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酸蛋白分析仪

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  • 蛋白质氨基酸残基组成分析以及蛋白预测软件

    http://img.dxycdn.com/trademd/upload/asset/meeting/2013/09/06/A1378379551.jpg 氨基酸是蛋白质的基础组成单位,通过研究蛋白质中氨基酸的性质和组成来预测蛋白质的结构和功能,蛋白质氨基酸残基组成分析主要是通过氨基酸分析仪来完成的,本文推荐了2个基于氨基酸组成进行蛋白质预测软件。基于氨基酸组成的蛋白质预测软件根据组成蛋白质的20种氨基酸的物理和化学性质可以辨析电泳等实验中的未知蛋白质,也可以分析已知蛋白质的物化性质。ExPASy工具包包涵的程序:AACompIdent:与把氨基酸序列在SWISS-PROT库中搜索不同,AACompIdent工具利用未知蛋白的氨基酸组成去确认具有相同组成的已知蛋白。该程序分析时需提交的相关信息包括:蛋白质的氨基酸组成、等电点pI和分子量(如果知道)、正确的物种分类及特别的关键词。此外,用户还需在六种氨基酸“组合”中作出选择,这影响到分析如何进行。例如,某种“组合”会把残基Asp/Asn(D/N)和Gln/Glu(Q/E)组合成 Asx(B)和Glx(Z);或者某种残基会在分析中被完全除去。对数据库中的每一个蛋白序列,算法会对其氨基酸组成与所查询的氨基酸组成的差异打分。由电子邮件返回的结果被组织成三级列表:第一张列表中的蛋白都基于特定的物种分类而不考虑pI和分子量;第二张列表包含了不考虑物种分类、pI和分子量的全体蛋白;第三张列表中的蛋白不但基于特定物种分类,并且将 pI和分子量也考虑在内。虽然计算所得结果各不相同,但零分表明了该序列与提出的组成完全相符。AACompSim:AACompIdent的一个变种,AACompSim提供类似的分析,但与前者以实验所得的氨基酸组成为依据进行搜索不同,后者使用SWISS-PROT中的序列为依据。有报道称,氨基酸组成在物种之间是十分保守的(Cordwell等,1995),并且通过分析氨基酸的组成,研究者能从低于25%序列相似性的蛋白之间发现弱相似性(Hobohm和Sander,1995)。因此,在“传统的”数据库搜索基础上辅以组成分析,能为蛋白质之间关系提供更多见解。PROSEARCH:PROPSEARCH也提供基于氨基酸组成的蛋白质辨识功能。用144种不同的物化性质来分析蛋白质,包括分子量、巨大残基的含量、平均疏水性、平均电荷等,把查询序列的这些属性构成的“查询向量”与SWISS-PROT和PIR中预先计算好的各个已知蛋白质的属性向量进行比较。这个工具能有效的发现同一蛋白质家族的成员。可以通过Web使用这个工具,用户只需输入查询序列本身。分子量搜索(MOWSE)分子量搜索(MolecularWeightSearch,MOWSE)算法利用了通过质谱(MS)技术获得的信息。利用完整蛋白质的分子量及其被特定蛋白酶消化后产物的分子量,一种未知蛋白质能被准确无误地确认,给出由若干实验才能决定的结果。由于未知蛋白无需再全部或部分测序,这一方法显著地减少了实验时间。MOWSE的输入是一个纯文本文件,包含一张实验测定的肽段列表,分子量范围在0.7到4.0Kda之间。计算过程基于在OWL非冗余蛋白质序列库中包含的信息。打分基于在一定分子量范围内蛋白中一个片段分子量出现的次数。输出的结果是得分最佳的30个蛋白的列表,包括它们在OWL中的条目名称、相符肽段序列、和其它统计信息。模拟研究得出在使用5个或更少输入肽段分子量时,准确率为99%。该搜索服务可通过向mowse@daresburg.ac.uk发送电子邮件实现。为获得更多关于查询格式的细节信息,可以相该地址发送电子邮件,并在消息正文中写上“help”这个词。蛋白质氨基酸组成分析用盐酸在110 ℃将蛋白或多肽水解成游离的氨基酸,用氨基酸分析仪测定各氨基酸的含量。采用经典的阳离子交换色谱分离、茚三酮柱后衍生法,对蛋白质水解液及各种游离氨基酸的组分含量进行分析。仪器基本结构同普通HPLC相似,但针对氨基酸分析进行了细节优化(例如氮气保护、惰性管路、在线脱气、洗脱梯度及柱温梯度控制等等)通常细分为两种系统:蛋白水解分析系统(钠盐系统)和游离氨基酸分析系统(锂盐系统),利用不同浓度和pH值的柠檬酸钠或柠檬酸锂进行梯度洗脱。其中钠盐系统一次最多分析约25种氨基酸,速度较快,基线平直度好;锂盐系统一次最多分析约50种氨基酸,速度较慢,基线一般不如钠盐系统好。分析效果:从目前已知的氨基酸分析方法比较来看,除灵敏度(即最低检测限)比HPLC柱前衍生方法稍低以外(HPLC:0.5 pmol;氨基酸分析仪:10 pmol),其他如分离度、重现性、操作简便性、运行成本等方面,都优于其他分析方法。蛋白质氨基酸残基组成分析的主要步骤包括:首先是蛋白被水解为氨基酸,其次是采用离子色谱等方法进行游离的氨基酸含量和组成的分析。总之利用蛋白可以分析氨基酸,利用氨基酸也可以研究蛋白质。

  • 牛奶蛋白质分析仪可以用于检测乳蛋白制品嘛

    牛奶蛋白质分析仪可以用于检测乳蛋白制品。以下是详细解释和相关信息:  功能与应用:牛奶蛋白质分析仪是一种专门用于分析牛奶及其制品中蛋白质含量的仪器。它基于先进的生化分析技术,如比色法、光谱法或电化学法等,能够准确、快速地检测样品中的蛋白质含量。  乳蛋白制品的检测:乳蛋白制品,如奶粉、酸奶、奶酪等,其蛋白质含量是产品质量和营养价值的重要指标。牛奶蛋白质分析仪可以有效地检测这些乳蛋白制品中的蛋白质含量,为生产厂家提供准确的质量控制手段。  优点与特点:  准确性高:牛奶蛋白质分析仪具有高灵敏度和高准确性,能够确保测量结果的可靠性。  快速便捷:该仪器操作简单,使用方便,可以快速得出测量结果,提高检测效率。  适用范围广:除了牛奶及其制品外,还可以用于其他含蛋白质样品的检测,如豆类制品、肉制品等。  在乳品工业中的重要性:随着乳品市场的不断扩大和消费者对乳制品质量要求的提高,牛奶蛋白质分析仪在乳品工业中的重要性日益凸显。它可以帮助乳品企业提高产品质量、降低生产成本,同时为消费者提供更加安全、健康的乳制品。  综上所述,牛奶蛋白质分析仪是一种功能强大、应用广泛的检测仪器,完全可以用于检测乳蛋白制品中的蛋白质含量。[img=,690,690]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2024/05/202405271615421543_8284_6238082_3.jpg!w690x690.jpg[/img]

  • 【资料】通过氨基酸分析仪实现对蛋白的鉴定

    把蛋白完全水解成氨基酸,可以在pmol到nmol水平上分离和定量。虽然氨基酸的序列信息已经无法得到,但是组成蛋白的氨基酸种类及含量信息可以得到,利用氨基酸的指纹信息可以鉴定蛋白。

  • 氨基酸分析仪和蛋白质测序仪的区别以及价格

    大家好,氨基酸分析仪与蛋白质测序仪有主要区别在什么地方呢?目前实验室需要进行氨基酸的测序分析,究竟买一台蛋白质测序仪好呢,还是氨基酸分析仪好呢?价格大概有多少呢?这些仪器有没有国产的呢 QQ:2392795357

  • 【原创大赛】维纶基牛奶蛋白纤维和维纶基大豆蛋白纤维定性分析的研究

    维纶基牛奶蛋白纤维和维纶基大豆蛋白纤维定性分析的研究维纶基大豆蛋白纤维是迄今为止我国获得的唯一完全知识产权的纤维发明,在纺织行业得到了快递的发展,广泛的应用,但与维纶基大豆蛋白纤维一样由我国企业自主研发的维纶基牛奶蛋白纤维也申请到专利好几年了,但迟迟没有相关标准的出台,使这一我国自主研发的新型纤维得不到有效利用新型纤维的不断推出,为我们提供了更多的纤维原料,但同时由于国家标准的相对滞后,给检测工作者带来了很大的难题,下面就目前市场上两种新型蛋白复合纤维给予试验,进行定性分析。主要原理是在观察了维纶基牛奶蛋白纤维与维纶基大豆蛋白纤维显微结构和燃烧性状后,研究两者在常用化学试剂中的溶解性。试验结果表明,维纶基牛奶蛋白纤维与维纶基大豆蛋白纤维在88%甲酸和浓硝酸中都能够部分溶解;在沸腾水浴中,维纶基牛奶蛋白纤维与维纶基大豆蛋白纤维能够完全溶解于75%硫酸和98%硫酸牛奶蛋白纤维是再生蛋白质纤维,是以牛奶为原料经脱水、脱脂、分离、纯化、浓缩制成牛奶酪蛋白,与高分子化合物共混、共聚制成纺丝液,再经湿法纺丝而成;牛奶酪蛋白与聚乙烯醇制得的纤维称为维纶基牛奶蛋白纤维;牛奶酪蛋白与纤维素共聚制得粘胶基牛奶蛋白纤维。牛奶蛋白纤维含有多种氨基酸,具有良好的亲肤性和吸湿导湿性,抗菌防蛀,服用性强,受到消费者的青睐。维纶基牛奶蛋白纤维呈浅黄色,是由牛奶酪蛋白和聚乙烯醇大分子共混、共聚、醛化、揉和、脱泡,湿法纺成的纤维,克服了合成纤维吸湿性差和天然纤维强度低的不足,其比电阻介于天然纤维和合成纤维之间,吸湿性也优于聚乙烯醇纤维,在直接染料、弱酸性染料、活性染料和中性染料中都有良好的上染能力。本文在观察维纶基牛奶蛋白纤维和维纶基大豆蛋白纤维显微结构和燃烧性状后,研究两者在常用化学试剂中的溶解性,为纤维检测提供参数。大豆蛋白纤维属于再生植物蛋白纤维类,是以榨过油的大豆豆粕为原料,利用生物工程技术,提取出豆粕中的球蛋白,通过添加功能性助剂,与腈基、羟基等高聚物接枝、共聚、共混,制成一定浓度的蛋白质纺丝液,改变蛋白质空间结构,经湿法纺丝而成. 其有着羊绒般的柔软手感,蚕丝般的柔和光泽,棉的保暖性和良好的亲肤性等优良性能,还有明显的抑菌功能,被誉为“新世纪的健康舒适纤维”。大豆纤维是以脱去油脂的大豆豆粕作原料,提取植物球蛋白经合成后制成的新型再生植物蛋白纤维,是由我国纺织科技工作者自主开发,并在国际上率先实现了工业化生产的高新技术,也是迄今为止我国获得的唯一完全知识产权的纤维发明。1 试验1. 1试验材料、仪器和试剂纤维细度成分显微分析仪,万分之一电子天平;SHA-C水浴振荡器;鼓风恒温烘箱; 索氏萃取器;酒精灯;具塞三角瓶若干。甲酸(88%);硫酸(75%);浓硫酸(98%);浓硝酸;1MOL/L次氯酸钠溶液;石油醚(馏程为40℃~60℃)。1.2试验方法显微结构试验:用纤维细度成分显微分析仪观察纤维的显微结构。 以下试验维纶基牛奶蛋白纤维与维纶基大豆蛋白纤维同一方法分别做一次燃烧性状试验:点燃酒精灯,用镊子夹取10mg左右纤维束,徐徐靠近火焰,观察试样对热的反应情况。将纤维移入火焰,观察纤维的燃烧情况;然后离开火焰,观察纤维的燃烧情况,并用鼻子闻试样燃烧刚熄灭的气味。最后,待试样熄灭冷却,观察残留物灰分的状态。预处理:取纤维5g左右,用定量滤纸包好,置于索氏萃取器中,用石油醚萃取1h,每小时至少循环6次,待试样中的石油醚挥发后,把试样浸入冷水中浸泡1h,再在(65±5)℃的水中浸泡1h,浸泡过程中时时搅拌。水(mL)与试样(g)之比为100:1。然后抽吸脱水,晾干。溶解性试验:准确称取试样1g置于具塞三角瓶中,加入100mL化学试剂,在搅拌条件下观察不同温度下纤维和试剂随时间的变化情况。待一定时间后,洗涤,抽吸排液,烘干。2 试验结果2.1显微结构在显微镜下观察维纶基牛奶蛋白纤维与维纶基大豆蛋白纤维的横截面呈腰圆形或哑铃形,纵向有沟槽,两种纤维在显微镜下几乎无差别,无法区分这两种纤维。2.2燃烧性状维纶基牛奶蛋白纤维与维纶基大豆蛋白纤维靠近火焰时现象都是熔融并卷曲;进入火焰,熔融、卷曲并燃烧;离开火焰,燃烧,有时会自然熄灭。燃烧过程中散发出蛋白质燃烧时所特有的臭味。纤维燃烧的一端形成黑褐色硬块。两种纤维在燃烧情况下,火焰颜色,气味几乎无差别,无法区分这两种纤维。2.3溶解性取维纶基牛奶蛋白纤维与和维纶基大豆蛋白纤维分别置于88%甲酸、75%硫酸、浓硫酸、浓硝酸和1MOL/L次氯酸钠溶液中进行溶解性试验, 品名/溶液88%甲酸[/ali

  • 天研|牛奶蛋白质分析仪的原理是什么

    牛奶蛋白质分析仪的原理主要基于光学测量技术,特别是光谱分析法。具体地说,它采用红外光谱法来测量牛奶中乳清蛋白和酪蛋白的含量。首先,将牛奶样品制成透明薄片,然后使用近红外光电传感器和光源对其进行扫描。牛奶中的蛋白质对特定波长的红外光有特定的吸收特性,通过测量这些吸收特性,可以分析出牛奶中蛋白质的种类和含量。此外,仪器会将牛奶光谱与事先建立的标准光谱进行比较,通过复杂的算法处理,从而得出各种蛋白质形态的含量。这种比较和计算过程确保了测量结果的准确性和可靠性。总的来说,牛奶蛋白质分析仪通过光学测量和光谱分析技术,能够快速、准确地测定牛奶中蛋白质的含量和种类,为乳制品生产、质量控制和科学研究提供了有力的支持。[img=,690,690]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2024/04/202404291701212298_2595_6238082_3.jpg!w690x690.jpg[/img]

  • 立即报名!基于液相色谱法的糖化血红蛋白分析仪的应用的技术讲座!

    立即报名!基于液相色谱法的糖化血红蛋白分析仪的应用的技术讲座!

    糖尿病是一种慢性病,随着经济生活水平的提高和社会老龄化的加剧,近年来患者人数在全球包括中国逐年递增,目前已严重威胁到国民的健康。对糖尿病的监测也越来越受到国家和人们的重视。作为全球公认的糖尿病检测"金标准",糖化血红蛋白(HbA1c)能够稳定可靠地反映出受检人在检测前90天到120天内的平均血糖水平,不受抽检时间、空腹与否或胰岛素等因素的干扰,经过国际临床化学和实验室医学联盟(IFCC)的技术验证和推广使用,使得糖化血红蛋白检测已成为诊断糖尿病的一种趋势。我们国家也参考国际公认的HPLC-LC-MS/MS方法,已经基本建立了自己的糖化血红蛋白检测一级参考体系。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/10/201510221629_570638_1587_3.jpg糖尿病检测方法以及主流仪器分析使用最先进的流体技术和产品,为您打造最优秀的HbA1c分析仪项目难度以及如何解决各类流路问题糖化血红蛋白(HbA1c)分析仪市场情况以及前景分析立即报名参与讲座:http://www.instrument.com.cn/webinar/meeting/meetingInsidePage/1689

  • 【转帖】蛋白分析系统

    蛋白分析系统在我们选择蛋白分析工具的时候,通常是根据不同的蛋白来选择不同的分析手段,如凝胶电泳、化学荧光染色、质谱等等。但是目前已经研制出的蛋白分析工具的种类繁多,从这一方面也在一定程度上反映了蛋白分析的复杂性。以下是一些近期推出的蛋白分析系统,希望能帮助您轻松完成研究工作。

  • 【求助】新手请教氨基酸分析仪的几个疑问

    最近刚接手日立的氨基酸分析仪,有几个疑问,向大家请教一下1.水解蛋白分析方法的前处理中,水解过程中大家是按照仪器说明书中的方法做的吗,我以前没用过水解管,是不是一定要充氮,水解管的封口是怎么处理的?2.水解蛋白分析方法和生理体液方法的针对的样品区别究竟在哪里,前者除了测蛋白水解后得到的氨基酸,还有其他的可以测吗,说明书上说前者还可以测加入了氨基酸的化学液体,这个究竟包括哪些样品呢

  • 【原创大赛】维纶基牛奶蛋白纤维和维纶基大豆蛋白纤维定性分析的方法研究

    【原创大赛】维纶基牛奶蛋白纤维和维纶基大豆蛋白纤维定性分析的方法研究

    维纶基牛奶蛋白纤维和维纶基大豆蛋白纤维定性分析的方法研究 维纶基牛奶蛋白纤维与维纶基大豆蛋白纤维都是由聚乙烯醇和蛋白共混制得,所以化学性质及其相似,一直以来由于维纶基牛奶蛋白纤维没有相关的检测方法,检测机构对维纶基牛奶蛋白纤维出具的检测报告都是维纶基大豆蛋白纤维 维纶基大豆蛋白纤维的成分定量分析方法是先用次氯酸钠溶液溶解掉蛋白质,然后用盐酸溶解聚乙烯醇,同样维纶基牛奶蛋白纤维也是可以用这种方法进行溶解,下面看看常规的检测方法能不能分析出这两种纤维1.维纶基牛奶蛋白纤维与维纶基大豆蛋白纤维,其纤维成分定性的基本方法:①.显微镜法: 在显微镜下观察维纶基牛奶蛋白纤维与维纶基大豆蛋白纤维的横截面呈腰圆形或哑铃形,纵向有沟槽;②.燃烧: 维纶基牛奶蛋白纤维与维纶基大豆蛋白纤维靠近火焰时现象都是熔融并卷曲;进入火焰,熔融、卷曲并燃烧;离开火焰,燃烧,有时会自然熄灭。燃烧过程中散发出蛋白质燃烧时所特有的臭味;③.溶解法:共同的维纶基,加上都是蛋白质,化学性质非常接近,在75%硫酸、浓硫酸、浓硝酸和0.1MOL/L次氯酸钠溶液中,溶解现象和状态都是一样的,都无法将两者定性2.个人通过研究和分析认为,只有通过两者氨基酸的组分不同进行定性,从而确定纤维牛奶中氨基酸的组成表”取自《乳与乳制品的生理功能特征》一书。“大豆蛋白质的氨基酸组成表”取自《大豆制品工艺学》一书。大豆蛋白质的氨基酸组成可以参考“全酸沉淀蛋白”的氨基酸组成,做为比较的依据。因为大豆蛋白纤维使用的是大豆分离蛋白,即是酸沉蛋白。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2013/09/201309121130_463904_2154459_3.jpghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2013/09/201309121130_463905_2154459_3.jpghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2013/09/201309121130_463907_2154459_3.jpg3.维纶基牛奶蛋白纤维与维纶基大豆蛋白纤维的通过测其氨基酸的组成不同,可以定性出大豆蛋白与牛奶蛋白,如果是大豆蛋白复合纤维,然后用GB/T2910.101-2009大豆蛋白复合纤维和其他纤维的混合物-定量化学分析进行测试。完全溶解,则为维纶基大豆蛋白纤维,如果是维纶基牛奶蛋白纤维,也可以用此方法进行定量法定性,相关详细步鄹如下:3.1 试验3.1.1试验材料、仪器和试剂万分之一电子天平;SHA-B水浴振荡器;鼓风恒温烘箱;索氏萃取器,离心机,具塞三角瓶,1MOL/L次氯酸钠溶液,氢氧化钠,20%盐酸溶液等3.1.2目前行业内认为定性牛奶蛋白纤维的最好方法:牛奶蛋白纤维在2.5%NaOH 溶液下,100℃恒温加热30分钟,即可出现牛奶蛋白特有的现象。状态:在整个溶解的过程下,纤维体积膨胀渐呈冻胶状,颜色会从本色逐渐变成深红色,然后再有深红色褪色至浅黄色。此方法经试验,并不是所有的牛奶蛋白复合纤维都出现此特有现象,有时不是很明显,只能作为判断的一种辅助方法,不能作为定性的标准方法。3.1.3在显微镜下观察牛奶蛋白复合纤维或大豆蛋白复合纤维,能确定是其中的一种,然后用1MOL/L次氯酸钠溶液,常温下振荡溶解30分钟,此时,蛋白全部溶解,剩余纤维抽滤,冲洗干净,取少量纤维在显微镜下查看,初步判定为聚乙烯醇,然后燃烧,根据味道和燃烧现象,确定其为维纶基蛋白纤维3.2需要确定蛋白质纤维为何种纤维,经初步试验分析,常规方法无法准确定性,下面是维纶基牛奶纤维的专利拥有者在相关国家检测机构取得的检测报告http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2013/09/201309121131_463909_2154459_3.jpg以上报告可能确定是维纶和牛奶蛋白复合,但其报告检测依据个人不是特别认同,也咨询过相关人员,没有给予明确答复,检测的具体方法没有明确,国家并没有发布相关的检测标准,不能作为判断纤维的依据,所以目前情况下仍然不能使该纤维大面积推广使用。3.3个人认为,只有通过两者氨基酸的组分不同进

  • 【求助】氨基酸自动分析仪

    大家好! 我是一名新手,有很多地方都不懂.我使用的biochrom30型氨基酸自动分析仪最近测定的谷物氨基酸含量都很高,甚至比凯氏定氮测出的粗蛋白含量还高.我一直查不出是什么原因.请大家帮帮我! 还有前处理中,封管抽真空时,会有很多泡沫一直向上跑,该怎么办? 谢谢大家!

  • 【分享】生物质谱在糖蛋白结构分析中的应用

    【分享】生物质谱在糖蛋白结构分析中的应用

    生物质谱在糖蛋白结构分析中的应用项目完成人:桑志红 蔡 耘项目完成单位:国家生物医学分析中心 随着人们对糖蛋白参与生命活动机理的日益深入了解,对天然糖蛋白及重组糖蛋白类药物的分析越来越受到重视。重组糖蛋白类药物的质量控制更是直接关系到药物的疗效及至人类的健康。九十年代以来,随着带有反射功能的基质辅助激光解吸附电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)和纳升电喷雾串联质谱(nano-ESI-Q-TOF)等具有软电离方式的现代质谱 技术的发展,质谱以其高灵敏度和强有力的分析混合物的能力,提供了生物大分子的分子量、序列、一级结构信息以及结构转换、修饰等方面的信息,使糖基化分析有了重要的进展。 通常研究糖蛋白的方法是把蛋白链上的寡糖切下来,分别研究蛋白部分和寡糖部分的结构,因此无法研究与两部分共同相关的结构问题,也不能区分不同糖基化位点上切下来的寡糖。自90年代初,国外有人开始用质谱法研究糖蛋白的结构,同时描述了各个位点的不均一性。我们用建立的现代生物质谱技术研究糖蛋白一级结构的方法,将其应用与基因重组糖蛋白的结构分析。为糖蛋白结构分析及基因重组糖蛋白类药物的质量控制提供新的手段。一、 生物质谱研究糖蛋白结构方法的建立实验所用仪器为:1.德国BRUKER 公司的REFLEXIII型基质辅助激光解吸附电离飞行时间质谱仪,N2激光器,波长337nm,线性飞行距离150cm,加速电压2kv。2.英国Micromass 公司Q-TOF型电喷雾串联质谱仪。源温80°C,气体流速40L/h,枪头电压650V,检测频率2.4S,氩气碰撞池压力6*10-5mbar。1. 基质的选择,在MALDI-TOF-MS分析中,基质起着相当重要的作用。不同的基质对不同类的物质响应不同,a-氰基-4-羟基肉桂酸用于测定糖蛋白核糖核酸酶B效果相对较好。2. 糖蛋白分子量的测定,糖蛋白核糖核酸酶B由124个氨基酸组成,在34位Asn处连有一个高甘露糖型N-糖链。由于糖链的微不均一性,与普通蛋白质及核酸不同,其分子离子峰在MALDI-TOF-MS 质谱图上表现为一簇峰,各峰之间约相差一个糖基。正是由于这种微不均一性,使得其分子离子峰变宽,灵敏度降低。糖链分子量越大,峰越宽,灵敏度越低,所以一般只有糖链较短,蛋白的质量不太大的糖蛋白才能测定其平均分子量。用MALDI-TOF可直接测定糖蛋白核糖核酸酶B的平均分子量为 15208.6Da。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/03/201103211511_284179_1604317_3.jpg3. 糖含量的测定,采用O聚糖酶及内糖苷键酶F分别作用于核糖核酸酶 B,只有内糖苷键酶F能够是其分子量发生变化,表明核糖核酸酶B分子中不存在O-连接糖链存在着N-连接糖链。内糖苷键酶F切断N-糖链五糖核心最内侧的GlcNAc-GlcNAc糖苷键,得到含一个GlcNAc的肽链,减去GlcNAc,可以计算出准确的肽链分子量T=13695.6,与糖蛋白平均分子量之差为糖链的平均分子量G=1513.4,平均糖含量为:(糖链大小/糖蛋白分子量)×100%=9.95%。4. 糖基化位点的确定,研究糖基化类型及糖基化位点的策略:采用蛋白酶酶解与糖苷内切酶酶解相结合的方法,通过酶切前后含糖肽片的位移,结合网上数据库检索,可以确定糖基化类型和糖基化位点。以不同类型的糖苷内切酶作用于糖蛋白(N-糖苷键酶或O-糖苷键酶),在MALDITOF-MS 上观察其质量的变化,可以直接确定糖蛋白中是否含有响应类型的糖链,这是我们确定糖蛋白中糖苷键类型的基础。我们采用先将核糖核酸酶B还原烷基化,加Glu-C酶切,产物再用内糖苷肩酶F酶切,可观察到含糖肽段出现位移,将核糖核酸酶B的肽质量指纹图进行数据库检索,证实发生位移的肽段中含有N-糖链特异连接位点,由此确定34位Asn为糖基化位点。另外我们采用内糖苷键酶F及肽-N-聚糖酶F两种酶进行差位酶切法对含糖肽段进行验证,两种酶酶切后分子离子峰的差值除以GlcNAc的质量,结果就是N-糖基化位点的个数5. 质谱测定氨基酸序列, 我们对核糖核酸酶B肽质量指纹谱中的含糖肽段进行了串联质谱测定,首先在一级质谱图中选择离子4972.23,在串联质谱的碰撞活化室以氩气与其碰撞产生碎片,从碎片的质荷比推算出此肽片中的一段氨基酸序列,检索结果为核糖核酸酶B,从而判断其理论序列是否一致。6. 糖链结构的研究,凝集素对糖肽的亲和提取,进一步分析糖肽序列及糖链结构的关键是含糖肽段的提取。核糖核酸酶B中糖链为高甘露糖型,我们选用对其有特异性吸附的伴刀豆球蛋白对其进行提取利用这种简捷的亲和质谱的方法,对糖肽段进行了分析。建立了亲和质谱分析糖肽类物质的方法,为今后糖肽序列分析及糖链结构分析奠定了基础。二、基因重组糖蛋白人促红细胞生成素(rhEPO)的结构分析。 利用以上建立的方法,我们对样品重组人促红细胞生成素进行了分析,断定此样品为非完全糖基化,样品中只存在N-连接的糖链,无O-糖链。应用酶切法用肽-N-聚糖酶处理后,得到两个含糖肽段,进行数据库检索,测得38位及83位为N-糖基化位点,与文献报道相符,结果可靠。因此,该项课

  • 酸性蛋白CIEF分析

    最近在做几个酸性蛋白的CIEF。贝克曼的方法比较适用于中性和偏碱性的蛋白分析,对于酸性蛋白分析效果不太理想。氨水迁移法比较适合酸性蛋白,但是据说很伤柱子,做不了几个样品。讨论一下,有没有人遇到同样的问题,是怎么优化方法的呢?我尝试调整占位剂的配比,暂时也没有得到理想的结果。

  • 请教如何定性定量分析角蛋白材料

    请教如何定性定量分析角蛋白材料

    请教一下该图为一角蛋白材料,请问能分析出有哪些氨基酸成分吗?根据文献内应含约17种,请问应如何分析?能否定量测出各种氨基酸含量?http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/10/201210230158_398636_2032315_3.jpg

  • 【资料】不同氨基酸自动分析仪氨基酸分析结果之比较

    近几年来由于饲料工业迅猛发展,对饲料产品的品质控制已经从常规的营养分析转到了微量分析,对饲料品质的评价已经从粗蛋白含量的高低,改为观测各种氨基酸含量是否符合要求,所以准确测定氨基酸含量就成了关键一环。本实验验证不同品牌的氨基酸分析仪在不同的实验室测定氨基酸含量是否有差别。

  • 蛋白酶分析方法

    各位大侠:最近在做蛋白酶(5w分子量)检测,用的是大粒径(300A)的C4和C18,流动性换过三氟乙酸、甲酸和磷酸都不行,蛋白酶都出在死时间啊!!!愁死人了,谢谢各位高手指导。

  • 氨基酸自动分析仪的检测限一般可以达到多少?

    我有一批水稻伤流液样品需要测定其中的17种酸水解蛋白氨基酸,根据文献记载其含量范围应该在几十个PPM以上,不知用氨基酸自动分析仪可以保证质量地测出吗?谢谢各位老师的帮助了![em01] [em01] [em61]

  • 【天研】牛奶蛋白质分析仪在乳制品生产线上有哪些应用

    牛奶蛋白质分析仪是一种专业的检测设备,主要用于对牛奶中的蛋白质进行快速、准确地分析。该仪器在乳制品行业中发挥着重要的作用,能够帮助消费者了解牛奶的质量和营养成分,同时也能为乳制品生产企业提供科学的指导,优化生产工艺,提高产品质量。  牛奶蛋白质分析仪的工作原理主要基于光谱分析技术,通过测量牛奶中蛋白质对特定波长光线的吸收来计算蛋白质的含量。该仪器具有操作简便、快速、准确等特点,可广泛应用于各类乳制品的生产、加工、质检等领域。  具体来说,牛奶蛋白质分析仪在乳制品生产线上具有以下应用:  原料奶检测:确保原料乳的质量符合生产要求,通过快速检测原料奶中蛋白质的含量,确保生产过程中的原料质量稳定。  加工过程控制:实时监测加工过程中蛋白质的变化情况,指导生产商及时调整工艺参数,确保产品品质。  产品质量检验:质检部门和乳制品企业可以利用牛奶蛋白质分析仪对市场上的乳制品进行抽检,判断其蛋白质含量是否符合国家标准。这有助于打击假冒伪劣产品,保障消费者的合法权益。  此外,牛奶蛋白质分析仪还可以检测牛奶中的其他营养成分,如脂肪、糖等,从而全面评估牛奶的营养价值。通过使用这种仪器,乳制品企业可以及时发现并解决生产过程中的问题,提高产品的竞争力,并保障食品安全。  总之,牛奶蛋白质分析仪是乳制品行业中不可或缺的重要检测工具,其在保障产品质量和消费者健康方面发挥着重要作用。如需更多信息,可以访问牛奶蛋白质分析仪生产厂商官网或咨询乳制品行业专家。[img=,690,690]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2024/04/202404291700285525_1260_6238082_3.jpg!w690x690.jpg[/img]

  • EGFP蛋白全称、大小、序列分析

    [b][font=宋体][font=宋体]一、[/font][font=Calibri]EGFP[/font][font=宋体]蛋白全称[/font][/font][/b][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]EGFP[/font][font=宋体],全称为增强型绿色荧光蛋白([/font][font=Calibri]Enhanced Green Fluorescent Protein[/font][font=宋体]),是一种在生物科学研究中广泛应用的荧光报告蛋白。它是由普通绿色荧光蛋白([/font][font=Calibri]GFP[/font][font=宋体])进行突变和优化得到的,相较于原始的[/font][font=Calibri]GFP[/font][font=宋体],[/font][font=Calibri]EGFP[/font][font=宋体]具有更高的荧光亮度和更稳定的性质。[/font][/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体][font=宋体]二、[/font][font=Calibri]EGFP[/font][font=宋体]蛋白大小[/font][/font][/b][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]EGFP[/font][font=宋体]蛋白的大小为[/font][font=Calibri]238[/font][font=宋体]个氨基酸,分子量约为[/font][font=Calibri]27kDa[/font][font=宋体]。这个分子量相对较小,使其在融合蛋白、抗体标记等生物分子标记领域中具有广泛的应用价值。同时,[/font][font=Calibri]EGFP[/font][font=宋体]的相对分子量较小也意味着它对其他蛋白质的负担较小,这有助于保持标记蛋白质的天然状态和功能。[/font][/font][b][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]三、[/font][font=Calibri]EGFP[/font][font=宋体]蛋白序列[/font][/font][/b][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]以下是[/font][font=Calibri]EGFP[/font][font=宋体]蛋白的氨基酸序列:[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]MVHHIQGGGPGMPMPGEEMMMAAN[/font][font=宋体]稚[/font][font=Calibri]TSGSHMVHHIQGGGPGMPMPGEEMMMAAN[/font][font=宋体]稚[/font][font=Calibri]TSGSHMVHHIQGGGPGMPMPGEEMMMAAN[/font][font=宋体]稚[/font][font=Calibri]TSGSHMVHHIQGGGPGMPMPGEEMMMAAN[/font][font=宋体]稚[/font][font=Calibri]TSGSHMEEEEDVMKDVEEETPIPELMLLDMAAQDPIPELMLLDMAAQDPIPELMLLDMAAQDPIPELMLLDMAAQDPIPELMLLDMAAQDP[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]通过分析[/font][font=Calibri]EGFP[/font][font=宋体]的氨基酸序列,我们可以发现其中包含一些重要的结构域和功能位点。例如,在[/font][font=Calibri]EGFP[/font][font=宋体]的氨基端,有一个由数个甘氨酸和丝氨酸组成的“环状结构”,这个结构对于荧光发射起着关键作用。在羧基端,我们还可以看到一个“多肽区”,这个区域对于荧光亮度和稳定性也有重要影响。此外,在[/font][font=Calibri]EGFP[/font][font=宋体]的氨基酸序列中还包含多个突变位点,这些位点使得[/font][font=Calibri]EGFP[/font][font=宋体]相较于原始的[/font][font=Calibri]GFP[/font][font=宋体]具有更高的荧光亮度和更稳定的性质。[/font][/font][b][font=宋体] [/font][font=宋体]四、总结[/font][/b][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]EGFP[/font][font=宋体]是一种重要的荧光报告蛋白,通过对其全称、大小和序列的深入了解,我们可以更好地理解其性质和应用。在实际的生物科学研究中,[/font][font=Calibri]EGFP[/font][font=宋体]已被广泛应用于细胞生物学、分子生物学、生物医学等多个领域,为科研工作者提供了强有力的工具,有助于推动生命科学研究的进步。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]更多[url=https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review/protein-tag][b]蛋白标签[/b][/url]详情可以查看义翘神州网:[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review/protein-tag[/font][/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体][font=宋体]义翘神州:蛋白与抗体的专业引领者,欢迎通过百度搜索[/font][font=宋体]“义翘神州”与我们取得联系。[/font][/font][/b][font=Calibri] [/font]

  • 氨基酸分析仪现状之我见

    首先,我要开门见山的承认,我是某氨基酸分析仪代理公司的员工。此帖若与各位大虾的见解不同,还请指正。对论坛中有关氨基酸分析的帖子粗略浏览了一边,发现两个特点:一是到论坛中来发帖子的主要还是使用HPLC来做氨基酸分析,二是提到的专用氨基酸分析仪似乎只有“日立”。氨基酸分析无疑具有极高的价值(极端一些的说,大部分蛋白分析都是应该被氨基酸分析所取代的),同时也有相当的难度。正因为如此,国内的氨基酸分析发展才表现出一方面发展势头很好,另一方面真正把氨基酸分析工作做好的又不多。较HPLC而言,专用的氨基酸分析仪方法简单、单样成本低、干扰少、稳定性好,尽管仪器本身比HPLC要贵得多,也势必成为今后氨基酸分析的主力。有一篇帖子提到,“日立的氨基酸分析仪是世界上最好的”,真不知他/她是如何得来这个结论。没有调查就没有发言权,没有比较,如何能得出结论?做氨基酸分析的人基本都是知道日立的,因为日立做氨基酸分析仪已有几十年;然而,除了日立,他们还知道哪些氨基酸分析仪厂家呢?诸多原因导致欧美的氨基酸分析仪迟迟未能进入中国市场,而凭借日元贷款项目和援助项目的独有优势,日立在中国用户心目中已经悄然建立起“氨基酸分析仪=日立”的心里暗示。但日立的氨基酸分析仪真的这么好吗?在北京一家同时拥有四种氨基酸分析仪(现在为3种)的单位,他们对日立L-8800的看法是“一般”,“分离效果和长期稳定性不如××仪器”……我不能说以偏概全,但对比总是难能可贵。我并非要写些东西来宣传我们的产品,因为好的东西总是需要经历一段必不可少的市场认可周期,但对于从事氨基酸分析工作的广大用户,他们需要中国的氨基酸分析仪市场是一个充满竞争的市场,而不是一家独“show”的市场,只有充分的竞争才能为他们带来技术更高、性价比更优的仪器。

  • CEX分析蛋白样品

    采用CEX分析蛋白电荷异质性,与主峰的相对保留时间差十分钟左右的是酸性或碱性峰么?通常情况下是不是酸性峰中性峰碱性峰三者挨着?谢谢

  • 质谱分析的蛋白标准品

    求购 质谱分析的蛋白标准品,MALDI-TOF-MS上用的。 分子量在400--30000da 的或者接近这个质量范围的,如有请联系我。直接给我这个留言就可以,谢谢!

  • 氨基酸分析仪现状之我见

    首先,我要开门见山的承认,我是某氨基酸分析仪代理公司的员工。此帖若与各位大虾的见解不同,还请指正。 对论坛中有关氨基酸分析的帖子粗略浏览了一遍,发现两个特点:一是到论坛中来发帖子的主要还是使用HPLC来做氨基酸分析,二是提到的专用氨基酸分析仪似乎只有“日立”。 氨基酸分析无疑具有极高的价值(极端一些的说,大部分蛋白分析都是应该被氨基酸分析所取代的),同时也有相当的难度。正因为如此,国内的氨基酸分析发展才表现出一方面发展势头很好,另一方面真正把氨基酸分析工作做好的又不多。较HPLC而言,专用的氨基酸分析仪方法简单、单样成本低、干扰少、稳定性好,尽管仪器本身比HPLC要贵得多,也势必成为今后氨基酸分析的主力。 有一篇帖子提到,“日立的氨基酸分析仪是世界上最好的”,真不知他/她是如何得来这个结论。没有调查就没有发言权,没有比较,如何能得出结论?做氨基酸分析的人基本都是知道日立的,因为日立做氨基酸分析仪已有几十年;然而,除了日立,他们还知道哪些氨基酸分析仪厂家呢?诸多原因导致欧美的氨基酸分析仪迟迟未能进入中国市场,而凭借日元贷款项目和援助项目的独有优势,日立在中国用户心目中已经悄然建立起“氨基酸分析仪=日立”的心里暗示。但日立的氨基酸分析仪真的这么好吗?在北京一家同时拥有四种氨基酸分析仪(现在为3种)的单位,他们对日立L-8800的看法是“一般”,“分离效果和长期稳定性不如××仪器”……我不能说以偏概全,但对比总是难能可贵。 我并非要写些东西来宣传我们的产品,因为好的东西总是需要经历一段必不可少的市场认可周期,但对于从事氨基酸分析工作的广大用户,他们需要中国的氨基酸分析仪市场是一个充满竞争的市场,而不是一家独“show”的市场,只有充分的竞争才能为他们带来技术更高、性价比更优的仪器。

  • 换个角度再聊聊掺假实验之动物水解蛋白检验过程的注意事项

    [align=center][b][font=宋体][/font][/b][/align][align=center]换个角度再聊聊掺假实验之动物水解蛋白检验过程的注意事项[/align][align=center][/align][font=宋体]概述[/font][font=宋体]一说到蛋白质,大家总是想到三聚氰胺这个永远的痛点。那什么是[/font][font=宋体]动物水解蛋白[/font][font=宋体]呢?[/font][font=宋体]水解蛋白是一种被处理过的蛋白质,[/font][font=宋体]其目的[/font][font=宋体]是为了增加膳食补充剂的吸收率以及促进肌肉生长而被广泛使用。然而,水解蛋白的摄入对身体会产生一定的不良影响。它可能引起肠胃不适,长时间过量的摄入水解蛋白会导致肝脏和肾脏的负担加重,产生肝肾疾病的风险。此外,水解蛋白含有谷氨酸和天冬氨酸等氨基酸,如果过度摄入,会使脑内谷氨酸的含量过高,产生神经性问题。[/font][font=宋体]需要注意的是,水解蛋白虽然有一定的营养价值,但对于大部分人来说,摄入水解蛋白的必要性并不大,完全可以通过摄入其他蛋白质而满足身体所需。如果需要补充蛋白质,可以选择天然蛋白质来源,比如肉类、鱼类、豆类等食物。此外,如果您已经在使用水解蛋白补充剂,[/font][font=宋体]个人认为十分有必要。[/font][font=宋体]用硝酸汞沉淀方法除去乳酪蛋白,但水解蛋白不会被除去,并与饱和的苦味酸溶液会产生沉淀反应。[/font]这个方法我们再前期和大家讨论过了。今天在说说[font=Arial, Verdana, 微软雅黑, 宋体][size=16px][color=#323232]L-羟脯氨酸的方法.[/color][/size][/font][font=宋体][/font][b]1.测定原理[/b]试样经酸水解后,过滤,用稀盐酸溶解,注入氨基酸分析仪进行测定。采用外标法定量。[b]2 试剂与材料[/b]2.1除非另有规定,应选用优级纯试剂和符合GB/T 6682规定的一级水。2.2 盐酸7.8mol/L,将650mL优级纯的浓盐酸小心倒入350mL超纯水中,混匀。2.3 配制茚三酮显色液,方法如表1所示。2.4 配制苯酚水溶液(5.0%,w/v):称取苯酚5.0g,溶于100mL水中。2.5 配制盐酸溶液(0.1 mol/L):量取盐酸(7.8mol/L)16.6mL,倒入1000mL水中。2.6 L-羟脯氨酸标准品,纯度≥99%。2.7 配制L-羟脯氨酸标准储备液:称取100mg(精确到0.1mg)羟脯氨酸标准品,用盐酸溶液(0.1mol/L)溶解并定容至100mL容量瓶中。该溶液的浓度为1000mg/L,于4℃冰箱内贮存,有效期3个月。2.8 准备苯酚溶液。2.9 L-羟脯氨酸标准工作液:准确吸取L-羟脯氨酸标准储备液1.00mL于100mL的容量瓶内,用盐酸溶液(0.1mol/L)定容。该溶液的浓度为10.00mg/L,于4℃冰箱内贮存,有效期1周。[b]3 仪器与设备[/b]L-8900氨基酸自动分析仪、电热恒温干燥箱、配有聚四氟乙烯密封盖的水解管、电子天平(精确到0.0001g)、定量滤纸、0.45μm水性样品过滤器(直径13mm)、氮吹仪。[b]4 分析步骤4.1 样品处理[/b]称取1~2g(精确至0.001g)牛奶样品于水解管中,加8.00mL盐酸,滴入3滴苯酚溶液,用一级水补足10.00mL,充氮后封管,置于110℃烘箱中保持22~24h,冷却后经滤纸过滤。取0.400mL滤液于氮吹仪上吹干,残留物用2.00mL盐酸溶液(0.1mol/L)溶解,过0.45μm滤器,备用。同时做空白对照。[b]4.2 样品测定[/b]4.2.1 氨基酸分析仪条件①分离柱:6 0 m m×4.6 m m(i.d)不锈钢柱,交换树脂为氨基酸分析专用树脂;②柱温:反应柱57℃、分离柱135℃;③泵流速:泵10.400mL/min、泵20.350mL/min;④进样体积:20μL;⑤检测波长:440nm;⑥茚三酮显色液:可按表1配制,也可根据仪器自身要求配制;⑦流动相缓冲液:可按照表2配制,也可根据仪器自身要求配制。4.2.2 定量测定按照外标法进行定量计算。[b]5 结果计算和表述[/b]试样中L-羟脯氨酸的含量X,以质量分数mg/kg表示,单点校正按下式计算:式中:V1— 加入稀盐酸溶液定容的体积,mL;V2— 水解液的定容体积,mL;V3—水解样液的取样量,mL;AS—L—羟脯氨酸标准溶液对应的色谱峰面积响应值;A — 试样溶液对应的色谱峰面积响应值;CS— L—羟脯氨酸标准溶液的浓度,Hg/mL;m — 试样质量,g。平行测定结果用算术平均值表示,结果保留3位有效数字。[b]6 重复性[/b]在同一实验室由同一操作人员使用同一仪器完成的2个平行测定的相对偏差不大于10%。

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