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纯化设备

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纯化设备相关的论坛

  • 求大分子的纯化、分离设备

    本人想购买一台做大分子分离纯化的设备,要求是要分离效果好,也不知道什么仪器合适,想请大家给给意见,谢谢

  • GMP | 20个常见的纯化水设备系统GMP验证问题

    新版GMP认证出台后,许多制药企业在纯化水设备系统的GMP认证会遇到一些问题,以下是整理收集的20个常见的制药纯化水设备系统GMP认证问题。1.纯化水设备没有安装PID图;2.纯水设备没有贴取样点编号;3.纯化水系统中需要加上用水点编号;纯化水储罐上面管道无流向标识;4.纯化水理化检测记录中:不挥发物检测称重无原始打印记录;电导率的检测应加入单位;其整张记录太粗,可操作性不强;5.纯化水系统从EDI出来就是纯化水,但现场的管路及阀门、送水泵、压力表都没安照纯化水的标准做,存在污染风险;6.纯化水系统验证时没有验证自动电磁阀的动作是否准确无误;7.安装纯化水在线电导率监测时没有图纸;8.纯化水无管理设计图,管路非卫生连接,无日常监控,管路设计不利于取样;9.纯化水灌及焊接不符合要求,应该采用一面焊两面的成型工艺,并提供纯化水管道的内窥镜照片;10.纯化水设备系统无取样记录;纯化水回水处应安装流量计;11.纯化水系统需要对总送、总回、储罐、最远用水点进行每周全检,其余用水点每月全检;12.纯化水系统的验证,对纯化水设备系统的IQ\OQ\PQ等性能进行验证;13.纯化水的设计、安装、臭氧消毒依据、焊接、验证确认等部分不符合要求;14.纯化水设备的图纸与实际设计不相符,各控制阀应在图纸上注明;15.管道、储水罐、电焊问题;16.储备出水口,回水口应有温度计,以便对其温度变化进行控制,应有流量监控计;17.纯化水管道接口连接方式应该采用卫生级卡箍连接方式,并且杜绝使用丝牙连接方式;18.纯化水区段管线为应采用自动焊接工艺以及专业的切管工具;19.循环管线安装没有坡度,未设计最低点为排放点;20.纯化水系统管道存在死角,容易滋生微生物及细菌。

  • 温度对制药纯化水设备系统微生物控制的影响

    制药纯化水系统通常应用连续的方法控制微生物,并进行周期性消毒。以热系统、冷系统以及常温系统讲述制药纯化水设备系统在不同温度时对连续微生物控制的影响。1.“热”系统防止细菌生长的最有效和最可靠的方法是在高于细菌易存活的温度下操作。如果制药纯化水设备分配系统维持在热状态下,常规的消毒可以取消。有很多的历史数据表明系统在80℃的温度下操作,能防止微生物的生长。目前很多企业在70℃的温度下验证水系统。在较低的温度下操作的优点包括节约能源、对人体伤害风险低、减少红锈的生成。系统在这个范围内的较高温度下操作在微生物污染方面具有更高的安全性。但在80℃以下的有效性必须在实例的基础上用检测数据来证明,需要注意的是,这个温度范围不会去除内毒素。2.“冷”系统通常情况下,“冷”系统是在4~l0℃(我国药典附录中提及的是低于4℃)的温度下操作。在15℃ 以下,微生物的生长率明显降低,因此与常温系统相比,冷系统的消毒频率可能要降低。特定温度下的有效性与否,在任何特殊系统中相关的消毒频率必须在实例的基础上通过统计分析来确定。虽然“冷”系统被证明是有效的,但是其需要能耗及与其相关的成本很高。3.“常温”系统任何制药用水系统的循环温度都是通过需要达到的微生物标准或需要达到的使用温度来确定的。在行业中,“常温”的纯化水设备系统通常使用臭氧或热消毒,与“热”或“冷”系统相比,通常需要较低的生命周期成本,并且还减少了能量消耗。然而,在没有提高系统消毒水平的情况下,在储罐和分配循环中缺少温度控制会导致系统内生物膜的形成,偶尔或不可预测地产生微生物不符合规定的水,以及导致不在计划内的水系统停机。

  • 【分享】生物制药设备和分离纯化技术

    [I][B][color=#DC143C][size=4][font=新宋体]生物制药设备和分离纯化技术,一本从事制药行业的好书![/font][/size][/color][/B][/I][em0807][img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=81109]生物制药设备和分离纯化技术[/url]

  • 纯化水

    纯化水设备间需要什么试剂,东西

  • 蛋白质纯化及复性

    蛋白质纯化及复性 重组蛋白在大肠杆菌(E. coli)高效表达时,往往以不溶的、无活性的蛋白聚集体,即包涵体(inclusion body)的形式存在于细胞内。必须从细胞内分离出包涵体,采用高浓度变性剂(如7.0mol/L盐酸胍、8.0mol/L脲)溶解包涵体,然后除去变性剂或降低变性剂的浓度,使包涵体蛋白得以复性,最后再用色谱法使目标蛋白质得到纯化。其中包涵体蛋白的复性和纯化是整个过程中的核心。 目前重组蛋白生产中普遍存在的问题是:(1)复性效率低。传统的复性方法稀释法和透析法。稀释复性法对样品几十倍,甚至上百倍的稀释会使样品的体积急剧增大,给后续的分离纯化带来很大的困难,而且复性过程中需要较大的复性容器。透析法耗时较长,而且要多次更换透析溶液。这两种方法的共同缺点是蛋白质在复性过程中会发生聚集而产生大量沉淀,复性效率低,通常蛋白质的活性回收率只有5~20%,而且复性后的蛋白质溶液中含有大量的杂蛋白,需要进行进一步的分离纯化。(2)工艺路线烦琐,生产周期长。在传统的重组蛋白质分离纯化工艺中,大多采用经典的软凝胶分离介质,由于这种介质的颗粒较大,分离效率较差,因此常常需要采用多种不同模式的色谱操作联用对目标蛋白质进行纯化,才能得到纯度符合一定标准的目标蛋白质。另外,这种色谱介质的耐压性很差,只能在流速较低的情况下进行操作,分离纯化时间较长。分离纯化步骤多和分离时间长使得蛋白质的质量回收率和活性回收率很低。而且在传统的重组蛋白质生产工艺中,蛋白质的复性和纯化是生产过程中两个独立的单元操作,也在很大程度上制约着生产效率。(3)生产成本高,设备投资大。由于复性和分离纯化分别单独进行,而且分离纯化步骤多,每一步都需要有与之配套的设备,致使设备投资大,生产成本高。随着生产规模的增加,这种弊端会愈来愈严重。 1991年耿信笃教授首先将高效疏水相互作用色谱(HPHIC)用于变性蛋白的复性,很好的解决了上述问题,现已成功用于重组人干扰素-g(rhIFN-g)、重组人干扰素-a(rhIFN-a)、人粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF)、重组人胰岛素原(proinsulin)、重组牛朊病毒(prion)等重组蛋白以及溶菌酶和核搪核酸酶等标准模型蛋白的复性与同时纯化中。目前,排阻色谱法、离子交换色谱法和亲合色谱法也已用于蛋白质的复性和同时纯化中。与传统的稀释法及透析法比较,用色谱法进行蛋白复性的优点是:①在进样后可很快除去变性剂;②由于色谱固定相对变性蛋白质的吸附,可明显地减少、甚至完全消除复性过程中蛋白质聚集体和沉淀的产生,从而提高蛋白质复性的质量和活性回收率;③在蛋白质复性的同时可使目标蛋白质与杂蛋白分离以达到纯化的目的,使复性和纯化同时进行;④便于回收变性剂,以降低废水处理成本。简言之,色谱法复性可以提高蛋白质的活性和质量回收率,将蛋白复性和纯化集成在一步操作完成,缩短了操作步骤和生产时间,减少了设备投资,使生产成本大大降低,已经引起了全世界范围内许多生化研究者和重组蛋白药物生产厂家的关注。由于高效液相色谱(HPLC)分离效率高,往往在一步操作中便可得到纯度符合要求的蛋白质,而且分离速度快,在应用方面具有更大的优势。

  • 【原创】蛋白质纯化技术简述

    【原创】蛋白质纯化技术简述

    这个贴作为“蛋白质重组表达研究简述--从基因克隆到蛋白纯化及功能研究”一贴的分支内容。因为蛋白质纯化技术本身就是一个比较复杂的技术,内容涵盖很多,因此我觉得单独作为一贴来简述更加合适。先传两张仪器的照片,AKTA基本上垄断了做蛋白纯化的仪器设备。FPLC,功能比较适中的纯化设备,一般的蛋白纯化需要可以满足。比Primer要强大。[img]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2009/06/200906161044_155637_1613111_3.jpg[/img]exploer 100,属于满足中试要求的纯化设备,流速最大100ml/min。[img]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2009/06/200906161045_155639_1613111_3.jpg[/img]

  • AKTA蛋白纯化系统操作

    AKTA蛋白纯化系统是当前重组蛋白表达与纯化服务中经常用到的一组设备,自动化程度很高。AKTA系统依据不同的配置,可以分为AKTA EXPLORER、AKTA PILOT、AKTA PURIFIER等多种型号的设备。以下以AKTA EXPLORER为例简单介绍AKTA蛋白纯化系统的一般操作。

  • 欢迎kaikaifeng担任实验室常用设备-分离/纯化/萃取版主

    欢迎[url=http://www.instrument.com.cn/bbs/user.asp?username=kaikaifeng]kaikaifeng[/url]担任实验室常用设备-分离/纯化/萃取版主!我们希望有更多的热心用户能加入到版主队伍中来,也希望在职的版主能在版面中发现有能力的热心用户推荐给我们。论坛正在招募版主,有兴趣的用户请参见这个帖子:[url=http://www.instrument.com.cn/bbs/shtml/20071101/1042199/]http://www.instrument.com.cn/bbs/shtml/20071101/1042199/[/url]

  • 纯化水检测项目

    纯化水检测,用哪个设备来做?哪个牌子的好?谢谢各位的回答!!!

  • 抗体纯化和蛋白纯化有什么区别?从定义及原理上剖析:

    [font=宋体][b]什么是抗体纯化?抗体纯化原理:[/b][/font][font=宋体][font=宋体]抗体纯化是指从抗血清([/font][font=Calibri]pAb[/font][font=宋体])、腹水或杂交瘤细胞系([/font][font=Calibri]mAb[/font][font=宋体])细胞培养上清液中提取抗体的过程。纯化后的抗体适用于多种应用。该过程可以在提供抗体纯化服务的实验室中进行,如果有必需的设备和工具,也可以自行纯化。如研究人员担心原始研究的完整性受到破坏,可在实验室中进行纯化,确保研究快速进行。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]抗体的主要来源之一是在动物体内生成的抗血清。在这种情况下,反复向动物体内注射抗原,直到抗体开发完成为止,其血液用于制备抗血清,经纯化后可获得多克隆抗体。抗体的另一个来源是克隆细胞,其作为相同细胞群的一部分生成抗体;这种方法用于大规模生产单克隆抗体。查看更多有关[/font][font=宋体]“单克隆抗体纯化”的信息。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]什么是蛋白纯化?[/b][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]重组蛋白的纯化是生物学研究中的重要技术。为了研究蛋白的特定功能和结构,研究人员必须将重组蛋白从生物体中分离并纯化。蛋白纯化方法主要利用不同重组蛋白之间的相似性和差异性。可以根据蛋白之间的相似性去除非蛋白物质,然后根据蛋白之间的差异分离纯化目标重组蛋白。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]蛋白标签是一种可以提高重组蛋白的溶解度、简化蛋白纯化的简单有效的工具,并通过简单的方法跟踪蛋白表达和纯化过程。此外,蛋白标签是追踪活细胞中蛋白和进程的一种有效工具,可以通过显微镜直接跟踪或者通过[/font][font=Calibri]Western blot[/font][font=宋体]、免疫沉淀或免疫染色间接进行跟踪。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]蛋白纯化原理:[/b][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]不同的重组蛋白具有不同的氨基酸序列和空间结构,导致其物理、化学和生物学特性存在差异。我们也可以根据目标蛋白与其他蛋白和裂解液的性质差异设计合理的蛋白纯化方案。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]大多数的纯化方案需要不止一步才能达到理想的纯度水平。该过程中的每一步都会造成一定的产品损失,假设每一步的获得率为[/font][font=Calibri]80%[/font][font=宋体]。因此,建议尽可能减少纯化步骤。起始原料的选择是纯化过程设计的关键。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]在背景信息、检测方法和样品规格都已到位的情况下,可以考虑采用三阶段纯化策略。纯化分为捕获、中度纯化和精细纯化三个阶段,每个阶段都有特定的目标。捕获阶段的目标是分离、浓缩和稳定目标产物。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]义翘神州提供重组蛋白表达纯化服务和[url=https://cn.sinobiological.com/services/monoclonal-antibody-production-services][b]单克隆抗体定制服务[/b][/url],更多详情可以关注[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/services/monoclonal-antibody-production-services[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/services/recombinant-protein-expression-service[/font][/font]

  • 纯化水能达到注射用水的标准吗?

    首先肯定一个:纯化水的制备与注射用水的制备工艺是不一样的。其次:纯化水的质量标准与注射用水的质量标准是不一样的,制备设备也是不一样的。再次:纯化水的制备方法有很多,使用的技术设备有电渗析、混合树脂床、反渗透、EDI等,往往有几个设备的组合使用,因此,如果使用的几个组合设备性能较好,是有可能制出的纯化水达到注射用水的质量标准的。实际上,对于药厂,如果需要使用纯化水,在选择设备的时候只要能制出的水符合纯化水的质量标准就行了,谁会提高设备要求,以注射用水的要求选配纯化水设备?纯化水质量标准(依据2005版药典)本品为蒸馏法、离子交换法、反渗透法或其他适宜的方法制得供药用的水,不含任何附加剂。4.1 性状:本品为无色的澄清液体;无臭,无味。4.2 检查:4.2.1 酸碱度检查:取本品10ml,加甲基红指示液2滴,不得显红色;另取10ml,加溴麝香草酚蓝指示液5滴,不得显蓝色。4.2.2 氯化物、硫酸盐与钙盐检查: 取本品,分置三支试管中,每管各50ml。第一管中加硝酸5滴与硝酸银试液1ml,第二管中加氯化钡试液2ml,第三管中加草酸铵试液2ml,均不得发生浑浊。4.2.3 硝酸盐检查: 取本品5ml置试管中,于冰浴中冷却,加10%氯化钾溶液0.4ml与0.1%二苯胺硫酸溶液0.1ml,摇匀,缓缓滴加硫酸5ml,摇匀,将试管于50℃水浴中放置15分钟,溶液产生的蓝色与标准硝酸盐溶液〔取硝酸钾0.163g,加水溶解并稀释至100ml,摇匀,精密量取1ml,加水稀释成100ml,再精共3页 第2页密量取10ml,加水稀释成100ml,摇匀,即得(每1ml相当于1μgNO3)〕0.3ml,加无硝酸盐的水4.7ml,用同一方法处理后的颜色比较,不得更深(≤0.000006%)。4.2.4 亚硝酸盐检查: 取本品10ml,置纳氏管中,加对氨基苯磺酰胺的稀盐酸溶液(1→100)1ml与盐酸萘乙二胺溶液(0.1→100)1ml,产生的粉红色,与标准亚硝酸盐溶液〔取亚硝酸钠0.750g(按干燥品计算),加水溶解,稀释至100ml,摇匀,精密量取1ml,加水稀释成100ml,摇匀,再精密量取1ml,加水稀释成50ml,摇匀,即得(每1ml相当于1μgNO2)〕0.2ml,加入无亚硝酸盐的水9.8ml,用同一方法处理后的颜色比较,不得更深(≤0.000002%)。4.2.5 氨检查: 取本品50ml,加碱性碘化汞钾试液2ml,放置15分钟;如显色,与氯化铵溶液(取氯化铵31.5mg,加无氨水适量使溶解,并稀释成1000ml)1.5ml,加无氨水48ml与碱性碘化汞钾试液2ml制成的对照液比较,不得更深(≤0.00003%)。4.2.6 二氧化碳检查: 取纯化水25ml,置50ml具塞量筒中,加氢氧化钙试液25ml,密塞振摇,放置,1小时内不得发生浑浊。4.2.7 易氧化物检查: 取纯化水100ml,加稀硫酸10ml,煮沸后加高锰酸钾滴定液(0.02ml/l)0.10ml,再煮沸10分钟,粉红色不得完全消失。4.2.8 不挥发物的检查: 取纯化水100ml,置105℃恒重的蒸发皿中,在水浴上蒸干,并在105℃干燥至恒重,遗留残渣不得超过1mg。4.2.9 重金属检查:取纯化水50ml,加水18.5ml,蒸发至20ml,放冷,加醋酸盐缓冲液(PH3.5)2ml与水适量使成25ml,加硫代乙酰胺试液2ml,摇匀,放置2分钟, 共3页 第3页与标准铅溶液1.5ml加水18.5ml用同一方法处理后的颜色比较,不得更深(≤0.00003%)。4.3 微生物限度检查: 取纯化水,采用薄膜过滤法处理后,依照《中国药典》2005版附录ⅪJ检测,细菌、霉菌和酵母菌总数应≤100个∕ml。① 欧洲药典中总有机碳( TOC )和易氧化物项目,可任选一项监控。②美国药典中规定:a. 企业自用的纯化水监测 TOC 和颠倒率,商业用的纯化水应符合无菌纯水的试验要求。表中所列为企业自用纯化水的监测项目。b. 纯化水不得用于制备肠外制剂。③微生物超标纠正标准是指微生物污染达到某一数值,表明纯化水系统已经偏离了正常运行的条件,应采取纠偏措施,使系统回到正常的运行状态。

  • 在哪里能找到与纯化相关的资料

    我希望能找到一些与生产中纯化、发酵设备、工艺相关的资料,不知道应该到哪个论坛里看,看了看色谱、生化仪器及设备等一些论坛,觉得没有太多的关系,还是我没有找到?我觉得这部分东西也应该有很多人在做吧,能不能有新的论坛出现,专门讨论生化技术与生产的结合应用呢?

  • BUCHI能用来纯化蛋白质吗

    各位老大,BUCHI的中压制备系统可以用来纯化蛋白质吗?另外最小的BUCHI的层析柱是什么型号的,能不能买到?还有G25的填料,谢谢卖设备的人跳槽了,结果现在都推另外一家公司的,说这个设备不能用。也搞不清楚!谢谢大家!

  • 欢迎xiaodu2007693担任实验室常用设备-分离/纯化/萃取版主

    欢迎[url=http://www.instrument.com.cn/bbs/user.asp?username=xiaodu2007693]xiaodu2007693[/url]担任实验室常用设备-分离/纯化/萃取版主!我们希望有更多的热心用户能加入到版主队伍中来,也希望在职的版主能在版面中发现有能力的热心用户推荐给我们。论坛正在招募版主,有兴趣的用户请参见这个帖子:[url=http://www.instrument.com.cn/bbs/shtml/20071101/1042199/]http://www.instrument.com.cn/bbs/shtml/20071101/1042199/[/url]

  • 楷拓生物科技(苏州)有限公司刚刚发布了工艺设备工程师(细胞/纯化方向)职位,坐标苏州市,速来围观!

    [size=16px][color=#ff0000][b][url=https://www.instrument.com.cn/job/position-79375.html]立即投递该职位[/url][/b][/color][/size][b]职位名称:[/b]工艺设备工程师(细胞/纯化方向)[b]职位描述/要求:[/b]职责描述:1. 参与细胞培养及纯化设备设施调研,协调供应商进行技术交流,配合设备使用部门完成URS编写及审核工作;2. 负责公司工艺设备固定资产管理、做好设备开箱验收、调拨、盘点和报废及建立、整理和更新设备档案工作;3. 负责联系协调供应商工程师进行设备安装、运行、调试,和供应商建立良好的沟通关系4. 全面负责细胞培养及纯化工艺设备维护维修工作,制定行之有效的维护保养计划,起草设备维护维护保养SOP等5. 配合设备使用部门完成设备偏差调查及维护SOP变更升级6. 编制年度备品备件计划,统计、分析和评价备品备件消耗和使用情况,编制部门设备预算,合理控制设备维修费用7. 与设备使用部门保持密切合作,提供设备的日常运行与故障解决方面的信息与技术支持,提供灵活、安全、快速响应的服务;任职要求:1. 本科及以上学历,机械/电气/自动化相关专业教育背景 ,生物药背景优先考虑,具有低压电工上岗证优先2. 熟悉GMP和FDA法规、政策和质量管理体系相关知识3. 具有生物制药行业 3 年以上工作经验,精通细胞培养设备、纯化设备等工作原理,熟悉洁净车间的生产设备工艺流程。4. 具备良好的团队协作能力、跨部门沟通协调能力5. 具备正直、诚实、守信、主动积极的工作态度6. 具备良好的工作计划和跟踪、反馈、总结、分析、创新能力7. 抗压能力强,具备应急问题处理能力、良好的设备及系统故障判断、分析与处理能力 8. 具备良好的设备维护、安全、质量意识9. 熟悉 Microsoft Office,具有数据分析、总结、报告能力10. 熟悉 Auto CAD 11. 具备良好的英文听说读写能力 ,英文要求四级,能够基本读懂英文版电路图及说明书[b]公司介绍:[/b] 楷拓生物科技(苏州)有限公司位于中国(江苏)自由贸易试验区苏州片区苏州工业园区裕新路108号A栋3楼312室,注册资本为1668万人民币,成立于2021-06-17,目前公司的主要经营范围是一般项目:技术服务、技术开发、技术咨询、技术交流、技术转让、技术推广;技术进出口;货物进出口;科技推广和应用服务;医学研究和试验发展(除人体干细胞、基因诊断与治疗技术开发和应用);企业管理;信息咨询服务(不含许...[url=https://www.instrument.com.cn/job/position-79375.html]查看全部[/url][align=center][img=,178,176]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2021/08/202108160948175602_3528_5026484_3.png!w178x176.jpg[/img][/align][align=center]扫描二维码,关注[b][color=#ff0000]“仪职派”[/color][/b]公众号[/align][align=center][b]即可获取高薪职位[/b][/align]

  • 重组蛋白纯化常用方法有哪些?义翘重组蛋白纯化服务介绍

    [font=宋体] [font=宋体]重组蛋白纯化要利用不同蛋白间内在的相似性与差异,利用各种蛋白间的相似性来除去非蛋白物质的污染,而利用各蛋白质的差异将目的蛋白从其他蛋白中纯化出来。每种蛋白间的大小、形状、电荷、疏水性、溶解度和生物学活性都会有差异,利用这些差异可将蛋白从混合物如大肠杆菌裂解物中提取出来得到重组蛋白。[/font][/font][font=宋体] [font=宋体][b]重组蛋白纯化常用的几个方法如下:[/b][/font][/font][font=宋体] [font=Calibri]1.[/font][font=宋体]蛋白纯化色谱法:[/font][/font][font=宋体] [font=宋体]色谱法无疑是下游处理中主要和常用的操作,因为色谱法相比其他单元操作具有某些优势。例如色谱法支持高分辨率的效率,可以分离分子性质非常相似的复杂粗制混合物。此外,色谱法是生物工艺中遇到的稀释溶液中捕获分子的理想选择。[/font][/font][font=宋体] [font=宋体]柱色谱法[/font][font=Calibri]([/font][font=宋体]层析法[/font][font=Calibri])[/font][font=宋体]的原理是将一个大的蛋白池分离成许多小的蛋白池,其中一些富集了目标蛋白。虽然柱色谱法有昂贵的专业设备,但只需要基本的设备就可以了。[/font][/font][font=宋体] [font=Calibri]2.[/font][font=宋体]亲和色谱法:[/font][/font][font=宋体] [font=宋体]亲和色谱法依赖于蛋白对基质结合配体的特异性和可逆性结合。该配体可以直接与目的蛋白结合或共价连接到蛋白的标签上与其相结合。亲和层析通常是最有效的纯化方法,通常用在纯化方案的早期阶段。这种特定的亲和相互作用能够捕获目标物,同时去除溶液中的污染物或其他分子,并一步富集或纯化目标分子,使其与其他不能结合配体的分子分离。[/font][/font][font=宋体] [font=宋体]除了理论上蛋白能够通过免疫亲和色谱纯化之外,亲和法仅限于具有特异结合特性的蛋白,而免疫亲和色谱是所有亲和技术中特异性最高的。[/font][/font][font=宋体] [font=Calibri]3.[/font][font=宋体]离子交换色谱法:[/font][/font][font=宋体] [font=宋体]离子交换色谱[/font][font=Calibri](IEX)[/font][font=宋体]是一种主要基于蛋白净电荷的色谱分离方法,通常用于追踪脱酰胺和琥珀酰亚胺的形成。[/font][font=Calibri]IEX[/font][font=宋体]有两种类型:阳离子交换和阴离子交换色谱法。当缓冲液[/font][font=Calibri]pH[/font][font=宋体]值高于此[/font][font=Calibri]IP[/font][font=宋体]时,蛋白带负电(阴离子);当[/font][font=Calibri]pH[/font][font=宋体]值低于此[/font][font=Calibri]IP[/font][font=宋体]时,蛋白带正电(阳离子)。[/font][/font][font=宋体] [font=宋体]所有蛋白都表现出净电荷,这取决于蛋白氨基酸组成和任何共价连接的修饰。蛋白净电荷受溶解它的溶剂[/font][font=Calibri]pH[/font][font=宋体]所影响,因为溶剂会与蛋白进行氢离子交换。通常情况下,蛋白与[/font][font=Calibri]IEX[/font][font=宋体]的结合必须通过反复试验来确定,使用一系列[/font][font=Calibri]pH[/font][font=宋体]值的溶剂以确定蛋白保留的最佳[/font][font=Calibri]pH[/font][font=宋体]。通常溶剂的[/font][font=Calibri]pH[/font][font=宋体]值与[/font][font=Calibri]pI[/font][font=宋体]相差约一个[/font][font=Calibri]pH[/font][font=宋体]单位就足以实现蛋白结合。[/font][/font][font=宋体] [font=Calibri]4.HPLC[/font][font=宋体]法蛋白纯化:[/font][/font][font=宋体] [font=宋体]色谱法是一种常用分析技术,可以将混合物分离成单独的成分。高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]法通常称为[/font][font=Calibri]HPLC[/font][font=宋体],在化学生物学研究实验室中广泛应用。[/font][/font][font=宋体] [font=宋体]在化学生物学中,单个分析物(如多肽)通常经色谱纯化后作为一种功能工具使用。高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]法[/font][font=Calibri](HPLC)[/font][font=宋体]是一种用于分析和分离液体样品的方法。在化学生物学实验室中,[/font][font=Calibri]HPLC[/font][font=宋体]是纯化多肽(人工合成或用合成器自动合成)和其他中小型有机分子不可或缺的过程。它还允许使用颗粒非常小的柱填料,这就给固定相和流经它的分子之间产生相互作用提供了更大的表面积,这样可以更好地分离混合物的成分。[/font][/font][font=宋体][font=宋体]针对特定应用开发的[/font][font=Calibri]HPLC[/font][font=宋体]色谱柱有很多种类,如正相[/font][font=Calibri]HPLC(NP-HPLC)[/font][font=宋体]和反相[/font][font=Calibri]HPLC(RP-HPLC)[/font][font=宋体]。正确选择色谱柱是获得良好的[/font][font=Calibri]HPLC[/font][font=宋体]结果的关键。色谱柱的选择取决于我们希望分离的混合物的组分特性。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]义翘神州提供从基因合成、载体构建到蛋白质表达、纯化的一站式服务,可以根据客户需求,选用不同表达[/font][font=Calibri]/[/font][font=宋体]纯化标签、表达宿主等,真正为客户实现深度私人定制。多种纯化体系,为蛋白表达、纯化提供多种选择,我们致力于为客户提供高质量、低成本的重组蛋白。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]更多[url=https://cn.sinobiological.com/services/recombinant-protein-expression-service][b]重组蛋白表达纯化服务[/b][/url]详情尽在:[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/services/recombinant-protein-expression-service[/font][/font]

  • 酸纯化器如何纯化氢氟酸

    由于ICP-MS需要用很高纯度的化学试剂,公司买了亚沸点酸纯化器用来纯化电子级别的化学试剂,发现纯化氢氟酸时,常常纯化出来很高浓度的砷。这是怎么回事呢?怎么样能去除呢?请高手指点下啊,小女子万分感激!

  • 现在市场上的酸纯度堪忧!有了解酸纯化系统的朋友吗?

    本人主要测痕量元素,用了几种硝酸后发现,国药的硝酸铅含量很低,能满足日常使用。但是铬含量依然不够理想(7ml消化定容到25ml后接近5个ppb,),但已属国产酸中最好的(个人认为),后来买了默克优级纯硝酸,发现铬的本底极低,甚至可以忽略不计,但价格有点贵。不适合大批量检验。 下面切入正题,我们单位正在报明年的设备采购计划,所以我想买一台酸纯化系统,但是对品牌,不太了解,而且对其实际使用效果尚存疑惑,是否真的能将一些元素含量降低到零点零几个ppb,若真有那种效果,就很物有所值了。 请使用过、或略有了解的朋友不吝赐教啊,说说品牌和实际效果,只说一句半句的也行,确实很需要“酸纯化”相关的信息!

  • 美国高麦氩色谱之纯化器

    请问有用过美国高麦氩色谱(GM100)的吗?其中有一个载气(氩气)的纯化器。有换过的吗?原装的太贵了将近3万,请问是否有可替代的厂家或者设备?Parameter is not valid.

  • 深入解析蛋白质纯化系统的原理与应用

    [font=宋体]蛋白质纯化系统是一种用于从混合物中纯化目标蛋白的设备和方法。它结合了多种技术和步骤,可以有效地分离和纯化蛋白质,提供高纯度和高活性的目标蛋白。蛋白质纯化系统是实现蛋白质纯化的关键装置,它结合了各种分离、富集和纯化方法,帮助科研工作者实现蛋白质的高纯度提取。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]蛋白质纯化系统的基本原理[/b][/font][font=宋体]蛋白质纯化系统主要依据蛋白质的特性利用不同的物理化学方法进行分离和纯化。下面将介绍几种常见的蛋白质纯化系统的基本原理。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]①[url=https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review/protein-purification-by-ac][b]亲和层析[/b][/url][/font][/font][font=宋体]亲和层析是一种基于蛋白质的特异性与配体的亲和性相互作用来实现分离和纯化的方法。在亲和层析过程中,蛋白质溶液通过填充有配体的柱子,与配体结合形成复合物,而非特异性结合的其他组分被洗脱。最后,通过改变条件来破坏蛋白质与配体的结合,从而使得目标蛋白质得以纯化。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]②凝胶过滤层析[/font][font=宋体]凝胶过滤层析是一种基于蛋白质大小差异来进行分离的方法。在凝胶过滤层析中,待纯化的蛋白质溶液通过一系列的凝胶层析柱,大分子的蛋白质不能进入凝胶颗粒的内部,而小分子的蛋白质则可以进入凝胶颗粒内部。通过调整凝胶的孔径,可以实现对目标蛋白质的选择性分离和纯化。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]③[url=https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review/protein-purification-by-iec][b]离子交换层析[/b][/url][/font][/font][font=宋体][font=宋体]离子交换层析是一种基于蛋白质与固定在柱子上的离子交换基的电荷相互作用来实现分离和纯化的方法。在离子交换层析中,蛋白质溶液通过带有离子交换基的柱子,与柱子上的离子交换基之间发生相互作用。通过改变溶液的离子浓度和[/font][font=Calibri]pH[/font][font=宋体]值,可以实现对蛋白质的选择性吸附和洗脱。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]④逆流层析[/font][font=宋体]逆流层析是一种基于分子质量和电荷差异来实现蛋白质分离和纯化的方法。在逆流层析中,蛋白质溶液通过填充有逆流层析介质的柱子,溶液在反向流动的情况下通过层析柱。由于不同蛋白质之间的分子质量和电荷差异,它们在逆流层析介质中的移动速度不同,从而实现对蛋白质的分离和纯化。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]蛋白质纯化系统的应用[/b][/font][font=宋体]蛋白质纯化系统在生物医药领域有着广泛的应用,下面将介绍几个常见的应用场景。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]①药物研发[/font][font=宋体]蛋白质纯化系统在药物研发中起到了非常重要的作用。通过蛋白质纯化系统,科研人员可以从复杂的生物样品中高效纯化出目标蛋白质,为药物研发提供了可靠的原料和工具。蛋白质纯化系统不仅可以提高药物研发的效率,还可以确保药物的纯度和质量,从而提高药物的疗效和安全性。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]②生物学研究[/font][font=宋体]在生物学研究中,蛋白质纯化系统被广泛应用于蛋白质相互作用研究、蛋白质结构解析和功能分析等方面。通过蛋白质纯化系统,科研人员可以从不同的细胞和组织中提取目标蛋白质,进一步研究它们之间的相互关系和作用机制。蛋白质纯化系统还可以用于蛋白质结构解析,帮助科学家揭示蛋白质的三维结构以及其功能。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]③临床诊断[/font][font=宋体]蛋白质纯化系统在临床诊断中也起到了重要的作用。通过蛋白质纯化系统,医生可以从患者的生物样本中纯化出特定的蛋白质标志物,用于疾病早期诊断、病情监测和治疗评估等方面。蛋白质纯化系统在临床诊断中的应用可以帮助医生及早发现疾病,提高诊断的准确性和效率。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体]蛋白质纯化系统是实现蛋白质纯化的重要装置,它结合了多种分离、富集和纯化方法,帮助科研人员高效地提取目标蛋白质。蛋白质纯化系统的应用广泛,不仅在药物研发、生物学研究和临床诊断等领域发挥重要作用,还为科学家揭开蛋白质的结构和功能提供了有力的支持。通过不断的技术创新和优化,蛋白质纯化系统将更好地满足科研和临床的需求,推动生物医药领域的发展。[/font][font=Calibri] [/font]

  • 分离纯化的定义

    分离纯化:有一种以上的微生物培养物称为混和培养物(Mixed culture)。如果在一个菌落中所有细胞均来自于一个亲代细胞,那么这个菌落称为纯培养(Pure culture)。在进行菌种鉴定时,所用的微生物一般均要求为纯的培养物。得到纯培养的过程称为分离纯化.

  • 【分享】试剂纯化

    化学试剂的纯化   在化学分析、仪器分析、无机制备、有机合成以及其他的科学实验工作中经常会遇到所用的化学试剂纯度不够,或买不到所需纯度的化学试剂,这就需要在实验室自己对现有的化学试剂进行纯化,以便得到所需纯度的化学试剂。实验室中常用的纯化化学试剂的方法有:蒸馏和精馏、重结晶、萃取、区域熔融和色谱分离等等,下面将分别加以简单介绍。 蒸馏和精馏   蒸馏和精馏是一种使用广泛的纯化方法,根据液体混合物中液体和蒸汽之间混合组分的分配差别进行纯化,是纯化挥发性和半挥发性化学试剂的第一选择。 蒸馏和精馏的实际应用   蒸馏和精馏主要用于液体、或是加热可成为液体的化学试剂,特别是用于有机化学试剂的纯化。在蒸馏或精馏之前,有时可加入某些化学试剂,与欲纯化的化学试剂中的杂质发生化学反应,生成沸点更高(或更低)的物质,在蒸馏或精馏是更容易除去。   在蒸馏或精馏时,往往是除去最初馏出的馏分和最后剩下的馏分,两头除去的越多,得到的化学试剂纯度就越高,但产率越低。 下面介绍几个用蒸馏或精馏方法纯化的化学试剂: 1. 盐酸的提纯:   (1)除去一般杂质的盐酸 用三次离子交换水将一级盐酸按盐酸:水=7:3的体积比稀释(或按1:1稀释,按此比例稀释仅得到浓度为6N的盐酸)。将此盐酸1.5升装入2升的石英或硬质玻璃蒸馏瓶中,用可调变压器调节加热器,控制馏速为200毫升/小时,弃去前段馏出液150ml,取中段馏出液1升,所得的纯盐酸浓度为6.5-7.5N,铁、铝、钙、镁、铜、铅、锌、钴、镍、锰、铬、锡的含量在5′10-6--2′10-7%以下。   (2)除去砷的盐酸 用三次离子交换水将一级盐酸按7:3的体积比稀释,加入适量氧化剂(按体积加入2.5%硝酸或2.5%过氧化氢或高锰酸钾0.3克/1.5升)。将此盐酸1.5升装入2升的石英或硬质玻璃蒸馏瓶中,放置15分钟后,以100毫升/小时的馏速进行蒸馏。弃去前段馏出液150毫升,取中段馏出液1升备用。砷的含量在1′10-6%以下。 2. 硝酸的提纯  于2升硬质玻璃蒸馏器中,放入1.5升硝酸(一级品),在石墨电炉上借可调变压器调节电炉温度进行蒸馏,馏速为200-400毫升/小时,弃去初馏份150毫升,收集中间馏份1升。 将上述得到的中间馏份2升,放入3升石英蒸馏器中。将石英蒸馏器固定在石蜡浴中进行蒸馏,借可调变压器控制馏速为100毫升/小时。弃去初馏份150毫升,收集中间馏份1600毫升。铁、铝、钙、镁、铜、铅、锌、钴、镍、锰、铬、锡的含量在2′10-7%以下。

  • 【求助】关于分离纯化的问题

    本人是新手,以前从未做过分离纯化。现在感觉很困难·····我是这样设计的,先用跑板的方法分离,刮下斑点后溶解制成样品液。下一步纯化的话该选用什么方法呢?我的预期目标是纯化成单一组分,主要想除去的是其中的蛋白质和盐分,烦请各位专业人士多提意见啊,谢谢~~

  • 【转帖】蛋白质纯化武器-设备篇(欢迎补充)

    (1)超声波细胞破碎机适用于5-100g湿菌体超声破碎,实验室规模用。一般可选择直径10、15、20mm的超声探头。推荐国产机器为宁波新芝。(2)高压匀浆机大规模生产用,对菌体量无限制。破菌效果好,但要注意冷却。(3)高分散乳化机均匀悬浮菌体用,比搅拌快,均匀性好,特别适合于大规模生产。另外,大规模生产时缓冲液的配制很有用,可快速溶解、混匀。推荐品牌:IKA 国产品牌:FLUKO;(4)中空纤维超滤柱大规模生产时做菌体收集用,要配合大蠕动泵及压力表。小规模研发时也有用做浓缩的,但感觉死体积比较大。(5)高速冷冻离心机小试、中试菌体收集用,破菌后离心,包涵体溶解后离心、小规模离心超滤等。推荐品牌:BECKMAN、日立、Eppendorf(6)磁力搅拌器就是搅拌用了。缓冲液配制,包涵体溶解等。推荐品牌:国产的都行,最好配4或6工位的。(7)真空泵离心上清过滤、缓冲液过滤、样品过滤等。推荐品牌:Millipore WP61型。(8)过滤器同真空泵配合使用。推荐品牌:Sartorius烧结金属垫板的不锈钢50mm滤器。(9)pH计缓冲液配制、样品pH调节用。推荐品牌:梅特勒(10)电导仪就是测定缓冲液及样品的电导了,做离子交换层析有时候要用到。(11)纯水仪如果没有管道系统的纯水设备,那就必需要的了。至少也是要去离子水、双蒸水或三蒸水。推荐品牌:MINI Q(12)紫外可见分光光度计测定蛋白浓度。推荐品牌:Beckman,岛津(13)核酸蛋白检测仪纯化时在线监测。如果不是用AKTA、Bio-Rad之类的高级仪器,就必须要了。(14)蠕动泵简单纯化系统用、包涵体稀释复性。推荐品牌:兰格、GE公司P50。(15)纯化系统高级的纯化系统了。推荐品牌:AKTA explorer、AKTA Purifier。不推荐bio-rad的DUOFLOW。(16)膜超滤器蛋白样品浓缩、缓冲液置换、以及药品级蛋白纯化时缓冲液的去内毒素用。推荐品牌:Millipore Labscale、Pellicon(泵可用国产的兰格)(17)蛋白电泳仪SDS-PAGE、Westblot用。推荐品牌:Bio-Rad,国产上海天能。(18)脱色摇床电泳染色、脱色用。(19)制冰机破菌时冷却用。(20)恒温培养箱融合蛋白酶切去除tag时恒温用,做ELISA时用。(21)凝胶成像仪就是给电泳胶及WB拍照片用,要配照片打印机哦。就是一台数码相机,硬件各品牌没有本质差异,主要看那家的软件做的好,界面友好。(22)电磁炉加热电泳样品,方便,快捷。(23)微波炉电泳考染脱色。加热水,溶解尿素、硫酸铵等。(24)微量取样器就是枪了。从1ul到5ml都要的。还有一种电动的,可以用刻度吸管。推荐品牌:Gilson,eppendorf(25)超净工作台做蛋白样品的无菌过滤用。(26)冰箱不说了。(27)电风扇小量样品的浓缩风干。个人感觉10-200ml的样品浓缩最为方便,比超滤、PEG等方法简单实用。(28)电子天平称重了。两种精度:0.1mg和0.01g。推荐品牌:梅特勒(29)空调这个我相信大家都不会反对,也是蛋白纯化对环境的要求。(30)超声波清洗机缓冲液脱气用,当然也可以采用真空泵抽真空的方法。特别是做疏水层析时,有机溶剂与水相混溶时脱气。(31)酶标仪、洗板机测定蛋白质免疫活性用。特别当我们纯化的蛋白原料含量很低时,SDS-PAGE无法有效监测就必须应用Elisa方法。(32)恒温干燥箱、干烤箱恒温干燥箱用于玻璃器皿、一般塑料件洗涤后的干燥,设定温度40-60度。干烤箱用于干烤灭菌,内毒素去除等,设定温度180-220度。(33)酸缸就是做细胞培养常用的那种浸泡容器的东东,对药品级的蛋白纯化要求容器都要用酸缸泡过。(34)UPS电源保护层析设备,防止数据丢失,生产必备。(35)层析冷柜 低温冷室4度双门的那种大冷柜,可以把层析柱放进去,对温度敏感的蛋白纯化需要。冷室作用同上,更彻底,只是运行费用更大。(36)冷冻干燥机(器)蛋白质保存较佳的方案。从手提式到药厂的大规模冻干室形式多样。(37)不锈钢层析柱架、三叉夹柱架有商品化的卖,但是没有自己DIY的好。可以自己设计好后找做不锈钢窗户的小店去做,很便宜。夹层析柱的夹子首选三叉夹,很牢靠,最大可以夹50mm的GE夹套XK柱。

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