我想测全血血红蛋白,求购血红蛋白计。联系:shenyuni2000@yahoo.com.cn
我想检测兔子全血的血红蛋白,不知道那个公司有这方面的试剂盒?如果我用血红蛋白计测量,xk-2血红蛋白计怎么样啊?还有就是全血的血红蛋白和血浆的血红蛋白的差别到底在哪啊?请各位老师指教!!
最近要做大豆豆血红蛋白含量的测定,方法我已经知道,最后要比色,可是我查不到有关测定豆血红蛋白含量标线的方法!!!!太早的文献真的很难找到,希望各位大侠能多多指教,给与帮助!我将万分感谢 !
可有同仁做血红蛋白直接电化学的?我最近实验有点小郁闷,可有人讨论讨论啊?求知音啊!!!
英国研究人员说,他们发现了一种控制人体血红蛋白含量的基因,这将有助于研制治疗贫血症等病症的药物。 英国帝国理工学院研究人员11日在《自然遗传学》杂志上报告说,他们对1.6万人的基因图谱和血红蛋白含量进行了分析。结果显示,基因TMPRSS6控制着人体内的血红蛋白含量。研究对象中既有欧洲人也有亚洲人,说明这一基因的作用在全球人群中广泛存在。 血红蛋白是高等生物体内负责运送氧的一种蛋白质,如果体内血红蛋白含量过低,就会出现贫血等症状。但如果血红蛋白含量太高,也会增加中风等疾病的风险。 研究人员说,如果能研发出增强基因TMPRSS6活动性的药物,就可以提高人体内的血红蛋白含量,帮助治疗贫血症等。同样,如果能用药物抑制该基因的作用,也可以根据需要降低血红蛋白的含量。
[em06] [em06] [em06] !!我用磷酸缓冲溶液配制的血红蛋白就是做不出来氧化还原峰,那位高手知道是怎么回事啊?是不是用其他溶液配制啊?
我用氰化高铁法测全血中血红蛋白含量,但同一组的三个平行间差别很大,请问是何原因?谢谢指点
采用P/ACETM MDQ高效毛细管电泳仪,电泳缓冲液为50mmol/L 柠檬酸-20mmol/L 柠檬酸三钠,pH2.6,电泳温度25℃,电压22kV,紫外检测波长196nm。结果表明:肌肉中肌红蛋白和血红蛋白含量测定结果相对标准偏差为0.69% 和0.90%,后加标准品和前加标准品回收率分别为93.26%~97.84%、90.32%~97.46% 和79.89%~84.14%、79.52%~83.65%。该方法简单、快速、对同时测定畜禽肌肉色素物质肌红蛋白和血红蛋白含量准确度良好,是评价肉品质参数的一种值得推广应用的新方法。
糖尿病是一种慢性病,随着经济生活水平的提高和社会老龄化的加剧,近年来患者人数在全球包括中国逐年递增,目前已严重威胁到国民的健康。对糖尿病的监测也越来越受到国家和人们的重视。作为全球公认的糖尿病检测"金标准",糖化血红蛋白(HbA1c)能够稳定可靠地反映出受检人在检测前90天到120天内的平均血糖水平,不受抽检时间、空腹与否或胰岛素等因素的干扰,经过国际临床化学和实验室医学联盟(IFCC)的技术验证和推广使用,使得糖化血红蛋白检测已成为诊断糖尿病的一种趋势。我们国家也参考国际公认的HPLC-LC-MS/MS方法,已经基本建立了自己的糖化血红蛋白检测一级参考体系。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/10/201510221629_570638_1587_3.jpg糖尿病检测方法以及主流仪器分析使用最先进的流体技术和产品,为您打造最优秀的HbA1c分析仪项目难度以及如何解决各类流路问题糖化血红蛋白(HbA1c)分析仪市场情况以及前景分析立即报名参与讲座:http://www.instrument.com.cn/webinar/meeting/meetingInsidePage/1689
猪血红蛋白水解液中多肽、血红素等营养成分浓度较低,有必要对猪血红蛋白水解液进行浓缩。用0.2μm的陶瓷微滤膜和截留相对分子质量3.5 × 103 的超滤膜对猪血红蛋白水解液进行微滤澄清和超滤浓缩,考察膜滤前后水解液中粗多肽、血红素等成分的含量变化及膜的各项性能表征。结果表明,0.2μm 陶瓷膜对猪血红蛋白水解液有明显的澄清效果,粗多肽得率为76.150%,血红素得率为80.154%,膜再生效果好,膜通量恢复率达到97.42%。超滤对粗多肽和血红素的浓缩倍数分别达到3.5 倍和3 倍。因此,微/ 超滤技术适用于浓缩猪血红蛋白水解液,能获得富含多肽和血红素的浓缩物。
人血清中血红蛋白的[color=red]分子荧光[/color]光谱法测定
[font=宋体] 近年来,由于国内电子技术的发展,以往在医院用大型生化仪器检测的血液许多项目,也能在家中使用便携式检测仪器进行检测了。例如,检测人是否贫血,可以通过便携式血红蛋白检测仪进行检测。但这类仪器远不如便携式血糖检测仪那么普及,人们还是有些不放心。下面采用与医院血液分析仪进行对比检测方法,看看市售优利特[/font]URIT-12[font=宋体]便携式血红蛋白检测仪的准确度。[/font][font=宋体][b]一、仪器[/b][/font]1[font=宋体]、被校验仪器[/font][font=宋体]优利特[/font]URIT-12[font=宋体]便携式血红蛋白检测仪,生产日期[/font]2023[font=宋体]年[/font]3[font=宋体]月。[/font][font=宋体]优利特血红蛋白检测试纸[/font]H12[font=宋体],生产日期[/font]2023[font=宋体]年[/font]3[font=宋体]月,效期[/font]2024[font=宋体]年[/font]9[font=宋体]月。(注:仪器屏幕上[/font]759[font=宋体]是试纸校对码,不是检测值)[/font][img=,690,517]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/08/202308010852578354_673_1807987_3.jpg!w690x517.jpg[/img]2[font=宋体]、对比仪器[/font] [font=宋体]市区某医院[/font][font=宋体]血常规检验仪器[/font][font=宋体],日本HORIBA公司MICROS 60血液分析仪。[/font][font=宋体][b]二、对比测量方法[/b][/font][font=宋体]同一人,采[/font][font=宋体]新鲜人指尖全血样进行检验。[/font][font=宋体]在医院进行血常规检验后[/font]2[font=宋体]天内,使用被检验仪器进行测量并记录数据。[/font][img=,690,517]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/08/202308010854022056_8326_1807987_3.jpg!w690x517.jpg[/img][img=,690,517]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/08/202308010855243654_6682_1807987_3.jpg!w690x517.jpg[/img][b][font=宋体]三、测量数据对比分析(血红蛋白浓度[/font]g/L[font=宋体])[/font][/b][font=宋体]根据医学研究,正常人血红蛋白浓度指标与性别及年龄有关:[/font] [font=宋体]成年男性[/font] 120g/L[font=宋体]~160[/font]g/L [font=宋体]成年女性[/font] 110g/L[font=宋体]~150[/font]g/L [font=宋体]新生儿[/font] 170g/L[font=宋体]~200[/font]g/L[font=宋体]关于优利特[/font]URIT-12[font=宋体]血红蛋白检测仪,厂家说明书描述其准确性指标为:在血红蛋白浓度[/font]40g/L[font=宋体]~100[/font]g/L[font=宋体]范围内,绝对偏差应不大于[/font]10g/L[font=宋体];在血红蛋白浓度[/font]101g/L[font=宋体]~240[/font]g/L[font=宋体]范围内,相对偏差应不大于[/font]10%[font=宋体]。[/font][font=宋体]测量数据对比列表如下:[/font][img=,583,227]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/08/202308010855573629_6076_1807987_3.jpg!w583x227.jpg[/img] [font=宋体]从检验结果对比,看到这台优利特[/font]URIT-12[font=宋体]便携式血红蛋白检测仪(或这批试纸条)的检测数据与医院的检测数据存在负偏差,平均偏差为[/font][font=宋体]-[/font]8.2[font=宋体]。尽管大多数偏差在厂家自定的范围内(有一例超差,为[/font][font=宋体]-[/font]11[font=宋体]),但是,看起来还是偏大,特别是在贫血标准下限值附近,这些偏差有些让人担心,容易误判。[/font][font=宋体][b]四、使用便携式血红蛋白检测仪测量注意事项[/b][/font][font=宋体] 便携式血红蛋白检测仪的检测原理,是基于干化学检测方法,采用光学反射光度法原理。作为便携式检验仪器,其光学传感器的检测精度比起大型仪器有一定的差距,检验结果受到干扰的因素比较多,操作的要求要高一些。[/font] [font=宋体]平时,电池应保持电量充足,存放在[/font]0[font=宋体]~30℃[/font][font=宋体]干燥阴凉地方,轻拿轻放,不在强光直射下使用,不使用过期试纸条。[/font] [font=宋体]在家里首次使用便携式血红蛋白检测仪时,有条件的,最好与医院血常规检验数据进行比对[/font][font=宋体],或利用一月内的体检报告中的血液检测数据进行对比[/font][font=宋体]。若相差[/font]3%[font=宋体]范围,可以接受。通过检测数据对比,看看家中的便携式血红蛋白检测仪是正偏差还是负偏差?偏差多少?检测时,对检测值相应增加或减少,这样得到的修正结果更准确。[/font] [font=宋体]每年最好与医院的检测报告对比一次,发现误差过大且没有规律,应返厂维修。[/font][font=宋体][b]五、使用感受和建议[/b][/font] [font=宋体]便携式血红蛋白检测仪作为[/font]POCT[font=宋体](“床边检验”或“即时检验”)仪器,开始进入家庭。其使用操作过程与血糖仪相似,比较容易上手。但由于取血量较多,掌握滴血过程还要多练习几次。[/font] [font=宋体]试纸条最小封装是[/font]25[font=宋体]张[/font]/[font=宋体]筒[/font][font='Arial','sans-serif']×[/font]2[font=宋体],一旦开封,厂家建议在一个月内使用完。意味着,超出一个月时间,试纸条上的化学物质与长时间空气接触后,会发生化学反应,致使检验结果的准确性发生变化。对于家庭来讲,贫血病人的恢复是一个漫长的过程(数月或半年[/font][font=宋体]~一年时间[/font][font=宋体]),最多是半个月测量一次。在家中不需要像血压计、血糖仪那样频繁使用。这个数量太多,一个月内,一个人根本用不完,更适合幼儿园、学校或乡镇卫生院筛查使用。[/font][font=宋体] 个人觉得试纸条封装有[/font]4[font=宋体]张[/font]/[font=宋体]筒[/font][font='Arial','sans-serif']×[/font]5[font=宋体]小规格更适合个人使用。开封后的保值期能有[/font]3[font=宋体]个月为好,这需要在试纸条筒内的防氧化吸湿剂上下功夫进行技术研发。[/font][font=宋体] 由于家用便携式血红蛋白检测仪检测的准确度波动较大,不能作为诊断贫血病的唯一依据,只能作为参考。当检测值接近贫血病上下限指标时,应及时到医院进行复查。[/font][font=宋体] 目前,基层医院便民门诊血常规检验的费用很低,便民门诊挂号费[/font][font='Times New Roman','serif']1[/font][font=宋体]元,血常规检验项目[/font][font='Times New Roman','serif']10[/font][font=宋体]元/次,[/font][font='Times New Roman','serif']15[/font][font=宋体]分钟即可取结果。家用便携式血红蛋白检测仪及试纸的市场价格较高。个人建议,对大多数人,没有必要购买仪器及在家自测血红蛋白浓度。[/font]
[font=宋体] 近年来,由于电子技术和电化学试纸技术的进步,国产POCT(Point of care test,即时检验,又称床边检验)仪器品种上市增多,血红蛋白浓度也可以方便地在家中用便携式仪器进行测量了,对于贫血病患者来说是一个福音。本文拆解优利特一款便携式血红蛋白分析仪,解析电路结构,为正确使用和维修提供帮助。[/font][font=宋体][b]一、仪器基本情况[/b] 广西桂林优利特医疗电子有限公司生产,型号URIT-12。直接显示人体内血红蛋白含量和血细胞压积,可快速完成检测。无需手动校正,不同批号试纸只需插入该试纸CODE卡,仪器自动更换代码。[/font][font=宋体]下图检测窗口的绿光,是内部520nm高亮LED发出的检测光:[/font][font=宋体][img=,690,517]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/08/202308010906317330_1037_1807987_3.jpg!w690x517.jpg[/img] [/font][font=宋体]检测时的照片:[/font][img=,690,517]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/08/202308010907136257_5413_1807987_3.jpg!w690x517.jpg[/img][font=宋体]取出试纸片,背面的反应色块上是[/font][font=宋体][back=white]棕红色的反应物氰化高铁血红蛋白:[/back][/font][img=,690,517]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/08/202308010907341079_4231_1807987_3.jpg!w690x517.jpg[/img][b]二、仪器测量原理[/b][align=left][font=宋体] 仪器与专用试纸条配套使用,通过测量试纸条反射光强度,定量检测血液中血红蛋白([/font]HGB[font=宋体])浓度。其原理是:一次性试纸条上的化学品涂层中含有溶胞剂及反应化学物质,当被测指尖血滴到试纸上,溶胞剂破解红细胞后,反应物质与其中的血红蛋白发生反应,试纸颜色发生变化。试纸颜色变化深浅与血红蛋白浓度相关,在波长[/font]520nm LED[font=宋体]照射下,用硅光电池测量试纸条反应终点的反光强度,经[/font]MCU[font=宋体]数据处理后,显示为血红蛋白浓度值。[/font][/align][font=宋体] 试纸条上[/font][font=宋体]反应色块的[/font][font=宋体]主要反应物质:高铁氰化钾,表面活性剂曲拉通。曲拉通起到[/font][font=宋体]溶胞剂作用,让血红蛋白从红细胞中释放出来,与[/font][font=宋体]高铁氰化钾反应生成[/font][font=宋体][back=white]氰化高铁血红蛋白(棕红色),它是一种非常稳定的血红蛋白衍生物,血液中的各种血红蛋白成分均能被转化,其吸收峰为540nm左右。[/back][/font][font=宋体][b]三、拆机[/b][/font][font=宋体]取下仪器下面盖板,看见内部的“SET”键和PD(检测器):[/font][img=,690,517]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/08/202308010912540877_8931_1807987_3.jpg!w690x517.jpg[/img][font=宋体]PD上面有一小块红外截止滤镜(泛红光),防红外干扰。旁边的小圆孔内是520nm高亮LED,工作时发出检测光:[/font][img=,690,517]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/08/202308010913209777_4784_1807987_3.jpg!w690x517.jpg[/img][font=宋体]仪器背面,有工厂出厂商标:[/font][img=,690,517]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/08/202308010915071431_3168_1807987_3.jpg!w690x517.jpg[/img][font=宋体]卸下电池盖,装有两枚日本原产maxell CR2032锂电池,电量高,比较耐用:[/font][img=,690,517]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/08/202308010915308198_5689_1807987_3.jpg!w690x517.jpg[/img][font=宋体]拆开试纸代码卡,内部只有一枚芯片:[/font][img=,690,517]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/08/202308010915529522_2600_1807987_3.jpg!w690x517.jpg[/img][font=宋体]芯片型号24C02,是I2C接口串行E2PROM存储芯片,内部写有试纸批号数据,供仪器自动校正使用:[/font][img=,690,517]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/08/202308010916176537_8204_1807987_3.jpg!w690x517.jpg[/img][font=宋体]仪器是卡口结构,用小刀拨开,取出电路板:[/font][img=,690,517]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/08/202308010916458952_4776_1807987_3.jpg!w690x517.jpg[/img][img=,690,517]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/08/202308010917212870_868_1807987_3.jpg!w690x517.jpg[/img][img=,690,517]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/08/202308010917475022_3461_1807987_3.jpg!w690x517.jpg[/img][font=宋体]电路板侧面的通讯孔、试纸代码插槽:[/font][img=,690,517]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/08/202308010918147194_539_1807987_3.jpg!w690x517.jpg[/img][font=宋体]电路板上元件分布,由于采用了MCU,元件不多,比较简洁:[/font][img=,690,517]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/08/202308010918440117_8499_1807987_3.jpg!w690x517.jpg[/img][font=宋体][b]四、主要电子元件及功能[/b][/font][font=宋体]下面电路板上,U1是TI(美国德州仪器)公司的2432C,E2PROM存储芯片,存储试纸数据或检测结果,供MCU分析计算用或查询以往检测结果。U4是[color=black][back=white]TI [/back][/color]公司[color=black][back=white]贴片模数转换芯片[/back][/color]D571[color=black][back=white],[/back][/color][color=black][back=white]封装SOT23-6,将光电池输出的模拟电信号转变为数字信号,送入MCU[/back][/color]分析计算用。[/font][img=,690,517]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/08/202308010919491011_8981_1807987_3.jpg!w690x517.jpg[/img][font=宋体]下面电路板上,U2是TI(美国德州仪器)公司的[color=black][back=white]M430FE427[/back][/color][color=black][back=white]微控制芯片(MCU),封装[/back][/color][color=#333333][back=white]TQFP-64[/back][/color][color=#333333][back=white],是主控芯片,内置本机程序及液晶显示屏驱动。[/back][/color]U3-ADNN是电源管理芯片。CRYSTA EAMD是晶振,为MCU提供时钟基准。[/font][img=,690,517]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/08/202308010920361712_1183_1807987_3.jpg!w690x517.jpg[/img][font=宋体]卸下电路板与液晶面板固定螺丝,将二者分离开:[/font][img=,690,517]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/08/202308010921135797_2257_1807987_3.jpg!w690x517.jpg[/img][font=宋体]这一面没有元件,LCD与电路板用导电橡胶条连接:[/font][img=,690,517]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/08/202308010922114891_9083_1807987_3.jpg!w690x517.jpg[/img][font=宋体]红外截止滤镜片嵌在塑料板上,旁边的小圆孔是LED导光孔:[/font][img=,690,517]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/08/202308010923114231_1077_1807987_3.jpg!w690x517.jpg[/img][font=宋体]看见光源520nm高亮LED及PD(硅光电池检测器)的真面目:[/font][img=,690,517]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/08/202308010923331469_1690_1807987_3.jpg!w690x517.jpg[/img][font=宋体]该机电路原理框图如下:[/font][img=,690,394]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/08/202308010924008044_1154_1807987_3.png!w690x394.jpg[/img][font=宋体][b]仪器电路工作原理:[/b]开机前,插入试纸代码卡,按下开关键,仪器自动读取代码卡中的信息并向机器内部传输数据,屏幕显示代码值(应与试纸筒上的代码一致),然后自动关机,取下代码卡。再次按下开关键,根据屏幕提示,插入试纸片,仪器读取试纸片反应色块的白底后,判断为有效试纸,待屏幕出现滴血提示,取指尖血滴入试纸反应区,几秒钟后,待试纸反应区生成[/font][font=宋体][back=white]氰化高铁血红蛋白(棕红色),MCU发出读取检测头数据指令,520nm高亮LED对试纸反应色块发出闪烁光,试纸反应色块的反射光被PD(硅光电池检测器)接受,其电信号经模数转换后,送入MCU进行分析计算,结果由LCD液晶显示屏显示出来。其余按键用于查阅以前检测结果和进行时间、亮度等参数设置。[/back][/font][font=宋体][b]结束语:[/b]通过拆解,了解到[/font][font=宋体]该仪器属于单光束分光光度计。检测器(PD)采用硅光电池,光源采用[/font]520nm [font=宋体]高亮[/font][font=宋体]LED[/font][font=宋体],为固定波长吸光度测量方式。如果采用最新的[/font][font=宋体]智能光敏传感器[/font][font=宋体],[/font][font=宋体]在一块芯片上集成信号调理、模数转换、跨导运放等电路,[/font][font=宋体]会进一步简化电路,[/font][font=宋体]使仪器精度及可靠性大大提高,缩小与进口仪器的差距,性价比会得到进一步提升。[/font][font=宋体]用过的试纸片不能乱丢,应妥善处置。避免老人、小孩接触玩耍受到污染。[/font][font=宋体](由于不是厂家设计人员,难免没有错误,欢迎指正。)[/font]
制备的血红蛋白纳米微囊用什么方法可以不破损微囊而测出其中的血氧饱和度?红外的方法可行否?
日前,国家药品不良反应监测中心发布了第39期《药品不良反应信息通报》并表示,近期国外药品管理部门发现苯佐卡因可能引起高铁血红蛋白血症的严重不良反应。考虑到此类风险在我国临床应用中也同样存在,且苯佐卡因产品多为非处方药,为使广大医务人员和患者及时了解该药品的使用风险,国家食品药品监督管理局提醒广大医务人员、药品生产企业和公众关注苯佐卡因引起高铁血红蛋白血症的安全性信息。 苯佐卡因是局部麻醉药,主要用于皮肤病止痒,创面、痔疮及溃疡面等止痛,在我国主要作为非处方药使用。 2011年4月,美国和加拿大药品管理当局发布警示信息,警惕苯佐卡因可能引起的严重不良反应高铁血红蛋白血症,涉及主要人群是2岁以下儿童,用药目的是使用苯佐卡因制剂缓解出牙引起的不适。 高铁血红蛋白血症虽然罕见,但为可危及生命的严重不良反应。高铁血红蛋白血症降低红细胞在全身输送氧气的能力,其体征和症状包括白色、灰色或蓝色皮肤、口唇和甲床,呼吸急促、乏力、意识错乱、头痛、头晕、恶心以及心率的变化。在罕见的情况下,高铁血红蛋白血症可以导致麻痹、昏迷甚至死亡。 FDA建议2岁以下儿童不要使用苯佐卡因产品,除非在医生的建议和监督下;成人使用苯佐卡因凝胶和溶液缓解口腔疼痛应严格按照产品说明书使用,并将本品放在儿童不能接触的地方。 虽然我国尚未收到苯佐卡因导致高铁血红蛋白血症的报告,但是国外药品不良反应监测数据表明,苯佐卡因可以引起高铁血红蛋白血症,此风险在我国临床应用中也同样存在。 国家食品药品监督管理局建议患者在使用含苯佐卡因药物时要严格按照说明书使用,如果在使用过程中出现高铁血红蛋白血症的体征和症状,如皮肤、口唇粘膜、甲床青紫,呼吸急促、心率加快、乏力、意识错乱、头痛、头晕等,请及时就医。2岁以下儿童应在医师指导下使用。 国家食品药品监督管理局建议生产企业及时完善产品说明书;增加相关安全性信息;加强合理用药的宣传,确保产品的安全性信息及时传达给患者和医生;并加强药品不良反应监测。 广大医务工作者、药品生产企业和公众如需了解详细信息,请登陆国家食品药品监督管理局网站(http://www.sfda.gov.cn)或国家药品不良反应监测中心网站(http://www.cdr.gov.cn)查询。
全血洗涤后离心机用多少转速?常温还是4℃?取下层红细胞裂解后离心用多少转速?常温还是4℃?
“不同饱和度硫酸铵沉淀中的蛋白浓度测定结果表明血红蛋白主要集中于50%和60%饱和度的硫酸铵沉淀中,杂蛋白主要集中在10%~40%饱和度的硫酸铵沉淀中。”这是文献中的原话,我想知道怎么知道哪部分是杂蛋白呢?怎么分辨哪部分的沉淀是自己的目标蛋白,哪部分的沉淀是杂蛋白呀[img]https://simg.instrument.com.cn/bbs/images/default/em09509.gif[/img]
蛋白质的英文名词来源于希腊文,其含义是“第一”和“基本的”。反映了蛋白质是生命活动中最基本的和最重要的物质。蛋白质由碳、氢、氧、氮4种主要元素组成,有的蛋白质还含有硫、磷等其他元素。如血红蛋白含有铁、甲状腺球蛋白含有碘等。蛋白质的基本结构单位是氨基酸。氨基酸的特点是在分子一端含有氮和氢元素组成的化学基团——氨基。动物不能合成氨基,只有植物有利用硝酸盐合成氨基的能力。所以在动物饲养中,要依靠含有氨基酸、蛋白质的饲料,使家畜、家畜等生产蛋白质(净肉)。 蛋白质由一长串氨基酸链组成。一般都很长,如血红蛋白是由580个氨基酸组成。但氨基酸种类只有20种,在蛋白质中按严格的顺序排列,构成多种多样的生物专一性的蛋白质。由于人体不能合成氨基酸,只能从食物中获得蛋白质,并在肠内将蛋白质分解成各种氨基酸,这些氨基酸被吸收后,重新合成人体的特殊蛋白质。合成蛋白质的主要器官是肝脏。 从蛋白质这个名字看,好像蛋白质来源离不开蛋。其实动物、植物以及其他生物体都含有蛋白质。虽然最常党见的蛋白质——蛋清是白色的。但并非所有蛋白质都是白色的。血液上的血红蛋白是红色的,绿色植物的叶绿蛋白是绿色的。 同碳水化物和脂肪相比,蛋白质的两个代谢特点,一是它主要在代谢中发挥作用,而不是分解后为人体提供能量;二是蛋白质代谢的起点和终点都是蛋白质,即起点是人体的异蛋白质(如鱼的蛋白质,鸡肉蛋白质等),而终点则成了人体特有的蛋白质。蛋白质由氨基酸组成,是另一种重要的供能物质,每克蛋白质提供4卡路里的热量。但蛋白质的更主要的作用是生长发育和新陈代谢。过量的摄入蛋白质会增加肾脏的负担。因此蛋白的摄入要根据营养状况、生长发育要求达到供求平衡。通常蛋白摄入所产生的热量约占总热量的20%左右为宜。
最近一直在网上找国产的肌红蛋白,但是所查到的几乎都是Sigma的进口的,价钱有点偏高。我是用来作为测试柱子性能的样品,所以不需要太纯的,那样更容易考察柱子的分离性能。知道供应信息的请回帖啊,谢谢!
一些蛋白质的分子量与Stokes半径:蛋白质 分子量(kD)Stokes半径(nm)乳清蛋白 12.4 2.01核糖核酸酶 13.7 1.92肌红蛋白 17.0 2.00大豆胰蛋白酶抑制剂 21.5 2.26碳酸酐酶 31.0 2.35辣根过氧化物歧化酶 40 3.00卵清蛋白 45 2.80血红蛋白(人)64.5 3.08牛血清白蛋白 70 3.65酵母醇脱氢酶 150 4.55血浆铜蓝蛋白 151 4.73谷氨酸脱氢酶 258 6.00甲状腺球蛋白 670 8.25芜菁花叶病毒 3500 ~12.0
我们学习分离血红蛋白时,书上提到凝胶色谱法分离蛋白质原理是蛋白质分子量大小不同导致有些蛋白质能进入凝胶颗粒,另一些不能,所以迁移速度不同,将分子量不同的蛋白质分离。既然这样,那为什么不是因为蛋白质分子大小不同呢? [b]问题补充:[/b]关键在于为什么是根据蛋白质分子量大小而不是蛋白质分子大小(所占空间)分离呢 小分子蛋白可以在小孔内穿过 从而增加了分离时所走的路程 最后被分离。大分子蛋白主要是通过凝胶颗粒之间的空隙通过 因此路线相对较短最先被分离。 只是做题时这一题选分子量而不选分子大小
目前血细胞分析仪检测原理包括电学和光学两种,电学包括电阻抗法和射频电导法,光法包括激光散射法和分光光度法。电阻抗法根据Coulter原理及血细胞非传导的性质,以电解质溶液中悬浮的血细胞在通过计数小孔时引起的电阻变化进行检测为基础,进行血细胞计数和体积测定。当有细胞通过小孔时,由于电阻增加,于瞬间引起电压变化及通过脉冲。细胞体积越大,脉冲振幅越高,细胞数量越多,脉冲数量也越多。脉冲信号经过:放大、阈值调节、甄别、整形、计数而得出细胞技术结果。电阻抗法可准确量出细胞(或类似颗粒)的大小,是三分类血液分析仪的主要应用原理,并与光学检测原理组合应用于五分类血液分析仪中。激光散射法应用了流式细胞术检测原理及细胞通过激光束被照射时,产生与细胞特征相应的各种角度的散射光。对经信号检测器接受的散射光信息进行综合分析,即可准确区分正常类型的细胞。激光散射法在区别体积相同而类型不同的细胞特征时,比电阻抗法分群更加准确。故激光散射法已成为现代五分类血液分析仪的主要检测原理之一。射频电导法是用高频电磁探针渗入细胞膜脂质可测定细胞的导电性,提供细胞内部化学成分、细胞核和细胞质、颗粒成分等特征信息。射频电流是每秒变化大于10000次的高频交流电磁波,能够通过细胞壁。分光光度法是所有类型的血细胞分析仪检测血红蛋白的原理,它利用血红蛋白与溶血剂在特定波长下比色,吸光度的变化与液体中血红蛋白含量成比例。
0.05),表明无性别差异。 图2 CIEF测定105份正常成人样品Hb A2值的频数分布情况(见附件)图3 正常成人、-和-地贫Hb A2 CIEF测定值分布情况(见附件)2.3 稳定性和精确性的测定:两例样品(Sample 1,Sample 2)各自的三天重复(60次)CE检测结果显示:Hb A2的平均出锋时间为288.49s,s=13.49, CV为4.67%。定量测定Hb A2CVs见表1。定量测定正常样品(Sample 1)的CV为: 3.63%~9.04%;Hb A2升高样品(Sample 2)的CV为:2.75%~5.09%。表1 CIEF测定Hb A2精确性Table 1 Precision of Hb A2 measurement by CIEF N Mean,% s CV,%Sample 1 Day 2 10 3.65 0.33 9.04Day 4 10 3.86 0.14 3.63Day 6 10 3.74 0.18 4.81 Sample 2 Day 2 10 7.66 0.39 5.09Day 4 10 7.65 0.21 2.75Day 6 10 7.37 0.31 4.212.4 CIEF与常规血红蛋白电泳的比较:通过对198份样品的常规血红蛋白电泳和CIEF Hb A2测定值做统计学分析,可见常规血红蛋白电泳(Conventional Hb electrophoresis, CHbE)Hb A2测定值相对于CIEF Hb A2测定值之间的的线性回归方程为Hb A2 CHbE=-2.707+1.321Hb A2 CIEF,相关系数为0.991(图4),显示出二者之间良好的线性关系。图4 CIEF与常规血红蛋白电泳测定Hb A2的线性关系。(见附件)2.5 样品的基因型分析结果:CIEF诊断为-地贫的43例携带者中,经基因分析其中42例的基因型为--SEA,例为;CIEF
全自动血细胞分析仪——能依靠它们去计数吗?库尔特原理库尔特原理指出:悬浮在电解液中的颗粒随电解液通过小孔管时,在恒电流设计的电路中导致小孔管内外两电极间电阻发生瞬时变化,产生电位脉冲。脉冲信号的大小和次数与颗粒的大小和数目成正比。这主要是根据血细胞与稀释剂相比,血细胞是不良导体的特性而提出的。起初,原始的库尔特计数器只能计算和测量红细胞。后来,随着技术的不断发展和设备的不断改进,临床医生还可以利用它来计算和测量白细胞。到20世纪70年代,技术的进一步发展使技术人员能够分离血小板。全自动细胞计数器的演进传统意义上的血细胞计数器是通过研究外周血涂片,使用血细胞仪和白细胞分类计数而手动完成的(也称为100个细胞涂片分类,手动白细胞分类计数或手动计数器)。根据库尔特原理导致了库尔特计数器的发明,随后又开发出了技术先进的全自动血液细胞分析仪。自此,仪器的技术水平得到不断提高。由于技术的进步,一台仪器可以分析越来越多的参数,从而大大提高了血液检测的效率,减少在多台仪器上分析一个样品的情况。现代的细胞分析仪能够测量白细胞(WBC)、白细胞分类(五分类)、红细胞(RBC)、血红蛋白(HGB)、血小板(PLT)、平均红细胞体积(MCV)、平均血小板体积,并且可以自动计算血细胞比容(HCT)、平均红细胞血红蛋白(MCH)、平均红细胞血红蛋白浓度(MCHC)、红细胞分布宽度,血小板比积和血小板分布宽度。自动分析仪的其他重要因素包括它们运行的速度和每批次可以处理的样本数量(大处理容量可以减少周转时间)。即时检验(POCT)即时检验([/
我用V-5600可见分光光度计做的,做样品的时候含量比别的实验室低10%这样,有老师知道什么原因吗,用的是SF/Z JD0107010-2011的方法做的,别的实验室用的WS/T 42-1996的标准。之前我觉得是方法不同做的结果会不一样,但是我今天做的空白血(之前没做过)我以为会像正常没有CO中毒一样,会在10%以下,但是我做得-9%左右,我就怀疑是仪器或者方法操作的问题,有没有老师知道是什么情况
70kDa)中的七个得到了可溶性表达,而其它的融合标签(GST,MBP和hexahistidine)系统则只得到了四个可溶性表达的蛋白。表1. 用大量的目标蛋白评估NusA标签对提高融合蛋白可溶性的作用参考文献a目的蛋白数目目的插入序列种属目标蛋白大小范围NusA融合蛋白可溶性比例Shih等(2002)40酵母,哺乳动物,植物,昆虫9-10060Korf等(2005)75人6-12760bKohl等(2008)96人1-11844ca. Korf等和Kohl等的研究中包含了六组氨酸标签。b. 可溶性蛋白量大于等于10%即认为该融合蛋白可溶。c. 纯化后的融合蛋白如果在SDS-PAGE后考染在合适位置出现条带即认为可溶。Korf等的还发现对于定位于真核细胞细胞器,质膜或者骨架的蛋白,相对于其它标签系统来讲,NusA标签是最好的可溶性表达的选择。Kohl等(2008)也发现只要在20-25℃诱导表达,NusA标签能够大大提高难表达的蛋白比如膜蛋白的可溶性。与Korf等的研究结果一致,Kohl等也发现25℃诱导表达比30℃或37℃诱导表达可以纯化得到更多的NusA融合蛋白。切除NusA标签获得后保持活性且正确折叠的蛋白表2总结了16个采用NusA标签成功获得可溶性蛋白,在切除标签后这些蛋白仍有正确折叠结构和活性。大部分这种研究是是关于分子量小于或接近20kDa的目标蛋白。纯化后的目标蛋白产量范围在1.5-100mg/L。趋化因子和细胞因子可以得到高达30-100mg/L的产量。其它关于这些蛋白表达和纯化的有参考价值信息包括:■ 植物磷酸烯醇式丙酮酸—羧化酶激酶(Ermolova 2003)——目标蛋白切除标签后用BDA(蓝色葡聚糖)亲和层析树脂纯化。纯化后蛋白的催化活性比未切除标签的融合蛋白高50倍。■ Xklp3a,Tep3Ag和E8R(De Marco 2004)——用蛋白酶切割后,His-融合的TEV和NusA被Ni2+离子亲和色谱选择性去除。与Ni2+亲和结合的标签被紧密地结合在树脂上,在流出液中则可以得到纯化的目的蛋白。所有这三种蛋白在纯化后都正确折叠且均一分散在溶液中。纯化的膜结合蛋白E8R牛痘病毒蛋白在Tris缓冲液中除去NusA后出现了沉淀,然而加入0.02%的月桂酰基麦芽糖苷和150mM的氯化钠后,蛋白又重新变得可溶。■ 环麦芽糖糊精酶(Turner 2005)——这个蛋白属于α-淀粉酶家族。这个家族的蛋白通常在大肠杆菌中很难以活性形式表达出来。将其与肠激酶混合孵育24小时以上会使其活性逐渐增强,直到达到未经肠激酶处理过的融合蛋白的2倍以上,这也说明标签的存在降低了该酶的活性。可以用固化了Cu2+的亲和层析柱去除切除的融合标签。■ 八种人趋化因子(Magis-trelli 2005)——所有的蛋白都在OrigamiTM B菌株中表达提高它们在胞质中的二硫键形成率。在趋化因子编码序列的C端引入了AviTMTag(亲和素)生物素化序列。切割后的细胞趋化因子可以用单体的亲和素树脂亲和层析与切割下的NusA标签和蛋白酶混合物分离开。所有切割纯化后的蛋白在细胞趋化实验中都显示了活性,而没有一个融合蛋白有这样的活性。■ 蚯蚓血红蛋白(Karlsen 2005)——酶切后,用分子筛分离纯化蚯蚓血红蛋白,纯化后的蛋白通过圆二色谱检测得到的α-螺旋结构与模型预期结果一致,且纯化后的蛋白可以以单体的形式稳定保存。■ 人白介素-29(Li 2006)——用S-蛋白亲和层析比Ni2+亲和层析可以得到更纯的目的蛋白。将融合蛋白N端的NusA/His•Tag®/S•Tag™标签切掉后,用链亲和素琼脂去除生物素标记的凝血酶。用水疱性口膜炎病毒(VSV)处理固定的人羊膜上皮细胞(WISH 细胞)后,通过检测纯化的IL-29对细胞的保护效应来检测其抗病毒活性。■ 人干扰素-λ2(Li 2007)——酶切后,用Novagen提供的EKaptureTM琼脂除去重组的肠激酶。先用纯化后的干扰素-λ2处理WISH细胞,24小时后加入VSV病毒,可以观察到干扰素-λ2可以有效地保护细胞免于病毒介导的病变。表2. 切除NusA标签获得后保持活性且正确折叠的蛋白参考文献目的蛋白目的蛋白分子量(kDa)切割用蛋白酶融合蛋白亲和层析固定介质纯化后目的蛋白产量(mg/L)Ermolova等(2003)植物磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶激酶32凝血酶Ni2+1.5De Marco等(2004)Xklp3ATep3AgE8R15NRa32bTEV酶TEV酶TEV酶Ni2+5.02.54.0Turner等(2005)环麦芽糖糊精酶69肠激酶Cu2+1.6Magistrelli等(2005)八种人趋化因子8-21Xa因子Ni2+30-100Karlsen等(2005)蚯蚓血红蛋白15TEV酶Ni2+NRaLi和He(2006)人白介素-2920凝血酶S-蛋白60Li和Huang(2007)人干扰素-λ220肠激酶Ni2+65a. 未报道b. 根据NCBI报道预测的全长蛋白分子量与NusA标签融合且具有活性的蛋白 与这些切除NusA标签后保持活性且正确折叠的蛋白不同,还有很多报道指出目的蛋白在“NusA-目的蛋白”的融合形式时具有很好的活性。比如单链(ScFv)催化活性抗体14D9(Zheng 2003),来自Aequorea victoria的绿色荧光蛋白(Nallamsetty 2006),人二氢叶酸还原酶(Nallamsetty 2006),来自Ensis directus蛏子的精氨酸酶激酶(Compaan 2003),来自B. thuringiensis的修饰δ-内毒素(Kumar 2005),人BCMA跨膜受体(Guan 2006),植物α-双加氧酶1(Liu 2006),以及来自Plasmodium falciparum的b-ketoacyl-acyl载体蛋白合成酶(Lack 2006)等,反映了各种不同背景的蛋白都显示出了与NusA标签融合后的活性。NusA标签提高蛋白可溶性的可能机制 Houry(1999)等揭示NusA蛋白是分子伴侣GroEL在体内的必须底物。而GroEL与其共作用因子GroES是大肠杆菌唯一的在所有生长条件下必需的分子伴侣系统。Douette等(2005)研究了融合蛋白NusA-UCP1(uncoupling protein 1)的可溶产量。UCP1是一种线粒体膜蛋白。这些作者发现16℃培养时,当GroEL共过表达的情况下,融合蛋白的可溶性有更大的提高。这个结果也表明NusA与分子伴侣途径相作用,从而阻止参与蛋白的聚集。总结 已有充分的证据证明NusA标签系统能显著提高多种不同来源蛋白的可溶性表达,而这些蛋白在单独表达时往往形成不可溶的包涵体。在一些研究报告中,用蛋白酶切除NusA标签能使目的蛋白仍保持正确折叠和生物学活性;相反,在另外许多报道中也指出当目的蛋白与NusA融合而非切除时,融合蛋白也同样具有活性。NusA标签系统的成功至少部分地是由于其与大肠杆菌分子伴侣系统相互作用的结果。
功能性蛋白及一例分析自19世纪中叶荷兰化学家Gerardus Mul-der从动物组织和植物体中提取出蛋白质以来,人们发现了越来越多的蛋白质,据估计生物界中蛋白质的种类可达1010~1012之多;在这如此众多的蛋白质中,功能性蛋白发挥着极其重要的生理功能 。功能性蛋白也有人称其为活性蛋白。它们的特点是都有识别功能,能与其他分子特异性结合.完成各种复杂的生命活动:在结构上主要是一些球状蛋白质。1 功能性蛋白的种类按其作用方式不同可分为酶蛋白、运输蛋白、运动蛋白、免疫球蛋白、毒蛋白、激素蛋白(1)酶蛋白: 细胞的生长和繁殖、代谢物的合成和分解、能量的产生和利用,这些过程所需要的物质都是通过无数的生物化学反应来提供的.而这些反应又都是在一类特殊蛋白质—酶蛋白的催化下完成的。酶的催化效率极高,且具有高度的专一性,也正是这种高度的专一性使一种特定的酶只能作用于一种或少数几种结构相似的化合物,这就要求有各种不同的酶去作用于不同的化合物。在酶的作用下,生物细胞才得以合成各种复杂的化合物,也才能使各种大分子物质被分解、吸收和利用.且这些反应都要在适合于生物体本身的温度、压力和pH值等非常温和的条件下进行,能使生物细胞按照这种方式进行化学变化是蛋白质最重要的功能之一。常见的酶蛋白如淀粉酶使淀粉分解形成葡萄糖,蛋白酶、肽酶使蛋白质分解为氨基酸;溶菌酶使细菌细胞壁中的肤聚糖被破坏;凝血系统酶的有序作用使凝血过程得以有条不紊地进行.合成酶能合成多种体内所需要的大分子物质。应用举例:由于近年来鱼粉资源价格上涨,冷向军等人通过向鱼粉含量较低(10﹪)的饲料个添加蛋白酶AG使鱼的前肠蛋白酶有显著提高。同样有实验证明在玉米-豆粕型粮食中添加蛋白酶可以改善肉鸡的生长性能,提高蛋白质的消化率。(2)运输蛋白:有些蛋白质起载体的作用可以运输特定的物质到达必须的部位,使其完成特定的功能,这种蛋白质称为运输蛋白。如哺乳动物的血红蛋白能将氧从氧气充裕的肺内运送到各个组织中去:血清蛋白能与游离脂肪酶等多种物质结合,并将这些物质在脂肪组织与身体的其他部位间运送(最典型的β1-脂蛋白可随血流运输脂肪),铁传递蛋白能传递血液中的铁。无脊椎动物体内的血蓝蛋白,大豆根瘤中的豆血红蛋白也起着输送氧气的作用。另外还有一些能携带物质通过细胞膜进出细胞的蛋白质,如细菌过膜运输中的载体蛋白等,它们都属于运输蛋白。(3)运动蛋白:参与运动功能的蛋白质种类较多如脊椎动物中骨骼肌的主要成分就是肌动蛋白和肌球蛋白,肌肉的收缩就是靠着这两种互相联系的平行丝状蛋白相对滑动来完成的;细菌的运动器官——鞭毛也是由鞭毛蛋白组成的;绿藻的运动也离不开蛋白质;有丝分裂的完成,精子的运动等都与运动蛋白有关,所以绝大多数生物的运动和收缩过程都是运动蛋白参与的结果。应用举例:邱永忠等人在研究烟草花叶病毒(TMV)在植物细胞间的运动时发现用体外定位突变引起L株上,被点突变的DNA体外转录成RNA后感染感病烟草,结果定位突变的L株表型30kD蛋白基因四种位点不同的移码突变和一种基因中间大部分缺失的突变体均使病毒不能感染植株。这证明TMV 30kD蛋白与病毒运动有关,而与病毒复制无关。同时因为胞间连丝一般只能让小于1kD的分子通过,其通透范围远小于病毒颗粒,也小于折叠的病毒核酸分子,Wolf等实验证明正时因为30kD蛋白才使得植株分子半径扩散了三倍多。(4)免疫球蛋白:指具有抗体活性的动物蛋白。主要存在于血浆中,也见于其他体液、组织和一些分泌液中。脊椎动物的免疫系统能抵抗外来的入侵物质,如病毒、细菌以及其他机体的细胞,当外来的这些入侵物质(抗原)进入机体后就会激发机体的免疫系统而产生特异性的免疫球蛋白(抗体),通常每一种抗体对于相应的某一特定抗原具有高度的专一性,抗原与抗体结合形成抗原-抗体复合物.使入侵物质——抗原失活而排出体外,从而消除外来物质对机体的干扰。由此看来蛋白质不仅参与了高等动物的免疫反应,而且起着重要的作用,由于抗原和抗体结合的高度专一性,必然有数量众多的抗体作用于不同的抗原物质,据估计抗体的类型可能有10O万种,即免疫球蛋白可能有100万种之多。(5)毒蛋白:动物、植物和微生物都可以产生某些特殊的物质来防御敌害,这些物质中绝大多数是蛋白质类物质,由于它们对高等动物具有毒性,故称为毒蛋白。蝎类能产生毒性很强的蝎毒蛋白.用来攻击敌害,保护自己;蛇类产生的神经毒素和心赃毒素其主要成分也是小分子量的蛋白质;毒蘑菇中的相当一部分蘑菇毒素也是蛋白质;细菌产生的毒素,毒性极强的肉毒梭菌毒素(人的致死量小于19m)和破伤风痉挛毒素、白喉杆菌毒素等外毒素均是蛋白质。应用举例:王峰等人研究核糖体失活蛋白(RIPS)是一类能够抑制细胞核糖体合成蛋白质,从而导致宿主死亡的毒蛋白,广泛存在于植物、细菌中。发现其在在细胞内的转运途径研究很多,目前较为清楚的是逆向转运途径,其中以蓖麻毒素、志贺菌毒素、霍乱毒素为代表,大体过程为:内吞一内吞小体一高尔基体一内质网一胞液。(6)激素蛋白:是由特殊细胞所产生的一类物质,它们通过与靶细胞或系统内其它器官的相互作用来发挥其代谢上的功能,其实许多激素本身就是蛋白质,这样的蛋白质称为激素蛋白,它们在生物合成上具有重要的功能。如胰高血糖素、胰岛素、胃泌素、生长激素、促甲状腺激素、促肾上腺皮质激素和促脂解激素等均是蛋白
血中铅WS/T20-1996、WS/T21-1996,血中游离原卟啉,血中锌卟啉,血中镉WS/T34-1996,血中碳氧血红蛋白的测定;尿中汞,尿中镉,尿中硒WS/T47-1996,尿中砷WS/T28-1996,WS/T29-1996,尿中氟的测定WS/T30-1996要分析方法全文,谢谢专家回帖,[em17] [em31]
N-三(羟甲基)甲基-3-氨基丙磺酸,简称TAPS.作为DNA筛分体系中常用的缓冲液体系,也可作为RNA样品的缓冲液成分,适用于叶绿体薄层备样的电子传递和磷酸化研究,在冷冻干燥过程中保护氧合血红蛋白氧化为高铁血红蛋白,也可作为毛细管区带电泳进行蛋白微量分析的背景电解质。
拉曼光谱技术作为一种通用的分析仪器,其应用范围很广,很多朋友只是了解拉曼光谱在某一方面的应用。希望大家在此晒一下自己的研究领域,交流一下,也许可能对其他人有帮助。我先介绍一下自己的研究方向 主要用拉曼光谱分析了血红蛋白的光谱特征,并监测亚硝酸盐中毒引起血红蛋白分子变化情况。