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电泳条带分析

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电泳条带分析相关的资讯

  • 凝胶电泳实验操作中的小技巧
    1、让凝胶电泳变得更快,更漂亮方法改进:将电泳电压进行定时变化,例如可以在开始时将电泳电压调节至 100V,大约 15min。使条带的确可以因为自身片段大小不同而产生较大差别的泳动速度,从而将片段分离,然而现在的分离或许会间距较小,从而图片很不漂亮,或者不易观察.可以紧接着进行 120V-130V 的电压进行较小差 异电泳,但是由于电泳电压较大,可以避免过大的片段残存在胶孔不易泳动的情况.结果:这样两个电压进行配合电泳,便可以得到非常漂亮的电泳条带,并且可以节省 1/5-2/5 左右 的时间.2、RNA 电泳如何得出漂亮的条带方法改进:1.电泳槽,制胶器,梳子等的清洗:去污剂浸泡过夜——自来水冲洗干净——ddH20 冲洗——3%H2O2 灌满浸泡过夜——灭活的 0.1%DEPC水冲洗干净——超净台内紫外线照射过夜. 2.烧瓶,烧杯,药匙,量筒等制胶器械的清洗:0.1%DEPC 水浸泡过夜后高压消毒灭活,烘箱烘干.或 者 ddH20 清洗干净, 超净台内紫外线照射过夜. 3.电泳缓冲液必须是 RNase free . 4.预电泳 5-10min 减少了非特异 RNA 条带的出现,有利于分离和纯化,同时可根据电泳仪是否冒泡判断电 泳仪装置是否有误. 5.样品是在电泳缓冲液液略低于胶表面而不是在高过胶面时加进齿槽,避免了加样 时 RNA 的扩散,加样后 RNA 从齿槽逸出造成 RNA 的弥散及定位不良等现象. 6.电泳 3-5min 让 RNA 进入凝胶后再加电泳缓冲液液高过表面,确保了加到每个槽中的 RNA 量及定位的准确性,从而有利于 DNA 的鉴定和纯化.3、如何提高 SDS-PAGE 的分辨率方法改进:借鉴 Tricine-SDS-PAGE 中添加甘油或者尿素来提高分辨率的成功经验,在普通的 SDS-PAGE 中加入约 13%的甘油,同样可以提高分辨率,有效防止小分子量蛋白的弥散.只要把原来 配方中的水换成 60%的甘油,就可以了.结果:加入甘油之后,条带较细,分得更开.4、改进一点点,我们能得到更加美观的 SDS-PAGE 胶方法改进:所做的改进很简单却很有效,加完分离胶后,用移液枪吸取酒精(浓度没有特别要求, 干净无污染就好)加到分离胶上至覆盖界面,静置片刻后放到 37℃恒温箱中可加速胶的凝固.待到分 离胶完全凝固之后倒去上层的酒精,就可以看到齐平漂亮的界面啦!改进二:脱色 背景:给染色结束的 SDS-PAGE 胶脱色往往需要比较长的时间,否则会由于脱色不完全而导致条 带不清晰,影响到拍照的效果.方法改进:改进的方法很简单易行——取一张我们常常随身携带的面巾纸,打个结放入盛有脱色液 的大培养皿里放到脱色摇床上,这样一来,原来过夜脱色达到的效果现在只需要短短的 3,4 个小时就 可以轻松实现了. PS:希望大家这个时候用的面巾纸是质量比较好不容易掉屑的...
  • 远慕技术:电泳后的凝胶染色实验
    实验概要本文介绍了电泳后主要的凝胶染色方法,包括:标准考马斯亮蓝染色法、快速考马斯亮蓝染色法、凝胶铵银染色法、凝胶中性银染色法及凝胶铜染色法。实验步骤1. 标准考马斯亮蓝染色法 1) 电泳后,将凝胶转入一洁净的玻璃或塑料容器中。加入5倍于凝胶体积的0.25%考马斯亮蓝R-250(溶解于50%甲醇和10%乙酸中); 2) 室温下振摇温育4h至过夜; 3) 去除染色液,收集保存可重复使用20-40次; 4) 依次在25%甲醇和7.5%乙酸中室温振摇下脱色。灵敏度为0.1-0.5ug蛋白/每条带。注:使用加热的染色液或脱色液可以缩短染色或脱色时间。将染色液或脱色液在微波炉或水浴中加热,(大约50-60℃),染色时间可缩短至20min,脱色时间约 1-2h。2. 快速考马斯亮蓝染色法 1) 电泳后,将凝胶转入一洁净的玻璃或塑料容器中。加入5倍于凝胶体积的0.25%考马斯亮蓝R-250(溶解于50%三氯yi酸中); 2) 室温下振摇温育20min; 3) 去除染色液,收集保存可重复使用多次; 4) 加入数倍体积的脱色液(25%甲醇、7%乙酸)室温振摇下脱色。必要时可更换脱色液。灵敏度为1.0ug蛋白/每条带。3. 凝胶铵银染色法 1) 电泳后,将凝胶转入一洁净的玻璃或塑料容器中。加入5倍于凝胶体积的50%乙醇和10%乙酸,振摇30min至过夜; 2) 去除50%乙醇和10%乙酸,用去离子水清洗凝胶。加入20%乙醇, 室温振摇30min; 3) 去除20%乙醇,再加5倍体积的20%乙醇,室温振摇30min; 4) 去除20%乙醇,将凝胶转入通风柜内,加入5倍体积的用去离子水配制的5%戊二醛,室温振摇30min; 5) 去除戊二醛,用去离子水清洗凝胶。加入5倍体积的20%乙醇,室温振摇20min; 6) 去除20%乙醇,重复6两次; 7) 去除20%乙醇,用去离子水清洗凝胶。再加入5倍体积的用去离子水,室温温育10min; 8) 去除去离子水,加入4倍体积新鲜配制的氨水/银溶液,室温振摇30min。配制100ml:加1.4ml 14.8mol/L氢氧化铵到100ml水中,再加入190ul 10mol/L氢氧化钠;放置涡旋器上缓缓加入1ml新鲜配制的硝酸银溶液(0.8g硝酸银/ml水),直至出现沉淀物,但很快溶解。 9) 去除氨水/银溶液,用去离子水清洗凝胶20min以上,其间更换水数次; 10) 去除水,加入5倍体积新鲜配制的0.005%柠檬酸,0.019%的甲醛。轻柔混匀,数分钟内条带即显现出。当背景开始变化时,去除显影剂,用用去离子水清洗凝胶。在10%乙酸和20%乙醇中温育凝胶,以终止反应。灵敏度为1-10ng蛋白/每条带。注:操作时,应戴手套并使用洁净的玻璃器皿,以免污染,影响反应的灵敏度。4. 凝胶中性银染色法 1) 电泳后,将凝胶转入一洁净的玻璃或塑料容器中。加入5倍于凝胶体积的30%乙醇和10%乙酸,振摇30min至过夜; 2) 去除乙醇/乙酸溶液,加入5倍体积的30%乙醇, 室温振摇30min; 3) 去除乙醇,再加5倍体积的30%乙醇,室温振摇30min; 4) 去除乙醇,加入10倍体积的去离子水,室温振摇10min;重复用去离子水清洗两次; 5) 去除去离子水,加入4倍体积新鲜配制的0.1%硝酸银溶液(用室温下贮存于棕色瓶内的20%原液稀释而得),室温振摇30min; 6) 去除硝酸银溶液,用去离子水清洗凝胶20s; 7) 去除水,加入5倍体积的2.5%碳酸钠和 0.02%的甲醛(pH4.0),室温振摇温育,数分钟内条带即显现出。当背景开始变黑时,停止温育; 8) 在1%乙酸内清洗,停止反映。用去离子水清洗,更换数次,每次10min 灵敏度为1-10ng蛋白/每条带。5. 凝胶铜染色法凝胶铜染色法为考马斯亮蓝或银染色法的替代染色方法。将凝胶氯化铜溶液中温育,在Tris和SDS同时存在时可形成明显的白色不透明的沉淀物。蛋白条仍然清晰,留下一个多肽分离模式的附染图象。由于蛋白质未结合在凝胶上,可通过EDTA去除Cu离子而得以洗脱,因而该方法特别适合需快速定位蛋白条带用于免疫反应,或进一步进行蛋白质化学研究。其染色模式如同考马斯亮蓝或银染色法的凝胶,易进行拍照。 1) 电泳后,凝胶用蒸馏水短时清洗数次,每次30s,勿洗过长时间; 2) 将凝胶转入一洁净的玻璃或塑料容器中。加入5倍于凝胶体积的0.3mol/L CuCl2; 3) 室温振摇5min,较厚的凝胶可适当延长时间。当CuCl2进入凝胶时,在不含蛋白的区域会出现白色沉淀; 4) 用蒸馏水清洗数分钟,在黑色背景下观察结果。灵敏度为10-100ng蛋白/每条带(0.5mm厚的凝胶)或1ug蛋白/每条带(1mm厚的凝胶)。注:将凝胶在0.25mol/L EDTA、0.25mol/L Tris溶液中温育可使铜染逆转。
  • Life Tech 蛋白质电泳的革命性进步
    你的蛋白质分离结果准确吗?您的蛋白质样本会在电泳时降解吗?NuPAGE预制胶系统为你带来:最清晰的条带中性PH环境最大程度保证样本稳定性12个月的保存期每次都可以获得最可靠,最佳的蛋白分离结果(见右图)点击此处获取详细产品信息想要见证蛋白质电泳的革命吗?现在就试一试NuPAGE蛋白预制胶吧。免费试用申请 Application Note NuPAGE预制胶与传统Tris-Glycine胶中样本完整性保持的比较NuPAGE电泳系统为中性环境,样品处理液为弱碱性,因而在样品处理时对酸性敏感的肽键(如Asp-Pro)不易断裂;还原环境保护蛋白不易被再氧化。所以与传统的Tris-Glycine相比,采用NuPAGE蛋白不易降解,更体现真实状态(如Lane 1);NuPAGE的中性环境中在还原剂的保护下蛋白不被修饰,不容易产生模糊条带(如Lane 4,5) 即日起购买NuPAGE预制胶系统,即可享受NuPAGE启动套装优惠。套装包含NuPAGE预制胶电泳系统及蛋白标准品四件套,详情请咨询Life Technologies 客户经理或当地经销商
  • 年底现货大促销 化学发光凝胶成像系统
    上海山富科学仪器有限公司作为提供生命科学专业性仪器的公司,从事生物成像类仪器研发多年。 在黄山市经济开发区拥有占地15亩标准厂房与生产车间,生产部通过ISO9001:2008质量体系认证,医疗器械生产许可证,拥有凝胶成像两项技术专利成果,CE认证,08年开始对外的出口如今我司的产品遍布全球各大洲。 910 化学发光凝胶成像系统,现参加年终现货大促销,促销时间:2011年12月5日-2012年1月20日。价格从11万6直降3万元整,支持试用二周。确保您满意产品的最终成像效果,凡是在年底促销期间提交试用的客户,优惠价格都能保留到年后实际采购,如有意者欢迎随时与我司联系,踊跃参加促销活动。 910 化学发光凝胶成像是入门级别,能够兼容普通的荧光凝胶成像。使用变焦镜头。目前使用west blotting的用户越来越多,而传统的压片过程存在很多弊端。费时费力而且实验成本也大。910化学发光可以完成快速成像,无需暗室与胶片,无需显影与定影。短短几分钟也能得出灵敏度与压片相媲美的影像结果。910可以完成5分钟的持续曝光。对于west blotting在压片过程中肉眼可见的样品,或者压片时间小于2分钟的样品都可以拍摄出来。专业的化学发光软件,帮助您更好的定量目标蛋白。传统的胶片显影的动态范围窄,不适用于蛋白的精确定量分析,使用化学发光得到的图片能够提供宽的动态范围,进行精确的定量分析。技术参数 摄像头:进口高分辨率低照度数码制冷CCDCCD尺寸:2/3英寸(10.2mm*8.3mm) SONY ICX285 冷却方式:半导体制冷冷却温度:-35℃ 有效像素:1392*1040 采集位数:16bit像素尺寸:6.45&mu m*6.45&mu m像素合并:1*1,2*2,4*4动态范围:三个数量级灵敏度:20pg双链DNA电动变焦镜头:日本进口电动6倍变焦 F1.0 2/3英寸大口径高通透镜头照明模式:透射紫外,透射白光,反射白光激发光源:312nm紫外透照台;均匀冷光源白光透射板;LED反射白光灯;紫外反射选配滤光片数量:6位电动控制自动滤光片轮滤光片:标配590nm超多层镀膜螺旋型标准滤光片透射面积:紫外:21*26cm 白光:20*28cm外形尺寸:430*430*620mm主要特点 1 910采用密封条设计,确保暗箱的绝对密封,拍摄时不受环境光源的任何影响。2 910采用进口2/3大尺寸CCD可以制冷-35℃,确保微弱的化学发光捕捉。3 电动6位的滤光轮,为将来更多应用预留了空间。4 保留了紫外透照的设计,在可以做化学发光的同时也兼容普通的凝胶成像。化学发光凝胶全系列 型号 910920950采集系统进口高分辨率低照度数码制冷CCD进口高分辨率低照度数码制冷CCD进口高分辨率低照度数码制冷CCDCCD尺寸10.2*8.3mm 10.2*8.3mm15.2/*15.2mm冷却方式半导体制冷三级制冷三级制冷冷却温度-35℃-55℃-60℃有效像素1392*1040 145万1392*1040 145万2048*2048 420万像素尺寸(um V*H)6.45*6.456.45*6.457.4*7.4采集位数16 bit16 bit16 bit像素合并1*1,2*2,4*41*1,2*2,4*41*1,2*2,4*4接 口USB 2.0USB 2.0USB2.0镜 头 2/3英寸 日本进口电动6倍变焦镜头 F1.02/3英寸 日本进口定焦镜头 17mm F0.952/3英寸 日本进口定焦镜头 25mm F0.95暗 箱化学发光专用密封暗箱,确保适用于微弱光源长时间曝光下显影滤光片数量6位电动控制自动滤光片轮标配滤光片590nm超多层镀膜螺旋型标准滤光片选配滤光片537nm红色滤光片,460nm蓝色滤光片,699nm滤光片照明模式透射紫外,透射白光,反射白光反射白光反射白光软件ChemShot化学发光专用软件,全中文界面,支持Win2000/XP,集图像采集、编辑、分析和数据库管理功能为一体。尺寸(mm)(W*D*H)430*430*620430*430*620430*430*620重量32kg32kg32kg认证CECECE 上图为910,曝光2分钟图像。使用western blot 曝光标签,以及ECL染色剂,左边第一个点为AB原液混合,后面各点是分别等比例稀释结果。一共可见6个点,第七个点隐约可见。 软件功能简介 ChemiShot全功能控制分析软件,能对DNA/RNA,蛋白质电泳图像、荧光及化学发光成像,各种杂交膜图像、克隆计数、放射自显影、酶标板点杂交图像进行拍摄和分析; 可自动识别条带及其左右边界,自动生成峰值曲线图、数据表; 可进行分子量、百分比、含量计算并生成分子量数据库; 所有数据表均能保存为Excel格式和打印; 一 图像采集编辑功能: 1 中文界面,Windows操作系统。(也可提供英文界面) 2 可通过软件进行缩放、聚焦、光圈、透射紫外灯及反射灯的全自动控制 3 实时显示图像 4 通过软件控制选取不同滤镜 5 多种格式存储图像 6 可连接其它输入设备。 7 灰度调整:调节图像黑白对比度、亮度和灰度系数,达到最佳照片效果。 8 图像旋转:图像可左右,上下旋转。 9 图像反转:图像可黑白转换。 10 添加文字:可在图像上添加中英文。 11 可打印图像、图谱曲线、图表及数据报告。 二 电泳条带分析功能:1 可自动或手动识别泳道,并能手动调整泳道边框,增删泳道,实现泳道的精确分离。 2 可去除背景,以达到最佳的分析效果 3 泳道(Lane)密度扫描:可同时进行多泳道密度扫描,自动辨别电泳条带,同时绘出扫描曲线。 4 分子量计算:输入Market泳道已知分子量(bp值),就可计算出其它泳道分子量(bp值)。 5 数据分析结果:可计算出每根条带的迁移率。 6 分析结果的数据可以用 Excel 文件形式输出。 三 图像数据库功能: 1 可以导入导出多种格式的图像文件 2 可以添加删除数据库图像文件 3 可以在数据库内按采集时间,图像类型进行检索 4 可以根据不同人员建立不同数据库保存图像,便于使用与管理 5 分析结果的数据以及所有图像能复制、粘贴、打印,具有与Excel、Word、画图、剪切板、PhotoShop的连接功能 6 无需借助其它软件即可进行加注文字、箭头、矩形框等,并可对已加注的历史图像反复修改。 更多详情,请登录我司网站了解更多。www.shbiotech.com该活动最终解释权归上海山富所有。------上海山富科学仪器有限公司联系电话:021-65550736 65558758 传真:021-65522489上海市曲阳路851弄沪办大厦9号楼506室www.shbiotech.com
  • 电泳微流控芯片:生物分析的里程碑
    电泳微流控芯片是一种结合了电泳和微流控技术的创新型生物分析工具。该技术整合了微流体学的优势,通过微小尺度的通道、电场和高度灵活的流动控制,实现了对生物分子的高效分离、检测和分析。——技术原理——电泳原理:在电解质溶液中,位于电场中的带电离子在电场力的作用下,以不同的速度向其所带电荷相反的电极方向迁移的现象。电泳微流控芯片技术可以分为两种主要类型:毛细管电泳和芯片上电泳。毛细管电泳利用单根毛细管作为分离通道,而芯片上电泳则将电泳所需的缓冲液、电极等组件集成到一个微流控芯片上,实现设备的微小化和自动化。这种集成化设计使得电泳微流控芯片具有高通量、高效率、低样品消耗和快速分离等优点。电泳微流控芯片的原理主要基于电场驱动下的带电粒子在微尺度流道中的迁移与分离。具体来说,电泳微流控芯片利用微加工技术在芯片上构建微米级的流道,这些流道用于容纳电泳缓冲液。当在芯片两端施加电场时,缓冲液中的带电粒子(如DNA、蛋白质等)会根据其电荷和电场方向发生迁移。不同带电粒子由于其电荷、质量和形状的差异,在电场中的迁移速度会有所不同,从而实现粒子的分离。——应用领域——电泳微流控芯片的应用领域非常广泛,涵盖了多个重要的科学和工业领域。以下是其主要的应用领域:1、生物医学:在生物医学领域,电泳微流控芯片技术主要用于DNA片段、多肽、蛋白质等生物分子的分离和分析。它被认为是后基因时代中最有希望攻克蛋白质研究、基因临床诊断等科学难题的分离分析手段之一。此外,电泳微流控芯片技术也被用于PCR反应,可以大大简化操作步骤,显著提高检测效率。2、新药物合成与筛选:电泳微流控芯片技术在新药研发过程中发挥着重要作用。它可以用于药物分子的分离和筛选,从而加速新药的研发进程。3、食品和商品检验:电泳微流控芯片技术可以用于食品中添加剂、污染物等的检测和分析,确保食品的安全和合规性。同时,它也可以用于商品的质量控制和检验。4、环境监测:在环境监测领域,电泳微流控芯片技术可用于水、土壤、空气等环境样本中有害物质的检测和分析,为环境保护和污染治理提供科学依据。5、刑事科学:电泳微流控芯片在法医学中具有重要的应用,特别是在DNA分离、检测和分析方面,对于个体身份的鉴定和犯罪现场的物证分析具有重要意义。6、其他科学领域:此外,电泳微流控芯片技术还广泛应用于军事科学、航天科学等其他重要科学领域,为这些领域的研究和发展提供了强大的技术支持。——优势——1、高分辨率和快速分离:微流控芯片中的通道尺寸小,因此具有较高的分辨率和更快的分离速度。这使得它能够在短时间内准确地分离和识别出各种生物分子,如DNA、蛋白质等。2、低样品和试剂消耗:由于微流控芯片中的流体通道尺寸微小,所需的样品和试剂量大大减少。这既降低了分析成本,也减少了生物样本的浪费,对于珍贵的生物样本尤其重要。3、高通量分析能力:微流控芯片可以并行处理多个样品,实现高通量分析。这大大提高了分析效率,使得在短时间内能够处理更多的样本,适用于大规模的生物分子分析任务。4、易于集成和自动化:电泳微流控芯片可以与其他技术(如质谱联用)实现联合分析,进一步提高分析的准确性和灵敏度。此外,微流控芯片技术易于实现自动化,减少了人为操作的误差,提高了分析的准确性和可靠性。5、微型化和便携性:电泳微流控芯片采用微型化设计,使得整个分析系统更加紧凑和便携。这使得它可以在现场进行实时分析,无需复杂的实验室设备,为现场检测和即时分析提供了便利。保利微芯公司简介保利微芯科技有限公司隶属中国保利集团公司,由保利置业集团有限公司投资,设计研发微流控生物芯片,公司具备技术先进的微流控生物芯片设计制造能力,已形成创新性的、技术领先的微流控芯片整体解决方案。可以承接国内外芯片设计、应用公司的微流控芯片生产订单,为即时诊断(POCT)、基因测序、环境保护、食品安全和科学研究等应用领域的客户提供有核心竞争力的高性价比芯片产品。
  • 毛细管电泳技术在蛋白药物分析中的应用
    毛细管电泳技术在蛋白药物研发和质量控制中的发展 随着蛋白药物的开发热潮在全球兴起,毛细管电泳技术(Capillary Electrophoresis, CE)作为一种新兴的研发和质控的分析技术也越来越受到各大生物制药公司的青睐和法规机构的重视。全球大部分生物制药公司均已使用毛细管电泳系统用于蛋白药物的研发及质量控制分析。从培养基优化、克隆筛选、配方稳定性研究和纯化过程监测,到蛋白表征、相关杂质检测、蛋白结构鉴定和蛋白质药物产品的质量控制,蛋白药物的各个环节都需要使用到毛细管电泳。例如蛋白的纯度测定,已经从SDS-PAGE转变为十二烷基硫酸钠-毛细管凝胶电泳(CE-SDS)方法;蛋白质的等电点测定,毛细管等电聚焦(CIEF)比传统胶条方法更为准确;糖蛋白药物的糖基异质性表征,毛细管电泳是高分辨率分析方法之一。在各国药典中,毛细管电泳技术用于蛋白药物的检测方法也不断丰富与发展。药典中最早出现其对蛋白药物检测方法是促红细胞生成素(EPO)的糖异构体测定。糖蛋白的异构体差异小,普通的分析方法很难将EPO中的多种异构体分离定量。欧洲药典和美国药典将毛细管电泳方法确定为EPO异构体分析的标准,解决EPO产品中各种糖基化异构体的分离和定量问题。此外,生长激素的相关杂质检测标准也采用了毛细管电泳的方法。对于单克隆抗体药物的分析,在2006年,由惠氏、安进、基因技术、礼来、辉瑞、强生及加拿大卫生署等十几个实验室对“CE-SDS方法对单抗药物纯度分析”进行了联合验证。他们对方法的稳定性、可靠性、准确性等多方面进行了研究和考察。研究结果表明CE-SDS方法比传统的SDS-PAGE更适合单抗药物的表征与质量控制,其结果的稳定可靠性要远远超过SDS-PAGE,建议各生物制药公司使用CE-SDS代替原有的SDS-PAGE作为研发与质量分析的平台。随后,上述生物制药公司及机构又针对“CIEF方法进行单抗药的等电点测定及电荷异质性分析”、“CZE方法快速分析单抗药的电荷异质性”,“毛细管电泳技术进行单抗药中的糖基分析”进行了多实验室联合验证,结果展现了CE技术用于单抗药质量控制的优势及可行性。美国药典于2013年发布了利妥昔和曲拓珠等单克隆抗体药物的纯度检测、等电点/电荷异质性分析和糖基分析采用毛细管电泳方法。在中国,中国食品药品检定研究院于2012年联合国内外生物制药机构对“CE-SDS方法对单抗药物纯度分析”进行了验证,确认了CE-SDS方法在分辨率、定量准确性及自动化程度等方面的优势,并指出CE可以对单抗非糖基化重链进行准确定量。基于以上工作以及毛细管电泳技术在单抗药分析中的强大优势,中国药典2015版的第三部中增加了CE技术,明确了CE是单克隆抗体药物大小变异体、电荷变异体、鉴别与一致性和糖基化修饰分析中的重要方法。随着CE技术在生物制药领域的快速发展,以及新的蛋白质药物的不断上市,将会有更多的CE方法出现在各国药典中。毛细管电泳技术在单克隆抗体药物分析中的应用(1)单克隆抗体药物的纯度及大小异质性分析SDS-PAGE方法对单抗药物进行纯度分析,在分辨率、定量准确性和自动化程度上,已经不能满足生物制药研发和质量控制的要求。CE-SDS方法基于蛋白分子量的差异分离,用于还原和非还原单抗药物的纯度分析,免去了复杂的人工操作、定量更加准确,具有更高的分辨率,在还原模式中可对非糖基化重链进行分离和准确定量。图1. CE-SDS对还原单克隆抗体药物的纯度分析[1]选用不同的毛细管长度,可以实现高分辨率模式和快速模式的纯度分析。高分辨模式的CE-SDS方法提供最高的分辨率,快速模式的CE-SDS方法提供更短的冲洗和分离时间,提高了分析的通量。CE-SDS结合激光诱导荧光检测器(CE-SDS-LIF),通过5-Tarma或FQ染料对蛋白进行标记,可以获得更高的灵敏度,可以检测到含量在0.01%的杂质碎片。此外,LIF检测器的使用,可以最小化基线波动,使积分和定量更加准确。(2)单克隆抗体药物等电点的测定和电荷异质性的分析单抗药物在结构上会发生糖基化、脱酰胺化、异构化、氧化等翻译后修饰,造成蛋白表面电荷的改变,引起单抗的电荷异质性。每个变异体具有不同的等电点。基于等电点分离的毛细管等电聚焦技术(cIEF),可以对单抗药物的变异体进行高分辨率的分离和定量,可分离0.03个pI差异的变异体。方法使用等电点Marker制作校准曲线,对变异体的等电点进行准确的测定。是单抗药物等电点测定和电荷异质性分析的重要方法。图2. CIEF方法对单克隆抗体药物的等电点和电荷异质性分析[5]针对不同pI范围的蛋白样品,可以通过选用适当的两性电解质来实现高分辨率的分析。如对于大部分单抗,其pI值位于7-10之间,可使用pH 3-10范围的两性电解质;对于pI 在5-7范围内的蛋白样品,可使用pH 5-8的窄范围两性电解质;而对于pI 小于5的酸性蛋白,则可以使用反向聚焦和迁移模式,实现更好的分析。 (3)CZE方法对单克隆抗体药物电荷异质性的快速分析毛细管区带电泳(CZE)基于分析物电荷/体积的比进行分离,是毛细管电泳技术中最简单、快速的模式。由于单抗药物的各个变异体分子体积近乎相同,因此在CZE分离模式中,电荷变异体的分离取决于表面电荷的差异,与CIEF模式的变异体分离相一致。因此,CZE成为快速电荷异质性分析的平台方法被生物制药行业所使用。此外,由于CZE方法简单快速的特点,它也被用于单抗药的鉴别分析中。图3. 同一种CZE方法对23种单抗药物的电荷异质性分析[3](4)单克隆抗体药物的糖基异质性分析单克隆抗体等糖蛋白药物中,糖基的种类和排列顺序会导致糖基异质性。单抗药物的糖基化修饰对其安全性和药效有着很大的影响。因此对糖基异质性的质量控制十分重要。毛细管电泳方法对糖基异质性分析的流程包括糖蛋白中糖基的释放、糖基的标记和毛细管电泳分离。磁珠辅助的糖基释放和标记,使得前处理可在1小时内完成,加快了前处理的时间。采用APTS作为荧光标记物,不仅可以通过增加电荷提高分离效率, 还通过LIF检测实现了高灵敏的糖基分析。毛细管电泳技术对糖基分析的优势在于分辨率高,速度快。不但可以区分出一个糖基的差别,相同分子量的糖基异构体也可以得到分离,整个分离过程可在5-20分钟内完成。图4. CE-LIF方法对单抗药糖基分析的电泳图毛细管电泳技术在重组蛋白类药物分析中的应用重组人促红细胞生成素(rhEPO)是高度糖基化的蛋白药物。糖基化的异质性导致了多种变异体的存在。采用CZE方法可对EPO的变异体进行分离和定量,该方法已经成为欧洲药典中EPO变异体分析的标准方法。此外,CIEF方法也可以实现对EPO中各个变异体的高分辨分离,不但可以获得与CZE方法相同的变异体数目和定量信息,还可以提供每个变异体的精确的等电点数值。在对不同来源的EPO产品与参考品的比较中,可使用等电点对变异体进行鉴定。图5. CZE方法对EPO变异体的分析重组人生长激素(rhGH)的纯度及异质性分析中,CZE方法分离度高、定量准确,也已为欧洲药典所采用。图6 CZE方法对rhGH的电荷异质性分析总结在蛋白药蓬勃发展的今天,毛细管电泳技术以其分辨率高、模式多等优势,在蛋白药研发和质控的过程中起到了不可或缺的作用,被越来越多的企业和监管机构所认可,用于蛋白药的纯度、等电点及电荷异质性、糖基等分析中。随着蛋白药物、细胞/基因治疗以及新型疫苗等生物制品的不断发展,毛细管电泳技术将会具有更大的应用空间,在蛋白、核酸及病毒颗粒等分析中,发挥它的优势,提高生物制品的质量控制标准。
  • 荧光定量PCR之RNA提取及质量评估
    分子生物学研究对提取RNA要求较高,纯度高、完整性好、含量高的RNA是获得实验成功的关键和前提。小编给各位小伙伴总结了以下RNA提取常见问题及RNA质量的评估方法:常见的RNA提取方法有异硫氰酸胍-苯酚法(Trizol法)、离心柱法和磁珠法。Trizol法是动物组织及动物细胞总RNA提取最常用的方法。Trizol法裂解能力较强,尤其适合小样本及特别难提取的组织,如皮肤,动物结缔组织等总RNA的提取;另外Trizol作为一种通用型的裂解试剂,还可以用于植物组织、细菌、真菌等组织的提取。离心柱法是一种十分稳定的RNA提取方法,电泳条带较为均一,但分子量较小的RNA会被过滤掉。磁珠法是使RNA与纳米磁珠结合,在磁场作用下,磁珠-核酸复合物与液体分离,再把核酸从磁珠上洗脱下来。对于含多糖多酚的植物组织如油茶、茶叶、油菜等还可以使用CTAB法进行总RNA的提取。那么在RNA提取过程中如何防止RNA降解,保证RNA质量?如何避免RNA降解?1.避免RNA酶的产生:A 、避免内源性RNAase:内源性RNAase是造成RNA降解的最重要原因。收集样本时,内源性RNA酶释放,降解RNA,降解速度与酶含量和温度有关,所以收集样本时必须马上进行内源RNA酶的失活。内源性RNAase失活方法:①迅速研磨破碎后加入裂解液中保存;②立即切成小块投入液氮中保存;③使用RNAlater保护剂等。B、避免外源性RNAase:使用无RNase的塑料制品和枪头,玻璃器皿要消毒避免交叉污染,注意:戴帽子、戴口罩、橡胶无菌手套,在清洁灰尘少的试验台提取。2.提高RNA提取效率:A 、组织RNA提取:选用新鲜组织,这样RNA提取的效果比较好;如果不是新鲜的(最好在半年之内,-80℃或者液氮中冻存的)组织,注意不要反复冻融,从冰冻状态拿到0-4℃,待组织解冻后,用DEPC泡过的剪刀剪一小块组织,称重后,放到预冷的匀浆器中,进行匀浆处理。注意:速度不要太快,要有间隙,否则由于摩擦产热,RNA遇热会加速降解。如果一次做多个标本的RNA提取,也要这样做,更不能急。后面的步骤和细胞RNA提取一样。B、培养细胞的RNA提取:贴壁细胞,需要先用胰酶消化后,然后收集到离心管中,离心,去上清然后用PBS多洗2-3次,以去除多余的胰酶。悬浮细胞,直接用吸管或者加样枪吹打,以使细胞基本可以被吹下来。然后离心去上清,不需要用PBS洗。如何确认RNA质量的好坏?1. RNA溶液纯度的检测:RNA溶液在280、320、230、260nm下的吸光度分别代表了核酸、背景(溶液浑浊度)、盐浓度和蛋白等有机物的值。一般我们通过OD260/OD280的值来判断RNA纯度:OD260/280的值在1.9-2.1之间,认为RNA纯度较好;OD260/280的值小于1.8时,表明蛋白质杂质较多;OD260/280的值大于2.2时,表明RNA已经降解;注意:如果用TE溶液洗脱RNA,会使OD260/280的值偏大。2. RNA完整性的检测:1)通过琼脂糖凝胶电泳检测28s和18s条带,28s条带宽度为18s条带的两倍;2)通过色谱方法检测,RIN值:28s/18s为1.8-2.0,表明RNA完整性较好,基本无降解发生。RNA电泳带型的特征:☑RNA应该呈现出3条rRNA带。分别是5、18、28SrRNA条带。☑28s亮度是18s亮度的一倍,其他比例关系均提示RNA有一定程度的破坏。☑不能有多的带出现,出现多的带有两个可能:一是DNA污染带 二是rRNA破坏断裂带。☑rRNA之间可以看到很淡的、雾蒙蒙的mRNA拖带。☑ 琼脂糖凝胶被RNAase处理后电泳带基本消失,没有明显的、边缘清晰的带残留(如果有残留就是明显的DNA污染,而且是很大量的 DNA污染。参考文献:[1]Vermeulen J, De Preter K, Lefever S. Measurable impact of RNA quality on gene expression results from quantitative PCR[J]. Nucleic Acids Res 39 2011 :e63.Azure Cielo™ 实时荧光定量PCR系统Azure Cielo™ 实时荧光定量PCR系统来自于美国Azure Biosystems公司,配备高品质温度模块,采用光纤和CMOS的检测系统,高能LED的激发,提供高灵敏和可靠的数据。▲ Azure Cielo™ 实时荧光定量PCR系统
  • 中科院生态环境研究中心在毛细管电泳-单分子成像分析研究中取得重要进展
    单个DNA分子不连续运动成像揭示场强变化的等速电泳动力学  中国科学院生态环境研究中心环境化学与生态毒理学国家重点实验室汪海林课题组在高灵敏分析的基础研究方面取得重要进展。他们利用先进的单分子成像技术研究并揭示了独特的等速电泳聚焦和分离的机理,其有关“DNA单分子不连续运动成像揭示场强变化的等速电泳动力学”的研究发表在国际著名化学期刊《美国化学会志》(J. Am. Chem. Soc. 2013, 135, 4644 - 4647)上。  带电组分在均一和非均一电场中的运动是电泳应用于化学、物理学、生命科学以及新兴的纳米科技领域的基础。目前,人们对带电组分在均一电场中的运动已经有了充分的认识,而对其在非均一电场中运动的了解却有限。事实上,通过巧妙设计非均一电场,可实现其它技术难以分离的超大DNA分子(80 kb) 的分离和多种分析物的高倍浓缩(可达百万倍)。因而,认识非均一电场中带电组分的运动机制对发展高灵敏的生物分子分析技术和方法具有特殊意义。尽管非均一电场的使用已有百年历史,但对于其形成机理的认识由于存在技术瓶颈而踯躅不前。  为了解决这一学科难题,汪海林课题组通过改造全内反射荧光显微成像仪器,首先实现了毛细管电泳-单分子荧光成像分析。在此基础上,以毛细管等速电泳(cITP)作为非均一电场模型,对流经毛细管检测窗口处单个DNA分子实时成像。由于每一幅像记录了单个DNA分子在50 毫秒内的运动轨迹,因此可以计算出每一时间点DNA单分子的运动速度。而DNA运动速度的大小直接与电场强度相关,从而可获得毛细管中电场强度的动态分布信息。通过研究电场强度的实时变化,揭示了电渗流存在下等速电泳的动力学,并首次提出了三区带模型,突破了传统二区带模型的局限。利用这一研究成果,他们发展一种新颖的DNA单分子聚焦方法,实现对极低浓度下随机分布的、难以检测的单分子成像,可检测出4´ 10-17mol/L DNA分子。  在这项研究工作中,汪海林课题组创造性地利用单分子成像技术测定电场强度的分布,提供了一种全新的非均一电场研究方法,这对发展基于电泳分离的高灵敏生物分析技术和方法具有重要意义。  该工作得到了国家杰出青年基金、国家973计划、重点实验室等的支持。
  • 毛细管电泳-质谱技术在手性化合物分离分析中的研究进展
    手性是自然界和生命体的基本属性之一,诸如生物结构中的核酸、蛋白质及糖类等都具有手性。目前绝大多数药物都是以手性形式存在,这些药物在生命体内的药理活性、代谢作用和速率及毒性等方面均存在显著差异,比如一种对映体有活性,而另一种无显著的药理活性,甚至有毒副作用或可发生拮抗作用。除了旋光性上的差异,手性药物具有相同的物理和化学性质,故对其分离分析一直都是药物分析、分离纯化领域研究的重点和难点。新药的研发和应用亦需要研究人员继续开发新的高效手性分析方法,以实现高选择性和高灵敏度的手性化合物定量和定性分析。高效液相色谱-质谱(HPLC-MS)具有较高的灵敏度和重现性,是目前手性药物分离分析的主要方法。然而,HPLC-MS需要昂贵的手性柱和与MS兼容的色谱柱流动相,而且手性色谱填料的柱效和拆分能力仍有待提高。毛细管电泳(CE)技术凭借其高效、低样品消耗、分析快速、分离模式多样化等诸多优势,已经发展成为手性分离研究领域极具吸引力和应用前景的分析方法之一。紫外可见检测器(UV-Vis)是CE最常用的检测器,但是毛细管的光程长度较短,导致灵敏度较低,因此难以满足生物样品中痕量手性化合物的分析要求。激光诱导荧光检测器(LIF)可以提高检测的灵敏度,但是只适用于本身带有荧光或被荧光标记的物质。而毛细管电泳-质谱联用技术结合了CE的分离效率高、分析速度快、样品消耗低以及MS的高灵敏度和强结构解析能力,近些年来在蛋白质组学和代谢组学等领域发挥了重要作用。CE杰出的手性拆分能力与MS优势的结合,亦使CE-MS成为实现手性化合物高效分离分析的完美组合,尤其是在复杂生物基质中手性化合物分析的灵敏度和分辨率方面,为药物、医学以及食品科学等领域重要手性分子分析提供了新视角。手性CE-MS联用技术,在一次分析中能同时得到样品的迁移时间、相对分子质量和离子碎片等定性信息,解决了实际样品中未知手性化合物(包括无紫外吸收基团或荧光基团的手性化合物)的识别问题,在减少生物样品基质效应的同时,可以对多组手性对映体实现高通量分析。在过去的十几年里,基于不同CE-MS分离模式的高性能手性分析体系层出不穷,并成功应用于医药、生物、食品和环境科学等领域的手性化合物分析中。这篇综述着重评述了电动色谱-质谱(EKC-MS)、胶束电动色谱(MEKC-MS)和毛细管电色谱-质谱(CEC-MS)手性分离模式从2011年到2021年的最新发展和应用。综述介绍了CE-MS各种手性分析模式下的分离原理、手性选择剂以及在医药等领域中重要手性化合物的分析应用,并讨论了不同手性分析模式的局限性。最后总结了CE-MS联用模式在手性化合物分离分析中的应用前景。相比于广泛应用的HPLC-MS, CE-MS凭借其高效率、低消耗、高选择性、分离模式多样化等诸多优势,已发展成为手性分析领域应用前景广阔的分析方法之一,并且已成为HPLC-MS等其他经典手性分离方法的一个强有力补充技术。目前CE-MS手性分析的研究挑战之一是实现快速和超灵敏的手性分析。采用基于短毛细管的快速毛细管电泳(HPCE)结合在线样品富集有望解决这个难题。此外,CE-MS的不同手性分析模式大多数采用的是三管设计的鞘状流动界面,灵敏度较低。新进研发的新型界面技术,如通过微瓶辅助的界面流动、无套多孔尖端的设计以及CE-MS离子源的引入等,在提高手性化合物分析灵敏度方面显示出巨大应用前景。另一方面,开发同时对多种手性药物进行对映体分离、检测和定量的CE-MS手性分析方法,也是目前研究的重点和难点。这些研究将对开发制药工业中的通用方法和高通量分析生物样品中的手性药物及其手性代谢物具有重要意义,对手性药物和代谢物的药物-药物相互作用和毒性研究也具有指导价值。EKC-MS和MEKC-MS应用中的手性选择剂具有多样性,使其在新药开发和药物质量控制、药代动力学以及药效学研究中具有巨大的潜力。进一步开发MS友好、绿色和高选择性的手性选择将拓宽待分离手性化合物的应用范围。目前,CEC-MS手性分析研究中,研究者更多致力于开发用于整体柱或填充柱的新型毛细管手性固定相。使用功能化纳米颗粒增加CEC手性柱表面积以及CE-MS的微型化微芯片设备的研发,目前仍是尚未充分探索的领域,尤其在实际应用方面与相对更加通用的手性分离模式相比仍有较大差距。文章信息:色谱, 2022, 40(6): 509-519DOI: 10.3724/SP.J.1123.2021.11006迟忠美1, 杨丽2*1. 渤海大学化学与材料工程学院, 辽宁 锦州 1210132. 东北师范大学化学学院, 吉林 长春 130024
  • 赛默飞推出采用最新毛细管电泳技术的遗传分析系统
    p  5月22日,赛默飞世尔科技宣布推出最新的毛细管电泳(CE)系统,该技术主要是为Sange测序和片段分析提供低通量、cartridge-based系统。Applied Biosystems™ SeqStudio™ 遗传分析系统可用于肿瘤学研究、基因组编辑、物种鉴定和人体细胞系鉴定等应用,能够支持日益增长的追求经济性和易用性的CE平台的需求。br//pp style="text-align: center "img src="http://img1.17img.cn/17img/images/201705/insimg/c04800fe-65d7-4d53-b5b4-49dbca56fd71.jpg" title="未标题-1.jpg"//pp style="text-align: center "SeqStudio遗传分析系统/pp  新的SeqStudio遗传分析系统采用独特的一体式盒式cartridge,结合毛细管阵列,聚合物储存器和阳极缓冲液,极大地简化了实验准备和实际操作时间。此外,该系统其他创新功能允许客户访问个性化协议,直观的触摸屏和连接到Thermo Fisher Cloud,可用于远程设置和监控以及轻松的数据分析和协作。/pp  “采用CE系统的Sanger测序是40周年庆典推出的新品,是测序科技的金标准。帮助发现新的生物学发现,并在2003年用于完成人类基因组计划。” 赛默飞世尔科技公司遗传分析副总裁兼总经理Kim Kelderman说。“SeqStudio遗传分析仪是一款为研究人员提供真正即插即用功能的智能和先进系统。/pp  此前,SeqStudio遗传分析系统已经在北美、欧洲、中东、非洲、日本和中国地区选择部分用户使用,在该系统上已经有超过2000个组合的运行结果。该系统将于2017年下半年向全球用户供应。/pp  “我积极推荐新的CE系统,它降低了毛细管电泳平台的运行成本,并且容易操作。” MRC Holland首席执行官Jan Schouten表示。“该系统可以处理一个完整的微量滴定板样品,并具有足够的容量用于中低通量遗传实验室。”/pp  SeqStudio遗传分析系统将在2017年5月27日至30日在丹麦哥本哈根举行的年度欧洲人类遗传学协会(ESHG)大会上首次展出。/pp  更多信息,请访问www.thermofisher.com/seqstudio。/ppbr//p
  • GS-Smart小型自动凝胶染色仪与台式水平脱色摇床在CBB染色法中的应用对比
    GS-Smart小型自动凝胶染色仪与台式水平脱色摇床在CBB染色法中的应用对比 台式水平脱色摇床是生物学实验室常见的仪器设备,常用于普通凝胶电泳条带固定、考马斯亮蓝(CBB)染色脱色、硝酸银染色、蛋白质免疫印迹(Western Blot)、细胞培养和放射自显影等实验中。一般的台式水平脱色摇床主要是通过调节定幅载具的摆动频率,从而控制样品在溶液中的摆动快慢,这既是该仪器的基本工作原理,也是她在以上实验中主要发挥的作用。在普通考马斯亮蓝染色、脱色实验中,台式水平脱色摇床是科研工作者们经常会用到的设备。一般是设定工作池的摇摆频率后,先后加入CBB染色液、脱色液,使摇床工作池持续摇摆,再置入蛋白凝胶使其在摇摆的液体中充分浸润洗涤,从而实现染色脱色。但一般的台式水平脱色摇床除了工作池的摆动频率可调外,没有其他参数能设置,虽然某些型号摇床还增加了定时功能,但也无法设置自动完成复杂的步骤。因此,前期进液、换液和排液都需要实验人员手动操作,另外,染色、脱色时间也只能靠实验人员自己把握。再者,台式水平脱色摇床的工作池一般裸露在外,摇摆过程中,有可能溅出溢出CBB染色液、脱色液,还有可能挥发出有毒化合物。这样不仅容易造成污染,甚至可能产生安全隐患,进而危害实验人员的健康。相比之下,鼎昊源GS-Smart小型自动凝胶染色仪无论在功能上、设计上还是外观上均领先台式水平脱色摇床,例如:1.智能编程功能:GS-Smart内置3种标准的染色程序,可编程存储47个自定义程序,可以轻松实现进液、换液、出液、定时摇动和废液回收等步骤,无人值守,让实验全程自动完成,这将为那些还在使用传统台式水平脱色摇床做CBB染色脱色实验的科研工作者们节省大量时间精力。2.可封闭可定制的染色池:GS-Smart染色池可封闭,既能防止液体溅出溢出、阻隔挥发物质,还可选择并定制各种尺寸。有些科研工作者为实现&ldquo 快速&rdquo CBB染色脱色,习惯将CBB染色液或脱色液加热至沸腾然后进行染色脱色处理,而高温状态的液体会加速挥发甲醇乙酸等化合物,如果此时使用台式水平脱色摇床,无疑具有一定的安全隐患。3.机身与储液瓶一体化设计:该设计属于国际首创,与市场同类产品相比,减少了分散在外的瓶瓶罐罐,从而整机占地面积与普通台式水平脱色摇床相当。不仅节省了实验室空间,同时也美化了整体外观。 综上,在CBB染色脱色实验应用方面,鼎昊源GS-Smart小型自动凝胶染色仪无论在功能上、设计上还是外观上均全面领先于台式水平脱色摇床。事实上,GS-Smart从2013年春季推出之初,就定位成了一款为考马斯亮蓝染色脱色实验而生的仪器,她的最终使命是全面取代CBB染色脱色实验中的台式水平脱色摇床,从而让所有CBB染色脱色自动进行! 本文关键词:摇床,脱色摇床,水平脱色摇床
  • “掌上HSCE,把电泳捧在手心里”——浙大团队在微型分析仪器研制方面再创新高
    p  近日,浙江大学方群教授研究组研制出一台可完全手持并独立工作的高速毛细管电泳分析仪,这是迄今为止国际上尺寸最小的基于激光诱导荧光检测的高速毛细管电泳分析仪,该成果以“A Low-Cost Palmtop High-Speed Capillary Electrophoresis Bioanalyzer with Laser Induced Fluorescence Detection”为题发表在学术期刊“SCIENTIFIC REPORTS”上,并得到separationNOW.com网站的亮点报道。/pp style="text-align: center"img src="https://img1.17img.cn/17img/images/201808/insimg/e0f43721-a7ac-462c-94aa-a0fb41e09f23.jpg" title="1_副本.jpg"//pp style="text-align: center "strong掌上高速毛细管电泳生化分析仪外观/strong/pp  高速毛细管电泳(High-speed capillary electrophoresis, HSCE)技术自1991年被提出以来,因其快速、高效又耗样量少的特点,在分析化学领域得到快速发展。近年,即时检测(Point-of-Care Testing, POCT)、环境监测、现场勘查和空间探测等领域的发展对分析仪器的微型化和自动化水平提出了更高的要求,借助于微流控技术的发展、电子元件的集成,小型化也成为HSCE系统的一个重要发展方向。/pp  span style="color: rgb(255, 0, 0) "strong麻雀虽小五脏全,极简策略显神通/strong/span/pp  这款掌上HSCE分析仪整体尺寸仅为90 mm× 75 mm× 77 mm(长× 宽× 高),重300 g,成本只有约3500元。体积虽小,但内部却集成了缺口管阵列自发进样模块、毛细管电泳模块、正交型激光诱导荧光检测模块、高电压模块及电子电路控制模块这五大部分。在该仪器研制过程中,采用了“极简微型化”的策略,即基于对仪器分析原理的本质化理解和前期基础研究的成果对仪器进行最大程度的简约化系统设计,保留核心功能,删减暂不必要的次要功能,同时充分借用其他学科领域内低成本的商品化元器件构建仪器系统,达到简化系统结构、缩小仪器体积、大幅降低仪器成本的目的,同时在分析性能上仍可达到与常规分析系统相当的水平。/pp  该研究组之前发展的具有自主知识产权的缺口管阵列自动进样技术、皮升级平移自发进样技术、斜45° 检测正交型激光诱导荧光检测技术等,为微型化HSCE分析仪的研制提供了坚实的基础。而极简微型化策略和低成本元器件的采用,以及对仪器电子电路的最大程度的集成与优化共同促进了这款微型化仪器的出台。利用在淘宝网上购买的数码相机自动对焦模块中使用的微型平移台,以及200 μL离心管,即可构建一个自动化的缺口管阵列自动进样系统,体积仅为传统平移台系统的百分之一,其移动距离可达到17 mm,定位精度达到10 μm,而其成本仅为20元。/pp  在激光诱导荧光检测模块研制过程中,虽然遵从极简微型化策略而使用了小体积的405 nm激光二极管光源、光电二极管检测器和聚焦透镜,但通过采用独特的斜45° 正交型光路以及对系统的深入优化和挖掘潜力,仍能保留较高的仪器检测性能,在S/N=3的条件下,对荧光素纳的检出限达到1.02× 10-9 M,足以与部分使用光电倍增管的常规激光诱导荧光检测器相媲美。此外,通过采用自主设计和加工的整体型光路框架可将激光光源、激光聚焦透镜、毛细管支架与对准装置、荧光收集透镜、荧光滤光片、光电检测器等元件集成于一体,使得整个检测模块的体积仅为44 mm× 42 mm× 40 mm。/pp  在毛细管电泳分离部分,利用缺口管进样系统和平移自发进样方法可实现90 pL的微体积进样,即不需采用昂贵和加工复杂的电泳芯片,只采用普通的短毛细管即可完成高速毛细管电泳分离操作。同时,利用微型化的高电压模块(22 mm× 22 mm× 22 mm),可提供0 至 - 6000 V 的电泳电压。/pp  熟悉分析仪器研制的人都知道,要实现分析仪器的微型化,仪器的电子控制系统是关键难点之一,电子控制系统需要实现荧光信号的实时采集和处理、图谱的实时显示及数据的保存。更为重要的是,要实现真正的掌上型应用,整个系统需要由小体积的电池供电,而分析仪中的激光二极管、微型平移台和电泳高压模块对电池来说均是耗电的大户。因此,系统除了选用超低功耗嵌入式微控制器实现了控制系统的集成化外,在降低功耗方面还做了很多努力,最终成功实现了仪器的电池供电,单块容量为1150 mA的锂电池可提供10小时以上的连续工作时间。/pp style="text-align: center"img src="https://img1.17img.cn/17img/images/201808/insimg/e0cc5945-dcd7-4c82-9acb-302624aceeb3.jpg" title="2_副本.jpg"//pp style="text-align: center "strong掌上高速毛细管电泳生化分析仪内部结构照片/strong/pp  span style="color: rgb(255, 0, 0) "strong分离模式多样化,仪器应用尤可期/strong/span/pp  该掌上HSCE分析仪以3.8 cm的毛细管作为分离通道,仅用7秒的时间即可完成3种氨基酸的电泳分离,在如此短的时间内不会形成明显的焦耳热效应,电泳分离可获得约1 μm 塔板高度的高分离效率。这台掌上HSCE不仅适用于氨基酸的毛细管区带电泳分离,也实现了手性氨基酸(D、L-亮氨酸和D、L-天冬氨酸)的胶束电动毛细管色谱快速分离,还实现了5 个DNA片段、3个蛋白质的毛细管凝胶电泳分离。该仪器还被应用于KRAS原癌基因诊断中的PCR产物和酶切产物实际样品的分析。电泳分离图谱直接显示在仪器外壳上的液晶显示屏上,并同步保存在MicroSD数据存储卡上,也可以通过蓝牙模块无线发送到手机或者平板电脑上进行实时监测。/pp style="text-align: center"img src="https://img1.17img.cn/17img/images/201808/insimg/d29702a5-d745-4964-87df-547353e8c955.jpg" title="3_副本.jpg"//pp style="text-align: center "strong掌上高速毛细管电泳分析仪在线分离结果照片/strong/pp  纵观当下的需求和这款掌上HSCE分析仪的性能特点,该仪器作为一个起点,将有助于开拓HSCE更多新的应用领域:几分钟的DNA片段分离有望取代繁琐耗时的平板凝胶电泳,在广大生化实验室中得到普及 用价廉易得的低成本毛细管取代电泳芯片,自动化的操作和四按键的便捷控制成为走进家庭的敲门砖,进而实现个体化健康管理和疾病预防 电池供电超长待机,这是一款行走的HSCE,借此进行床旁检测、传染病监控等指日可待。/pp  该论文的第一作者为浙江大学化学系微分析系统研究所潘建章副研究员、方盼博士和方晓霞博士,通讯作者为浙江大学化学系微分析系统研究所方群教授。特别感谢国家自然科学基金(21435004,21227007和21027008等)对该项工作的支持!/pp  SCIENTIFIC REPORTS文章链接:/pp  https://www.nature.com/articles/s41598-018-20058-0/pp  separationNOW.com报道链接:http://www.separationsnow.com/details/ezine/161ada26e8d/Cheap-analysis-in-the-palm-of-your-hand-A-miniature-CE-device-made-with-off-the-.html/p
  • 毛细管电泳电化学发光微型综合分析仪研制成功
    由中科院长春应化所完成的中科院科研装备研制项目“毛细管电泳电化学微型综合分析仪”,12月25日在长春通过了以张玉奎院士为首的专家组验收。专家组认为,该仪器性能良好、灵敏度高、稳定性强、国内外目前尚无该种仪器。  毛细管电泳技术和微流控芯片分析方法由于其分别具有分离效率高、生物兼容性好、利于微型化、集成化等特点而被广泛应用于分析科学领域,日益引起国内外的广泛关注。而将二者有机结合,优势互补,搭建一个便捷式经济型多功能生物分析平台??毛细管电泳电化学发光微型综合分析仪,进一步拓展其分析对象和应用范围,更是国际电分析化学领域竞相研发的重要前沿方向。  中科院长春应化所汪尔康院士和徐国宝研究员等聚焦这一重要的国际前沿发展方向,在中国科学院科研装备专项的支持下,于2007年2月开始了“毛细管电泳电化学发光微型综合分析仪”的研发。研发中,他们注重发挥在毛细管电泳检测技术和微流控芯片分析方法中的积累和优势,创新性地将电化学发光、电化学等检测技术与毛细管电泳、微流控芯片等分析工具有机结合在一起。在此基础上,由西安瑞迈分析仪器公司配合,进一步微型化、集成化,研发出具有我国自主知识产权的毛细管电泳电化学发光微型综合分析仪样机,属国际首创。  与此同时,他们还结合该分析仪器的研发,研制出5种具有生物应用前景的电化学发光探针,并应用于生物分子检测分析 建立了一系列固定电化学发光探针的新方法,并发展出相关电化学发光固体检测器。这些创新成果,为研制的样机在科学研究及临床中推广应用奠定了重要的基础。  该仪器是由多通道数据采集分析仪、多功能化学发光监测仪、数控电化学分析恒电位仪、数控毛细管/芯片电泳高压电源等控件所组成的专用系统 系统成功构建了基于WINDOWS操作系统的多窗口、多界面分析化学数据采集与处理平台,实现了多种控制部件的系统连接与控制 在硬件设计中,系统采用了分布式微处理器结构,集成了多个通用或专用处理器管理各控制部件,使系统具有了很高的灵活性和可靠性 由于采用了较为合理的总线连接方式和订制了完善的通讯协议,整个系统具有硬件简单,扩展方便,功能齐全和便于组合等优点。系统中的所有部件既可组合使用,也可单独作为具备相应功能的单项仪器使用。在软件设计中,充分考虑了多参数分析的特点,设计了完善的同步测试功能 针对化学动力过程测试的特点,系统还开展了具有独特功能的以谱图加亮区为主的谱图处理及动态背景扣除等功能 特别设计的样品测试界面,则可使批量样品测试变得简单容易。  该仪器的研发成功,丰富了基础科学的研究手段,为蛋白质、DNA、细胞、免疫等前沿领域的科学研究提供了一个新的多功能分析平台,也为一些重大疾病的早期诊断和医治提供了有力的支撑,是我国电分析化学领域取得的又一重要的创新性成果。
  • 北京六一发布北京六一DYCZ-20H型 DNA序列分析电泳仪新品
    ☆多用途,高通量,优良的性价比☆一次电泳加样量 204 个,可用排枪☆多板制胶,一致性强☆开盖断电,保证安全☆专利设计,全优质 PMMA 制造,晶莹剔透产品特点1. 上样量达到 204 个且可用排枪加样。2. 可用于引物筛选,重复性好,省时省力。3. 上槽缓冲液 800ml, 下槽缓冲液 900ml, 可满足两块胶电泳的缓冲能力,与传统仪器相比省近一倍缓冲液,省去了每次电泳后调节 PH 值的繁琐工作。产品规格外形尺寸(mm):408×160×167试样格:102 齿,厚 1.0mm,2 条凝胶面积(mm):316×90创新点:☆多用途,高通量,优良的性价比☆一次电泳加样量 204 个,可用排枪☆多板制胶,一致性强☆开盖断电,保证安全☆专利设计,全优质 PMMA 制造,晶莹剔透北京六一DYCZ-20H型 DNA序列分析电泳仪
  • 安捷伦推出自动化平行毛细管电泳系统新品 可大幅提升蛋白分析效率
    1月17日,安捷伦宣布在第23届 PepTalk 会议期间正式发布用于蛋白质分析的新型自动化平行毛细管电泳系统——Agilent ProteoAnalyzer系统。这款新平台简化并提高了复杂蛋白质混合物的分析效率,而这项分析则是制药、生物技术、食品分析和学术界分析工作流程的核心。第 23 届PepTalk会议于当地时间1月16日至19日在美国加利福尼亚州圣地亚哥举办。毛细管电泳 (Capillary Electrophoresis ,简称CE)可提供快速的高分离度分析,且样品消耗量极少,因此已成为蛋白质分离不可或缺的工具。生物制药公司对单克隆抗体以及具有潜在治疗意义的其他蛋白靶点的兴趣日益扩大,因此推动了CE解决方案需求的预期增长。用于蛋白质CE-SDS分析的Agilent ProteoAnalyzer系统外观Agilent ProteoAnalyzer系统具有更高的效率、多功能性和可靠性,尤其适用于蛋白质QC工作流程。自动执行分离、数据处理和简化前处理步骤,从而简化分析工作流程,提高效率,降低培训和相关人力成本。该系统还可以分析从粗裂解物到纯化组分的多种样品类型。它可以在单次运行中分析不同大小和类型的蛋白质,并始终提供准确的结果,减少了耗时且昂贵的重复分析。安捷伦副总裁兼生物分子分析事业部总经理Knut Wintergerst表示:“Agilent ProteoAnalyzer系统将蛋白质分析的效率、多功能性和可靠性提升至新的水平。自动化平行毛细管电泳可简化复杂混合物的分析,使从制药到学术界的各个领域均受益良多。兼具出色的精密度和可靠性,可降低人工成本,并改进分析工作流程。”安捷伦整合基因组学事业部产品经理 Kyle Luttgeharm 将于当地时间1月18日(周四)中午12:25在PepTalk 举办研讨会,主题为《了解 ProteoAnalyzer 系统:独树一帜的自动化蛋白质分析》。安捷伦是CE市场的领导企业之一,其自动化电泳系统广泛应用于核酸分析,如NGS QC和IVT RNA应用。安捷伦希望通过扩展适用于相关生物分子类别的ProteoAnalyzer CE产品组合,巩固其作为质量控制分析解决方案主要供应商的市场地位。
  • 生物学中的化学专家——百灵威!
    您看到的是神奇的生命现象,我们看到的是参与其中的化学反应;您看到的是鲜活的组织、细胞,我们看到的是珍藏在里面的化学元素;您看到的是美妙的蛋白电泳条带,我们看到的是错落有致的化合物;您看到的是氨基酸连接成多肽的奇妙历程,我们看到的是多个化学基团的催化重组。和您y样热爱生命科学,伴您勇闯科学难关,与您y起为生物学研究做出贡献!为您的工作提供更为专业的产品服务!十八年的创新发展铸就了有机化学行业的l导者,十八年的资源整合精细制造成就了业界金字招p,十八年的真诚沟通用心服务赢得了科研精英们的y致口碑!贴心的不只是产品,还有我们的价格&mdash &mdash 低至八折,持续两个月真诚回馈。(活动时间:2010年11月20日&mdash &mdash 2011年01月20日)产品编号英文名称中文名称CAS规格目录价折后价160975SDS, 99%十二烷基硫酸钠151-21-3100g500g¥261¥383 ¥209¥30620765SDS in pellets, 99%十二烷基硫酸钠151-21-3250g1kg¥362¥1013 ¥290¥810 166974Acrylamide, 99%丙烯酰胺79-06-1100g500g ¥192¥466 ¥154¥373 402847Bis-Acrylamide, 98% N,N-亚甲基双丙稀酰胺110-26-9100g¥260 ¥208 19148Brilliant Blue G 250考马斯亮蓝G-2506104-58-125g ¥405 ¥324 19149Brilliant Blue R 250考马斯亮蓝R-2506104-59-25g ¥263 ¥210 17096Ethidiumbromide, pure95%溴化乙啶1239-45-81g5g¥238¥958 ¥190¥766 149443Imidazole, 99%咪唑288-32-4500g¥589 ¥471 42145TCA, 99+%三氯乙酸76-03-9100g ¥337 ¥270 32687DMF, 99.8%N,N-二甲基甲酰胺68-12-2100mL¥394 ¥315 149332Glycine, 98%甘氨酸56-40-6250g1kg¥200¥528¥160¥422256725Tricine, 99%三(羟甲基)甲基甘氨酸5704-04-125g100g ¥300¥720 ¥240¥576 255989TEMED, 99%N,N,N' ,N' -四甲基乙二胺110-18-9100mL500mL ¥213¥520 ¥170¥416 288975CHAPS, 98%3-[3-(胆酰胺丙基)二甲氨基]丙磺酸内盐75621-03-31g5g ¥329¥1277 ¥263¥1020 415951DTT, 99% [for molecularbiology]二硫苏糖醇3483-12-31g5g ¥276¥679 ¥221¥543 168802EDTA-2Na, 99%乙二胺四乙酸二钠盐水合物6381-92-6250g1kg ¥302¥906 ¥242¥725 226162Tris, 99.5%三(羟基甲基)氨基甲烷77-86-1100g500g ¥247¥925 ¥198¥740S0596Sodium CholateC24H39NaO5361-09-15g ¥208 ¥166 23336Tween 20吐温209005-64-5250mL¥290 ¥232 27863Tween 80吐温809005-65-6250mL ¥254 ¥203 21568Triton X-100曲拉通X-1009002-93-1250mL1L¥278¥739¥222¥591 16379&beta -Alanine, 99%&beta -氨基丙酸107-95-9500g¥520 ¥416 B3473PMSF苯甲磺酰氟化物329-98-65g¥779 ¥701 20587Ammonium sulfate, for analysis, 99.5%硫酸铵7783-20-2250g ¥420 ¥336 19228PEG 6000聚乙二醇25322-68-31kg ¥792 ¥633 331686Iminodiacetic acid, 98% IDA(亚氨基二乙酸)142-73-4100g ¥240 ¥192 41574Nitrilotriacetic acid, 99%次氮基三乙酸139-13-9250g¥426¥340 13891Thiourea, extra pure, 99%硫脲62-56-6500g ¥368 ¥294 167691-Butanol, 99+%正丁醇71-36-3100mL ¥206 ¥164 14849Benzenesulfonamide, 98%苯磺酰胺98-10-2500g ¥901 ¥720
  • 药典委首次制定蛋白质组学分析标准,涉及色质谱、凝胶电泳等多种技术
    蛋白质组学是指在大规模水平上以蛋白质的生物多样性为基础,研究细胞、组织或生物体蛋白质组成及其变化规律、蛋白质翻译后修饰以及蛋白与蛋白之间相互作用等,从而揭示疾病发生、发展和药物治疗相关的规律与机制。随着质谱技术以及色谱与质谱联用技术的快速发展,蛋白质组学分析技术在未知蛋白质的鉴定、蛋白质结构的解析、靶向蛋白质定量、以及生物技术药物研发、质量控制和体内药代动力学研究方面应用越来越广泛。药典委拟制定《中国药典》蛋白质组学分析方法及应用指导原则,并于2024年2月20日发布公示稿(详见附件)并征求意见。该指导原则适用于蛋白质组学在蛋白质组成及其变化规律、蛋白质翻译后修饰以及蛋白与蛋白之间相互作用方面的分析研究,规范蛋白质组学分析方法建立,分析过程质量控制和数据分析,确保蛋白质组学分析结果的重复性与可靠性。蛋白质组学分析方法需要具备实用性强、多肽和蛋白的检测特性好以及合适的质控过程,保证分析结果的可靠性。同时蛋白质组学在操作过程中能够处理大量样品。蛋白质组学分析基本流程主要包括:1. 蛋白样品的提取,变性还原,酶解与多肽分离富集;2. 多肽的分析与鉴定;3. 数据分析。分离和富集技术:凝胶电泳和色谱技术分析与鉴定技术:质谱、二维凝胶电泳、X射线分析、核磁共振波谱和透射电子显微镜技术附件: 蛋白质组学分析方法及应用指导原则草案公示稿(第一次).pdf
  • 水平电泳仪金秋大促
    金秋开学礼,cleaver电泳系统福利促销第一弹!!!通用实验科技(中国)有限公司-英国cleaver水平电泳系统金秋十月大促销 促销日期:2018年10月16号-2018年11月1日为答谢新老用户一直以来对cleaver产品的信任和支持,在此金风送爽,丹桂飘香的金秋十月,我司对生命科学类实验室仪器-水平电泳系统现进行如下大力促销,cleaver水平电泳系统主要是用于核酸样本的快速检测,第一弹福利产品详情如下: multiSUB Mini水平电泳槽 multiSUB Midi水平电泳槽 multiSUB Choice水平电泳槽型号:MSMINIDUO 型号:MSMIDIDUO 型号:MSCHOICETRIO秒杀价:2300元/台 秒杀价:2500元/台 秒杀价:2700元/台 更多产品特点和细节可咨询客服:400-821-3360温馨提示:促销期间按照订单付款顺序发货,先到先得,售完即止,此促销活动全年仅此一次!!!莫失良机!!!公司背景通用实验科技(中国)有限公司(Labcare Scientific China Limited)是一家专注于通用实验室配件耗材、设备仪器和工程项目服务的高科技公司。我们依托团队在生命科学和化学分析仪器行业的专业背景以及在材料系统筛选和加工生产及质量管理领域丰富的经验,在欧洲、北美和亚太地区都设立了代表处。致力于专业、严格地筛选了大量国内外直接原厂生产商作为协议供应商,以委托制造式进行并实现全球采购。通过专业的库存和物流管理体系,致力于为目标地域的生命科学和化学分析实验室用户提供质优价廉的各种通用实验室配件耗材、仪器设备和服务。
  • 毛细管电泳专家莅临海能仪器,聚焦毛细管电泳仪国产化发展与推广
    毛细管电泳技术具有高效分离、快速分析、试剂和样品用量少、绿色环保、前处理简单等优势,并使分析化学研究应用从微升水平进入纳升水平。毛细管电泳技术在生物制药、临床医学、手性药物、食品饮料、环境分析、法医鉴定等领域具有广泛应用,是蛋白质、核酸、有机物的有效分析技术,也使单细胞及单分子分析成为可能,并有更多应用领域尚待开发。作为新型微量分析技术,其应用领域十分广泛。 2017年,海能仪器与欧洲DL公司签署战略合作协议,购买了“高效毛细管电泳仪”相关专利实施许可权及非专利技术、软件所有权等全部技术产权。2019年,海能仪器历时2年完成了毛细管电泳仪全部技术的国产化,并实现了国产毛细管电泳仪的批量化生产。为推动毛细管电泳技术的应用普及,加快国产毛细管电泳仪器的发展和应用推广,由北京理化分析测试技术学会主办,于2019年8月21至22日在海能仪器产业园举行了“毛细管电泳应用技术研讨会”。十余位长期从事毛细管电泳技术研究和应用的专家莅临海能,参加此次研讨会,就毛细管电泳技术的应用以及国产化仪器的发展与推广进行研讨交流。 专家一行详细了解了海能仪器全产业链的生产模式,参观了海能文化馆,核心部件事业部、电路板车间、精加工车间、模塑车间、钣金喷涂车间,了解海能仪器为提升科学仪器品质和水平所做出的举措,并对国产毛细管电泳仪的发展寄予厚望。 与会专家围绕毛细管电泳技术应用的热点和国产毛细管电泳仪的未来发展前景进行充分交流,分享技术经验,提出有益建议。希望海能毛细管电泳仪为相关行业的分析人员提供更多的选择和更好的服务。
  • 6项基因测序相关国标出炉 涉基因提取、纯化、捕获、高通量测序等
    p  近日,国家市场监督管理总局(国家标准化管理委员会)批准了501项国家标准。其中6项标准规定了包括strong核酸提取、核酸纯化、核酸检测、高通量测序、目标基因捕获等方法或试剂盒质量评价规范/strong。/pp style="text-align: center"img style="max-width: 100% max-height: 100% width: 600px height: 207px " src="https://img1.17img.cn/17img/images/201909/uepic/f1dcb8ec-9e38-452e-8fcf-83903cd80e93.jpg" title="微信图片_20190927151454.png" alt="微信图片_20190927151454.png" width="600" height="207" border="0" vspace="0"//pp  这6项标注分别是strong核酸检测试剂盒质量评价技术规范(标准号:GB/T 37871-2019)、个体鉴定的高通量测序方法(标准号:GB/T 37870-2019)、目标基因区域捕获质量评价通则(标准号:GB/T 37872-2019)、合成基因质量评价通则(标准号:GB/T 37873-2019)、核酸提取纯化方法评价通则/strongstrong(标准号:GB/T 37874-2019)、核酸提取纯化试剂盒质量评价技术规范(GB/T 37875-2019)/strong。/pp  strongspan style="color: rgb(0, 112, 192) "1. 核酸提取纯化试剂盒质量评价技术规范/span/strongstrongspan style="color: rgb(0, 112, 192) "(GB/T 37875-2019)/span/strong/pp  该标准由中国计量科学研究院、北京康为世纪生物科技有限公司起草,规定了核酸提取纯化试剂盒的评价指标和评价方法。/pp  评价指标:产量、纯度、完整度、重复性、再现性、批间差异和细菌内毒素残留。/pp  评价方法/pp  产量:紫外分光光度法、荧光法/pp  纯度:对多糖、蛋白质、多酚、异硫氰酸等残留杂质采用紫外分光光度法 对残留核酸采用琼脂糖凝胶电泳法检测。/pp  完整度:琼脂糖凝胶平板电泳法/pp  细菌内毒素残留:光度测定法/pp  仪器:微量紫外分光光度计、微量移液器、平板电泳仪、凝胶成像系统/pp style="text-indent: 2em "a href="http://(GB/T 37875-2019)(http://c.gb688.cn/bzgk/gb/showGb?type=online&hcno=3101B767728F9C1349E4CE2E431AF84E)" target="_self" style="color: rgb(255, 0, 0) text-decoration: underline "strongspan style="color: rgb(255, 0, 0) "详情请点击此处/span/strong/a/pp  strongspan style="color: rgb(0, 112, 192) "2. 个体鉴定的高通量测序方法/span/strongstrongspan style="color: rgb(0, 112, 192) "(标准号:GB/T 37870-2019)/span/strong/pp  标准结合核酸生物技术和高通量测序技术,对人体样本的STR位点和SNP位点进行鉴定。该标准由深圳华大生命科学研究院、中国计量科学研究院、深圳华大智造科技有限公司、深圳华大基因科技有限公司、深圳基因产学研资联盟起草。/pp  具体包括选择分子遗传标记位点、DNA提取、文库制备与DNA测序、位点分型及结果分析整个流程操作及仪器、试剂。/pp  仪器:PCR仪、高通量测序仪、离心机、漩涡震荡机、冰箱。/pp style="text-indent: 2em "a href="http://(http://c.gb688.cn/bzgk/gb/showGb?type=online&hcno=729A515C8246ADF310B3D2E94E843D24)" target="_self" style="color: rgb(255, 0, 0) text-decoration: underline "strongspan style="color: rgb(255, 0, 0) "详情请点击此处/span/strong/a/pp strongspan style="color: rgb(0, 112, 192) " 3. 目标基因区域捕获质量评价通则(标准号:GB/T 37872-2019)/span/strong/pp  该标准规定了基于液相捕获技术的目标基因区域捕获质量评价的术语、质量要求和评价方法。适用于高通量基因测序对人类基因组DNA样本进行目标基因区域捕获的质量评价,不适用于单分子测序。/pp  标准由深圳华大生命科学研究院、中国计量科学研究院、深圳华大智造科技有限公司、深圳华大基因科技有限公司、深圳华大临床检验中心有限公司、艾吉泰康生物科技(北京有限公司)起草。/pp  测序质量要求包括平均测序深度、测序覆盖度、捕获特异性。评价方法包括文库制备、高通量测序、数据过滤、序列比对。/pp style="text-indent: 2em "a href="http://(http://c.gb688.cn/bzgk/gb/showGb?type=online&hcno=D30847645D9A4E6B36D79257F8A46D74)" target="_self"strongspan style="color: rgb(255, 0, 0) "详情请点击此处/span/strong/a/pp  strongspan style="color: rgb(0, 112, 192) "4. 合成基因质量评价通则(标准号:GB/T 37873-2019)/span/strong/pp  该标准规定了合成基因相关的术语和定义、质量要求和评价方法。适用于100bp~20kb片段长度的生物基因合成。/pp  该标准由深圳华大生命科学研究院、中国计量科学研究院、深圳华大基因科技有限公司、青岛华大基因研究员起草。/pp  合成基因质量要求/pp  纯度:在pH值为7.0-8.5条件下,OD260/OD280在1.8~2.0,且OD260/OD230 2.0./pp  总量:一般不低于1μg./pp  完整性:电泳条带明亮大小与目标条带一致,且亮度集中程度高。/pp  序列一致性:与设定基因序列完全匹配/pp  仪器:紫外分光光度计、凝胶成像系统、电泳仪、微波炉、微量移液器/pp style="text-indent: 2em "a href="http://(http://c.gb688.cn/bzgk/gb/showGb?type=online&hcno=F6657ACDAB4112EDBC1E2B5455AC98C7)" target="_self"strongspan style="color: rgb(255, 0, 0) "详情请点击此处/span/strong/a/pp  strongspan style="color: rgb(0, 112, 192) "5. 核酸提取纯化方法评价通则(标准号:GB/T 37874-2019)/span/strong/pp  该标准由中国科学院北京基因组研究所、中国计量科学研究院起草。标准规定了核酸提取纯化方法评价的指标参数和评价方法。包括常规的新鲜动植物组织样本、细胞样本、血液样本、唾液样本和分辨样本等。/pp  规定的参数指标包括DNA完整度、总RNA 完整度、提取产量、DNA纯度、RNA 纯度。/pp  仪器:水平电泳仪、凝胶成像系统、微量移液器、荧光定量仪、紫外分光光度仪。/pp style="text-indent: 2em "a href="http://(http://c.gb688.cn/bzgk/gb/showGb?type=online&hcno=27E460FBEE9D8C005E88A14303347EAF)" target="_self"strongspan style="color: rgb(255, 0, 0) "详情请点击此处/span/strong/a/pp strongspan style="color: rgb(0, 112, 192) " 6. 核酸检测试剂盒质量评价技术规范(标准号:GB/T 37871-2019)/span/strong/pp  本标准规定了核酸检测试剂盒质量评价的术语和定义、评价要求、评价指标和评价方法等,适用于核酸检测试剂盒产品和服务,但不适用于高通量测序的核酸检测试剂盒。/pp  该标准由中国计量科学研究院、北京康为试剂生物科技有限公司、北京市医疗器械检验所起草。/pp  核酸检测试剂盒分为定量和定性检测试剂盒。定量检测试剂盒的评价指标包括线性、准确度、分析特异性、定量限、检出限、重复性。定性检测试剂盒的评价指标包括准确度、分析特异性、检出限、重复性。/pp style="text-indent: 2em "a href="http://(http://c.gb688.cn/bzgk/gb/showGb?type=online&hcno=A95B2D758535933A2FFBE427584A44AE)" target="_self" style="color: rgb(255, 0, 0) text-decoration: underline "strongspan style="color: rgb(255, 0, 0) "详情请点击此处/span/strong/a/p
  • SCIEX:生物制药质量控制体系中的毛细管电泳技术
    p style="text-align: justify "strong——生物制药质量控制体系中的毛细管电泳技术/strong/pp style="text-align: justify "  span style="font-size: 14px font-family: 楷体, 楷体_GB2312, SimKai color: rgb(0, 112, 192) "近年来,我国生物制药行业发展正如火如荼,研发投入、生产能力、产业集中度均进一步提升。同时,国家政策积极,出台了一系列优惠政策,为我国生物制药产业发展提供了良好的大环境。为了帮助来自生物制药领域的用户学习、了解生物制药分析表征、质量控制工作流程相关内容,仪器信息网特别策划了/spana href="https://www.instrument.com.cn/zt/swzybz" target="_blank"span style="font-size: 14px font-family: 楷体, 楷体_GB2312, SimKai text-decoration: underline color: rgb(192, 0, 0) "istrong“生物制药分析、表征与质量控制”专题(点击查看)/strong/i/span/aspan style="font-size: 14px font-family: 楷体, 楷体_GB2312, SimKai color: rgb(0, 112, 192) "并邀请strongSCIEX CE& Biopharma市场开发经理赵鹏/strong谈谈对生物制药分析、表征与质量控制的看法。/span/pp style="text-align: center"img src="https://img1.17img.cn/17img/images/201904/uepic/5c472894-74c3-419c-8122-b8b64f4c9dd6.jpg" title="赵鹏.jpg" alt="赵鹏.jpg" width="222" height="306" style="width: 222px height: 306px "//pp style="text-align: center "strongSCIEX CE& Biopharma市场开发经理 赵鹏/strong/pp style="text-align: justify "  span style="color: rgb(0, 112, 192) "strong仪器信息网:请介绍贵公司在生物制药分析、表征和质量控制方面仪器产品或产品组合?相比于同类产品,在技术上有哪些优势?/strong/span/pp style="text-align: justify "  strong赵鹏:/strong生物制药市场,作为公司最重要的一个发展行业,SCIEX在此领域内已经耕耘多年。作为最早开发毛细管电泳技术的企业,SCIEX针对毛细管电泳技术也做了很多的开发。最为广大生物制药用户熟知的是我们的拳头产品——PA800 Plus制药分析系统。该系统基于毛细管电泳的技术,具有强大的分析功能及易于使用的特性,可对蛋白纯度、电荷异构体和糖类进行自动化定量及定性分析。目前,已有上百家全球领先生物制药企业使用PA800 Plus,该系统为他们提供了对蛋白特性分析的自动化定量综合解决方案。而且PA800 Plus创新型的设计体系确保其操作的可靠性和持久性,是用户值得信赖的产品。/pp style="text-align: center"img src="https://img1.17img.cn/17img/images/201904/uepic/0a2ef248-ac20-4fa0-b599-4f3c322ba57a.jpg" title="02.png" alt="02.png" width="375" height="250" style="width: 375px height: 250px "//pp style="text-align: center "a href="https://www.instrument.com.cn/netshow/C317284.htm" target="_blank" style="font-size: 14px text-decoration: underline "span style="font-size: 14px "strongSCIEX PA800 PLUS 生物制药分析系统(点击查看仪器信息)/strong/span/a/pp style="text-align: justify "  糖谱分析是生物制药中非常重要的环节,其能够预测药物的有效性及帮助优化细胞培养条件,但是在生物制药分析和表征中的大规模克隆筛选和细胞培养中存在一些挑战,比如实验流程太复杂,数据分析太复杂且耗费时间等。为了帮助客户解决此问题,SCIEX在2018年推出了C100HT 生物制品分析系统,其具有12通道分离模块, 96孔样品板上样装置,每天最多可运行5块96孔板。软件中具有快速分析的可视化图谱,可以通过颜色编码来判断通过/失败追踪。C100HT 生物制品分析系统可以帮助用户进行高通量的糖基筛选和分析。/pp style="text-align: center"img src="https://img1.17img.cn/17img/images/201904/uepic/a2d172fe-b075-4b01-84be-851fc5f1f560.jpg" title="SCIEX C100 HT生物制品分析仪.jpg" alt="SCIEX C100 HT生物制品分析仪.jpg" width="370" height="370" style="width: 370px height: 370px "//pp style="text-align: center "a href="https://www.instrument.com.cn/netshow/C317286.htm" target="_blank" style="font-size: 14px text-decoration: underline "span style="font-size: 14px "strongSCIEX C100HT 生物制品分析仪(点击查看仪器信息)/strong/span/a/pp style="text-align: justify "  在生物样品表征中质谱已成为不可或缺的手段。如何提升质谱的灵敏度,降低离子抑制效应一直是人们关注的重点。SCIEX的CESI 8000 Plus 高效毛细管电泳分离和电喷雾离子化系统,将毛细管电泳(CE)的高效分离和超低速流的特性与电喷雾离子源(ESI)完美结合,从而显著提升灵敏度,降低离子抑制效应,为蛋白药物表征,蛋白组学鉴定,蛋白翻译后修饰分析和代谢组学指纹图谱表征等领域带来了全新的分析方法。/pp style="text-align: center"img src="https://img1.17img.cn/17img/images/201904/uepic/947b1f7e-1741-4b17-92df-49482c10efd7.jpg" title="Sciex CESI 8000 高性能电喷雾离子化系统.jpg" alt="Sciex CESI 8000 高性能电喷雾离子化系统.jpg"//pp style="text-align: center "a href="https://www.instrument.com.cn/netshow/C208633.htm" target="_blank" textvalue="SCIEX CESI 8000 Plus 高效毛细管电泳分离和电喷雾离子化系统(点击查看仪器信息)"span style="font-size: 14px "strongSCIEX CESI 8000 Plus 高效毛细管电泳分离和电喷雾离子化系统(点击查看仪器信息)/strong/span/a/pp style="text-align: justify "  相对于同类型的产品,SCIEX不仅在产品上具有很强的技术领先型,并有广大的用户基础,而且拥有一支单独的团队针对毛细管电泳技术进行技术应用的开发,新方法的研究,以及市场开发和售后保障等,能够快速响应客户的需求。/pp style="text-align: justify "  span style="color: rgb(0, 112, 192) "strong仪器信息网:您觉得国内企业在生物制药分析表征和质量控制方面存在哪些不足?/strong/span/pp style="text-align: justify "  strong赵鹏:/strong国内企业在生物制药分析表征和质量控制方面的不足主要有两点。/pp style="text-align: justify "  strong1、表征方法建立及数据解读能力较弱。/strong国内生物药企对于生物制药表征分析方法一般都是照搬国外方法,自己缺乏能力去进行新方法建立。特别是对于创新药的新特征,如何找到一种合适的表征方法,常常依赖于仪器制造公司。数据解读能力也比较薄弱,由于生物药的复杂性,常常会出现与预期不符的情况,如何从数据中找出样品相关信息,如何进行下一步的表征,也是国内生物药企需要提高的地方。/pp style="text-align: justify "  strong2、质量控制体系中细节的把控。/strong质量控制不仅包括常规的实验检测,规范性文件体系的建立,也包括细节上的把控。如有时候实验结果会受到环境、人员及检测平台的影响,前期制定的质量标准随着实验条件的改变有可能后期无法达到,所以在标准建立时就需要多环境,多人员,多方位的去测试。/pp style="text-align: justify "  span style="color: rgb(0, 112, 192) "strong仪器信息网:贵公司在生物制药分析、表征和质量控制方面可以提供哪些解决方案?/strong/span/pp style="text-align: justify "  strong赵鹏:/strongSCIEX研发生产的 PA800 Plus生物制药分析系统,为生物制药企业提供在一个平台上实现多重表征与应用的解决方案,该系统全面支持监管合规,可为用户从研发到质控的成功保驾护航。/pp style="text-align: justify "  SCIEX的分析结果值得信赖,用户可以借助SCIEX使用经行业和监管部门认可的 CE 技术对任意分子进行表征。这正是几乎所有商用治疗性单克隆抗体制造商都使用SCIEX CE 的众多原因之一。/pp style="text-align: justify "  另外,用户借助SCIEX可以全面实现对单克隆抗体的分析:如通过金标准 CE-SDS 方法在数分钟内完成纯度/ 异质性分析 通过屡获殊荣的快速糖基化分析技术进行糖基化分析 通过简单快速的 CZE 或高分辨率毛细管等电聚焦 (cIEF) 分析电荷异质性。与此同时,SCIEX可为用户提供单克隆抗体以外的多肽和蛋白质、质粒和核酸治疗性药物的表征方案。/pp style="text-align: justify "  SCIEX依托遍布全球的专家支持网络,在所有地区可持续提供世界一流的全球性支持,有效助力制药用户开发相应的治疗药物。/pp style="text-align: center "a href="https://www.instrument.com.cn/zt/swzybz" target="_blank"span style="color: rgb(192, 0, 0) "ispan style="text-decoration: underline "strong点击图片进入专题,给你“好看”/strong/span/i/span/a/pp style="text-align: center"a href="https://www.instrument.com.cn/zt/swzybz" target="_blank"img src="https://img1.17img.cn/17img/images/201904/uepic/c1a19013-a9fc-4e5d-9fea-ed1433e82a86.jpg" title="企业微信截图_20190426142814.png" alt="企业微信截图_20190426142814.png" width="551" height="228" style="width: 551px height: 228px "//a/pp style="text-align: center "span style="text-decoration: underline " /spanbr//pp style="text-align: center "strongspan style="text-decoration: none "关注span style="text-decoration: none color: rgb(0, 112, 192) "3i生仪社/span,找到更多生命科学干货/span/strong/pp style="text-align: center "img src="https://img1.17img.cn/17img/images/201904/uepic/68e891ee-311c-4b84-bb77-984298436020.jpg" title="小icon.jpg" alt="小icon.jpg"//p
  • 单分子成像技术揭示毛细管电泳机理
    p  中国科学院生态环境研究中心环境化学与生态毒理学国家重点实验室汪海林课题组在高灵敏分析的基础研究方面取得重要进展。他们利用先进的单分子成像技术研究并揭示了独特的等速电泳聚焦和分离的机理,其有关“DNA单分子不连续运动成像揭示场强变化的等速电泳动力学”的研究发表在国际著名化学期刊《美国化学会志》(J. Am. Chem. Soc. 2013, 135, 4644 - 4647)上。br//pp  带电组分在均一和非均一电场中的运动是电泳应用于化学、物理学、生命科学以及新兴的纳米科技领域的基础。目前,人们对带电组分在均一电场中的运动已经有了充分的认识,而对其在非均一电场中运动的了解却有限。事实上,通过巧妙设计非均一电场,可实现其它技术难以分离的超大DNA分子(80 kb) 的分离和多种分析物的高倍浓缩(可达百万倍)。因而,认识非均一电场中带电组分的运动机制对发展高灵敏的生物分子分析技术和方法具有特殊意义。尽管非均一电场的使用已有百年历史,但对于其形成机理的认识由于存在技术瓶颈而踯躅不前。/pp  为了解决这一学科难题,汪海林课题组通过改造全内反射荧光显微成像仪器,首先实现了毛细管电泳-单分子荧光成像分析。在此基础上,以毛细管等速电泳(cITP)作为非均一电场模型,对流经毛细管检测窗口处单个DNA分子实时成像。由于每一幅像记录了单个DNA分子在50 毫秒内的运动轨迹,因此可以计算出每一时间点DNA单分子的运动速度。而DNA运动速度的大小直接与电场强度相关,从而可获得毛细管中电场强度的动态分布信息。通过研究电场强度的实时变化,揭示了电渗流存在下等速电泳的动力学,并首次提出了三区带模型,突破了传统二区带模型的局限。利用这一研究成果,他们发展一种新颖的DNA单分子聚焦方法,实现对极低浓度下随机分布的、难以检测的单分子成像,可检测出4´ 10-17mol/L DNA分子。/pp  在这项研究工作中,汪海林课题组创造性地利用单分子成像技术测定电场强度的分布,提供了一种全新的非均一电场研究方法,这对发展基于电泳分离的高灵敏生物分析技术和方法具有重要意义。/pp  该工作得到了国家杰出青年基金、国家973计划、重点实验室等的支持。/ppbr//p
  • 毛细管电泳(CE)真的“没落”了吗?
    毛细管电泳技术(Capillary Electrophoresis, CE)又称高效毛细管电泳(HPCE)或毛细管分离法(CESM),是一类以毛细管为分离通道、以高压直流电场为驱动力的新型液相分离技术。是80年代初发展起来的一种新型分离分析技术,它是电泳技术与层析技术相结合的产物,现在所说的毛细管电泳技术(CE)是由Jorgenson和Lukacs在1981年首先提出,他们使用了75mm的毛细管柱,用荧光检测器对多种组分实现了分离;1984年Terabe等发展了毛细管胶束电动色谱(MECC);1987年Hjerten等把传统的等电聚焦过程转移到毛细管内进行,建立了毛细管等电聚焦(CIEF);同年,Cohen发表了毛细管凝胶电泳(CGF)的工作;1988&mdash 1989年出现了第一批CE商品仪器。  但是目前很多人认为,在众多的仪器中,CE好像不是那么的热门,甚至一些从事过CE研究的人员也认为该方法前途暗淡。  行内流行说法之一:CE近年越来越难发文章,人们的研究热情正在走下坡路。  行内流行说法之二:由于企业和检测机构用的少,学这个就业困难。不如HPLC、GC等有前途。  日前一名网友在仪器信息网论坛发帖称,鉴于以上的这些消极情绪,导致一些刚入门的新手们,无论他们起初是怀着多大的热情,随着时间的推移他们总会或多或少难以避免的被这些消极情绪所影响,人云亦云,失去钻研的热情。  毛细管电泳(CE)真的&ldquo 没落&rdquo 了吗?  以一个科研工作者的身份该,网友谈到,&ldquo CE方法已经被各种标准(包括中国药典、国标,甚至是欧洲标准)所收录,说明一直有企业或检测机构在应用该方法。而事实也正是如此,我自己所知道的就有好几家检测机构和企业配备有CE仪器。&rdquo   据小编了解,2010年版中国药典对盐酸头孢吡肟中N-甲基吡咯烷的检查,USP对盐酸罗哌卡因的对映体纯度检查,均采用毛细管电泳法测定。  另外,该网友谈到,任何仪器都只不过是一种方法媒介,如果你&ldquo 矢志不渝&rdquo 的认为CE没前途,那么你有没有对你的课题有一个整体的认识呢?又或者,你有没可能通过这个课题对这个领域有一个系统的认识?举个例子,比如你的课题是有关CE在某种中药检测中的应用。那么你在毕业前应该要掌握以下几点:该药物的使用历史、功效、研究现状、特征组份等;涉及该药物的检测方法;该药物的功效和对应功效的活性成分;如何进行质量控制等。该网友说,如果你具备了这些知识,面试的时候就不会只是一脸无辜的说,&ldquo 我做CE出身的&rdquo 。  十八般兵器样样精通那是不可能的。其实退一步说,就算相对于LC、GC来说CE有点偏门,但学校学的是&ldquo 渔&rdquo 的手段,也就是分析问题,解决问题的能力,一法通万法通。所以,困心横虑中的从事CE研究的同学们,是不是不那么煎熬啦?  其实,每一种好的仪器,研究和应用都需要大家的推动,如果我们放弃了,这种仪器的未来也就被放弃了。所以,从事CE研究的人们,或许你们今天的研究就能够推动CE的发展,加油!  对于&ldquo 行内流行说法之一&rdquo ,该网友会在7月份开新帖,以数据说话,大家敬请期待!  原帖:写给从事CE研究的研究生们--我们为何不屈不挠的浸泡在哀伤里?
  • 生命科学 | 毛细管电泳原理及其在临床诊断中的应用
    前言蛋白质是生命活动的直接执行者,参与生命的几乎所有过程,包括遗传、发育、生殖、物质和能量的代谢、应激等,因此通过分析蛋白质结构和性质的异常就可以获得机体的受损或病变情况。但蛋白质分子结构与性质复杂多样,如何有效的分离和分析生物体中的各个蛋白质一直面临着严峻的技术挑战。毛细管电泳(ce)技术的出现,给解决这一挑战提供了新的途径,它能够从电荷、分子量等不同维度对蛋白分子进行高效的分离分析,因此得到了广泛的应用和发展。毛细管电泳技术的原理毛细管电泳法是以毛细管为分离通道,以高压直流电场为驱动力,依据样品中各组分之间淌度和分配行为上的差异而实现分离的电泳分离分析方法(图1)。图1 毛细管电泳技术的原理毛细管两端分别浸入在电泳缓冲液中,并且两端连接着高压电源。当高压电源施加稳定的高压时,毛细管内产生了电渗流,使得毛细管内液体整体向负极移动。同时由于进入到毛细管中样本所含组分的荷质比不同,不同物质在毛细管中的迁移速度则不同。不同片段依次经过检测窗时被光检测模块所检测,从而实现了不同组分的分离以及定性、定量检测的目的。毛细管电泳技术的优势相比于hplc等传统的分析分离手段,毛细管电泳技术拥有如下的主要优点(图2):1.分离效率高,分析速度快:由于毛细管能抑制溶液对流,并具有良好的散热性,允许在很高的电场下(可达400v/cm以上)进行电泳,因此可在很短时间内完成高效分离。2.操作模式多,分析方法开发灵活:只要更换毛细管填充溶液的种类、浓度、酸度或添加剂等,就可以用同一台仪器实现多种分离模式。3.适合于微量样品的分析:毛细管内径极小(20-75um),进样为纳升级或纳克级,非常适合于稀少样品的检测分析。4.应用范围广:毛细管电泳在生命科学领域有广泛应用。在核酸检测方面,可用于一代测序或基因片段分析;而在蛋白质检测方面,可应用药物分析和临床诊断。图2 毛细管电泳的主要优势毛细管电泳在临床诊断中的应用作为一种高效的生物大分子分离分析技术,毛细管电泳在临床诊断领域的主要应用如下:1.多发性骨髓瘤:进行血清蛋白电泳、血清免疫分型的检测,是多发性骨髓瘤筛查和诊断的重要依据。2.地中海贫血:进行血红蛋白电泳检测,是地中海贫血筛查的重要手段。3.糖尿病:进行糖化血红蛋白检测,相比传统hplc等方法,能够排除异常血红蛋白的干扰。 聚拓生物聚拓生物为聚光科技集团成员企业,其自主研发的clincap 1000全自动毛细管电泳仪是专门为临床检验而设计的,具有全自动、高分辨的毛细管电泳仪可满足多种临床蛋白分析项目,为临床提供精准可靠的检测结果。系首款获得医疗器械认定的国产同类产品。
  • 安捷伦公司推出新一代毛细管电泳系统
    安捷伦科技公司推出灵敏度提高10倍的新一代毛细管电泳系统  2009年4月28日,北京—安捷伦科技公司(NYSE:A)今日推出了新一代Agilent 7100毛细管电泳(CE)系统,其灵敏度比其他商品化的毛细管电泳仪提高10倍以上。  “我们认为电泳业务是我们的核心技术之一,并且看到很多应用领域正在对毛细管电泳技术产生浓厚的兴趣,如新型生物药物的质量保证/质量控制、环境分析、食品安全和生命科学等领域。”安捷伦公司电泳业务全球总经理Nitin Sood 说,“无论是单独使用,还是作为CE/MS的分离部分,或是作为液相色谱的互补技术,安捷伦的新型7100毛细管电泳系统都提供了类似HPLC的出色高灵敏度,可以应对众多具有挑战性的分析任务。”  毛细管电泳引人注意的另一个原因是因为该技术使用很少量的溶剂。新的7100毛细管电泳系统与其前一代产品相比,尺寸减小了25%,重量减小了30%,并且耗电量更低。  新型检测器采用了一种扩展光程的专利毛细管光路设计和另一种高灵敏度池设计,从而带来了出色的灵敏度,使Agilent 7100的灵敏度是其它毛细管电泳仪的10-20倍。  Agilent 7100提供了业界最广泛的检测器选择,具有高度的灵活性和灵敏度,并且这种新仪器能够与之前的Agilent毛细管电泳平台反向兼容,使现有的方法可以继续使用。该仪器能开展毛细管电泳分离的各项技术,包括对非常相似的相关化合物进行快速分离的毛细管电色谱技术。其标配的缓冲液补充系统能确保高通量自动运行,并且已经过改进,减少了补给缓冲液的用量。  Agilent 7100 毛细管电泳系统通过设计提高了分离效率、可靠性和易用性。新型耐用的内部加压系统和改进的毛细管冷却系统能耐受更高的电流和/或更大孔径的毛细管,既可以提高分析通量,也使应用范围得到了扩展。另外,该电泳系统应用了新型化学工作站软件,其易于使用的图形用户界面以及改进的方法设置功能,极大地缩短了启用和培训时间。  该电泳系统的模块化结构,便于快速接近电极、预穿孔器、电子元器件和管路等部件,有利于进行日常维护和保养。毛细管卡套具有自动对准功能,可以在几秒钟内得到快速毛细管更换,并能与所有商用毛细管兼容。  即插即用型毛细管电泳/质谱联用仪(CE/MS)  Agilent 7100毛细管电泳仪提供与Agilent质谱仪(MS)的即插即用式连接,将毛细管电泳的分析时间短,分离效能高的特点与质谱技术的分子量和结构信息相结合。适用的质谱仪包括单四极杆、飞行时间(TOF)、离子阱、三重四极杆(QQQ)、ICP和四极杆飞行时间质谱系统(Q-TOF)。安捷伦是唯一一家能提供完全集成化CE/MS解决方案的公司,所有系统组件均来自一个供应商。  安捷伦毛细管电泳产品经理Tobias Preckel表示,“Agilent毛细管电泳系统不仅具有一流的性能,而且我们还大力继承以往的可靠性特点, 其口碑在过去的16年里已为众人所知。”     其他信息,请访问www.agilent.com/chem/ce.  关于安捷伦科技公司  安捷伦科技公司(NYSE:A)是全球领先的测量公司,也是通信、电子、生命科学和化学分析的技术领导者。公司的19,000名员工为遍及世界110多个国家的客户提供服务。安捷伦2008财年的净收入为58亿美元。 有关安捷伦的信息,请访问www.agilent.com。
  • 永久免费!SHST图像分析软件正式发布
    p style="margin-top: 10px margin-bottom: 10px line-height: 1.5em text-align: justify "span style="font-family: 微软雅黑 "  2020年9月1日,杭州申花科技有限公司正式发布SHST图像分析软件(版本号:2.0.0.10),该软件支持微软Windows及苹果Mac系统,永久免费下载,并持续升级,为科研助力!/span/pp style="text-align: center"img style="max-width: 100% max-height: 100% width: 600px height: 248px " src="https://img1.17img.cn/17img/images/202009/uepic/044553f9-5989-4b51-81b8-f6f39329d47d.jpg" title="丁香园.jpg" alt="丁香园.jpg" width="600" vspace="0" height="248" border="0"//pp style="margin-top: 10px margin-bottom: 10px line-height: 1.5em text-align: center "span style="font-family: 微软雅黑 "  (Source:丁香园)/span/pp style="margin-top: 10px margin-bottom: 10px line-height: 1.5em text-align: justify "span style="font-family: 微软雅黑 "  对从事分子生物学,跑DNA电泳,做Western实验的科研工作者而言,对结果进行半定量分析是一种必备的技能。/span/pp style="margin-top: 10px margin-bottom: 10px line-height: 1.5em text-align: justify "span style="font-family: 微软雅黑 "  市面上最常用的软件是 Image J,它是一款免费的图像分析软件,适用于科研图像的分析,可以进行细胞计数、不同颜色通道的荧光照片的融合,不规则区域面积的测定,也广泛应用于Western blot(简称:WB),DNA电泳胶条带的定量分析。Image J的图像分析功能强大,适用范围广,使用场景多,但也正因如此,使用其进行条带的分析,步骤繁琐,结果也往往停留在灰度值。/span/pp style="margin-top: 10px margin-bottom: 10px line-height: 1.5em text-align: justify "span style="font-family: 微软雅黑 "  有不少成像仪器的厂商针对于条带分析开发出了相应的软件。/span/pp style="margin-top: 10px margin-bottom: 10px line-height: 1.5em text-align: justify text-indent: 2em "span style="font-family: 微软雅黑 "但是:1.国外品牌的软件通常需要购买;2.国内品牌一般只向购买仪器的客户免费提供,并且需要配合厂家提供的软件加密锁方能使用;3.由于加密锁的数量有限(通常只有一个),从而无法满足一个实验室多人同时使用,如软件锁遗失,客户还需再次购买。/span/pp style="margin-top: 10px margin-bottom: 10px line-height: 1.5em text-align: justify "span style="font-family: 微软雅黑 "  针对客户的痛点,申花科技自主研发并发布SHST图像分析软件,它专用于WB条带、蛋白胶及DNA电泳的图像分析,并适用于Windows和Mac系统,完全免费,无需软件密码锁,我们一起来看一下它的几个亮点:/span/pp style="margin-top: 10px margin-bottom: 10px line-height: 1.5em text-align: justify "span style="font-family: 微软雅黑 "  strong1. 魔术棒功能/strong:一键识别所选区域内的泳道和条带,并且直接获得灰度值/span/pp style="text-align: center"img style="max-width: 100% max-height: 100% width: 600px height: 375px " src="https://img1.17img.cn/17img/images/202009/noimg/35729db7-8cba-411a-bfd2-d273f27aea08.gif" title="1 1. 魔术棒功能.gif" alt="1 1. 魔术棒功能.gif" width="600" vspace="0" height="375" border="0"//pp style="margin-top: 10px margin-bottom: 10px line-height: 1.5em text-align: justify "span style="font-family: 微软雅黑 "  strong2.自动识别多种图片格式/strong(PNG、JPG、TIF),并直接转换为均一的黑白图片,适用于对x光胶片进行分析/span/pp style="text-align: center"img style="max-width: 100% max-height: 100% width: 600px height: 375px " src="https://img1.17img.cn/17img/images/202009/noimg/df976f5d-46aa-4609-86ba-81f105729a3a.gif" title="2 1. 魔术棒功能.gif" alt="2 1. 魔术棒功能.gif" width="600" vspace="0" height="375" border="0"//pp style="margin-top: 10px margin-bottom: 10px line-height: 1.5em text-align: justify "span style="font-family: 微软雅黑 "  strong3. 分子量计算/strong:选择marker所在泳道,根据marker说明书设定分子量,其他被选中泳道上条带的分子量会被自动计算出来/span/pp style="text-align: center"img style="max-width: 100% max-height: 100% width: 600px height: 375px " src="https://img1.17img.cn/17img/images/202009/noimg/55fccb74-1fd0-4942-b065-1cca7442d53a.gif" title="3 3. 分子量计算.gif" alt="3 3. 分子量计算.gif" width="600" vspace="0" height="375" border="0"//pp style="margin-top: 10px margin-bottom: 10px line-height: 1.5em text-align: justify "span style="font-family: 微软雅黑 "  strong4. 浓度计算/strong:通过定义某一条带的浓度,计算出其他条带的相对浓度/span/pp style="text-align: center"img style="max-width: 100% max-height: 100% width: 600px height: 375px " src="https://img1.17img.cn/17img/images/202009/noimg/a0baef14-29f1-447e-96bc-46637f290353.gif" title="4 4. 浓度计算.gif" alt="4 4. 浓度计算.gif" width="600" vspace="0" height="375" border="0"//pp style="margin-top: 10px margin-bottom: 10px line-height: 1.5em text-align: justify "span style="font-family: 微软雅黑 "/span/pp style="margin-top: 10px margin-bottom: 10px line-height: 1.5em text-align: justify " span style="font-family: 微软雅黑 " 最后我们附上软件的下载链接,该软件将持续更新,并加载更多的专业的、实用的功能!希望它能为您的工作带来便利!/span/pp style="margin-top: 10px margin-bottom: 10px line-height: 1.5em text-align: justify "span style="font-family: 微软雅黑 "  ??复制下方链接地址,用浏览器打开后下载??/span/pp style="margin-top: 10px margin-bottom: 10px line-height: 1.5em text-align: justify "span style="font-family: 微软雅黑 "  a href="http://Windows:https://www.shenhua.bio/SHSTAnalysis.exe.html" target="_self"Windows:https://www.shenhua.bio/SHSTAnalysis.exe.html/a/span/pp style="margin-top: 10px margin-bottom: 10px line-height: 1.5em text-align: justify "span style="font-family: 微软雅黑 "  a href="http://MacOS:https://www.shenhua.bio/SHSTAnalysis.dmg.html" target="_self"MacOS:https://www.shenhua.bio/SHSTAnalysis.dmg.html/a/span/pp style="text-align: justify margin-top: 10px margin-bottom: 10px line-height: 1.5em "span style="font-family: 微软雅黑 "  /span/pp style="text-align: justify margin-top: 10px margin-bottom: 10px line-height: 1.5em text-indent: 2em "span style="font-family: 微软雅黑 "strong杭州申花科技/strong/span/pp style="text-align: justify margin-top: 10px margin-bottom: 10px line-height: 1.5em text-indent: 2em "span style="font-family: 微软雅黑 "杭州申花科技有限公司作为生物成像领域的新品牌,拥有一支包括研发、生产、销售和售后在内的成熟团队。传承国内领先的成像技术,吸收国内外品同类产品的优点,申花科技的化学发光成像系统均采用业界高标准的核心部件,并结合用户的应用,不断优化软件,提高用户操作体验,为科研助力。/spanspan style="font-family: 微软雅黑 "/spanbr//p
  • 毛细管电泳高级培训研讨会2012年12月
    尊敬的毛细管电泳用户: 贝克曼库尔特商贸(中国)有限公司将于2012年12月13-14日举办毛细管电泳高级培训研讨会,地点为北京市理化分析测试中心永丰分部。 有意参加者请在11月30日之前发邮件确认。hxchen@beckman.com 时间 培 训 内 容12月13日09:00-11:30 毛细管电泳技术原理及应用进展 12:30-13:30 毛细管电泳操作注意事项14:00-16:30 毛细管电泳质谱联用技术原理及应用进展12月14日09:00-11:30 如何增加毛细管电泳分析的重现性13:00-16:30 仪器硬件及软件使用交流 贝克曼库尔特公司 北京市理化分析测试中心 2012.11.15
  • N端封闭蛋白序列分析进行时——台式MALDI-8020
    胰蛋白酶消化,质谱法轻松鉴定蛋白质,已经是非常成熟的工作流程。即使是刚接触MS的使用者也可以很快掌握。在质谱法鉴定蛋白的工作流程中,蛋白质鉴定是通过使用搜索引擎,例如 Mascot或Matrix Science进行简单的数据库搜索来实现的。然而,对于数据库中未列出的蛋白质鉴定需求,或需要进行蛋白质末端序列分析的这两种情况,通常采用更昂贵的高端仪器和更复杂的工作流程,需要熟练的操作员。此外,蛋白质测序仪也通常用作蛋白质末端序列分析的方法,但遇到 N 端封闭的蛋白质,去封闭是必要的。作为样品序列分析前的预处理,预处理效果取决于蛋白质类型,可能效果不佳,对操作人员有一定要求,需要一定程度的技能和经验,这些可能会限制其使用。 近年来,利用MALDI-TOF离子源(ISD:In-Source Decay)中发生的蛋白质碎裂离子,可以分析N末端被封闭或未在数据库中登记的蛋白质序列MS图谱。此外,ISD理论上不受每个样品质量的限制,因此无需胰蛋白酶消化即可直接对高质量蛋白质进行测序。结合电泳胶提取蛋白和岛津台式机MALDI-8020,通过N端封闭蛋白的分子量测定和序列分析的例子,让我们来了解下大蛋白分子直接测序技术MALDI-ISD。 将模型样品N 端被乙酰化的牛碳酸酐酶 (Sigma-Aldrich)溶解在缓冲溶液中进行电泳, 95 °C 下加热 5 分钟,然后在聚丙烯酰胺凝胶(ATTO 12.5 %,预制 e-PAGEL)上进行电泳。所得聚丙烯酰胺凝胶用考马斯亮蓝染色以检测蛋白质斑点。使用含有表面活性剂的提取缓冲溶液,我们从凝胶分离的碳酸酐酶的条带中提取蛋白质。使用氯仿/甲醇在提取缓冲溶液中沉淀蛋白质以去除表面活性剂和盐,并使用 MALDI-TOF 质谱仪进行测量。芥子酸用作 MALDI 基质用于蛋白质分子量测量,1,5-二氨基萘 (DAN) 用于 ISD 的序列分析。 图1、碳酸酐酶电泳图图2、从凝胶中提取的碳酸酐酶MS图(基质芥子酸) 接下来,从25 pmol凝胶蛋白条带中提取碳酸酐酶,与基质DAN混合,MALDI-8020线性模式进一步分析。结果如图3所示,主要检测到c离子(从蛋白质N段产生的片段)质量一致的峰。通过使用免费软件Mass++ TM和蛋白质氨基酸序列比对工具Basic Local Alignment Search Tool (BLAST),我们对从检测到的峰中获得的氨基酸序列进行了同源性搜索。 图3、MALDI-ISD鉴定结果 鉴定结果显示匹配结果最高的是碳酸酐酶。通过检测到的c离子片段质量和数据库中已有的碳酸酐酶氨基酸序列,我们可以推断出N段序列是SHHWGYGKH...,并且是N-乙酰化的。 MALDI-8020线性模式MALDI-ISD技术,无需复杂的工作流程,无需胰蛋白酶消化即可直接对高质量蛋白质(如本文所述m/z 29030示例)进行N端测序。 该方法在岛津应用专家与美国佛罗里达州立大学、日本爱媛大学高级研究支持中心生物医学分析部、利物浦大学生化与系统生物学系等共同发表的一篇文献中也有应用到。PEPPI-MS基于聚丙烯酰胺凝胶的预分馏,实现质谱法鉴定完整蛋白或蛋白复合物。凝胶分离回收14种人血清蛋白,提取后,用MALDI-8020的MALDI-ISD产生的产物离子鉴定人血清白蛋白N端氨基酸序列。 MALDI-8020是岛津MALDI家族一款体积小巧,性能卓越的特色产品。荣获2018 IBO工业设计大奖银奖。 主要特点:● 线性台式MALDI-TOF● 200Hz固态激光器,355nm波长● 进样速度快● TrueClean™ 自动源清洁功能。配备大口径离子光学系统,使仪器长期使用中源的污染风险降到最低。配备基于紫外激光器的源清洁功能,可自动快速实现源自清洁。● 静音(55dB)● 可视化工作状态 参考文献:岛津应用新闻 No.B83J. Proteome Res. 2020, 19, 3779−3791
  • 药典委:0542 毛细管电泳法标准草案的公示
    2022年底,国家药典委员会发布《中国药典》(2025年版)编制大纲的通知。《通知》显示,到2025年,全面完成新版《中国药典》编制工作。符合中医药特点的中药标准进一步完善,化学药品、生物制品、药用辅料和药包材标准达到或基本达到国际先进水平,药品质量控制和安全保障水平明显提升。近日,国家药典委员会公布了一批方法通则的修订草案,涉0512高效液相色谱法标准草案、毛细管电泳法标准草案、0931溶出度与释放度测定法标准草案、分析仪器确证指导原则标准草案、光学分析法标准草案、扫描电子显微镜法标准草案等。  其中,0542 毛细管电泳法标准草案,是参考 ICH Q4B 附录 11 毛细管电泳法,对《中国药典》 0542 毛细管电泳法进行修订。  此次修订调整了部分内容和实验参数,主要修订内容如下: 1. 原理部分进行详述,增加了毛细管电泳法的理论描述和计算公式; 2. 仪器的一般要求中增订了需要给出具体规定的毛细管电泳法条件,以及试验过程中需要注意的相关事项; 3. 分离模式部分中对毛细管区带电泳、毛细管凝胶电泳、毛细管等电聚焦电泳和胶束电动色谱等四种方法进行详 2023 年 9 月 2 / 2 述,包括原理、条件优化、仪器参数等内容; 4. 增加定量内容,对定量的相关要求和结果计算进行描述; 5. 对个别文字表述进行规范。关于0542 毛细管电泳法标准草案的公示编号:Fg2023-0162号  我委拟修订0542毛细管电泳法。为确保标准的科学性、合理性和适用性,现将拟修订的0542毛细管电泳法公示征求社会各界意见(详见附件)。公示期自发布之日起三个月。请认真研核,若有异议,请及时来函提交反馈意见,并附相关说明、实验数据和联系方式。相关单位来函需加盖公章,个人来函需本人签名,同时将电子版上传至【公示反馈】附件中。   公示期满未回复意见即视为对公示标准草案无异议。0542毛细管电泳法修订说明.pdf0542毛细管电泳法公示稿(第一次).pdf
  • 君意东方携新型电泳产品出彩亮相慕尼黑
    p style="text-indent: 2em "2018年10月31日至11月2日,第九届慕尼黑上海分析生化展(analytica China 2018)在上海新国际博览中心E1-E4馆举行。大会吸引近1000家中外企业参展,各行业先锋企业携前沿技术创新齐聚一堂,引领行业新高度。/pp style="text-indent: 2em "君意东方携新品电泳仪器产品亮相慕尼黑。秉承“为客户提供高标准、规范化、专业品质的产品和服务”的发展宗旨,君意开发制造了各种实验用途的电泳仪器,现已形成品种丰富、规格齐全的JY系列电泳产品。/pp style="text-indent: 2em "此次会展君意东方全方位展示了其电泳产品安全、高效、便利、快捷的优点。/pp style="text-align: center"img src="https://img1.17img.cn/17img/images/201811/uepic/fcb6d325-67bf-45b0-95e4-9d7394ddc98d.jpg" title="微信图片_20181106165223.jpg" alt="微信图片_20181106165223.jpg"//pp style="text-align: center "strong君意东方JY系列电泳仪/strongbr//pp style="text-indent: 2em "君意东方JY系列电泳仪为触摸按键,具有多功能保护和迭配功能,采用微处理智能控制且具有自动记忆功能。/pp style="text-align: center"img src="https://img1.17img.cn/17img/images/201811/uepic/b37f58fa-bd26-4f45-800a-c0ca46de16f2.jpg" title="微信图片_20181106165255.jpg" alt="微信图片_20181106165255.jpg"//pp style="text-align: center "strong君意东方电泳槽产品展示/strongbr//pp style="text-align: center"img src="https://img1.17img.cn/17img/images/201811/uepic/63f3e62d-7dd4-420d-8d19-4bcd84c973df.jpg" title="微信图片_20181106165251.jpg" alt="微信图片_20181106165251.jpg"//pp style="text-align: center "strong工作人员向参展会员讲解产品的特点/strongbr//pp style="text-indent: 2em "产品不但涵盖常规的核酸、蛋白电泳,还具有国内企业独领风骚的脉冲场电泳、变性梯度电泳等系统,以及与电泳配套的仪器设备,如快速成像仪、凝胶成像分析系统等。/pp style="text-indent: 2em "据介绍,君意东方的宗旨是为顾客提供高标准、规范化、专业品质的产品和服务,未来将继续为电泳过程的优化提供优秀的解决方案。/p
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