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龙细胞测定仪

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龙细胞测定仪相关的论坛

  • 平板细胞克隆形成试验

    概念:细胞克隆形成率即细胞接种存活率,表示接种细胞后贴壁的细胞成活并形成克隆的数量。贴壁后的细胞不一定每个都能增殖和形成克隆,而形成克隆的细胞必为贴壁和有增殖活力的细胞。克隆形成率反映细胞群体依赖性和增殖能力两个重要性状。基本步骤:1、取对数生长期的各组细胞,分别用0.25%胰蛋白酶消化并吹打成单个细胞,并把细胞悬浮在10%胎牛血清的DMEM培养液中备用。2、将细胞悬液作梯度倍数稀释,每组细胞分别以每皿50、100、200个细胞的梯度密度分别接种含10mL 37℃预温培养液的皿中,并轻轻转动,使细胞分散均匀。置37℃ 5% CO2及饱和湿度的细胞培养箱中培养2~3周。3、经常观察,当培养皿中出现肉眼可见的克隆时,终止培养。弃去上清液,用PBS小心浸洗2次。加4%多聚甲醛固定细胞5mL固定15分钟。然后去固定液,加适量GIMSA应用染色液染10~30分钟,然后用流水缓慢洗去染色液,空气干燥。4、将平皿倒置并叠加一张带网格的透明胶片,用肉眼直接计数克隆,或在显微镜(低倍镜)计数大于10个细胞的克隆数。最后计算克隆形成率。克隆形成率 =(克隆数/接种细胞数)×100%平板克隆形成试验方法简单,适用于贴壁生长的细胞。适宜底物为玻璃的、塑料瓶皿。试验成功的关键是细胞悬液的制备和接种密度。细胞一定要分散得好,不能有细胞团,接种密度不能过大。

  • 【原创大赛】从流式细胞仪的结构浅析维修

    【原创大赛】从流式细胞仪的结构浅析维修

    DHI测定设备主要由三部分组成,乳成分测定仪,体细胞测定仪和自动进样器,其中乳成分测定仪和体细胞测定仪则用同一个自动进样器。本文主要从体细胞测定仪的结构和工作原理分析阐述维修该设备的一些步骤。1、流式细胞仪的结构体细胞测定仪主要采用流式细胞仪OR术的原理。流式细胞术(flow cytometery, FCM)是20世纪70年代发展起来的一种可以快速、准确、客观,可同时检测单个微粒(通常是细胞)的多项特性,并加以定量的技术。流式细胞仪是一种集激光技术、电子物理技术、光电测量技术、电子计算机以及细胞荧光化学技术为一体的新型高科技仪器设备。一般其结构分为3部分:样品室及液流驱动系统;激光光源及光学系统;信号检测、储存、数据处理系统。仪器内部光学结构见图1。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2013/08/201308071351_456588_1644065_3.jpg从图1可以清晰的看出仪器的内部结构。其中样品室(也称为观察室)是仪器的核心部件之一,在样品室中被检测样品与激光相交,而样品室由石英玻璃制成,其形状为细孔,只供单列细胞流过,检测区在该孔的中心,这种结构的样品室的光学特性良好,流速较慢,因而细胞受照射时间长,可收集的细胞信号光通量大,配上广角收集透镜,可获得很高的检测灵敏度和测量精度。图2为流式细胞仪的模拟图,从图2更能直观的看到仪器的构造。通过仪器的构造了解仪器的工作原理,为仪器的维修打下坚实的基础。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2013/08/201308071353_456590_1644065_3.jpg图2 流式细胞仪的模拟图1.1激光光源和光学系统目前流式细胞仪的光源采用激光(laser)光源。激光是一种相干光源,它能提供单波长、高强度及稳定性高的光照,是细胞微弱荧光快速分析的理想光源。由于细胞快速流动,每个细胞经过光照区的时间仅为1μs左右,每个细胞所携带荧光物质被激发出的荧光信号的强弱,与被照射的时间和激发光的强度有关,因此细胞需要足够的光照强度。1.2流式细胞仪的分析原理经过染色液染色的样品溶液通过样品管被压进喷嘴的中央,同时无细胞的鞘液也被压入喷嘴,形成包绕细胞的鞘液流,使细胞以单列进入样品室,与水平方向的激光光束(波长488nm)垂直相交。稳定的液流推进装置,使染色的样品呈单列,每个细胞以均等的时间依次通过激光照射区。被荧光染色的细胞受照射后,产生两种信号,一种是散射光信号,其又分为前向散射光(Forward scatter,FSC)和侧向散射光(Side scatter,SSC),前者一般与细胞体积的大小呈正比,而后者与细胞的颗粒度和复杂性有关。2、故障分析2.1光源散射当用离子液或标样对体细胞进行测定时,如果测定结果偏低,其原因很有可能是激光聚焦的问题,发生激光的散射,导致结果偏低。其现象见图3。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2013/08/201308071357_456602_1644065_3.jpg[/

  • 【云唐】atp测定仪的作用有哪些

    [img=,690,690]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2024/03/202403070918214602_9274_5604214_3.jpg!w690x690.jpg[/img]  ATP测定仪是一种广泛应用于生物学、医学、环境科学等领域的仪器,用于检测样品中三磷酸腺苷(ATP)的含量。ATP作为细胞内的能量“货币”,其含量与细胞的代谢活性、生物量、微生物污染等密切相关。因此,ATP测定仪在多个领域都有着重要的作用。  在生物学领域,ATP测定仪常被用于研究细胞的生长、分裂、代谢等过程。通过测定不同条件下细胞内的ATP含量,可以了解细胞的代谢活性、能量状态以及细胞损伤程度等信息。例如,在药物研究中,ATP测定仪可以用于评估药物对细胞代谢活性的影响,从而筛选出具有潜在疗效的药物。  在医学领域,ATP测定仪的应用也十分广泛。例如,在手术室中,医生可以利用ATP测定仪快速检测手术器械和手术区域的清洁程度,以确保手术过程的无菌性。此外,ATP测定仪还可以用于监测患者的免疫功能、感染程度以及肿瘤细胞的代谢活性等。通过监测患者体内的ATP含量,医生可以及时了解患者的病情变化情况,从而制定更加精准的治疗方案。  在环境科学领域,ATP测定仪同样发挥着重要作用。例如,在饮用水处理过程中,ATP测定仪可以用于检测水中的微生物污染情况。由于ATP是微生物细胞内的能量来源,因此ATP的含量与微生物的数量和活性密切相关。通过测定水中的ATP含量,可以及时发现潜在的微生物污染问题,从而采取相应的处理措施保障饮用水的安全性。  此外,ATP测定仪还在食品安全、农业生产等领域得到了广泛应用。在食品安全领域,ATP测定仪可以用于检测食品表面的微生物污染情况,以及评估食品的卫生质量。在农业生产中,ATP测定仪可以用于检测土壤中的微生物生物量、活性以及植物根系的代谢活性等,从而为农业生产和土壤改良提供科学依据。  总之,ATP测定仪作为一种重要的分析仪器,在多个领域都有着广泛的应用。通过快速、准确地检测样品中的ATP含量,ATP测定仪为生物学、医学、环境科学等领域的研究提供了有力的支持,为保障人类健康、促进科技进步作出了重要贡献。随着科学技术的不断发展,ATP测定仪将在更多领域发挥其独特的作用,为人类社会的可持续发展贡献力量。

  • 克隆形成实验及划痕实验、流式细胞术操作步骤

    [size=16px]克隆形成实验[/size][size=16px]及划痕实验[/size][size=16px]、[/size][size=16px]流式细胞术[/size][size=16px]操作步骤[/size]软琼脂克隆形成实验检测单细胞克隆形成能力软琼脂克隆形成实验适用于悬浮生长的细胞。1. 配胶液:用蒸馏水和琼脂糖粉配制浓度为 0.3% 的琼脂糖液,高压灭菌,置于42℃ 水浴锅中,目的是为了使其保持融化状态。2. 配制含 20% FBS 的 2×1640 培养基,用 0.22 ?m 的滤器过滤除菌。3. 铺下层胶:将 0.6% 的琼脂糖胶液与 2×1640 培养基等体积混合,以每孔 1.5mL 加至 6 孔板中,室温等其凝固。4. 细胞计数:将细胞用 PBS 洗一遍,离心,加入新的培养基混匀稀释,计数。H69-NC、H69-shMSI1-1、H69-shMSI1-2、H82-NC、H82-shMSI1-1、H82-shMSI1-2、H526-NC、H526-shMSI1-1、H526-shMSI1-2 均以 1×104/孔铺入 6 孔板。5. 铺上层胶:将 0.3% 的琼脂糖胶液与 2× 培养基 1:1 混合,加入 100 μL 细胞悬液,混匀后,每孔加入 1.5 mL 混合液。6. 放入 37℃,5%CO2 培养箱培养,约 2-3 周后终止培养。7. 比较细胞克隆形成能力的差异,利用 Graphpad prism5 作图计算两种细胞克隆形成能力的差异。平板克隆形成实验检测单细胞克隆形成能力平板克隆形成实验适用于贴壁生长的细胞。1. 细胞处理:将 SW1271-NC、SW1271-shMSI1-1、SW1271-shMSI1-2 细胞,用 PBS洗一遍,用胰酶消化并计数。2. 接种细胞: 将细胞接种于 6 孔板中, SW1271-NC 、SW1271-shMSI1-1 、SW1271-shMSI1-2 接种密度为 3×103/孔,注意一定让细胞均匀分布。于 37℃,隔离CO2 静置培养 2-3 周(终止培养时间以不小于 2 周且克隆之间不发生融合为标准)。3. 出现肉眼可见的克隆时,终止培养。弃去旧培养基, 用 PBS 清洗 2 次,用 4% 多聚甲醛固定液固定 20 min,吸除固定液,用蒸馏水清洗 2 次后加适量结晶紫染色15-20 min,用蒸馏水洗去结晶紫,自然风干,用扫描仪扫描成图片。4. 在低倍镜下计数大于 50 个细胞的克隆数。5. 计算克隆形成率。细胞划痕实验1. 用记号笔在 12 孔板底部划两条平行线做为标记。2. 将 SW1271-NC、SW1271-shMSI1-1、SW1271-shMSI1-2 细胞接种至 6 孔板。3. 待细胞汇合度为 90% 左右时,用 10μL 枪头垂直于两条平行标记线进行划痕。4. 吸除培养基,1xPBS 漂洗 2 次,并换用无血清培养基培养。5. 分别在划痕后培养 0h,12h,24h,48h,72h 观察细胞迁移情况并拍照。流式细胞术1. 收集 H69、H82、H526、SW1271 的对照组和实验组细胞(包括培养上清中的细胞),收集 1 - 10 ×105 个细胞,用预冷 PBS 离心洗涤。用双蒸水稀释 5 ×Binding Buffer为 1 × 工作液,取 500 μl 1 × Binding Buffer 重悬细胞。2. 每管加入 5 μl Annexin V-APC 和 10 μl 7-AAD。3. 轻柔涡旋混匀后,室温避光孵育 5 分钟。4. 上机进行分析。

  • 显微镜下西达本胺影响细胞克隆

    显微镜下西达本胺影响细胞克隆

    显微镜下西达本胺影响细胞克隆平板克隆的结果显示,随着加药浓度的增加克隆集落数减少,且单个集落体积逐渐减小(图 b).平板克隆结晶紫染色结果同样印证了上述结果,集落数明显减少(图c).由此可见,西达本胺显著影响 了结肠癌细胞的生物学形态和克隆形成能力. [img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/06/202306302201105759_3735_5389809_3.png[/img]

  • 还原糖测定仪有什么用

    还原糖测定仪有什么用

    还原糖测定仪是一种用于测量食品、生物样本或其他物质中还原糖(如葡萄糖、果糖等)含量的仪器。还原糖是一类能够还原氧化剂的糖类,具有重要的生物学和食品学意义。还原糖测定仪的主要用途如下:  食品分析: 还原糖测定仪在食品工业中用于测量食品样品中的还原糖含量,如果汁、蜂蜜、糖果等。这有助于确定食品的甜味程度,评估食品的质量和口感,并进行食品配方和加工控制。  饮料生产: 饮料行业经常使用还原糖测定仪来监测饮料中的糖分含量,以确保产品的口味一致性和质量。  食品营养分析: 在食品营养分析中,还原糖测定仪可以用于测量食品中的糖分含量,为食品的营养信息提供数据基础。  生物学研究: 在生物学和生物化学研究中,还原糖测定仪可以用于测量细胞培养基、生物样本中的葡萄糖等还原糖的含量。这有助于研究细胞代谢、能量产生等生物过程。  医学应用: 还原糖测定仪在医学诊断中也有应用,如血糖测定。医疗人员可以使用这些仪器来测量血液样本中的葡萄糖含量,用于糖尿病的监测和诊断。  生产过程控制: 在食品生产和相关工业中,还原糖测定仪可以用于生产过程控制,确保产品在生产过程中的糖分含量符合规定。  总之,还原糖测定仪在食品工业、食品营养分析、生物研究和医学诊断等领域都有重要的应用。它们能够快速、准确地测量还原糖含量,为品质控制、研究和诊断提供必要的数据支持。[img=,690,690]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/09/202309010953010897_3417_5604214_3.jpg!w690x690.jpg[/img]

  • atp测定仪适合检测哪些类型的微生物

    [size=16px]  atp测定仪适合检测哪些类型的微生物  ATP测定仪是一种基于生物发光原理的快速检测仪器,通过测量样品中的ATP含量来评估微生物的活性水平。由于ATP是所有活细胞(包括微生物)的能量来源,因此ATP测定仪能够广泛应用于多种微生物的检测。  具体来说,ATP测定仪适合检测的微生物类型包括但不限于:  病原微生物:这是指那些能够引起疾病的微生物,例如大肠杆菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌等。这些微生物常常存在于食品、水源和环境中,对人体健康构成威胁。ATP测定仪能够快速检测这些病原微生物的存在,有助于及时采取防控措施。  环境微生物:环境中的微生物种类繁多,包括细菌、真菌、病毒等。ATP测定仪可以用于评估环境样本(如土壤、水体、空气等)中的微生物污染程度,为环境监测和治理提供数据支持。  食品微生物:食品中的微生物污染是食品安全领域的重要问题。ATP测定仪可以检测食品样品中的微生物活性,包括菌落总数、大肠菌群、霉菌和酵母等,从而评估食品的卫生状况和质量安全。  需要注意的是,ATP测定仪检测的是ATP分子本身,而不是细胞数量或种类。因此,它更适用于快速评估样品中生物活性和细菌污染的程度,而不是用于鉴定具体的细菌种类。  总的来说,ATP测定仪在多个领域都有广泛的应用,能够为微生物检测提供快速、准确的方法,有助于保障人们的健康和安全。[img=,690,690]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2024/03/202403151354328485_5049_6098850_3.jpg!w690x690.jpg[/img][/size]

  • 全自动还原糖测定仪应用范围

    全自动还原糖测定仪应用范围

    [size=16px]  全自动还原糖测定仪是一种用于测定食品、饲料、生物样品等中还原糖含量的仪器。它通过化学分析方法,测量样品中还原糖的浓度,广泛应用于食品工业、生物化学、医药等领域。其应用范围包括但不限于以下几个方面:  食品工业: 在食品生产中,全自动还原糖测定仪可以用来监测和控制食品中的糖分含量,包括糖果、巧克力、饼干、饮料等。这有助于确保产品的质量、口感和风味的一致性。  饲料工业: 在饲料生产中,全自动还原糖测定仪可以用来分析饲料中的糖分含量,帮助饲料生产商制定合适的饲料配方,以满足不同动物的营养需求。  生物化学研究: 在生物化学研究中,全自动还原糖测定仪可以用来测定细胞培养基、培养物中的糖分含量,从而研究细胞代谢和生长过程。  医药领域: 全自动还原糖测定仪在药物研发和生产中也有应用,用于监测药物中的糖含量,以确保药品的质量和稳定性。  环境监测: 在环境监测中,全自动还原糖测定仪可以用于测定水体、土壤等样品中的还原糖含量,从而了解环境中有机物的分布和污染情况。  农产品质量检测: 在农产品质量检测中,全自动还原糖测定仪可以用来测定水果、蔬菜等农产品中的糖分含量,以指导采摘和销售。  总之,云唐全自动还原糖测定仪在食品、饲料、生物化学、医药等领域的应用范围十分广泛,有助于实现精确的糖分分析,从而保障产品质量和研究成果的准确性。[img=,690,690]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/08/202308301629258474_7582_6098850_3.png!w690x690.jpg[/img][/size]

  • 【原创大赛】【流式细胞仪系列之三】谱图解析

    【原创大赛】【流式细胞仪系列之三】谱图解析

    流式细胞仪测试的结果,在仪器内是标明荧光强度,前向角散射光强度,侧向角散射光强度,或其他参量的电压值或电流值。本特利微生物测定仪的样品经过染色后,被液流系统送到样品室,激光照射染色后的样品溶液后产生荧光,被检测器光电倍增管检测,将光信号转化为电信号,通过数模转换在计算机上存储结果,数据以CSV格式存储在c/data文件夹下。 一个数字文件,有易于加工处理和分析的优点,但通常缺乏直观性,如能用一组图形来表明各个参量的相互关系,对操作者来说更为直观。本特利流式细胞仪数据的显示为单参数直方图(histogram)和二维点图(dot plot)两种。 微生物测定仪有三个谱图,见图1。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2014/12/201412251429_528941_2648817_3.jpg图1仪器显示谱图1、脉冲高度图(pulseheight/intensity)http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2014/12/201412251430_528942_2648817_3.jpg图2 脉冲高度图 脉冲高度图以脉冲高度为横坐标,细胞数量为纵坐标作图。2、脉冲宽度图(pulsewidth/duration)http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2014/12/201412251430_528943_2648817_3.jpg图3 脉冲宽度图 脉冲高度图以脉冲高度为横坐标,细胞数量为纵坐标作图。3、二维点图(dot plot)http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2014/12/201412251430_528944_2648817_3.jpg图4 二维点图 单参数直方图的限制是:只能表明一个参数与细胞数量间的关系,不能显示两个独立参数与细胞的关系。当需要研究两个或更多测定量关系时,可采用二维点图的显示方式。 在图1中,我们可以把二维点图和对应的直方图都画在一起。点图横坐标表示脉冲高度(height),纵坐标表示脉冲宽度(width)。二维点图上每个点代表一个细胞,每个点与横坐标的距离表示该点的脉冲高度,每个点与纵坐标的距离表示该点的脉冲宽度。 绘制全部细胞群体的脉冲高度图,即图2中的脉冲高度图,同理绘制脉冲宽度图。我们可以由点图得到两个直方图,但由两个直方图无法反演成一个二维点图,这说明一个点图所携带的信息量大于两个直方图所携带的信息量。 从三个谱图的坐标位置,我们很明显能看出三者之间的关系。4、软件中的设置及结果显示http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2014/12/201412251430_528945_2648817_3.jpg图5 软件设置积分起始位置 选择TOOLS-OPTIONS-CALIBRATION,可以看出脉冲高度积分范围设置和脉冲宽度的积分范围设置。 对于以上三个图而言,最终的结果为脉冲高度的积分面积来表示。所以,其样品的测试结果严重依赖于积分范围,尤其是积分的起始位置。仪器上设置的积分起始位置为0.4。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2014/12/201412251430_528946_2648817_3.jpg图

  • 细胞周期的测定原理与操作步骤

    一、原理细胞周期指细胞一个世代所经历的时间。从一次细胞分裂结束到下一次分裂结束为一个周期。细胞周期反应了细胞增殖速度。单个细胞的周期测定可采用缩时摄影的方法,但它不能代表细胞群体的周期,故现多采用其他方法测群体周期。测定细胞周期的方法很多,有同位素标记法、细胞 计数法等,这里介绍一种利用BrdU渗入测定细胞周期的方法。BrdU(5-溴脱氧尿嘧啶核苷)加入培养基后,可做为细胞DNA复制的原料,经过两个细胞周期后,细胞中两条单链均含BrdU的DNA将占l/2,反映在染色体上应表现为一条单体浅染。如经历了三个周期,则染色体中约一半为两条单体均浅染,另一半为一深一浅。细胞 如果仅经历了一个周期,则两条单体均深染。计分裂相中各期比例,就可算出细胞周期的值。http://img.dxycdn.com/trademd/upload/asset/meeting/2013/08/27/A1377590583.jpg二、仪器、用品与试剂1. 仪器、用品:同常规细胞培养2. 试剂:BrdU(1.0 mg/ml),甲醇、冰醋酸,Giemsa染液,秋水仙素,2×SSC液三、操作步骤1. 细胞生长至指数期时,向培养液中加入BrdU,使最终浓度为10 μg/ml。2. 44小时加秋水仙素,使每ml中含0.1 μg。3. 48小时后常规消化细胞至离心管中,注意培养上清的漂浮细胞也要收集到离心管中。4. 常规染色体制片。5. 染色体玻片置56 ℃水浴锅盖上,铺上2×SSC 液,距紫外灯管6 cm处紫外照射30分钟。6. 弃去2×SSC液,流水冲洗。7. Giemsa液染色10分钟,流水冲洗,晾干。8. 镜检100个分裂相,计第一、二、三、四细胞期分裂指数。9. 计算:细胞 周期(Tc)=48/(小时)附:(1)BrdU配制: BrdU 10 mg十双蒸水10ml 4 ℃下避光保存。(2)2×SSC配制: NaCl 1.75克,柠檬酸三钠,2H2O 0.88克,加水至100 ml,4 ℃保存。

  • 【分享】细胞代谢呼吸动态分析仪同步侦测OCR、CDPR、ECAR

    北京华威中仪科技代理的由美国Seahorse Bioscience 公司最新研发的XF生物能量测定仪(细胞代谢呼吸动态分析仪)XF extracellular analyzer是世界首创使用24孔及96孔微孔盘为平台,采用无损伤专利固态探针侦测技术即时同步侦测有氧呼吸O2(OCR)以及糖酵解作H+(OCAR)、 CO2产率(CDPR)的动态分析仪,透过此系统的协助,研究者得以更快的速度、更简易的设计了解细胞以及线粒体如何运用不同的受质作为能量的来源、评估疾病与氧代谢及线粒体运作状态之交互作用、分析代谢调节药物对于生理的效应、建立细胞品管系统、快速筛选出具开发潜力之药物及药物毒性评估等多种不同应用。此系统现已被广泛应用于免疫学、药物筛选、肝脏及外源性毒理、糖尿病及肥胖症、老化、干细胞、细胞生理、药物转化等各个领域,哈佛大学等名校已借助该系统在nature、cell上发表文章几十篇,其他SCI高影响因子文章200多篇,现在就拥有Seahorse Bioscience 公司的细胞代谢呼吸动态分析仪,领先下一个细胞与线粒体研究的黄金十年。

  • 【转帖】新产品Cellscreen全自动细胞图像分析仪

    Cellscreen系统第一次实现了可重复对细胞培养进行观察。无需染色、无需制样,通过光学图像分析将细胞培养的生长曲线保存;与其它现有测试方法相比,Cellscreen系统对细胞培养无损伤性,独立性。第一次实现了对同一细胞培养区域进行多次测量。Cellscreen技术证明是一种精确的、可靠的、自定义实验条件、操作方便、节省成本的方法。Cellscreen能优化和加速新产品和测试程序的开发。 Cellscreen应用领域 Cellscreen模块化设计能适用于更广范的领域,例如: 制药研究:Cellscreen系统能缩短常规科研究时间,能拍摄细胞生长因子的各种因素,如毒性测试及生物适应性的测试。 生物技术研究:Cellscreen系统适用于增殖研究、过程(培养基)最优化、质量控制。另外,用于拍摄克隆细胞实验的新性质,如应用在新的治疗蛋白和抗体的研究。 Cellscreen系统的优势: l缩短制药研发的时间周期 l对细胞培养无损伤—细胞可再用于其它研究 l可扩展的详细的结果描述,对细胞培养过程的文档和图像存档 l与现有的方法相比,更精确——可靠、重复性、自定义 l很容易融入到日常实验 l很容易操作Multiwellplate l特别低的操作成本-对所有的测量只需要一个培养皿,不需试剂、不需对细胞染色。 l节省时间—不需样品制备 l技术成熟—innovatesAG图像识别技术 l模块化设计—系统可扩展其它分析模块 Cellscreen系统模块化设计: 为满足广泛的分析需求,Cellscreen系统是按模块化设计,能运行不同的软件系统。硬件由一个双处理器电脑及控制单元组成,控制单元通过高精度电机台自动聚焦、自动调光来控制显微镜;不同的软件模块对数码相机获取的图像进行分析,分析所得的图像和数据存储在终端数据库。 软件模块包括: l悬浮细胞的增殖研究模块(PS模块) l贴壁细胞的增殖研究模块(PA) l克隆细胞实验模块(CL) 细胞增殖研究模块(PS和PA)能重复观测细胞培养的生长因子,CL模块观察克隆细胞,并能追随到起源的单克隆细胞。 克隆细胞实验模块(CL) 在整个培养过程中,CL模块自动监控单个克隆细胞到群体的生长过程;为了证明细胞群体的单克隆细胞起源,需要监控整个生长过程。 Cellscreen系统用40倍放大系数抓取容器低部的16幅图像,它能代表整个容器的状态。 所有获得的图像和数据存档到数据库,因此可以跟踪任何生物群体的成长过程,证明生物群体起源的单克隆细胞。 很好的保护—Cellscreen的培养器 Cellscreen的培养器精确的安装在显微镜上,在测量过程中,对您贵重的细胞培养,它保持一个稳定的环境。对温度和CO2的浓度能精确的控制。培养器可以长时间或频繁的监控微量滴定盘,而不需移动它。 贴壁细胞的增殖研究模块(PA) PA模块通过测量细胞覆盖区域,用户可以观察到贴壁细胞的增殖。PA以40放大倍数获得图像。系统可以自由选择培养皿的区域。这系统适用于所有通用的微量滴定盘规格(6-96眼)。结果以图像和曲线的形式表示出来。PA模块将所有的图像和结果存档,输出格式CSV(兼容Excel格式)。 PA模块精确的测量至少80%细胞的生长因子,用于科研、发展、研制新产品。 悬浮细胞的增殖研究模块(PS) PS模块通常应用在对细胞生长因子影响的研究。为了获得生长曲线,悬浮液里培育的细胞数量被重复的量化——时间、原料、操作的消耗成本。对同一培养皿里的细胞生长,PS模块能重复计数、消除对每次测量都需要更换盘子的影响。 另外,Cellscreen系统对每个细胞进行计数,相对现存的细胞计数方法,它有很高的精确性。PS模块用的是100放大倍数,它获得的图像有很好的分辨率,能提供出细胞直径和细胞形状的一些信息。 Cellscreen系统概述 很容易综合到您的日常工作中——易学易用 实验和测量的标准化 在准备阶段,用户按要求设定实验配置。对实验条件有详细选择和描述,例如:微量滴定盘上的哪个培养皿,培养皿里哪个区域需要检测;另外一些参数需要选定,如:体积、细胞类型、培养方法、细胞直径。因为无需吸液管,其它方法中隐含的误差就很容易避免。 图像清晰、分析准确 现在的测量方法里,用CCD相机拍摄图像,对每一幅图片用相同的技术指标聚焦。 Cellscreen精确的控制技术保证,在每一个测量过程中,准确的拍摄培养皿的同一区域;因此对每一选择的区域,用户可以跟踪细胞的生长过程;PS软件对选定区域的细胞进行计数;CL和PA软件用来测定克隆细胞和悬浮细胞的表面区域。 广泛和详细的结果陈述 用户可以选择结果的描述方式:如照片、生长曲线、细胞浓度曲线图或幻灯片,用来证明细胞生长发育的全过程。所有的信息,如实验设置、图像的获得、处理结果以及一些简单的实验文档都自动保存在终端数据库。

  • 细胞中钙离子浓度测定

    搜求细胞中钙离子测定的方法及相关使用仪器、附件,希望各位大侠指点迷津!http://simg.instrument.com.cn/bbs/images/brow/em09511.gif

  • 面包体积测定仪 面包体积测量仪-郑州中谷机械设备有限公司

    面包体积测定仪 面包体积测量仪-郑州中谷机械设备有限公司

    http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2016/06/201606280928_598410_1941670_3.jpg JMTY 型面包体积测定仪 是测量面包、馒头和各类不规则固体食品体积的专用计量仪器。面包体积测定仪仪器适用于体积小于 1000ml 的食品体积值测定,广泛用于粮食、食品等部门。 技术参数:1 外形尺寸: 850 × 200 × 130mm; 2 测量范围: 标尺 Ⅰ: 0~600ml; 标尺Ⅱ: 400~1000ml; 3 填充物:粒径在 1 ~ 2mm 油菜籽。4 准确度: ≦± 1.0% 5 重现性: ≦± 0.8%。面包体积测定仪☆面包测定仪☆面包体积测定仪价格是多少面包体积测定仪☆面包测定仪☆面包体积测定仪厂家哪个好 电话:0371-55862289 传真:0371-61175791 网址:http://www.zzzhonggu.com手机:13513890822 18037122128信箱:zhonggu668@163.com详细资料,敬请登录中谷机械设备公司以下网站: http://www.zzzhonggu.com 郑州中谷机械设备有限公司更多推荐产品 http://www.zzzhonggu.com/1016-9.html 谷物选筛http://www.zzzhonggu.com/1014-6.html害虫选筛http://www.zzzhonggu.com/1014-16.html容重器http://www.zzzhonggu.com/1014-2.html电子容重器http://www.zzzhonggu.com/1014-19.html钟鼎式分样器http://www.zzzhonggu.com/1014-11.html不锈钢分样器http://www.zzzhonggu.com/1014-14.html小麦硬度测定仪http://www.zzzhonggu.com/1014-18.html碎米分离器http://www.zzzhonggu.com/1014-20.html精米机http://www.zzzhonggu.com/1014-3.html检验砻谷机http://www.zzzhonggu.com/1014-8.html单管通风机http://www.zzzhonggu.com/1001-2.html多管通风机http://www.zzzhonggu.com/1001-3.html谷物水分测定仪http://www.zzzhonggu.com/1005-2.html快速水分测定仪http://www.zzzhonggu.com/1005-3.html电脑快速水分仪http://www.zzzhonggu.com/1005-6.html粮食水分测定仪http://www.zzzhonggu.com/1005-11.html不锈钢粮食取样器http://www.zzzhonggu.com/1010-1.html粮食扦样器http://www.zzzhonggu.com/1010-5.html散粮车取样器http://www.zzzhonggu.com/1010-7.html油脂酸价测定仪http://www.zzzhonggu.com/1019-16.html罗维朋比色计http://www.zzzhonggu.com/1019-14.html

  • 离心机如何应用于红细胞压积容量测定

    [b]离心机[/b]如何应用于红细胞压积容量测定摘要:红细胞压积(packedcellvolume,PCV)又称红细胞比容(hematocrit,Hct),是指红细胞在血液中所占容积的比值,测定时将抗凝血在一定的条件下离心沉淀,即可测得每升血液中血细胞所占容积的比值。  1原理[b]离心机[/b]  在100刻度玻璃管中,充入抗凝血至刻度,经一定时间离心后,红细胞下沉并紧压于玻璃管中,读取红细胞柱所占的百分比,即为红细胞压积容量(PCV又称压容、比容)。  2.器材  (1)温氏管:管长11cm,内径约2.5mm,管壁有100个刻度。一侧自上而下标有0~10,供测定血沉用,另一侧标有10~0,供测定比容用。如无这种特制的管子,可用有100刻度的小玻璃管代替。  (2)长针头及胶皮乳头:选用长12~15cm的针头,将针尖磨平,针柄部接以胶皮乳头。也可用细长毛细吸管代替。  (3)水平电动离心机:转速能达4000rpm者。  3.方法  (1)用长针头吸满抗凝血,插入温氏管底部,轻捏胶皮乳头,自下而上挤入血液至刻度10处。  (2)置离心机中,以3000rpm的速度离心30~45min(马的血液离心30min,牛、羊的血液离心45min),取出观察,记录红细胞层高度,再离心45min,如与第一次离心的高度一致,此时红细胞柱层所占的刻度数,即为PCV数值用%表示。  4.注意事[b]离心机[/b]项  (1)温氏管及充液用具必须干燥,以免溶血。  (2)此时,离心机的转速必须达3000rpm以上,并遵守所规定的时间。  (3)用一般离心后[b]离心机[/b],红细胞层呈斜面,读取时应取斜面1/2处所对应的刻度数。血浆与红细胞层之间的灰白层由白细胞与血小板组成,不应计算在内。  5.临床意义  (1)红细胞压积增高:见于各种原因所引起的血液浓缩,使红细胞相对性增多,如急性胃肠炎、肠便秘、肠变位、瓣胃阻塞、渗出性胸膜炎和腹膜炎,以及某些传染病和发热性疾病。由于红细胞压积增高的数值与脱水程度成正比,因此在临床上可根据这一指标的变化而推断机体的脱水情况,并计算补液的数量及判断补液量的实际效果。另外。也见于各种原因所致的红细胞绝对性增多,如真性红细胞增多症、肺动脉狭窄、高铁血红蛋白血症等。  (2)红细胞压积降低:见于各种贫血,但降低的程度并不一定与红细胞数一致,因为贫血有小细胞性贫血、大细胞性贫血及正细胞性贫血之分。

  • 光合作用测定仪在实验课程中有哪些应用

    [font=-apple-system, BlinkMacSystemFont, &][color=#05073b][size=18px]  光合作用测定仪在实验课程中有哪些应用,光合作用测定仪在实验课程中有多种应用,主要体现在以下几个方面:  植物生理实验课程:光合作用测定仪是植物生理实验课程中常用的检测仪器。利用它,学生可以开展植物光合作用、呼吸作用、蒸腾作用的相关课题研究以及教学。  测定光合作用参数:在实验过程中,学生可以将植物样品放入光合作用仪中,调节光源的强度和波长,使其符合实验要求。然后,通过CO2供应系统向光合作用仪中注入一定浓度的CO2,以模拟植物在自然环境中的CO2浓度。在此过程中,学生可以测定光合作用的净速率、光补偿点和CO2补偿点等指标,从而了解植物光合作用的效率。  测定环境参数:光合作用测定仪还可以测定CO2浓度、叶片温度、光合有效辐射和叶室温湿度等环境参数。通过科学计算,可以得出叶片的光合速率、叶片蒸腾速率、细胞间CO2浓度、气孔导度、水分利用率等光合作用指标,从而更全面地了解植物的生长状况。  科学研究与指导农业生产:光合作用测定仪的应用不仅限于教学和实验,还可以在科研和生产方面发挥积极作用。例如,在农业生产和农业科研中,可以利用光合作用测定仪来科学指导农业生产,提高作物产量和品质。  总的来说,光合作用测定仪在实验课程中的应用广泛,是植物生理实验、科研和生产中不可或缺的工具。通过使用该仪器,学生可以更深入地了解植物光合作用的原理和过程,为未来的科研和农业生产奠定坚实的基础。[img=,690,690]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2024/05/202405210944478055_8620_6098850_3.jpg!w690x690.jpg[/img][/size][/color][/font]

  • 全自动还原糖测定仪有什么用

    全自动还原糖测定仪有什么用

    [img=,690,690]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/10/202310080909409267_416_5604214_3.jpg!w690x690.jpg[/img]  全自动还原糖测定仪是一种实验室仪器,主要用于测定食品、饮料、生物样品和其他物质中的还原糖含量。其作用包括以下几个方面:  测定还原糖含量:全自动还原糖测定仪可以精确测量样品中的还原糖含量,这对于食品和饮料工业以及生物研究非常重要。还原糖是一类可被还原的碳水化合物,包括葡萄糖、果糖和半乳糖等。测定还原糖含量可以用于质量控制、产品开发和研究。  食品质量控制:在食品工业中,还原糖测定仪用于检测食品和饮料中的糖含量,以确保产品的一致性和质量。这对于糖果、果酱、果汁、软饮料等产品的生产非常重要。  质量标准遵守:在一些行业中,特定产品必须满足法定的质量标准和规定。全自动还原糖测定仪可以帮助企业确保其产品符合相关标准,以避免违规和处罚。  科学研究:在生物研究领域,测定还原糖含量可以用于研究细胞代谢、酶活性和疾病诊断等方面。全自动还原糖测定仪提供了高度精确的分析工具,有助于科学家深入了解生物过程。  药物研发:在制药行业,还原糖测定仪可以用于糖基药物研发和质量控制,以确保药物的安全性和有效性。  总之,全自动还原糖测定仪的主要作用是测量样品中的还原糖含量,以满足质量控制、法规遵守、科学研究和产品开发等不同领域的需求。它提供了高效、精确和可重复的还原糖分析方法,有助于确保产品的质量和性能。

  • 牛奶体细胞测定与牧场管理

    [b]奶牛体细胞测定与牧场管理[/b]是DHI(Dairy Herd Improvement)的必修课题。DHI即奶牛生产性能测定也称牛群改良,是一套完整的奶牛生产性能记录和管理体系,是一个实实在在通过度量和分析解决奶牛生产实际问题的方法,其目的是提高牛群的整体素质和生产水平,使用方法是从群体着眼,针对个体解决存在的问题。DHI检测的项目:一是牛群的产奶性能,包括每头牛的产奶量、乳脂率、乳蛋白率等;二是收集牛群饲养管理与经营方面的资料,如系谱资料、产犊日期、干奶日期、淘汰日期和牛群的年龄结构等,并将这些资料信息进行系统加工处理,所得结果再返回牛场指导牛场的经营管理,帮助提高牛场经济效益。DHI的用途具体体现为追踪个体牛表现、观察牛群表现、开发新目标、乳房炎管理、选种等方面的。  针对于[b]奶牛体细胞测定与牧场管理[/b]课题,最关键是乳脂率、乳蛋白率、体细胞数,其中体细胞直接影响产奶量、乳脂率、乳蛋白率和其它乳成分。通过体细胞数的变化,可反映牧场管理水平及牧场经营状况。DHI检测设备推荐本特利NexGen系列新一代牛奶成分+体细胞检测,检测速度400-600/小时,可以根据牧场需要进行配置,同时检测模块有丙酮和乳铁蛋白,对于预防奶牛酮病和乳房炎有提前预警作用。 [b]体细胞数(SCC)[/b]是指每毫升牛奶中所含的体细胞量,它反映牛场奶牛乳房健康状况,几乎参加DHI项目的每头泌乳牛都进行体细胞检测。它包括多种类型的细胞如白细胞和脱落的上皮细胞等,高SCC记录预示着大量的白细胞的存在和乳房感染几率较大。DHI报告可提供全群奶牛各胎次每月体细胞数值,可按照不同胎次统计出不同SCC水平的牛头数及所占百分比。  个体[b]奶牛体细胞数(SCC)[/b]直接反映了奶牛乳房健康状况,并能反映防治措施是否有效,需要说明一点,SCC的高低反映了乳房受感染的程度,而并非超过某一特定值就表示该牛一定有乳房炎而需要治疗。 牛群[b]体细胞数(SCC)[/b]是整个牛群乳房健康程度的标志。体细胞数、体细胞评分反映了该牛群的健康状况。对于体细胞高的牛群,应从挤奶设备的消毒效果,挤奶设备真空度及真空稳定性,奶衬性能及使用时间,牛床、运动场等卫生环境等方面找问题。 在DHI报告中提供了因[b]奶牛体细胞数(SCC)[/b]太高而造成奶牛产奶量的损失,应用该数据可以计算出奶牛场全年产奶量损失及直接经济损失。[b]奶牛体细胞数(SCC)[/b]与奶量损失的关系  DHI报告分析:脂肪蛋白比。一个牛群正常的脂肪和蛋白比例在1.1-1.2的范围内,或蛋脂比在0.8—0.85如果变化范围超过上限或下限,说明奶牛饲养管理方面有问题。  当脂蛋比低于1.1时表明  A、奶牛粗饲料在瘤胃中的发酵率降低  B、粗饲料的质量差  C、精料比例过大  D、瘤胃亚临床或临床型酸中毒  E、奶牛反刍减少,日粮中缺乏缓冲物质  当脂蛋比高于1.2时表明:  A、奶牛日粮中蛋白质不平衡,品质差,缺乏必需氨基酸,如蛋氨酸和赖氨酸。  B、日粮中能量不足,瘤胃微生物蛋白合成不足  C、奶牛干物质采食量不足  D、夏天热应激  E、饲料中添加了大量的油脂类脂肪  F、可发酵碳水化合物含量不足DHI报告中奶牛繁殖状况分析:平均泌乳天数。如果一个牛群具有正常的牛群结构,且常年均衡配种,那么该牛群的平均泌乳天数应改为150-170天。如果超过上限则表明:  A、所提供的产犊日的准确性  B、奶牛产后繁殖问题严重  C、配种技术员水平不高 D、存在严重的饲养管理问题  DHI报告在生产实践中的重要意义:DHI分析报告是奶牛场改进饲养方法、提高管理水平的基础。如根据奶牛泌乳曲线的变化、乳成分和奶牛体细胞和尿素氮测定结果,分析各类营养的平衡关系,以调整饲料配方和优化饲喂程序,保证牛群的正常管理,而使牛群发挥最大的生产潜力,提高生产水平。

  • 【转帖】iPS细胞:人造肿瘤细胞?

    各国争相发展的重点项目  iPS技术,即诱导性多能干细胞技术,是一种将成体成熟、分化的体细胞重编程获得类似胚胎干细胞的新兴技术。2007年11月美国和日本科学家分别独立宣布可将人类皮肤细胞转化为iPS细胞。这一发现被《自然》和《科学》杂志分别评为2007年第一和第二大科学进展。之后,iPS细胞研究迅猛发展,不同的国家和实验室纷纷报道了多种方法建立的iPS细胞系。就连世界第一只体细胞克隆动物多利羊的培育者伊恩·威尔莫特也宣布放弃人类胚胎干细胞克隆研究,转而进行 iPS 细胞研究,因为他认为这种细胞比胚胎干细胞更具潜在优势。  我国连续多年将干细胞研究列入“863”、“973”、国家自然基金重点项目。国务院2006年发布的《国家中长期科学和技术发展规划纲要(2006-2020年)》中,干细胞作为五项生物技术之一成为未来15年我国前沿技术的重点研究领域。  致瘤风险浮出水面  Yamanaka研究组在《自然·生物技术》上发表的文章显示,用iPS细胞诱导的神经干细胞,即使不含c-Myc(曾被认为是导致肿瘤的主要原因),在植入NOD/SCID免疫缺陷小鼠后仍有很强的致瘤性,甚至高于胚胎干细胞。   他们共研究了36个iPS细胞克隆,在诱导方式上,有些诱导剂配方中含有c-Myc基因,有些没有,因此具有较好的代表性。同时他们选择了3株胚胎干细胞作为对照。在45周的观察中,移植胚胎干细胞来源神经干细胞的34只小鼠有4只长出肿瘤。在100只移植胚胎成纤维细胞来源的iPS神经干细胞小鼠中34只发现肿瘤,概率和胚胎干细胞相当。在55只移植成人成纤维细胞来源的iPS神经干细胞小鼠中46只发现肿瘤,概率远高于胚胎干细胞。在36只移植肝细胞来源的iPS神经干细胞小鼠中10只发现肿瘤,概率高于胚胎干细胞。8只移植胃上皮细胞来源的iPS神经干细胞小鼠中未发现肿瘤。病理学检查证实肿瘤均为畸胎瘤,部分为恶性畸胎瘤。  研究还发现,以前认为致瘤性很强的c-Myc在去掉后并没有减少iPS神经干细胞的致瘤性,相反以前认为没有致瘤性的Nanog基因却可以明显增强iPS神经干细胞的致瘤性。  这次试验的另一个意外结果是并未发现在生成的肿瘤细胞中有c-Myc或其他基因的激活。以前的观点认为,转入的癌基因是iPS致瘤性的基础,只要在iPS细胞诱导成功后通过各种方法去除已完成使命的癌基因即可使iPS细胞免于致瘤性。这次试验的结果无疑给这些想法留下了阴影,而且使iPS致瘤的机制更加扑朔迷离。

  • 流式细胞术详解 6-8章节

    六. 流式细胞仪主要构造和工作原理 信号检测系统 当测定标本在鞘流液约束下细胞成单行排列依次通过激光检测区时产生散射光和荧光信号,散射光分为前向角散射(Forward Scatter, FS)和侧向角散射或900散射(Side Scatter, SS),散射光是细胞的物理参数与细胞样本的制备(如染色)无关;荧光信号也有两种,一种是细胞自发荧光它一般很微弱,一种是细胞样本经标有特异荧光素的单克隆抗体染色后经激光激发发出的荧光,它是我们要测定的荧光,荧光信号较强,这两种荧光信号的同时存在是我们测定时需要设定阴性对照的理由,以便从测出的荧光信号中减去细胞自发荧光和抗体非特异结合产生的荧光。前向角散射(FS)反映被测细胞的大小,它由正对着流动室的光电二极管装置接收并转变为电信号;侧向角散射或900散射(SS)反映被测细胞的细胞膜、细胞质、核膜的折射率和细胞内颗粒的性状, 它由一个光电倍增管(PMT) 接收并转变为电信号,这些电信号存储在流式细胞仪的计算机硬盘或软盘内。流式细胞仪测定常用的荧光染料有多种,他们分子结构不同,激发光谱和发射光谱也各异,选择荧光染料时必须依据流式细胞仪所配备的激光光源的发射光波长(如氩离子气体激光管,它的发射光波488ηm,氦氖离子气体激光管发射光波长633ηm)。488ηm激光光源常用的荧光染料有FITC(异硫氰酸荧光素)、PE(藻红蛋白)、PI(碘化丙啶)、CY5(化青素)、preCP(叶绿素蛋白)、ECD(藻红蛋白-得克萨斯红)等。他们的激发光和发射光波长分别是: [/col

  • Nature:科学家从人卵细胞培养出胚胎干细胞

    10月6日出版的新一期英国《自然》杂志刊登报告说,美国研究人员用人类卵细胞培养出了胚胎干细胞,虽然这项成果还存在一些缺陷,但已是“黄禹锡造假事件”后最接近培养出正常人类胚胎干细胞的成果。这一成果可能引起有关克隆问题的新一轮大争论。http://www.bioon.com/biology/UploadFiles/201110/2011100911202350.jpg(图片来自原文)将体细胞中的遗传物质植入卵细胞中,将其培育成为胚胎干细胞甚至最终培养出新的个体,就是常说的克隆技术,著名的克隆羊“多利”就是用这种技术得到的。2004年,韩国研究人员黄禹锡曾宣称用这种方法培育出了人类胚胎干细胞,引起一时轰动,但后来证明这是一起造假事件。此后,许多科研人员都进行了这方面的尝试,但一直没有成功。相关研究面临的障碍是,如果先将人类卵细胞中的遗传物质去掉,再植入另一个体细胞的遗传物质,这样得到的卵细胞分裂几次后就会停止发育。而美国纽约干细胞基金实验室等机构的研究人员报告说,如果留下一部分原有卵细胞中的遗传物质,再另外加上体细胞的部分遗传物质,这样得到的卵细胞可以发育到具有70至100个细胞的囊胚阶段,达到可以提取胚胎干细胞的阶段。胚胎干细胞具备发育成各种组织和器官的潜力,如果能够培育出人类胚胎干细胞,就意味着能够培育出属于某个人自己的组织和器官,可用于个性化的医疗。当然这也会引起有关克隆人的争议。本次研究虽然能够培育出人类胚胎干细胞,但也存在一些缺陷。最重要的是这些细胞中存在3组染色体,即卵细胞原有的1组染色体和来自体细胞的2组染色体,而正常的人类细胞只有2组染色体。因此,这种人类胚胎干细胞还不具备实用性。但是《自然》杂志同时发表的社论指出,这是自“黄禹锡造假事件”后最接近培养出可用人类胚胎干细胞的成果,在大方向上证明这仍然是一条可行的道路。社论认为,这将引起新一轮的有关克隆人的大争论,甚至提出联合国有必要开始考虑制订监管克隆的规章制度。

  • 激光扫描共聚焦显微镜在细胞生物学中的应用

    激光扫描共聚焦显微镜是近十年发展起来的医学图像分析仪器,与传统的光学显微镜相比,大大地提高了分辨率,能得到真正具有三维清晰度的原色图像。并可探测某些低对比度或弱荧光样品,通过目镜直接观察各种生物样品的弱自发荧光。能动态测量Ca2+ 、pH值,Na+、Mg2+等影响细胞代谢的各种生理指标,对细胞动力学研究有着重要的意义。同时激光扫描共聚显微镜可以处理活的标本,不会对标本造成物理化学特性的破坏,更接近细胞生活状态参数测定。可见激光扫描共聚焦显微镜是普遍显微镜上的质的飞跃,是电子显微镜的一个补充,现已广泛用于荧光定量测量,共焦图像分析,三维图像重建、活细胞动力学参数分析和胞间通讯研究等方面,在整个细胞生物学研究领域有着广阔的应用前景。1. 定量荧光测量ACAS可进行重复性极佳的低光探测及活细胞荧光定量分析。利用这一功能既可对单个细胞或细胞群的溶酶体,线粒体、DNA、RNA和受体分子含量、成份及分布进行定性及定量测定,还可测定诸如膜电位和配体结合等生化反应程度。此外,还适用于高灵敏度快速的免疫荧光测定,这种定量可以准确监测抗原表达,细胞结合和杀伤及定量的形态学特性,以揭示诸如肿瘤相关抗原表达的准确定位及定量信息。2. 定量共聚焦图像分析借助于ACAS激光共焦系统,可以获得生物样品高反差、高分辨率、高灵敏度的二维图像。可得到完整活的或固定的细胞及组织的系列及光切片,从而得到各层面的信息,三维重建后可以揭示亚细胞结构的空间关系。能测定细胞光学切片的物理、生物化学特性的变化,如DNA含量、RNA含量、分子扩散、胞内离子等,亦可以对这些动态变化进行准确的定性、定量、定时及定位分析。3. 三维重组分析生物结构ACAS使用SFP进行三维图像重组,SFP将各光学切片的数据组合成一个真实的三维图像,并可从任意角度观察,也可以借助改变照明角度来突出其特征,产生更生动逼真的三维效果。4. 动态荧光测定Ca2+、pH 及其它细胞内离子测定,利用ACAS能迅速对样品的点,线或二维图像扫描,测量单次、多次单色、双发射和三发射光比率,使用诸如Indo-1、BCECF 、Fluo-3等多种荧光探针对各种离子作定量分析。可以直接得到大分子的扩散速率,能定量测定细胞溶液中Ca2+对肿瘤启动因子、生长因子及各种激素等刺激的反应,以及使用双荧光探针Fluo-3和CNARF进行Ca2+和pH的同时测定。5. 荧光光漂白恢复(FRAP)——活细胞的动力学参数荧光光漂白恢复技术借助高强度脉冲式激光照射细胞某一区域,从而造成该区域荧光分子的光淬灭,该区域周围的非淬灭荧光分子将以一定速率向受照区域扩散,可通过低强度激光扫描探测此扩散速率。通过ACAS可直接测量分子扩散率、恢复速度,并由此而揭示细胞结构及相关的机制。6. 胞间通讯研究动物细胞中由缝隙连接介导的胞间通讯被认为在细胞增殖和分化中起非常重要的作用。ACAS可用于测定相邻植物和动物细胞之间细胞间通讯,测量由细胞缝隙连接介导的分子转移,研究肿瘤启动因子和生长因子对缝隙连接介导的胞间通讯的抑制作用,以及胞内Ca2+、PH和cAMP水平对缝隙连接的调节作用。7. 细胞膜流动性测定ACAS设计了专用的软件用于对细胞膜流动性进行定量和定性分析。荧光膜探针受到极化光线激发后,其发射光极性依赖于荧光分子的旋转,而这种有序的运动自由度依赖于荧光分子周围的膜流动性,因此极性测量间接反映细胞膜流动性。这种膜流动性测定在膜的磷脂酸组成分析、药物效应和作用位点,温度反应测定和物种比较等方面有重要作用。8. 笼锁-解笼锁测定许多重要的生活物质都有其笼锁化合物,在处于笼锁状态时,其功能被封闭,而一旦被特异波长的瞬间光照射后,光活化解笼锁,使其恢复原有活性和功能,在细胞的增值、分化等生物代谢过程中发挥功能。利用ACAS可以人为控制这种瞬间光的照射波长和时间,从而达到人为控制多种生物活性产物和其它化合物在生物代谢中发挥功能的时间和空间作用。9. 粘附细胞分选ACAS是目前唯一能对粘附细胞进行分离筛选的分析细胞学仪器,它对培养皿底的粘附细胞有两种分选方法: ① Coolie-CutterTM法,它是Meidian公司专利技术,首先将细胞贴壁培养在特制培养皿上,然后用高能量激光的欲选细胞四周切割成八角形几何形状,而非选择细胞则因在八角形之外而被去除,该分选方式特别适用于选择数量较少诸如突变细胞、转移细胞和杂交瘤细胞,即使百万分之一机率的也非常理想。 ② 激光消除法,该方法亦基于细胞形态及荧光特性,用高能量激光自动杀灭不需要的细胞,留下完整活细胞亚群继续培养,此方法特别适于对数量较多细胞的选择。10. 细胞激光显微外科及光陷阱技术借助ACAS可将激光当作“光子刀”使用,借此来完成诸如细胞膜瞬间穿孔、切除线粒体、溶酶体等细胞器、染色体切割、神经元突起切除等一系列细胞外科手术。通过ACAS光陷阱操作来移动细胞的微小颗粒和结构,该新技术广泛用于染色体、细胞器及细胞骨架的移动。

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