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荧光猝灭分析

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荧光猝灭分析相关的论坛

  • 荧光猝灭现象

    碰到荧光猝灭现象,该如何解释?能详细分析下吗?谢谢大侠了!

  • 【资料】荧光猝灭!!!!!!!!!!!!!

    fluorescence quenching   荧光猝灭是指荧光物质分子与溶剂分子之间所发生的导致:   ①荧光强度变化   或   ②相关的激发峰位变化   或   ③荧光峰位变化   的物理或化学作用过程。与荧光物质分子发生相互作用而引起荧光强度变化和相关的激发峰位和荧光峰位变化的物质被称为荧光猝灭剂(quencher)。   荧光猝灭分为静态猝灭和动态猝灭。基态荧光分子与猝灭剂之间通过弱的结合生成复合物,且该复合物使荧光完全猝灭的现象称为静态猝灭。激发态荧光分子与猝灭剂碰撞使其荧光猝灭则称为动态猝灭。   荧光分子本身浓度增大使其荧光猝灭的现象称为浓度猝灭或自猝灭。由于荧光的再吸收、荧光物质发生化学变化而观察不到荧光的现象一般不称为荧光猝灭。在利用荧光进行定量、液体闪击计数等包含荧光过程的测定方法中,一定要注意溶剂、共存杂质、氧气等猝灭剂的影响。   利用某种物质对某一种荧光物质的荧光猝灭作用而建立的对该猝灭剂的荧光测定方法,即为荧光猝灭法。一般而言,荧光猝灭法比直接荧光测定法更为灵敏,具有更高的选择性。   分子结构和化学环境是影响物质发射荧光和荧光强度的重要因素. 至少具有一个芳环或具有多个共轭双键的有机化合物容易产生荧光,稠环化合物也会产生荧光.饱和的或只有一个双键的化合物,不呈现显著的荧光.最简单的杂环化合物,如吡啶,呋喃,噻吩和吡咯等,不产生荧光。   取代基的性质对荧光体的荧光特性和强度均有强烈影响.苯环上的取代基会引起最大吸收波长的位移及相应荧光峰的改变.通常给电子基团,如-NH2-,-OH,-OCH3,-NHCH3和-N(CH3)2等,使荧光增强;吸电子基团,如-CL,-Br,-I,-NHCOCH3,-NO2和-COOH,使荧光减弱.具有刚性结构的分子容易产生荧光。   大多数无机盐类金属离子不产生荧光,而某些情况下,金属螯合物却能产生很强的荧光. 溶剂的性质,体系的PH值和温度,都会影响荧光的强度. 荧光分子与溶剂或其他分子之间相互作用,使荧光强度减弱的现象称为荧光猝灭.引起荧光强度降低的物质称为猝灭剂.当荧光物质浓度过大时,会产生自猝灭现象。

  • 荧光猝灭常见吗?

    高浓度的试剂荧光反而不强是荧光猝灭引起的吗?谁了解荧光猝灭的相关知识,介绍下,什么物质的测定容易产生荧光猝灭?

  • 【讨论】溶液的荧光猝灭

    [size=5][color=red][font=宋体][b]荧光熄灭:[/b][/font][/color][color=blue][font=宋体]指荧光物质分子与溶剂分子或溶质分子的相互作用引起荧光其哪个度降低或荧光强度与浓度偏离线性的现象。[/font][/color][/size][color=red][size=6][font=宋体][b] [/b][/font][/size][/color][color=red][size=6][font=宋体][b]熄灭原因[/b][/font][/size][/color][color=blue][size=6][font=宋体]:[/font][/size][/color][color=blue][size=6][font='Times New Roman'] [/font][/size][/color][color=blue][size=6][font=宋体]碰撞猝灭;氧的熄灭作用等。 [/font][/size][/color]

  • 【求助】荧光猝灭类型的准确判断问题

    大家好 请问一下既然荧光寿命的测定能够准确判断荧光猝灭类型,那么为什么很少见使用此法呢,其他方法麻烦还有争议,现在的仪器不是已经可以测得荧光寿命了么?回答最好有文献支持,急写毕业论文用!谢谢大家了 ,帮帮我吧。[em09501]

  • 黄曲霉毒素B1的荧光猝灭

    快过年了,今儿中午突然接到领导一个电话,有个黄曲霉B1的突发事件,让回家后随时待命。。。挂了电话后http://simg.instrument.com.cn/bbs/images/default/em09504.gif。正赶上月初的时候单位新购置了一台沃特世的液质,居然有加荧光检测器。早在以前的比对中就被黄曲霉虐待过,这次趁着液质检测人员回家过年的机会(羡慕嫉妒恨啊)刚好能偷偷搬过来用用。额正题来了:为什么UPLC的大体积流通池可以避免黄曲霉B1的荧光猝灭呢?原来只记得看过文献上说是因为黄曲霉B1在反相中遇水猝灭,可是这跟流通池体积大有关系么?

  • 猝灭还是淬灭

    看到有的人说荧光猝(cu)灭,有人说荧光淬(cui)灭到底哪个对阿?

  • 荧光分析法

    转自;成都速佳仪器维修中心论坛一)荧光的产生一此化学物质能从外界吸收并储存能量(如光能、化学能等)而进入激发态,当其从激发态再回复到基态时,过剩的能量可以电磁辐射的形式放射(即发光)。荧光发射的特点是:可产生荧光的分子或原子在接受能量后即刻引起发光;而一旦停止供能,发光(荧光)现象也随之在瞬间内消失。  可以引起发荧光的能量种类很多,由光激发所引起的荧光称为致荧光。由化学应所引起的称为化学荧光,由X线或阴极射线引起的分别称为X线荧光或阴极射线荧光。荧光免疫技术一般应用致荧光物质进行标记。  (二)荧光效率荧光分子不会将全部吸收的光能都转变成荧光,总或多或少地以其他形式释放。荧光效率是指荧光分子将吸收的光能转变成荧光的百分率,与发射荧光光量子的数值成正比。荧光效率=发射荧光的光量分子数(荧光强度)/吸收光的光量子数(激发光强度)发射荧光的光量子数亦即荧光强度,除受激发光强度影响外,也与激发光的波长有关。各个荧光分子有其特定的吸收光谱和发射光谱(荧光光谱),即在某一特定波长处有最大吸收峰和最大发射峰。选择激发光波长量接近于荧光分子的最大吸收峰波长,且测定光波量接近于最大发射光波峰时,得到的荧光强度也最大。  (三)荧光的猝灭荧光分子的辐射能力在受到激发光较长时间的照射后会减弱甚至猝灭 ,这是由于激发态分子的电子不能回复到基态,所吸收的能量无法以荧光的形式发射。一些化合物有天然的荧光猝灭作用而被用作猝灭剂,以消除不需用的荧光。因此荧光物质的保存应注意避免光(特别是紫外光)的直接照射和与其他化合物的接触。在荧光抗体技术中常用一些非荧的色素物质如亚甲蓝、碱性复红。伊文思蓝或低浓度的过锰酸钾、碘溶液等对标本进行得当复染,以减弱非特异性荧光本质,使特异荧光更突出显示。物质的激发光谱和荧光发射光谱,可以用作该物质的定性分析。当激发光强度、波长、所用溶剂及温度等条件固定时,物质在一定浓度范围内,其发射光强度与溶液中该物质的浓度成正比关系,可以用作定量分析。荧光分析法的灵敏度一般较紫外分光光度法或比色法为高,浓度太大的溶液会有“自熄灭”作用,以及由于在液面附近溶液会吸收激发光,使发射光强度下降,导致发射光强度与浓度不成正比,故荧光分析法应在低浓度溶液中进行。 所用的仪器为荧光计或荧光分光光度计,按各药品项下的规定,选定激发光波长和发射光波长,并配制对照品溶液和供试品溶液。 由于不易测定绝对荧光强度,故荧光分析法都是在一定条件下,用对照品溶液测得浓度的线性范围后,再在每次测定前,用一定浓度的对照品溶液校定仪器的灵敏度;然后在相同的条件下,读取对照品溶液及其试剂空白与供试品溶液及其试剂空白的读数,用下式计算供试品浓度: R-R C=──×C R-R 式中 C为供试品溶液的浓度; C为对照品溶液的浓度; R为供试品溶液的读数; R为供试品溶液试剂空白的读数; R为对照品溶液的读数; R为对照品溶液试剂空白的读数。 因荧光分析法中的浓度与读数的线性较窄,故(R-R)/(R-R)应为0.50~2.0;如有超过,应在调节溶液浓度后再测。 对易被光分解的品种 ,可选择一种激发光和发射光波长与之近似而对光稳定的物质溶液,例如蓝色荧光可用硫酸奎宁的稀硫酸溶液,黄绿色荧光可用荧光素钠水溶液,红色荧光可用罗丹明B水溶液等,先与对照品溶液比较测定其读数关系,并在测定供试品溶液时用以代替对照品溶液,以校定仪器的灵敏度。 荧光分析法因灵敏度高,故干扰因素也多。溶剂不纯会带入较大误差,应先作空白检查,必要时,应用玻璃磨口蒸馏器蒸馏后再用。溶液中的悬浮物对光有散射作用,必要时,应用垂熔玻璃滤器滤过或用离心法除去。所用的玻璃仪器与测定池等也必须保持高度洁净。温度对荧光强度有较大的影响,测定时应控制温度一致。溶液中的溶氧有降低荧光作用,必要时可在测定前通入惰性气体除氧。

  • 一般用Hg去猝灭金团簇用多大的浓度?

    想必有些人做过用汞去猝灭金团簇的荧光实验,或者利用荧光猝灭来检测汞的实验。请问在开始尝试时,Hg应该用多大的浓度呢?还有如果我用氯化亚锡去还原Hg2+来得到汞再去还原金团簇,又该配多大的浓度合适呢?想得出一个线性关系,但是连一个基准都没有,不好开始实验,还请大神指教!感激不尽!

  • 【原创】兽药分析-荧光分析法

    荧光分析法-兽药   某些物质受紫外光或可见光照射激发后能发射出比激发光波长较长的荧光。  (一)荧光的产生一此化学物质能从外界吸收并储存能量(如光能、化学能等)而进入激发态,当其从激发态再回复到基态时,过剩的能量可以电磁辐射的形式放射(即发光)。荧光发射的特点是:可产生荧光的分子或原子在接受能量后即刻引起发光;而一旦停止供能,发光(荧光)现象也随之在瞬间内消失。  可以引起发荧光的能量种类很多,由光激发所引起的荧光称为致荧光。由化学应所引起的称为化学荧光,由X线或阴极射线引起的分别称为X线荧光或阴极射线荧光。荧光免疫技术一般应用致荧光物质进行标记。  (二)荧光效率荧光分子不会将全部吸收的光能都转变成荧光,总或多或少地以其他形式释放。荧光效率是指荧光分子将吸收的光能转变成荧光的百分率,与发射荧光光量子的数值成正比。荧光效率=发射荧光的光量分子数(荧光强度)/吸收光的光量子数(激发光强度)发射荧光的光量子数亦即荧光强度,除受激发光强度影响外,也与激发光的波长有关。各个荧光分子有其特定的吸收光谱和发射光谱(荧光光谱),即在某一特定波长处有最大吸收峰和最大发射峰。选择激发光波长量接近于荧光分子的最大吸收峰波长,且测定光波量接近于最大发射光波峰时,得到的荧光强度也最大。  (三)荧光的猝灭荧光分子的辐射能力在受到激发光较长时间的照射后会减弱甚至猝灭 ,这是由于激发态分子的电子不能回复到基态,所吸收的能量无法以荧光的形式发射。一些化合物有天然的荧光猝灭作用而被用作猝灭剂,以消除不需用的荧光。因此荧光物质的保存应注意避免光(特别是紫外光)的直接照射和与其他化合物的接触。在荧光抗体技术中常用一些非荧的色素物质如亚甲蓝、碱性复红。伊文思蓝或低浓度的过锰酸钾、碘溶液等对标本进行得当复染,以减弱非特异性荧光本质,使特异荧光更突出显示。 物质的激发光谱和荧光发射光谱,可以用作该物质的定性分析。当激发光强度、波长、所用溶剂及温度等条件固定时,物质在一定浓度范围内,其发射光强度与溶液中该物质的浓度成正比关系,可以用作定量分析。荧光分析法的灵敏度一般较紫外分光光度法或比色法为高,浓度太大的溶液会有“自熄灭”作用,以及由于在液面附近溶液会吸收激发光,使发射光强度下降,导致发射光强度与浓度不成正比,故荧光分析法应在低浓度溶液中进行。 所用的仪器为荧光计或荧光分光光度计,按各药品项下的规定,选定激发光波长和发射光波长,并配制对照品溶液和供试品溶液。 由于不易测定绝对荧光强度,故荧光分析法都是在一定条件下,用对照品溶液测得浓度的线性范围后,再在每次测定前,用一定浓度的对照品溶液校定仪器的灵敏度;然后在相同的条件下,读取对照品溶液及其试剂空白与供试品溶液及其试剂空白的读数,用下式计算供试品浓度: R-R C=──×C R-R 式中 C为供试品溶液的浓度; C为对照品溶液的浓度; R为供试品溶液的读数; R为供试品溶液试剂空白的读数; R为对照品溶液的读数; R为对照品溶液试剂空白的读数。 因荧光分析法中的浓度与读数的线性较窄,故(R-R)/(R-R)应为0.50~2.0;如有超过,应在调节溶液浓度后再测。 对易被光分解的品种 ,可选择一种激发光和发射光波长与之近似而对光稳定的物质溶液,例如蓝色荧光可用硫酸奎宁的稀硫酸溶液,黄绿色荧光可用荧光素钠水溶液,红色荧光可用罗丹明B水溶液等,先与对照品溶液比较测定其读数关系,并在测定供试品溶液时用以代替对照品溶液,以校定仪器的灵敏度。 荧光分析法因灵敏度高,故干扰因素也多。溶剂不纯会带入较大误差,应先作空白检查,必要时,应用玻璃磨口蒸馏器蒸馏后再用。溶液中的悬浮物对光有散射作用,必要时,应用垂熔玻璃滤器滤过或用离心法除去。所用的玻璃仪器与测定池等也必须保持高度洁净。温度对荧光强度有较大的影响,测定时应控制温度一致。溶液中的溶氧有降低荧光作用,必要时可在测定前通入惰性气体除氧。

  • 【好书推荐】《荧光分析法》(第三版)出版了!

    本书对荧光分析法作了较全面的介绍。阐述了荧光分析法的基本概念和原理、荧光与分子结构的关系、环境因素对荧光光谱和荧光强度的影响以及溶液荧光的猝灭;介绍了荧光仪器的组件、荧光光谱的校正和荧光仪器的灵敏度以及市场上常见仪器的性能;介绍了各种荧光分析方法,其中包括常规的荧光分析法、同步荧光分析法、三维荧光光谱分析法、时间分辨和相分辨荧光分析法、荧光偏振测定、低温荧光分析法、固体表面荧光分析法、动力学荧光分析法、空间分辨荧光分析技术、单分子荧光检测、荧光免疫分析法和导数荧光分析法等;对近70种元素和脂肪族、芳族、维生素、氨基酸、蛋白质、核酸、胺类、甾族、酶、辅酶、药物、毒物以及农药等有机化合物的荧光分析法作了简要的评述。 本书内容丰富,应用面广,可作为高等院校相关专业本科生和研究生的教材或教学参考书,也可供科研和生产部门的有关科学技术人员参考。 [url=http://www.instrument.com.cn/book/shtml/20060901/1009127.shtml]点击这里[/url]了解本书详情,并可在本网订购。

  • 【分享】荧光分析法 (第三版)电子版

    荧光分析法(第三版) 【作 者】许金钩 王尊本 【丛 书 名】 21世纪科学版化学专著系列 【出 版 社】 科学出版社 【书 号】 7030172957 【出版日期】 2006 年7月 【开 本】 B5 【页 码】 467 【版 次】3-3 【内容简介】本书对荧光分析法作了较全面的介绍。阐述了荧光分析法的基本概念和原理、荧光与分子结构的关系、环境因素对荧光光谱和荧光强度的影响以及溶液荧光的猝灭;介绍了荧光仪器的组件、荧光光谱的校正和荧光仪器的灵敏度以及市场上常见仪器的性能;介绍了各种荧光分析方法,其中包括常规的荧光分析法、同步荧光分析法、三维荧光光谱分析法、时间分辨和相分辨荧光分析法、荧光偏振测定、低温荧光分析法、固体表面荧光分析法、动力学荧光分析法、空间分辨荧光分析技术、单分子荧光检测、荧光免疫分析法和导数荧光分析法等;对近70种元素和脂肪族、芳族、维生素、氨基酸、蛋白质、核酸、胺类、甾族、酶、辅酶、药物、毒物以及农药等有机化合物的荧光分析法作了简要的评述。.本书内容丰富,应用面广,可作为高等院校相关专业本科生和研究生的教材或教学参考书,也可供科研和生产部门的有关科学技术人员参考。... 下载地址 匿名提取文件连接 http://pickup.mofile.com/3417237278603239 或登录Mofile,使用提取码 3417237278603239 提取文件 or 荧光分析法 第三版.part1.rar (19.07MB) http://www.91files.com/?WSUGCT85ARJ4Y3AM7W9Y 荧光分析法 第三版.part2.rar (13.58MB) http://www.91files.com/?1Q3DG1ET36BWGTN6G9PQ

  • 荧光分析特点

    (1)荧光分析的主要特点是灵敏度高、选择性好,荧光分析的灵敏度要比吸收光谱测量高2-3个数量级。分光光度法通常在 10-7 级,而荧光的灵敏度达10-9。(2)强选择性强,荧光物质具有两种特征光谱:激发光谱和吸收光谱,相对于分光光度法单一的吸收光谱来说,荧光光谱可根据激发光谱和发射光谱来鉴定物质。 (3)信息量丰富,能提供荧光物质的多种参数。 (4)但是荧光分析方法也有其不足之处:①很多物质本身不发荧光;②荧光的产生与化合物结构的关系不明确;③干扰因素多,光分解、氧淬灭、易污染。

  • 荧光分析特点

    (1)荧光分析的主要特点是灵敏度高、选择性好,荧光分析的灵敏度要比吸收光谱测量高2-3个数量级。分光光度法通常在 10-7 级,而荧光的灵敏度达10-9。(2)强选择性强,荧光物质具有两种特征光谱:激发光谱和吸收光谱,相对于分光光度法单一的吸收光谱来说,荧光光谱可根据激发光谱和发射光谱来鉴定物质。 (3)信息量丰富,能提供荧光物质的多种参数。 (4)但是荧光分析方法也有其不足之处:①很多物质本身不发荧光;②荧光的产生与化合物结构的关系不明确;③干扰因素多,光分解、氧淬灭、易污染。

  • 适用荧光分析的物质是哪些

    对于荧光物质,一般来说,有个观点, 就是其化学物质有共轭体系和刚性的平面结构, 比如苯环才会有荧光。但是能说说具体原理吗。我看到的一个理论解析是, 苯环的刚性环状结构能限制被吸收的能量通过振动或旋转等等消耗掉, 从而让这些能量以荧光的形式发出, 回到基态。 但说的是绝对需要苯环吗?谁能给出更多更具体的解释?我从吸收,IC(Internal Conversion)再到发荧光这三个过程看,只要适当波长的光能被吸收, 不被系间转换, 从而通过内转换过程无辐射跃迁至具有相同自旋多重度的激发态, 就能发荧光(荧光也不被猝灭)。这些过程很多文献都有讨论, 但没有直接提到必须要苯环结构的问题啊?我在测定长链烷烃(光谱纯级)时, 在266nm激发光照射下, 也能看到很强烈的荧光(应该不是raman散射, 因为在300nm外, 而且信号强度很大), 谁能告诉我原因?我也看到不少文献关于测定烷烃的荧光寿命的。 这也和刚才的观点有矛盾啊!欢迎大家讨论

  • 荧光分析法

    荧光分析法一、概述 1.定义: 化学发光 原子荧光(x-荧光),测痕量元素 光致发光 分子荧光 测痕量化合物,在常温和低温下测定 2.特点 (1)灵敏度很高:一般10-9~10-12g/ml,诱导激光10-19g/ml。 (2)线性范围宽:3~5个数量级。 (3)选择性好(比紫外好)。 (4)信息量大:F—λex, F—λem, F—λex—λem, F—△λ(λex-λem)。 (5)仪器操作简单(类似紫外)。 3.应用情况 (1)有天然荧光物质,可用直接荧光法; (2)无或弱荧光的物质可用衍生物荧光法; (3)可使荧光熄灭的物质,可用荧光熄灭法; (4)发光寿命不同的物质,可用时间分辨荧光法; (5)荧光光谱严重重叠的物质,可用同步扫描荧光法; (6)作为HPLC的常用检测器。二、荧光的产生 λex -ν 第一激发单线态最低振动能级 F(λem)基态单线态多振动能级 (1)λemλex; (2) F—λex和F—λem区别:前者可有几个峰,后者只有一个峰; (3)F—λex和A—λ曲线相似,λex可由A—λ曲线上找,用最强λmax作激发波长λex (4)选λex(max)和λem(max)作为光谱条件 定性 定量 ——最灵敏的一组波长 (5)F—λem曲线的形状与λex无关,F与λex有关。 (6)物质发光的必备条件 吸收较强:UV-Vis光 荧光效率φf0。 (7)引起荧光的分子结构因素:n—π共轭体系 刚性和平面性结构:取代基少 取代基性质 φf增大:杂原子饱和基团 φf减小:不饱和杂原子基团 :—CO—、—NO2、—COOH、重离子如—I、—Br (8)荧光测试——提高灵敏度和选择性 测无机离子(配合物) 测有机离子 三、影响F的外因 1.温度:T增高,φf下降;   2.溶剂极性强,荧光效率φf增大,一般在水或醇中测定; 3.酸度:有机酸、碱的结构与PH有关; 4.荧光熄灭(Q)剂的影响: (1)M*与Q碰撞失去振动能; (2)M与Q形成配合物; (3)M*与Q碰撞发生电荷转移,M*电荷转移,λmax改变; (4)M*与Q碰撞发生电荷转移形成Q→Q*; (5)重原子效应:M*(单线态)→M*(三线态); (6)顺磁性物质:溶解O2; (7)自熄灭现象(浓度比较高:1g/L); (8)其它分子强烈吸收λex; 5.表面活性剂影响,形成胶束使M*固定,分散于其中。φf 增大→胶束荧光分析; 6.散射光: 瑞利光:λem=λex; 拉曼光:λemλex,干扰荧光。 溶剂分子或荧光分子吸收了光子的部分能量(分子振动能),光子能量下降,λem↑    Eex-Eem=△E振动(与分子性质有关) 溶剂的拉曼光:1/λex-1/λem=10-7ū(cm-1) 1/λem=0.9975×(1/λex)-3.350×10-4,ū水=3350cm-1(r=0.9999992)。 消除拉曼光干扰的方法: (1)选择合适的λex,使λRm和λem不重叠; (2)从样品F值中减去空白的拉曼光(F0); (3)改换溶剂。四、F—C关系:一定的λex和λem下,F=K‘×φf×(I0-I) K’为仪器参数;A0.05时,F=2.303 K‘×φf×I0,测定相对误差6%。F决定 内因:φf、E外因:K‘、I0是荧光法比uv法更灵敏的原因A=KC=-lg(I/I0)五、定量分析方法:测荧光时使用一个池。F=KC: 作灵敏度校正空白荧光1.标准曲线法(1)性质稳定的基准物 标准物 校正仪器灵敏度 100被测物 50(2)空白荧光的扣除: 将空白调到F0=0,再测样品F;测空白的F00,再测样品F,F-F0=KC对照品和样品的空白不同,同时测Fs0、Fx0作对比,Fx-Fx0=KCx Fs-Fs0=KCs。(3)标准曲线:F-F0=KC(r0.999) 2.比例法 一般公式:(Fx-F0)/(Fs-F0)=Cx/Cs 特殊情况: Fx/Fs=Cx/Cs F0=∑Fx0 Fs0 (Fx-F0)/(Fs-F0)=Cx/Cs

  • 普析原子荧光灯突然熄灭后无法点亮

    如题,昨天用普析原子荧光测汞。开始时,灯可以正常点亮,测载流空白一切正常,未发现问题。测试标曲时,灯突然熄灭,无法再次点亮。尝试过更换其他灯都点不亮。新人求助

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