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细胞组织检测

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细胞组织检测相关的资讯

  • 细胞组织实验室落户泰州
    江苏省发改委最近同意在泰州建设江苏省首家细胞组织工程实验室,去年落户泰州医药城的江苏华亿细胞组织工程有限公司获准筹建。该项目总投资4000万元,主要建设内容包括人造皮肤构建与应用等。  人造皮肤的准确名称是“生物医学活性人工皮肤”,其产业化在全球刚刚起步。江苏华亿项目1年前落户泰州医药城,现有100万平方厘米的人造皮肤库存。
  • iCEM 2017特邀报告:细胞组织的高分辨率电镜样品制备技术与展望
    p style="text-align: center "strong第三届电镜网络会议(iCEM 2017)特邀报告/strong/pp style="text-align: center "strong细胞组织的高分辨率电镜样品制备技术与展望/strong/pp style="text-align: center "strongimg width="250" height="316" title="hewanzhong.jpg" style="width: 250px height: 316px " src="http://img1.17img.cn/17img/images/201705/insimg/ea81f7ae-3201-4741-9132-f2436adedaad.jpg" border="0" vspace="0" hspace="0"//strong/pp style="text-align: center "strong何万中 研究员/strong/pp style="text-align: center "strong北京生命科学研究所/strong/ppstrong  报告摘要:/strong/pp  近年来冷冻电镜技术的突破性进展,体外蛋白的冷冻单颗粒分析技术已经益日普及成为原子级分辨率结构解析的常规工具之一。然而,细胞组织原位高分辨率电镜分析,则是生物电镜领域下一个等待开发的宝库及新生长点。实现原位高分辨率结构分析、蛋白质分子的功能定位及时空相互关系, 必将极大地拓展我们在超微-分子水平对生物医学问题的认识。本报告将主要介绍我们自己在近20年在细胞组织高分辨率电镜样品制作的经验与技术开拓,涉及分子水平的细胞组织高压冷冻制样技术及冷冻替代固定技术、高导热率样品盘设计与应用实例、大块组织样品的高分辨率样品制作、冰冻切片技术、超快脱水固定技术、细胞电子断层成像技术及实例、新型可克隆电镜标记技术等,同时展望今后相关技术发展的趋势及潜力。/ppstrong  报告人简介:/strong/pp  何万中,北京生命科学研究所研究员,博士生导师,北京市“海外高层次人才计划”(“海聚工程”)入选者, “北京市特聘专家”。2007-2010年 新加坡国立大学生物科学系助理教授。2004-2007年,加州理工学院生物分部博士后; 1999-2004年,纽约大学分子生物医学研究所博士后;1998-1999年 西班牙国家生物技术中心博士后。1998年,中科院物理研究所凝聚态物理学(电子显微学方向)博士; 1994年,中国地质大学(北京)矿物学硕士;1991年,成都理工大学地质学学士。长期从事电子显微学及图像处理、细胞电子断层成像技术、高压冷冻及冷冻替代固定技术、低温切片技术,及近年来在新型可克隆电镜标记技术开拓。主持过两项新加坡BMRC科研项目,及两项科技部“973国家重点基础研究发展计划”项目中担任课题组长。现任中国电子显微镜学会理事,中国物理学会冷冻电镜分会理事,北京生物工程学会理事。/pp  strong报告时间:2017年6月23日上午/strong/pp strong 立即免费报名:a title="" href="http://www.instrument.com.cn/webinar/meetings/iCEM2017/" target="_blank"http://www.instrument.com.cn/webinar/meetings/iCEM2017//a/strongbr//pp style="text-align: center " a title="" href="http://www.instrument.com.cn/webinar/meetings/iCEM2017/" target="_self"img title="点击免费报名参会.jpg" src="http://img1.17img.cn/17img/images/201705/insimg/c9793b9d-a3ec-4cb2-a453-330b3d0cbf03.jpg"//a/p
  • 安捷伦和 Akoya Biosciences 宣布合作推动生物制药应用的多重组织检测开发
    安捷伦科技公司(纽约证券交易所代码:A)今天宣布与空间生物学公司 Akoya Biosciences, Inc.(纳斯达克股票代码:AKYA)建立合作伙伴关系,开发用于组织分析的多重免疫组织化学诊断解决方案,并将临床研究市场中多重检测的工作流程解决方案商业化。集成安捷伦的 Dako Omnis(自动染色仪器)和 Akoya 的 PhenoImager HT(成像平台)进行多重显色免疫组织化学 (mIHC) 和免疫荧光 (mIF) 检测,将创建一个单一的端到端商业工作流程,包括试剂、染色、成像和分析。安捷伦和 Akoya 将合作开发显色和免疫荧光多重检测,其中包括为开发精准癌症疗法的生物制药公司提供空间分析。这些检测解决方案将使研究人员和医疗专业人员能够满足患者对新疗法的选择需求,并将他们的发现迅速转化为临床试验。使用多重成像的空间表型分析提供了单细胞分析的优势,同时保留了细胞之间的空间关系。这为揭示肿瘤微环境中细胞组织和治疗反应的新见解提供了宝贵的工具。该协议将为数字病理学支持的生物标志物临床研究提供端到端的多重解决方案,为整个制药价值链提供功能。结合安捷伦的伴随诊断和 IHC 工作流程专业知识、Dako Omnis 奥秘一代仪器的庞大安装基础以及强大的制药合作伙伴网络 凭借 Akoya 的成像仪安装基础、空间分析专业知识和 CLIA 实验室功能,将进一步使生物制药合作伙伴能够利用这种集成的工作流程解决方案来满足其生物标志物发现和验证需求,从而帮助推动更好的患者分层。根据单独的增值经销商协议,Akoya Biosciences将分销和转售Dako Omnis,作为端到端多路复用解决方案的一部分。安捷伦诊断和基因组学事业部总裁 Sam Raha 表示:“我们很高兴与 Akoya 合作,为多重显色和免疫荧光组织检测创造行业领先的产品和服务。Raha补充说:“这种伙伴关系使生态系统能够协助开发新型精准癌症疗法,并为我们在临床研究市场的共同客户提供简化的工作流程,以满足未来临床诊断的需求。“多重组织分析有可能改变癌症治疗领域,并开创精准病理学的新时代,”Akoya Biosciences首席执行官Brian McKelligon说。“这种伙伴关系以及两个组织的联合实力将促进多重组织生物标志物的开发和部署,使我们的生物制药和CRO合作伙伴受益,并最终使患者受益。
  • 技术分享 | 洞悉真正的3D细胞培养-Molecular Devices
    洞悉真正的3D细胞培养开发更复杂、生物学相关和预测基于细胞的化合物筛选方法是药物发现的主要挑战。三维(3D)分析模型的集成正越来越广泛地应用于驱动转化生物学。具体来说,3D培养提供了紧密概括人体组织各方面的优势,包括结构、细胞组织、细胞-细胞和细胞-基质相互作用,以及更多生理相关的扩散特性。 三维(3D)细胞培养作为一种更好地模拟体内生理的系统,已经有了显著的发展。今天3D细胞培养正在兴起,不仅作为早期药物发现的新工具,而且作为治疗疾病的潜在疗法。共聚焦成像和三维分析可以定量表征复杂的表型效应。我们展示了如何成功地将三维模型用于毒性评估、疾病建模和化合物筛选。ImageXpress Micro共聚焦高内涵成像分析系统和 MetaXpress软件中的3D分析工具满足了这些挑战,能够在单一界面内对3D细胞模型进行高内涵检测,减少开发时间。这本电子书突出了三维细胞培养成像和分析的优势,包括一些三维细胞模型的应用程序,以及优化您的三维分析工作流程的技巧和方法。下载全文请联系美谷分子仪器
  • Cancer Cell | 单细胞图谱揭开非小细胞肺癌肿瘤分类新标准
    免疫治疗是非小细胞肺癌(Non-small cell lung cancer,NSCLC)的主要治疗方法之一。虽然肿瘤突变负荷(Tumor mutational burden,TMB)与免疫治疗的响应应答相关,但是免疫应答与肿瘤基因型之间的关系还知之甚少。2021年11月11日,美国西奈山伊坎医学院Miriam Merad研究组与Ephraim Kenigsberg研究组合作发文题为Single-cell analysis of human non-small cell lung cancer lesions refines tumor classification and patient stratification,通过建立病人非小细胞肺癌中肿瘤细胞的scRNA-seq以及CITE-seq分析,确定了肿瘤突变负荷以及TP53突变的情况,从而构建了NSCLC肿瘤的细化分类以及患者分层,为免疫疗法的响应提供了新的数据库参考。为了对肿瘤微环境中的免疫细胞的转录状态进行检测,作者们对未进行治疗的、早期的NSCLC患者体内的肿瘤进行切除并对细胞进行分析(图1)。作者们通过CITE-seq(Cellular Indexing of Transcriptomes and Epitopes by Sequencing)、scRNA-seq以及TCR-seq(T cell receptor sequencing)整合免疫细胞表面标记的抗体分析生成了三个数据库。作者们对8名患者的肿瘤和非肺部组织进行了CITE-seq,对另外27名患者进行了scRNA-seq。CITE-seq中采用了15个用于注释细胞类型的抗体,并最终扩展到81个抗体进行更具体的研究。除此之外,作者们的还对三名患者进行了scRNA-seq/TCR-seq的联合分析。图1 对病人NSCLC肿瘤组织的CITE-seq、scRNA-seq以及TCR-seq分析总的来说,来自35个肿瘤和29个相匹配的非肺部样本中的361,929个单细胞被分为30个注释的转录状态细胞群。基于RNA的聚类分析,作者们共鉴定除了49个免疫细胞群体,包括T细胞、B细胞、浆细胞、肥大细胞、浆细胞样树突状细胞以及单核吞噬细胞等。CITE-seq数据使用成熟的蛋白质细胞标记物进一步确认了细胞身份。为了确定组织取样是否会导致分析结果的差异,作者们对8名患者的每个肿瘤的三个不同区域进行了取样对比分析。作者们发现免疫细胞表型的差异主要是由肿瘤之间的差异而非区域取样差异造成的。因此,肿瘤微环境中的特征稳健且可重复,促使作者们进一步分析其中转录状态的差异与肿瘤分型之间的关系。通过对肿瘤的scRNA-seq以及CITE-seq分析,作者们发现肿瘤中树突细胞(Dendritic cells,DC)组分主要包括cDC1、cDC2、富含调控因子的成熟mregDC以及DC3类型(图2)。其中DC3是肿瘤中最普遍存在的DC亚型,并且在肿瘤中数量会增加,而mregDC是最为罕见的类型。先前的研究表明mregDC的激活对于诱导肿瘤定向T细胞应答至关重要,因此作者们想对单个载玻片上的肿瘤样品进行连续免疫组化染色,研究检测mregDC在肿瘤中的分布【1】。作者们发现在靠近T细胞的三级淋巴结构区域(Tertiary lymphoid structures,TLS)存在MYH11+滤泡树突状细胞的聚集。TLS结构的形成有助于患者接受免疫疗法以及预后【2,3】。通过对DC3细胞类型的分析,作者们发现DC3的特征介于单核细胞样细胞和cDC2样细胞之间。另外,通过基因表达的差异分析作者们鉴定发现一个DC模块基因mod28富集表达在肿瘤病灶区域,其中包括CD1A以及CD207基因表达,这些基因标记出LCH(Langerhans cell histiocytosis)朗格汉斯细胞组织细胞增生症细胞,因此作者们又将该细胞群的分类名称为LCH-like细胞。随后作者们对NSCLC中的T细胞进行了细致分类。CITE-seq对T细胞的分析鉴定发现CD8+细胞具有自然杀伤细胞样(Natural killer-like)特征,另外也有多种因子表达的激活型T细胞等。除此之外,通过对病人体内的NSCLC肿瘤进行配对的scRNA-seq/TCR-seq分析,作者们发现激活型T细胞是肿瘤中存在最多的类群,而且与非肺部组织相比肿瘤内包含多种类型的T细胞,比如激活型T细胞、周期型T细胞以及调节型T细胞等。作者们对的肿瘤中免疫细胞的数量进行分析后发现,B细胞和浆细胞的数量在肿瘤中都出现了显著的升高,但是B细胞与浆细胞之间的比例相对来说是比较稳定的。为了建立起细胞表型驱动病人多样性的关联,作者们希望对细胞类型出现频率进行归一化分析。通过该分析,作者们发现激活型T细胞、IgG+浆细胞以及MoMΦ-II细胞对于肺癌的出现具有很高的相关性。因此,作者们将该细胞组成称为肺癌激活模块(Lung cancer activation module,LCAM)。作者们可以根据肿瘤免疫微环境中存在的免疫细胞的类型对病人进行分型,与已有的聚类方法Seurat【4】相比LCAM分型方法具有很高的准确性和稳健性,对其他独立于本工作的数据库【5】进行测试也可以确认该LCAM分类方法具有很高的可重复性。作者们发现LCAM评分与病人吸烟的情况具有相关性,该细胞模块的表达是对突变和异位表达的肿瘤抗原的适应性反映的标志。而且,LCAM与TP53突变负担也存在相关性,TP53突变的肿瘤与TP53野生型的肿瘤相比,LCAM评分更高。而且TP53的突变与肿瘤突变负担也存在相关性。为了鉴定这些发现在其他肿瘤中是否具有普适性,作者们在肺鳞状细胞癌中也进行了相似的分析,发现肺鳞状细胞癌中也表现出较高的LCAM评分水平。因此,LCAM与肿瘤突变负担相关,可能可以作为特异性免疫检查点阻断反应的非冗余生物标志物。 工作模型总的来说,该工作通过对35个NSCLC病人中相匹配的肺部肿瘤与非肺部组织的scRNA-seq、CITE-seq以及TCR-seq,构建了迄今为止最大的早期肺癌免疫反应细胞图谱,并通过对其中免疫细胞类型的分析建立了对NSCLC肿瘤进行详细分型的LCAM模块,LCAM评分较高说明患者正在经历一个更有力的抗原特异性抗肿瘤适应性免疫应答过程,同时说明LCAM可以作为更直接的衡量抗原特异性抗肿瘤免疫激活的指标。原文链接:https://doi.org/10.1016/j.ccell.2021.10.009
  • 江苏首家新生细胞抗衰实验室揭牌 新生细胞抗衰术全球首发
    7月15日上午,南京医科大学友谊整形外科医院新生细胞抗衰实验室揭牌暨新生细胞抗衰术全球首发仪式在该院举行。标志着中国的抗衰老领域有了第一家高规格的专业机构,结束了以往医学抗衰老领域无专业的学术研究机构的局面,同时也奠定了新生细胞抗衰实验室在医学抗衰老领域的领先地位。  新生细胞抗衰术全球首发  备受关注的“新生细胞抗衰术”,作为目前世界最前沿的医学抗衰科技,在此次新闻发布会上首次公布。  据了解,新生细胞抗衰术,是将健康、亚健康、疾病,医学美学的预测、预防、评估、维养、纠正、治疗和恢复与各种个性化机体表征数据与抗衰老管理指征结合起来,通过“细胞新生医学技术”进行新生细胞的注入,促进细胞维养再生,恢复细胞活性,重现生命活力,恢复年轻面容,恢复身体器官机能。  高端求美者踊跃参与  据悉,“新生细胞抗衰术”采用国际最高端抗衰老医学系统检测,根据个人体质提取最优的新生细胞,经国家级实验室高科技手段纯化、分离、萃取后注射“新生细胞”、“新生细胞活性因子”、“再生修复活性成长因子”以及高纯度细胞营养液到人体内,修复、激活老化受损细胞的同时不断补充新生正常细胞的数量,从而达到增强细胞组织活性,重建肌肤纤维结构,重现青春容光的神奇功效,被高端求美者视为“不老仙药”。
  • BINDER培养箱个性化解决方案 成功繁殖人体皮肤细胞
    在生物医学研究和应用中,再生技术属于最具创新性、最有希望的未来领域。再生医学的治疗方法,在于重建、替换有功能障碍的细胞、组织和器官,例如借助经过培育的组织及刺激身体本身的再生和修复过程。洛桑大学医院细胞组织部专门从事实验室环境中的人体皮肤培植工作。培养细胞组织时,首先要从患者身上提取皮肤,放入实验室繁殖,然后再植入患者体内。对于遭受大面积烧伤的患者而言,这项新的治疗模式具有开创性的意义,因为传统的移植过程会形成严重的疤痕,给患者留下终身的印记。  然而迄今为止,人体皮肤的生产成本很高,还必须满足最为严苛的安全要求。皮肤培植过程必须在安全等级最高的 A 级无尘室内进行。只有经过隔离室,工作人员才能进入培养箱所在的无尘室,还必须事先经过长达 30 分钟甚至更长时间的清洁程序。在无尘室内的实际停留时间最长为四个小时,否则可能使试样受到污染。这项程序所花费的不仅是时间,还有高额的成本。  由于人造皮肤的需求量极高,在瑞士一家大学附属医院的提议下,于2009年启动了一个大型项目,旨在大幅提升人体皮肤培植过程的效率。这个想法的基础,在于把无尘室环境限制在隔离装置(手套箱)内,并将培养箱的孵化室作为独立单元集成于隔离装置中。这带来了极大的优势,因为隔离装置的环境只需达到 4 级无尘室标准即可,工作人员不必再经过繁杂的清洁过程。实验室工作人员可以在无尘室中停留八个小时,远高于以往的四个小时,不仅使得这一过程更为高效,而且成本更低。于是就建立了一处人体皮肤培植中心,其中配置有五个隔离装置和五个培养箱。  这一规模宏大建设项目由希森美康公司设计和实施。该公司负责项目的组织工作,协调和掌控所有十家项目合作方的各种任务。BINDER的任务是针对该项目调整 CB 160 培养箱。整个设计阶段的工作极为复杂:采用带有热消毒传感器的 BIN-DER CB 160 气体培养箱作为核心部件。培养箱的不锈钢腔也作为无尘室的组成部分集成里面。实验员将试样从 D级无尘室实验室送入隔离区域(隔离室)。净化隔离室内的空气:抽排空气颗粒,使该区域从 D级升至 A 级。然后,放置试样的滑座将再穿过一个隔离室,进入模块中固定安装有培养箱的 A级无尘室中。通过无尘室外的操作面板,可对该设备进行控制。借助手套接入孔,实验员可将试样放入培养箱内。  任务设置 ● 集成培养箱的隔离装置 ● 安全而高效地培育细胞组织 ● 节省时间和费用 ● 可靠的消毒措施 ● 均匀的温度分布 ● 简便的操作  BINDER 解决方案 ● 根据要求调整 CB 160 培养箱 ● 热消毒传感器 ● 气密型培养箱 ● 带操纵杆的推拉门 ● 可拉出的带不锈钢钩子的托盘 ● 特别开发的托架 ● 一目了然的操作面板 ● APT.Line 空气护罩系统 ● 180° C 热风消毒 带集成培养箱的隔离装置模块  废料容器也集成在无尘室内。由于可能造成污染,当培养箱打开时,绝不能打开废料容器。所以培养箱上配有传感器,可识别废料容器是否打开。此外,集成培养箱的无尘室必须完全密封。“将在无尘室内进行超压测试,检测其密封性, ”BINDER有限责任公司的 Bernd Hofmann 表示。“压力下降的情况必须出现在规定的时间范围内。迄今为止,整个欧洲都采用这项安全方案。”经过调整的 CB 160 培养箱  传感器具有冗余功能。每台培养箱配有两个传感器,用于检测温度、二氧化碳和氧气,在紧急情况下会发出警报。即便如此,还是对 CB 160进行了重大调整。为避免污染,培养箱完全密闭。为节约无尘室内的空间,将以往的平开门改为了推拉门,还专门为此开发了操纵杆。操纵杆可以转动,以避免妨碍实验员使用手套进行工作。  培养箱还配有三个可以拉出的托盘。滚珠轴承不适合无尘室,因而采用了不锈钢钩子固定托盘的特殊设计。从而保证试样不滑落,并为托盘提供稳固支撑。由于存在露水凝结的危险,也撤除了培养箱的玻璃门。培养箱位于专门开发的台架上,安装于隔离装置中,高度可调。为简化操作,全套电气装备被布置于设备下方。
  • 神奇的“万-能细胞”——干细胞
    人体内有各种各样各司其职的细胞,白细胞、淋巴细胞保护我们免受细菌及病毒的侵害,红细胞携带氧气,血小板可以凝血… … 除了这些,人体内还有一种细胞功能更复杂,那就是有“万-能细胞”之称的干细胞。要知道,人体内的细胞都是有寿命的,例如红细胞一般有120天左右的寿命,120天后全新的红细胞就会代替那些老去的红细胞。那么,新的红细胞从何而来?其实,新的红细胞就是由干细胞中的造血干细胞分化而来。这就不得不提干细胞的五个特征:一是自我更新,指细胞分裂增殖的过程,产生的子代细胞仍维持亲代细胞的原始特性,比如,肝移植供者切除3/4的肝脏,可以在两周内完全恢复成原样。二是克隆源性,即单个细胞具有创造更多相同细胞的能力,一个细胞能复制成两个完全一样的细胞。三是高度分化潜能,即能向不同的组织分化。例如我们临床上已经成熟应用的白血病治疗方法——造血干细胞移植,其实就是利用了造血干细胞的分化功能,相当于更换了正常的干细胞。四是可塑性,指干细胞具有分化为其他类型组织细胞的能力。例如骨髓造血干细胞可以在适合的环境下分化为和脑组织的神经同类型的神经细胞。五是生物学特征,干细胞要想维持自我更新和分化的特性,需要特定的干细胞微环境,在不同的微环境中,干细胞可以发挥不同的能力。干细胞还是个大家族,根据不同的标准,可有多种分类。例如,根据来源不同,干细胞可分为胚胎干细胞和成体干细胞两大类。胚胎干细胞主要来自囊胚的内细胞团,是一种高度未分化细胞;成体干细胞是对胎儿、儿童和成人组织中存在的多潜能干细胞的统称。相比于胚胎干细胞,成体干细胞来源较广,相对容易获取,并且源于患者自身的成体干细胞在应用时不存在组织相容性的问题,可避免移植排异反应和使用免疫抑制剂。按照发育潜能,干细胞又可分为全能干细胞、多能干细胞、单能干细胞三大类。全能干细胞是指能够发育成具有各种组织器官的完整个体潜能的细胞,如受精卵;多能干细胞虽然能分化出多种细胞组织,但并不能发育成完整的个体,如胚胎干细胞;单能干细胞是指只能向单一方向分化、产生一种或几种密切相关类型的细胞,如造血干细胞、神经干细胞、心脏干细胞等。当前,干细胞研究已经成为医学领域和生物医学领域的热点之一。经过多年的研究积累,我国在干细胞研究领域也已取得了诸多成就,如利用干细胞开展脊髓损伤修复已初见成效。相信不久的将来,随着干细胞理论的日臻完善和干细胞技术的不断发展,“万能细胞”将为人类健康做出更多贡献。
  • 干货 ∣ 3D细胞球技术了解一下
    建立生理相关的体外模型对于进一步了解神经疾病的机制以及靶向药物开发至关重要。iPSC衍生的神经元显示出对化合物筛选和疾病建模的巨大希望,然而目前已经开发出使用三维(3D)培养物作为对神经元细胞的测定开发的有效方法。3D细胞培养被认为是更接近人类组织的重演方式,包括结构、细胞组织、细胞- 细胞和细胞- 基质相互作用等领域。 3D 细胞培养模式较传统的单层细胞培养模式能够更加真实地反应出细胞相互作用和化合物筛选过程中其生理变化的过程。采用手动操作进行相应检测分析会复杂而繁琐,而且随着样品量增加变得越来越困难。自动化系统能够以更加精准、更高通量的方式进行3D 细胞成像分析,ImageXpressMicro Confocal共聚焦高内涵成像分析系统将会成为您的得力研究助手。 目前,比较常见的的两种3D细胞球培养模式包括3DProSeedTM水凝胶和微流控OrganoPlate平台培养系统。水凝胶通过掺入MMP切割位点来帮助细胞迁移,并包含RGD细胞粘连基序以支撑细胞的粘附作用。这种水凝胶预制板使用方法简便,同时能很好地兼容自动化设备(图1)。OrganoPlate是一个高通量平台,结合了最新的3D细胞培养技术、Phaseguides™ 和微流体技术,它包含96个适合长期培养活细胞的组织芯片,适用于筛选目的,并且与标准实验室设备或自动化系统兼容,如ImageXpressMicro Confocal共聚焦高内涵成像分析系统(图2)。图1:图解3DProSeedTMsurface工作原理以及在模具中培养神经元细胞的过程图2:OrganoPlate中培养的神经元细胞。在充满基质胶的OrganoPlate培养槽内对接种的iCell神经元细胞进行透射光成像。细胞以每芯片30,000个细胞的密度培养72h,然后用20X平场荧光物镜进行透射光成像。 更多实验内容请扫描下面二维码获取。
  • 第二届中国干细胞学会年会日程安排
    大会主要内容及日程安排 日期:11月10日(星期四) 地点:北京国际会议中心时间 演讲人机构地点 08:00- 17:00参会代表报到 3 楼大堂15:00- 18:00张贴墙报 墙报展示区 大会主题报告 主席:李凌松14:00-14:15李凌松致欢迎词裴刚会议祝词徐国彤学会工作总结与展望 14:20-14:45Hans Keirstead 美国加州大学 14:45-15:10李凌衡美国斯托瓦斯研究所 15:10-15:35徐国良中国科学院上海生化与细胞研究所 15:35-16:00程临钊美国Johns Hopkins医学院 16:00-16:25丁胜美国UCSF 16:25-16:30大会休息大会报告:胚胎干细胞-iPS细胞特性 主席:周琪 裴端卿16:30-16:50周琪中国科学院动物所 16:50-17:10裴端卿广州生物医药与健康研究院 17:10-17:30高绍荣 北京生命科学研究所 17:30-17:50邓宏魁 北京大学生命科学院 17:50-18:10金颖 中国科学院上海健康科学研究所 18:10-18:30肖磊 浙江大学动物科技学院 19:00大会全体报告人晚宴:万龙州海鲜酒楼幸福厅(北四环东路中国五矿大厦一楼电话64989898) 日期:11月11日(星期五) 地点:北京国际会议中心时间 演讲人机构地点 大会报告:干细胞与生殖医学 主席:乔杰 姚元庆9:00-9:20宋尔卫 中山大学附属第二医院 9:20-9:40 乔杰 北京大学生殖医学中心 9:40-10:00冯立新 上海交通大学医学院医学研究院 10:00-10:20姚元庆 解放军301医院妇产科 10:20-10:30 大会休息10:30-10:50卞修武 第二军医大学病理学研究所 10:50-11:10刘厚奇 第二军医大学 11:10-11:30洪登礼 上海交通大学医学院 11:30-11:50刘林 南开大学生命科学院 11:50-12:10黄建 浙江大学医学院 大会报告:成体干细胞及分子调控 主席:程涛 时玉舫13:30-13:50汤其群 复旦大学医学院 13:50-14:10时玉舫 中国科学院上海健康所 14:10-14:30程涛 中国医学科学院血液病研究所 14:30-14:50项鹏 中山大学干细胞与组织工程中心 14:50-15:10赵春华 中国医学科学院基础医学研究所 15:10-15:20 大会休息 大会报告:干细胞分化与疾病 主席:徐国彤 安松柱15:20-15:40徐国彤 同济大学医学院 15:40-16:00刘祖国 厦门大学医学院 16:00-16:20洪天配 北京大学第三医院内分泌科 16:20-16:40马跃 中国科学院生物物理所 16:40-17:00王媛 上海华东师范大学 17:00-17:20安松柱 广州源生医药公司 17:20-17:40机动安排会后全体参会人员自助餐宴会,时间待通知 日期:11月12日(星期六) 地点:北京国际会议中心时间演讲人机构地点大会报告:干细胞组织工程与疾病模型 主席:裴雪涛 曾凡一9:00-9:20戴建武 中国科学院遗传发育所 9:20-9:40裴雪涛 军事医学科学院 9:40-10:00曾凡一 上海交通大学医学院 10:00-10:20季维智 中国科学院昆明研究所 10:20-10:30 大会休息大会报告:干细胞与表观遗传调控 主席:朱大海 陈德桂10:30-10:50孙毅 同济大学生命科学与技术学院 10:50-11:10朱大海 中国协和医科大学 11:10-11:30陈德桂 中科院上海生化与细胞生物学研究所 11:30-11:50林戈 中南大学湘雅医学院生殖与干细胞研究所 11:50-12:10康九红 同济大学生命科学与技术学院 大会报告:干细胞组织工程与骨、软骨疾病 主席:敖英芳 卫小春13:30-13:50敖英方 北京大学第三医院 13:50-14:10卫小春 山西医科大学第二附属医院 14:10-14:30欧阳宏伟浙江大学医学院 14:30-14:50张智勇 第四军医大学 14:50-15:10大会休息 大会报告:神经干细胞与神经疾病 主席:李华顺 王金环15:10-15:20朱剑虹复旦大学华山医院神经外科 15:20-15:40景乃禾中国科学院上海生化细胞研究所 15:40-16:00王任直协和医院神经外科 16:00-16:20徐荣祥 北京军区总医院神经外科 16:20-16:40章小青 同济大学医学院 16:40-17:00李华顺 四川大学发育干细胞研究所 17:00-17:20机动安排
  • 开创微流控细胞分析新领域,为生命科学研究提供新工具——访BCEIA2021微流控细胞分析学术研讨会发起人林金明教授
    第十九届北京分析测试学术报告会暨展览会(以下简称BCEIA)将于2021年9月27-29日在北京• 中国国际展览中心(天竺新馆)召开。秉承“分析科学 创造未来”的愿景,面向世界科技前沿,面向经济社会发展主战场,面向国家重大需求,每届BCEIA的学术报告会都会邀请诸多知名科学家到会交流分析科学最新研究成果。近期,中国分析测试协会联合仪器信息网特别组织了BCEIA2021系列专访,邀约参与学术报告会组织和筹备的各领域专家,解读会议主题,分享学科发展趋势与仪器创新研究方向等,以飨读者。清华大学化学系林金明教授作为本届微流控细胞分析学术研讨会的发起人,将为广大参会观众带来一场学术技术交流的盛宴。借此机会,我们采访了林金明教授,请他谈谈对微流控技术成果进展与未来热点展望。微流控细胞分析技术正处“萌芽”阶段自1985年以来,BCEIA学术报告会已经连续举办了18届,吸引众多海内外知名分析科学家参会交流。三十多年以来,BCEIA对我国科学发展与进步起到了不可估量的作用。不仅成就了国产科学仪器的研发与使用,也培养了大批分析测试人才。据林金明教授介绍,今年微流控细胞分析学术研讨会将邀请多名业内资深专家学者,报告主题内容集中在细胞生物学与微流控技术,包括肿瘤细胞、干细胞等细胞生物学研究领域,微流控芯片技术研究进展和微流控技术应用与细胞分析领域,多维度分享技术进展,也为处于萌芽阶段的微流控细胞分析技术的发展奠定基础。应用于生命科学研究的光谱、电化学、色谱、质谱等技术已经发展近百年,但这些手段大部分针对的是元素、分子甚至蛋白质、核酸等的研究。对于模拟人体组织器官真实的微环境进行细胞分析研究时,这些手段就会略显不足。在模拟人体组织微环境时必然涉及到细胞、体液等流体介质,那么微流控细胞分析技术作为一个交叉学科技术显得尤为重要。微流体本身涉及力学、流体力学、材料的设计、芯片的研发制造等,最后还要实现自动化控制等方方面面。此外,细胞组织研究涉及细胞生物学、化学等基础科学。要真正实现细胞分析与微流控技术二者的结合以及更好的应用,需要通过各个领域专家的交流,齐心协力才能推动微流体用于细胞研究的进一步发展。微流控细胞分析技术主要实现了在细胞、组织应用方面仪器小型化,这不仅要求芯片尺寸与细胞高度吻合,也要求材料和细胞生物性高度相容,发展空间十分广阔。林金明教授表示:“微流控芯片一定会在用于细胞分析的小型化仪器上发挥重大作用,如果我们现在不好好去做,未来有可能陷入‘卡脖子’的状态。未来,在超微量流体的流动性、稳定性、操控性以及超微量流体物质的检测技术手段等方面,都需要强有力的创新科技实力,才能避免受制于人。”“第四代色质谱联用技术”实现“Lab on a Chip”谈及成果转化,林金明教授表示目前主要集中于微流控芯片的通道数、培养腔以及控制部位的研究。不同于一百多年来全球科学家传承使用的培养皿细胞培养方法,林金明教授使用微流控技术,将细胞培养集成在一个小小“芯片”上,实现了6通道细胞封闭培养,外部连接控温与二氧化碳气体装置,真正实现细胞培养的功能。这样做的好处是与传统细胞培养相比,过程试剂加样量大大减少;同时,大大降低了对空间洁净度的高要求。目前该成果已经成功实现产业化,并与色谱、质谱联用进行细胞分析,可以称作第四代色质谱联用技术。(第一代:气相色谱质谱联用——小分子、挥发性物质分析;第二代:液相色谱质谱联用——大分子、不易挥发物质分析;第三代:毛细管电泳色谱质谱联用——蛋白质、核酸分析)。此外,林金明教授表示近期在从事细菌领域的微流控技术应用研究,主要集中于食品领域中常见的致病细菌如大肠杆菌、沙门氏菌、金黄色葡萄菌等的分选,目前该工作已经得到了广东省科技厅的支持,正在与深圳一家企业合作进行成果转化。他表示,十分愿意与各类有应用需求的企业以及政府持续合作,希望为相关领域发展做出相应的贡献。推动微流控芯片技术发展势在必行林金明教授认为,目前微流控细胞分析技术的发展还处于全球范围的摸索阶段,对于未来的发展趋势,他认为在以下两个领域比较重要。第一个领域是利用微流控技术进行细胞共培养的研究。目前,细胞的培养基本都局限于二维空间并且无法进行多细胞培养,而人体组织是由多种细胞组成的,所以多种细胞在微流控芯片上的共培养是非常有发展前景的,或者叫做器官模拟培养。另外,基于此一定要做到自动化组织器官培养,这对于器官组织的认知以及各类机制的发现是至关重要的,从而对新药开发、对疾病机制的研究,以及对疾病的治疗等都很有帮助。第二个领域是活性单细胞的分析,要在外围其他细胞的环境作用中进行单细胞分析。在研究过程中,不仅要提供细胞所需的营养物质,还要提供一些细胞所需要的化学刺激等,这些必然离不开微流控技术。放眼未来,林金明教授认为微流控芯片在上述领域实现应用意义重大,将会对生命科学的研究起到巨大的促进作用,希望20年之后能够成为非常先进且实用的分析技术手段。参加BCEIA展会有助提升学生综合能力谈及对BCEIA的感受,林金明教授回忆,自他从国外回国将近20年的时间,不论作为学者还是作为分论坛筹备人,从未间断参加BCEIA。每两年一届的BCEIA都会涌现大量新技术、新产品,这对中国科学仪器发展起到非常好的推进作用。一方面,展会将国内先进的科学知识与创新仪器技术展示给全球的参会者,体现出国产仪器技术水平的不断提升和进步。另一方面,通过吸引国外先进仪器厂家参与展览最新技术进展,也让我们国产厂商以及研究单位直观了解差距,对整个国产科学仪器技术的提升有很大推进作用。更重要的是,30多年以来,BCEIA对学生的综合教育也起到很好的帮助作用。在参会期间,实验室学生也得到一定程度的锻炼和提高,他们不仅参加光谱、色谱、质谱等各种学术报告会,也同时会参观仪器技术展览。对他们而言,是一个综合的学术交流与知识提高的过程——既可以听到专家们的学术报告,又可以了解仪器展览中一些大型成果转化与合作进展,并且与不同国家的仪器技术专家进行充分交流,了解科学仪器的性能参数、应用领域、开发过程等,全方面锻炼他们的学术交流能力和对科学仪器行业的认知能力。后记:目前,林金明教授在清华大学已经开设了微流控芯片细胞分析课程,将研究内容转化成教科书,传授给学生。他表示,一个仪器技术的发展需要到货架上实践,一个科学理论也需要总结成教科书,通过书本传授给学生。我们不仅要追求科学研究的理论进展,也要追求成果的实际落地与应用转化。希望这些成果与理论知识不仅武装每位科学技术研发工作者,更要武装我们年轻一代的学生,从而为国产科学仪器行业的发展尽一份自己的力量。(采编撰稿:刘立东)
  • 细胞和组织保持其形状的方法!
    细胞和组织保持其形状的方法!百欧博伟生物:长期以来,科学家一直在思考身体的组织如何在面对生长,受伤和其他力量时保持僵硬。在一项新研究中,耶鲁大学的研究人员描述了这一神秘过程,这是健康细胞和组织功能的关键。为了探讨这个话题,zishen作者Stefania Nicoli和她的同事Martin Schwarz首先关注人体细胞,特别是控制动物组织刚性的成纤维细胞。他们发现,除了能够正向调节组织硬度的基因外,还有一个微小的RNA网络可以抵消这种僵硬。这些microRNA控制蛋白负责维持组织收缩,粘附和结构。这些基因一起创造了“机械稳态”或平衡,在压力下保持组织稳定性。研究小组在小鼠和斑马鱼的细胞中观察到了同样的现象,表明这种机制在脊椎动物中是常见的,可追溯到数百万年前。这一发现可以提供对纤维化发展的了解 - 可导致疾病的组织增厚和瘢痕形成。Nicoli说:“它可能能够解释早期纤维化疾病,”这是癌症和高血压等疾病的一个因素。“如果你足够早地发现纤维化过程,你可以逆转它。”欢迎访问中国微生物菌种查询网,本站隶属于北京百欧博伟生物技术有限公司,单位现提供微生物菌种及其细胞等相关产品查询、咨询、订购、售后服务!与国内外多家研制单位,生物医药,第三方检测机构,科研院所有着良好稳定的长期合作关系!欢迎广大客户来询!
  • 高内涵——自动化智能化的上皮细胞管腔结构分析方案
    上皮细胞是常见的细胞组织类型之一。最简单的上皮组织结构是一个由单层细胞构成的腔隙,类似管状内腔,细胞朝向管腔的一侧为顶层,远离管腔的一侧为基底层,上皮细胞的这一现象称为细胞极化。尽管多种调控上皮细胞极性的因素已经被发现,但它们在上皮细胞极性建立、极化膜生物合成和组织形成过程中是如何相互协调和整合的尚不清楚,可以明确的是这一机制在生物体发育和疾病过程中扮演了重要角色。MDCK细胞在生长的过程中会发生细胞极化的过程,单层细胞放射状围绕中心腔隙排列,形成特定三维结构,一些极化机制也首先在MDCK细胞模型中得到了印证,因此它是一个很好的研究上皮细胞极化和管腔结构形成的简化系统,目前已广泛应用于相关领域的研究。图1:MDCK细胞管腔结构形成示意图然而由于生长方式的特殊性,同一个视野中的不同管腔结构有可能位于不同的层面上,因此在以往的实验中想要对这样的样本进行高通量成像是一个很大的挑战,往往需要手动对每一个管腔结构进行单独拍摄,并在后期做图像分析,而使用高内涵成像分析技术则将这一繁复的操作过程变得自动化和智能化。Step1.智能预扫使用高内涵的智能预扫功能,可以先在低倍(5×)下对整孔进行全局扫描,拍摄的同时软件根据算法确定视野中每个空腔结构的定位和范围,剔除不含目的结构视野。图2:Optically section in Z → Max. project medial planesStep2.精细层扫然后再自动转换至高倍(20×或63×),分别对含有空腔结构的视野进行高分辨率的精细层扫,以确保位于不同层面的空腔结构都能够获取到图像。图3:Detect polarity orientation → Calculate lumen numberStep3.统计分析最后使用高内涵的分析功能模块对细胞的极性变化和形成的管腔数量直接进行统计分析。图4:Phenotype binning总结图5:细胞极化和管腔数量分析示意图。MDCK细胞团培养24-72h后进行染色,对不同Z轴层面(共8层,每层间隔2μm)成像后采用最大投影模式进行显示和分析,应用机器自学习模块对细胞极化进行自动检测,并在此基础上计算形成的内腔数量。由此可以看出高内涵可以很好的解决上皮细胞3D培养中不规则分散样本的定位成像问题,简化了成像流程,为样本中特殊结构的自动化成像和分析提供了高效的解决方案。点击链接了解更多高内涵仪器相关资料:https://y6n.cn/uSQLG参考文献1. Roman-Fernandez, et al. Complex polarity: building multicellular tissues through apical membrane traffic. Traffic 17, 1244–1261(2016).2. O' Brien, et al. Opinion: building epithelial architecture: insights from three-dimensional culture models. Nat. Rev. Mol. Cell Biol. 3, 531–537 (2002).3. Rodriguez-Boulan, et al. Organization and execution of the epithelial polarity programme. Nat. Rev. Mol. Cell Biol. 15, 225–242(2014).4. álvaro Román-Fernández, et al. The phospholipid PI(3,4)P2 is an apical identity determinant. Nat Commun. 9: 5041(2018).关于珀金埃尔默:珀金埃尔默致力于为创建更健康的世界而持续创新。我们为诊断、生命科学、食品及应用市场推出独特的解决方案,助力科学家、研究人员和临床医生解决最棘手的科学和医疗难题。凭借深厚的市场了解和技术专长,我们助力客户更早地获得更准确的洞见。在全球,我们拥有12500名专业技术人员,服务于150多个国家,时刻专注于帮助客户打造更健康的家庭,改善人类生活质量。2018年,珀金埃尔默年营收达到约28亿美元,为标准普尔500指数中的一员,纽交所上市代号1-877-PKI-NYSE。了解更多有关珀金埃尔默的信息,请访问www.perkinelmer.com.cn
  • 天士力干细胞创新药获批临床!为上海东方医院首个干细胞成药临床试验项目
    同济大学附属东方医院再生医学研究所何志颖研究员表示:项目研究从2018年开始,2021年4月Pre-IND,2024年1月18日IND获批!历时6年艰辛。这是东方医院首个干细胞成药临床试验项目,希望能造福于心衰患者!据报道1月18日,天士力公告其一款创新干细胞药物获得国家药监局批准进入临床试验,主治慢性心力衰竭。公告称,公司收到国家药监局核准签发关于人脐带间充质干细胞注射液(B2278注射液)项目的《药物临床试验批准通知书》,同意开展伴冠状动脉旁路移植术指征的慢性缺血性心肌病导致的慢性心力衰竭的临床试验。人脐带间充质干细胞注射液(B2278注射液)由上海市东方医院(同济大学附属东方医院)研发,2022年8月天士力与东方医院签署《技术转让(合作)合同》受让相关技术及成果,并在全球范围内,优先在中国开展药品注册申报及后续临床试验开发。临床前研究证明,B2278注射液可通过旁分泌作用调控心肌组织微环境,对于缺血性心肌病中的心肌细胞组织损伤有明显抑制作用,增加动物心功能,促进血管再生,减少心肌凋亡。心力衰竭是由于心脏结构和/或功能异常导致心室充盈和/或射血能力受损的一组临床综合征,是大部分心血管疾病发展的最终阶段,随着年龄增长,心衰患病率和发病率均明显增加。目前对于心力衰竭的治疗主要包括药物治疗、血运重建、细胞和基因治疗,其中冠状动脉旁路移植术(CABG)是常用的血运重建治疗方式,《2022年中国心血管外科手术和体外循环数据白皮书》显示,2022年CABG占心外科手术总量21.1%。上述治疗手段可以在一定程度上延缓心力衰竭的进展,但不能使死亡心肌再生。伴随CABG手术的心肌局部注射干细胞有望通过刺激心脏细胞的增殖和分化、抑制心肌细胞损伤及免疫调节等作用,修复心肌细胞使心肌收缩增强从而对心力衰竭发挥治疗作用。目前国际上获批的干细胞品种已达十余种,但是尚无治疗心衰的干细胞产品上市。
  • 天津大学MFCM微流控流式细胞技术进展|针对原生质体样品的分析
    要更好地了解原生质体的表型异质性,需要对许多单个细胞的形态和代谢特征进行全面分析。在单细胞表型分析方面,流式细胞仪已证明其具有高通量定量分析和分离目标生物样品的能力。然而,传统的流式细胞仪体积庞大、复杂且需要高技能的人员。随着微流控技术的发展,微流控已与流式细胞仪相结合(MFCM),实现了强大的单细胞聚焦、检测和分选,已在各种生物应用中得到证明 ,包括单细胞 RT-PCR、干细胞筛选、蛋白质分析等。虽然 MFCM 已被证明是医学诊断和动物细胞研究中单细胞操作和分析的强大工具,但在植物细胞特性方面的类似工作仍然远远落后。天津大学环境科学与工程学院的Xingda Dai等人开发了一种带有荧光传感器的微流控流式细胞仪,为原生质体样品的分析提供了一种简单、直接且具有成本效益的解决方案。原生质体是植物细胞,其中细胞壁已被酶促或机械去除,是生物技术应用(如体细胞杂交和遗传转化)的非常有效的实验模型。原生质体提供了悬浮培养中的多细胞组织和细胞组装体所没有的许多细胞学优势,因此是研究细胞过程(如信号转导、细胞壁再生、压力和激素的作用等)的宝贵实验系统。然而,在细胞壁消化后,产生的原生质体是渗透敏感的、脆弱的结构,需要格外小心以保持其完整性。此外,原生质体的直径通常比哺乳动物细胞大,并且不像动物细胞那样粘附,因此使用流式细胞仪分析原生质体群体需要对仪器配置进行重大更改,并且极难实现稳定的流动。下图就是文章中所用的微流体流式细胞仪。(A) 开发平台示意图;(B) 已开发平台的照片;(C) 单个植物细胞通过通道的延时图像;(D) 单个植物细胞双通道荧光检测的实时响应。首先,基于用二氯二氢荧光素二乙酸酯 (DCFH-DA)染料检测拟南芥叶肉原生质体细胞内活性氧 (ROS) 的变化,研究了 H2O2、温度、紫外线 (UV) 和镉离子等各种外部应激因素对细胞内 ROS 积累的影响。下图显示的是外源 H2O2 介导的拟南芥原生质体 ROS 含量的变化。(A) 原生质体的荧光图像,比例尺为 25 µm;(B-D) 分别在 3、6 和 9 小时后由原生质体中的 H2O2 浓度诱导的荧光强度梯度;(E) H2O2 处理时间对原生质体荧光强度的影响。下图显示的是环境压力下拟南芥原生质体的氧化还原状态。(A) 原生质体在不同温度下的荧光图像,比例尺为 25 µm;(B) 原生质体在不同温度胁迫下的荧光强度;(C) Cd2+处理的原生质体荧光图像,比例尺为25 µm;(D) Cd2+下原生质体的荧光强度;(E) 紫外处理下原生质体的荧光图像, 比例尺为 25 µm (F) 紫外线下原生质体的荧光强度其次,从白色花瓣中分离出的矮牵牛原生质体比从紫色花瓣中分离出的原生质体中观察到更快和更强的氧化爆发,证明了花青素的光保护作用。第三,使用具有不同内源性生长素的突变体,证明了生长素在原代细胞壁再生过程中的有益作用。此外,UV-B 照射通过增加细胞内生长素水平具有类似的加速作用。该研究揭示了以前未被充分认识的原生质体群体中的表型变异性,并证明了微流体流式细胞术在评估单细胞水平的植物代谢和生理指标的体内动态方面的优势。
  • CERO全自动3D细胞培养系统——助力类器官研究的绝佳利器
    尊敬的科研工作者们!你们一定听说过CERO 3D Incubator & Bioreactor这款细胞培养系统吧!它在类器官研究领域具有显著优势,让我们一起来了解一下吧!首先,CERO提供了最佳的细胞培养环境,通过独特的3D细胞培养技术,监测和控制温度、pH和二氧化碳水平,为类器官的生长和发育提供最适宜的条件。其次,CERO能够提高类器官的复杂性和成熟度,模拟更真实的生理结构和功能。这对于研究类器官在特定生理环境下的反应和功能具有重要意义,让我们的研究更加接近真实,更有说服力。再次,CERO减少了对嵌入基质的依赖,提供最大的均匀性和稳定性(如CEROtubes有独特的鳍状设计),使得类器官的培养更加标准化和可重复。这对于研究结果的可靠性和可比较性非常重要,让我们的实验更精准,更可信。最后,CERO适用于各种组织类型的类器官培养,如肝脏、肾脏、肠道、皮肤等,具有广泛的应用价值。无论你是研究肝脏还是皮肤,CERO都能满足你的需求。我们一起了解一下类器官的前世今生类器官的起源——自组织现象:类器官的起源可以追溯到1907年,当时44岁的美国贝克罗莱那大学教授威尔逊 (H. V. Wilson)发现通过机械分离的海绵(sponge)细胞可以重新聚集并自组织成为新的具有正常功能的海绵有机体,他的研究结果于1910年发表。Wilson, H. V. Development of sponges from dissociated tissue cells(1910)我们要知道类器官是由多个不同类型的细胞组成,协同工作以执行特定的功能,类似于真正的器官。它们可以是人工合成的,也可以是通过再生医学技术生长出来的。类器官的来源总结还有如下图六种:Xu et al. Journal of Hematology & Oncology (2018)近年来火热的干细胞研究,主要开始于上世纪末。1987年,A.J. Friedenstein发现间充质干细胞 (Mesenchymal Stem Cell,MSC)。1998年,美国生物学家James Thomson首次分离得到人胚胎干细胞。2007年,Thomson教授成功制造出人诱导多能干细胞 (induced Pluripotent Stem Cells,iPSC).如今,绝大多数类型的非肿瘤来源的人源类器官均可由MSC或iPSC发育而来,干细胞研究的飞速进展为类器官研究带来新的活力。近十余年类器官的发展,如下图类器官发展历程(Claudia Corrò et al. Am J Physiol Cell Physiol, 2020) CERO是如何促进类器官的研究进展的呢?我们这里有几个案例可以给大伙儿一起分享一下吧CERO进行心脏组织模型的研究(心脏类器官的研究案例)干细胞来源的心肌细胞在心血管研究、疾病模型和药物开发等领域受到越来越多的关注。研究方法:使用CERO作为一个完整的工作流平台,让干细胞以均匀的聚集体形式扩增,然后直接诱导成为大量的跳动的心脏体。使用CERO进行多能干细胞的扩增和心肌分化,与传统的轨道振荡器相比,可以提高心肌细胞的质量、均匀性、完整性和产量。研究结果:使用CERO可以实现从干细胞到心肌细胞的高效转化,形成具有生理功能的心脏组织模型,用于各种应用。CERO 3D与轨道振荡器的比较—鼠胚干细胞诱导心肌细胞后的3、8和13天分化研究 这里有一段来自CERO的客户(Jaya Krishnan教授,法兰克福歌德大学心血管再生研究所,Genome Biologics联合创始人)的评价:“我们所有研究的最终目标是识别和开发具有临床相关性的治疗人类心脏病的药物。为此,我们利用人类自组织的心脏类器官进行高通量药物筛选,以及利用体内的人类先天性疾病的遗传模型,作为我们的实验平台,结合腺相关病毒(AAV)和反义RNA作为治疗剂。CERO 3D大大简化了我们的心脏类器官生成的工作流程,并使我们能够显著提高类器官的生产规模。使用CERO 3D生成的类器官显示出更好的细胞组织,以及在生产批次内外的均匀性和一致性。” 不仅如此,CERO还应用于猪的肌源性类器官的研究(该研究于2022年在Cells上发表,影响因子≥4.9)三维细胞培养技术比平面表面更适合模拟体内细胞环境。球体是多细胞聚集体,我们旨在使用中型培养箱和生物反应器混合设备,制备无支架的肌源性起源球体,称为肌球体。首次使用这种技术从原始猪肌细胞(PMC)获得球体,并将其形态学和生长参数、标记物表达和肌源潜能与C2C12来源的球体进行了比较。两种细胞类型都能在生物反应器中在24小时后形成圆形球体。C2C12球体的平均直径(44.6µ m)大于PMC球体(32.7µ m),最大直径超过了1mm。C2C12细胞形成的聚集体较PMC更少,并具有更高的密集度(细胞核/平方毫米)。从球体中分离后,C2C12细胞和PMC开始再次增殖,并能够分化为肌源系谱,通过肌管形成和FActin、Desmin、MyoG和Myosin的表达来证明。在C2C12中,球体中观察到多核合体和Myosin的表达,表明加速了肌源分化。总之,中型培养箱和生物反应器系统适用于从原始肌细胞中形成和培养球体,并保持其肌源潜能。Cells 2022, 11,1453. https://doi.org/10.3390/cells11091453CERO还应用于脑类器官的发育研究:“跨发育过程中从中等到纳米尺度成像三维脑器官结构”并在2022年发表于HUMAN DEVELOPMENT文献索引:Development(2022)149,dev200439.doi:10.1242/dev.200439根据Paş ca等人(2015)的改良方案,使用CERO 3D培养箱-生物反应器的步骤如下:1、iPSCs解离:使用StemProAccutase将iPSCs解离成单细胞悬浮液。2、类器官形成:将1.5×106个iPSCs转移到AggreWell800板中,每个微孔中含有5000个细胞。使用培养基,包括50% DMEM-F12 GlutaMax、50%神经基底培养基。添加以下成分到培养基中:1:100 B-27、1:200 N-2、1:200 MEM-NEAA、1mM L-谷氨酰胺、1:1000 β-巯基乙醇、10μg/ml胰岛素。添加两种SMAD途径抑制剂dorsomorphin(1μM)和SB-431542(10μM),以及ROCK抑制剂Y-27632(10μM)。将具有和不具有霍乱弧菌诱导eGFP构建物的iPSC按10/90的比例混合。在最初的5天里,每天更换不含ROCK抑制剂的培养基。类器官培养:将类器官转移到CEROtubes中,放入旋转的CERO 3D生物反应器。从第5天到第12天,每隔一天喂养类器官。在第12天,改用含有bFGF(10ng/ml)而不是SMAD抑制剂的培养基培养4天。从第16天开始,类器官在未添加补充物的情况下维持,每隔一天更换一次培养基。LSFEM的器官样本准备LSFEM的器官样本准备包括固定、渗透化、免疫染色、嵌入和消化等步骤。通过对样本的处理和扩张,可以实现清晰的成像和超分辨率的分析。(F,G)示例展示了根据II方案(CERO培养制备)的3个月大脑器官样本(F)和根据I方案(6孔板培养制备)的2个月大脑器官样本(G)的光学切片。两者都经过Hoechest和ZO1的染色。综合以上步骤,CERO 3D生物反应器能够在中-纳米级光学分辨率下对整个脑器官体进行缩放,获得关于脑器官体结构和亚细胞细节的全面视图。同时,通过LSFEM的超分辨率成像,可以可视化保留有空间信息的突触,实现对超分辨率下的扩展神经回路的分析。通过LSFM和LSFEM的结合,CERO为成熟的脑类器官的分析提供了一种有效的方法。 总的来说,CERO在类器官研究方面具有多种优势,如提供最佳细胞培养环境、提高类器官成熟度与复杂性、标准化和可重复培养,适用于多种组织类型。类器官的优势在于模拟人体生理状态、提高实验可靠性与准确性,广泛应用于基础研究、药物研发、临床试验和再生医疗。让我们共同努力,将类器官研究推向新的高度!
  • 生物传感器监测植物生长
    日前,德国拜罗伊特大学和图宾根马克斯普朗克发育生物学研究所科学家开发出一种新型传感器,可以实时显示植物细胞中生长素的空间分布,并可快速检测环境变化对植物生长的影响。这种传感器为研究人员打开了观察植物内部运作的全新视角。相关研究成果发表在最近的《自然》杂志上。  无论是种子的胚胎发育、根系生长,还是植物对阳光方向的反应,生长素都具有协调植物对外界刺激反应的功能。为了触发对外部刺激的反应,它必须存在于所需的细胞组织中。迄今为止,人们还无法在细胞分辨率上直接确定生长素的时空分布。  此次,研究人员开发出一种新型基因编码的生物传感器,可将植物体内生长素的分布定量可视化。其特殊之处在于,它是一种植物经改造后可自己产生的人造蛋白质,而不必经由外部引入。他们利用这种传感器实时观察了细胞组织需要生长素的时空间分布动态过程。  在开发这种生物传感器时,研究人员发现大肠杆菌中有一种蛋白质可与两种荧光蛋白偶联,并在这些配对蛋白非常接近时发生荧光共振能量转移(FRET)。这种蛋白可与氨基酸色氨酸结合,但与生长素的结合要差得多。他们希望通过基因改造,使其能更好地与生长素结合,并使其FRET效应只在蛋白质与生长素结合时发生。  研究人员对植物进行了基因改造,使其在某种刺激下可在细胞组织中产生满足这些要求的蛋白质。于是,新型生物传感器诞生了:强烈的荧光信号表明了细胞组织中生长素的位置,提供了细胞内生长素分布的精确“快照”,且不会对生长素控制过程造成永久影响。  “传感器的发展是一个漫长的过程,在这个过程中,我们已经获得了关于蛋白质如何被选择性地改变以结合特定小分子的基本见解。”拜罗伊特大学蛋白质设计学教授比尔特哈克说,“预计在未来几年,新的生物传感器将发现更多关于植物内部运作以及它们对外界刺激反应的新见解。”
  • 中南大学湘雅二医院1534.95万元采购流式细胞仪
    详细信息 中南大学湘雅二医院2024年临床诊断试剂及配套产品第四批入围遴选项目遴选公告 湖南省-长沙市-天心区 状态:公告 更新时间: 2024-01-12 中南大学湘雅二医院2024年临床诊断试剂及配套产品第四批入围遴选项目遴选公告 2024年01月12日 17:43 公告信息: 采购项目名称 中南大学湘雅二医院2024年临床诊断试剂及配套产品第四批入围遴选项目 品目 货物/物资/医药品/诊断用生物制品/诊断用生物试剂盒 采购单位 中南大学湘雅二医院 行政区域 湖南省 公告时间 2024年01月12日 17:43 获取招标文件时间 2024年01月12日至2024年01月26日每日上午:9:00 至 12:00 下午:14:00 至 17:00(北京时间,法定节假日除外) 招标文件售价 ¥400 获取招标文件的地点 华新项目管理集团有限公司(长沙市天心区书院路9号保利国际B3栋1805室) 开标时间 2024年02月02日 09:00 开标地点 华新项目管理集团有限公司(长沙市天心区书院路9号保利国际B3栋1805室) 预算金额 ¥1534.950000万元(人民币) 联系人及联系方式: 项目联系人 罗婷、康心旭、彭晓坤、粟瑀 项目联系电话 0731-85163777 采购单位 中南大学湘雅二医院 采购单位地址 湖南省长沙市人民中路139号 采购单位联系方式 联系方式:黄老师 联系电话:0731-85294138 代理机构名称 华新项目管理集团有限公司 代理机构地址 长沙市天心区书院路9号保利国际B3栋1805室 代理机构联系方式 联系方式:罗婷、康心旭、彭晓坤、粟瑀 联系电话:0731-85163777 附件: 附件1 公告附件-中南大学湘雅二医院2024年临床诊断试剂及配套产品第四批入围遴选项目.docx 项目概况 中南大学湘雅二医院2024年临床诊断试剂及配套产品第四批入围遴选项目 招标项目的潜在投标人应在华新项目管理集团有限公司(长沙市天心区书院路9号保利国际B3栋1805室)获取招标文件,并于2024年02月02日 09点00分(北京时间)前递交投标文件。 一、项目基本情况 项目编号:HXCG-HN-2401016 项目名称:中南大学湘雅二医院2024年临床诊断试剂及配套产品第四批入围遴选项目 预算金额:1534.950000 万元(人民币) 采购需求: 目录序号 目录名称 规格 最高限价 入围家数 预计年使用量(万元) 1 性激素结合球蛋白检测试剂盒(电化学发光法) 各规格 22.4元/人份 1家 78 人生长激素检测试剂盒(电化学发光法) 各规格 17.1元/人份 骨钙素检测试剂盒(电化学发光法) 各规格 23元/人份 总I型胶原氨基端延长肽检测试剂盒(电化学发光法) 各规格 48.4元/人份 -胶原特殊序列检测试剂盒(电化学发光法) 各规格 24.6元/人份 配套产品及限价详见第三章 2 全段甲状旁腺激素测定试剂盒(化学发光法) 各规格 20.7元/人份 1家 922.7 甲状腺过氧化物酶抗体测定试剂盒(化学发光法) 各规格 14.7元/人份 游离三碘甲状腺原氨酸测定试剂盒(直接化学发光法) 各规格 10.1元/人份 三碘甲状腺原氨酸测定试剂盒(直接化学发光法) 各规格 9.5元/人份 游离甲状腺素测定试剂盒(直接化学发光法) 各规格 10.1元/人份 四碘甲状腺原氨酸测定试剂盒(直接化学发光法) 各规格 9.4元/人份 甲状腺球蛋白抗体测定试剂盒(化学发光法) 各规格 16.2元/人份 促甲状腺素测定试剂盒(直接化学发光法) 各规格 9.9元/人份 黄体生成素测定试剂盒(直接化学发光法) 各规格 11.2元/人份 雌二醇测定试剂盒(直接化学发光法) 各规格 11.1元/人份 孕酮测定试剂盒(直接化学发光法) 各规格 12.1元/人份 卵泡刺激素测定试剂盒(直接化学发光法) 各规格 11.2元/人份 睾酮测定试剂盒(化学发光法) 各规格 10.9元/人份 催乳素测定试剂盒(直接化学发光法) 各规格 11.2元/人份 胰岛素测定试剂盒(直接化学发光法) 各规格 16.1元/人份 C-肽测定试剂盒(直接化学发光法) 各规格 16.1元/人份 皮质醇测定试剂盒(直接化学发光免疫分析法) 各规格 19.3元/人份 总维生素D测定试剂盒(化学发光法) 各规格 25.2元/人份 配套产品及限价详见第三章 3 促肾上腺皮质激素测定试剂盒(化学发光法) 各规格 21.6元/人份 1家 88.3 胰岛素样生长因子-I测定试剂盒(化学发光法) 各规格 24.3元/人份 胰岛素样生长因子结合蛋白-3测定试剂盒(化学发光法) 各规格 31.5元/人份 配套产品及限价详见第三章 4 硫酸脱氢表雄酮(DHEA-S)测定试剂盒(化学发光法) 各规格 12.5元/人份 1家 99.2 甲状腺微粒体抗体(TMA)测定试剂盒(化学发光法) 各规格 21.6元/人份 血管紧张素I(Angiotensin I)测定试剂盒(化学发光法) 各规格 10元/人份 血管紧张素II(Angiotensin II)测定试剂盒(化学发光法) 各规格 10元/人份 醛固酮(ALD)测定试剂盒(化学发光法) 各规格 16.2元/人份 血清降钙素(CT)测定试剂盒(化学发光法) 各规格 16.2元/人份 促甲状腺激素受体抗体(TRAb)测定试剂盒(化学发光法) 各规格 17.9元/人份 17 -羟孕酮测定试剂盒(化学发光免疫分析法) 各规格 20.5元/人份 配套产品及限价详见第三章 5 糖化白蛋白测定试剂盒(酶法) 各规格 51.8元/ml 1家 10.1 配套产品及限价详见第三章 6 环孢霉素测定试剂盒(比浊法) 各规格 65元/人份 1 185 普乐可复测定试剂盒(比浊法) 65元/人份 雷帕霉素测定试剂盒(比浊法) 65元/人份 总酶酚酸检测试剂盒(比浊法) 65元/人份 配套产品及限价详见第三章 7 总酶酚酸检测试剂盒(化学发光法) 各规格 92元/人份 1 30 配套产品及限价详见第三章 8 HLA特异性抗体检测试剂盒(流式细胞仪-微珠法) 各规格 128元/人份 1 120 人类白细胞组织相容性抗原 类(HLA-Ⅰ)分型试剂盒(流式细胞仪-微珠法) 480元/人份 人类白细胞组织相容性抗原Ⅱ类(HLA-II)分型试剂盒(流式细胞仪-微珠法) 320元/人份 配套产品及限价详见第三章 注:按目录序号确定入围供应商,各供应商须对目录序号所有产品进行响应,不得拆分,否则将取消其申请资格。 合同履行期限:3年 本项目( 不接受 )联合体投标。 二、申请人的资格要求: 1.满足《中华人民共和国政府采购法》第二十二条规定; 2.落实政府采购政策需满足的资格要求: 按相关政策执行 3.本项目的特定资格要求:1)所投货物若纳入医疗器械管理的,供应商须具有医疗器械生产或经营许可证(或相应的备案凭证),且生产范围或经营范围必须包含体外诊断试剂。2)所投货物如纳入医疗器械管理的,必须具有相应的备案凭证或注册证(如医疗器械备案凭证、医疗器械注册证等);所投试剂必须是符合湖南省医疗服务项目收费目录的医用试剂。3)所投试剂如纳入药品管理的,供应商必须具有相应的生产或经营许可证(如药品生产或经营许可证等),且生产范围或经营范围必须包含体外诊断试剂。4)所投货物如既不属于医疗器械管理也不属于药品管理,需提供相应的分类界定证明。5)试剂接受生产企业(境外产品国内总代理视同为生产企业)或具备有效授权委托书的经营企业参与。同一目录序号下同一生产厂家只能授权一家代理商参加遴选,生产厂家与其授权货物代理商不得同时参与同一目录序号遴选,否则其相应申请均无效。6)供应商对同一目录序号内的试剂只能选择一个品牌进行申报,否则取消该目录序号的入围资格。4、单位负责人为同一人或者存在控股、管理关系的不同单位,不得同时参加同一目录序号的申请。5、与采购人存在利害关系可能影响入围公正性的法人、其他组织或者个人,不得参加申请。6、被“信用中国”网站列入失信被执行人和重大税收违法案件当事人名单的或被“中国政府采购网”网站列入政府采购严重违法失信行为记录名单(处罚期限尚未届满的),不得申请。7、符合法律、行政法规规定的其他条件。 三、获取招标文件 时间:2024年01月12日 至 2024年01月26日,每天上午9:00至12:00,下午14:00至17:00。(北京时间,法定节假日除外) 地点:华新项目管理集团有限公司(长沙市天心区书院路9号保利国际B3栋1805室) 方式:持报名资料到指定地点购买 售价:¥400.0 元,本公告包含的招标文件售价总和 四、提交投标文件截止时间、开标时间和地点 提交投标文件截止时间:2024年02月02日 09点00分(北京时间) 开标时间:2024年02月02日 09点00分(北京时间) 地点:华新项目管理集团有限公司(长沙市天心区书院路9号保利国际B3栋1805室) 五、公告期限 自本公告发布之日起5个工作日。 六、其他补充事宜 1、供应商获取遴选文件时必须提供以下资格证明资料(一式一份,装订成册)(注:报名资料除法定代表人身份证明和授权委托书须提供原件外,其它资料须提交复印件并加盖公司公章): ①法定代表人身份证明、法定代表人委托授权书(附被授权委托人身份证); ②营业执照(具有统一信用代码); ③提供试剂生产厂商信息表(格式见公告附件)(提供纸质版以及电子档,电子档(需提供试剂信息一览表excel格式)请在报名前将此表格发送至邮箱3585232829@qq.com,邮件备注 中南大学湘雅二医院2024年临床诊断试剂及配套产品第四批入围遴选项目 +公司名称报名资料 ); ④本公告供应商资格要求中所规定的证明材料。(具体要求详见公告附件) 本公告同时在中国政府采购网(http://www.ccgp.gov.cn/)、中南大学湘雅二医院(http://www.xyeyy.com/3/29/index.htm)发布,公告附件在中国政府采购网下载。 七、对本次招标提出询问,请按以下方式联系。 1.采购人信息 名 称:中南大学湘雅二医院 地址:湖南省长沙市人民中路139号 联系方式:联系方式:黄老师 联系电话:0731-85294138 2.采购代理机构信息 名 称:华新项目管理集团有限公司 地 址:长沙市天心区书院路9号保利国际B3栋1805室 联系方式:联系方式:罗婷、康心旭、彭晓坤、粟瑀 联系电话:0731-85163777 3.项目联系方式 项目联系人:罗婷、康心旭、彭晓坤、粟瑀 电 话: 0731-85163777 × 扫码打开掌上仪信通App 查看联系方式 基本信息 关键内容:流式细胞仪 开标时间:2024-02-02 09:00 预算金额:1534.95万元 采购单位:中南大学湘雅二医院 采购联系人:点击查看 采购联系方式:点击查看 招标代理机构:华新项目管理集团有限公司 代理联系人:点击查看 代理联系方式:点击查看 详细信息 中南大学湘雅二医院2024年临床诊断试剂及配套产品第四批入围遴选项目遴选公告 湖南省-长沙市-天心区 状态:公告 更新时间: 2024-01-12 中南大学湘雅二医院2024年临床诊断试剂及配套产品第四批入围遴选项目遴选公告 2024年01月12日 17:43 公告信息: 采购项目名称 中南大学湘雅二医院2024年临床诊断试剂及配套产品第四批入围遴选项目 品目 货物/物资/医药品/诊断用生物制品/诊断用生物试剂盒 采购单位 中南大学湘雅二医院 行政区域 湖南省 公告时间 2024年01月12日 17:43 获取招标文件时间 2024年01月12日至2024年01月26日每日上午:9:00 至 12:00 下午:14:00 至 17:00(北京时间,法定节假日除外) 招标文件售价 ¥400 获取招标文件的地点 华新项目管理集团有限公司(长沙市天心区书院路9号保利国际B3栋1805室) 开标时间 2024年02月02日 09:00 开标地点 华新项目管理集团有限公司(长沙市天心区书院路9号保利国际B3栋1805室) 预算金额 ¥1534.950000万元(人民币) 联系人及联系方式: 项目联系人 罗婷、康心旭、彭晓坤、粟瑀 项目联系电话 0731-85163777 采购单位 中南大学湘雅二医院 采购单位地址 湖南省长沙市人民中路139号 采购单位联系方式 联系方式:黄老师 联系电话:0731-85294138 代理机构名称 华新项目管理集团有限公司 代理机构地址 长沙市天心区书院路9号保利国际B3栋1805室 代理机构联系方式 联系方式:罗婷、康心旭、彭晓坤、粟瑀 联系电话:0731-85163777 附件: 附件1 公告附件-中南大学湘雅二医院2024年临床诊断试剂及配套产品第四批入围遴选项目.docx 项目概况 中南大学湘雅二医院2024年临床诊断试剂及配套产品第四批入围遴选项目 招标项目的潜在投标人应在华新项目管理集团有限公司(长沙市天心区书院路9号保利国际B3栋1805室)获取招标文件,并于2024年02月02日 09点00分(北京时间)前递交投标文件。 一、项目基本情况 项目编号:HXCG-HN-2401016 项目名称:中南大学湘雅二医院2024年临床诊断试剂及配套产品第四批入围遴选项目 预算金额:1534.950000 万元(人民币) 采购需求: 目录序号 目录名称 规格 最高限价 入围家数 预计年使用量(万元) 1 性激素结合球蛋白检测试剂盒(电化学发光法) 各规格 22.4元/人份 1家 78 人生长激素检测试剂盒(电化学发光法) 各规格 17.1元/人份 骨钙素检测试剂盒(电化学发光法) 各规格 23元/人份 总I型胶原氨基端延长肽检测试剂盒(电化学发光法) 各规格 48.4元/人份 -胶原特殊序列检测试剂盒(电化学发光法) 各规格 24.6元/人份 配套产品及限价详见第三章 2 全段甲状旁腺激素测定试剂盒(化学发光法) 各规格 20.7元/人份 1家 922.7 甲状腺过氧化物酶抗体测定试剂盒(化学发光法) 各规格 14.7元/人份 游离三碘甲状腺原氨酸测定试剂盒(直接化学发光法) 各规格 10.1元/人份 三碘甲状腺原氨酸测定试剂盒(直接化学发光法) 各规格 9.5元/人份 游离甲状腺素测定试剂盒(直接化学发光法) 各规格 10.1元/人份 四碘甲状腺原氨酸测定试剂盒(直接化学发光法) 各规格 9.4元/人份 甲状腺球蛋白抗体测定试剂盒(化学发光法) 各规格 16.2元/人份 促甲状腺素测定试剂盒(直接化学发光法) 各规格 9.9元/人份 黄体生成素测定试剂盒(直接化学发光法) 各规格 11.2元/人份 雌二醇测定试剂盒(直接化学发光法) 各规格 11.1元/人份 孕酮测定试剂盒(直接化学发光法) 各规格 12.1元/人份 卵泡刺激素测定试剂盒(直接化学发光法) 各规格 11.2元/人份 睾酮测定试剂盒(化学发光法) 各规格 10.9元/人份 催乳素测定试剂盒(直接化学发光法) 各规格 11.2元/人份 胰岛素测定试剂盒(直接化学发光法) 各规格 16.1元/人份 C-肽测定试剂盒(直接化学发光法) 各规格 16.1元/人份 皮质醇测定试剂盒(直接化学发光免疫分析法) 各规格 19.3元/人份 总维生素D测定试剂盒(化学发光法) 各规格 25.2元/人份 配套产品及限价详见第三章 3 促肾上腺皮质激素测定试剂盒(化学发光法) 各规格 21.6元/人份 1家 88.3 胰岛素样生长因子-I测定试剂盒(化学发光法) 各规格 24.3元/人份 胰岛素样生长因子结合蛋白-3测定试剂盒(化学发光法) 各规格 31.5元/人份 配套产品及限价详见第三章 4 硫酸脱氢表雄酮(DHEA-S)测定试剂盒(化学发光法) 各规格 12.5元/人份 1家 99.2 甲状腺微粒体抗体(TMA)测定试剂盒(化学发光法) 各规格 21.6元/人份 血管紧张素I(Angiotensin I)测定试剂盒(化学发光法) 各规格 10元/人份 血管紧张素II(Angiotensin II)测定试剂盒(化学发光法) 各规格 10元/人份 醛固酮(ALD)测定试剂盒(化学发光法) 各规格 16.2元/人份 血清降钙素(CT)测定试剂盒(化学发光法) 各规格 16.2元/人份 促甲状腺激素受体抗体(TRAb)测定试剂盒(化学发光法) 各规格 17.9元/人份 17 -羟孕酮测定试剂盒(化学发光免疫分析法) 各规格 20.5元/人份 配套产品及限价详见第三章 5 糖化白蛋白测定试剂盒(酶法) 各规格 51.8元/ml 1家 10.1 配套产品及限价详见第三章 6 环孢霉素测定试剂盒(比浊法) 各规格 65元/人份 1 185 普乐可复测定试剂盒(比浊法) 65元/人份 雷帕霉素测定试剂盒(比浊法) 65元/人份 总酶酚酸检测试剂盒(比浊法) 65元/人份 配套产品及限价详见第三章 7 总酶酚酸检测试剂盒(化学发光法) 各规格 92元/人份 1 30 配套产品及限价详见第三章 8 HLA特异性抗体检测试剂盒(流式细胞仪-微珠法) 各规格 128元/人份 1 120 人类白细胞组织相容性抗原 类(HLA-Ⅰ)分型试剂盒(流式细胞仪-微珠法) 480元/人份 人类白细胞组织相容性抗原Ⅱ类(HLA-II)分型试剂盒(流式细胞仪-微珠法) 320元/人份 配套产品及限价详见第三章 注:按目录序号确定入围供应商,各供应商须对目录序号所有产品进行响应,不得拆分,否则将取消其申请资格。 合同履行期限:3年 本项目( 不接受 )联合体投标。 二、申请人的资格要求: 1.满足《中华人民共和国政府采购法》第二十二条规定; 2.落实政府采购政策需满足的资格要求: 按相关政策执行 3.本项目的特定资格要求:1)所投货物若纳入医疗器械管理的,供应商须具有医疗器械生产或经营许可证(或相应的备案凭证),且生产范围或经营范围必须包含体外诊断试剂。2)所投货物如纳入医疗器械管理的,必须具有相应的备案凭证或注册证(如医疗器械备案凭证、医疗器械注册证等);所投试剂必须是符合湖南省医疗服务项目收费目录的医用试剂。3)所投试剂如纳入药品管理的,供应商必须具有相应的生产或经营许可证(如药品生产或经营许可证等),且生产范围或经营范围必须包含体外诊断试剂。4)所投货物如既不属于医疗器械管理也不属于药品管理,需提供相应的分类界定证明。5)试剂接受生产企业(境外产品国内总代理视同为生产企业)或具备有效授权委托书的经营企业参与。同一目录序号下同一生产厂家只能授权一家代理商参加遴选,生产厂家与其授权货物代理商不得同时参与同一目录序号遴选,否则其相应申请均无效。6)供应商对同一目录序号内的试剂只能选择一个品牌进行申报,否则取消该目录序号的入围资格。4、单位负责人为同一人或者存在控股、管理关系的不同单位,不得同时参加同一目录序号的申请。5、与采购人存在利害关系可能影响入围公正性的法人、其他组织或者个人,不得参加申请。6、被“信用中国”网站列入失信被执行人和重大税收违法案件当事人名单的或被“中国政府采购网”网站列入政府采购严重违法失信行为记录名单(处罚期限尚未届满的),不得申请。7、符合法律、行政法规规定的其他条件。 三、获取招标文件 时间:2024年01月12日 至 2024年01月26日,每天上午9:00至12:00,下午14:00至17:00。(北京时间,法定节假日除外) 地点:华新项目管理集团有限公司(长沙市天心区书院路9号保利国际B3栋1805室) 方式:持报名资料到指定地点购买 售价:¥400.0 元,本公告包含的招标文件售价总和 四、提交投标文件截止时间、开标时间和地点 提交投标文件截止时间:2024年02月02日 09点00分(北京时间) 开标时间:2024年02月02日 09点00分(北京时间) 地点:华新项目管理集团有限公司(长沙市天心区书院路9号保利国际B3栋1805室) 五、公告期限 自本公告发布之日起5个工作日。 六、其他补充事宜 1、供应商获取遴选文件时必须提供以下资格证明资料(一式一份,装订成册)(注:报名资料除法定代表人身份证明和授权委托书须提供原件外,其它资料须提交复印件并加盖公司公章): ①法定代表人身份证明、法定代表人委托授权书(附被授权委托人身份证); ②营业执照(具有统一信用代码); ③提供试剂生产厂商信息表(格式见公告附件)(提供纸质版以及电子档,电子档(需提供试剂信息一览表excel格式)请在报名前将此表格发送至邮箱3585232829@qq.com,邮件备注 中南大学湘雅二医院2024年临床诊断试剂及配套产品第四批入围遴选项目 +公司名称报名资料 ); ④本公告供应商资格要求中所规定的证明材料。(具体要求详见公告附件) 本公告同时在中国政府采购网(http://www.ccgp.gov.cn/)、中南大学湘雅二医院(http://www.xyeyy.com/3/29/index.htm)发布,公告附件在中国政府采购网下载。 七、对本次招标提出询问,请按以下方式联系。 1.采购人信息 名 称:中南大学湘雅二医院 地址:湖南省长沙市人民中路139号 联系方式:联系方式:黄老师 联系电话:0731-85294138 2.采购代理机构信息 名 称:华新项目管理集团有限公司 地 址:长沙市天心区书院路9号保利国际B3栋1805室 联系方式:联系方式:罗婷、康心旭、彭晓坤、粟瑀 联系电话:0731-85163777 3.项目联系方式 项目联系人:罗婷、康心旭、彭晓坤、粟瑀 电 话: 0731-85163777
  • 西部首个国家级干细胞创新平台落户成都
    p style="text-align: center " img title="2220002a96397739540.jpg" src="http://img1.17img.cn/17img/images/201602/noimg/254f4365-ae87-4df5-83ce-ae02eae23685.jpg"//pp  近日,由四川新生命干细胞科技股份有限公司(以下简称公司)申报、中国医学科学院输血研究所共同建设的“成体干细胞开发应用国家地方联合工程实验室(以下简称“工程实验室”)”项目,顺利通过国家发改委的审批,成为西部首个国家级干细胞创新平台,为西南地区干细胞产业的发展和技术进步奠定坚实基础。/pp  strong创新促发展,引领行业前进/strong/pp  工程实验室总投资3000万元,其中200万元为“四川省预算内基本建设投资计划补助”资金。总建筑面积2350m² ,包括各功能实验室、中试车间及其他相关部门,并引进一系列国内外先进设备用于新技术、新产品的研发,如细胞生物分析、高通量测序、核酸检测系统、流式细胞仪、无菌操作、超速离心等。工程实验室还拥有一支专业结构合理,研发水平较高、工程化经验丰富的专职研发团队,其中包括原华西医科大学基础医学院副院长汪成孝教授、中国医学科学院输血研究所副所长马峰教授、军事医学科学院放射与辐射医学研究所副研究员段海峰等6名在干细胞技术应用、研究与开发、免疫治疗及临床医学等方面深有造诣的技术带头人。/pp  工程实验室经过长期的技术沉淀、工程化实践、市场化考验,初步建立了较为完善的覆盖产业链上中下游的技术体系,其中多项技术水平处于国际先进、国内领先。实验室承担1项国家级火炬计划项目,1项国家重点基础研究发展计划(973计划)项目,2项国家自然科学基金项目,1项协和创新研究团队项目,承担5项省级项目,开展具有前瞻性的自主研发项目10项,合作研发项目3项。/pp  工程实验室自成立以来,其研发的“脐带血造血干细胞技术”获得四川省科技成果转化项目,“干细胞研究关键技术与候选药物开发”项目获得四川省围绕产业链部署创新链重大科技和公益类项目,承担5项省卫计委项目,发现11例HLA新等位基因并被世卫组织授予命名,获得国家专利22项,相关研发人员多次在国际重要的期刊杂志上发表论文。/pp style="text-align: center "img title="2210000955ee9277c04 (1).jpg" src="http://img1.17img.cn/17img/images/201602/noimg/0af5fa09-fd11-4e29-8c52-2e7d4550710d.jpg"//pp  同时,工程实验室与四川大学口腔再生医学国家地方联合实验室建立长久合作机制,主要开展以乳牙来源的干细胞组织工程技术研究,为今后乳牙来源的干细胞用于牙齿和牙周组织的缺损修复及再生的临床治疗奠定基础 与中国医学科学院输血研究所、中国军事医学科学院及四川省人民医院等多家知名干细胞科研和医疗机构建立了紧密的合作关系,在干细胞关键技术研究和干细胞技术应用方面取得了重要突破。/pp  工程实验室以干细胞技术应用、研究与开发为主体、免疫细胞治疗、基因检测为重要构成的发展结构,以研发新产品、新技术、突破关键核心瓶颈为抓手,以智力成果外溢辐射带动行业进步为责任,同时不断整合内外各种优质资源,保持与其他国家级创新平台的密切合作,经过数年稳健发展,取得了众多成绩,创造了良好的经济社会效益。/pp  strong集中优势,着力打造国家级创新平台/strong/pp  工程实验室所处干细胞行业是当今国际生命科学与生物技术的前沿和制高点,为国家鼓励发展行业,社会民生需要,有利于我国发展模式转变和经济结构调整,有利于我国参与国际竞争。同时,能带动行业技术进步,促进地区经济的发展。/pp  但目前,我国干细胞产业发展中存在一些问题严重制约其快速发展,如产业链脱节,产学研体系尚未有效形成,企业科研技术力量相对薄弱,且较为分散,缺少行业标准和国家标准,资源投入不足,行业人才不足等。/pp  四川作为医药生产大省,不仅拥有国家卫计委首批批准设置的七家脐带血库之一的“四川省脐带血造血干细胞库”这一干细胞资源库,还拥有四川大学华西医院、中国医学科学院输血研究所和四川新生命干细胞科技股份有限公司等一批干细胞研究、应用和产业化的重点单位,在发展干细胞产业方面具有得天独厚的优势和良好的基础,但却缺少干细胞研究与转化创新平台。/pp  因此,面向未来,工程实验室将进一步整合申报及共建单位内外各种优质资源,从资金投入、硬件升级、信息化水平提高、人才队伍建设、外部资源引入、机制完善方面,不断提升平台的综合实力。工程实验室将以干细胞产业发展需要为出发点,以提高行业的整体创新能力和干细胞产业核心竞争力为宗旨,从干细胞行业前沿技术、干细胞产品开发及制约干细胞基础研究向临床应用转化的关键技术难题等方面系统地进行攻关研究,开展重要技术标准的研究制定,同时凝聚、培养干细胞产业技术创新人才,开展干细胞产业技术研发的国际交流与合作。实验室将力争成为国内领先、国际一流的国家级创新平台,通过技术成果的示范和辐射作用,促进国家和地方产业创新平台的有机衔接,促进四川省乃至整个西部干细胞产业的技术进步,提升行业的核心竞争力和可持续发展能力,创造更多新的成绩,为地方经济发展作出更大的贡献。/pp /p
  • 美制成首个活细胞激光器
    据美国物理学家组织网6月13日(北京时间)报道,美国马萨诸塞州综合医院研究人员成功利用表达了绿色荧光蛋白(GFP)的肾脏细胞产生了一种纳秒级的激光脉冲,首次用单个活细胞作为增益介质产生了激光。相关论文将于近日发表在《自然光子学》杂志上。  产生激光通常要有3个要素,第一是光源,第二是受激产生激光的“增益介质”,第三是将所产生的光聚拢到一起的“光学共振腔”。哈佛医学院皮肤病学副教授、论文作者尹淑贤(韩国名)博士说,激光发明50年来,通常都是用合成材料如晶体、染料、纯净气体作为光学增益介质,光脉冲在两面镜子间来回反射,在这些介质中被放大。而我们选择了能表达绿色荧光蛋白(GFP)的肾脏细胞作为增益介质。  GFP蛋白最初是在水母中发现,可在不添加其他酶的情况下诱导发光。研究人员给一个直径约20微米宽、1英寸(2.5厘米)长的圆筒两边装上镜子作为光学共振腔,共振腔内装满GFP水溶液,再向其中放入肾脏细胞。结果发现,肾脏细胞不仅能产生激光脉冲,而且能像透镜一样将光回聚并诱导激光发射。  更重要的是,该激光设备中的细胞在发光过程中仍然存活,能持续产生数百次激光脉冲。尽管单个激光脉冲比较微弱,仅持续几纳秒,但却很明亮,很容易探测到。  论文主要作者、马萨诸塞州综合医院马尔特加特说,这一成果源于好奇心。由于此前激光均由各种机械装置生成,他和同事就想,“为什么自然界中没有生物能制造激光”,产生了用细胞组织试试看的念头,结果显示这是有可能实现的。  对于这项成果的运用前景,研究人员提出了几种可能。首先,由于不同的细胞结构所产生的激光在光学性质上有差异,可以通过分析最后得到的光,来研究细胞和机体组织 第二,目前医学上有一种光动力疗法,可把对光敏感的药物送到要医治的机体部位,然后用光照来激发药效,如果在这种疗法中能用上“细胞激光器”,也许可以增进疗效。  但要在机体组织内产生激光,还要解决一个问题,即如何在机体组织内形成一个光学共振腔,而不是像本次研究那样利用外部的两面小镜子。“下一步,我们希望能在细胞里植入一种类似于镜盒的结构作为光学共振腔。而我们的长期目标是找到一种方法,将无生命的光通讯和计算机拓展到生物技术领域,这在一些涉及电子与生物组织转换界面的项目上尤其重要。”马尔特加特补充说。
  • 是时候介绍这套靠谱的低氧活细胞检测系统了
    当地时间10月7日,瑞典卡罗琳医学院宣布,授予威廉凯林(William G. Kaelin Jr)、彼得拉特克利夫(Sir Peter J. Ratcliffe)及格雷格塞门扎(Gregg L. Semenza)诺贝尔生理学或医学奖,以表彰他们在“发现细胞如何感知和适应氧气供应”领域的卓越贡献。我们都知道,这次诺奖的核心发现就是围绕HIF-1(低氧诱导因子)这条信号通路,小编在这里不再赘述这条通路伟大而精妙的丰富内核,而要强调的是,人类的多种疾病都和常氧/低氧的调节有关,比如恶性肿瘤,肾性贫血,损伤修复,循环障碍疾病等,这次的三位诺奖得主已经为我们发现并阐明了生物体启动氧感知的重要钥匙,而仍然有太多未知的关键节点等待同道中人去探索发现。常用的方法包括体外化学模拟和体外物理模拟,说白了就是给细胞加工具药物(例如CoCl2)或者是低氧环境培养。对于有些细胞模型或研究方向来说,低氧环境培养是必不可少的,然而往往很多实验室的低氧培养设备和其他检测设备是分家的,或者甚至缺少低氧培养的相关设备,给许多实验设计造成了不大不小的困扰。点点点点一下嘛解决方案靠谱的隆重介绍所以Cytation & Lionheart氧浓度可调节活细胞检测系统上图便是能够便捷控制CO2和O2的气体控制装置,在面板上可以方便设定CO2和O2的浓度范围,比如上图,O2的浓度已经从常规的20%降低到5%。是不是惊讶于她的轻盈体型?咱们就是这么节约空间资源有木有!当然,作为控制器,是需要和咱们的核心检测设备Cytation或Lionheart搭载使用的,这样就能够完美实现低氧环境控制和灵活多样的活细胞检测同步进行(传送门)。新鲜小案例:研究一下3D细胞球的缺氧变化此前我们已经介绍过非常多的3D细胞的应用案例,由于3D细胞能够更好地模拟体内细胞的微环境,因此针对3D细胞培养的缺氧水平下的研究需求也是非常多的。11个小时内,人源肝细胞球内的低氧水平逐渐增加(Cyto-ID Hypoxia 染料用于标记细胞内缺氧水平,红色荧光信号增加,表示细胞低氧状态加剧) 请向后滑动_____通过Gen5软件的细胞圈选识别,可以对Cyto-ID标记的细胞缺氧信号定量分析。_____这个图展示了不同的分析方式下的信号倍比变化,数据说明一切,咱们还是需要选择对合适的分析方法__________使用低亲和力球形96板 ,能够快速的构建3D细胞模型(相关案例传送门),接入CO2和N2后,通过气体控制装置设定CO2条件5%,氧气条件8%,放入细胞培养板,即可在长时间内实时监测细胞球的形态或其他需要检测的指标。来自霍普金斯医学院的案例Dr. Gilkes团队的主要研究方向是低氧和乳腺癌的相关研究,2019年他们的一篇文章中通过3D组织细胞培养,阐述了低氧可激活RhoB的表达与活性,并且RhoB在乳腺癌的转移过程中发挥了复杂而关键的作用。首先,Dr. Gilkes团队在分子水平,研究了多种乳腺癌细胞系在低氧(1%)培养条件下的HIF-1和RohB的mRNA水平及蛋白水平的表达变化,在发现显著差异后,当然是要研究一下这个关键的RohB在活细胞水平,特别是3D细胞培养模型中, 如何影响肿瘤细胞的表型变化,于是,Cytation和Lionheart就发挥了重,要,作,用啦。比如,使用LionheartFX连续16小时检测基质胶3D结构中的MDA‐MB‐231亚克隆细胞的迁移运动情况,评价不同RohB的表达量对细胞迁移的影响。16个小时,每隔2分钟拍照一次,然后软件合成视频,可以看出细胞的迁移运动情况,这个gif图是未处理的亚细胞克隆迁移情况。(请向后滑动)__________另外,作者团队构建了3D细胞球的低氧培养模型,用于更深入的研究RohB对肿瘤细胞的迁移及侵袭能力的影响。这里恰好又使用了Cytation5的1%低氧及常氧培养系统,使用了针对3D细胞成像的Z-Stack模式。3D细胞球在基质胶内的侵袭情况及定量统计。(请向后滑动)_______________在整体动物水平,Dr. Gilkes团队通过构建不同RohB表达量的患瘤小鼠模型,通过不同组织的HK2基因表达评估及免疫组化、HE染色等病理学评估,研究了RohB对于肿瘤病灶的生长和迁移的影响。其中大量的免疫组化及HE染色成像均由LionheartFX完成。有趣的是,研究结果发现RhoB对于肿瘤的生长和转移并非单一单向的作用,而是较为复杂的双向作用。肝脏组织切片免疫组化对RhoB的表达定量检测,以及HE染色观察肿瘤转移病灶。(请向后滑动)_____小鼠淋巴结组织切片的波性蛋白免疫组化,波形蛋白是肿瘤进展过程中的重要指标_______________到这里,我们可以看到,搭载了低氧活细胞培养的Cytation&LionheartFX细胞成像系统,可以从分子、3D细胞到整体动物水平帮助研究者获得多种多样的实验结果,其操作便捷性及提供数据的广泛性均极为出色。说到这,小编都有点嫉妒Dr. Gilkes团队的学生了,毕竟曾经的小编想做活细胞实验都是奢望呀,更何况是低氧模型的细胞追踪啦~其实,低氧和氧感知研究还涉及到更多的实验类型,比如氧耗速率检测、氧应激检测、血管生成检测、信号通路研究相关检测、药物筛选方案等等,基于Cytation和Lionheart的图像采集、分析系统在这些领域都积累了丰富的应用,如果有感兴趣的童鞋可以随时和我们联系,或者持续关注我们的后续更新~
  • 胰蛋白酶,组织解离、细胞消化的小帮手
    胰蛋白酶(胰酶,Trypsin),CAS:9002-07-7,为蛋白酶的一种,EC3.4.4.4,是从牛、羊、猪的胰脏提取的一种丝氨酸蛋白水解酶。来源于胰腺的一种丝氨酸蛋白酶,由223个氨基酸残基组成的单链多肽,底物特异性是带正电荷的赖氨酸和精氨酸侧链。胰酶主要切割赖氨酸和精氨酸羧基端,当两者之一紧随为脯氨酸的情况除外。另外,当切割位点任一边紧邻酸性残基,胰酶水解速率也会减缓。在组织细胞的体外培养和原代细胞培养中的组织细胞分散(将组织块制备成单个细胞悬液)以及传代细胞培养中,贴壁生长细胞的消化分散均要使用组织细胞消化液。常用的消化液为胰蛋白酶,EDTA等,其功能主要是使细胞间的蛋白质(如细胞外基质)水解,使组织或贴壁细胞分散成单个细胞,制成细胞悬液用于进一步的实验。以下是absin胰酶部分产品,全部现货供应哦~胰蛋白酶(猪源)1:250 abs47014936本品是由猪胰提取而得的一种肽链内切酶,白色至淡黄色粉末。可用于制备单细胞悬浮液,胰蛋白酶在用于细胞培养时,可用PBS溶解成浓度为0.25%,也可以加入0.02%EDTA ,过滤除菌后使用。溶于水≥10mg/ml,不溶于乙醇、甘油、氯仿和乙醚。本品具有以下特点:1、对电点pI 10.5。Ca2+对酶活性有稳定作用。 2、重金属离子、有机磷化合物、DFP、天然胰蛋白酶抑制剂对其活性有强烈抑制。 3、可用于制备单细胞悬浮液或贴壁细胞的消化、分离。货号名称abs47014936猪源胰蛋白酶1:250胰蛋白酶-EDTA消化液(0.25%) abs47014938本产品含0.25%胰酶,溶于无钙镁平衡盐溶液中,经过滤除菌,可以直接用于培养细胞和组织的消化。货号名称abs47014938胰蛋白酶-EDTA消化液(0.25%)胰蛋白酶-EDTA消化液(0.25%) 不含酚红 abs47047375本品含 0.25%胰酶和 0.02%EDTA(0.53mM),溶于无钙镁平衡盐溶液中,经过滤除菌,可以直接用于培养细胞和组织的消化。本产品具有方便快速、稳定安全、细胞状态好等特点。货号名称abs47047375胰蛋白酶-EDTA消化液(0.25%) 不含酚红胰蛋白酶(牛胰) 1:2500 abs9154本品是由牛胰提取而得的一种肽链内切酶,白色或类白色粉末。溶于水,不溶于乙醇、甘油、氯仿和乙醚。其广泛应用于分子生物学,药理学等科研方面。是一种专一性催化水解赖氨酸、精氨酸羧基形成的肽键,可用于蛋白质化学研究。货号名称abs9154胰蛋白酶(牛胰) 1:2500更多absin胰蛋白酶相关产品 :货号名称abs47014938胰蛋白酶-EDTA溶液abs9154胰蛋白酶(牛胰腺)abs47047375胰蛋白酶-EDTA消化液(0.25%) 不含酚红abs44073474重组牛胰蛋白酶abs47014937Trypsin (0.25%), Phenol Redabs47014936猪源胰蛋白酶1:250abs47014940胰蛋白酶,蛋白测序级abs47014939胰蛋白酶,组织培养级Absin特色产品线(全部现货):WB相关:ECL发光液、预染marker、预制胶;IHC相关:二抗试剂盒、组化笔;IP/CoIP试剂盒;激动剂/抑制剂;血清、BSA、蛋白酶K、CTB、TTX、CEE;凋亡试剂盒;呼吸爆发试剂盒;ELISA试剂盒;重组蛋白;抗体: 二抗、标签抗体、对照抗体;定制服务(抗体/多肽/蛋白/标记/检测)...
  • 细胞增殖检测新技术——EdU 取代BrdU
    直接测定DNA合成是细胞增殖检测的最准确方法之一,是测定物质毒性、评估药物安全评价、细胞健康的基本方法,其中以前常用的方式是利用胸腺嘧啶核苷酸类似物&mdash &mdash BrdU进行检测。因为在细胞周期的S期,和细胞一起孵育的BrdU能掺入DNA分子中,再结合BrdU抗体与渗入DNA的BrdU特异性结合,就能够检测到DNA复制活跃的细胞。但BrdU有一大缺点,就是需要变性DNA后才能与抗体结合,但这就破坏了DNA双链结构,影响了其他染料的结合染色,导致染色弥散,准确性降低等问题。哈佛大学医学院细胞生物学家Adrian Salic就认为:&ldquo 为了能够暴露BrdU的抗原表位,必须用高浓度的盐酸,乙酸或酶解,但经历了如此严重的处理后,细胞原本精巧细致的结构在显微镜下就变得惨不忍睹了。&rdquo 事实上,现在有一种新的检测方法能避免这种情况的发生&mdash &mdash EdU检测。EdU (5-乙炔基-2&rsquo 脱氧尿嘧啶核苷)也是一种胸腺嘧啶核苷类似物,但其连有的炔羟基团在天然化合物中很少见,在细胞增殖时能够插入正在复制的DNA分子中,基于EdU与染料的共轭反应可以进行高效快速的细胞增殖检测分析,可以有效地检测处于S期的细胞百分数。与传统的免疫荧光染色(BrdU)检测方法相比,更简单,更快速,更准确。EdU只有BrdU抗体大小的1/500,在细胞内更容易扩散,不需要严格的样品变性(酸解、热解、酶解)处理,有效地避免了样品损伤,有助于在组织、器官的整体水平上观测细胞增殖的真实情况,具有更高的灵敏度和更快的检测速度。Adrian Salic特别强调:&ldquo 与传统的免疫荧光染色不同,EdU反应能在几分钟内完成,且不需要进行严格的样品变性处理,使得组织成像更简单易行。&rdquo 细胞增殖检测方法基于EdU与Apollo?荧光染料的完美结合准确检测新合成的DNA,简单,快速,准确。这种检测方法非常快速,且只需简单的几个步骤,因此也适用于高通量筛选试验,如在药物筛选中检测加药后细胞的活力。 图1 BrdU 与EdU 检测原理示意图 表1 BrdU 与EdU 检测优缺点比较 图2 BrdU 需要DNA 变性后才能与抗体结合,导致BrdU、Hoechst 染色弥散,边缘模糊不清;而EdU 边缘清晰完整,检测更灵敏、更准确EdU可以检测新合成的DNA,而EU则可以检测新合成的RNA。EU是一种尿嘧啶核苷类似物,能够在RNA转录时期代替尿嘧啶( U )渗入正在合成的RNA分子,基于EU与Apollo?荧光染料的特异性反应进行RNA检测。EU能够在体内和体外水平检测时间和空间上RNA合成的变化,能够更方便地研究RNA转录位点,结合相关抗体标记能够检测与RNA有相互作用的蛋白。结合EdU和EU进行检测新合成的DNA和新合成的RNA,可以深入开展细胞增殖、细胞周期、细胞毒性、DNA复制及修复、信号通路等方面的研究。
  • 稀有细胞检测,不做无谓的牺牲
    p  有些细胞在血液和组织中的含量很少但却很重要,比如干细胞、循环内皮细胞、循环肿瘤细胞和残留病变细胞。准确检测和分析这些稀有细胞,是理解疾病进程和发育机制的关键。然而稀有细胞检测并不是一件容易的事,会受到样本质量等多种因素的影响。/pp  流式细胞技术能对每个细胞进行多种定量分析,是在血液、骨髓等组织中检测稀有细胞的有力工具。稀有细胞检测往往需要大量样本才能采集到足够的数据,这个时候传统流式细胞仪也有些发怵,因为大样本意味着处理时间长,如果不想牺牲检测灵敏度,就不能贸然加快进样速率。/pp strong 声波聚焦技术,不做任何无谓的牺牲/strong/pp  样本溶液注射到流式细胞仪的时候,细胞是随机分布在三维空间内的。让这些细胞逐个穿过激光束,对于准确采集数据非常重要。绝大多数流式细胞仪通过快速流动的鞘液实现这一点。鞘液带动细胞并将其限制在中心位置,进而建立单细胞流,这一过程称为水动力聚焦。/pp  与传统水动力聚焦不同的是,声波聚焦技术利用超声波将细胞紧密聚集在样本流中间,汇聚成一条直线。这种超声波大于2 MHz,与医学成像中的超声波类似。声波聚焦流式细胞仪基本不受进样速率的影响,能使细胞强聚焦于激光检测点,与样本-鞘液的比率无关。/ppstrong  不牺牲通量和精度/strong/pp  传统的水动力聚焦技术受到了不少限制。流速提高会增大样本流的宽度,使细胞的聚焦效果下降。细胞偏离激光中心越远,激发光强度变化就越大,CV值也越高。研究人员经常需要在分析通量和精度之间寻求平衡。/pp  声波聚焦技术在很大程度上与进样流速无关,不论样本流与鞘液流的比例如何,都能使细胞紧密地聚集于激光检测焦点,避免分散。这样可以采集更多光子,在极高的样本通量下保证高精度分析。/pp  声波聚焦流式细胞仪在高达1 mL/min的进样速率下也能维持精确聚焦,让研究人员能够获得更小的CV值,更好地鉴别弱阳性信号和背景,实现更小的差异和更好的信号分离。/pp  不牺牲检测速度稀有细胞检测一般需要采集大量细胞,才能获得准确而可靠的结果。在这种情况下,传统流式细胞仪需要很长的处理时间。不过,声波聚焦流式细胞仪的样本运行速率非常快(可达1,000μL /min),每次运行可采集2000万个细胞。这么高的样本采集速率和样本量可以帮助人们快速准确地检测稀有细胞,不会影响数据的质量。/pp  不牺牲珍贵样本样本制备对稀有细胞检测有很大的影响。举例来说,洗脱和裂解红细胞(RBC)会造成严重的细胞损失和损伤。声波聚焦流式细胞仪支持无洗脱、无裂解的流式实验方案,可以最大程度的保留珍贵样本,避免不必要的细胞损失,简化样本制备步骤。/pp  研究人员可以通过有目的地稀释样本来取代洗脱和裂解步骤,快速而有效地分析浓度较低的样本,比如脑脊液(CSF)、干细胞以及细胞数量较少的稀释样本。对于小鼠血液、骨髓等难以采集的样本、细针抽吸样本或低细胞产量样本,研究人员可以直接染色和稀释,无需洗脱或红细胞裂解。/pp  值得一提的是,声波聚焦流式细胞仪处理全血样本可省去样本制备,既没有样本损失,也不会影响数据质量。/ppstrong  选择流式细胞仪需要知道的事/strong/pp  近三十年来,流式细胞仪已经成为科研和临床领域不可或缺的重要工具。不论你是不是第一次购买流式细胞仪,入手一个新平台都需要考虑很多因素。为了找到最适合自己的那一款,我们需要了解一些事:/pp  流式细胞仪主要由三个部分组成:液流系统、光学系统和电子系统。液流系统将颗粒或细胞送给激光束进行检测。光学系统负责照明并将光信号引导到适当的检测器。而电子系统将光信号转变为电脑可以处理的电信号。/pp  检测参数同时检测多种细胞参数,是流式细胞仪的一大优势。我们在选择流式细胞仪时一定要明确自己对参数的需求。因为一次实验能检测多少参数,取决于流式细胞仪配备的激光器和检测器。比如Attune® NxT声波聚焦流式细胞仪采用模块化设计,能够配置多达4种激光和14色荧光检测,适用于多参数分析。/pp  检测性能了解流式细胞仪的灵敏度、分辨率、动态范围、检测能力和检测速度,可以帮助我们缩小选择范围。购买流式细胞仪是一笔不小的投资,我们不仅需要认清目前的研究需求,还应全面考虑到未来几年的应用。/pp  样本类型现在绝大多数流式细胞仪都能处理几微升到几百微升的样本。如果细胞非常稀少,我们就需加大样本量同时尽量避免细胞损失。在这种情况下,Attune® NxT声波聚焦流式细胞仪将是不错的选择。这种流式细胞仪特别适用于稀少细胞和珍贵样本的检测。/pp  系统软件流式细胞仪用起来顺不顺手,在很大程度上取决于其系统软件。除了方便性以外,我们还需要了解软件是否能呈现我们所需的数据,以及可不可以定时更新升级。Attune的采集和分析软件很直观而且功能强大,适合各种经验水平的用户。/pp  实验室空间每一个实验室的空间都是有限的,越来越紧凑正是流式细胞仪的发展趋势。Attune声波聚焦流式细胞仪就是这样一种小巧方便的台式设备。/pp  除此之外,购买流式细胞仪之前我们还需要了解多方面的信息,比如仪器的自动化程度,厂家提供的技术支持和培训,仪器的兼容性和可拓展性等等。br//p
  • Webinar:“小贝开讲” 之流式细胞术在细胞外囊泡检测中的应用
    时间:2017年8月10日 19:30 - 20:30内容简介:细胞外囊泡(Extracellular Vesicles, EVs)是指从细胞膜上脱落或者由细胞分泌的双层膜结构的囊泡状小体,直径从40nm到1000nm不等。细胞外囊泡广泛存在于各种体液中,由于其携带多种蛋白质、脂类、DNA、mRNA、miRNA等物质,会参与到细胞通讯、迁移、免疫调节、组织再生等多种生理过程中,而成为目前的研究热点。对细胞外囊泡进行准确的定性、定量、分离及后续研究是目前主要的研究手段。目前关于细胞外囊泡研究的方法众多。而流式细胞术以其高速、高灵敏、高通量、多参数、可定量的特点,成为目前对细胞外囊泡的非常出色的检测方法。同时,带分选功能的流式也可以让您达到很好的分离效果。本次在线讲座,我们邀请了贝克曼库尔特生命科学部中国区流式产品经理周昱曦博士为大家介绍流式细胞术在微小颗粒检测方面的发展,以及使用流式细胞术对细胞外囊泡进行检测的流程介绍、优化以及相关的注意事项。主讲人简介:周昱曦 博士产品经理 贝克曼库尔特生命科学部贝克曼库尔特生命科学部中国区流式产品经理,负责非临床流式的产品管理工作。毕业于中山大学中山医学院。具有10年以上流式细胞分析、分选仪操作经验,从事流式应用支持、应用开发、市场推广超过5年。对科研流式应用及开发、仪器原理及特性拥有丰富经验。点击此处轻松报名。
  • 循环肿瘤细胞(CTC)捕获及检测技术进展
    p style="text-indent: 2em "在过去的一年中,循环肿瘤细胞(CTC)捕获和检测市场飞速增长,多个公司将此类技术推向临床并应用于癌症的诊断,与此同时,一大批新兴公司凭借其独有技术从科研机构中脱颖而出,开启了循环肿瘤细胞捕获和检测的商业化之路。/pp style="text-align: center"img src="https://img1.17img.cn/17img/images/201901/uepic/80851a5e-ad37-4e21-86db-fe75c5d75d14.jpg" title="细胞.jpeg" alt="细胞.jpeg" width="419" height="279" style="width: 419px height: 279px "//pp  传统上,临床医生采用组织活检进行癌症诊断。但这种方法对患者具有侵入性,不仅耗时且价格高昂。在过去的十年中,液态活检技术的发展为这些问题带来了突破性的解决方案,并有望为不同患者的疾病提供了更加精准的个体化信息。/pp  加拿大多伦多大学生物化学教授Shana Kelley一直致力于CTC捕获和检测技术的研究,她认为,“strong液体活检将有望带来一次彻底的模式转变,因为患者可以在接受治疗的同时以一种非侵入式的方式进行持续监测/strong。这样可以监测肿瘤的动态特征,帮助医生们制定更多治疗方案,而组织活检由于技术的风险和侵入性无法做到这些。”她还表示:“strong我们发现越来越多的技术能够在单细胞水平分析CTCs的基因型和表型特征/strong。考虑到这些细胞的异质性以及追踪患者样本中目标亚群微量水平的重要性,这一点极其重要。”/pp  一般而言,研究人员可以通过CTC的生物或物理特征(如基因表达、大小、密度、变形性或电荷)进行正向富集或负向富集,然后利用免疫、分子或功能性实验对这些细胞进行检测。虽然CTC富集和捕获技术前景广阔,但与利用ctDNA的液体活检技术相比,研究人员却遇到了挑战。/pp  2017年发表在Cancer Discovery期刊的一项研究中,来自德国汉堡大学医学中心的Klaus Pantel及其研究团队对CTCs在液体活检领域的临床应用进行了研究,并指出了strongCTCs应用的局限性/strong:strong建立癌细胞系或异种移植需要成百上千个CTCs,这使该方法适用于极少数疾病的晚期患者身上/strong。作者还指出,对基于CTC生物学发现的新技术研发的关注,常常会延缓CTC检测进入临床诊断的进程。但研究人员也表示,有关CTC生物学的新研究已经开始衍生出“集CTCs富集、检测和定性于一体”的平台。/pp  美国医疗和生命科学咨询公司Health Advances副总裁Kristen Amanti认为,CTCs临床应用的问题和障碍主要取决于如何使用这些细胞。“strong如果公司试图利用CTCs来进行癌症筛查,而不是监测已经被诊断出患有某种特定癌症患者的治疗,那么公司将面临更大的困难/strong。”Kristen Amanti说到,“如果没有针对特定类型癌症的筛查机制,那么在证明临床证据有效方面会很困难。如果你提前了解已有一个筛查机制,那你可能还要去证明你比这种筛查更好,或者能够提供某种经济优势。”/pp style="text-align: center "strongspan style="color: rgb(192, 0, 0) "商业化进程加速/span/strong/pp style="text-indent: 2em "虽然在临床开展上面临着不少障碍,但是CTC富集和检测的商业前景仍然十分强劲。2018年,多家公司都在CTC捕获和检测技术的临床转化方面取得了重大进步。br//pp  美国Epic Sciences公司的CTC技术在2018年取得了一系列积极进展。2018年6月,Epic Sciences公司及合作伙伴发布了一项多机构队列研究,验证了基于CTC的AR-V7检测方法的有效性。根据该公司的信息,strong这项研究是首个证实液体活检能够预测治疗效果并显示对患者具有生存受益的研究之一/strong。此外,Epic Sciences在2018年初时曾获得5200万美元E轮融资,目前该公司正在将其技术用于研究血液中肿瘤细胞和人类免疫细胞的综合分析,进而用于免疫治疗药物的研发和伴随诊断中。2018年11月,该公司还与加拿大四家乳腺癌治疗中心合作进行了一项临床试验,以检测其技术是否能预测转移性乳腺癌患者的复发风险。/pp  与此同时,美国液体活检公司Celsee Diagnostics在CTC富集工具商业化方面取得了进展。在与单细胞诊断公司IncellDx达成一项可行性研究合作后,Celsee Diagnostics在2018年1月份签订了一系列产品的strong联合商业化协议,包括基于CTC的乳腺癌、结直肠癌、前列腺癌和其他癌种的筛查产品/strong。/pp  2018年5月,CellMax Life公司启动了一项美国临床试验,用于验证其基于CTC的结直肠癌筛查产品。该公司CMx平台目前只在亚洲销售,采用于一种“混合微流体芯片”,能够从10亿个正常细胞背景中分离出1~10个CTCs。CellMax Life还在2018年4月份与IncellDx达成合作,共同开发和和销售几种实体瘤的CTC检测产品,用于个性化治疗方案选择和监测。近日,CellMax Life还宣布,作为公司细胞疗法临床试验的一部分,公司已经与台湾Medigen Biotech公司达成合作。Medigen将结合Cellmax Life的CMx平台及其液体活检panel,用于患者的的治疗决策及疗效监测。/pp  另一家计划进军CTC液体活检领域的公司是Precision for Medicine。2018年9月,Precision for Medicine收购了ApoCell公司及其ApoStream CTC富集技术。strong该技术可利用介电电荷差分离肿瘤细胞和正常细胞/strong。根据Precision for Medicine公司高级副总裁Darren Davis的说法,公司收购ApoCell主要在于其开发的一款基于免疫组织化学和免疫荧光成像的新型液体活检技术。/pp  Vortex Biosciences也在推广基于CTC的VTX-1液体活检平台方面取得了进展。该公司在2018年3月份与BioView合作开发一种整合流程,以识别CTCs的临床生物标志物。2017年11月份,该公司和Stratec Consumables签订了一项供货协议,计划开发一款适用于Vortex平台的微流体芯片。该芯片最初由加州大学洛杉矶分校(UCLA)开发,新版芯片将帮助该平台适用于商业生产规模。此外,在2018年早些时候,Menarini Silicon Biosystems公司宣布已经将最近收购的技术整合到一款细胞型液体活检流程中,其中包含CellSearch CTC纯化工具。该公司表示,CellSearchstrong利用细胞外抗原表位和免疫磁珠,以一种自动化方法从血液样本中提取肿瘤细胞/strong。/pp style="text-align: center "strongspan style="color: rgb(192, 0, 0) "初创公司潜力巨大/span/strong/pp style="text-indent: 2em "位于美国密歇根州的初创公司Akadeum计划通过公司的微气泡平台进入液体活检市场。公司称微气泡平台可以识别和分离CTCs和其他分子分离。目前Akadeum的这款工具只限于研究使用,与微流控芯片不同的是,该平台使用的是低密度的玻璃板和空气泡,气泡表面带有特定抗体,能够与靶细胞结合,然后“浮到表面”。Akadeum公司CEO Brandon McNaughton表示,该公司计划在未来两到三年内在全美国推广产品甚至销往国外。br//pp  来自威斯康星大学的 Capio BioSciences公司也开发了一种类似的技术,名为CapioCyte。该技术整合了细胞滚动和多价结合功能。Capio BioSciences创始人Seungpyo Hong解释道,CapioCyte与其他CTC捕获技术不同之处在于,该技术结合了仿生学和纳米技术。癌症筛查和早期诊断是一个极大的市场,但Hong指出,每个患者的CTCs所呈现的高度变异数量和表型表明,CTCs的预后价值将在未来得到进一步探索。/pp  除此之外,美国堪萨斯大学还在2018年5月公布了一项关于strong微流体平台的研究/strong,strong该平台可以对包括多发性骨髓瘤在内的克隆性浆细胞疾病患者的循环浆细胞进行检测/strong。在堪萨斯大学大学化学与机械工程专业教授Stephen Soper主导下,研究团队在2016年创建了Biofuidica公司,进一步开发一款使用正弦微流控技术的诊断工具。/pp style="text-align: center "strongspan style="color: rgb(192, 0, 0) "学术成果不断涌现/span/strong/pp style="text-indent: 2em "商业进程之外,关于CTC的学术成果在去年同样不断涌现。例如,来自加拿大英属哥伦比亚大学的研究人员便开发了一款strongCTC富集系统/strong。研究团队认为,通过结合生物物理富集和激光捕获显微切割(LCM),该系统在一定程度上克服目前液体活检技的局限性。在本研究中,课题组通过溶解红细胞从前列腺癌血样中富集CTCs,使用一种特殊的微流体细胞分类方法分离白细胞和CTCs。为了提取单个CTC用于激光捕获显微切割,研究小组通过免固定染色选择肿瘤细胞,将细胞样本嵌入水凝胶基质中,使细胞固定。随后,研究小组然后使用一款短距离散焦UV激光提取包埋的细胞。br//pp  此外,在去年4月份,来自加拿大多伦多大学的一个研究小组发布了一项关于strongmRNA细胞计数法的检测方法/strong,将CTC分离和基因表达分析结合起来。研究人员使用两种磁性颗粒,选择性杂交肿瘤细胞中mRNA的不同区域,帮助分离细胞并评估每个细胞中RNA的含量。研究小组利用免疫荧光法以及mRNA方法或EpCAM捕获法检测到CTCs。研究人员发现mRNA细胞计数方法能够同时提供CTC数量和临床相关mRNA的缺失或存在的准确情况。但研究小组表示,他们还将需要在CTCs含量较少的早期癌症患者中测试这种方法。/pp style="text-align: center "strongspan style="color: rgb(192, 0, 0) "结语/span/strong/pp style="text-indent: 2em "肿瘤液态活检的概念起源于CTC,相比ctDNA,发现较早却浮沉多年的CTC在几番打磨后逐渐发挥出自己的优势。借着二代测序技术的东风,ctDNA后来者居上占尽风头,但是CTC也完全没有落后。CTC分离和鉴定技术的发展使得相关研究再次成为肿瘤领域的焦点。如今,越来越多新的检测产品正在被使用,未来可能还会出现更多。随着更多数据的积累与临床证据的支持,液体活检的使用或将变得更加常规化。br//p
  • 张泽民课题组受邀在Science杂志发表泛人类组织单细胞测序观点文章
    目前科学家对人类细胞如何互相作用以组成不同组织与器官的认识仍然十分有限。近年来,一系列单细胞测序的研究工作揭示了正常组织与疾病状态下的单细胞图谱,描绘了组织中多种细胞类型及其丰度与互作,但这些工作往往局限于单一器官。系统性地比较多种组织间的细胞类型及其转录组的异同,有助于科学家理解器官特异性的细胞状态分化。2022年5月12日,Science杂志在线发表了Tabula Sapiens Consortium、Eraslan、Domínguez Conde、Suo等研究人员报道的4篇跨组织人类单细胞图谱的研究,共涉及来自68位捐献者的30余种组织类型,超过100万单细胞,涵盖500种以上细胞类型。北京大学张泽民课题组受邀于Science同期发表Perspective观点文章,对以上研究进行了总结,并对将来单细胞测序技术在疾病研究与药物研发中的应用进行了展望。跨组织单细胞测序揭示了组织间保守的细胞特征。Eraslan等人通过比较多种器官中的巨噬细胞,发现了保守的巨噬细胞发育路径,即monocyte前体在组织中发育为高表达HLAII、行使免疫功能的巨噬细胞类群,与高表达LYVE1、行使血管支持与免疫细胞浸润抑制功能的巨噬细胞类群。跨组织单细胞测序发现了组织特异性的细胞状态。记忆T细胞是经过抗原刺激后的T细胞,Domínguez Conde等人发现了三类CD8记忆T细胞亚型,分别为分布在血液丰富组织中的TEM/EMRA细胞,分布在肠道中的TRM细胞,以及主要分布在脾脏与骨髓当中的TRM/EM细胞,这些T细胞亚型各自特异表达的细胞因子受体可能是形成组织差异性分布的机制。对组织间细胞构成的比较识别了稀有的细胞类型。Tabula Sapiens Consortium发现来自肺、心脏、子宫、肝脏、胰腺、脂肪、肌肉等组织的内皮细胞有着各自独特的转录组特征,提示了高度组织适应的功能。同时胸腺、血管、前列腺、眼球来源的内皮细胞更为相似。泛组织研究的方法发现了心脏内皮细胞的特异性marker SLC14A1,提示了心脏内皮细胞可能的适应性代谢功能。同时,Eraslan等人发现了稀有的细胞类型,包括前列腺中的神经内分泌细胞与食管中的肠系神经。跨组织单细胞图谱同时提示了疾病相关的细胞类型。Eraslan等人以肌肉疾病为例研究了单基因遗传病中的潜在致病细胞类型。研究发现在一种影响神经-肌肉细胞信号传递的疾病中,仅神经与肌肉连接处的肌肉细胞富集该类疾病的相关基因。同时,对受体-配体进行的分析发现细胞间互作失调是肌肉疾病的成因之一。例如在一种致死性的肌肉疾病中,ERBB3突变会导致肌肉细胞与施旺细胞(一种生成神经元旁髓鞘的细胞类型)的互作失调。这一系列跨组织单细胞测序数据集同时为药物副作用和安全性研究提供了重要的参考。虽然新药的分子靶向性不断提高,但全身系统性的给药仍然是最主流的方式,使得药物副反应成为重要的临床问题。对这一系列跨人类组织的单细胞数据集进行基因表达查询将大大助力于新药研发的毒性预测,将毒副作用识别在人体试验之前。本期Science发表的四项跨组织单细胞测序研究代表了构建综合性人类细胞图谱的重要里程碑。将来的研究有必要在更大队列的人群中进行探索与验证。同时,将跨组织的研究方法应用于疾病研究十分重要,例如肿瘤。理解组织保守性与组织特异性的肿瘤发生过程对开发泛癌种与癌症类型特异的肿瘤药物至关重要。例如,对肿瘤免疫的认识促进了靶向PD1抗体药物在多种癌症类型中的成功。近年来张泽民课题组报道了一系列泛癌种的髓系细胞与T细胞单细胞测序研究,这一系列研究方法适合被推广至更全面的细胞类型和患者队列,并最终使科学家在单个基因、细胞、组织与表型层面系统性地理解疾病与生物学过程。
  • 洪斌:循环肿瘤细胞检测新技术让癌症检测更快、更准
    在癌症诊断与治疗中,医生通常是利用活组织检查来进行确诊并跟踪治疗效果。这种方法不仅会给患者带来创伤,而且价格昂贵。循环肿瘤细胞(Circulating Tumor Cell, CTC)检测打破了这一僵局。CTC是存在于癌症患者血液循环系统中的游离癌细胞,被认为是癌症生长、转移的一个重要因素。近年来,CTCs引发越来越多的研究者及商业公司的兴趣。  10月23日,在第三届&ldquo 千人计划&rdquo 创业大赛决赛上,美国泰勒影像生物技术有限公司创始人洪斌博士带来了关于CTCs的新项目&mdash &mdash 基于循环肿瘤细胞检测的快速、低成本癌症普查技术。生物探索记者对此进行了专访。洪斌博士在千人计划大赛上展示自己带来的CTCs检测项目  循环肿瘤细胞,癌症无创检测新工具  对于科研及临床来说,CTC的概念并不陌生,早在1896年,澳大利亚学者Ashworth就首次提出CTC的概念。CTCs目前定义为自发或因诊疗操作由实体瘤或转移灶释放进入外周血循环的肿瘤细胞。  大量实验已经证实CTCs检测有助于肿瘤的早期诊断、判断患者预后、评估抗肿瘤药物的疗效及制定个体化治疗方案。与其他组织学标本如骨髓等相比,外周血标本容易获得,且创伤性小,是临床上常规检测较为理想的标本来源。  但是,CTC在外周血中的数量非常稀少,仅占外周血白细胞的1/106-1/107,并且它是连续产生的,在血液中呈动态分布,会出现滞后现象,具有很强的异质性,因此CTCs的检测一直受到挑战。  新技术实现CTCs快速检测  洪斌博士带来的技术可以解决这一问题。洪博士曾在美国豁达斯派克生物技术公司及美国艾卫迪医学检测公司工作,主导过政府支持的循环肿瘤细胞检测项目。他说,CTCs的少是相对的概念,并不是所有样品中都会少,这是一个误解。以前是因为产品、设备不够好,检测不到,所以才叫&ldquo 少&rdquo 。现在已经证明了,很多样品检测水平是以前平台的30倍到100倍,这样就不能称作&ldquo 少&rdquo 了。  不同于常规的细胞学检测手段,洪博士使用的是专利技术,肿瘤细胞无需分离、无需洗脱特异性染色和高清成像,不会对细胞产生物理损伤,没有样品损失。同时,他们开发了非抗体染色剂,无论染色时间长短对正常细胞都不会产生非特异性染色,不会产生染色背景。整个检测过程只需10分钟,保证了癌症检测的准确度、灵敏度、特异性和方便使用。  既往研究表明,外周血CTCs存在于肺癌、乳腺癌、前列腺癌、结直肠癌、膀肌癌和卵巢癌等多种恶性肿瘤中,因此洪博士的这项技术几乎可以检测所有癌症&mdash &mdash 只要能产生CTCs。医院、体检中心、诊所、中心实验室进行癌症筛查、诊断和治疗评价时均可使用这项技术。  一年左右进入临床  对一项医学技术来说,大家最为关注的永远都是何时能够进入临床,真正应用到患者身上,尤其是与癌症相关的技术。洪博士表示,这项技术预计一年左右在中国进入临床,经过临床试验、注册证审批等程序,再过一年半到两年时间即可推向市场。  洪博士提醒,虽然这项技术很先进,但是它不能完全取代现有的癌症检测技术。放射、影像、病理检查等每项技术都有自己的优势,在某些情况下,CTCs快速检测技术能够取代传统检测手段,更多情况下,CTCs快速检测技术希望做到与传统检测手段优势互补,最终实现癌症的准确检测&mdash &mdash 这也是癌症检测的最终目的。  在查看介绍资料时,记者注意到该技术有&ldquo 床边&rdquo 、&ldquo 快捷&rdquo 字样,因此产生疑问,该检测方法有可能给患者在家里使用吗?洪博士说,该检测使用形式多样,可以在专业实验室使用,也可以在病人床边使用,但是建议医生在专业实验室使用,以方便结果确认。  洪博士计划首先将产品推向全国各体检中心。被问及在中国推广这项技术可能会遇到哪些挑战,他说,挑战肯定会有,毕竟这是一个新产品,但它并不是市场上第一个这种类型的产品。经过多年发展,市场已经认可CTCs检测相关产品,他们只要努力证明这项技术好在哪里就行了。  CTCs检测不是一件易事,中国十年前就有公司介入CTCs检测领域,因为难度太大,到现在鲜有成功者。或许接下来十年,这种情况会得到改观。随着检测技术的不断改进,检测手段敏感性与特异性的提高,CTCs检测必将在临床肿瘤诊治中得到更广泛的推广应用,CTCs检测也将在人类战胜肿瘤的征途上写下新的篇章。  美国泰勒影像生物技术有限公司创始人洪斌  洪斌毕业于南京大学、北京化工大学、美国路易维尔大学。曾在美国豁达斯派克生物技术公司担任高级研究员、项目主管,在美国艾卫迪医学检测公司担任研发主管。洪博士获得了美国普渡大学药政管理与质量监督职业资格认证,美国药监局药政管理培训资格认证,多项中美创新创业大赛大奖,并入选美国大学名人录。他发表第一作者SCI核心期刊文章十余篇,发明专利四篇、知识产权一篇,是生物传感器和医学检测领域著名期刊 Biosensor & Bioelectronics的特邀审稿人。
  • Nature丨癌细胞中的“团伙作案”:ecDNA“犯罪中心”驱动癌基因分子间的协同表达
    DNA不仅可以按其序列编码信息,也可以按其形状编码信息。人类基因组被分割成由染色质纤维折叠成动态的层次结构组成的染色体。这种空间结构(包括许多染色质环)可以将远端元件拉近,并将转录活动组织到不同的区域,从而限制了DNA的调控和转录机制。而在癌症中,这种染色质环境则发生了深远的改变【1】。近年来,编码癌基因的环状染色体外DNA(ecDNA)被证明在癌症中广泛存在,是癌症基因组的普遍特征,也是人类癌症进展的有力驱动因素。ecDNA是共价闭合双链,不同于在健康体细胞组织中发现的千碱基大小的环状DNA,其大小从100千碱基到数兆碱基不等,且被高度扩增【1】。ecDNA缺乏着丝粒,并且在每次细胞分裂后随机分布在子细胞中,使得其可以快速积累,且可以选择具有耐药性或其他适应性优势的ecDNA变体【2】。ecDNAs可以重新整合到染色体中,因此也可能作为某些染色体扩增的前体【3】。ecDNA具有更高的染色质可及性而缺乏更高的染色质致密性,且包含内源性致癌基因增强子元件,这表明癌基因扩增子可能是通过调控依赖性来扩增转录的【1,4】。值得一提的是,ecDNA存在于正常染色体环境之外,但其在细胞核中的空间组织尚不清楚。此外,ecDNA可以在细胞分裂期间或DNA损伤后聚集,但此生物学后果也尚不清楚。2021年11月24日,来自美国斯坦福大学的Howard Y. Chang团队在Nature上在线发表题为 EcDNA hubs drive cooperative intermolecular oncogene expression 的文章,研究了致癌ecDNA的空间、表观遗传学和转录动力学,揭示了由聚集在间期细胞细胞核中的约10-100个ecDNA组成的ecDNA“中心”,可以驱动分子间增强子信号以促使癌基因表达扩增,从而作为癌基因协同转录的组合增强子平台。研究人员利用DNA荧光原位杂交(FISH)技术,使用靶向多个细胞系中的ecDNA扩增的癌基因的探针来观察间期细胞核中ecDNA的定位,包括前列腺癌细胞系PC3(MYC扩增)、结直肠癌细胞系COLO320-DM(MYC扩增)、多形性成胶质细胞瘤细胞系HK359(EGFR扩增)和胃癌细胞系SNU16(MYC和FGFR2扩增)。结果显示,在进行实验的所有ecDNA阳性癌细胞中,尽管有数十到数百个单独的ecDNA分子,这些ecDNA的DNA FISH信号在很大程度上都局限于间期细胞细胞核的特定区域,由此表明ecDNA彼此发生了强烈聚集,该特征被称为ecDNA“中心”。这些ecDNA“中心”所占据的空间比相同大小的相邻染色体片段大得多,提示它们由许多紧密聚集在该空间中的ecDNA分子组成。进一步实验发现,ecDNA的聚集可以发生在具有不同癌基因扩增的各种癌症类型和原发性肿瘤中。随后,研究人员通过联合DNA和新生RNA FISH,在PC3和COLO320-DM细胞系中观察MYC等位基因的活跃转录,并计算每个ecDNA分子的MYC转录概率。结果显示,大多数新生的MYC mRNA转录本来自ecDNA“中心”,而不是来自染色体位点。ecDNA“中心”上致癌基因的转录活性明显高于染色体位点,表明当同一细胞中有更多的ecDNA拷贝时,每个ecDNA分子转录癌基因的可能性更大,尤其是以ecDNA“中心”的形式。人类染色体8q24上的MYC癌基因是癌症中体细胞DNA重排的热点,在人类癌症中近30%的MYC扩增以ecDNA的形式存在,通常包含MYC和PVT1(浆细胞瘤变体转录本1,位于MYC 3’端55kb处,是人类癌症的常发断点)的5’端部分。MYC的两侧是超级增强子,以赖氨酸27处的组蛋白H3乙酰化(H3K27ac)和BET蛋白(如BRD4)为标记,MYC转录对抑制剂JQ1置换BET蛋白高度敏感。为了检测活细胞中的MYC ecDNA,研究人员在COLO320-DM细胞中的MYC ecDNA中插入Tet-operator (TetO)阵列,并用TetR-eGFP或TetR-eGFP(A206K)标记ecDNA,以最小化GFP二聚化。实验结果显示,JQ1能有效降低COLO320-DM细胞(含MYC ecDNA)中MYC mRNA的水平,但对COLO320-HSR细胞(染色体MYC扩增子或均匀染色区)中MYC mRNA的水平没有显著影响(注:这两种细胞来自同一患者肿瘤,除了MYC扩增的背景外,具有高度相似的遗传背景)。此外,TetO-GFP COLO320-DM细胞的活细胞成像显示ecDNA“中心”在有丝分裂期间分解成更小的颗粒,之后又重新形成大的“中心”。值得注意的是,有丝分裂后的ecDNA“中心”的组装会被JQ1阻断。这些结果表明,COLO320-DM细胞中ecDNA“中心”的形成、维持和癌基因转录对BET蛋白的溴域H3K27ac相互作用具有独特的依赖性。为了将ecDNA结构与MYC转录调控联系起来,研究人员使用五种正交方法重建了COLO320-DM ecDNA,报告了迄今为止组装的最大的ecDNA结构——一个4.328 Mb的ecDNA,包含PVT1-MYC融合、标准MYC序列和来自多个染色体起源的序列(染色体6、8、13和16)的多个拷贝,并且利用DNA FISH验证了PLUT、PCAT1和MYC基因在重建预测的ecDNA上的共定位。接下来,研究人员确定了与癌基因高表达相关的ecDNA调控元件。来自72,049个COLO320-DM和COLO320-HSR细胞的配对单细胞ATAC–seq和RNA-seq确定了47个与高MYC表达相关的ecDNA调控元件,而目前驱动ecDNA上MYC癌基因表达的PVT1启动子(PVT1p),在ecDNA“中心”内接受了广泛的组合增强子输入。进一步地实验表明,分子间增强子-启动子在ecDNA“中心”激活,同时研究人员证实PVT1p作为一种DNA元件,能够反式激活ecDNA“中心”。那么分子间增强子-基因的相互作用是否可以被精确定位和干扰呢?以SNU16细胞系(它包含两种不同的ecDNA类型:一种来自8号和11号染色体的MYC扩增子和一种来自10号染色体的FGFR2扩增子)为研究对象,实验结果表明FGFR2和MYC ecDNA是共同选择的,因此这两个扩增子上的增强子可协同激活MYC表达。然后,MYC蛋白又可以反过来激活FGFR2的表达。顺式和反式调控元件之间几乎没有重叠,这也证实分子间增强子元件是直接通过反式而非下游效应修改基因表达。而进一步评估独立癌症类型中的分子间ecDNA的相互作用显示ecDNA“中心”内的分子间增强子基因激活发生在不同的癌基因位点和多种癌症类型中。综上所述,ecDNA“中心”内ecDNA的局部聚集促进了新的分子间增强子-基因相互作用和癌基因过度表达(图1)。与偏向局部顺式调控元件并跨越100-300nm的染色体转录中心不同,ecDNA“中心”可以跨越1000 nm以上,且涉及位于不同ecDNA分子上的反式调控元件。毫无疑问,这一发现对于ecDNA如何进行选择以及ecDNA上癌基因调控的重组如何促进转录具有深远的意义。同时,对于ecDNA“中心”促进癌基因转录的认识为癌症治疗提供新的潜在机会。原文链接:https://doi.org/10.1038/s41586-021-04116-8
  • 关注干细胞|南华生物联合申报科研项目成功获国家自然科学基金资助
    近日,国家自然科学基金委员会发布2022年国家自然科学基金项目申请集中评审结果,南华生物医药股份有限公司(股票代码:000504)全资子公司--湖南博爱康民干细胞组织工程有限责任公司与首都医科大学附属北京安贞医院、湖南医药学院第一附属医院联合申报的科研项目:“羊膜间充质干细胞联合水凝胶支架材料移植干预脊髓损伤动物实验研究”成功获批国家自然科学基金面上项目资助。基础研究是技术问题的总机关 指出:“当前,新一轮科技革命和产业变革突飞猛进,科学研究方式正在发生深刻变革,学科交叉融合不断发展。基础研究是整个科学体系的源头,是所有技术问题的总机关。加强基础研究是科技自立自强的必然要求,是我们从未知到已知、从不确定性到确定性的必然选择”。 国家自然科学基金坚持支持基础研究,以基础研究支撑应用研究。支持方向主要分为“基础科学、技术科学、生命与医学、交叉融合”4个板块,鼓励科技创新、突出原创。 国家自然科学基金项目对于科研的重要性不言而喻,高校和科研院所尤其看重,因此竞争也越来越激烈。2022年国家自然科学基金共接收项目申请294396项,平均资助率16.73%左右,获批项目的专业度和含金量均名列前茅。需求牵引--干细胞修复脊髓损伤具有良好应用前景 脊髓损伤是一种引起损伤平面以下丧失自主运动功能和感觉神经损伤性疾病,具有高致残率和死亡率。全球脊髓损伤病例每年新增 12~65/10万人,我国脊髓损伤的发生率为 25~60 /百万人,其中男性比例远高于女性(2.4~5.6:1),损伤起因主要包括交通事故(主要)、暴力行为、运动、坠落及其他原因。 目前传统的治疗方法难以再生及修复受损的神经功能,因此,亟需开发创新疗法和治疗策略,以期提高患者生存质量或治愈率,减轻患者及家庭负担,提高全民健康水平。 近年来的研究结果显示,干细胞尤其是间充质干细胞在脊髓损伤治疗中具有良好的治疗潜力,其主要通过分化成神经细胞、刺激内源性神经干细胞活化、抑制炎症调节病理微环境来修复神经功能。因为受损的脊髓再生能力有限,干细胞的再生和免疫调节等特性,或可从根源上修复受损神经组织,对于脊髓损伤后脊髓功能的恢复至关重要,这是药物和物理疗法无法实现的,这可能是干细胞再生医学在脊髓损伤中展示出独特优势。突破瓶颈--院企联合,坚攻基础,面向临床 基于干细胞对于脊髓损伤修复的重要意义,南华生物联合首都医科大学附属北京安贞医院、湖南医药学院第一附属医院开展羊膜间充质干细胞联合水凝胶支架材料移植干预脊髓损伤动物实验基础研究。以期探索出一种较好的羊膜间充质干细胞移植方案,为后期开展临床研究提供实验数据,为脊髓损伤患者带来新的希望。 首都医科大学附属北京安贞医院是集医疗、教学、科研、预防、国际交流于一体,在全国心血管领域处于领军地位的三级甲等综合性医院,同时也是北京市心肺血管疾病研究所,为北京市心血管病研究重点实验室的依托单位,该实验室为北京市科委建立的高科技实验室,是首批国家心血管疾病临床医学研究中心,具有心肺血管国家重点实验室。北京安贞医院具备屏障级动物实验室,配备高效液相色谱仪、双光子倒置激光共聚焦显微镜、活体动物体内可见光成像系统、激光定量成像细胞仪等精品实验仪器。首都医科大学附属北京安贞医院负责本研究项目的专家为骨科主任医师胡三保博士,胡博士先后在北京大学、首都医科大学攻读进修,在骨科脊柱脊髓损伤手术及药物治疗方面经验丰富,在国内外核心期刊发表过多篇脊柱脊髓相关研究论文,参与了首都卫生发展科研专项重点公关项目、首都卫生发展科研专项等重点项目,是中华医学会北京分会创伤外科专业委员会委员、中华医学会北京分会骨科专业委员会创伤学组委员、北京医师协会全科医师专家委员会委员。 湖南医药学院第一附属医院是高校直属附属医院,省属三甲综合医院,医院目前拥有 4 个省级科研平台,其中依托湖南省脊柱脊髓损伤与修复临床医疗技术示范基地这个平台,2022年已成功获批国家自然科学基金面上项目1个、湖南省自然科学基金项目1个、湖南省临床创新引导项目1个,该平台主任为我省知名骨科专家唐接福主任医师、研究生导师,深耕临床、科研一线三十年,系湖南省“湘西特聘专家”、湖南省高层次卫生人才“225”工程培养对象、“怀化市优秀科技工作者”。 南华生物作为目前国内唯一一家国资控股的干细胞、免疫细胞及组织工程产业主板上市公司,同时也是国家干细胞转化资源库湖南临床研究中心,以“精益求精,德达天下”为己任,坚持“四精三好”的战略要求,通过公司团队的精干化、设备的精品化、质量管理的精细化、安全的精准化,实现好细胞制品南华造、好生物药品南华造、好医疗技术南华造,力争通过在大健康全产业链的布局,打造全球顶尖的生物科技公司。 本次科研合作项目的开展,三方将充分利用各自平台和队伍的优势互补,从严治学、聚焦前沿,勇于探索和创新,争取解决关键科学难题,获得科研成果突破,进一步推动成果转化,面向临床,惠泽大众
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