抗体药物检测

导读抗体药物在临床上主要用于癌症、自身免疫、代谢和传染病等疾病的治疗。与小分子药物相比，抗体药物在体内的吸收、分布、代谢及排泄具有独特的药代动力学特征。2020版《抗肿瘤生物类似药治疗药物监测药学专家共识》中多数专家强烈推荐对其进行监测，以实施个体化治疗策略。纳米表面分子导向限制性酶解- nSMOL（nano-Surface and Molecular Orientation Limited Proteolysis）技术是岛津开发的革新性技术，可以选择性酶解Fab 区域特征肽段，克服了全酶解技术及ELISA法诸多缺点，具有更好的选择性和重现性，是复杂基质中抗体药物定量的新利器。突破传统方案，nSMOL技术 – 抗体药物定量新视野以往对抗体药物的检测主要是采用ELISA试剂盒完成，但ELISA方法存在开发时间长、准确性一般、假阳性率高、线性范围窄等问题。而LC-MS/MS方法可以很好地弥补ELISA法的不足，但是如果前处理方法不够成熟，面对复杂的基质组分，常导致选择性和重现性不佳、检测耗时或灵敏度不理想的情况。01 技术原理nSMOL技术同时弥补了ELISA法及传统全酶解LC-MS/MS法的不足，技术原理如图1所示，其利用胰酶纳米颗粒与固化树脂之间孔径的差异，限制胰蛋白酶与抗体药物的接触区域，可以选择性酶解Fab 区域特征肽段。图1. nSMOL技术选择性酶解原理摘自Iwamoto N. et. al.Analyst, 2014, 139, 576-58002 技术优势nSMOL技术能确保获得靶标蛋白特异性肽段，降低样品的复杂程度，克服了传统溶液全酶解技术中存在的酶解产物复杂、酶解效率低、酶解重现性差，内源性干扰严重等问题，从而表现出良好的选择性和重现性。与ELISA法相比（见表1），其开发周期更短，定量特性更适合高灵敏、高特异性、多种抗体药物的高通量测定。03 应用广阔nSMOL技术开启了抗体药物定量分析的新视野，经过岛津与客户的不断研究探索，该技术已在不同治疗用途抗体药物的研发、质控、临床治疗药物监测中得到成熟应用。图2展示了国内外相关应用成果。截至目前，全球已上市100余种抗体类药物，nSMOL技术应用前景十分广阔。图2. 国内外相关应用创新临床应用，nSMOL技术实现多种炎症治疗性抗体药物同时监测临床上多种抗体药物均可用于炎症性免疫疾病的治疗，因此同时定量监测人血液中多种抗体药物浓度的分析方法，具有迫切的临床需求。01 nSMOL临床应用nSMOL技术发明人 - 岛津生命科学研究中心Takashi Shimada博士及其科研团队，2019年在《Journal of Immunological Methods》期刊上发表文章，使用nSMOL技术开发了9种抗体和Fc-融合蛋白(英夫利昔单抗、阿达木单抗、尤特克单抗、戈利木单抗、依库珠单抗、依那西普和阿巴西普、托珠单抗和美泊利单抗)的LC-MS生物分析方法，通过临床试验进一步论证了该技术在多种抗体药物浓度同时监测应用中的巨大价值。该文章中样品的处理方式采用了改进的nSMOL反应条件, 如图3所示。图3. 9种抗体和Fc-融合蛋白的nSMOL样本处理流程首先样品在缓冲液中与结合有Protein A的树脂混合，样品中的抗体被亲和富集。第二步，富集后的树脂与含固定化胰酶纳米颗粒混合，其表面固化的胰蛋白酶可以与树脂所富集抗体的Fab区域进行充分接触，特别是Fab区域中的CDR相关特征肽段被选择性酶解下来，洗脱后进行LC-MS/MS定量。为提高低敏抗体托珠单抗和美泊利反应效率，采用了250 mM TCEP-HCl水溶液的酸化还原加速条件进行处理，得到了良好的结果。9种抗体和Fc-融合蛋白通过特征肽段的LC-MS/MS检测，获得了其典型MRM色谱图（图4a,图4b），9种药物具有良好的灵敏度、色谱保留及峰形。图4. 9种抗体和Fc-融合蛋白药物典型MRM色谱图根据日本厚生劳动省药品和食品安全局评估和许可司发布的《药物开发中生物分析方法验证指南》进行了详细验证。验证结果显示该方案的定量灵敏度、线性范围、重复性、准确性等指标均满足该类抗体治疗药物监测需求。02 临床研究2017年11月至2019年1月，京都大学医院招募了45名患有类风湿关节炎(RA)或炎症性肠病(IBD)的日本患者参加这项研究。作者使用临床患者样本对比分析了9种药物同时监测与单个监测方法所得结果的相关性。部分结果见图5。图5. 两种方法定量结果相关性分析线性回归拟合Pearson相关分析表明，两种监测方法所得结果之间具有良好的相关性，且对照组各数据在95%置信区间内具有较高的重现性和较低的变异。作者经过严苛的方法学验证及临床实验，证明了基于nSMOL技术的LC-MS/MS法可以同时定量人血清中多种抗体及Fc-融合蛋白药物，并应用于治疗药物监测，助力患者个体化精准用药。结语nSMOL技术结合岛津三重四极杆质谱仪能够较好地解决单克隆抗体药物在定量分析中的难题，是抗体药物血药浓度监测不可或缺的高效工具。该方案为治疗性抗体药物的治疗药物监测(TDM)提供了更加简便高效、准确稳定的检测方法，期待其临床应用能够助力个体化治疗策略的探索与实践。撰稿人：任彪文中推荐技术方法方案仅用于医学专业人士技术交流，不作为临床诊断依据。如需深入了解更多细节，欢迎联系津博士sshqll@shimadzu.com.cn

抗体药物中的糖链对抗原性、生物活性、高级结构的稳定性均有很大的影响，因此直接关系到药品的安全性和有效性。由于培养工艺条件的变化会导致抗体药物中的糖链分布不均匀，所以在生产阶段对糖链的管理非常重要。现阶段虽然在日本药典中并未收录糖链的测定方法等内容，但在相关领域有关于介绍测定方法的需求。 本文为您介绍使用超快速液相色谱仪“Nexera X2”和高灵敏度荧光检测器“RF-20AXS” 对抗体药物中的糖链进行分析的方法。该测定方法使用了Core-Shell 型快速分析液相色谱柱“AerisTMPEPTIDE XB-C18”。 因为该色谱柱用于分离分子量较小的肽或进行肽图分析，所以可有效分离抗体药物中所含的糖链与杂质。 岛津荧光检测器RF-20Axs RF-20Axs是带温控功能的分光荧光检测器，采用新光学系统，实现了领先世界水平的高灵敏度。通过附加流通池的温控功能，大幅提升了峰响应对环境温度变化的稳定性。采用帕尔贴元件温控荧光检测器的流通池，可以将流入流通池中的样品的温度保持恒定。伴随温度变化发生荧光强度变化的化合物也可以进行稳定的定量分析。　 了解详情 请点击“使用荧光检测器RF-20AXS 对抗体药物进行高灵敏度糖链分析” 关于岛津 岛津企业管理（中国）有限公司是（株）岛津制作所于1999年100%出资，在中国设立的现地法人公司，在中国全境拥有13个分公司，事业规模不断扩大。其下设有北京、上海、广州、沈阳、成都分析中心，并拥有覆盖全国30个省的销售代理商网络以及60多个技术服务站，已构筑起为广大用户提供良好服务的完整体系。本公司以“为了人类和地球的健康”为经营理念，始终致力于为用户提供更加先进的产品和更加满意的服务，为中国社会的进步贡献力量。 更多信息请关注岛津公司网站www.shimadzu.com.cn/an/ 。

p style="line-height: 1.75em " /pp style="text-align:center"img src="http://img1.17img.cn/17img/images/201603/insimg/423d89ef-b2c0-432b-82bf-7282dc2e3167.jpg" title="201637164821361.jpg" width="500" height="427" border="0" hspace="0" vspace="0" style="width: 500px height: 427px "//pp style="text-align: center "中科院上海巴斯德研究所所长唐宏和MRCT首席执行官Dave Tapolczay代表合作双方签署并交换了合作协议。/pp style="line-height: 1.75em " 抗体类药物开发已经进入成熟阶段。早期主要是解决免疫原性问题，上世纪80年代以前的单抗主要是鼠源抗体，包括免疫原性反应在内的安全性问题使其难以得到临床认同。近年来，全人源抗体技术已经不是难题，最新的抗体药物已经实现全人源化，可完全规避鼠源成分带来的各种安全性风险。/pp style="line-height: 1.75em " 近日，中国科学院上海巴斯德研究所(IPS)和英国国家医学研究院科技部(MRCT)在上海成立合作共建“IPS-MRCT 抗体药物联合中心”，标志着中国抗体药物研发进入全新的阶段。/pp style="line-height: 1.75em " 传统的抗体类药物主要针对某些癌细胞特定抗原或针对肿瘤供给血管，如曲妥珠单抗和贝伐珠单抗。新的研究发现抗体类药物也能有一些新的用途，比如免疫检查点抑制剂PD-1类药物可以改变人体对癌细胞的免疫应答，抗体偶联物可以运输细胞毒类药物直达靶点，双特异性T细胞抗体可以将癌细胞和免疫细胞联络在一起，嵌合CD19单抗可以用于CAR-T治疗等等。抗体类药物的发展无疑为抗肿瘤靶向治疗提供了更多强大的武器。抗体类药物在肿瘤领域可谓大放异彩。不过，抗体类药物已不仅仅用于抗肿瘤治疗，其在多种自身免疫疾病、心脑血管疾病、眼科疾病等治疗领域中都显示出卓越的优势。/pp style="line-height: 1.75em " 中国的抗体类药物创新相比欧美还较为落后，国内抗体药市场绝大部分份额还被外资企业产品占据。中国的抗体药数量较少，技术水平也普遍不高，一些国外不认同的技术或淘汰技术开发的品种尽管在中国获批，但市场并不接受。此外，虽然我国抗体药在研品逐步丰富，但大多数品种依然是癌症或自身免疫疾病用药，新适应症用药还为数不多。/pp style="line-height: 1.75em " 不过，中国的抗体类药物创新水平正逐步赶上。一是国家新药创制政策对生物药创新日益重视，最新的“十三五”新药创制计划明确对抗体类药物新技术和新靶点创新的支持，包括双特异性抗体、抗体偶联物、PD-1类药物等都将给予重点支持。二是海外归国高水平生物药人才在国内陆续创建的生物药创新企业为国内带来了欧美最新的生物药创新技术，也带来了生物药创新的新理念。三是风投等资本力量与生物药创新的结合日益紧密。包括恒瑞的PD-1类药物SHR1210、康方生物的免疫监测点抑制剂AK-107、信达生物的双特异性抗体Anti-PD-1 Bispecific Antibodies等在研药物的海外市场权益，都以数亿美元的高昂价格转让给跨国企业，中国的创新抗体类药物已逐步得到国外企业的认同。/pp style="line-height: 1.75em " 最新成立的IPS-MRCT抗体药物联合中心是中国加速创新抗体类药物研发的又一有力证明。抗体药物联合中心将整合IPS和MRCT优势进行创新抗体药物的研发及转化，致力于中国的研究机构和国际以及国内制药公司之间建立转移转化的桥梁，促进中国创新抗体药物的研发与产业化。/pp style="line-height: 1.75em " 新成立的抗体药物联合中心主任，上海巴斯德所孙兵研究员介绍称：“过去三年中国新药临床申报(IND)中，抗体药物领域大多为仿制药，创新靶点少，未来鼓励创新抗体药物的研发是必然趋势。”他还表示：“中国基础研究发展迅猛，但转化研究的能力有待提升。”这也是IPS选择与MRCT合作的根本目的。/pp style="line-height: 1.75em " 英国国家医学研究院(MRC)拥有强劲的医药研发实力，造就了29位诺贝尔奖获得者。MRCT是负责MRC科技成果转化的非盈利性组织，在创新靶点抗体药物研发、知识产权保护、科技成果开发和转化等方面具有丰富的经验和独特的运作体系。/pp style="line-height: 1.75em " 上海巴斯德研究所科研合作处高级主管孟君对《第一财经日报》记者表示：“此次成立的抗体药物中心，是把双方多年来的合作正式化了，而且能够提供一个开放的平台，加强与国内外各大机构的研究合作，并将科研成果尽快产业化。”/pp style="line-height: 1.75em " 中国科学院上海巴斯德研究所是根据中法两国政府间协议，由中国科学院、上海市政府和法国巴斯德研究所三方为应对中国重要传染性疾病而建立的高水平、非盈利性的科研机构。研究所瞄准国家战略需求，定位于重大传染病的基础和应用研究，研究方向主要集中在新生及突发传染性疾病的病毒学、免疫学、疫苗学研究。/ppbr//p

2013年6月21-22日 广州　　2012年全球销售额前10名的药物中，抗体药物占据“半壁江山”，且市场增速势头不减 在中国，乐观估计，到2015年，抗体药物市场规模将达到325亿-650亿元。对抗体药物生产企业而言，机遇和挑战并重。　　易贸医药第三届抗体药物高峰会，在两届成功召开的基础上，将于2013年6月21-22日在广州举行。在议题上，本届会议更为专注的讨论抗体治疗药物产业化。从市场概况、前期研发、药物开发、临床试验、生产工艺出发，通过总、分会场的形式，更为细致、深入的探讨抗体治疗药物在发展过程中面临的挑战。　　战略合作伙伴：　　华南新药创制中心　　广东华南新药创制中心(以下简称中心)是在广东省政府主导下，由广东省科技厅等多家政府机构及部分骨干医药企业共同出资，于2008年10月成立的科技类民办非企业机构，坐落于广州科学城。理事单位包括：广东省科学技术厅、广东省财政厅、广东省发展和改革委员会、广东省卫生厅、广东省食品药品监督管理局、广州市科技和信息化局、广州开发区、广州中大控股有限公司、广州华银医药科技有限公司、广州白云山制药股份有限公司、广州药业股份有限公司等　　主会场　　抗体药物产业发展趋势及项目合作　　分会场一　　抗体药物临床前与临床研究　　分会场二　　抗体药物的产业化流程　　2013年抗体药物高峰会发言嘉宾：　　郭亚军教授　　中国人民解放军总医院肿瘤中心主任，第二军医大学肿瘤研究所所长，抗体药物国家工程研究中心和抗体药物国家重点实验室主任　　倪健教授　　苏州工业园区晨健抗体组药物开发有限公司董事长兼首席科学家，卫生部抗体技术重点实验室学术委员会副主任，被中央六部委(中央组织部、中央宣传部、中央统战部、人事部、教育部、科技部)评为全国留学人员先进个人及留学回国人员成就奖(国家主席胡锦涛等亲切会见)曾任二届美国华人生物医药科技协会会长(2001-2003年)，上海市优秀留学回国人才，上海市优秀学科带头人，上海市科学预见专家， 2005年享受国务院政府特殊津贴人员。　　周新华博士　　嘉和生物药业有限公司首席执行官。国际公认的著名生物制药，特别是单克隆抗体药物专家，是生物医药领域新技术创新的领军人物，是膜层析技术应用于生物医药大规模生产的先驱，单克隆抗体药物工艺病毒验证专家，曾任全球最大生物制药公司Amgen工艺开发总监，首席科学家，现担任北京大学客座教授。他是具有十多年会龄美国制药科学家学会资深会员，目前也是美国化学学会会员和美国华人生物医药协会终身会员。　　Dr. Dorothee Ambrosius　　Head Global Process Science at Boehringer-Ingelheim。Dr Ambrosius has a broad expertise in biochemistry/protein chemistry and over 15 years of experience in identification and development of novel biopharmaceutical proteins (antibodies and proteins factors) from different sources. She completed her PhD in biology at the RWTH in Aachen and joint Boehringer-Mannheim, biotechnology Research Center in 1989. She held several research management positions at Boehringer-Mannheim and Roche in the area of recombinant protein production.　　关于主办方　　易贸医药，作为易贸商务旗下独立业务，自2008年开始紧密跟踪，秉承易贸十多年来对于各个行业深入研究，并保持与业内人士紧密联系的优良传统，以专业第三方的角度，定期举办围绕市场热点的行业高端峰会，打造品牌峰会、市场调研、公关路演、商务合作等一系列活动。我们致力于增进国际与国内同行的了解，促进科研与生产企业的沟通，提升政府和产业企业的交流，借助会议的平台，在政府、企业和园区之间建一个信息共享的桥梁。　　官方网址：http://antibody.cbichina.com

连接子 - 抗体与药物结合的关键因素抗体-药物偶联物（Antibody-drug conjugate, ADC）结合了抗体的高特异性和小分子药物的强细胞毒性。这种组合结合了抗体的独特和非常敏感的目标能力，可以区分健康组织和癌组织。它还具有细胞毒性药物的细胞杀伤能力，可能最大限度地减少剂量限制性毒性，同时最大限度地提高所需的治疗效果。ADC的主要优点是可以在体循环中作为药物使用，最终在靶肿瘤细胞中释放游离药物。在这一过程中，连接子在释放有效药物靶向肿瘤细胞，决定ADC的药代动力学特性、治疗指标和选择性，甚至整体成功方面发挥着关键作用。目前使用的连接子可分为可切割连接子和不可切割连接子两大类，它们之间的区别在于它们在细胞内是否会被降解。一、用于连接的可切割连接ADC连接子的主要类别是可切割连接子。可切割连接子被设计为对细胞外和细胞内环境差异（pH、氧化还原电位等）表现出化学不稳定性，或者可以被特定的溶酶体酶切割。在大多数情况下，这种连接子被设计成在键断裂后释放有效载荷分子。这种无迹可循的药物释放机制使研究人员能够根据已知的游离有效载荷的药理学参数估计共轭有效载荷的细胞毒性。2.1 可切割接头的类型可裂解接头腙是一种酸不稳定基团，当ADC被转运到核内体（pH 5.0-6.0）和溶酶体（pH约4.8）时，它被用作可切割的连接子，通过水解释放游离药物。组织蛋白酶B响应连接子组织蛋白酶B是一种溶酶体蛋白酶，在多种癌细胞中过表达，参与人类许多致癌过程。组织蛋白酶B的底物范围相对较广，但它优先识别某些序列，如苯丙氨酸-赖氨酸（Phe-Lys）和缬氨酸-瓜氨酸（Val-Cit）。这种序列的c端切割肽键。Val-Cit和Val-Ala连接物偶联p -氨基苄氧羰基（Val-Cit- pabc和Val-Ala- pabc）是adc最成功的可切割连接物。PABC片段使自由有效载荷分子以无迹方式释放。双硫键连接子谷胱甘肽敏感连接子是另一种常见的裂解连接子，其策略依赖于细胞质中较高浓度的还原分子（如谷胱甘肽）（1-10 mmol/L）。二硫键嵌入在连接子中，在循环中抵抗还原性裂解。然而，内化后，大量细胞内谷胱甘肽减少二硫键，释放自由有效载荷分子。为了进一步提高循环中的稳定性，通常在二硫键旁边安装一个甲基。焦磷酸二酯连接子该阴离子连接子具有比传统连接子更高的水溶性和优良的循环稳定性。此外，在内化后，焦磷酸二酯通过内核体-溶酶体途径快速裂解，释放未修饰的有效载荷分子。图1. 可切割连接子。（Kyoji Tsuchikama & Zhiqiang An. 2018）二、不可切割的连接子不可切割连接子由稳定的键组成，抵抗蛋白质水解降解，确保比可切割连接子更高的稳定性。不可切割连接子依赖于细胞质和溶酶体蛋白酶对ADC抗体成分的完全降解，并最终释放与降解抗体衍生的氨基酸残基连接的有效载荷分子。与可切割连接子相比，不可切割连接子的最大优点是其等离子体稳定性增强，与可切割连接子相比，这可能提供更大的治疗窗口。此外，与可切割的偶联物相比，它有望降低脱靶毒性，因为不可切割的adc可以提供更大的稳定性和耐受性。图2. 不可切割的连接子。不可切割连接的化学稳定性可以承受蛋白质水解降解。单抗的细胞质/溶酶体降解可以释放与降解的单抗衍生氨基酸残基相连的有效载荷分子。（Kyoji Tsuchikama & Zhiqiang An. 2018）三、总结结论保证游离药物在肿瘤细胞内的特异性释放是选择Linker的最终目的。该连接子对ADC的稳定性、毒性、PK特性和药效学等具有重要意义。每个环节都有其优点和缺点。在选择连接子时，必须考虑许多因素，包括单克隆抗体和细胞毒性药物中的现有基团、反应性基团和衍生功能基团。最后，需要通过个案分析确定如何优化选择合适的连接物、靶点和毒性分子，平衡ADC药物的有效性和毒性。表1. 连接子类型及优缺点比较参考文献1. Kyoji Tsuchikama & Zhiqiang An. Antibody-drug conjugates: recent advances in conjugation and linker chemistries. Protein & Cell. 2018 9:33-46.2. Jun Lu. Feng Jiang. Aiping Lu. and Ge Zhang. Linkers Having a Crucial Role in Antibody–Drug Conjugates. Int J Mol Sci. 2016 Apr 17（4）:561.3. Monteiro Ide P, Madureira P, de Vasconscelos A, Pozza DH, de Mello RA. Targeting HER family in HER2-positive metastatic breast cancer: potential biomarkers and novel targeted therapies. Pharmacogenomics. 2015 16（3）:257-71.阿拉丁提供相关产品，详情请见阿拉丁官网：Linkers - A Crucial Factor in Antibody–Drug Conjugates (aladdin-e.com)

在“十三五”医药生物产业规划的推动下，我国抗体药物虽迎来发展机遇期，但仍在知识产权、检测标准、成本控制等方面受到制约，亟待大力创新，规范发展，实现产业转型升级。　　抗体药物成生物医药“潜力股”　　抗体是指机体在抗原性物质刺激下，由B细胞分化成浆细胞所产生的、可与相应抗原发生特异性结合的免疫球蛋白。通过与抗原(包括外来的和自身的)相结合，抗体可有效清除侵入机体的外源微生物并中和它们所释放的毒素，清除某些自身抗原，以维持机体正常平衡。由抗体物质组成的药物就是抗体药。抗体针对相应抗原具有高特异性和高亲和力的特性，使得其在疾病的诊断和治疗中显示出其他类型药物无可比拟的优势。　　目前全球抗体药物市场增长势头强劲，1997年全球抗体药物市场规模只有3.1亿美元，2010年已达到480亿美元。统计显示，2015年全球抗体药物市场规模已达到680亿美元，且年增长速度较高，如日本抗体医药2014年比2013年度增长幅度高达555亿日元。　　数据显示，在21世纪前十年，抗体药物在全国生物制药中的市场份额从10.5%上升到56.4%，被业内认为是生物制药产业中最为活跃的组成部分，已成为未来生物医药领域发展的“潜力股”。　　在临床实践中，抗体药物也呈现愈发活跃的状态。2013年全球前十大重磅畅销药中，6个都是抗体药物。美国詹森研究开发有限责任公司副总裁威廉R斯特罗尔表示，过去十年间，多种抗体治疗方法和新平台已被设计研发，未来抗体治疗的范围将进一步扩大。“目前一些针对免疫肿瘤学的抗体已被研发，即将进入临床，为癌症患者、免疫功能紊乱、代谢障碍等患者提供更多治疗方法。”　　抗体药产业在全球蓬勃发展的同时，中国内地近年来也持续发力：从2007年抗体药物市场规模的2.3亿元，增长到2010年的10亿元。随着“十二五”、“十三五”医药生物产业规划的推动，制药技术迅猛发展的拉动下，目前国内抗体药物产业发展迅速，已形成以北京、上海、西安、武汉等为中心的产业基地。　　虽然中国抗体药物相对基数小，但是发展潜力巨大。目前，我国国产单抗药物主要为仿制药。在进口药占主导、药品专利到期创造的窗口机遇期，将倒逼国产药比例将有所提升。2015年有640亿美元的生物专利药到期，其中抗体药物占比高达48%。业内普遍认为，中国“仿制”抗体药物将迎来一个发展机遇期。　　国内抗体药产业化发展仍受制约　　虽然国内制药企业在抗体药物研制方面取得有效进展，但仍存在一定制约。　　缺少自主知识产权。中国科学院过程工程研究所国家生化工程技术研究中心首席科学家苏志国指出，目前中国90%以上的抗体药物都是仿制国外，国内缺少自主知识产权的细胞株以及技术，包括设备、材料、工艺等都是采用国外进口，缺乏创新。　　华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室教授谭文松也表示，我国受到产能和成本制约，动物细胞培养生产工艺技术落后，且无血清培养基、生物反应器和原辅料等过分依赖借口，表达产物质量低、标准缺失，且分工不够明确，产学研用合作严重不足。　　纯化工艺成本过高。在生物技术药物产业发展中，生产制造规模和产品纯度的要求越来越严格。随着生物药物被批准和投入生产的数量增多，临床使用量持续加大，对生产制造纯化工艺的效能和成本要求也早随之提高。业内人士指出，目前抗体药物开发中，约60%的资金被投入在下游纯化工艺建设，药物制造成本可达到售价的20%到25%。　　上海交通大学生物制药实验室主任李秀荣认为，下游纯化成本扩张，也为生物制药企业的运转增加了压力。如果生产中可以减少纯化步骤，研究高质量纯化工艺，缩短生产周期，降低生产成本，提高生产效率，生物技术药物制造将会更加“轻装上阵”。　　药物质量检测标准尚未成熟。抗体药物检测标准的建立和验证，是药物最终获得批准并进入生产沟通的核心环节，质量分析检测贯穿全流程。据介绍，目前我国抗体药物质量标准尚未完全成型，主要沿用欧美标准，仍然需要学界和产业界积极配合。　　“除了标准不成熟，更重要的是我们的抗体药物企业都是等着国家检查，缺乏自查自纠的安全意识。”苏志国表示，目前美国已经提出了质量源于设计的概念，但中国的企业相对缺乏对质量重要性和安全性的认识。“安全是根本。如果药物安全无法得到保障，那产业化就将无法实现，国内抗体药物将在全球继续处于跟跑位置。”　　加强创新促国产抗体药产业转型升级　　“我们是生物医药的仿制药大国，进口药比国产药贵几倍。为什么医院碰到疑难杂症，还是青睐进口药?很大一部分原因，就是因为进口药比国产仿制药的有效性更强。”苏志国认为，加强创新、提高核心竞争力，是中国抗体药物发展的未来方向。　　专家表示，大部分抗体药物属于高精尖药物范围，诊疗类似癌症等疑难重症，感冒药等常见药物的“价格战”套路并不适用，应从提高质量、加大创新力度入手，整体提高抗体药物的产业能力。　　苏志国建议，国家、企业、科研单位等宜建立创新联盟，从国家层面鼓励新药创制，鼓励新抗体的研制，并重视知识产权，尽快实现细胞株、装备、消耗材料等内容的研发，以实现技术国产化，起到可以支撑的技术平台作用。　　在抗体药物创新中，动物细胞的大规模培养技术已成为各个国家生物医药产业化的核心竞争点。谭文松指出，我国动物细胞工程行业起步较晚，目前上市产品数量和种类少，工业化生产规模小。建议国家加大力度促进细胞株的代谢工程改造，并加强对细胞培养过程的理解和优化，提高抗体表达速率，开发高产量、高质量的细胞培养工艺，以补齐短板，实现行业转型升级。

p style="text-align: center "img title="01.jpg" src="http://img1.17img.cn/17img/images/201712/insimg/27f551b5-cf28-4863-90a3-b4b5162691b4.jpg"//pp　　2014年以来，抗体药物进入爆发阶段，短短三年多的时间有超过30款抗体药物获批上市。2016年是FDA监管批准的“小年”，仅批准了22个原创新药，而抗体药物多达7个。2017年至今，已经有9个抗体药物获批上市。抗体药物的市场容量近年来快速攀升，从2012年530亿美元快速扩容到2016年的880亿美元，2017年上半年抗体药物市场容量已达到490亿美元，预计2017年全年将首次突破千亿美元大关。抗体药物已成为整个制药行业中发展最快的领域之一。目前尚有550多种抗体药物处于临床研发阶段，包括超过50个品种已进入了三期临床研究阶段。本文即对目前全球上市的抗体类药物，根据不同的适应症领域做一简要汇总。/pp style="text-align: center "img title="05.jpg" src="http://img1.17img.cn/17img/images/201712/insimg/24dbe449-e6c7-4a14-b36b-7e96190e7665.jpg"//pp style="text-align: center "img title="06.jpg" src="http://img1.17img.cn/17img/images/201712/insimg/b9285e06-8f29-4b0a-a847-d2c47f8b7f59.jpg"//pp style="text-align: center "img title="07.jpg" src="http://img1.17img.cn/17img/images/201712/insimg/b24a1f7e-bd72-45c4-8c76-3c784ad65c3f.jpg"//pp　　附注：/pp　　1.本表主要内容改编自文献1，对更多资料感兴趣的读者可自行查阅。/pp　　2.表中抗体药物列表信息更新至2017年12月10日。/pp　　缩略词表：/pp　　ALL：acute lymphoblastic leukaemia/pp　　AML：acute myeloid leukaemia/pp　　CLL：chronic lymphocytic leukaemia/pp　　CTLA4：cytotoxic T lymphocyte protein 4/pp　　HER2：human epidermal growth factor receptor 2/pp　　Ig：immunoglobulin/pp　　IL：interleukin/pp　　EGFR：epidermal growth factor receptor/pp　　FGF23：fibroblast growth factor 23/pp　　PD1：programmed cell death protein 1/pp　　PDL1：PD1 ligand 1/pp　　PDGFRα：platelet-derived growth factor receptor-α/pp　　TNF：tumour necrosis factor/pp　　VEGF：vascular endothelial growth factor/pp　　VEGFR2：vascular endothelial growth factor receptor 2/pp　　参考文献：/pp　　1.Next generation antibody drugs: pursuit of the ' high-hanging fruit' . Nature Reviews Drug Discovery doi:10.1038/nrd.2017.227/pp　　2.www.fda.gov./pp　　3.药渡数据。/pp /p

2014年3月10-11日，GE医疗生命科学部出席在厦门日航酒店召开的2014（第四届）抗体药物及新药研发高峰会，并推出抗体药物质量分析与过程控制的整体解决方案。会议期间，GE医疗生命科学部的技术人员与来自抗体药物研究开发、工业生产与质量控制，以及抗体药物临床研究领域的专家和业界相关人士，共同探讨生产质控和临床开发的热点话题，并在当前抗体药物及生物类似药市场蓬勃发展的大气候下，分享抗体药物新趋势，以迎接行业挑战与机遇。 此次，GE医疗生命科学部展示了旗下全面、成熟的整体解决方案，涵盖从抗体研发、生产放大直至产品分析的完整工业流程。随着近年来国内质量法规的日渐升级完善，大量在研新药和仿制药进入临床前和临床阶段，抗体药物的临床安全性评价和生产环节质量控制日益受到重视。尤其对于抗体等生物治疗性药物，其复杂的药物结构和多步的生产流程，更容易导致最终产品在质量、药效甚至安全性方面的差异。因此，采用最先进的技术（State-of-art techniques）对临床阶段的免疫原性进行全面筛查表征，对工艺流程中抗体产品的关键的质量属性（Quality Attributes）进行实时监测和控制的理念逐渐被行业认可和应用。因而在此次峰会上，GE更着重介绍了针对抗体药物质量分析和过程控制的解决方案。 来自GE医疗生命科学部的Biacore产品经理蔡河做了“Biacore技术在抗体药物质量控制与安全性评价环节的应用与进展”的主题报告，详尽地介绍了GE非标记生物物理分析技术，特别是Biacore技术的价值与应用，包括无需标准曲线的抗体活性浓度定量技术（CFCA）、生物活性分析（FcR, C1q）、临床免疫原性、ADA筛查和表征等。尽管众多的研究者和业内专家对包括Biacore在内的GE非标记分析技术在抗体的药物靶点发现与确认、抗体筛选、动力学表征等前期开发领域的标杆应用早有认可，此次还是对其延展的强大的质量分析和安全性评价的技术价值和产品应用表示出了极大的兴趣。另外，随着近几年国内生物类似物（生物仿制药）市场不断加温，GE的非标记生物物理技术也一定会在生物类似药的head-to-head的一致性分析方面发挥不可替代的作用。 本次峰会还对近几年抗体药物研发的新热点，如ADC（抗体-药物偶联物）、双特异性抗体、抗体药物的临床试验等具体策略和问题展开了深入的探讨；在专场访谈中对于抗体研发的合作模式，法规和质量要求，以及如何更有效的开展生物制品的临床试验进行了开放式的讨论。 GE医疗生命科学部作为在抗体和生物制药领域的领先供应商，期望借其抗体研发、生产到分析平台，以及包含企业整体化解决方案在内的先进技术和理念，共同推动国内抗体和生物制药的进步和发展。

p style="text-align:center"img src="https://img1.17img.cn/17img/images/201904/uepic/9537c51b-c218-4822-b839-7c19b1cd2048.jpg" title="yimiao.jpg" alt="yimiao.jpg"//pp　　strong大会背景：/strong/pp　　人用疫苗和抗体是生物医药产业的重要组成部分。接种疫苗是公认的最经济、有效的感染性疾病防控手段。当前全球上市的疫苗种类约68种,可预防34种疾病。近年来,全球疫苗市场年销售总额保持在300亿美元左右。抗体药物是现代生物医药产业的主力军,目前占全球生物药物市场的50%,是生物医药产业增长最快的细分领域。抗体药物以其高特异性成为全球药品市场上炙手可热的药品，而单克隆抗体作为抗体的一种，主要用于恶性肿瘤、免疫性疾病、移植排斥反应、感染性疾病和心血管疾病等治疗中。/pp　　strong【时间】/strong2019年7月11日-12日/pp　　strong【地点】/strong北京 亦庄生物医药园/pp　　strong【形式】/strong大会主题报告、分会场技术报告、新技术与产品展示 /pp　　strong【会议规模】/strong 500人/pp　strong　参会人员/strong/pp　　诚挚邀请各高校科研院所、国内外著名专家学者、抗体研发中心，研究所，重点实验室的主要负责人、疫苗抗体生产和销售企业的高管、相关厂商、届时将吸引500余名专业人士齐聚北京。/pp　　strong参展费用/strong/pp　　标准展位(2m× 3m=6m)：14800元人民币/pp　　统一配置：三面隔板(高度250cm,可用高度246cm)一块楣板(标注公司Logo 与名称)地毯、两盏射灯、一张洽谈桌、两把椅子、220V电源插座。/pp　　strong参展范围/strong/pp　　1、疫苗、抗体、诊断试剂、实验室设备/pp　　2、细胞培养基、动物血清等方面的技术与产品/pp　　3、生物培养箱、发酵罐、酶标仪、生物传感器/pp　　4、疫苗抗体技术解决方案的厂商 大会组委会秘书处-联络方式/pp　　联系人：范老师 15910266159 (微信同步)/pp　　邮 箱：fanyu@swjslt.com Q Q 咨询：3030466696/pp　　strong论坛日程安排/strong/pp　　strong2018年7月11日上午/strong/pp　　.............................................................................................................................................../pp　　07:30-09:00 strong参会代表报到/strong/pp　　09:00-09:15 strong开幕式 /strong：园区领导致开幕词/pp　　09:15-09:45 中国生物医药现状与发展趋势/pp　　09:45-10:15 疫苗创新的机遇及挑战/pp　　10:15-10:35 中场休息 参观展览/pp　　10:35-11:05 创新生物药在中国的挑战及应对策略/pp　　11:05-11:35 连续工艺操作在抗体药物生产中运用与进展/pp　　11:35-12:05 病毒疫苗高效工业化生产关键问题及其对策/pp　　12:00-13:00 strong自助午餐/strong/pp　　strong7月11日下午 专题论坛一 新型疫苗研发与评价/strong/pp　　.............................................................................................................................................../pp　　13:30-14:00 新型疫苗研发趋势与新技术应用/pp　　14:00-14:30 病毒疫苗工艺杂质控制及检测方法/pp　　14:30-15:00 新疫苗临床前安全性评价/pp　　15:00-15:20 中场休息 参观展览/pp　　15:20-15:50 H7H9流感疫苗安全性及免疫性探讨/pp　　15:50-16:20 癌症疫苗的开发进展及未来机会/pp　　16:20-16:50 佐剂研发推动创新疫苗发展/pp　　16:50-17:20 疫苗过程中的病毒颗粒纯化/pp　　.............................................................................................................................................../pp　　strong7月12日上午 专题论坛二 抗体药物研发新技术/strong/pp　　.............................................................................................................................................../pp　　09:00-09:30 中国生物制药的工艺开发和商业规模生产-优势和挑战/pp　　09:30-10:00 抗体类药物创新研发策略/pp　　10:00-10:20 中场休息 参观展览/pp　　10:20-10:50 生物制药过程的效率和效益：过程模拟和评价/pp　　10:50-11:20 抗体药物下游工艺开发与产业化关键技术/pp　　11:20-11:50 单克隆抗体唐的质量控制技术/pp　　12:00-13:30 自助午餐/pp　　.............................................................................................................................................../pp　　strong7月12日下午 专题论坛三 抗体药物研发新技术/strong/pp　　.............................................................................................................................................../pp　　13:30-14:00 抗病毒治疗性抗体的研究进展/pp　　14:00-14:30 从抗体设计到产业化生产看QBD的重要性/pp　　14:30-15:00 双特异抗体药物研发技术/pp　　15:00-15:20 中场休息 参观展览/pp　　15:20-15:50 蛋白(单抗)药物制剂的开发策略/pp　　15:50-16:20 抗体药在肿瘤和传染病治疗中的应用/pp　　16:20-16:50 单抗药物的药学研究开发重点与案例分析/pp　　.............................................................................................................................................../pp　strong　1，参展商确定参展请与组委会联系索取“参展申请表”/strong/pp　　span style="color: rgb(255, 0, 0) "温馨提示：参展企业须尽早报名,以便获得相对优越位置。/span/ppbr//p

2012中国抗体药物开发与工程国际论坛(简称：Antibody China Summit 2012)于2012年6月6日星期三&mdash &mdash 2012年6月7日星期四在锦江汤臣大酒店举行。 在上一届医药制造峰会的深远影响下，立足于上海的中国抗体药物开发与工程国际论坛即将成为中国抗体药物研发制造业最具影响力的国际会议之一，并立志于为蓬勃发展的中国抗体产业和打造未来世界级抗体贡献智慧和力量。 超过一百五十位与会代表，十几家主流公司和媒体，二十几位抗体领军人物共同出席，除此以外我们与美国权威抗体药物杂志也进行了友好合作。来自中国医药成果转化中心，美国国家癌症研究所，University of Colorado Denver，葛兰素史克，默克，Pharmanet，Millipore，JS Biosciences 等机构的发言嘉宾就抗体中国市场，最新研发突破，未来抗体研发趋势，全球化生产技术创新，大规模生产工艺的发展等问题分享最新的智慧。 大昌华嘉携仪器家族的新成员--法国FOGALE公司在线活细胞浓度分析仪亮相了本次大会，受到了广泛关注。 FOGALE公司创立于1983，是电容、光学和超声技术领域的权威企业。FOGALE BIOTEC位于美国马萨诸塞州、剑桥，专注于研发和销售上游发酵和细胞培养高端设备， Biomass细胞浓度测量系统是全球最先进的在线细胞分析系统，仪器采用电容法的原理，在线实时测量细胞的浓度，为生物发酵和细胞培养领域提供一种全新的检测手段。 目前Biomass系统已成功应用于啤酒行业，和细胞制药行业，在欧美制药和饮料行业已得到广泛的应用，目前中国企业已经开始使用上这项全新的技术。

2012中国抗体药物开发与工程国际论坛(简称：Antibody China Summit 2012)于2012年6月6日星期三&mdash &mdash 2012年6月7日星期四在锦江汤臣大酒店举行。 在上一届医药制造峰会的深远影响下，立足于上海的中国抗体药物开发与工程国际论坛即将成为中国抗体药物研发制造业最具影响力的国际会议之一，并立志于为蓬勃发展的中国抗体产业和打造未来世界级抗体贡献智慧和力量。 超过一百五十位与会代表，十几家主流公司和媒体，二十几位抗体领军人物共同出席，除此以外我们与美国权威抗体药物杂志也进行了友好合作。来自中国医药成果转化中心，美国国家癌症研究所，University of Colorado Denver，葛兰素史克，默克，Pharmanet，Millipore，JS Biosciences 等机构的发言嘉宾就抗体中国市场，最新研发突破，未来抗体研发趋势，全球化生产技术创新，大规模生产工艺的发展等问题分享最新的智慧。 大昌华嘉携仪器家族的新成员--法国FOGALE公司在线活细胞浓度分析仪亮相了本次大会，受到了广泛关注。 FOGALE公司创立于1983，是电容、光学和超声技术领域的权威企业。FOGALE BIOTEC位于美国马萨诸塞州、剑桥，专注于研发和销售上游发酵和细胞培养高端设备， Biomass细胞浓度测量系统是全球最先进的在线细胞分析系统，仪器采用电容法的原理，在线实时测量细胞的浓度，为生物发酵和细胞培养领域提供一种全新的检测手段。 目前Biomass系统已成功应用于啤酒行业，和细胞制药行业，在欧美制药和饮料行业已得到广泛的应用，目前中国企业已经开始使用上这项全新的技术。

相比于低水平重复，高水平重复对企业的影响往往更为严重，因为创新药投入更大，研发周期更长。　　还记得去年南方所年会上关于“新药高水平重复现象也已经呈现交错的态势”的观点。与业内广泛认同的“低水平重复”不同，“高水平重复”还未得到部分企业的重视，在某些领域(如替尼类)创新药的研发已经出现了扎堆情况。　　在一系列利好因素的作用下，国内生物药研发非常活跃，尤以抗体类药物最受关注。相比于替尼类等，国内抗体类药物过热态势还不明显，但我们也看到不少国内优秀企业也开始或准备涉水抗体类药物研发。从靶点上看，国内抗体类药物研发依然集中在TNF-α 、CD20、HER2、VEGF等热门靶点，而对于一些国外研发比较活跃的新靶点，国内还比较滞后。　　据笔者统计，截至2016年10月，国内已上市或在研的抗体类药物(不含融合蛋白类药物，排除鼠源单抗)总数达到180个(数据来源于CDE公开数据，在研品种仅包括至少申报临床的品种，不含前期研发品种)。其中，国内企业开发的品种为128个，占71.1% 跨国企业开发的品种为52个。　　180个品种中，创新抗体药有85个，其中国内企业开发的品种为35个，占41.2% 生物类似药共95个，除了2个是国外企业的品种，其余均是国产品种。虽然从分布来看，国内单抗类药物仍以生物类似药为主，但创新药的数量已经大幅增长。同时，一定数量生物类似药的开发无疑也是非常节约研发资源的方式，可以降低开发风险。　　相比于化药品种，抗体类药物的研发投入巨大，难度也更高。不少国内企业对于抗体类药物开发难度并没有清醒的认识，看到类似凯美纳、朗沐、泰欣生和艾坦这样的品种上市后获益颇丰，就简单认为抗体类药物一旦获批就能轻松获得数亿元的销售额。　　比如网上就有大量类似的提法：“某某公司的某产品是全球某畅销品种的相似品种，一旦上市该药销售额有望超过**亿元”。殊不知，这些销售成绩都需要大量的市场推广才有可能实现，加之国内如赫赛汀、美罗华、安维汀和修美乐等品种普遍已有超过10家以上的类似药申请。部分靶点的生物仿制药已经明显过热，一堆产品蜂拥而至，仅在研究阶段的临床基地筛选，病例入组就将让不少企业苦不堪言。　　此外，尽管在小试及中试阶段，生物药的开发已经难度不大，但如何在质量和成本可控的情况实现产业化，这一步依然非常漫长。即便是顺利上市，单抗类药物同样会面临激烈的竞争，尤其对于某些目标人群本就有限的品种。　　因此，对于抗体类药物的研发，国内企业还需冷静思考，切莫跟风。本文梳理出国内抗体类药物的8个研发热门靶点，对各靶点市场情况和趋势进行精辟分析，为国内抗体类药物研发提供参考和建议。　　NO.1 TNF-α 靶点　　[已上市/在研品种] 28种　　[生物类似药热点] 阿达木单抗(17种)　　TNF-α 靶点是单抗取得最为成功业绩的靶点。即便排除TNF-α 融合蛋白药物依那西普，仅抗TNF-α 单抗就有4个重磅炸弹级品种：首个获批的英夫利西单抗，“药王”阿达木单抗，以及新获批的戈利木单抗和赛妥珠单抗。这4个品种2015年全球销售额合计达266亿美元。　　不过，相比于TNF-α 单抗在全球大放异彩，其在国内的表现却相当惨淡。根据样本医院销售数据，尽管类克(英夫利西单抗)及修美乐(阿达木单抗)已在国内上市，但两个产品样本医院销售合计仅为1.33亿元，且连续两年销量止步不前。这也提示，短期内国内类风湿关节炎生物制剂还难以获得市场认可。　　虽然国内销售不佳，却也无碍TNF-α 单抗成为国内最受关注的单抗研发类别，已上市及在研的单抗达到28个。其中英夫利西单抗、阿达木单抗及各自的生物类似药共有22个。　　尤其是英夫利西单抗生物类似药，作为人鼠嵌合单抗，在阿达木单抗上市多年的情况下，国内研发依然活跃。进度最快的上海百迈博制药已经申报生产，值得期待 还在申报临床的几个厂家，则建议进一步评估继续开发的价值。　　阿达木单抗类似药仅仅已申报品种就达到17个，更值得注意的是还有不少准备申报临床的企业。目前申报进度最快的是百奥泰生物和信达生物，均已进入Ⅲ期临床 此外，北京绿竹生物、嘉和生物、江苏众合、复宏汉霖和浙江海正都已获得临床批件。　　在TNF-α 创新药方面，全人源、抗体小型化以及长效是TNF-α 单抗的主要发展方向。因此，与英夫利西单抗和阿达木单抗相比，杨森长效全人源的戈利木单抗和UCB的长效抗体片段赛妥珠单抗有一些优势，这两个品种在国内研发分别进展到申报生产和Ⅲ期临床。　　国内自主创新的一类TNF-α 药物中，目前主要有丽珠的注射用重组人源化TNF-α 单抗，以及三生的人源化抗人TNF-α 单抗注射液(CHO细胞)，两个品种目前都在进行临床研究。　　NO.2 VEGF靶点　　[已上市/在研品种] 26种　　[生物类似药热点] 贝伐珠单抗(19种)　　与TNF-α 一样，VEGF也是药物获得巨大成功的靶点，贝伐珠单抗的上市及其肿瘤饥饿疗法的提出在当时的影响力不亚于PD-1及其肿瘤免疫疗法。　　VEGF单抗除了在肿瘤领域取得巨大成功，也广泛用于眼底新生血管疾病的治疗。包括贝伐珠单抗、雷珠单抗，以及2个VEGF融合蛋白类药物(阿柏西普和康柏西普)，都广泛用于包括年龄相关性黄斑病变在内的多种新生血管疾病。VEGF单抗药物治疗眼底疾病的地位甚至高于其治疗肿瘤的地位。2015年，贝伐珠单抗(安维汀)和雷珠单抗(诺适得)的全球销售额分别达70亿美元和36亿美元。　　　　在国内，目前已上市和在研的VEGF单抗达26种。其中，贝伐珠单抗的类似药达19种，信达生物进度最快，已进入Ⅲ期临床，此外还有多个厂家已经获批临床。雷珠单抗由于上市较晚，目前国内类似药获批临床的仅有齐鲁1个品种。　　VEGF单抗创新药中，礼来最新在FDA获批的Ramucirumab也已在中国进入Ⅰ期临床，该药在国外已获得包括非小细胞肺癌和胃癌在内的多个适应症。先声的Sevacizumab是其联合开发的VEGF单抗，也在中国开展Ⅰ期临床。　　此外，泰康生物正在开展Ⅰ期临床的重组抗VEGF人源化单抗注射液，应该是一个针对眼底疾病的VEGF单抗，该药作为为数不多的针对眼底疾病的创新药，更值得期待。　　NO.3 CD20靶点　　[已上市/在研品种] 19种　　[生物类似药热点] 利妥昔单抗(15种)　　CD20靶点单抗主要用于非霍奇金淋巴瘤和淋巴细胞白血病的治疗。全球首个获批的CD20类单抗罗氏的利妥昔单抗(美罗华)，2015年全球销售额高达73亿美元。在国内市场，美罗华也是最畅销的抗肿瘤单抗药物，根据PDB样本医院数据，2015年样本医院销售额达到7.93亿元。　　　　在美罗华的刺激下，国内CD20类抗体药物的研发一直非常活跃，目前已上市和在研的CD20单抗共有19个，其中利妥昔单抗及其类似药共有16个。　　在利妥昔单抗类似药的研发竞争中，三生国健的速度最快，已经完成临床研究，正在申报上市。此外，复宏汉霖、神州细胞和信达生物已进入Ⅲ期临床，浙江海正已进入Ⅱ期临床，还有6家企业已获得临床批件。　　CD20创新药方面，目前国内有3个在研品种。考虑到利妥昔单抗是人鼠嵌合单抗，故降低其免疫原性是一个发展方向。　　罗氏的Obinutuzumab是第一个被FDA认定为“突破性治疗”的单抗，与利妥昔单抗一样靶向CD20单抗，但其属于人源化单抗，且通过糖基化修饰其Fc片段增加其对Fcγ 受体的亲和力。GSK的奥法木单抗(Ofatumumab)是全人源的CD20单抗，该药用于CLL同样获得了突破性治疗认定。目前Obinutuzumab和Ofatumumab都在中国开展Ⅲ期临床研究，有望分享美罗华的市场份额。　　国内CD20创新药也有了先行者，北京天广实生物的重组人源化单抗MIL62注射液是人源化CD20单抗，该药目前正在申报临床。　　NO.4 EGF靶点　　[已上市/在研品种] 19种　　[生物类似药热点] 西妥昔单抗(11 种)　　EGF类单抗主要用于结直肠癌的治疗。第一个获批的EGF类单抗是Imclone的西妥昔单抗(爱必妥)，该药2015年全球销售额超过14亿美元。　　在国内，除了爱必妥，百泰生物联合开发的尼妥珠单抗(泰欣生)也获批上市，两个品种上市早期都经历了快速增长，不过目前增速有所放缓，2015年两个品种样本医院销售合计达3.4亿元。　　　　爱必妥的成功和泰欣生的上市促进了国内EGF类抗体的研发，目前已上市和在研的EGF类单抗一共有19个，其中西妥昔单抗及其类似药共有12个。在西妥昔单抗类似药研发竞争中，张江生物的速度最快，目前正在Ⅲ期临床阶段，其余大部分处于Ⅰ期临床或获批临床批件阶段。　　西妥昔单抗的最大问题同样是免疫原性，该药属于人鼠嵌合单抗，因此EGF类单抗研发也着眼于解决免疫原性问题。帕尼单抗(帕妥木单抗)是安进研发的全人源EGF单抗，单药一度被认为有望替代西妥昔单抗，不过上市后大规模临床研究并未支持其在疗效或安全性上优于西妥昔单抗。目前帕尼单抗国内由贝达安进开发，正在开展Ⅲ期临床研究。除了针对西妥昔单抗的类似药，目前国内还有多个针对其他EGF单抗的类似药。齐鲁和上海津曼特生物的EGF单抗类似药都已获批临床，其中前者可能是帕尼单抗的类似药。　　创新药方面，目前国内有4个自主研发品种。神州细胞的重组全人源抗人表皮生长因子受体单抗注射液目前已经进入Ⅰ期临床，而上海赛伦生物和重庆智翔金泰生物各自的重组全人源抗EGFR单抗注射液均已经获得了临床批件，这些品种可能都是采用不同的方式使西妥昔单抗实现全人源。　　NO.5 HER2靶点　　[已上市/在研品种] 19种　　[生物类似药热点] 曲妥珠单抗(10种)　　HER2靶点单抗主要用于乳腺癌等HER2高表达的癌症治疗。第一个获批的HER2类单抗是罗氏的曲妥珠单抗(赫赛汀)，该药2015年全球销售额达到68亿美元，在国内该药销量同样增速迅猛，样本医院2015年赫赛汀销售额达6.66亿元。对于HER2高表达的乳腺癌、胃癌等疾病，曲妥珠单抗的疗效优越，并已经被国内外指南一致推荐为HER2阳性的乳腺癌等疾病的一线用药。　　中国是乳腺癌的高发国，患者众多，故HER2单抗市场巨大。目前已上市和在研的HER2类单抗一共有19个，其中曲妥珠单抗及其类似药共有11个。在曲妥珠单抗类似药研发竞争中，复宏汉霖和嘉和生物的速度最快，目前正在Ⅲ期临床阶段，安徽安科和齐鲁则进入Ⅰ期临床。　　尽管曲妥珠单抗已经得到临床认同，但业内还是希望能在HER2药物中有新的突破。帕妥珠单抗是罗氏新获批的HER2单抗，该药尽管同属HER2单抗，但作用靶点与曲妥珠有所区别。　　临床研究发现曲妥珠单抗联合帕妥珠单抗的疗效较单用曲妥珠单抗大幅提升。目前帕妥珠单抗正在国内开展Ⅲ期临床。对于帕妥珠单抗，国内不少企业也跃跃欲试，其中齐鲁的帕妥珠单抗类似药获批进入临床，丽珠的重组抗HER2结构域Ⅱ人源化单抗注射液同样定位于HER2的结构域Ⅱ，作为创新药该药已经获批临床。　　抗体偶联技术在HER2单抗使用最多，罗氏的Trastuzumab Emtansine(Kadcyla)是第一个在HER2领域获得成功的抗体偶联物，该药利用曲妥珠单抗和微管蛋白类药物DM1，偶联物较曲妥珠单抗的疗效显著提升，该药目前正在国内开展Ⅲ期临床研究。　　国内针对HER2的抗体偶联物研发活跃，目前已经有百奥泰生物的注射用重组人源化抗HER2单克隆抗体-美登素偶联物和烟台荣昌的注射用重组人源化抗HER2单抗-MMAE偶联剂获批开展临床研究。　　在HER2领域还有一个值得大书特书的国产创新药：武汉友芝友这样一个名不见经传的创新企业正在开发注射用重组抗HER2和CD3人源化双特异性抗体，该药是国内自主研发的首个申报临床的双特异性抗体，从理论上该药可以同时靶向HER2和T细胞，实现靶向免疫。　　NO.6 PD-1/PD-L1靶点　　[已上市/在研品种] 7种　　抗肿瘤无疑是抗体类药物最为关注的领域，而在抗肿瘤领域，以PD-1、PD-L1为代表的抗肿瘤免疫治疗又是其中最闪亮的类别。2014年《Forbes》破例将两个肿瘤免疫药物分别是Opdivo(Nivolumab)和Keytruda(Pembrolizumab)列为该年度最重要的创新药，各大专业医药数据分析公司也纷纷预测两个产品全球销售额将轻松突破50亿美元大关，甚至有望挑战修美乐的药王地位。除了这两个品种，罗氏的Atezolizumab也获批上市，该药是全球首个获批的PD-L1药物。三个药物目前都已进入中国，正在开展Ⅲ期临床研究，都有可能成为首个中国上市的PD-1/PD-L1药物。此外，默克雪兰诺的PD-L1药物Avelumab正在申请临床研究。　　PD-1/PD-L1类药物是国内抗体类药物创新的热点，国内在研的自主研发PD-1/PD-L1药物达7个，其中君实生物的重组人源化抗PD-1单抗注射液已经进入了Ⅰ期临床，此外百济神州的PD-1类药物BGB-A317、恒瑞的PD-1类药物SHR-1210和信达生物的PD-1类药物IBI308均获批临床。而基石药业、誉衡和嘉和生物各有1个PD-1/PD-L1类药物申报临床。　　NO.7 IL-6靶点　　[已上市/在研品种] 7种　　IL-6类单抗主要用于类风关等自身免疫疾病。类风关的生物制剂治疗一度被TNF-α 抑制剂垄断，但欧美最新指南普遍将各类生物制剂放到了等同地位，这使得包括IL-6类在内的各种非TNF类药物获得了巨大的市场机会。　　IL-6类药物目前最畅销的是罗氏的托珠单抗，该药2015年全球销售额达到15亿美元。在国内，IL-6治疗类风关的理念还有待推广，目前仅有静脉注射也阻碍了托珠单抗的推广。尽管不属于国内抗体类药物研究热点，但目前已上市和在研的IL-6类单抗依然达到7个，其中托珠单抗及其类似药共有4个。　　创新药方面，杨森的Sirukumab和Siltuximab(司妥昔单抗)都已申请在中国开展临床研究，其中全人源IL-6单抗Sirukumab已获得临床批件，在免疫原性方面有一定优势。国内IL-6创新药领域目前仅有药明康德的重组全人抗白介素-6单克隆抗体注射液，该药是药明康德和阿斯利康旗下的MedImmune共同研发的产品。　　NO.8 RANK靶点　　[已上市/在研品种] 6种　　核因子-κ B受体活化因子(RANK)及其配体RANKL与破骨细胞的成熟等一系列骨代谢相关信号通路有关。对RANK及其配体RANKL的抑制，可在某些情况下改善骨代谢，减少骨质疏松和骨折等疾病风险。　　根据该机制，安进成功开发了针对RANKL的狄诺塞单抗，该药已获批用于恶性肿瘤骨转移(SREs)和骨质增生等4种有巨大市场容量疾病的治疗。狄诺塞单抗尽管上市时间不长，但市场表现优异，2015年其全球年销售额已达30亿美元。　　国内RANK单抗均属于狄诺塞单抗及其类似药。安进的原研药目前已经在中国进入Ⅲ期临床。5个类似药中，齐鲁进度最快，已获得临床批件 其他厂家则还处于申报临床阶段。

安捷伦公司大力支持首届抗体工程高峰会暨抗体药物成果展（Antibody Engineering Summit & Antibody Therapeutics Exhibition） 随着生物医药市场的快速开发，探寻不同的抗体研发方法及需要应对的挑战变得日益重要和紧迫。对于蛋白治疗药物研发企业来说，从蛋白设计、抗体工程、生产工艺到技术应用，每一个环节都至关重要。2011年7月21-22日在上海银星皇冠假日酒店办的&ldquo 首届抗体工程高峰会暨抗体药物成果展&rdquo ，聚集了有关抗体研发、生产等全球领先企业高层，共同探讨抗体行业的研发进展和实际应用情况，并深入讨论了&ldquo 新医改&rdquo 环境下，抗体药物相关企业所面临的重大挑战、主要进展和应对方案、全球趋势、以及当前国内生产和应用市场分析等。 此次峰会围绕主题&mdash &mdash 国际抗体药物研发与合作，邀请到约100名来自抗体药物生产、抗体工程及新药研发、CRO、CMO、科研院校的国内外领先企业高层参会。 作为世界领先的生物医药行业分析解决方案供应商，安捷伦致力于帮助生物医药领域用户开发专业、安全、高质、高效的药物治疗产品，并且帮助用户以更快的速度，更低的成本将产品推向市场，经过近年来的先进技术及行业经验的不断积累，安捷伦目前可为广大生物医药领域用户提供广泛的完整应用方案，包括： 生理化学性质表征完整新生物成分（NBE）分析糖基化与磷酸化蛋白分析氨基酸分析肽谱分析产物相关的杂质分析工艺流程相关的污染物检测蛋白和抗体的质量保证/质量控制稳定性和剂型测试蛋白治疗药物的生产工艺优化等 7月21日进行的首日大会报告上，来自安捷伦公司的液质联用技术应用工程师陶定银博士进行了题为&ldquo 利用安捷伦HPLC、Chip-cube HPLC 及Q-TOF等仪器针对抗体药物的表征策略&rdquo 的精彩报告。报告中提到，单克隆抗体药物与抗原存在很强的相互作用且具有高特异性，目前在科研以及各种疾病治疗中备受关注。抗体药物在应用之前，需要进行一系列的表征，比如抗体药物的氨基酸序列、完整蛋白质、甲硫氨酸氧化、二硫键、以及糖基化等翻译后修饰。采用安捷伦的HPLC、Chip-cube HPLC 及Q-TOF等仪器方案可充分实现抗体药物的一系列表征。安捷伦开发的单克隆抗体-糖链分析芯片，可以快速高效的分析抗体药物的糖基化修饰，结果与LC-FLD方法相当。新颖的报告内容及创新的技术理念引发与会者强烈的关注和兴趣。更多安捷伦生物制药解决方案，请参考：http://www.chem.agilent.com/zh-cn/solutions/biopharma/pages/default.aspx 更多安捷伦生物制药分析解决方案在线讲座视频及应用材料，敬请联系我们：yunxia_shi3@non.agilent.com 订阅Access Agilent电子刊物，请登录: www.agilent.com/chem/accessagilent:cn 关于安捷伦科技 安捷伦科技公司（纽约证交所：A）是全球领先的测量公司，同时也是通信、电子、生命科学和化学分析领域的技术领导者。公司的18500 名员工为100 多个国家的客户提供服务。在2010 财政年度，安捷伦的业务净收入为54 亿美元。要了解安捷伦科技的信息，请访问：www.agilent.com.cn。

单克隆抗体(mAb)是制药行业增长最快的治疗方法之一，mAb的高阶结构(HOS)影响药物与靶标的结合特异性，从而影响治疗效果和副作用。若储存而导致HOS发生变化，例如蛋白质错误折叠和聚集，会导致稳定性降低、功效丧失或可能的免疫原性。因此，监测HOS对保证mAb疗法的有效性和安全性至关重要。X射线晶体学和核磁共振(NMR)光谱可以提供原子级分辨率，但存在费时费样品的缺点；生物物理技术，如差示扫描量热法(DSC)、动态光散射(DLS)、荧光光谱、红外(IR)光谱和圆二色(CD)光谱只能提供低分辨率的整体构象。焦碳酸二乙酯(DEPC)作为亲电子试剂能够修饰溶剂可接近的亲核侧链（Cys、His、Lys、Thr、Tyr、Ser）和蛋白质的N末端，这些残基产生的羧基化产物具有+72.021Da的质量转移，经过蛋白水解消化、液相色谱分离和串联质谱分析后，可以识别和半定量特定的蛋白质修饰位点。将一种条件（例如天然）与另一种条件（例如加热）进行比较时，特定残基处共价标记程度的变化可用于探测蛋白质的HOS变化（图1）。在这篇文章中，作者使用DEPC共价标记联用质谱，以利妥昔单抗作为单抗药物的模型，以期在远低于mAb治疗药物熔点的温度下能够特异性检测细微HOS变化，并通过活性测定进行验证。图1. DEPC 标记与质谱联用分析单抗药物结构的流程在通过共价标记研究热应力（heat stressed）利妥昔单抗之前，作者使用CD光谱、荧光光谱和动态光散射(DLS)来识别加热对蛋白质结构的干扰。发现当在低于其熔点的温度下加热利妥昔单抗4小时时，这三种技术在45°C或55°C时无法检测到显著的结构变化，而在65°C时仅显示出轻微的变化。随后作者团队使用DEPC CL-MS探测利妥昔单抗的细微结构变化。在45°C压力下的利妥昔单抗样品中发现DEPC标记水平的变化较少，大多数变化是由于蛋白质受热去折叠导致的标记增加（图2），且可变区的变化远少于恒定区。超过70%的标记变化发生在Tyr、Ser和Thr残基处，而发生在His和Lys残基处的标记变化始终小于20%。标记变化表明，45°C时的结构变化主要是局部微环境的变化，而非溶剂可及性差异显著的大结构变化，也就是说修饰位点分散在整个蛋白质结构中，而不是集中在蛋白质的某些区域。图2. 45°C 热应力 4 h 后 DEPC修饰程度的变化。饼图表示在利妥昔单抗的每个结构域内标记变化显著的修饰残基比例。红色代表标记增加，而蓝色代表减少。条形图表示共价标记变化程度低 (L)、中 (M) 和高 (H)的残基数量。活性测定能反映一定程度的结构变化对利妥昔单抗活性的影响，从而验证DEPC标记结果。桥接ELISA的结果表明，在预热至45°C后，利妥昔单抗的Fc结合活性没有显著变化（图3a），Fc区域的CDC活性估计在45°C热应激后保持不变（图3b），利妥昔单抗的Fab结合活性估计与对照样品没有差异（图3c）。活性测定结果表明蛋白质在45°C时没有发生显著的结构变化。在Fab和Fc区域中标记变化的残基数量相对较少，主要标记对局部微环境变化更敏感的Tyr、Ser和Thr残基。修饰位点分散在整个蛋白质中，对Fab和Fc区域的构象几乎没有影响，与共价标记质谱联用的测定结果相吻合。图3.使用单抗活性测定验证CL-MS实验揭示的结构变化。Fc区的结构完整性通过(a)测量Fc与捕获抗体结合的利妥昔单抗桥接ELISA和(b)测量补体依赖性细胞毒性的Alamarblue测定来评估。Fab区域的结构完整性通过(c)Raji细胞下拉试验评估，测量Fab与B细胞CD20抗原的结合。55°C加热4h后利妥昔单抗所有结构域的残基修饰程度都发生了显著的变化，尤其是Fab区域的VH和VL结构域。（图4）加热至55°C时，His和Lys残基处发生的标记变化几乎是45°C的两倍，表明蛋白质在这些区域展开；Fab区域标记水平发生显著变化，特别是在VH、VL和CL域。这表明利妥昔单抗的Fab区域存在局部结构变化，据报道这也是IgG1分子中对热应激最敏感的区域。Fc区域中没有观察到类似的发生标记变化的残基聚集，Tyr、Ser和Thr处的大多数标记变化为中度或高度变化，这些结果表明蛋白质拓扑结构可能发生变化。图4. 55°C 热应力 4 h 后 DEPC修饰程度的变化。饼图表示在利妥昔单抗的每个结构域内标记变化显著的修饰残基比例。红色代表标记增加，而蓝色代表减少。条形图表示共价标记变化程度低 (L)、中 (M) 和高 (H)的残基数量。尺寸排阻色谱(SEC)测量表明在65°C加热条件下存在高分子量物质。将DEPC CL-MS方法应用于65°C热应力的利妥昔单抗后，发现所有利妥昔单抗结构域的标记发生显著变化（图5），主要体现为标记的减少，这可能是因为蛋白质聚集。利妥昔单抗的Fab和Fc区均发现标记减少的残基簇，活性测定结果显示Fc结合和CDC活性的降低（图3），说明了Fc区特别是CH3结构域的标记变化，与DEPC标记结果一致。图5. 65°C 热应力 4 h 后 DEPC修饰程度的变化。饼图表示在利妥昔单抗的每个结构域内标记变化显著的修饰残基比例。红色代表标记增加，而蓝色代表减少。条形图表示共价标记变化程度低 (L)、中 (M) 和高 (H)的残基数量。总结DEPC标记技术的结构分辨率和灵敏度足以探测细微的蛋白质构象变化，该技术与质谱联用可在低于Tm的温度下揭示利妥昔单抗中的细微HOS变化，与经典的生物物理技术互补。总体而言，鉴于CL-MS简便、灵敏的特点，该方法将适用其他抗体药物的结构研究。

p　　strong01 抗肿瘤药物活体水平药效学评价/strong/pp　　Avastin/Bevacizumab通过特异性结合并阻断VEGF(血管内皮生长因子)抑制肿瘤血管生成，是世界上第一个抗肿瘤血管生成的抗体类药物。Palbociclib(帕博西尼)是针对 CDK4/6 激酶靶点的高选择性小分子抑制剂，辉瑞公司于2015年获得Palbociclib与诺华Letrozole(来曲唑)联合治疗ER+/HER2- 绝经后晚期乳腺癌的FDA药物上市审批。Docetaxel(多西他赛)为紫杉醇类传统化疗药物。/pp　　在2009年Clin Cancer Res杂志发表的文章中，辉瑞肿瘤生物部研发团队就利用IVIS小动物光学成像技术平台，将荧光素酶标记MDA-MB-435 乳腺癌细胞移植入小鼠肾包膜下，建立肾包膜肿瘤疾病活体水平动物药效学评价模型，通过观测给药后光学信号随时间的变化情况，进而评价Palbociclib (PD-991)、Avastin 和 Docetaxel三种不同药物，特定的给药途径、时间、剂量等给药策略对于肿瘤的治疗效果。/pp style="text-align: center"img src="https://img1.17img.cn/17img/images/201811/uepic/dbd4cf41-f7bb-40ed-86ba-6666a45320cf.jpg" title="1.jpg" alt="1.jpg"//pp　　相对于触诊、肿瘤体积测量等传统方法，利用高灵敏度的生物发光成像技术进行药物评价，可以更灵敏的发现残余病灶点或尽早发现肿瘤的复发，从而更准确的对药 物治疗效果进行判定。并且利用生物发光成像技术进行药效评价的另一独特优势在于，可以明确判断药物是否有效杀死肿瘤活细胞。这是由于生物发光的原理是基于活细胞环境的酶促反应，因此，能够发光的细胞必定是具有活性的，从而避免了传统体积测定方法造成肿瘤体积无变化、内部已出现细胞死亡的检测陷阱。/pp　　针对人类顽疾癌症的治疗，多靶点联合治疗是当前的一个新思路，而小分子药物和生物大分子治疗的联合应用带来的治疗改善，给攻克癌症治疗难题也带来了新曙光。而高灵敏度的生物发光成像技术平台，以其非侵入性、快速、高效、高灵敏度等特点，也为多靶点联合治疗开启了新篇章。/pp　　strong02 免疫检验点抗体药物联合治疗研究/strong/pp　　Michael Lim等人在2017年Clinical Cancer Research杂志上的文章中，首次使用PD-1阻断抗体、TIM-3阻断抗体和传统放疗(stereotacticradiosurgery, SRS) 三种方式联合，在小鼠神经胶质瘤模型上，评价不同组合联合治疗的效果，如下图数据所示，使用三种/pp　　方式联合治疗能显著提高小鼠的生存时间，并且通过IVIS成像系统检测发现，第14天以后治疗组已检测不到GL261-luc2细胞的生物发光信号。/pp style="text-align: center"img src="https://img1.17img.cn/17img/images/201811/uepic/019afff7-e279-40b5-8c7f-1f30623e10de.jpg" title="2.jpg" alt="2.jpg"//pp　　Ronald Blasberg等人在2016年Molecular Therapy: Oncolytics杂志上发表的文章中，使用PD-1/PD-L1阻断抗体，联合靶向PSMA的人CAR-T细胞，对小鼠前列腺癌模型(Myc-CaP:psma(+))的治疗效果。如下图中结果所示，阻断PD-1/PD-L1，使得hPSMA-CAR-Tcell免疫治疗效果增强，但是治疗反应仅仅是在短期内，表示可能存在其他的免疫调节机制，限制了CAR-T细胞靶向、功能和在hPSMA阳性肿瘤的汇集。/pp style="text-align: center"img src="https://img1.17img.cn/17img/images/201811/uepic/99b2eeeb-6c1e-48e6-a671-eb9a9b332be7.jpg" title="3.jpg" alt="3.jpg"//pp　　strong03 荧光标记抗体药物靶向分布及代谢研究/strong/pp　　通过近红外荧光探针直接标记单抗药物，经尾静脉注射后，利用小动物活体成像检测荧光信号，而实时追踪抗体药物在体内分布、肿瘤靶向性及代谢情况。/pp　　利用近红外荧光探针直接标记抗体药物Herceptin/Trastuzumab，将XenoFluor 750-Herceptin通过尾静脉注射到HER2/neu阳性的小鼠模型体内。给药前21天使用人源前列腺癌PC-3M-luc细胞株，在免疫缺陷小鼠体内进行细胞原位移植造模，并同时用Spectrum检测生物发光信号，判断肿瘤生长状况。/pp　　XenoFluor 750-Herceptin不同剂量给药后，使用Spectrum连续检测荧光信号72h，可直观看到药物实时分布且靶向肿瘤的情况，并通过软件定量分析/pp　　肿瘤区域的荧光信号后，得到Herceptin的代谢曲线。/pp style="text-align: center"img src="https://img1.17img.cn/17img/images/201811/uepic/5542361d-205d-469e-a29a-3bf0d2758091.jpg" title="4.jpg" alt="4.jpg"//pp　　Takuo Suzuki等人在2015年 mAbs杂志上发表的文章中，使用一种更先进的基于FRET的方法，分别标记Trastuzumab和Cetuximab，通过小动物活性成像平台检测完整抗体实时分布及抗体被降解的情况。/pp style="text-align: center"img src="https://img1.17img.cn/17img/images/201811/uepic/c4861b20-13a9-4035-88e1-c515eaecc01b.jpg" title="5.jpg" alt="5.jpg"//pp　　以上这种FRET模型非常适合对抗体完整性、生物分布及稳定性的评价，且对Fc区域介导的ADCC效应及改造机制和抗体偶联药物设计(Antibody-Drug Conjugates, ADC)提供重要有效信息。/pp style="text-align: center"img src="https://img1.17img.cn/17img/images/201811/uepic/d6daf28b-db0b-421c-89ad-e49cafece935.jpg" title="6.jpg" alt="6.jpg"//pp style="text-align: center "img src="https://img1.17img.cn/17img/images/201811/uepic/9f1c32a3-dbfd-486a-9cb0-a8a850330df0.jpg" title="7.jpg" alt="7.jpg"//p

日前，国家科技部公布了56家第二批企业国家重点实验室建设计划名单，华药集团抗体药物研制国家重点实验室位列其中。在抗体药物领域同时获批的还有上海张江生物技术有限公司。　　抗体药物是现代生物制药的核心组成部分，以靶向性好、疗效高、副作用小等优点日益受到重视，凭借快速的市场增长率已成为当今国际生物技术药物发展的主流。我国在此领域与国际先进水平差距巨大，攻克以抗体药物为重点的重大疾病防治和新药创制的关键技术，被列为国家中长期科技发展的战略目标之一。建设抗体药物研制国家重点实验室的目的在于，通过建立起国际水平的抗体药物开发基地，开发出具有自主知识产权的抗体药物及其生产工艺，实现我国在抗体药物开发技术领域的跨越式发展，改变我国生物技术药物低水平重复的局面。　　华北制药集团自1985年以来相继开发出基因工程乙肝疫苗、吉姆欣、吉赛欣、济脉欣等产品，并建成符合国际GMP标准的现代化模块式生物制药产业化基地金坦公司。近年又开发多个生物技术药物，其中重组人源抗狂犬病毒抗体是我国第一个具有自主知识产权的重组人源抗体，作为国家一类新药已获国家药监局临床批文 重组人血白蛋白也已进入临床申报并开始建设产业化基地。目前，华药已建成了较为完整的生物技术药物研发体系，并拥有按照国际标准建设的完整的生物技术药物质量控制及检测平台，为国内生物技术药物研发提供了与国际接轨的通道。

大家好，本周为大家分享一篇文章，Added Value of Internal Fragments for Top-Down Mass Spectrometry of Intact Monoclonal Antibodies and Antibody−Drug Conjugates [1]，文章的通讯作者是加州大学洛杉矶分校化学与生物化学系的Joseph A. Loo教授。　　抗体-药物偶联物(Antibody - drug conjugates, ADC)是一种很有前景的治疗药物，它通过linker为抗体提供高效的细胞毒性有效载荷，以提高其抗肿瘤功效。将linker和有效载荷偶联到抗体上，给ADC带来了额外的异质性，增加了对其全面表征的挑战。自上而下的质谱(TD-MS)技术近年来在单克隆抗体的表征中得到了广泛的应用，与自下而上质谱(BU-MS)和中下质谱(MD-MS)相比，TD-MS具有最简单的样品制备流程和保留单克隆抗体内源性修饰的优势。然而，对于抗体大小的蛋白质和具有显著二硫键组成的蛋白质，TD-MS的断裂效率较低，获得的序列和药物偶联位点信息有限。　　为了增加TD-MS的序列信息含量，一种策略是将不包含蛋白质序列N端和C端的内部片段纳入数据分析工作流程中，这种方法已被证明有助于二硫化完整蛋白的TD-MS表征。在这篇文章中，作者发现在TD-MS中分配内部片段将mAb序列覆盖率提高到75%以上，并允许确定链内二硫键连接和各种N-糖基化类型。对于治疗性非特异性赖氨酸连接ADC，几乎60%的假定药物偶联位点被识别。　　内部片段可以在不破坏二硫键的情况下进入结构紧密、碎片化效率高度受限的区域，因此有可能大大增强完整单克隆抗体的序列信息。作者对完整的NIST单抗的5个最丰富的电荷态采用了ECD和HCD两种碎片化方法，并将每个电荷态的两种碎片化方法的TD-MS结果结合分析。内部片段的纳入提高了二硫键约束区域的序列覆盖，例如，轻链Cys133和Cys193之间的二硫约束序列几乎完全由内部片段覆盖(图2A)，重链的Cys147-Cys203和Cys264-Cys324序列区也是如此(图2B)，而这些区域是末端片段难以触及的。CDR的覆盖率从53%增加到60%，这表明纳入内部片段可以更深入地了解这一关键区域。总体来说，轻链的序列覆盖率从54%提高到83%，重链从28%提高到72%，合并后整个NIST单抗的序列覆盖率从36%增加到76%(图1)。重链比轻链的覆盖率提高更为显著，这表明随着蛋白质分子量增大，分配内部片段变得更有价值。　　图1. 考虑(A)轻链、(B)重链和(C)全单抗内部片段前后不同序列区域的序列覆盖率，包括非二硫约束序列(Free)、二硫约束序列(SS-constrained)、全序列(Full)和CDR序列(CDR)　　图2. (A)轻链和(B)重链的NIST mAb序列覆盖图谱。蛋白质骨架上的蓝色、红色和绿色切割分别代表b/y、c/z和by/cz片段。序列上方的实线表示末端片段序列覆盖率，序列下方的实线表示内部片段序列覆盖率。紫色虚线表示链内二硫键，浅灰色表示受二硫键约束的序列区域，橙色表示互补决定区域(cdr)。　　HCD能够在不破坏二硫键的同时仅碎裂蛋白质主干，因此作者在完整的NIST单抗上应用HCD来生成含有完整二硫键的片段，以确定二硫键连接。在每个形成链内二硫键的半胱氨酸上应用-1H的修饰，以表明它们的完整性。对于轻链，52个末端片段和12个内部片段穿过S - S键I, 17个末端片段穿过S - S键II, 6个末端片段穿过两个二硫键，清楚地显示了这两个二硫键的连接模式(图3A)。靠近重链两端的两个二硫键，S - S键I和S - S键IV，被89个末端片段和9个内部片段穿过 而中间的两个二硫键，S−S键II和S−S键III，只有24个内部片段穿过，没有末端片段穿过(图3B,C)。这些结果证明了NIST单抗重链的链内S - S连通性，重要的是，中间的两个S - S键模式只能由内部片段确定。除了确定链内S - S连通性外，分配内部片段也有助于鉴定N糖基化。当纳入内部片段时，额外分配了25个含有G0F的片段，42个含有G1F的片段和34个含有G2F的片段，这表明分析内部片段对N-糖基化鉴定的能力。　　图3. (A)轻链、(B)重链、(C)仅含完整NIST单抗内部片段的重链，在每个形成链内二硫键的半胱氨酸上施加一个氢损失后，通过HCD TD-MS生成片段位置图。　　内部片段可以确定赖氨酸连接ADC的药物偶联位点。作者采用了类似的方法，将ECD和HCD应用于先前已充分表征的非特异性赖氨酸连接ADC。ADC的TDMS在轻链上仅产生8个与DM1结合的末端片段(图4A)。分配内部片段显著提高了DM1偶联位点的测定。ADC的TD-MS在轻链上产生61个1- dm1结合和15个2 - dm1结合的内部片段，定位了3个偶联位点(K106, K114, K133)，并将鉴定的两个偶联位点缩小到4个赖氨酸残基(K153, K160, K170, K175)(图4A)。对于重链也观察到类似的结果。综上所述，对于完整的ADC，仅用末端片段确认了16个偶联位点，而在包含内部片段后，这一数字增加到52个，覆盖了约58%的抗体所有假定的偶联位点。　　图4. 由ECD和HCD TDMS生成的完整IgG1-DM1 ADC (A)轻链和(B)重链片段位置图。黑色垂直虚线表示赖氨酸的位置。　　在这项工作中，作者首次报道了在完整的NIST单抗和异质赖氨酸连接ADC的TD-MS表征中分析内部片段的好处。内部片段的包含末端片段难以达到的二硫键约束区域，显著增加了完整单克隆抗体的序列覆盖率。重要的PTM信息，包括二硫键模式和N糖基化，可以通过包含内部片段获得。最重要的是，内部片段可以帮助确定高度异质赖氨酸连接ADC的药物偶联位点。　　撰稿：夏淑君　　编辑：李惠琳　　文章引用：Added Value of Internal Fragments for Top-Down Mass Spectrometry of Intact Monoclonal Antibodies and Antibody-Drug Conjugates

p style="line-height: 1.5em text-indent: 2em margin-bottom: 10px "近两年，抗体药物集中获批，全球生物制药产业进入爆发期。乘着政策东风，我国抗体药物产业发展势头也越发强劲。/pp style="line-height: 1.5em text-indent: 2em margin-bottom: 10px "然而，国内抗体药在结构设计、新药临床前研究与安全评价、临床设计、工艺和质量稳定性等方面仍存在诸多的挑战；在抗体靶标和新抗体基因发现、新抗体药物创制等诸多方面，与发达国家还存在一定的差距。当然，这也意味着中国抗体药物产业有着巨大的发展空间，蕴含着丰富的机会。/pp style="line-height: 1.5em text-indent: 2em margin-bottom: 10px "为促进我国抗体药物产业持续快速发展，仪器信息网将于2019年9月12日举办a href="https://www.instrument.com.cn/webinar/meetings/ktyw/" target="_self"span style="color: rgb(255, 0, 0) "strong“抗体药物开发与质量控制”/strong/span/a主题网络研讨会。本次线上会议，邀请到多位国内外知名生物药企技术大咖，通过实际案例分享，为广大网友献上一场抗体药物开发策略及相关技术方法的知识盛宴。/pp style="line-height: 1.5em text-indent: 2em margin-bottom: 10px "span style="color: rgb(255, 0, 0) "strong点击下图，即可免费听会！/strong/span/pp style="text-align: center "a href="https://www.instrument.com.cn/webinar/meetings/ktyw/" target="_self"img width="600" height="134" title="banner.png" style="width: 600px height: 134px max-height: 100% max-width: 100% " alt="banner.png" src="https://img1.17img.cn/17img/images/201908/uepic/3dce9f47-794d-4b14-b495-c9c60ed4220d.jpg" border="0" vspace="0"//a/pp style="line-height: 1.5em text-indent: 2em margin-bottom: 10px "span style="color: rgb(255, 0, 0) "strongbr//strong/span/pp style="line-height: 1.5em text-indent: 2em margin-bottom: 10px "span style="color: rgb(255, 0, 0) "strong会议日程/strong/span/pp style="text-align: center "a href="https://www.instrument.com.cn/webinar/meetings/ktyw/" target="_self"img width="600" height="289" title="上午.png" style="width: 600px height: 289px max-height: 100% max-width: 100% " alt="上午.png" src="https://img1.17img.cn/17img/images/201908/uepic/ee928fc8-8700-4041-b23b-bb8bca65c43b.jpg" border="0" vspace="0"//a/pp style="text-align: center "a href="https://www.instrument.com.cn/webinar/meetings/ktyw/" target="_self"img width="600" height="227" title="微信截图_20190830202951.png" style="width: 600px height: 227px max-height: 100% max-width: 100% " alt="微信截图_20190830202951.png" src="https://img1.17img.cn/17img/images/201908/uepic/a509cf0c-03ca-4bf0-ab5c-807d125e48bb.jpg" border="0" vspace="0"//a/pp style="line-height: 1.5em text-indent: 2em margin-bottom: 10px "span style="color: rgb(255, 0, 0) "strongbr//strong/span/pp style="line-height: 1.5em text-indent: 2em margin-bottom: 10px "span style="color: rgb(255, 0, 0) "strong报告专家简介（以报告先后顺序排列）/strong/span/pp style="text-align: center line-height: normal margin-bottom: 5px "img width="600" height="316" title="专家.png" style="width: 600px height: 316px max-height: 100% max-width: 100% " alt="专家.png" src="https://img1.17img.cn/17img/images/201908/uepic/6a4ca758-c9c8-4df1-a06f-fafd1bf13a31.jpg" border="0" vspace="0"//pp style="text-align: center line-height: normal margin-bottom: 5px "报告专家br//pp style="line-height: 1.5em text-indent: 2em margin-bottom: 10px "a style="font-family: 楷体, 楷体_GB2312, SimKai text-decoration: underline " href="https://www.instrument.com.cn/webinar/news/d_11806.html" target="_self"span style="font-family: 楷体, 楷体_GB2312, SimKai "strongspan style="color: rgb(0, 112, 192) font-family: 楷体, 楷体_GB2312, SimKai "孙乐博士/span/strong/span/aspan style="font-family: 楷体, 楷体_GB2312, SimKai "，北京市千人、北京师范大学兼职教授，中国生物技术创新服务联盟执委，SCI杂志CytoTechnology副主编。1989年毕业于清华大学生物科学与技术系，获博士学位，之后在美国奥瑞岗州立大学完成博士后研究。曾在世界最大的生物试剂公司Upstate/Merck历任生产经理和科研总监，2000年在美国创办A& G药业，2004年归国创业，承担十多项国家和北京市重大项目及一般项目，在Nature Medicine 、Immunity等著名期刊发表论文40余篇，申请发明专利20余项，并获得美国专利3项和中国发明专利6项。/span/pp style="line-height: 1.5em text-indent: 2em margin-bottom: 10px "a style="font-family: 楷体, 楷体_GB2312, SimKai text-decoration: underline " href="https://www.instrument.com.cn/webinar/news/d_11758.html" target="_self"span style="font-family: 楷体, 楷体_GB2312, SimKai "strongspan style="color: rgb(0, 112, 192) font-family: 楷体, 楷体_GB2312, SimKai "施立明博士/span/strong/span/aspan style="font-family: 楷体, 楷体_GB2312, SimKai "，苏桥生物（苏州）有限公司质量控制执行总监，施立明曾长期服务于全球著名的制药公司基因泰克，安进，礼来和辉瑞，拥有近22年海外大分子制药分析方法开发，质量分析，团队和项目管理，CMC和IND/BLA申报经验。施博士专长于生物活性测定方法的开发、分析方法优化和验证、分析方法转移； CRO / CMO管理；分析性能的定量质量控制，偏差/一致性调查；以及作为analytical/CMC lead领导生物仿制药产品的开发和申报。/span/pp style="line-height: 1.5em text-indent: 2em margin-bottom: 10px "span style="font-family: 楷体, 楷体_GB2312, SimKai "strongspan style="color: rgb(0, 112, 192) font-family: 楷体, 楷体_GB2312, SimKai "邢春，/span/strong理学博士，毕业于复旦大学医学院，之前从事脂肪组织巨噬细胞对脂肪组织炎症的调节及机制研究工作。对免疫学研究技术和方法具有丰富经验。2019年加入赛默飞世尔科技担任应用技术专家。/span/pp style="line-height: 1.5em text-indent: 2em margin-bottom: 10px "a style="color: rgb(0, 112, 192) font-family: 楷体, 楷体_GB2312, SimKai text-decoration: underline " href="https://www.instrument.com.cn/webinar/news/d_11795.html" target="_self"span style="color: rgb(0, 112, 192) font-family: 楷体, 楷体_GB2312, SimKai "strong邵伟平博士/strong/span/aspan style="font-family: 楷体, 楷体_GB2312, SimKai "，目前是方达医药公司（美国）副总裁，主要负责生物大分子的技术，分析方法，运营和监管。他同时也负责CLIA方法的建立和实验室管理。之前，邵博士是Regeneron制药公司的生物分析运营总监，负责所有临床的生物分析, 完成了6个生物药在全球的成功上市。在加入Regeneron之前，邵博士在Merck制药公司负责药物安全性评估的策略，临床前毒理研究的方案以及生物表记物的研究。邵博士毕业于南京大学获得学士和博士学位并在加州大学圣地亚哥分校完成博士后研究，学术论文34篇，2项专利并合作起草了国际生物银行协会(ISBER)颁布的最佳实践指导。/span/pp style="line-height: 1.5em text-indent: 2em margin-bottom: 10px "a style="color: rgb(0, 112, 192) font-family: 楷体, 楷体_GB2312, SimKai text-decoration: underline " href="https://www.instrument.com.cn/webinar/news/d_11759.html" target="_self"span style="color: rgb(0, 112, 192) font-family: 楷体, 楷体_GB2312, SimKai "strong谢红伟博士/strong/span/aspan style="font-family: 楷体, 楷体_GB2312, SimKai "，现为上海复宏汉霖生物技术股份有限公司执行总监，都柏林大学博士，单克隆抗体和蛋白药物开发表征和质量研究专家。从事药物分析和单克隆抗体开发表征和质量控制20多年，曾担任恒瑞医药苏州圣迪亚抗体分析和质量控制执行总监，药明康德无锡生物制药蛋白质分析高级总监，美国KBI Biopharma抗体和蛋白药分析表征总监，和Waters公司生物制药高级研究科学家等。在单抗双抗开发，质量构建，企业内部质量标准制定和分析方法建立，依据药典，ICH和Regulatory Guidance制定DS/DP质量标准上有丰富的经验， 熟悉单抗和蛋白药的开发和生产流程。对单抗生产工艺变更和抗体类似药分析相似性的评估具有广泛丰富的经验，在mAbs, Analytical Chemistry, Trends in Biotechnology等杂志发表学术论文46篇。/span/pp style="line-height: 1.5em text-indent: 2em margin-bottom: 10px "span style="font-family: 楷体, 楷体_GB2312, SimKai "吕娟，应用化学硕士（核磁共振方向），毕业于北京微量化学研究所。2008年至今担任布鲁克MRS部门应用专家。/span/pp style="line-height: 1.5em text-indent: 2em margin-bottom: 10px "a style="font-family: 楷体, 楷体_GB2312, SimKai text-decoration: underline " href="https://www.instrument.com.cn/webinar/news/d_11757.html" target="_self"span style="font-family: 楷体, 楷体_GB2312, SimKai "strongspan style="color: rgb(0, 112, 192) font-family: 楷体, 楷体_GB2312, SimKai "乔怀耀老师/span/strong/span/aspan style="font-family: 楷体, 楷体_GB2312, SimKai "，江苏荃信生物医药有限公司质量研究部副总监，2008年于西南交通大学生物化学与分子生物学专业硕士毕业。参加工作至今共发表核心期刊文章十余篇，其中第一作者5篇，申请发明专利4项，以主要完成者身份参与省市级课题5项。2015年10月起加盟江苏荃信生物医药有限公司，担任公司质量研究部总监，全面负责公司在研抗体药物的质量研究工作。具备丰富的抗体药物质量研究经验，曾全程参与康弘药业已上市品种康柏西普的质量研究工作，其负责质量研究的其余5个抗体药物均已进入临床研究。/span/pp style="line-height: 1.5em text-indent: 2em margin-bottom: 10px "a style="color: rgb(0, 112, 192) font-family: 楷体, 楷体_GB2312, SimKai text-decoration: underline " href="https://www.instrument.com.cn/webinar/news/d_11796.html" target="_self"span style="color: rgb(0, 112, 192) font-family: 楷体, 楷体_GB2312, SimKai "strong易继祖博士/strong/span/aspan style="font-family: 楷体, 楷体_GB2312, SimKai "，毕业于美国Rutgers University（罗格斯大学）生物化学博士，宾夕法尼亚大学(UPENN)-Fox Chase癌症研究中心博士后。曾担任纽约大学西奈山医学院副教授，美国Becton Dickinson （BD）公司首席科学家，药明康德生物技术(上海) 股份有限公司生物制药总监。易博士现任武汉友芝友生物制药有限公司副总裁。他有20多年在生物技术、新产品开发的工作经验，专注于生物制药CMC和质量研究, 特别在细胞株开发,分析方法开发、生产, QC, 及质量管理上具有特长。在学术上，易博士发表学术论文及专著50多篇，并已获得多项PCT专利。/span/pp style="line-height: 1.5em text-indent: 2em margin-bottom: 10px "strong加入“抗体药物交流群”随时关注会议动向及抗体药物相关内容交流！/strong/pp style="text-align: center "img width="260" height="337" title="111.jpg" style="width: 260px height: 337px max-height: 100% max-width: 100% " alt="111.jpg" src="https://img1.17img.cn/17img/images/201909/uepic/8a37b073-6058-411e-938b-d5c161760b1f.jpg" border="0" vspace="0"//pp style="text-indent: 2em "strong群二维码时效不给力，可加小编二维码，邀请入群。/strong/pp style="text-align: center "img width="260" height="337" title="222.jpg" style="width: 260px height: 337px max-height: 100% max-width: 100% " alt="222.jpg" src="https://img1.17img.cn/17img/images/201909/uepic/00e72203-1950-4203-8d09-b9f0ef20e748.jpg" border="0" vspace="0"/br//pp style="line-height: 1.5em text-indent: 2em margin-bottom: 10px "span style="color: rgb(0, 176, 240) "strong如有疑问请拨打15650770053。/strong/span/p

使用“nSMOL Antibody BA Kit”实现对血液中治疗药物的监测预处理试剂盒“nSMOLTM Antibody BA Kit”岛津制作所和京都大学的研究小组领先全球开发出自身免疫性疾病１）治疗用抗体药物的同步定量分析技术。检测环节使用了岛津制作所的超快速液相质谱联用仪“LCMS-8050/8060”和预处理试剂盒“nSMOLTM Antibody BA Kit”２)。6月12日，联合研究成果发表在免疫学领域学术刊物《Journal of Immunological Methods》的网络版上。３)该研究从2017年4月开始历时2年，开发了从人血清中同步定量分析多种治疗用抗体的技术。具体来说，是指在相同分析条件下，对治疗自身免疫性疾病所用的7种抗体药物品（英夫利昔单抗、阿达木单抗、尤特克单抗、依库珠单抗、戈利木单抗、依那西普、阿巴西普）进行同时测定的技术。定量分析技术的有效性依据美国食品药品监督管理局（FDA）的指导标准４)进行了验证。从2017年12月开始的大约1年内，使用京都大学医学部附属医院收集的备检样品，对备检样品中所含的多种抗体药物的浓度进行检测，确认了同步定量分析值与过去取得的定量分析值之间仅有5%误差，属于高度一致的结果。本研究是在取得京都大学大学院医学研究科?医学部及医学部附属医院 医学伦理委员会的批准后实施的（批准编号：R0357、R0012、R1632）。在自身免疫性疾病的治疗中，关键是抗体药物的正确使用，为此，须使“血药浓度监测”（Therapeutic Drug Monitoring，以下简称“TDM”）生效。近年来，有报告表明部分疾病所使用的药物的血药浓度与药效具有相关性。例如，在关节风湿病方面，美国风湿病学会（ACR)和欧洲风湿病学会(EULAR)致力于通过血药浓度监测制定药效标准值。由于自身免疫性疾病伴有多种病情，因而会在多个诊疗科使用分别针对各种病情的抗体药物。针对各种药物单独进行TDM，存在着成本高、患者负担重等课题。本研究成果通过实现了自身免疫性疾病的抗体药物同步TDM，解决了上述课题，并开创了对多种疾病进行一元化且交叉式检查、制定相应治疗方针的可能性。此外，在医药品开发一线，本研究成果还可应用于生物仿制药的治疗效果验证等。岛津制作所通过正确使用医药品，减轻患者及医疗工作者的负担，并为控制医疗费增加而做出贡献。免疫细胞对自身的正常细胞及组织也反应过度并对细胞发起攻击而导致的疾病。关节风湿病等结缔组织病等为典型代表。超快速液相质谱分析系统用预处理试剂盒。与“LCMS-8050/8060”配合使用，可简便、迅速、高精度且低成本地实现抗体药物的药物动态分析。nSMOL法对抗体分子的N末端Fab领域进行选择性地解离和回收，通过质谱分析对单克隆抗体药物进行定量分析的本公司独有技术（nano-surface and molecular-orientation limited proteolysis）Multiplexed monitoring of therapeutic antibodies for inflammatory diseases using Fab-selective proteolysis nSMOL coupled with LC-MS. Iwamoto N, Takanashi M, Yokoyama K, Yonezawa A, Denda M, Hashimoto M, Tanaka M, Ito H, Matsuura M, Yamamoto S, Honzawa Y, Matsubara K, and Shimada T*. J Immunol Methods. 2019. pii: S0022-1759(19)30141-3. doi: 10.1016/j.jim.2019.06.014.https://www.fda.gov/files/drugs/published/Bioanalytical-Method-Validation-Guidance-for-Industry.pdf“nSMOL Antibody BA Kit”未进行基于医药品医疗器械法的医疗器械审批/认证等。不可用于治疗诊断目的及其相关手续。图片：超快速液相质谱联用仪“LCMS-8050”

单克隆抗体药物是利用淋巴细胞杂交瘤或基因工程技术制备得到的药物，是生物制药领域的重要组成部分。在抗肿瘤方面，单克隆抗体药物通过干预肿瘤发生发展中的信号通路，或激活机体对肿瘤的免疫反应，实现对肿瘤的靶向杀伤作用。与传统化疗药物相比，单克隆抗体药物表现出专一性强、疗效显著的特点，因此在肿瘤治疗中起到重要作用。此外，单克隆抗体药物还用于自身免疫、心血管、感染等疾病的治疗。据有关资料显示，2015 年全球单克隆抗体药物的销售额已达到 980 亿美元左右，而同年中国的单抗药物市场已经达到了 72 亿人民币，估计2020 年有望达到 200 亿。 据美国 FDA 规定，对人体使用的单克隆抗体药物，其临床前及临床试验中需进行药代动力学研究，包括药物血浆浓度变化、体内分布和清除率等。然而，生物基质中单克隆抗体药物的定量分析面临巨大挑战。如今对抗体药物的检测主要是采用 ELISA 试剂盒完成，但 ELISA 方法的缺点主要有开发时间长、准确性一般、假阳性率高、线性范围窄。LC-MS/MS 方法可以很好地解决 ELISA 所存在的不足，而且灵敏度也满足实际检测需求，因此被越来越多地应用于抗体药物的检测。但是其前处理方法不成熟常常导致选择性和重现性不佳。 纳米表面分子导向限制性酶解（nSMOL, nano-Surface and Molecular Orientation Limited Proteolysis）技术通过对抗体药物 Fab 区域选择性酶解，获得靶标蛋白特异性肽段，之后通过LC-MS/MS 方法对特异性肽段进行检测，从而实现对抗体药物的定量分析。nSMOL 技术能确保获得靶标蛋白特异性肽段，同时尽可能降低样品的复杂程度，从而表现出良好的选择性和重现性。 岛津公司作为全球著名的分析仪器综合生产厂商，始终秉承创业宗旨“以科学技术向社会做贡献”，不断钻研领先时代、满足社会需求的科学技术。为了迎合客户需求和行业发展趋势，岛津公司本应用文集，汇总了当前应用 nSMOL 技术在国际期刊上发表的研究论文，以及岛津公司基于 nSMOL 技术开发的应用文章。主要内容包括：1. 基于nSMOL技术发表的SCI论文Selective detection of complementarity-determining regions of monoclonal antibody by limiting protease access to the substrate: nanosurface and molecular-orientation limited proteolysis The development of the validated LCMS bioanalysis of trastuzumab in human plasma using a selective detection method for complementarity determining regions of monoclonalantibodies: nano-surface and molecular orientation limited (nSMOL) proteolysis Fully validated LCMS bioanalysis of Bevacizumab in human plasma using nano-surfaceand molecular-orientation limited (nSMOL) proteolysis Application of nano-surface and molecular-orientation limited proteolysis to LC–MS bioanalysis of cetuximab Validated LC–MS/MS analysis of immune checkpoint inhibitor Nivolumab in human plasma using a Fab peptide-selective quantitation method: nano-surface and molecular-orientation limited (nSMOL) proteolysis Validated LC/MS Bioanalysis of Rituximab CDR Peptides Using Nanosurface and Molecular-Orientation Limited (nSMOL) Proteolysis. 2. 岛津中国分析中心应用报告nSMOL前处理技术结合Skyline软件加速抗体药物LCMS分析方法开发 基于nSMOL技术和Skyline软件的曲妥珠单抗LC-MS/MS定量分析方法开发 nSMOL技术结合Skyline软件对贝伐珠单抗药物的UHPLC-MS/MS定量方法开发 采用nSMOL试剂盒建立人血浆中贝伐珠单抗定量分析方法的重现性验证 nSMOL技术不同酶解缓冲体系对曲妥珠单抗灵敏度的影响 有关详情，请您向“岛津全球应用技术开发支持中心”咨询。咨询电话：021-22013542 期待我们的工作会给您带来有益的帮助! 关于岛津 岛津企业管理（中国）有限公司是（株）岛津制作所于1999年100%出资，在中国设立的现地法人公司，在中国全境拥有13个分公司，事业规模不断扩大。其下设有北京、上海、广州、沈阳、成都分析中心，并拥有覆盖全国30个省的销售代理商网络以及60多个技术服务站，已构筑起为广大用户提供良好服务的完整体系。本公司以“为了人类和地球的健康”为经营理念，始终致力于为用户提供更加先进的产品和更加满意的服务，为中国社会的进步贡献力量。更多信息请关注岛津公司网站www.shimadzu.com.cn/an/。岛津官方微博地址http://weibo.com/chinashimadzu。岛津微信平台

应用专家 赵梦路 抗体药物在免疫、肿瘤治疗等多种应用中发挥越来越重要的作用，研究机构预测到2025年抗体药物市场规模将达到3000亿美元[1]，下图中红色代表2018年使用量最多的10种抗体药物。图1 时间轴显示从1975年开始研发成功的治疗性抗体及应用虽然抗体药物市场巨大，但是每年通过FDA审核并成功上市的治疗性抗体依然非常少，从下图可以看出，上市药物少的很大原因是治疗性抗体药物研发存在流程复杂、体外和体内药效验证困难等原因。图2 治疗性抗体药物临床前研究路线下图可以看出传统药物筛选流程中没有影像学方法，整个研发数据单一，必须拿到上一步的结果方可进行下一步的研究。而影像学方法可以进行高通量筛选，允许同时评估多个抗体分子的效力和毒性，最关键一点是影像学方法在药物筛选早期就可以拿到药物有无毒性作用，可以预测药物在人体的毒副作用，为更好的进行临床研究提供数据支持[2]。图3 药物序列筛选和并行筛选Leica THUNDER 3D极速高内涵活细胞培养成像系统是Leica全新研发的宽场快速高分辨荧光成像系统，拥有成像速度快、分辨率高、应用范围广、光毒性低和Navigator高通量采集与自动化处理数据等优点。 优势一 成像速度快适合高通量快速筛选，视频中使用THUNDER拍摄96孔板，每孔三色荧光成像加10层 Z stack，最终3.5分钟即可全部采集完成。视频1 THUNDER快速多通道荧光数据采集 视频2 THUNDER自定义采集参数和随机性设置高速多通道采集只是获取数据的第一步，自动化分析数据才能高效的获取结果。THUNDER可在Navigator流程中添加自动分析步骤，让数据采集完成自动进入分析流程，最终将结果直接呈现出来，图4 Navigator高通量采集后自动进入分析模块 优势二 高分辨率传统宽场成像虽然可以快速采集数据，但是由于固有的光学结构无法有效滤除非焦信号造成的信号模糊、信噪比差，而点扫描共聚焦又受限于成像速度慢无法满足高通量筛选的需求。THUNDER快速高分辨荧光成像系统，基于宽场成像一次拍照即可达到136nm的超高分辨率成像，THUNDER在满足成像速度的同时具备高分辨率优势，超高分辨率和高信噪比图像使后期结构辨别、弱信号定量分析成为可能。图5 THUNDER分辨细胞核中的DNA损伤位点传统宽场显微镜由于非焦信号干扰和衍射极限的限制，无法分辨300nm以内距离较近的信号。图5中的观察病毒侵入细胞核中造成的损伤位点（黄色点信号），由于THUNDER在XY轴拥有136nm的超高分辨率，因此可以清楚分辨靠的比较近的损伤点，这一THUNDER图像可以进行更加准确的定量分析。图6 神经细胞离体3D培养在药物研究领域，经常需要验证药物分子对细胞结构及存活的影响。THUNDER图像具有高分辨率优势，可以在药物作用早期即可观察到细胞精细结构的改变，从而更灵敏的捕获药物对细胞生长增殖的影响，为后期临床研究提供数据支持。图7 高信噪比图像助力细胞计数分析图像模糊，信噪比不足一直都是图像后期分析的难题，THUNDER技术在细胞高通量计数分析方面，拥有天然的优势，高分辨和高信噪比的图像大大简化了后期分析难度，可以更方便的进行自动分析。 优势三 应用广，适用细胞和模式动物随着技术的进步，抗体药物临床前研究已经不再局限在单细胞水平的疗效验证，而是涌现出越来越多的新技术渗透到活性分子的筛选中。由于抗体药物在离体细胞中的代谢与在体内情况有很大不同，如何缩小作用环境的差距成为时下研究的热点，比如可以通过类器官的构建来研究和体内相似的微环境及渗透屏障，可以在斑马、鱼线虫等模式动物活体水平研究抗体药物在体内环境的靶向性等等。这样一系列复杂的模型都需要一种观察深度大、应用范围广的成像技术，THUNDER恰好可以满足这些需求。视频3 Pseudoislets （pancreatic beta cells）(pancreatic beta cMIN6 cells grown as pseudoislets ells). DAPI (blue), Insulin (Alexa488, green), membrane receptor (Alexa594, red), phalloidin (Alexa647, white).Sample courtesy Dr. Rémy Bonnavion, MPI for Heart and Lung Research, Bad Nauheim视频中胰岛类器官由于具有三维立体结构，所以荧光显微镜无法分辨胰岛素分泌的具体情况，THUNDER高分辨成像解决了这一难题，同时THUNDER拍摄深度深的优点也让整个类器官都可以清楚的观察。视频4 Lung Organoid Mouse lung organoids derived from alveola stem and progenitor cells20x Air through 1mm plastic bottomSample courtesy Dr. Pumaree Kanrai, MPI for Heart and Lung Research, Bad Nauheim (Germany).肺类器官是培养中普通塑料培养板中的样本，从参数可以看出THUNDER成像不仅可以清楚分辨肺泡细胞的位置，而且使用厚底培养容器和长工作距离物镜不影响THUNDER高分辨拍摄，因此THUNDER可以拍摄几乎所有培养容器，覆盖单细胞到大体积类器官样本，具有非常广泛的应用范围。图8 线虫模式动物THUNDER成像图9 线虫体细胞计数自动分析在模式动物成像方面，THUNDER依然可以做到体细胞水平的成像，并且在大尺度深度采集后可以自动进行计数分析，方便评估药物在体内代谢和对体细胞的毒性作用。总结THUNDER是Leica专利的超高分辨、高信噪比快速荧光成像系统，可以覆盖单细胞、组织、类器官和活体动物等大部分研究领域。由于THUNDER具有快速高分辨的特点，因此所以可助力抗体药物临床前研究，可应用于治疗性抗体药物的体外细胞水平药效筛选和体内活性药效验证等试验，可助力抗体药物活性筛选、杀伤效果验证、早期细胞毒性发现等方面研究。针对抗体研究中细胞遇到的细胞、类器官和活体模式动物等样本，THUNDER倒置平台和体视镜平台可以完美的覆盖。而在分子水平，由于传统光学衍射限制，无法直接观察分子间的结合及相互作用强弱，Leica FALCON可以提供FLIM-FRET方案，可以超越衍射极限限制，实现分子水平相互作用检测。基于荧光寿命系统的FRET检测不受荧光染色、漂白等强度因素影响，可以更加精准的检测分子间的相互作用。参考文献：1. Development of therapeutic antibodies for the treatment of diseases. Luet al. Journal of Biomedical Science(2020) 27:1 2. Cellular imaging in drug discovery. NATURE REVIEWS | DRUG DISCOVERY(2006)343:5

p style="line-height: 1.75em text-indent: 2em text-align: justify "span style="font-family: 宋体, SimSun "说到抗体药物，主要是指单克隆抗体及其相关的大分子蛋白类生物药物。2019年全球药物销售排行榜的前15名中就有8个是单克隆抗体药物，其中艾伯维公司的阿达木单抗（修美乐）已连续8年蝉联榜首。/span/pp style="line-height: 1.75em text-indent: 2em text-align: justify "span style="font-family: 宋体, SimSun "单克隆抗体药物因具有更高的靶向性，可直达病变细胞，具有减少正常细胞受损，减少副作用等独特优势，一直是近几年来药物研发的热点。与小分子药物的原研药和仿制药情况一样，抗体药物在专利到期后，一般会迎来大批的生物类似药上市。包括目前国产已经上市的生物类似药：复宏汉霖的利妥昔单抗（汉利康），百奥泰生物的阿达木单抗（格立乐），海正药业的阿达木单抗（安健宁）和齐鲁制药的贝伐珠单抗（安可达）。其中的利妥昔单抗和贝伐珠单抗都是抗肿瘤生物类似药。另外我国还有将近400个在研的生物类似药。/span/pp style="line-height: 1.75em text-indent: 2em text-align: justify "span style="font-family: 宋体, SimSun "随着越来越多的单抗生物类似药的研发和上市，建立稳定可靠的生物基质样品中抗体药物生物检测方法对阐述其药代动力学，药效动力学及毒理学等方面的性质至关重要。尤其像在药物上市后临床使用阶段的治疗药物监测过程中，抗体药物的生物分析方法建立对临床合理用药具有重要的指导作用。/span/pp style="line-height: 1.75em text-indent: 2em text-align: justify "span style="font-family: 宋体, SimSun "2020年4月28日，由中国药理学会、中日友好医院发起，中国药理学会CTDM-GP项目组、中国药理学会治疗药物监测研究专业委员会、《中国医院用药评价与分析》杂志主办的“抗肿瘤生物类似药治疗药物监测专家共识线上发布会”成功召开。为广大临床药师和医师在临床真实世界如何开展抗肿瘤生物类似药治疗药物监测（TDM）提供技术指导，以强化抗肿瘤生物类似药在临床中的个体化用药策略，推动安全有效使用。/span/pp style="line-height: 1.75em text-indent: 2em text-align: justify "span style="font-family: 宋体, SimSun text-indent: 2em "《抗肿瘤生物类似药治疗药物监测药学专家共识（2020版）》中明确提到推荐建立液相色谱-质谱分析方法（LCMS）测定贝伐珠单抗、曲妥珠单抗和利妥昔单抗的血药浓度，并进一步评价血清、血浆与全血样本的测定差异性。其推荐程度最高等级“强”这一列中，专家比例高达74.65%。/span/pp style="text-align: center"img style="max-width:100% max-height:100% " src="https://img1.17img.cn/17img/images/202008/uepic/4a7ece57-8cc7-457f-8e9c-9045c3933df9.jpg" title="21.png" alt="21.png"//pp/pp style="line-height: 1.75em text-indent: 2em text-align: justify "span style="font-family: 宋体, SimSun "针对抗肿瘤生物类似药物的生物分析方法开发，岛津除了可以提供LCMS分析仪器，更有基于纳米表面分子导向限制性酶解技术（nSMOL,nano-Surface and Molecular Orientation Limited Proteolysis）的定量试剂盒产品提供！/span/pp style="text-align: center"img style="max-width:100% max-height:100% " src="https://img1.17img.cn/17img/images/202008/uepic/bb077e01-6f29-4dad-95f7-0447bfa6bf5c.jpg" title="22.png" alt="22.png"//pp/pp style="line-height: 1.75em text-indent: 2em text-align: justify "span style="font-family: 宋体, SimSun "nSMOL 技术可在近生理条件下，完成对抗体药物的选择性酶解，并获得与之相应的特征性肽段组分。其工作原理是利用抗体树脂对样品中单克隆抗体药物进行捕获，之后通过蛋白酶纳米颗粒对树脂上抗体成分进行限制性酶解，得到多肽片段。/spanspan style="font-family: 宋体, SimSun "该酶解主要针对抗体的 Fab 区域，Fab 区域外余下部分不受酶解作用且仍保留在原树脂上（如下图所示）。因此，nSMOL 技术不仅能够保证获得特异性的抗体序列片段，而且限制性酶解技术大大降低了样品的复杂性，缩短样品前处理时间，提高了检测灵敏度。/span/pp style="text-align: center"img style="max-width:100% max-height:100% " src="https://img1.17img.cn/17img/images/202008/uepic/cbd0bbc9-2957-4f4b-a7d1-7429a7260e60.jpg" title="23.png" alt="23.png"//pp style="text-align: center"img style="" src="https://img1.17img.cn/17img/images/202008/uepic/8904d059-e668-47b7-8b86-2a3feab64929.jpg" title="24.png"//pp/pp/pp style="line-height: 1.75em text-indent: 2em text-align: justify "span style="font-family: 宋体, SimSun "针对抗肿瘤抗体药物，岛津公司开发了针对人血浆中曲妥珠单抗、贝伐珠单抗、利妥昔单抗等单克隆抗体药物，基于nSMOL技术的定量分析方法，研究成果已在多个国际期刊中发表。另外针对自身免疫性疾病治疗用抗体药物（英夫利昔单抗、阿达木单抗、尤特克单抗、依库珠单抗、戈利木单抗、依那西普、阿巴西普），岛津开发了基于nSMOL技术的同时定量检测方法。/span/pp style="line-height: 1.75em text-indent: 2em text-align: justify "span style="font-family: 宋体, SimSun "对于生物药LCMS定量方法的开发，岛津同样可以提供针对定量肽段定制13C，15N高品质稳定同位素标记的服务，以及针对高通量样品处理的96孔前处理填料板！/span/pp style="text-align: center"img style="max-width:100% max-height:100% " src="https://img1.17img.cn/17img/images/202008/uepic/c5f44149-61ab-4727-a083-4b5f2a780e44.jpg" title="25.png" alt="25.png"//pp style="line-height: 1.75em text-indent: 2em text-align: justify "span style="font-family: 宋体, SimSun "/spanbr//pp style="line-height: 1.75em text-indent: 2em text-align: justify "span style="font-family: 宋体, SimSun "br//span/pp style="line-height: 1.75em text-indent: 2em text-align: right "span style="font-family: 宋体, SimSun "供稿人：岛津（上海）实验器材有限公司 市场部 周可鹏/span/pp/pp style="line-height: 1.75em text-indent: 2em text-align: justify "span style="font-family: 宋体, SimSun " /span/ppbr//p

在生物药众多的品类中，抗体药物是当前最大的治疗用生物剂类别，单克隆抗体是研发最早、研究最为深入的抗体药，具有较高的安全性与有效性。近年来随着单抗药物各个靶点不断进入红海竞争状态，双抗项目研发日渐火热。双特异性抗体药物（简称“双抗”）是新型的二代抗体，拥有两种特异性抗原结合位点，可以同时与靶细胞和功能细胞相互作用，进而增强对靶细胞的杀伤。与但双抗药物开发复杂性和技术壁垒更高，对于技术平台和靶点选择的适配性要求也有所提高。抗体-药物偶联物（ADC）是通过化学反应，把传统的小分子抗癌药物与重组单克隆抗体（mAb）分子通过连接分子结合，所形成的新分子。抗体工程在10年间也已经取得了相当大的进展，允许更多的位点特异性偶联，提高了ADC的均一性和稳定性。新的第二代和第三代ADC已经进入临床，以期获得更好的治疗效果和安全性。几十种基于半胱氨酸残基、非天然氨基酸或分子工程模式的生物偶联技术也已经在临床前研究获得了验证。此外，更多的肿瘤特异性抗原靶点和肿瘤内细胞毒性药物的释放机制使ADC获得了爆炸式的发展，ADC药物进入了黄金时代。为促进我国抗体药物产业持续快速发展，仪器信息网将于2022年9月14日-15日举办第五届“抗体药物研发与质量分析”主题网络研讨会，特别邀请二十余位多位业内研发专家、质量控制专家，对当前抗体药领域研究热点双抗、ADC相关研发、分析技术开发、质量研究、CMC开发、生命周期管理等广受关注的内容进行精彩分享，欢迎广大相关从业人员免费报参会！点击图片报名参会大会亮点一、专家阵容：恒瑞、信达、复宏汉霖等国内知名生物医药企业总经理、高级副总裁、研发总监、质量控制总监等大咖阵容二、热点内容：双抗、ADC药物研发策略和案例分享、 质量研究、质谱、色谱分析方法解析、 CMC开发、全生命周期管理考量和经验分享3、 参会人员专业、垂直：制药企业、CRO/CDMO、生物技术公司、政府主管部门、药检机构、科研院所免费报名链接：https://www.instrument.com.cn/webinar/meetings/antibodydrug2022/大会日程时间 Time报告题目Topic演讲嘉宾The Speakers抗体药物研发（上）(09月14日)9:00聚焦热点——ADC药物张娟(中国药科大学 教授)9:30更新中锐欧森中国10:00双特异抗体生物学活性分析方法的开发易继祖(友芝友生物 高级副总裁)10:30心血管代谢系统的抗体新药研发张成(鸿运华宁（杭州）生物医药有限公司 高级副总裁和首席科学官)11:00肿瘤免疫新药研发策略赵永浩(江苏康宁杰瑞生物制药有限公司 研发总监)抗体药物研发（下）-双抗、ADC药物(09月14日)13:30ADC研发进展与挑战陶维康(恒瑞医药股份有限公司 副总经理)14:00自动化时代下聚焦细胞株开发的自动化解决方案刘达潍(贝克曼库尔特生命科学 自动化应用专家)14:30高通量分析技术助力双抗新药开发探讨谢红伟(信达生物制药集团 产品开发部副总裁)15:00更新中SCIEX中国()15:30抗体偶联药物的CMC研发挑战及策略黄鹏(东曜药业有限公司 ADC研发负责人)16:00创新全人双抗设计/筛选及双靶点ADC新药开发案例杨勇飞(百奥赛图（北京）医药科技股份有限公司 新药研究院 总监)抗体药物分析与质量控制(09月15日)9:00抗体药物的质量研究策略及质控标准建立黄懿(上海探实生物科技有限公司 总经理)9:30更新中多宁()10:00复杂蛋白质药物体系异质性的质谱解析王冠博(北京大学生物医学前沿创新中心 研究员)10:30线性pH梯度分析单克隆抗体变体的创新技术李国荣(苏州科技大学 兼职教授)11:00高通量质谱用于抗体药物的结构表征卢颖洪(南京理工大学 副教授)抗体药物后期工艺开发和商业化生产(09月15日)13:30质量研究对抗体药物CMC研发关键节点的把控吕品(上海博威生物医药有限公司 质量分析部/执行总监)14:00基于cIEF-MS联用技术的抗体药物电荷异质性分析解决方案张为(永道致远科学技术有限公司 应用科学家)14:30抗体药物工作参比品的全生命周期管理李镭(浙江博锐生物制药有限公司 研发质量副总监)15:00抗体药后期CMC开发和商业化郭文晖(KKH Consultant LLC Principal Consultant)15:30全生命周期管理下生物药技术转移考量李孟捷(三生制药集团 质量 商务负责人 高级工程师)16:30抗体委托生产期间委托方和受托方的质量责任李醒(杭州奕安济世生物药业有限公司 QA执行总监)免费报名链接：https://www.instrument.com.cn/webinar/meetings/antibodydrug2022/ 专家阵容（更新中）第五届抗体药物会议交流群

2015年6月18日上午，安捷伦科技公司与烟台迈百瑞国际生物医药有限公司在山东烟台迈百瑞公司厂区举行了&ldquo 迈百瑞国际生物医药&mdash 安捷伦科技前沿生物药研究暨抗体药物偶联物分析联合实验室&rdquo 揭牌仪式。烟台迈百瑞国际生物医药有限公司常务副总裁梁其斌、烟台迈百瑞国际生物医药有限公司质量副总裁阮懋荣、安捷伦科技大中华区生命科学事业部业务总监赵影、安捷伦科技大中华区液相与液质联用技术应用技术支持经理安蓉等出席了揭牌仪式。仪器信息网等多家媒体与双方共同见证了促进中国新药领域研究的激动时刻。烟台迈百瑞质量副总裁阮懋荣致辞　　烟台迈百瑞国际生物医药有限公司质量副总裁阮懋荣为仪式致辞，并介绍了抗体偶联药物(Antibody Drug Conjugates，ADC)的特点和研发概况。ADC具有良好的靶向性及抗癌活性，已成为目前抗肿瘤抗体药物研发的新热点和重要趋势，并受到越来越多的关注。其开发涉及四个方面，包括药物靶点的筛选、重组抗体的制备、&ldquo 连接物&rdquo 技术开发以及高细胞毒性化合物的优化，其中任何一个环节出现问题，都会影响到ADC药物的安全性和有效性。目前，ADC药物开发的技术能力仍依赖于少数几个技术提供商。阮懋荣说：&ldquo 我们非常高兴能有机会与安捷伦这样全球领先的公司展开合作。迈百瑞一直致力于提供高质量的生物药物研发和GMP生产一站式外包服务，满足客户研发和GMP生产需求，加快生物药物的研发速度。此次与安捷伦合作成立的联合实验室，将为迈百瑞在国际ADC药物研发/生产舞台竞争中取得领先地位奠定坚实的基础。&rdquo 阮懋荣还说，迈百瑞的ADC产能是亚洲之冠，在全球也是屈指可数。除此之外，迈百瑞的客户是中国申请ADC新药的首例。　　该联合实验室是安捷伦科技在中国的第一间ADC分析领域前沿合作实验室，旨在以国际化视角和全球先进技术，建设先进生物药物分析测试平台，在完善工艺流程研究、ADC药物开发、提升科研质量的同时，紧跟国内外行业进展及客户需求，提供整体化解决方案，从而促进我国生物医药产业的可持续性发展。安捷伦科技大中华区生命科学事业部业务总监赵影致辞　　安捷伦科技大中华区生命科学事业部业务总监赵影女士在揭幕前致辞。赵影表示：&ldquo 安捷伦致力于为制药/生物制药行业客户提供创新高效的解决方案和技术支持。在ADC这一生物制药前沿的领域，安捷伦凭借其优异的仪器性能和完善的技术支持服务赢得了制药/生物制药客户的认可。在本次与迈百瑞的合作中，安捷伦不仅提供客户理化分析、结构表征相关的仪器平台，更是与客户紧密沟通，应对客户需求和行业动态快速响应，积极开发相应的整体解决方案。&rdquo 赵影还提到，安捷伦科技在全球已经有12000余名员工，近几年非常注重生命科学领域的发展。目前，中国的技术支持和售后服务工程师有500多位，为用户提供7天24小时无假期全天候的服务，得到了广大用户的认可。随着&ldquo 十三五&rdquo 重大新药创制中提出重点支持生物药开发创新，生物制药市场发展势头强劲，安捷伦也会继续在生物药物质量控制领域继续提供仪器平台和售后支持，协助广大制药用户以更快的速度、更低的成本将高质量的药物带入市场。烟台迈百瑞质量副总裁阮懋荣与安捷伦科技大中华区生命科学事业部业务总监赵影签署共建联合实验室框架协议联合实验室揭牌参观共建实验室及迈百瑞生产线　　安捷伦科技安蓉及迈百瑞姚雪静带领大家参观了共建实验室，并介绍了安捷伦的仪器应用。迈百瑞常务副总裁梁其斌带领大家参观了迈百瑞设施完备的无菌药物生产线，使大家对药物生产特别是ADC的生产流程增进了认识。　　烟台迈百瑞厂区坐落于在烟台海岸线旁边，紧邻大海，环境优雅。整个厂区使用的供暖等循环水都是打井地下水循环使用，也是响应环保的典范。双方答记者问　　在媒体采访环节，安捷伦科技和烟台迈百瑞回答了记者就双方合作实验室建成的有关问题。　　Instrument: 请问安老师，安捷伦科技的哪些产品已经用于联合实验室，将来会有那些产品逐步入驻?这些仪器将分别应用在药物研究的哪些层面?　　安捷伦科技安蓉：目前已经用在联合实验室的安捷伦设备包括1290 Infinity 2D超高效液相色谱、6530 四极杆-飞行时间串联质谱仪(Q-TOF)、1260 Infinity 液相色谱、1260 infinity 生物惰性液相系统、低热容(LTM)柱温箱以及毛细管电泳仪。接下来，安捷伦的气质联用仪和气相色谱会很快入驻，ICP-MS等仪器也会陆续应用于合作实验室。LC-MS和GC-MS以及ICP-MS等将会用于制剂包材药物相容性控制，LC和毛细管电泳等将用于QC层面表征等。　　Instrument: 请问赵总，这次与迈百瑞的合作应该是安捷伦科技六大战略领域中与诊断制药相关的一项，那么在其他几个领域是否也将与其他机构合作建立共建实验室?　　安捷伦科技赵影：安捷伦一直在寻找战略伙伴，前期已与上海交大药学院、中国药科大学等实验室有合作。现在和迈百瑞的合作，也是在寻求行业中的窗口。不仅在生物医疗方面，在其他战略领域也是如此。安捷伦要给客户提供真正意义上的整体解决方案，不仅针对仪器，也针对客户的应用需求，目的是为客户提供整体、特定的解决方案。与行业前沿的具体公司和实验室的合作，是对安捷伦的一种特殊技术补充。　　Instrument: 请问黄总，安捷伦和迈百瑞的合作将带来怎样的成果和收效?　　烟台迈百瑞药物研发中心副总裁黄长江：迈百瑞致力于研发药物分析手段，满足新的药物生产需求，是中国生物制药ADC研发生产的先驱。而安捷伦在生命科学仪器方面是佼佼者。安捷伦与迈百瑞的合作是一种一加一大于二的强强联手，即优秀的团队利用新的分析仪器研发新的检测方法。更新更好的药物分析方法将在我们的合作实验室中产生。编辑：郭浩楠

p style="line-height: 1.5em text-indent: 2em margin-bottom: 10px "9月12日，由仪器信息网主办的“抗体药物开发与质量控制”网络研讨会成功召开。9位来自国内外知名生物制药企业、仪器公司的企业高管、技术大咖及仪器应用专家为我们奉上了一场抗体药物开发策略及质量控制技术方法的知识盛宴！/pp style="line-height: 1.5em text-indent: 2em margin-bottom: 10px "本次会议，首次将国内外多位知名药企的技术大咖们聚集在直播间进行线上报告，会议当日吸引了众多抗体药物相关听众听取报告。为给未能参加会议直播的用户提供学习相关知识的机会，仪器信息网特将本次会议报告视频剪辑整理，以飨网友。/pp style="line-height: 1.5em text-indent: 2em margin-bottom: 10px "strong另外，应报告专家要求，本次会议部分视频仅能在本平台播放span style="color: rgb(255, 0, 0) "2个星期/span，请各位网友注意及时观看学习。/strong/pp style="text-align: center "img width="580" height="489" title="aaa.png" style="width: 580px height: 489px max-height: 100% max-width: 100% " alt="aaa.png" src="https://img1.17img.cn/17img/images/201909/uepic/ca7a31fb-69d4-4bc8-9c63-f1fa105f960c.jpg" border="0" vspace="0"//pp style="line-height: 1.5em text-indent: 2em margin-bottom: 10px "span style="color: rgb(255, 0, 0) "strong从人工智能技术到免疫原性分析，“抗体药物开发”专场回顾/strong/span/pp style="line-height: 1.5em text-indent: 2em margin-bottom: 10px "北京天成新脉生物技术有限公司总经理孙乐博士通过实际案例分享，详细讲解了DKK2“Me-first”抗体药创新和I/O靶点”Me-too”抗体药研发策略。a href="https://www.instrument.com.cn//webinar/video_105693.html" target="_self"span style="color: rgb(0, 112, 192) "strong《人工智能助力抗体药研发》点击观看/strong/span/a/pp style="line-height: 1.5em text-indent: 2em margin-bottom: 10px "当前，色谱、质谱的检测技术越来越精进，有很高的准确性和灵敏度。但是数据重现性常常不令人满意，限制了利用分析数据做重要决定的能力，这其中主要原因在于前处理环节，目前多肽、蛋白质尤其是抗体药物的分析需求通量不断增多，这一问题也越来越受到重视。针对此问题，安捷伦开发和提供了一套自动化系统，使得前处理过程更加精确，提升整体实验室质量。 a href="https://www.instrument.com.cn//webinar/video_105696.html" target="_self"span style="color: rgb(0, 112, 192) "strong《自动化解决方案助力高效高质样品前处理》点击观看/strong/span/a/pp style="line-height: 1.5em text-indent: 2em margin-bottom: 10px "在FDA指南中，生物仿制药被定义为生物制药。尽管在临床活性成分方面存在微小差异，但它与已经获得许可的生物制品高度相似，并且在纯度、效价和安全性方面没有临床意义的差异。这两种产品中，生物仿制药的发展过程复杂，具有一定的挑战性。本报告重点介绍美国食品及药品监督管理局（FDA）对生物仿制药开发指南的解释。《a href="https://www.instrument.com.cn//webinar/video_105690.html" target="_self"span style="color: rgb(0, 112, 192) "strongFDA guidance overview related to biosimilar development》点击观看/strong/span/a。strongspan style="color: rgb(255, 0, 0) "本视频观看时间仅限2星期！/span/strong/pp style="line-height: 1.5em text-indent: 2em margin-bottom: 10px "随着细胞工程技术的日益成熟，2014年以后，单抗药物以没你那7个左右的数量日益增加，截至2017年FDA已经通过了70个治疗性抗体药物，并有超过500个处于临床阶段的抗体药物，全球单克隆抗体药物的市场规模已经达到1061亿美元。相比于小分子药物，作为大分子药物，抗体药物具有特异性高、要午间干扰少等优点，邢春博士从抗体库的筛选，细胞株的建立以及抗体功能鉴定三个方面介绍了单克隆抗体药物高通量筛选方案。a href="https://www.instrument.com.cn//webinar/video_105692.html" target="_self"span style="color: rgb(0, 112, 192) "strong《单克隆抗体药物高通量筛选方案》点击观看/strong/span/a/pp style="line-height: 1.5em text-indent: 2em margin-bottom: 10px "因为不需要的免疫原性相关问题会为药物安全及有效性带来风险，所以免疫原性评估在生物治疗药物的开发中至关重要。然而，免疫原性数据以及数据的解释很容易受到许多因素的影响，这些因素包括但不限于对免疫原性分析、临床研究设计和异质性疾病群体的各种干扰。本报告将讨论免疫原性评估中的挑战和解决方案，特别是解决与免疫原性分析相关的问题，以便在临床试验期间提供有临床意义的数据。a href="https://www.instrument.com.cn/webinar/video_105694.html" target="_self"span style="color: rgb(0, 112, 192) "strong《生物大分子的免疫原性分析的策略，挑战和解决方案》点击观看/strong/span/a/pp style="line-height: 1.5em text-indent: 2em margin-bottom: 10px "span style="color: rgb(255, 0, 0) "strong知名药企真实案例分享，“抗体药物质量控制”专场回顾/strong/span/pp style="line-height: 1.5em text-indent: 2em margin-bottom: 10px "连续多年，单抗和融合蛋白生物药占据全世界上市销售前10名的绝对多数，而生物类似药是提升广大病患对高质量抗体药物可及性的重要途径。我国是发展中的人口大国，最近10年对创新单抗和生物类似药的开发均取得重大进展并开始惠及肿瘤病人。要加速发展和缩小与美国等先进国家在生物药上的差距，采用QbD等先进抗体药物开发理念极为重要。/pp style="line-height: 1.5em text-indent: 2em margin-bottom: 10px "基于QbD的质量研究和风险评估是是确定抗体生物药关键质量属性的有效途径。我们通过对抗体类似药和原创药的开发和申报要求的各自特点，比较对其质量研究的策略和分析方法。原创药开发中，从分析，非临床到临床研究比重逐步增加，而生物类似药的开发采用逐步递进和全面相似的原则，分析相似性至关重要， 除蛋白氨基酸序列要一致外，需用一系列先进灵敏的分析方法来证明生物类似药和原创药从结构、纯度、杂质和异构体、到活性与功能高度相似。对关键质量属性，需用先进正交的方法从不同角度证明生物类似药和原研药的相似性。复宏汉霖谢红伟博士报告a href="https://www.instrument.com.cn//webinar/video_105701.html" target="_self"span style="color: rgb(0, 112, 192) "strong《抗体药物的质量研究与控制》点击观看/strong/span/a/pp style="line-height: 1.5em text-indent: 2em margin-bottom: 10px "近二十年来大分子生物制品（尤其是单克隆抗体）发展十分迅猛，其市场份额逐年提升，针对热门药物的类似药研究也火热异常，各国纷纷出台相关指导原则以规范相关研究，本报告结合实例剖析了典型抗体类生物类似药的质量研究。乔怀耀老师a href="https://www.instrument.com.cn/webinar/video_105700.html" target="_self"strongspan style="color: rgb(0, 112, 192) "《单克隆抗体及其类似药研究》点击观看/span/strong/a/pp style="line-height: 1.5em text-indent: 2em margin-bottom: 10px "生物治疗药物是生物制剂和生物仿制药，通常时候蛋白质比如疫苗 和单克隆抗体等。而生物药物的构象聚集稳定性和糖基化等修饰是影响药物疗效的关键因素。他们的高阶结构和动力学与其功能直接相关，生物治疗药物通常是由活细胞生产的，这使得其质量控制变得更加重要和困难。2018年，大约有30%的临床药物是生物制剂或生物仿制药，这意味着生物药物的研发和生产逐年增长。核磁共振波谱一在解析结构方面有独特优势，具有极高的重现性，这种重现能力，能够额外提供更多复杂样品的统计学信息。a href="https://www.instrument.com.cn//webinar/video_105691.html" target="_self"span style="color: rgb(0, 112, 192) "strong《NMR在生物治疗药物质量控制中的应用》点击观看/strong/span/a/pp style="line-height: 1.5em text-indent: 2em margin-bottom: 10px "易继祖博士由浅入深，从抗体简介、抗体结构与功能的关系、表征研究、完整分子质谱、序列确定、PTMs 转录后修蚀: glycosylation, oxidation, deamidation 等产品相关的杂质研究，系统完整的诠释了生物制药中抗体的质谱表征研究a href="https://www.instrument.com.cn//webinar/video_105699.html" target="_self"strongspan style="color: rgb(0, 112, 192) "。《生物制药中抗体的质谱表征研究》点击观看。/span/strong/astrongspan style="color: rgb(255, 0, 0) "本视频观看时间仅限2星期！/span/strong/pp /pp /pp style="text-align: center "img width="470" height="468" title="图片1.png" style="width: 209px height: 204px max-height: 100% max-width: 100% " alt="图片1.png" src="https://img1.17img.cn/17img/images/201909/uepic/23a23ecd-d184-4d94-89f0-d68d3c458c78.jpg"//pp style="text-align: center "添加微信，加入“抗体药物交流群”/pp style="text-align: center"img style="" src="https://img1.17img.cn/17img/images/201909/uepic/f164cca3-8c16-46df-8e57-1ea4a14f0978.jpg" title="微信尾缀二维码01.png"//pp style="text-align: center"img style="" src="https://img1.17img.cn/17img/images/201909/uepic/1370ecda-4b41-4493-a163-3f54ffb0b999.jpg" title="微信尾缀二维码02.png"//pp /p

仪器信息网讯 为促进我国抗体药物产业持续快速发展，仪器信息网将于2023年9月19日-21日举办第六届“抗体药物研发与质量分析”网络会议。本次会议将有30余位抗体药物研究或者开发领域的专家，包括高校和科研院所的科研专家、制药企业的专家以及仪器企业的技术专家、内容覆盖抗体筛选、药物开发、质控、生产工艺和CMC全流程，一年一度的抗体药物网络盛会，面向所有从业人员的公益讲座，不容错过！点击图片，免费报名！大会日程2023/9/19 抗体筛选技术与抗体发现09:00--09:30抗体抗原分子识别的计算与应用曹志伟复旦大学生命科学院 系主任/教授（二级）09:30--10:00移液工作站在抗体药物研发领域的主要应用刘健德国耶拿分析仪器股份公司 产品经理10:00--10:30基于微流控技术筛选肿瘤免疫激动剂抗体张宏恺南开大学 教授10:30--11:00自动化时代下的抗体药物研发方案刘达潍贝克曼库尔特生命科学 自动化应用专家11:00--11:30基于单个浆细胞抗体发现平台（SCmab）及应用唐勇暨南大学生物工程学系 系主任/教授11:30--12:00生物分子互作技术在抗体药物筛选领域的应用王倩北京大学药学院 助理研究员2023/9/19 单抗/双抗药物开发14:00--14:30人工智能助力抗体药物开发李茂华京天成生物技术（北京）有限公司 总经理14:30--15:00双抗ADC国内外研发进展和趋势杨勇飞百奥赛图（北京）医药科技股份有限公司 总监15:00--15:30高效低毒双抗构建新策略：多个新型双抗案例分享黄浩旻三生国健药业（上海）股份有限公司 研发副总裁15:30--16:00抗体药物的生物分析策略和案例分享郎士伟武汉宏韧生物医药股份有限公司 总监2023/9/20 ADC药物开发09:00--09:30基于纳米抗体的多功能抗体药物平台技术潘利强浙江大学药学院 院长助理/研究员09:30--10:00时空定量观测ADC旁观者效应及肿瘤渗透性研究郭鹏中国科学院基础医学与肿瘤研究所 特聘研究员10:00--10:30高分辨质谱在ADC抗体药物中的全面表征方案张劭阳赛默飞世尔科技中国有限公司 高级应用支持工程师10:30--11:00双靶向ADC药物DTLL成药性及其与吉西他滨联用治疗胰腺癌克服耐药的研究李亮中国医学科学院医药生物技术研究所肿瘤研究室 研究员,博士生导师11:00--11:30天然抗体的一步定点修饰及ADC药物研发唐峰中国科学院上海药物研究所 副研究员11:30--12:00ADC药物研发中的质量分析和生物分析策略唐家澍中科新生命生物科技有限公司 首席科学家2023/9/20 抗体表征与质量控制（上）14:00--14:30从细胞株筛选到BLA申报不同阶段的质量研究策略及实例分析乔怀耀荃信生物医药 质量研究部总监14:30--15:00基于表位模拟肽识别策略的抗体药物分析新方法研究王启钦暨南大学 药物分析研究中心副主任/教授15:00--15:30高通量质谱用于抗体药物的结构表征卢颖洪南京理工大学 副教授15:30--16:00应用结构质谱技术拓展蛋白质药物质量属性表征范围王冠博北京大学生物医学前沿创新中心 研究员2023/9/21 抗体表征与质量控制（下）09:30--10:00蛋白类生物制药稳定化策略及案例分析方伟杰浙江大学 研究员10:00--10:30基于在线CE-MS联用技术的复杂生物制品的分析解决方案洪佳莹永道致远科学技术（上海）有限公司 市场经理10:30--11:00抗体类药物生物学活性研究策略姚雪静荣昌生物制药(烟台)股份 副总裁11:00--11:30生物药宿主细胞蛋白的表征分析与质控策略黄懿上海探实生物科技有限公司 CEO11:30--12:00融合蛋白药物糖修饰异质性分析方法应万涛军事科学院军事医学研究院 研究室主任/研究员2023/9/21 生物工艺与抗体药CMC13:30--14:00抗体药物工艺表征研究策略李苗苗夏尔巴生物 纯化工艺研究员14:00--14:30为出海企业制定后期CMC与商业化计划Kevin GuoKKH Consultant LLC 独立顾问 Independent Consultant14:30--15:00最新LC-MS PAT技术助力早期生物工艺开发罗宇文沃特世科技（上海）有限公司 市场开发经理15:00--15:30ADC药物的工艺开发和质量控制代波苏州宜联生物医药有限公司 总监15:30--16:00为制药行业应用量身打造的渗透压仪杨敏安达望（上海）科技有限公司 产品应用专家16:00--16:30双特异性抗体药物开发和生产的挑战和应对策略李巍巍白帆生物科技（上海）有限公司 CMC高级总监16:30--17:00抗体制剂与工艺开发关键技术考量梁柳恩广州汉腾生物科技有限公司 制剂开发资深研究员报名链接：https://www.instrument.com.cn/webinar/meetings/antibodydrug2023/扫码报名

抗体药物是现代生物医药产业的主力军,是生物医药产业增长最快的细分领域。我国抗体药物产业起步晚，抗体药发展水平相较于国际还有较大差距。近几年，国内抗体药物市场得到了快速的发展，但在抗体结构设计、新药临床前研究与安全评价、工艺和质量稳定性等方面仍存在诸多挑战。为促进我国抗体药物产业持续快速发展，仪器信息网将于2023年9月19日-20日举办第六届“抗体药物研发与质量分析”网络大会，将邀请多位业内专家做精彩报告，为广大用户搭建一个即时、高效的交流和学习的平台。点击免费报名专场设置：日期上午下午9月19日抗体筛选技术单抗/双抗药物开发9月20日ADC药物开发抗体表征与质量控制（上）9月21日抗体表征与质量控制（下）生物工艺和CMC会议日程（更新中）：9月19日上午 抗体筛选技术与抗体发现报告主题专家单位基于单个浆细胞抗体发现平台（SCmab）及应用唐勇暨南大学 教授/抗体工程中心主任基于微流控技术筛选肿瘤免疫激动剂抗体张宏恺南开大学 教授待定李茂华京天成总经理分子互作用于抗体筛选王倩北京大学药学院 国重实验室9月19日下午 单抗、双抗药物开发待定方伟杰浙江大学药学院 浙江大学（杭州）创新医药研究院生物药中心主任高效低毒双抗构建新策略：多个新型双抗案例分享黄浩旻三生国健 研发副总裁抗体药物的生物分析策略和案例分享郎士伟武汉宏韧生物医药股份有限公司 总监待定待定夏尔巴生物研发负责人9月20日上午 ADC药物开发创新全人双抗设计/筛选及双靶点ADC新药开发案例杨勇飞百奥赛图（北京）医药科技股份有限公司 新药研究院 总监时空定量观测ADC旁观者效应及肿瘤渗透性研究郭鹏中国科学院基础医学与肿瘤研究所 特聘研究员ADC药物研发过程中的质量分析和生物分析策略（拟）唐家澍中科新生命 首席科学家天然抗体的一步定点修饰及ADC药物研发唐峰中科院上海药物研究所 副研究员EGFR/HER2双靶向ADC药物(DTLL)经SMAD4克服胰腺癌耐药的作用研究（拟）李亮中国医学科学院医药生物技术研究所 研究员 待定待定宜联生物9月20日下午 抗体药物表征与质量控制（上）从细胞株筛选到BLA申报不同阶段的质量研究策略及实例分析乔怀耀荃信生物 高级总监基于表位模拟肽识别策略的抗体药物分析新方法研究王启钦暨南大学 教授待定王冠博北京大学 研究员抗体质谱表征技术(拟）卢颖洪南京理工大学 教授9月20日下午 抗体药物表征与质量控制（下）抗体类药物生物学活性研究策略姚雪静荣昌生物 副总裁抗体药物开发质量研究的重要性及全产程覆盖（拟）黄懿上海探实生物科技有限公司待定姚钟平香港理工大学教授糖修饰蛋白质分析方法与生物药应用研究（拟）应万涛军科院生物质普与糖蛋白质组学课题组长/研究员9月21日下午 生物工艺与抗体药CMCCMC策略分析郭文晖上海宇嵩科技有限公司 Principal Consultant待定戚波北京亿一生物待定李巍巍白帆生物 工艺总监 待定待定（拟）药明生物抗体处方与工艺开发关键技术考量梁柳恩 汉腾生物制剂开发 资深研究员会议链接：https://www.instrument.com.cn/webinar/meetings/antibodydrug2023/扫码报名

抗体药物是生物药物中最重要的组成之一，约占全球生物药市场五成，也是全球生物技术领域产业化最为成功的产品。抗体药物是以基因工程、细胞工程、发酵工程为工艺研发的生物技术药物，主要分三类：单克隆抗体药、多克隆抗体药与基因工程抗体药物；基因工程抗体药物包含源化改造抗体药物（嵌合抗体、人源化及完全人源化抗体）与小分子抗体药物（单链抗体、双特异性抗体、纳米抗体及人源Fab片段）。抗体药物因抗体药物与靶抗原结合具有高特异性、有效性和安全性，在恶性肿瘤、自身免疫疾病等重大疾病的临床治疗中发挥着越来越重要的作用。虽然我国抗体药物产业起步相对较晚，但近几年，中国抗体药物研发进入快车道。据了解，目前国内进行抗体药物研发的企业有百余家，上市的抗体药物达27个，此外还有数百个抗体药物正处于研发阶段，在研药物包括单抗、双抗和ADC药物等多种类抗体药。随着抗体药物产业的不断发展，研发、质量分析和生产等各个环节的技术方法和工艺等也在不断创新发展，从业人员需要及时了解相关进展，以便更好地开展工作。2021年9月14-16日，仪器信息网将举办第四届“抗体药物研发与质量分析”网络会议，聚焦抗体药物从研发到生产全流程的技术和方法，为行业从业人员提供免费、高效的学习交流平台。点击下图，可免费报名参会。点击图片免费报名会议看点• 设“单抗药物研发”、“双抗、ADC药物研发”、“抗体药物质量控制”、“抗体药物生物工艺”等多个主题会场，内容涉及单抗、双抗、ADC多类型抗体药、覆盖抗体药物研发生产全流程；• 30位专家参与，多位国内知名抗体药物企业（信达、奕安济世、武汉友芝友、亿一生物）高管和技术负责人结合实际案例详述研发进展与关键技术，可在线与大咖互动交流（对于社恐症人士更是绝对福利~）• 企业结合科研人员的知识盛宴，多位高校科研专家进行技术讲解，未来意向从事抗体药物事业的学生党不可错过！• 更多会议亮点，报名了解。扫码免费报名参会会议日程分会场一（9月14日上午）：单抗药物研发时间报告主题报告嘉宾9：00-9：30特异性靶向CLDN6的卵巢癌治疗抗体袁纪军上海吉凯基因 副总经理9：30-10:00数字化转型助力生物制药研发与数据合规黄皓珀金埃尔默 信息科学业务部售前总监10:00-10:30基于抗体分子的创新药物研究张娟中国药科大学 教授10:30-11:00自动化移液工作站在生物大分子药物研发领域的主要应用刘健德国耶拿 生命科学部移液工作站产品经理11:00-11:30基于精准医学大数据的新药研发和伴随诊断楼敬伟宝藤生物 董事长兼总裁分会场二（9月14日下午）：双抗、ADC药物研发13:30-14:00双特异性抗体开发中的杂质研究易继祖友芝友生物 副总裁14:00-14:30Hamilton自动化移液工作站让蛋白纯化如此简单姜超哈美顿 应用工程师14:30-15:00肿瘤免疫治疗：过去，现在和将来王常玉康诺亚生物医药 高级副总裁15:00-15:30待定拜泰齐贸易（上海）有限公司15:30-16:30基于糖链的ADC定点偶联技术与应用黄蔚中国科学院上海药物研究所 课题组长/研究员分会场三（9月15日上午）：抗体药物质量控制（上）9：00-9：30单抗药物LC-MS/MS与ECL生物分析方法比较(Case Study: SHR-1603和SHR-1222)高宇雄恒瑞医药 临床研发9：30-10:00BioAccord系统在抗体药物研发与质量控制上的应用邵锴沃特世 大中华区生物制药高级市场专员10:00-10:30抗体药物工艺开发的过程监控和高通量质量控制谢红伟信达生物制药集团 产品开发部副总裁10:30-11:00粘度流变在高浓度制剂中的应用刘兵锐欧森 产品经理11:00-11:30实验设计(DoE)在单克隆抗体工艺开发中的应用李国荣苏州美极医疗 总裁分会场四（9月15日下午）：抗体药物质量控制（下）14:00-14:30对单克隆抗体及其复合物的“自上而下”质谱分析王冠博北京大学生物医学前沿创新中心 研究员14:30-15:00抗体类生物大分子色谱表征田海玉纳谱分析 液相色谱柱产品线负责人15:00-15:30生物分析及临床相关的考量—抗体偶联药及双特异性抗体药张辰浦PPC佳生 生物分析实验室负责人15:30-16:00Q-TOF和LC在抗体药物质量研究中的应用唐雪岛津 应用工程师16:00-16:30磁共振在抗体药物研发与质量控制中的应用邓惠文布鲁克 制药市场拓展经理16:30-17:00高通量质谱用于抗体药物的结构表征卢颖洪南京理工大学 副教授分会场五（9月16日上午）：抗体药物生物工艺（上）9：00-9：30数据分析在细胞培养工艺开发和优化中的应用赵亮上海倍谙基生物 副总裁，研发中心负责人9：30-10:00东曹FcR亲和色谱技术在抗体药物研发、质控及工艺优化中的应用杜耀杰东曹 应用开发10:00-10:30抗体药物的开发过程和质量标准杨晓明杭州奕安济世 总经理10:30-11:00基于微芯片CE-MS联用技术的全自动培养基生化分析仪 REBEL 加速生物药上游工艺开发王亮908Devices Inc. （美国） Science leader, APAC11:00-11:30抗体快速纯化工艺耿信笃西北大学 教授分会场六（9月16日下午）：抗体药物生物工艺（下）14:00-14:30应用平台技术快速助推双抗从开发到生产李巍巍 白帆生物 工艺总监14:30-15:00中美双报的工艺验证设计戚波亿一生物 中国区COO/总经理15:00-15:30表位模拟肽识别技术：从抗体药物生产纯化到临床精准分析江正瑾暨南大学药学院 副院长/教授15:30-16:00蛋白药物制剂中的可见异物问题探讨吴用百奥泰 制剂高级经理扫码下方二维码，进入本次会议交流群，第一时间获取相关技术内容及会议回放视频。扫描进入会议交流群

抗体偶联药物是指将具有高度靶向性的单克隆抗体，通过特定的一段连接片段，实现同具有细胞毒性抗肿瘤药物的偶联，从而将抗体的高度选择性与药物的抗肿瘤活性合二为一。2021年8月8日，荣昌生物与Seagen（SeagenInc. 纳斯达克：SGEN）达成一项全球独家许可协议，以开发和商业化其抗体偶联药物（ADC）维迪西妥单抗，9月22日，国家药品监督管理局（NMPA）药品审评中心（CDE）官网显示，荣昌生物（09995.HK）靶向Claudin18.2的抗体偶联药物（ADC）RC118获得临床试验默示许可，适应症为Claudin18.2表达阳性的局部晚期不可切除或转移性恶性实体瘤。国内研发实力增强，中国ADC药物研究大有可为，期待为患者造福。 目前在研的ADC药物见下表：ADC结构主要由靶向抗体，连接子linker以及高效价小分子细胞毒性药物。药物研究过程涉及到重要关键质量属性，包括药物/抗体比率DAR（drug-to-antibody ratio），药物荷载分布，未偶联抗体，残留药物，大小异质性以及电荷异质性，以关键的DAR研究为例，DAR表示与抗体偶联细胞毒性药物的平均数量，是ADC药物重要质量属性。现在研厂家的pepline DAR值有不同设计的缘由，低药物荷载时，ADC效力可能会降低或达不到要求，高药物荷载，可能会影响毒性以及代谢问题。表.ADC药物重要关键质量属性 对于ADC药物DAR值分析，推荐使用液相以及液相串联质谱方法分析。根据该指南要求，岛津推荐：Nexera生物惰性液相以及Nexera LC40液相 Nexera Bio生物兼容液相系统 岛津生物兼容液相Nexera Bio系统流路采用生物惰性材料，不仅耐腐蚀，而且能减少生物大分子的吸附，保证生物大分子的完整性，有效保障分析重复性和仪器耐用性。 Nexera Bio生物兼容液相系统特点：● 泵头、混合器、进样针、样品环和接头配件等均采用生物惰性材料，耐腐蚀、抗吸附；● 耐高压不锈钢包覆的Peek管路，提升系统耐压至66MPa；● 标配输液泵柱塞清洗蠕动泵，有效降低盐析，实现良好的送液稳定性，并防止泵头腐蚀。 Nexera LC-40 系列 Nexera系列HPLC与人工智能和物联网结合，实现智能化和自动化。融合“AI”和“loT”技术，轻松应对RNA类物质分析液相色谱仪。 ADC样品DAR值分析案例通过岛津液相以及HIC色谱柱可自动化分析得到DAR值计算报告。 更多内容了解或仪器配置应用了解，请联系岛津工作人员！ 参考文献：[1] Wagh A , Song H , Zeng M , et al. Challenges and new frontiers in analytical characterization of antibody-drug conjugates[J]. mAbs, 2018:0-0. 岛生物药， 津心为您

p　　随着引领第二次生物医药产品浪潮的“单克隆抗体”的出现，抗体研发的一切正在慢慢改变。在抗体工程药物中，肿瘤抗体药物更是异军突起，独占一半天下，单克隆抗体药物以其独特的作用机制及高效性，在抗恶性肿瘤的治疗中发挥了不可估量的重要作用。目前，单克隆抗体已广泛应用于肿瘤的临床治疗，本文主要从抗体药物的发展、面临的挑战以及如何解决等方面进行了详细的分析。/ppstrong　　抗体药物的前世今生/strong/pp　　和各种重大革命性技术的发展一样，抗体的研究也是经历了漫长岁月。直到Kohler和Milstein在1975年创建了淋巴细胞的杂交瘤技术并获得了专一识别抗原位并与之特异结合的单克隆抗体，才受到了相关领域学者们的高度重视。两位科学家因此被授予1984年的诺贝尔生理学或医学奖。/pp　　然而，由于通过杂交瘤技术制备的单克隆抗体是鼠源性的，应用于人体不可避免地引起人抗鼠抗体(HAMA)反应，限制了单克隆抗体的临床应用。/pp　　为了克服这种缺陷，20世纪80年代中期研究者们寻求以基因工程技术对鼠源性单克隆抗体进行改造，尝试对其人源化处理。如将鼠源抗体可变区与人抗体恒定区拼接而形成嵌合抗体或将鼠抗体可变区的互补决定区(CDR区)与人的抗体的互补决定区互换构成人源化抗体等。/pp　　以上抗体技术的建立，基本解决了抗体药物异源性的问题，促进了抗体药物的广泛应用。迄今美国FDA已经批准上市了几十种治疗性抗体药物，抗体产业增长迅猛，产生了巨大的社会效益和经济效益。目前国内外处于临床前、临床研究的各类生物技术药物中也以抗体类制品最多，其中则以抗肿瘤抗体药物最多。/pp　　这其中除了单抗之外，新型抗体的开发也各施所长，其中包括双特异性抗体以及抗体偶联药物(ADC)。就开发热点而言，当然要数PD-1/PD-L1单抗、ADC药物、以及双特异性抗体了。目前，全球抗体药物产业已经步入了强劲发展的时代，与此同时，抗体技术的发展也面临着诸多挑战。无论是在抗体靶标和新抗体基因发现，还是在新抗体药物的研发和产品种类等方面，很多问题都亟待解决。在此，小编做了详细的总结。主要分为以下几个方面。/ppstrong　　筛选肿瘤治疗新靶点/strong/pp　　与传统的小分子药物相比，抗体的靶点数量相对要少的很多。这主要首先由于抗体本身的性质。一般来说，抗体分子的分子量较大，结构复杂，绝大多数抗体只能对位于细胞膜表面及分泌出来的分子发挥作用，而对于细胞内的分子则很难产生功效。/pp style="text-align: center "img title="001.jpg" src="http://img1.17img.cn/17img/images/201801/insimg/3fbc9274-4de1-4a6d-acf5-dc8ffbcad09f.jpg"//pp style="text-align: center "strong针对不同靶标的抗体/strong/pp　　目前，在已经批准的抗体药物中仅有27个靶标。其中7个靶标分别有两个或两个以上的抗体药物，共计18个。其中5个靶标(TNF、CD20、VEGF、HER2、EGFR)所对应的抗体药物多数为重磅炸弹药物，共计10个。在2014-2017新上市的抗体中，几个特殊靶点已引发重大波澜，诸如CTLA-4、PD-1/PD-L1等都成了重磅炸弹的诞生地。其中以PD-1/PD-L1为靶点的抗体作为肿瘤免疫治疗中的先锋队更是各个公司追逐的热点。/pp　　多家国际巨头公司已在该领域做了充足的准备，包括辉瑞，安进，赛诺菲，再生元、罗氏、诺华、礼来、阿斯利康等。该靶点也必然引起新一轮的腥风血雨。但总体来说，抗体靶标十分有限，所以说，在研发的候选抗体药物中，新靶点和新适应证抗体是药物研发团队首要追求的目标 其次是老靶点的深度开发。/ppstrong　　降低抗体的免疫原性/strong/pp　　最早通过杂交瘤技术制备的鼠源性单克隆抗体，应用于人体会不可避免地引起人抗鼠抗体(HAMA)反应。随着基因工程技术的发展，研究人员开始对鼠源性单克隆抗体进行改造，尝试对其人源化处理以解决单克隆抗体的这种缺陷。可分为嵌合抗体、人源化抗体或完全人抗体。试图通过增加其可变区序列与人胚系基因的同源性来降低它们的预期免疫原性。/pp style="text-align: center "img title="002.jpg" src="http://img1.17img.cn/17img/images/201801/insimg/d4eabd2b-11a8-492c-b317-7b62d2129725.jpg"//pp style="text-align: center "strong鼠源性到完全人源化抗体/strong/pp　　嵌合抗体成功的例子包括罗氏公司的抗 CD20 抗体Rituxan，其用于治疗B 淋巴瘤。它的抗淋巴瘤作用主要来自于补体作用、ADCC作用和诱导肿瘤细胞凋亡。因为人鼠嵌合抗体仅仅消除了鼠源单抗的部分异源性，未经改造的可变区的鼠源序列依然可以诱导人体产生HAMA反应，因此对鼠源抗体可变区的进一步进行人源化改造是必然趋势。/pp　　通过研究大量小鼠抗体可变区序列，截取可变区中与抗原直接接触的序列与人抗体可变区的框架区嫁接，经过亲和力重塑，可在极大程度上保持亲本抗体的特异性和亲和力，同时在人鼠嵌合抗体的基础上进一步消除免疫原性和毒副作用。人源化抗体成功的例子包括罗氏的Herceptin，其用于治疗HER-2过度表达的转移性乳腺癌。/pp　　不容置疑，完全人源化抗体绝对是最理想抗体，其可以达到完全避免鼠源性单抗的种种缺点。目前主要通过抗体库技术以及转基因小鼠技术等方法来进行生产。/ppstrong　　新型抗体药物/strong/pp　　抗体偶联药物(ADC)、双特异性抗体以及PD-1/PD-L1单抗绝对算的上是抗体圈的明星产品了。/pp　　ADC由单克隆抗体与有治疗作用的小分子药物两部分构成，借助抗体实现化学药物对肿瘤组织的靶向递送。ADC 在血液中稳定性高，药物分子不会脱落，因而毒副作用较小，但对肿瘤细胞的抑制作用远远高于裸抗体。这种设计策略既可提高抗体药物的杀伤能力，又提高小分子化学药物的治疗窗。/pp style="text-align: center "img title="003.jpg" src="http://img1.17img.cn/17img/images/201801/insimg/c110a3a2-3d90-4c38-ab72-7b6cdd3ecafa.jpg"//pp style="text-align: center "strong双特异性抗体/strong/pp　　传统抗体药物通过封闭单一信号通路抑制肿瘤生长，临床上易出现抗体药物的耐药性。所以双特异性抗体(BsAb)应运而生，其通过基因工程手段将两个分别靶向不同抗原的抗体片段组合在一起，具有两种抗原结合位点，可以发挥协同作用，进而提高治疗效果。这种结构设计能有效地改善抗体药物在体内的药物代谢动力学过程，增强临床治疗效果。然而，设计出疗效好、稳定性高且利于生产的BsAb仍需深入研究。/pp　　除了ADC和BsAb之外，肿瘤免疫治疗抗体药物也是火的不行。近几年，针对免疫检验点的PD-1/PD-L1单抗治疗不断在癌症治疗中取得突破性进展，尤其在黑色素瘤、肺癌、肾癌及膀胱癌等多种肿瘤的治疗中显示出很好的疗效，初步实现了利用免疫方法治疗肿瘤的梦想。/ppstrong　　抗体组技术和抗体组药物/strong/pp　　抗体组技术是在基因组学和蛋白组学基础上，结合杂交瘤技术及基因工程抗体技术，经过抗体靶标高通量筛选、建立大规模抗体库，最终走向应用。相比传统的单克隆抗体技术相比，抗体库技术，具有库容量大、可筛选种类多、更易获得针对特定抗原表位的高活性单克隆抗体等无以替代的优势。同时抗体库技术在筛选过程中，更为省时、省力、高效、经济。/pp style="text-align: center "img title="004.jpg" src="http://img1.17img.cn/17img/images/201801/insimg/7cd75911-64ed-4a38-aa94-c1179ab902e0.jpg"//pp style="text-align: center "strong抗体库技术/strong/pp　　目前抗体库根据其宿主免疫状态来说，主要分为天然库和免疫库两大类。天然库从理论上来说可以筛选获得可与任何抗原特异结合的的抗体，同时人抗体库可以直接产生全人的抗体V区基因，避免了后续的繁琐的人源化过程，但这些天然抗体基因缺乏体内的重排与突变过程，因而很难获得高亲和的抗体，所筛选的抗体往往需要进一步的亲和力成熟改造，而且同时筛选背景较高，针对特定抗原的抗体丰度低。/pp　　相比较而言，免疫库中则含有大量针对该特定抗原的抗体，其筛选背景大大降低，并且这些抗体基因经过在宿主体内的成熟过程，往往具理想的亲和力。/pp　　小鼠目前依然是最容易进行免疫和其后续进行基因工程操作的动物品种，然而通过小鼠抗体库获得的依然是鼠抗体V区基因，想使其安全用于临床，还必须进行后续的人源化改造。近两年发展的全人抗体的转基因小鼠技术，使得我们可以通过转有全套人抗体基因的转基因小鼠来制备人的免疫抗体库，并从中直接筛选具有治疗价值全人的抗体V区基因，无需人源化的改造。/ppstrong　　国内抗体药物产业如何突破瓶颈/strong/pp　　在全球抗体药物产业强劲发展的浪潮中，国内抗体药物产业也已经实现了从基础研究到产业化的跨越，抗体的产品逐渐增多，市场逐渐扩大。尽管我国抗体药物产业近年来发展迅速，但国产抗体药物的技术水平及市场占有率与国际先进水平仍有较大差距。/pp　　中国抗体药物上市以及原始创新产品开发都面临着严重不足的问题。无论是已上市销售的还是正在注册研究的抗体药物，国内企业在抗体靶标和新抗体基因发现、新抗体药物创制、产品种类等诸多方面都亟待提升。/pp style="text-align: center "img title="005.jpg" src="http://img1.17img.cn/17img/images/201801/insimg/35b205bb-cafe-410d-88f4-0541881c8198.jpg"//pp style="text-align: center "strongCustom mAb/strong/pp　　要实现抗体药物产业发展的突破，应该结合抗体药物相关的产学研医用现状资源禀赋及医疗服务的需求，选定未来重点发展领域及其对应的产品方向，重点支持和引导相关领域目标性抗体药物产品的开发。加强研发平台建设、提升抗体药物自主研发、CRO、CMO及产业化水平，达到与欧美先进国家同步，打破国外医药巨头对我国抗体药物的市场垄断，增强我国在国际抗体药物领域的综合竞争优势。/p