当前位置: 仪器信息网 > 行业主题 > >

酶联免疫分析

仪器信息网酶联免疫分析专题为您提供2024年最新酶联免疫分析价格报价、厂家品牌的相关信息, 包括酶联免疫分析参数、型号等,不管是国产,还是进口品牌的酶联免疫分析您都可以在这里找到。 除此之外,仪器信息网还免费为您整合酶联免疫分析相关的耗材配件、试剂标物,还有酶联免疫分析相关的最新资讯、资料,以及酶联免疫分析相关的解决方案。

酶联免疫分析相关的论坛

  • 如何使用酶联免疫分析仪检测生物实验

    如何使用酶联免疫分析仪检测生物实验

    [size=16px]  酶联免疫分析(Enzyme-Linked Immunosorbent Assay,ELISA)是一种常用于检测生物分子(如蛋白质、抗体、激素等)在样本中的定量或定性测量的实验技术。以下是使用酶联免疫分析仪检测生物实验的一般步骤:  准备实验材料和试剂:  样本:可以是血清、尿液、细胞上清等。  标准品:已知浓度的目标分子,用于绘制标准曲线以计算未知样本中的浓度。  酶标抗体:用于与目标分子结合的抗体,被标记上酶以便后续检测。  捕获抗体:涂覆在微孔板上,用于捕获目标分子和酶标抗体复合物。  涂覆微孔板:  向微孔板中加入捕获抗体,使其在孔底吸附。  将孔板放置在冰箱或其他适当条件下孵育,让抗体吸附稳定。  加入样本和标准品:  加入待测样本和一系列已知浓度的标准品到不同的孔中。  标准品的浓度通常是一个浓度梯度,用于绘制标准曲线。  孵育和洗涤:  孵育样本和标准品,使目标分子与捕获抗体结合。  之后,使用洗涤缓冲液洗涤孔板,去除未结合的物质。  加入酶标抗体:  加入带有酶标记的抗体,它会与样本中的目标分子结合形成复合物。  孵育和洗涤:  孵育酶标抗体,使其与捕获的目标分子结合。  再次用洗涤缓冲液洗涤孔板,去除未结合的物质。  加入底物:  加入含有底物的溶液。底物被酶催化后会产生颜色或荧光,信号强度与目标分子的浓度成正比。  停止反应:  加入停止液终止底物的反应,防止颜色或荧光的继续产生。  测量信号:  使用酶联免疫分析仪读取每个孔的颜色或荧光信号强度。  将信号与标准曲线进行比较,计算样本中目标分子的浓度。  数据分析:  根据标准曲线和信号强度,计算样本中目标分子的浓度。  请注意,每个实验都需要根据具体的样本和目标分子进行优化和调整。操作过程中应严格遵循实验操作规程,以确保结果的准确性和可重复性。如果你是初次进行ELISA实验,建议在有经验的实验室或专业人士的指导下进行。[img=,690,690]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/08/202308311608055074_5122_6098850_3.png!w690x690.jpg[/img][/size]

  • 关于对《全自动酶联免疫分析仪校准规范》征求意见的函

    [align=center][size=17px][color=#ff0000]全国生物计量技术委员会[/color][/size][/align][align=center][size=17px][color=#ff0000]关于对《全自动酶联免疫分析仪校准规范》征求意见的函[/color][/size][/align][size=15px]各位委员:[/size][size=15px]  由全国生物计量技术委员会对口负责的《全自动酶联免疫分析仪校准规范》征求意见稿已经起草完成。[/size][size=15px]  现将征求意见稿(见附件)发送给各位专家及委员广泛征求意见。[/size][size=15px]  望在百忙之中进行评审并提出意见。请将意见寄(或发电子邮件)给全国生物计量技术委员会秘书处。[/size][size=15px]附件下载:[/size][size=15px]《全自动酶联免疫分析仪校准规范》(征求意见稿)相关材料[/size][align=right][size=15px]全国生物计量技术委员会[/size][/align][align=right][size=15px]2021年9月6日[/size][/align]

  • 尼卡巴嗪酶联免疫反应测试盒

    1.概述REAGEN™尼卡巴嗪酶联免疫反应测试盒利用竞争性酶联免疫反应原理,对饲料中尼卡巴嗪的残留进行定量检测。该试剂盒有以下特点:Ø 高回收率(80-105%以上),快速(10-30分钟之内完成提取过程)提取。Ø 检测过程只需要不到1.5小时。Ø 高重复性。2.试剂盒原理REAGEN™尼卡巴嗪酶联免疫反应测试盒基于竞争性酶联反应原理,含有尼卡巴嗪的抗体已经包被于微孔板上。药物分析时,样品同酶标共同被添加到板孔中。如果样品中含有尼卡巴嗪,会竞争抗体,抑制酶标与板上包被的抗体结合。加入底物后,产物的颜色强弱与样品中尼卡巴嗪的浓度成反比。

  • 恩诺沙星酶联免疫反应测试盒

    1.概述REAGEN™恩诺沙星酶联免疫反应测试盒是利用竞争性的酶联反应原理,用于饲料、肉类组织(牛肉、鸡肉和猪肉)、鱼虾、牛奶、组织、血清和尿液中恩诺沙星残留的定量检测。该试剂盒具有以下特点:Ø 快速,高回收率(75-105%),多种样品的低成本提取方法。Ø 高灵敏度(0.1ng/g或ppb),低检测下限(牛奶0.5ng/g或ppb)。Ø 高重复性。Ø 检测过程只需要不到1.5小时。 2.试剂盒原理REAGEN™恩诺沙星酶联免疫反应测试盒基于竞争性酶联反应原理,含有恩诺沙星的抗原已经包被于微孔板上。药物分析时,样品同特异性一抗共同被添加到板孔中。如果样品中含有药物,会竞争一抗,抑制抗体与板上包被的药物抗原结合。加入酶标记的二抗,形成包被抗原-抗体-酶标二抗复合物。加入底物后,产物的颜色强弱与样品中药物的浓度成反比。

  • 头孢噻呋酶联免疫反应测试盒

    1.概述REAGEN™头孢噻呋酶联免疫反应测试盒是利用竞争性的酶联反应原理,用于牛奶、尿液、组织(肝、肾、肉)、蛋、血清和血浆中头孢噻呋残留的定量检测。该试剂盒具有以下特点:Ø 快速,高回收率(75-105%),多种样品的低成本提取方法。Ø 高灵敏度(2ng/g或ppb)。Ø 高重复性。Ø 检测过程只需要不到2小时。 2.试剂盒原理REAGEN™头孢噻呋酶联免疫反应测试盒基于竞争性酶联反应原理,头孢噻呋已经包被于微孔板上。药物分析时,样品同头孢噻呋捕获蛋白共同被添加到板孔中。如果样品中含有药物,会竞争捕获蛋白,抑制捕获蛋白与板上包被的药物结合。加入酶标记的二抗,形成包被药物-捕获蛋白-酶标二抗复合物。加入底物后,产物的颜色强弱与样品中药物的浓度成反比。

  • 环丙沙星酶联免疫反应测试盒

    1.概述环丙沙星酶联免疫反应测试盒是利用竞争性的酶联反应原理,用于饲料、肉类组织(牛肉、鸡肉和猪肉)、鱼虾、牛奶、组织、血清和尿液中环丙沙星残留的定量检测。该试剂盒具有以下特点:Ø 快速,高回收率(75-95%),多种样品的低成本提取方法。Ø 高灵敏度(0.35ng/g或ppb),低检测下限(饲料有机提取法0.525ng/g或ppb)。Ø 高重复性。Ø 检测过程只需要不到1.5小时。 2.试剂盒原理环丙沙星酶联免疫反应测试盒基于竞争性酶联反应原理,含有环丙沙星抗体的药物已经包被于微孔板上。药物分析时,样品同HRP酶标记物共同被添加到板孔中。如果样品中含有环丙沙星,会竞争包被抗体,抑制HRP酶标记物与板上包被的抗体结合。加入底物后,产物的颜色强弱与样品中药物的浓度成反比。

  • 萘啶酸酶联免疫反应测试盒

    1.概述 REAGEN™ 萘啶酸酶联免疫反应测试盒是利用竞争性的酶联反应原理,用于鱼、虾和肉中萘啶酸残留的定量检测。为食品加工厂和政府监督管理部门提供了检测限为5ppb的快速检测技术。满足消费者对食品安全问题的需求。该试剂盒有以下特点:Ø 快速鱼虾肉提取方法且回收率达到75-105%。Ø 快速的检测(在不考虑样品数量的情况下只需50min)。Ø 高重现性。 2.试剂盒原理REAGEN™萘啶酸酶联免疫反应测试盒基于竞争性酶联反应原理,含有萘啶酸抗体已经包被于微孔板上。药物分析时,样品同萘啶酸酶标记物共同被添加到板孔中。如果样品中含有药物,会竞争萘啶酸抗体,抑制酶标记物与板上包被的萘啶酸抗体结合。加入底物后,产物的颜色强弱与样品中萘啶酸的浓度成反比。

  • 四环素酶联免疫反应测试盒

    1.概述四环素酶联免疫反应测试盒利用竞争性酶联免疫反应原理,对蜂蜜、黄油、鸡蛋、奶酪、牛奶、血清、尿液、鱼、虾和肉类等中四环素残留进行定量检测。该试剂盒有以下特点:Ø 高回收率(80-105%),快速(30分钟),低成本;Ø 高灵敏度(0.05ppb),低检测下限(蜂蜜2.5ppb);Ø 高重现性;Ø 检测过程只需要不到2小时。2.试剂盒原理四环素酶联免疫反应测试盒基于竞争性酶联反应原理,含有四环素的抗原已经包被于微孔板上。药物分析时,样品同特异性一抗共同被添加到板孔中。如果样品中含有药物,会竞争一抗,抑制抗体与板上包被的药物抗原结合。加入酶标记的二抗,形成包被抗原-抗体-酶标二抗复合物。加入底物后,产物的颜色强弱与样品中药物的浓度成反比。

  • 赛庚啶酶联免疫反应试剂盒

    1.概述赛庚啶酶联免疫反应测试盒是用于检测肌肉,肝脏,肾脏和尿液中赛庚啶残留。该试剂盒特点包括:Ø 高回收率,快速 ;Ø 高灵敏度(0.03ng/g或ppb),低检测限(肉类/组织0.1ppb,尿液0.1ppb);Ø 快速的ELISA检测方法(在不考虑样品数量下只需不到2小时);Ø 高重现性。2.试剂盒原理赛庚啶酶联免疫反应测试盒基于竞争性酶联反应原理,相关的抗原已经包被于微孔板上。药物分析时,样品同特异性抗体一同加入孔中,如果样品中含有赛庚啶,会特异性竞争抗体,因而抑制板上包被的赛庚啶与抗体结合。HRP标记的二抗,与结合在板上一抗相结合,TMB底物加入板孔中,底物的颜色显色强度与样品中赛庚啶的含量成反比。

  • 红霉素酶联免疫反应试剂盒

    1.概述REAGEN™红霉素酶联免疫反应测试盒是用于检测水/尿/肉/鱼/虾中的红霉素的残留量。该试剂盒特点包括:Ø 高回收率(80-105%),快速(10-40分钟),多种样品低成本提取方法。Ø 高灵敏度(0.5ng/g或ppb),牛奶检测下限(2.5 ppb)。Ø 高重现性。Ø 快速的ELISA检测方法(只需不到2小时)。2.试剂盒原理REAGEN™红霉素酶联免疫反应测试盒基于竞争性酶联反应原理,含有红霉素的药物抗原已经包被于微孔板上,在分析时,样品中药物特异性地与抗体相结合。如果药品中有药物存在,它将阻止包被于微孔板上的药物与抗体结合。当与样品药物相结合的药物抗体被洗涤去除后,只剩下与微孔内药物相结合的抗体,与经酶标记物相结合。反应后颜色深度与样品中红霉素的含量成反比。

  • 结晶紫酶联免疫反应测试盒

    概述REAGEN™ 结晶紫酶联免疫反应检测试剂盒是利用竞争性的酶联反应原理定量检测分析结晶紫在鱼、虾以及鱼池或者鱼缸水样中的含量。该试剂盒主要有以下特点: Ø 高回收率(80-95%),快速地从鱼虾或者水样中提取结晶紫。Ø 试剂盒也可以检测隐性结晶紫,检测前先用提供的氧化液将隐性结晶紫转变成有色结晶紫。 Ø 96孔高通量定量检测,鱼或者虾样品的检测下限为0.1ppb。Ø 制备好的样品,可以直接用于LC或者LC/MS确认。Ø 高重复性。试剂盒原理实验方法基于竞争性酶联反应原理。微孔板上包被有CV的特异性抗体。测试分析时,样品和CV-HRP耦合物共同孵育。如果样品中含有CV抗原,就会竞争抗体,从而阻止CV-HRP耦合物与抗体结合。加入HRP耦合物的底物(TMB),在加入底物后将催化底物显色,根据颜色反应的灵敏度来确定样品中CV的浓度。颜色的深浅同样品中药物的浓度成反比关系。 检测步骤以下为计算份量的表格,用户可根据自己的需要来确定需要配置多少试剂。试剂每个反应需要的体积24 次反应的体积CV—HRP耦合物50 mL1.2 mL1倍工作洗液1 mL24 mL终止液100 mL2.4 mL底物100 mL2.4 mL(1) 加入100

  • 酶联免疫技术

    酶联免疫吸附实验(ELISA)基本原理  1971年Engvall和Perlmann发表了酶联免疫吸附剂测定(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)用于IgG定量测定的文章,使得1966年开始用于抗原定位的酶标抗体技术发展成液体标本中微量物质的测定方法。这一方法的基本原理是:①使抗原或抗体结合到某种固相载体表面,并保持其免疫活性。②使抗原或抗体与某种酶连接成酶标抗原或抗体,这种酶标抗原或抗体既保留其免疫活性,又保留酶的活性。在测定时,把受检标本(测定其中的抗体或抗原)和酶标抗原或抗体按不同的步骤与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与其他物质分开,最后结合在固相载体上的酶量与标本中受检物质的量成一定的比例。加入酶反应的底物后,底物被酶催化变为有色产物,产物的量与标本中受检物质的量直接相关,故可根据颜色反应的深浅刊物定性或定量分析。由于酶的催化频率很高,故可极大地地放大反应效果,从而使测定方法达到很高的敏感度。  方法类型和操作步骤  ELISA可用于测定抗原,也可用于测定抗体。在这种测定方法中有3种必要的试剂:①固相的抗原或抗体,②酶标记的抗原或抗体,③酶作用的底物。根据试剂的来源和标本的性状以及检测的具备条件,可设计出各种不同类型的检测方法。   (一)双抗体夹心法  双抗体夹心法是检测抗原最常用的方法,操作步骤如下:  (1)将特异性抗体与固相载体连接,形成固相抗体:洗涤除去未结合的抗体及杂质。  (2)加受检标本:使之与固相抗体接触反应一段时间,让标本中的抗原与固相载体上的抗体结合,形成固相抗原复合物。洗涤除去其他未结合的物质。  (3)加酶标抗体:使固相免疫复合物上的抗原与酶标抗体结合。彻底洗涤未结合的酶标抗体。此时固相载体上带有的酶量与标本中受检物质的量正相关。  (4)加底物:夹心式复合物中的酶催化底物成为有色产物。根据颜色反应的程度进行该抗原的定性或定量。  根据同样原理,将大分子抗原分别制备固相抗原和酶标抗原结合物,即可用双抗原夹心法测定标本中的抗体。[em22] [em26] [em47] [em57]

  • 酶联免疫吸附试验(ELISA)

    酶联免疫吸附试验(ELISA)是一种广泛应用在测定液体样本中的蛋白、抗体、或激素的免疫分析技术。酶联免疫吸附试验的标准程序,通常是把蛋白、抗体、或激素等(即抗原)直接或是以捕捉抗体(capture Ab)固定在固相载体上,再加入一级检测抗体(primary detection Ab),形成一个抗原抗体的复合物。如果该抗体已经用酶(enzyme)标记了,即可用来直接测定抗原的量,若无,则可利用另一个酶标记的二级抗体来测定抗原的量。测定抗原量的方法是加入该酶的底质(substrate),作用后产生出现的颜色深浅和样本中的抗原量呈正比的关系,依此原理计算出样本中的抗原总量或浓度。http://img.dxycdn.com/trademd/upload/userfiles/image/2013/02/B1359616446_small.jpg常见ELISA技术种类:1. 直接法(direct ELISA):将抗原直接固定在固相载体上,加入酶标记的一级抗体,即可测定抗原总量,此一级抗体的特异性非常重要。优势:操作手续简短,因无须使用二抗可避免交互反应。缺点:试验中的一抗都得用酶标记,但不是每种抗体都适合做标记,费用相对提高。2. 间接法(indirect ELISA):此测定方法与直接法类似,差别在于一级抗体没有酶标记,改用酶标记的二级抗体去辨识一级抗体来测定抗原量。优势:二抗可以加强信号,而且有多种选择能做不同的测定分析。不加酶标记的一级抗体则能保留它最多的免疫反应性。缺点:交互反应发生的机率较高。3. 双抗体夹心法(sandwich ELISA):被检测的抗原包被在两个抗体之间,其中一个抗体将抗原固定于固相载体上,即捕捉抗体。另一个则是检测抗体,此抗体可用酶标记后直接测定抗原的量;或不标记,再透过酶标记的二级抗体来测定抗原的量。这两种抗体必须小心选取,才可避免交互反应或竞争相同的抗原结合部位。优势:高灵敏、高专一性,抗原无须事先纯化。缺点:抗原一定得拥有两个以上的抗体结合部位。4. 竞争法(competitive ELISA):样本里的抗原(自由抗原)和纯化并固定在固相载体上的抗原(固定抗原)一起竞争相同的抗体,当样品里的自由抗原越多,就可以结合越多的抗体,而固定抗原就只能结合到较少的抗体,反之亦然。经清洗步骤,洗去自由抗原和抗体的复合物,只留下固定抗原和抗体的复合物,拿来与只有固定抗原的对照组结果相比较,根据呈色差异就可计算出样品里的抗原含量。优势:可适用比较不纯的样本,而且数据再现性很高。缺点:整体的敏感性和专一性都较差。最新ELISA技术:基于细胞法(cell-based ELISA):是一种新的定性蛋白检测技术,将细胞直接在微孔板里培养,待检测时,不需抽提蛋白和裂解细胞,便可直接测量微孔板里蛋白经刺激或抑制作用后的变化。优势:无需裂解细胞,所以目标蛋白损失最少,可测定完整细胞、黏附细胞、还有非粘附细胞。缺点:不能测定抗原量。

  • 【讨论】酶联免疫试剂盒中的洗液

    通常单位里多选用酶联免疫试剂盒法检测瘦肉精等药残,每盒中都有多于实际使用量很多的浓缩洗液,1、对于不同检测试剂,如盐酸克伦特罗、沙丁胺醇、磺胺等,它们的洗液是不是可以通用?2、稀释洗液用的蒸馏水是否可以用市面上桶装纯净水代替?对检测结果会产生什么影响?

  • 甲氧苄啶酶联免疫反应测试盒

    80%)l 高灵敏度(0.015 ng/g or ppb)l 快速检测(少于2个小时)l 重现性好2.试剂盒原理REAGEN™ 甲氧苄啶酶联免疫反应测试盒基于竞争性酶联反应原理,微孔板上包被着抗甲氧苄啶抗体。甲氧苄啶标准品或者样品溶液和HRP标记的甲氧苄啶添加到孔中,竞争结合包被的抗体。没有结合的酶标在洗板步骤中被洗去。TMB底物加入板孔中,底物的颜色显色强度与样品中甲氧苄啶的含量成反比。

  • 如何使用酶联免疫分析仪检测环境污染

    如何使用酶联免疫分析仪检测环境污染

    [size=16px]  酶联免疫分析仪(Enzyme-Linked Immunosorbent Assay,ELISA)是一种常用于检测生物分子,如蛋白质、抗体、激素等的方法。在环境污染领域,ELISA可以用于检测特定污染物或污染指标,例如有毒物质、重金属、细菌等。以下是使用ELISA检测环境污染的一般步骤:  准备样本和试剂: 收集环境样本,如土壤、水、空气等,然后准备ELISA所需的试剂,包括酶标记抗体、底物、洗涤缓冲液等。  涂覆固相载体: 将检测目标的抗原或抗体涂覆在固相载体(如微孔板)的表面上。这可以通过将样本或试剂溶液加入微孔板孔中,然后让其在一定条件下(通常在4°C下过夜)发生吸附。  样本处理: 将收集到的环境样本处理成适合ELISA检测的形式。这可能包括提取样本中的目标分子,去除干扰物质等。  添加样本: 将处理后的样本加入涂有抗原或抗体的微孔板中,使样本中的目标分子与固相载体表面的抗体结合。  洗涤: 为了去除非特异性结合物质,需要多次用洗涤缓冲液清洗微孔板,以确保只有特异性的结合物质保留在固相载体上。  加入酶标记抗体: 加入酶标记的二抗,这些抗体能够与目标分子结合。酶标记抗体与固相载体上的抗体形成“夹心”结构,将目标分子夹在中间。  洗涤: 同样,用洗涤缓冲液清洗以去除非特异性结合物质。  添加底物: 加入底物,使其与酶标记结合,产生可量化的信号。底物的酶反应会生成染色物质,其颜色的强度与目标分子的浓度成正比。  停止反应: 当染色反应达到适当的程度后,添加停止剂停止酶反应,防止颜色继续增加。  测量: 使用ELISA阅读器测量微孔板中每个孔的吸光度或荧光强度。根据标准曲线或内部对照,可以确定样本中目标分子的浓度。  数据分析: 根据测量的信号强度,结合标准曲线或内部对照,计算出样本中目标分子的浓度。  需要注意的是,ELISA的操作步骤可能因具体的污染物种类和ELISA试剂盒的种类而有所不同。在进行ELISA实验之前,建议详细阅读所使用试剂盒的说明书,并在实验过程中严格遵循操作步骤和安全注意事项。同时,确保实验过程中的样本处理、实验环境和仪器都保持干净,以防止误差和干扰。[img=,690,690]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/08/202308311601298825_1296_6098850_3.png!w690x690.jpg[/img][/size]

  • 【转帖】酶联免疫吸附试验及其应用

    近二十几年来,免疫学分析方法发展很快,特别是在使用标记了的抗原和抗体的分析技术以后,使原来许多经典的分析方法在敏感性和特异性方面都不能相比。继50年代的免疫荧光(IFA)和60年代的放射免疫(RIA)分析技术之后,在70年代初期又建立了用酶来标记抗原或抗体的分析技术。由于酶的高效生物催化作用,一个酶分子在数分钟内可以催化几十几百个底物分子发生反应,产生了放大作用,使得原来极其微乎其微的抗原或抗体在数分钟后就可被识别出来,这种技术被称为酶联免疫吸附试验法(Enzyme—Linked Immunosorbent Assay,ELISA),本法自70年代初期由VAN WEEMEN、SCHUARS.ENGVALL及PERLMARN等相继分别报道后,现已引起广泛重视。 ELISA法是免疫诊断中的一项新技术,现已成功地应用于多种病原微生物所引起的传染病、寄生虫病及非传染病等方面的免疫诊断。也已应用于大分子抗原和小分子抗原的定量测定,根据已经使用的结果,认为ELISA法具有灵敏、特异、简单、快速、稳定及易于自动化操作等特点。不仅适用于临床标本的检查,而且由于一天之内可以检查几百甚至上千份标本,因此,也适合于血清流行病学调查。本法不仅可以用来测定抗体,而且也可用于测定体液中的循环抗原,所以也是一种早期诊断的良好方法。因此ELISA法在生物医学各领域的应用范围日益扩大,可概括四个方面: 1、免疫酶染色各种细胞内成份的定位。 2、研究抗酶抗体的合成。 3、显现微量的免疫沉淀反应。 4、定量检测体液中抗原或抗体成份。 二、方法的基本原理和种类 ELISA的基本原理有三条: (1)抗原或抗体能以物理性地吸附于固相载体表面,可能是蛋白和聚苯乙烯表面间的疏水性部分相互吸附,并保持其免疫学活性; (2)抗原或抗体可通过共价键与酶连接形成酶结合物,而此种酶结合物仍能保持其免疫学和酶学活性; (3)酶结合物与相应抗原或抗体结合后,可根据加入底物的颜色反应来判定是否有免疫反应的存在,而且颜色反应的深浅是与标本中相应抗原或抗体的量成正比例的,因此,可以按底物显色的程度显示试验结果。 由于ELISA法一方面是建立在抗原与抗体免疫学反应的基础上,因而,具有特异性。而另一方面又由于酶标记抗原或抗体是酶分子与抗原或抗体分子的结合物,它可以催化底物分子发生反应,产生放大作用,正因为此种放大作用而使本法具有很高的敏感性。因此,ELISA法是一种既敏感又特异的方法。

  • 酶联免疫吸附试验标准操作规程(SOP)

    名称:酶联免疫吸附试验标准操作规程(SOP)关键词:ELISA 抗原 抗体目的:1、免疫酶染色各种细胞内成份的定位。2、研究抗酶抗体的合成。3、显现微量的免疫沉淀反应。4、定量检测体液中抗原或抗体成份。背景知识:ELISA是酶联接免疫吸附剂测定( Enzyme-Linked Immunosorbnent Assay )的简称。它是继免疫荧光和放射免疫技术之后发展起来的一种免疫酶技术。此项技术自70年代初问世以来,发展十分迅速,目前已被广泛用于生物学和医学科学的许多领域。原理:ELISA是以免疫学反应为基础,将抗原、抗体的特异性反应与酶对底物的高效催化作用相结合起来的一种敏感性很高的试验技术。由于抗原、抗体的反应在一种固相载体──聚苯乙烯微量滴定板的孔中进行,每加入一种试剂孵育后,可通过洗涤除去多余的游离反应物,从而保证试验结果的特异性与稳定性。在实际应用中,通过不同的设计,具体的方法步骤可有多种。即:用于检测抗体的间接法(图a)、用于检测抗原的双抗体夹心法(图b)以及用于检测小分子抗原或半抗原的抗原竞争法等等。比较常用的是ELISA双抗体夹心法及ELISA间接法。主体内容:【操作步骤】方法一 用于检测未知抗原的双抗体夹心法:  1. 包被:用0.05M PH9.牰碳酸盐包被缓冲液将抗体稀释至蛋白质含量为1~10μg/ml。在每个聚苯乙烯板的反应孔中加0.1ml,4℃过夜。次日,弃去孔内溶液,用洗涤缓冲液洗3次,每次3分钟。(简称洗涤,下同)。  2. 加样:加一定稀释的待检样品0.1ml于上述已包被之反应孔中,置37℃孵育1小时。然后洗涤。(同时做空白孔,阴性对照孔及阳性对照孔)。  3. 加酶标抗体:于各反应孔中,加入新鲜稀释的酶标抗体(经滴定后的稀释度)0.1ml。37℃孵育0.5~1小时,洗涤。  4. 加底物液显色:于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃10~30分钟。  5. 终止反应:于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml。  6. 结果判定:可于白色背景上,直接用肉眼观察结果:反应孔内颜色越深,阳性程度越强,阴性反应为无色或极浅,依据所呈颜色的深浅,以“+”、“-”号表示。也可测O•D值:在ELISA检测仪上,于450nm(若以ABTS显色,则410nm)处,以空白对照孔调零后测各孔O•D值,若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍,即为阳性。  方法二 用于检测未知抗体的间接法:      用包被缓冲液将已知抗原稀释至1~10μg/ml,      每孔加0.1ml,4℃过夜。次日洗涤3次。              ↓      加一定稀释的待检样品(未知抗体)0.1ml于上述已包被之反应孔      中,置37℃孵育1小时,洗涤。(同时做空白、阴性及阳性孔对照)              ↓      于反应孔中,加入新鲜稀释的酶标第二抗体(抗抗体)0.1ml,      37℃孵育30-60分钟,洗涤,最后一遍用DDW洗涤。[font='Helvetica Neue', Helvetica, Arial

  • ELISA与ELISpot检测有什么区别?酶联免疫吸附测定服务优势

    [align=left][font='calibri'][size=13px][color=#232323]ELISA[/color][/size][/font][font='calibri'][size=13px][color=#232323]与[/color][/size][/font][font='calibri'][size=13px][color=#232323]ELISpot[/color][/size][/font][font='calibri'][size=13px][color=#232323]检测有什么区别?[/color][/size][/font][font='calibri'][size=13px][color=#232323]酶联免疫吸附测定[/color][/size][/font][font='calibri'][size=13px][color=#232323]服务优势[/color][/size][/font][/align][font='宋体'][size=16px]酶联免疫吸附测定(enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA)是指将可溶性的抗原或抗体结合到聚苯乙烯等固相载体上,利用抗原抗体结合专一性进行免疫反应的定性和定量检测方法。[/size][/font][font='宋体'][size=16px]酶联免疫斑点技术 (enzym[/size][/font][font='宋体'][size=16px]e-linked immunospot assay, ELISpot) 是细胞免疫学研究中最敏感的检测方法之一,能够区分活化的T细胞亚群,可以在单细胞水平对抗体分泌细胞及细胞因子分泌细胞进行检测。在疫苗研究中,ELISpot是一种标准工具,用于通过测量激发强大T细胞反应的能力 (通常是干扰素-γ的分泌) 来确定疫苗的有效性。为满足客户的检测需求,义翘神州可提供ELISA检测服务和ELISpot检测服务。[/size][/font][font='宋体'][size=16px]酶联免疫吸附测定(ELISA)检测服务[/size][/font][font='宋体'][size=16px]优势:拥有庞大的产品库:6,000多种优质ELISA应用抗体,500多种ELISA试剂盒。技术人员长期从事于抗体质控工作,经验丰富,实验结果可靠。价格优惠[/size][/font][font='宋体'][size=16px]周期:3-5个工作日[/size][/font][font='宋体'][size=16px]服务类型:双抗夹心法ELISA检测、间接法ELISA检测、竞争法ELISA检测[/size][/font][font='宋体'][size=16px]ELISpot检测服务[/size][/font][font='宋体'][size=16px]优势:[/size][/font][font='宋体'][size=16px]高灵敏度:百万分之一阳性细胞检测率。[/size][/font][font='宋体'][size=16px]高通量检测 (一块 ELISpot 板可作 96 test):每天可检测数百个样品。[/size][/font][font='宋体'][size=16px]直观、可信度高。[/size][/font][font='宋体'][size=16px]周期:[/size][/font][font='宋体'][size=16px]2-3个工作日[/size][/font][font='宋体'][size=16px]交付内容[/size][/font][font='宋体'][size=16px]提供斑点图像、阴阳性检测结果、对比免疫反应强弱及细胞因子分泌量比较等多项结果分析数据[/size][/font][font='宋体'][size=16px]这两项服务义翘神州均可提供![/size][/font]

  • 化学发光免疫分析

    化学发光免疫分析放射免疫分析法有很高的灵敏度,但存在着放射性防护和同位素污染等问题。近年来,许多非放射性同位素标记的免疫分析方法相继出现。其中,在化学发光反应及抗原-抗体特异性识别基础上建立起来的一种新的非放射免疫分析技术--化学发光免疫分析法,由于这种方法具有灵敏度高,特异性强,精密度好,线性范围宽,仪器设备简单,试剂价格低廉,方法稳定、快速等优点,已成为一种重要的非同位素标记免疫分析方法,用于各种抗原、半抗原、抗体、激素、酶、脂肪酸、维生素和药物等的检测。  化学发光免疫分析包括三大类型:即标记化学发光物质的化学发光免疫分析;标记荧光物质的荧光化学发光免疫分析和标记酶的化学发光酶联免疫分析。下面以偶合放大化学发光酶联免疫分析法检测人血清中乙型肝炎表面抗原(HBsAg)为例。  (一) 原理  尽管辣根过氧化物酶(HRP)可以催化Luminol-H2O2反应体系产生化学发光,但由于该体系的检测灵敏度不够高,不能满足酶联免疫测定的要求。因此,为了提高体系的检测灵敏度,可将HRP催化H2O2氧化曙红(Eosin)的反应与该反应产物增强HRP催化luminol-H2O2的化学发光反应相偶合,建立偶合放大化学发光酶联免疫分析法。这里,酶的活性是基于下列发光反应进行检测的:  HRP         luminol+H2O2───→产物+hν                 产 物                  ↑       Eosin+H2O2 ──────┘               HRP 二) 操作步骤  1. 包被抗体 在每个小试管中加入聚苯乙烯珠各一枚,再加入300μl用0.05M,PH9.6 碳酸盐缓冲液稀释的抗HBsAg抗体,同时设空白对照,置4℃过夜。  2. 洗涤 用抽滤针头吸干管内液体,加入Tris-HCl-Tween20洗涤3次,每次加2ml,放置3~5min,用抽滤针头吸干管内液体。  3. 加待检血清和阳性标准品 用PBS-Tween20缓冲液不同倍数稀释HBsAg阳性标准品或待检血清,每管加入300μl。同时设阴性对照;空白对照管只加抗体稀释液。置37℃孵育2h。  4. 洗涤 同2。  5. 加酶标抗体  用含小牛血清的PBS-Tween20缓冲液稀释HRP标记的抗HBsAg抗体,每管加入300μl,空白对照管只加用于稀释酶标抗体的稀释液。置37℃孵育2h。  6. 洗涤 同2。  7. 化学发光测定 给每管加入300μl底物溶液,置37℃保温20min。犎;后将小试放入LKB-1250 lumimeter中,并置于测量位置,加入300μl 5.0×10-4M luminol。记录仪记录化学发光强度。  8. 同时用ELISA方法进行对照,结果测量采用DG3022型酶联免疫检测仪。  结果判定(1) 定性 按下列公式判别阴、阳性:          L样品-L空白     ┌≥2.1 为阳性   S/N = ──────── = 商│       L阴性对照-L空白    └<2.1 为阴性   (2) 定量 以不同稀释度的HBsAg阳性标准品的化学发光强度为纵坐标,不同稀释倍数为横坐标,作出剂量反应曲线(标准曲线),犜r待测样品中HBsAg的含量就可由测量的化学发光强度换算得到。

Instrument.com.cn Copyright©1999- 2023 ,All Rights Reserved版权所有,未经书面授权,页面内容不得以任何形式进行复制