知情并同意的前提下完成样品采集后,对样品进行清点和存放。样品处置人员应根据标准操作程序进行样品处理、分装和标签标识。样品存入时应再次确认样品信息准确无误,根据标准操作程序将样品进行登记和入库。储存的样品应根据样品类型选择以下合适的储存设备进行存放:([/font][font='Times New Roman','serif']1[/font][font=宋体])[/font][font='Times New Roman','serif']-20[/font][font=宋体]℃[/font][font=宋体]低温冰箱,用于样品处理后不能及时入库时的冷冻存放;([/font][font='Times New Roman','serif']2[/font][font=宋体])[/font][font='Times New Roman','serif']-80[/font][font=宋体]℃[/font][font=宋体]超低温冰箱,用于常规血清、血浆、尿液、脑脊液、关节液的存放。([/font][font='Times New Roman','serif']3[/font][font=宋体])液氮罐,用于肾活检组织、关节滑膜组织、血细胞等的存放。来自同一样品的多个复份样品应安排储存在不同的储存设备中,必要时可以异地储存,以保证当某个设备出现问题时,能将样品的损失降到最低。当样品可能含有病原微生物时,操作人员在操作过程中必须戴上手套、防尘口罩,穿好安全鞋,做好安全与健康防护措施;做好样品包装的消毒去污染;并做好交接记录,保留好原始资料,既是工作留下的证据,在审核时也是很有说服力的书证。[/font]以上内容来自仪器信息网《样品前处理实战宝典》

  • 【原创大赛】生物内样品预处理

    【原创大赛】生物内样品预处理

    生物内样品预处理生物样品成分复杂,往往含有大量有机物、无机物及各种矿物质元素,在对目标成分进行分析检测时,首先要排除内源性杂质及代谢物的干扰,又要对目标成分进行富集纯化以满足仪器检测灵敏度的要求。在处理的过程中,还要密切关注目标成分的理化性质,如失活,空气氧化,蛋白水解等,生物样品的提取制备繁琐复杂,下面我们对一些常规的预处理方法进行归类总结。1.样品均匀化样品均匀化可采用物理方法和化学方法。简单总结如下:http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2013/07/201307241405_453376_1444635_3.bmphttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2013/07/201307241406_453378_1444635_3.jpg http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2013/07/201307241406_453380_1444635_3.jpg2.去蛋白处理蛋白质的存在常常干扰生物样品中一些小分子化合物的检测。在色谱分析中,蛋白质的存在有可能会堵塞色谱柱,导致柱压升高,影响柱效,对仪器产生较大损伤。去除蛋白质的方法主要有:2.1 加入与水混溶的有机溶剂对于生物样品中极性成分,可加入极性有机溶剂甲醇、乙腈、乙醇、丙酮等,它们能与水互溶,使样品中的蛋白质脱水沉淀。按体积比1:2加入过量极性有机溶剂,离心,可沉淀98%的蛋白质。优点:蛋白脱水生成沉淀,通过离心即可除去,操作简便;若样品用于反相高效液相色谱法进行分析,上清液与流动相相匹配。局限性:但凡能溶于水-醇系统的物质,均在上清液中被提取出来,对于目标成分并没有很好的分离,上清液由于加液量多,难于挥干浓缩,残留的微量蛋白有可能会引起色谱柱堵塞。2.2加入酸性沉淀剂酸性沉淀剂能同蛋白质的阳离子形成不溶性盐。加酸性沉淀剂10%三氯醋酸、6%高氯酸钼、钼酸、磷钨酸、苦味酸等,调节溶液的pH值低于蛋白的等电点,使蛋白形成白色沉淀,加热使淀完全,离心,得上清液。优点: 沉淀作用强,0.2体积即达99.7%的沉淀率。局限性:上清液须用乙醚等萃取,萃取剂可能对目标成分产生干扰。2.3加入无机盐类无机盐类可以使蛋白质胶体脱水并中和其电荷而沉淀。常用无机盐类:饱和硫酸铵、硫酸钠、氯化钠等。局限性:沉淀率较低。2.4加入重金属盐类重金属盐类如汞盐、铜盐、锌盐等可与蛋白质形成不溶性盐而沉淀2.5其它非化学方法可用平衡透析法、超滤法去除大分子蛋白。液液萃取或液固萃取在萃取药物的同时,直接去蛋白。3.冷冻干燥冷冻干燥是生物预处理的有效方法,主要适用于水溶性较强的生物样品。将生物样品置于液氮、冰-丙酮浴或-40℃冰箱等低温条件下冷冻,冷冻好的样品放入冻干机中减压干燥,干燥的过程冰直接升华为水蒸气,其它杂质也一并挥发掉。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2013/07/201307241407_453382_1444635_3.jpg4.结合物水解药物在代谢后形成的葡萄苷酸、硫酸酯等结合物,使药物无法以游离状态存在,若要检测药物离子浓度,则需要通过酸水解、酶水解、溶剂解等方式。5.贮存预处理好的生物样品如在短期(如日内)即行分析的样品,置于4℃冰箱冷藏;需放置数日或较短时日的:-20℃冷冻;长期贮存:-40℃~ -80℃。

  • 生物样品中农残的测定问题

    有一批生物样品,欲测定其中的PCBs的各个组分的含量。因样品的前处理步骤较多,对测得的结果不是很有把握。请问有什么方法可以对所得到的结果做一个验证?看了论坛上的一些帖子,提到的内标法,外标法等,似乎是对上机测定的结果而言的吧? 我觉得如果可以找到相同基体的PCBs的标准样品,将这些样品和待测的生物样品一样进行前处理和上机测定,然后根据标准样品的测定情况,来验证样品测定的准确性。不知道是否有这样的方法?具体怎么做?谢谢!

  • 生物样品分拣工具是什么

    最近我们公司要作环境损害司法鉴定,有一个对仪器设备要求。恒温震荡培养箱(摇床)、生物样品分拣工具、超低温冰箱。生物样品分拣工具是什么?告诉指点。还有生物毒理性实验室是什么样子的,有标准参考吗?求大神点播

  • 微生物检验样品采集应注意的问题

    样品的采集是微生物检验的重要组成部分,用于检验的样品数量和状况具有重要意义。这对取样人员和制样人员提出了很高的专业要求,既要保证样品的代表性和一致性,又要保证整个微生物检验过程在无菌操作的条件下进行。微生物检验样品的采集大致分为取样、包装密封、标志、样品的运输、接收、保存几个环节。1 取样取样是指在一定质量或数量的产品中,取一个或多个代表性样品,用于感官、微生物和理化检验的全过程。首先在取样之前应确认货、证是否相符。其次取样工具要达到无菌的要求,对取样具和一些试剂材料应提前准备、灭菌。如果使用不合适的采集工具,可能会破坏样品的完整性,甚至使样品采集毫无意义。应根据不同的样品特征和取样环境,对取样物品和试剂进行事先准备和灭菌等T作。另外要保证样品能够代表整批产品,其检测结果应具有统计学有效性,样品到达实验室时的状况应能反映出取样时产品的真实情况。取样时应根据不同的产品类型、产品状态等选择不同的取样方法和标准。① 包装食品对于直接食用的小包装食品,尽可能取原包装,直到检验前不要开封,以防污染。对于桶装或大容器包装的液体食品,取样前应摇动或用灭菌棒搅拌液体,尽量使其达到均质;取样时应先将取样用具浸入液体内略加漂洗,然后再取所需量的样品,装入灭菌容器的量不应超过其容量的3/4,以便于检验前将样品摇匀;取完样品后,应用消毒的温度计插入液体内测量食品的温度,并作记录。尽可能不用水银温度计测量,以防温度计破碎后水银污染食品;如为非冷藏易腐食品,应迅速将所取样品冷却至0~4℃。对于大块的桶装或大容器包装的冷冻食品,应从几个不同部位用灭菌工具取样,使样品具有充分的代表性;在将样品送达实验室前,要始终保持样品处于冷冻状态样品一旦融化,不可使其再冻,保持冷却即可。② 生产过程中的取样 划分检验批次,应注意同批产品质量的均一性;如用固定在贮液桶或流水作业线上的取样龙头取样时,应事先将龙头消毒;当用自动取样器取不需要冷却的粉状或同定食品时,必须履行相应的管理办法,保证产品的代表性不被人为地破坏。

  • 【求助】一个生物粉末样品分析的求助!!!

    最近需要用ICP做一个生物样品分析,样品是黄色的粉末状。需要检测大约20种元素。请知道的老师帮帮忙。1)用什么样的方法进行样品处理最好???2)样品的标准溶液需要怎么样配制???

  • 【讨论】测土壤微生物生物量碳氮的土壤样品能冷冻保存吗?

    教科书里要求,土壤微生物生物量碳氮的测定要求使用鲜土样。出过野外的人都清楚,采集的鲜土壤往往不能及时的测定,于是怎么保存这些土壤样品成了问题。如果采集的鲜土样不能及时(达到1一个月时间)测定土壤微生物生物量碳氮,是冷冻保存还是冷藏保存呢,请说说你的见解!(有奖讨论)

  • 【资料】转-扫描电镜生物样品处理

    扫描电镜以观察样品的表面形态为主。扫描电镜样品的制备,必须满足以下要求:①保持完好的组织和细胞形态;②充分暴露欲观察的部位;③良好的导电性和较高的二次电子产额;④保持充分干燥的状态。  某些含水量低且不易变形的生物材料,可以不经固定和干燥而在较低加速电压下直接观察,如动物毛发、昆虫、植物种子、花粉等,但图像质量差,而且观察和拍摄照片时须尽可能迅速。对大多数的生物材料,则应首先采用化学或物理方法固定、脱水和干燥,然后喷镀碳与金属以提高材料的导电性和二次电子产额。  化学方法制备样品  其程序通常是:清洗→化学固定→干燥→喷镀金属。  清洗  某些生物材料表面常附血液、细胞碎片、消化道内的食物残渣、细菌、淋巴液及粘液等异物,掩盖着欲观察的部位,因而,需要在固定之前用生理盐水或等渗缓冲液等把附着物清洗干净。亦可用 5%碳酸钠冲洗或酶消化法去除这些异物。  固定  通常采用醛类(主要是戊二醛和多聚甲醛)与四氧化锇双固定,也可用四氧化锇单固定。四氧化锇固定不仅可良好地保存组织细胞结构,而且能增加材料的导电性和二次电子产额,提高扫描电子显微图像的质量。这对高分辨扫描电子显微术是极端重要的。为增强这种效果,可用四氧化锇-单宁酸或是四氧化锇-珠叉二胼等反复处理材料,使其结合更多的重金属锇,这就是导电染色。  干燥  固定后通常采用临界点干燥法。其原理是:适当选择温度和压力,使液体达到临界状态(液态和[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相[/url]间界面消失),从而避免在干燥过程中由水的表面张力所造成的样品变形。对含水生物材料直接进行临界点干燥时,水的临界温度和压力不能过高(37.4℃,218帕)。通常用乙醇或丙酮等使材料脱水,再用一种中间介质,如醋酸戊酯,置换脱水剂,然后在临界点干燥器中用液体或固体二氧化碳、氟利昂 13以及N2O等置换剂置换中间介质,进行临界干燥。  喷镀金属  将干燥的样品用导电性好的粘合剂或其他粘合剂粘在金属样品台上,然后放在真空蒸发器中喷镀一层50~300埃厚的金属膜,以提高样品的导电性和二次电子产额,改善图像质量,并且防止样品受热和辐射损伤。如果采用离子溅射镀膜机喷镀金属,可获得均匀的细颗粒薄金属镀层,提高扫描电子图像的质量。  冷冻方法制备样品  低温扫描电子显微术是80年代迅速发展和广泛应用的方法。它包括生物样品的冷冻固定、冷冻干燥、冷冻割断和冷冻含水样品的扫描电子显微术等。  冷冻固定  将生物材料投入低温的致冷剂中,如液氦、液氮、液体氟利昂及丙烷等。快速冷冻可使生物组织细胞的结构和化学组成接近于生活状态。被冷冻固定的生物样品,可以在低温条件下转移到具有低温样品台的扫描电子显微镜中直接观察无需进一步处理或仅在冷冻样品表面喷镀一薄层金属。这种方法不仅快速简便,而且可以排除由于干燥法造成收缩的假象,特别适合于研究含水量很高的生物材料。  冷冻干燥  生物样品经冷冻固定后,其中的水分冻结成冰,表面张力消失;再将冷冻样品放于真空中,使冰渐渐升华为水蒸气。这样获得的干燥样品在一定程度上避免了表面张力造成的形态改变。由于水冷冻而形成的冰晶会破坏组织结构,冰在真空中升华速度很慢,同时需要大型复杂的冷冻干燥装置,所以冷冻干燥法没有临界干燥法应用广泛。如果在冷冻前用有机溶剂置换样品中的水,而后,冷冻干燥,则可消除冰晶对结构的破坏,并大大缩短干燥时间;也无需特殊装置。  冷冻割断  为了观察脏器或细胞内部结构,可切断冷冻样品,再经化学固定、导电染色、脱水和临界点干燥及喷镀金属,用扫描电镜观察割断表面暴露出的内部结构。冷冻割断又包括乙醇割断法、二甲基亚砜割断法及冷冻断裂法等多种。用冷冻割断法可获得高分辨的组织细胞内部三维构造的扫描电镜图像。

  • 扫描电镜生物样品干燥方法选择的一般性原则

    (1)对于微生物等微小的生物样品,如果想要操作简便,可以选用自然干燥法或烘干干燥法;如果想要获得较好的效果,建议选用临界点干燥法或真空干燥法。(2)一般来说,含水量较少、细胞壁和蜡质层较厚的植物组织多采用自然干燥法,而幼嫩、含水分较多的组织则需要选择其他方法。临界点干燥法和叔丁醇真空干燥法几乎适用于各类型的植物样品,但是考虑到操作的复杂性,能使用更简便的干燥方法时一般不选用它们。(3)临界点干燥法是动物样品的首选干燥方法。考虑到操作的简便性,对于含水量低且观察部位相对较硬的动物样品也可以采用自然干燥法,但是含水量高且较柔软的样品推荐采用临界点干燥或叔丁醇真空干燥法。

  • 离子交换色谱在分离生物样品的应用

    Sepax Proteomix系列离子交换色谱柱的填料是以刚性、球形、高度交联的聚苯乙烯-二乙烯基苯(PS/DVB)树脂颗粒为基质、树脂表面涂覆一层纳米厚度的中性的亲水性聚合物薄膜、在亲水性薄层的表面通过共价化学键合致密且均匀的离子交换功能基团而成。亲水性的薄层完全覆盖疏水的树脂表面,可以消除与生物分子之间的非特异性结合作用,从而达到高效分离。 Sepax Proteomix系列离子交换色谱柱可以耐受高温(80℃)与高压(4,000psi),其pH适用范围为2-12,适用于分离蛋白质、低聚核苷酸和多肽类生物样品。流动相的选择范围广,可以是水,也可以是乙腈、甲醇等有机溶剂,还可以是缓冲盐溶液,如磷酸盐、tris、醋酸盐等。[img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=19461]赛分离子交换色谱柱在生物样品分离的应用[/url]

  • [转帖]生物样品前处理方法

    转自:[url]http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=117&id=4512473&sty=3&keywords=%D1%F9%C6%B7+%B4%A6%C0%ED+%B4%BF%BB%AF[/url],希望对大家的学习和工作有所帮助。1. 样品均匀化 对于生物样品,应在测定前混合均匀,以免造成测定误差。可置涡流混合器上混匀,血浆样品往复振摇亦可达到均匀化的目的。 对粪便、肌肉和组织等固体样品都存在均匀化这一问题。对含有不溶性组分的样品(例如组织和粪便),须将样品进行匀浆处理,以保证样品的均匀性。同时还应注意取样的代表性问题。 2. 去蛋白处理 生物样品如血浆、血清等含有大量的蛋白质,它们能结合药物,因此对于某些药物的测定,必须先将与蛋白结合的药物游离之后再作进一步处理。通常去蛋白过程是将蛋白质变性处理后,把与蛋白结合的药物解离出来,离心分离以除去蛋白。 目前已有很多去蛋白方法可供使用,但使用各种方法之前应了解该方法是否会导致生物样品中的药物发生分解或影响药物的提取等。通常除蛋白的方法是在含蛋白样品中加入适当的沉淀剂或变性剂,使蛋白质脱水而沉淀(如有机溶剂、中性盐),有的是由于蛋白质形成不溶性盐而析出(如高氯酸),离心后取上清液用于分析。甲醇、乙腈、丙酮和乙醇是沉淀蛋白常用的有机溶剂,中性盐可用氯化铵等。无机盐沉淀蛋白是可逆的,即将蛋白稀释后仍具有生理活性,而有机溶剂和酸类沉淀的蛋白是不可逆的。也可用透析法与超滤法除去样品中蛋白。3. 被测组分的提取 生物样品中被测组分一般需提取后才能进行色谱分析,这一步骤包含了样品的净化与浓缩。提取方法和提取条件的选择是分析方法研究的重要内容之一,它与分析方法的选择性、精密度和准确度紧密相关。 3.1 液-液提取 液-液提取是经典的提取方法之一,它基于被测组分在不相混溶的两种溶剂中的分配。在提取过程中,水相的pH是重要的参数;一般弱酸性药物可加入一定量的酸,弱碱性药物可加入一定量的碱,使药物以分子状态存在,有利于有机溶剂的提取效果;在[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]液质联用[/color][/url]中,必须使用可挥发性的酸和碱,如盐酸、甲酸、乙酸、氨水等。有时加入一些强离子的无机盐(如氯化钠), 利用盐析作用,能促进组分进入有机相。通过选择不同的有机溶剂可提高选择性。一般可选用乙酸乙酯、乙醚、二氯甲烷、氯仿、正己烷、甲基叔丁基醚、甲醇、乙腈等有机溶剂及其不同比例的混合物进行提取。液-液提取可用于水为基质的样品中非极性或弱极性组分的提取,液液提取可用氮气吹干,残渣可用与色谱方法相适应的溶剂溶解后进样。 液-液提取有时会发生乳化现象以及被测组分损失。为了防止乳化,可应用较大体积的有机溶剂,避免猛烈振摇或加入适当的试剂改变其表面张力而破乳,若已发生严重的乳化现象,可将试管置于冰箱中冷冻破乳。 萃取过程中所用的玻璃容器壁对某些药物的吸附是不可忽略的,特别是当药物浓度较低时更是如此。可使用经硅烧化处理的器具,同时萃取剂中加入异戊醇也可减少玻璃壁的吸附,还可减少萃取过程中乳化的形成。两性药物或水溶性很强的药物不能用一般的溶剂萃取法将它们自体液介质中萃取出来,通常可用离子对萃取法。针对呈解离状态的药物,可以加入反离子来形成离子对络合物,再用有机溶剂萃取出来。一般碱性药物用十二烷基磺酸类(RSO3H)作为反离子,其他有戊烷磺酸、己烷磺酸、庚烷磺酸、辛烷磺酸等;酸性药物可用烷基季铵类化合物(R4N+X-)作为反离子,如四丁基铵、四乙基铵、四辛基铵等。形成离子对后可用相应有机溶剂提取。 3.2 固相分离 固相分离又称为固相提取柱法,其常用的柱填料有吸附剂、高分子大孔树脂、离子交换树脂、键合硅胶等。固相分离有两种实现样品纯化的途径。一种是保留杂质,待测组分不被保留而自然流出或者被洗脱。更为常用的一种途径是先使待测物完全保留在柱上,使干扰杂质随样品溶剂或洗涤液洗出,然后以小体积溶剂洗脱待测物。键合硅胶固相提取的一般操作步骤如下:①以适当强溶剂湿润固相提取填料使其溶剂化;②以弱溶剂通常是水或缓冲溶液洗涤填料,使其达到良好的分离状态;③将溶于弱溶剂常是缓冲溶液中的样品加到固相提取柱上;④以强度适当的弱溶剂,如含有少量甲醇的水或缓冲溶液,洗涤、除去基质或干扰组分;⑤用强度较高的溶剂洗脱待测组分,收集洗脱液,直接或适当浓缩后进行色谱分析。 为了确立最佳固相提取条件,使方法有良好的选择性、准确度和重现性,在实验、实践中应当从下列各方面着手:首先要研究待测组分(药物等)的物理、化学性质,根据这些性质选择合适的固相提取剂,然后根据待提取组分的性质和已选用的提取剂来选择洗脱剂;再了解样品基质的性质,这有助于选择上样前固相提取剂的平衡溶剂、样品溶剂和消除杂质用的洗涤溶剂,最后进行回收率试验,考察提取的完全程度。

  • 【资料】生物样品前处理文献

    两篇较好生物、有机样品前处理综述文献,虽然发表时间较早。[img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=106930]生物样品与有机物质在化学分析前的灰化预处理技术(一)[/url][img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=106931]生物、有机样品前处理(二)[/url]

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