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******涉嫌广告******,主要致力于农牧食品领域的检测方法和检测仪器的研究与应用,主要产品有纤维分析仪,脂肪测定仪等。公司自成立以来,借助英国世界一流大学的卓越研究能力,整合著名的营养学家、油脂化学家、生命科学家等科研资源,凭借自身的人才优势,以前沿的技术、优秀的管理、独树一帜的产品和服务为全球的科技进步做出了重要贡献。RINGBIO公司作为世界知名的科学仪器领域的设备制造商业务遍及全球多个国家和地区。RINGBIO研究的检测方法(滤袋法)在世界处于领先地位。随着公司全球化发展,为了更好的服务中国客户,RINGBIO将最先进的研究成果带到了中国,设立了代表处和专业客户服务中心,负责在中国大陆的销售、推广和售后服务。RINGBIO所有产品的设计与制造过程严格遵循欧洲标准,秉承“工匠精神”的理念,用世界一流品质的产品来服务中国客户。
1 范围本方法规定了饲料中饲料中中性洗涤纤维(NDF) 的测定方法。本方法适用于各种单一饲料和配合饲料。本方法不适用于无机盐类饲料添加剂。2 原理饲料如一般饲料、牧草和粗纤维在一定温度下,经中性洗涤剂处理,可洗涤分解大部分细胞内容物,如脂肪、淀粉、蛋白质和糖类等,不溶解的残渣为中性洗涤纤维(NDF),包括构成细胞壁的半纤维素、纤维素、木质素和少量硅酸盐等杂质。3 仪器和设备3.1 消化装置- Ringbio 纤维分析仪。3.2 滤袋- Ringbio 专用滤袋。3.3 封口机。3.4 电热干燥箱。3.5 高温电阻炉。3.6 耐溶剂记号笔。3.7 干燥器:无水氯化钙或变色硅胶为干燥剂。3.8 分析天平- 精确至0.1 mg。4 试剂和溶液4.1 十二烷基硫酸钠。4.2 乙二胺四乙酸二钠(EDTA 二钠盐)。4.3 四硼酸钠(Na2B4O7·10H2O)。4.4 无水磷酸氢二钠。4.5 三甘醇。4.6 正辛醇(消泡剂)。4.7 丙酮。4.8 α-高温淀粉酶。4.9 中性洗涤剂(3%十二烷基硫酸钠溶液):称取60.0 g 十二烷基硫酸钠(USP);37.22 g 乙二胺四乙酸二钠(Na2EDTA);13.62 g 四硼酸钠(Na2B4O7)十水;9.12 g 无水磷酸氢二钠(Na2HPO4);20.0 ml 三甘醇;全部溶解在2 L 水中,适当的搅拌和加热有助于溶解。检查适当的pH 在6.9~7.1。5 测定步骤5.1 试样用耐溶剂记号笔给滤袋编号,称重记为m1。准确称取0.5 (± 0.05) g 制备好的样品于滤袋中,记为m。样品需要粉碎过1mm 筛。在距离滤袋上边缘约4mm 处用封口机封口,将样品在滤袋中展平,均匀分布。至少取一个空滤袋作为空白,记为C,做空白测定。5.2 预先脱脂脂肪含量高的样品需要脱脂。将装有样品的滤袋放入玻璃容器中,加丙酮使滤袋完全浸没,浸泡10min,倒掉溶剂,将滤袋放在网筛上凉干。5.3 放置滤袋将样品袋放在托盘上,每层托盘可放三个。一次最多可以在滤袋架上放24个滤袋。无论放置滤袋数量多少,8 层滤袋架上的托盘要全部使用,层与层之间错开120°。然后将装有滤袋的支架放入纤维分析仪消煮器中,将金属压锤放在支架顶部,以确保消煮过程中不浮起。5.4 消煮当处理24 个样品袋时,在消煮缸体内加入1900~2000 mL 已配好的中性洗涤剂溶液。如果处理的样品袋少于20 个,按照每个滤袋加100 mL 溶液,但不能少于1500 mL,要确保滤袋托盘能完全浸没。再向消煮缸体内加入20.0 g 无水亚硫酸钠和4.0 g α-高温淀粉酶。按下HEAT+AGITATE按键,设置处理时间75 min,确保滤袋支架搅拌正常。盖上盖子并完全密封好。仪器将加热并维持溶液温度100 °C。5.5 排废时间到后加热搅拌自动关停,消煮结束,按下EXHAUST按键,排出废液。*注:消煮器中的溶液是有压力的,在打开盖子之前一定将废液全部排尽以释放压力。5.6 水洗溶液排尽后,打开盖子,加2L (70°C~90°C) 的蒸馏水,并且第1次和第2次淋洗时同时加4.0 g α-高温淀粉酶,放下盖子,但不旋紧。按下FLUSH 按键,设置时间为5 min。重复2 次,共淋洗3 次。最后一次淋洗后,加冷的自来水以操作和使冷却容器,为下轮测定做好准备。5.7 浸泡丙酮将滤袋从滤袋支架上取下来,轻轻挤压去掉多余的水。然后将滤袋放入250 mL 烧杯中,加丙酮至浸没滤袋,浸泡3~5 min 后,取出并轻轻挤压去掉多余的丙酮。5.8 烘干并称重在通风橱中展开滤袋,让其自然干燥。完全干燥后放入102 °C±2 °C 烘箱中烘干2~4 h。*注:为避免滤袋燃烧,在丙酮完全挥发前不能把滤袋放入烘箱中。从烘箱中取出滤袋,直接放入干燥器中冷却至室温,称重记为m2。6 结果计算试样中中性洗涤纤维质量分数按以下公式计算:file:///C:\DOCUME~1\ADMINI~1\LOCALS~1\Temp\ksohtml\wps22D.tmp.png其中:m1——空滤袋质量,g;m——样品质量,g;m2——提取处理后样品残渣质量+滤袋质量,g;C——为空白滤袋校正系数(烘干后质量/原来质量)。7 安全注意 7.1 丙酮易燃,操作时应在通风橱中进行,避免吸入或与皮肤接触。将滤袋放入烘箱之前,要确保滤袋完全干燥,丙酮完全挥发。7.2 十二烷基硫酸钠对黏膜有刺激,因此操作时要带防尘口罩和手套。
尿干化学法分析仪和传统显微镜镜检是基于两种不同原理的检验手段,因此检测结果可能存在一定程度的差异。临床中两种诊断血尿方法常配合使用以达到检测效率与质量的统一,总结起来,对检测结果的影响因素主要有以下几方面。 3.1 假阳性 即尿干化学分析仪潜血实验呈阳性,但镜检却呈阴性 。其原因包括:(1)尿液分析仪潜血实验可与完整红细胞阳性反应,也能够与血红细胞释放的血红蛋白(hemoglobin,Hb)进行反应,这与显微镜只能够观察到完整的红细胞存在差异。健康人群尿Hb水平极低,定为阴性;(2)肌红蛋白(myoglobin,Mb)分子中包含Hb基团,当骨骼肌、心肌严重受损,血MB浓度升高,经肾排泄,导致尿液MB水平升高,潜血反应因此呈阳性,而显微镜检查却呈阴性;(3)部分患者尿中存在对热不稳定的酶,也可导致试剂块发生颜色变化,发生潜血反应;氧化性物质的污染也是造成潜血反应假阳性因素;高温或标本存放时间过长导致潜血反应阳性率增高 ;(4)尿试纸条超过保质期,或没有妥善保存、操作不当、仪器故障等均可能造成假阳性。 3.2 假阴性 即尿干化学分析仪潜血实验呈阴性,但镜检却呈阳性。其原因包括:(I)食物、药物影响:某些饮食、药物可引起尿液成份的改变如当尿液中存在大量的维生素时,维生素具有的强还原性使其竞争性结合反应产生的氧,导致尿试纸条无法出现潜血反应即出现假阴性反应;(2)高蛋白、高比重尿样削弱了试剂块潜血反应的敏感度,使能够发生反应的成分被包裹,反应试剂无法接触到,从而出现假阴性结果。 3.3 离心对检测结果的影响 离心中若速度过快,致使有形成分遭到破坏;但过慢时,沉渣中可能无法找到,以至于漏掉。因此对检验结果出现怀疑时,可实验潜血证实进行验证。总之,随着尿干化学分析仪普及,工作效率得到了极大提升,也使检测红细胞敏感度提高,但显微镜镜检也是无法替代的。对于疑似阳性反应的病例,应采用尿沉渣镜检进行复测,以求结论准确,提高检测可靠性。