流动相稀释仪

我看到文献上写“用流动相稀释至刻度”，我要做土壤吸附，溶液都是用0.01M的CaCl2作溶剂的，在做标取时，我是用流动相稀释，还是用CaCl2溶液呢？流动相：乙腈：磷酸二氢铵=65:35.用流动相稀释，就是按照这个比例配成溶液，再用来稀释么？

请问各位，用流动相稀释是什么意思？比如我用的是安捷伦1200的液相色谱，标品浓度为1mg/ml，那么怎样设置，用流动相稀释成：0.005ug/ml,0.01ug/ml,0.05ug/ml……呢？

求高手指点，标液的溶剂是正己烷，流动相是乙腈，正己烷和乙腈不互溶，这种情况要怎么稀释标液呢？

[color=#444444]使用离子液体(水不溶)萃取样品溶液以后，由于其粘度大，用乙腈进行稀释，但是稀释以后的溶液经试验证明不能完全溶解于乙腈：水=50:50的流动相中，请问此时还能用该流动相进行色谱分析吗？[/color]

请问各位老师，配置标准溶液的中间溶液，能不能用流动相稀释？

最近做液相，遇到的问题比较多，请各位大虾指点迷津。我想请问一下，标准品溶解后，用30：70的流动相定容。后来摸索条件发现，18：82的比例最合适。那先前用那个比例流动相定容配的标准储备液还能用不？定容用的流动相比例与实际进样用的流动相比例不同，是否会对实验结果造成较大的误差？谢谢！

各位老师，请问下，[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]液质[/color][/url]流动相中加甲酸或者氨水时，甲酸和氨水还需要稀释吗

原先的分析条件：正相色谱，示差检测器，硅胶柱，流动相100%正己烷，稀释试样的溶剂也是100%正己烷，现在发现试样中有部分物质不容，准备稀释试样的溶剂改成90%正己烷+10%乙醇，但流动相仍旧用100%正己烷（因为是单泵，用2种流动相比较麻烦），请问这样分析有问题吗？会不会产生有些物质原来在90%正己烷+10%乙醇的溶剂中已溶解了，到流动相中仍旧会析出的现象？

今天科室液相流动相突然冒黄烟，充满整个房间，刺鼻，昨晚仪器开了一夜，今天早上实验人员处理完数据关机之后不久发生了反应，不知道原因，流动相为20%丙酮十80%乙腈(由1%甲酸稀释)，请大家分析一下原因，谢谢!

这两天做桔子中的多菌灵，要用到流动相离子对试剂（7毫升磷酸、1g癸烷磺酸钠、5ml三乙胺稀释至1000ml）,发现一个问题，三次都是这样，每次检测完，运行关机程序时,流动相比例从10甲醇：90水到90甲醇：10水最后这时总提示 lost prime.这时湿灌注和干灌注系统都不没有压力。厂家维修工程师总是判断说这是单向阀堵塞，流动相不干净；取下来超声2分钟，正常。从昨天到今天三次都是这样，做一次拆一次机子，亚历山大，请问这是仪器问题还是流动相问题

每次用流动相直接稀释参考品成标准曲线，检测样品的IgG浓度，HPLC检测样品中IgG浓度的专属性验证如何做？

我先用乙腈/水提取，然后用agilent C18填料做成的小柱净化，取上清液离心，再取离心后的上清液用10mM醋酸铵稀释，这样用微孔滤膜过滤后能直接上液相吗？（流动相：甲醇/水=45/55），不需要再向样品中加入甲醇吗？我以前做的时候流动相是甲醇/水，样品一般用甲醇溶解啊。谢谢啊

各位大神，我看文献流动相是乙腈，样品是用乙腈溶解的，昨天做实验的时候我们师姐问我溶解样品的乙腈需要稀释多少倍？溶解样品的乙腈不是买回来的乙腈（色谱级别）吗？还需要稀释后才能溶解样品？用什么溶解呢？文献中只是说乙腈溶解样品后需要稀释成梯度，以便做标曲，没说乙腈在溶解前要稀释后才能使用啊，请问乙腈在使用前需要稀释吗？用什么稀释?稀释的标准是什么？

关于流动相的问题所选用的流动相是乙腈 而用的是之前配好的用甲醇稀释的标准溶液 对实验结果或者出峰情况影响大么？有哪些影响？谢谢大家了！

我的流动相组成是：40%的四丁基氢氧化铵3.25m L + 125mL甲醇——用水稀释到1L。我用0.45有机膜（尼龙66）过滤，刚开始根本下不了，后面产生了很多气泡，整个抽滤过程花了半个多钟，平时过滤纯甲醇之类是很快的。问题：我认为加了甲醇了就应该用有机膜过滤，但是这个过滤速度来看是不是我选膜不对啊，我该用什么滤膜呢？

请问各位，正相色谱法检测样品含量所用的样品稀释剂是否可以改变。比如，大豆油含量测定时样品稀释第一步用的是正已烷和异丙醇（1：1）混合溶液，第二步稀释是用流动相。我可以把第二步的流动相换成1：1的混合液吗？如果换了，对测定结果及色谱系统是否会有影响。各位如果没有检测过，可以从理论上帮助我分析一下吗？非常感谢！

使用水或流动相作为替代基质的时候，后续加入提取试剂，不是相当于又稀释了一些倍数吗，这样回收率岂不是很低？比如A纯溶液：10μl质控样品+190μl水+内标B先前处理：100μl水+200μl甲醇混匀，取190μl+10μl质控样品+内标C正常：10μl质控样品+190μl水+内标+200μl甲醇这样起码C溶液中目标化合物相比B溶液中目标化合物的浓度又稀释了2倍，这样回收率会偏低吧？

研究表明，当流动相的A0.7的时候，基线噪声会显著增加，一般选择的吸收值0.5。当A1.0时，基本就不能用使了。对于示差折光检测器，主要考虑样品和流动相的折光率，这里不 再赘述。选用的溶剂粘度要低、沸点适中使用低粘度溶剂，可减小容质的传质阻力，降低柱压，利于提高柱效。从分离制备和色质连用考虑，沸点要适中，低沸点的溶剂有它的优点;但仅仅用 于分析，沸点太低，反而由于溶剂的挥发，造成保留时间的变化。尽量不用高毒性的溶剂不只是环境，单从我们自身的安全考虑，当然用低毒溶剂最好。溶剂对样品有足够的溶解力样品如果不能溶解在选用的溶剂里，还怎么分析?但如果样品在流动相里溶剂仍然不大，可以用样品的最佳溶剂先溶解，再用流动相稀释，就 可以了。知道了上面选择溶剂的一般原则，就不难理解为什么不同乙醇、丙醇做流动相的原因了，因 为它们的粘度大。 还有丙酮，虽然粘度和毒性较低、溶解度大、极性适中，但用于它的截至吸收波长为330nm， 所以不常用，如果样品的吸收大于330nm，其实用丙酮是一个不错的选择。

你觉得离子对流动相是哪一种更好：1、称取适量的离子对试剂，溶解，用酸调至一定的ＰＨ，再与有机相混合或混合后再调ＰＨ。如药典中的盐酸肾上腺素注射液，维生素Ｂ6等。2、称取适量的离子对试剂，溶解于有机相，再与已调至一定ＰＨ的缓冲溶液混合。如盐酸班布特罗片。盐酸班布特罗片：0.15％辛烷磺酸钠的甲醇溶液-乙腈-磷酸盐缓冲液（取磷酸二氢钾6.8g，加水适量使溶解，用磷酸调节pH值至3.0，加水稀释至1000ml）（34:11:55）为流动相；一个是没有另加缓冲溶液，一个是加入其它缓冲溶液，哪个更合理，不知道2不加其它缓冲盐会如何？

如果这样都不能岂不是流动相就选择错误了？没发生什么问题，看到版主回复多多的问题突然想到的。

各位大侠，跪求帮助。刚刚接触高压色谱仪。目前存在如下问题：流动相本底测试时，当流动相A切换成流动相B时，光电检测器就会有一个较大的峰。例如：流动相A切换为流动相B时，本底有一个向上的峰；流动相B切换成流动相A时，有个向下的峰。请问该峰的原因是什么呢？？，有啥办法能够消除该峰。

一、HPLC流动相溶剂选择的一般原则： 1. 溶剂要与使用的检测器匹配对UV－Vis，主要考虑本底吸收，下面是常用溶剂在不同波长下的吸收值： 200 205 210 215 220 230 240 250 乙腈 0.05 0.03 0.02 0.01 0.01 0.7的时候，基线噪声会显著增加，一般选择的吸收值1.0时，基本就不能用使了。对于示差折光检测器，主要考虑样品和流动相的折光率，这里不再赘述。 2. 选用的溶剂粘度要低、沸点适中使用低粘度溶剂，可减小容质的传质阻力，降低柱压，利于提高柱效。从分离制备和色质连用考虑，沸点要适中，低沸点的溶剂有它的优点；但仅仅用于分析，沸点太低，反而由于溶剂的挥发，造成保留时间的变化。 3. 尽量不用高毒性的溶剂不只是环境，单从我们自身的安全考虑，当然用低毒溶剂最好。 4. 溶剂对样品有足够的溶解力样品如果不能溶解在选用的溶剂里，还怎么分析？不屑多解释。但如果样品在流动相里溶剂仍然不大，可以用样品的最佳溶剂先溶解，再用流动相稀释，就可以了。知道了上面选择溶剂的一般原则，就不难理解为什么不同乙醇、丙醇做流动相的原因了，因为它们的粘度大。还有丙酮，虽然粘度和毒性较低、溶解度大、极性适中，但用于它的截至吸收波长为330nm，所以不常用，如果样品的吸收大于330nm，其实用丙酮是一个不错的选择。

在做药典中“头孢呋辛”的测试时，药典规定选择下面的流动相，--------pH3.4 醋酸盐缓冲液（取醋酸钠0.68g，冰醋酸5.8g, 加水稀释成1000ml，用冰醋酸调节pH 值至3.4）-乙睛(85∶15)为什么这么选择呢？

[color=#444444]我要测的样品是水溶液，可以用流动相(乙腈和水）稀释样品后再进样吗？跟直接进水溶液效果一样吗？测出来的量会不会有差别？谢谢了！[/color]

试验目的：为该品种后期研究如有关物质和含量测定摸索流动相。试验条件：【含量测定】照高效液相色谱法（中国药典2010年版二部附录V D)测定。色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶 为填充剂；取醋酸铵3.96g,加水720ml使溶解，加乙腈280ml、三乙胺10ml，用冰醋酸调节pH值至5.5为流动相；检测波长为295nm。分别取盐酸帕罗西汀、去氟帕罗两汀与N-甲基帕罗西汀对照品各5mg，置同一10ml量瓶中，加流动相 溶解并稀释至刻度，摇匀，作为系统适用性试验溶液，取20μl注人液相色谱仪，记录色谱图，出峰顺序为去氟帕罗西汀峰、盐酸帕罗西汀峰、N-甲基帕罗西汀峰，理论板数按盐酸帕罗西汀峰计算不低于3000,盐酸帕罗西汀峰、去氟帕罗西汀峰与 N-甲基帕罗西汀峰之间的分离度均应符合要求。测定法 取本品10片，精密称定，研细，精密称取适量（约相当于帕罗西汀10mg)，用流动相溶解并稀释制成每 lml中约含0.lmg的溶液，摇匀，滤过，精密量取续滤液20μl注人液相色谱仪，记录色谱图；另取盐酸帕罗西汀对照品，同法测定，按外标法以峰面积计算，即得。色谱柱信息：序列号（SN）：W11212195。典型色谱图：http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2013/02/201302051437_424683_1621890_3.gif对照品和样品色谱峰比较：http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2013/02/201302051501_424684_1621890_3.gif试验总结：采用中国药典2010年版二部收载的方法，进行原料药的含量标定，其系统适用性结果符合要求，拖尾因子和分离度不是很理想，在后期研究准备调节流动相成分比例，以期得到改善。

最近买了几个威灵顿的标准品，溶剂是甲苯。而我用的液相流动相是乙腈/水，采用梯度洗脱（初始比例是40/60）。看了一些关于溶剂效应的经验帖子和文献之后，打算使用乙腈对购买的标品进行稀释配制成储备液，然后再用乙腈/水（40/60）的比例逐级稀释配制标准曲线。最后上机测定。现在我不能确定我的想法是否可行，由于标品比较贵，不敢轻易的尝试，希望得到高人指点！感激不尽！

降低稀释的强度（如增加水相比例、调整pH等）或更换稀释剂为流动相，2、在保证检测灵敏度的前提下，降低进样量。3、增加峰形前延抑制器，峰形前延抑制器的设计原理是，在色谱柱前端引入一个大小合适的空腔，使样品到达色谱前被存留于空腔内的流动相（色谱柱平衡时流动相会充满空腔）稀释，使“样品溶剂”经稀释后更接近流动相的组成，实现“样品溶剂与流动相的组成接近”，并取代“用流动相溶解样品”的解决方案。