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菌落总数检测

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菌落总数检测相关的论坛

  • 菌落总数的检测

    员工手部的菌落总数可不可以直接在培养基上涂抹呀?以前是用棉球檫拭后稀释培养,我现在想用倒好的培养基直接用手涂抹来检测菌落总数,不知道可不可以!做过的培养可以指教一下!谢谢

  • 乳酸菌和菌落总数的检测

    固体饮料里面有添加了乳酸菌,在检测固体饮料的菌落总数的时候,按照菌落总数的检测方法会把乳酸菌也给检测出来了吗? 这样的话其菌落总数一定会超标 ,没有可以执行的标准

  • 霉菌与菌落总数检测问题

    请教一下:霉菌与菌落总数检测时要在2个无菌室进行前处理吗?有的人说要分开检测,防止交叉污染;有的人说在一起操作没事。我想问有没有什么标准或文件说要分开操作,大家的实验室是怎么操作的?我说的实验室是通过资质认定或CNAS的检测机构

  • 浅谈水中菌落总数的检测方法

    [align=center][font='calibri light'][size=21px]浅谈水中菌落总数的检测方法[/size][/font][/align][align=left][font='calibri'][size=16px]之前在研究奶中菌落总数的检测方法的时候,偶然看到了水中菌落总数的方法,就想到既然都是液体,那是不是可以尝试用检测水中菌落总数的方法去检测牛奶中的菌落总数。[/size][/font][/align][align=left][font='calibri'][size=16px]我们先来看看水中菌落总数检测的方法。[/size][/font][/align][align=left][font='calibri'][size=16px]第一种:平皿计数法[/size][/font][/align][align=left][font='calibri'][size=16px]这个计数法是通过数菌落,一个单菌落就代表原样品中的一个单细胞。[/size][/font][/align][align=left][font='calibri'][size=16px]方法:样品10倍稀释→1ml稀释样品+15ml营养琼脂(45℃)混合→冷却凝固→37℃,48h培养。[/size][/font][/align][align=left][font='calibri'][size=16px]之后根据稀释倍数和取样接种量换算样品含菌数。[/size][/font][/align][align=left][font='calibri'][size=16px]第二种:酶底物法[/size][/font][/align][align=left][font='calibri'][size=16px]原理:不同细菌分泌的不同产物可分解不同底物产生同一种信号——荧光,此信号可以在366nm的紫外灯下显示,数对应荧光孔数查MPN表得结果,稀释水样范围<738MPN/mL。[/size][/font][/align][align=left][font='calibri'][size=16px]方法:1mL待测水样+9mL无菌水摇匀(培养基)→倒入定量盘,水平摇晃将液体充满孔槽→竖盘,棉条吸取多余水分→反向放置→37℃,48h培养→用366nm紫光灯照射,数带有荧光孔的数量。[/size][/font][/align][align=left][font='calibri'][size=16px]当时看到这个方法之后,就想到是不是能用这个方法检测牛奶的细菌总数,然后询问了一下师傅,才知道平皿计数法可以用于牛奶细菌总数的检测,但是酶底物法不太合适。因为水中除了细菌分泌产生的东西外,没有其他的物质。但是牛奶不一样,牛奶中含有脂肪,蛋白质,乳糖,矿物质等其他的物质,如果使用酶底物法会产生较大的误差,不适合牛奶的细菌总数的检测。[/size][/font][/align][align=left][font='calibri'][size=16px]虽然没有发现新的检测牛奶中细菌总数的方法,但是也学会了水中菌落总数的方法,希望能够对各位朋友提供帮助。[/size][/font][/align]

  • 【云唐仪器】菌落总数快速检测仪的作用

    [img=,690,690]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2024/04/202404251008416839_5929_5604214_3.jpg!w690x690.jpg[/img]  菌落总数快速检测仪的作用不仅限于食品安全领域,还广泛应用于医药、环保、农业等多个行业。以下是对其作用的具体探讨:  在食品安全领域,菌落总数快速检测仪能够迅速、准确地检测出食品中的微生物污染情况,为食品安全监管提供有力支持。在食品生产、加工、运输和销售的各个环节中,微生物污染是一个不可忽视的问题。一旦食品受到污染,不仅会影响食品的品质和口感,还可能对人体健康造成危害。而菌落总数快速检测仪则能够快速检测出食品中的微生物数量,帮助企业和监管部门及时发现并控制污染源,确保食品安全。  在医药领域,菌落总数快速检测仪同样具有重要的作用。药品作为一种特殊商品,其质量和安全性直接关系到患者的生命健康。药品在生产过程中,如果不严格控制微生物污染,就可能导致药品变质、失效甚至产生有害物质。而菌落总数快速检测仪则能够及时、准确地检测出药品中的微生物污染情况,为药品质量的监控和保障提供有力支持。  此外,在环保领域,菌落总数快速检测仪也能够发挥重要作用。水体、土壤等环境中的微生物污染是影响生态环境质量的重要因素之一。通过使用菌落总数快速检测仪,环保部门可以快速检测出环境中的微生物污染情况,为环境质量的评估和治理提供科学依据。  在农业领域,菌落总数快速检测仪同样具有应用价值。农业生产中,土壤和灌溉水中的微生物污染会直接影响作物的生长和产量。通过使用菌落总数快速检测仪,农民和农业部门可以及时了解土壤和水源中的微生物污染情况,采取相应的措施进行防治,提高农业生产效益和产品质量。  综上所述,菌落总数快速检测仪在多个领域中都具有广泛的应用价值,能够帮助人们快速、准确地检测出环境中的微生物污染情况,为各行业的健康发展提供有力支持。随着科技的不断进步和应用领域的不断拓展,相信菌落总数快速检测仪将会在未来发挥更加重要的作用。

  • 食品微生物检测菌落总数限量标准的疑问

    食品微生物检测,菌落总数限量标准规定样品中蛋白质含量大于40%时,菌落总数限量为40000,如果是氨基酸含量大于40%是否适用于这一限量标准呢?(正常情况下的限量标准是1000)

  • 【云唐仪器】菌落总数快速检测仪用途

    [img=,690,690]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2024/03/202403080953217092_7664_5604214_3.jpg!w690x690.jpg[/img]  菌落总数快速检测仪是一种广泛应用于食品安全、环境监测和医疗卫生等领域的仪器。它通过快速、准确地检测样品中的菌落总数,为各个领域提供了重要的信息,有助于保障公众的健康和安全。  在食品安全领域,菌落总数快速检测仪被广泛应用于食品生产和加工过程中的质量控制。通过对食品样品中的菌落总数进行检测,可以及时发现食品中的微生物污染情况,从而采取相应的措施进行处理,防止食品安全问题的发生。此外,菌落总数快速检测仪还可以用于食品储存和运输过程中的监测,确保食品在整个供应链中的质量稳定。  在环境监测领域,菌落总数快速检测仪可以用于检测水源、空气、土壤等环境中的微生物污染情况。通过对环境样品中的菌落总数进行监测,可以评估环境的卫生状况,及时发现污染源,为环境保护和治理提供有力的支持。  在医疗卫生领域,菌落总数快速检测仪对于医院、实验室等场所的卫生监测具有重要意义。通过对医疗器械、手术器械、手术室等环境的菌落总数进行检测,可以评估医疗环境的卫生状况,确保医疗过程的安全和有效性。  总之,菌落总数快速检测仪的用途广泛,不仅为食品安全、环境监测和医疗卫生等领域提供了便捷、准确的检测手段,也为保障公众健康和安全发挥了重要作用。随着科技的不断发展,相信菌落总数快速检测仪将会在更多领域得到应用和推广。

  • 【讨论】产品菌落总数检测

    想请问大家,在做产品菌落总数检验时有没有遇到过高稀释度平板上的菌落数反而比低稀释度平板上的菌落数多的情况?如果遇到这种情况,大家是怎么报告结果的?

  • 如何检测生乳中的菌落总数?

    如何检测生乳中的菌落总数?

    [align=center][size=18px]如何检测生乳中的菌落总数?[/size][/align][size=16px]微生物无处不在,生[/size][size=16px]乳中的微生物种类很多,主要有细菌、酵母菌、霉菌和噬菌体。目前最多的是要检测生乳中的菌落总数,那生乳中的菌落总数怎么测呢?[/size][size=16px]首先我们来看一下国家标准,标准规定生乳中菌落总数限量是≤2000000CFU/mL。[/size][size=16px]检测生乳中菌落总数一共有这几种方法。第一种是平板计数法,这种方法检测比较准确,但是检测的时间很长,因为它中间有一个48h的培养。如果着急的话这种方法就不太建议。第二种方法是美兰褪色法,美兰褪色法大家应该不陌生,就是在新鲜乳中加入亚甲基蓝,然后通过褪色的时间判断微生物的含量,褪色时间越快,微生物含量就越多。这样就能间接判断生乳的质量。还有一种方法就是用仪器检测了。[/size][size=16px]我们来详细介绍一下这个方法,前两种方法大家都烂熟于心了,我就不过多介绍了,我们来看看仪器检测该怎么用。[/size]1、 [size=16px]仪器介绍[/size][align=left][img=,690,284]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/10/202310181156583261_3551_6198248_3.png!w690x284.jpg[/img][/align][align=left][/align][align=left][size=16px]图一是仪器,图二是检测管,[/size][size=16px]菌落总数检测管底部的有一个透明的传感器,用于检测位于传感器上方的液体培养基中的微生物代谢所产生的 CO[/size][font='calibri'][sub][size=16px]2[/size][/sub][/font][font='calibri'][size=16px]。[/size][/font][size=16px]CO[/size][font='calibri'][sub][size=16px]2[/size][/sub][/font][size=16px] 是微生物代谢的普遍产物。当 CO[/size][font='calibri'][sub][size=16px]2[/size][/sub][/font][size=16px] 进入传感器时会改变其光学性质,并由暗色变为黄色(表明二氧化碳的存在)。只有气体可以穿过这个传感器,而液体、 微生物和颗粒物质均不能进入;这样光学读数不会被样本遮蔽。[/size][/align][align=left]2、 [font='calibri'][size=16px]操作步骤[/size][/font][/align][align=left][size=16px](1)将 25ml(g)固体样品加入 225ml 无菌生理盐水水中,混合均匀; [/size][/align][align=left][size=16px](2)吸取 1ml 稀释液加入 BFS-TVC 检测管中;拧紧摇匀后放入检测仪中。 [/size][/align][align=left][size=16px](3)在电脑中输入相关信息,点击“Start”开始检测; [/size][/align][align=left][size=16px]结果判定:曲线法定量检测,直接报告产品的 CFU 值;限定值法检测,在 系统运行过程中,如果出现 DT 检测时间,则样品菌含量超标;如果未出现DT,则样品菌含量不超标。 [/size][/align][align=left][size=16px]目前这几种方法就是最常用的方法,平板计数法,美兰褪色法,微生物仪器法。如果能有更加简便并且测试准确的方法就好了。仪器其实还是有些麻烦的,比较仪器体积很大,来回搬运不方便,还需要检测管的耗材。[/size][/align][align=left][size=16px]希望我总结的这几种方法能够对各位朋友提供一点帮助。[/size][/align][align=left][/align][align=left][/align]

  • 化妆品菌落总数检测的小知识

    测定菌落总数便于判明样品被污染的程度,是对化妆品进行卫生学总评价的综合依据。化妆品菌落总数检测所用到的培养基是卵磷脂、吐温80——营养琼脂培养基,并且需要在培养基里添加TTC(2,3,5-三苯基氯化四氮唑)。首先我们先聊聊为什么要用到卵磷脂、吐温80——营养琼脂培养基,而不是营养琼脂NA(培养细菌用的培养基),化妆品中一般含有防腐剂,防腐剂能够抑制细菌的生长,而卵磷脂能够中和防腐剂,能将潜在的被抑制的细菌复苏,这样才能真正体现化妆品被污染程度。另外我们还需要添加显色剂TTC(2,3,5-三苯基氯化四氮唑),因为很多化妆品本身就带有颜色,不加TTC的话很难看出是否有菌生长,便于区别化妆品中的颗粒与菌落,一般每100ml卵磷脂、吐温80——营养琼脂培养基加入1ml 0.5%的TTC溶液,如有细菌存在,培养后菌落呈红色,而化妆品的颗粒颜色无变化。注意的是,添加TTC溶液的时候不能过多,过多可抑制细菌生长。对于要做菌种鉴定的,尽可能不使用含有TTC的菌落来进行鉴定。

  • 饮用水检测 总大肠菌群和菌落总数检测 快速

    咨询各位大神了,饮用水检测中总大肠菌群和菌落总数的检测,要求快速检测或用便携式的仪器检测,各位论坛大神有用过什么,麻烦发上来,最好是按指标+方法+执行检测标准+仪器+厂家的格式。

  • 菌落总数计数

    请问各位同行,菌落总数检测,10的负2结果为菌落蔓延,10的负3结果 15 28,最后的报告是要以负2 还是负3的为准。。。。。

  • 【原创大赛】茶叶中菌落总数检测结果的测量不确定度评估

    【原创大赛】茶叶中菌落总数检测结果的测量不确定度评估

    茶叶中菌落总数检测结果的测量不确定度评估1. 概述1.1测量依据:GB4789.2 食品安全国家标准食品微生物学检验菌落总数测定。1.2环境条件:温度(20±4℃),相对湿度≤85% 。1.3测量标准:无。1.4测量对象:晒青毛茶、半成品茶、成品茶等。1.5测量过程:茶叶中菌落总数的测量过程见图1。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/07/201507011440_552715_2275853_3.png1.6评定结果的使用:在符合上述规定条件下的测量结果,若在测量仪器和人员等实验条件稳定的情况下,可直接使用本不确定度的评定结果。2. 评估模型2.1菌落总数测量的计算茶样经过处理,在恒温培养箱温度为36±1℃的条件下培养48±2h后,所得每g(mL)茶样中形成的微生物菌落总数。假设菌落总数测量时,选定2个测定平行,则茶样单位体积的菌落总数y可由下式算出:y = F·(N1+N2)/(V1+V2)……①式①中:y—茶样单位体积的菌落总数; F—茶样稀释倍数(10的若干指数倍);N1、N2—培养基平板的菌落计算结果; V1、V2—吸取的茶样液体体积,均为1。2.2菌落总数测量的数学评估模型建立在2.1中,式①为理论公式,而在实际测量过程中,1)茶样稀释、2)菌落总数在培养基平板上出现的随机误差、3)人员查计菌落总数的误差、4)培养基的菌落生长率、5)计数平板上菌落的重叠、6)茶样的不稳定、7)同一样品多次平行测量重复性等均会对检测结果有显著影响,即引入了测量不确定度。测量模型表示被测量(y)与各影响因子(x)之间的函数关系,一般通式为y = f(x1,x2, …, xn)。因此,根据GB 4789.2建立茶叶中菌落总数测量的数学评估模型为:y = f (R1,R2, R3, R4, R5, R6, R7) ……②在式②中,R1—茶样稀释过程引入的不确定度;R2—菌落总数在培养基平板上的随机误差引入的不确定度;R3—人员查计菌落总数引入的不确定度;R4—培养基菌落生长率引入的不确定度;R5—计数平板上菌落重叠引入的不确定度;R6—茶样不稳定引入的不确定度;R7—多次平行测量重复性引入的不确定度。3. 鱼骨图由菌落总数测量的数学评估模型的建立,绘制出茶叶中菌落总数测量的鱼骨图,见下图2。其中T表示温度,Temperature;C表示校准,Calibration;其他符号或字母代表的含义见2.2中的解释说明。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/07/201507011441_552716_2275853_3.png4. 茶叶中菌落总数测量的相对标准不确定度分量的计算由2.2可知菌落总数测量的的数学评估模型中7个不确定度分量相互独立,为方便不确定度运算,下面均以相对标准不确定度来表示各相应的不确定度。4.1茶样稀释过程引入的相对标准不确定度urel(R1)对于菌落总数的测量,在茶样的稀释过程中,茶汤的逐级稀释(将1mL的茶汤原液稀释为10mL)对测量结果的影响最为显著,而在此步骤,以移液器吸取1mL茶汤对菌落总数测量结果的影响更大。其中,影响移液器移取茶汤的不确定度分量有两个,一个是环境温度T,另一个是移液器自身校准的不确定度C。现对不确定度分量u (T)和u (C)分析如下:4.1.1环境温度引入的不确定度分量u(T)根据供应商提供的资料,茶样稀释使用的移液器在20℃下校准。实验室的环境温度控制在20±4℃,而茶样的稀释溶剂为实验室用水,经查阅实验室用水的体积膨胀系数为2.08×10-4(1/℃),依据溶剂的体积膨胀效应,茶样稀释产生的体积变化为±(1×4×2.08×10-4)mL=±8.32×10-4mL,故a=±8.32×10-4mL,假设其服从三角分布,u(T)=±3.40×10-4mL。4.1.2校准引入的不确定度分量u(C)茶样稀释时使用的移液器量程为1mL,根据供应商提供的移液器校准证书,1mL移液器在20℃的体积(1±0.027)mL,故a=±2.7×10-2mL,假设其服从三角分布,有u(C)=±1.10×10-2mL。由不确定度分量u (T)和u (C),利用其不确定度的合成,可计算出茶样稀释过程引入的相对标准不确定度urel(R1)= 1.10×10-2。4.2菌落总数在培养基平板上的随机误差引入的相对标准不确定度urel(R2)培养基计数平板上所查计的菌落总数均值是2个1mL所加茶样(茶样稀释匀液)中细菌经过分别培养出来的菌落总数均值。在一系列充分混匀的等量的粒子悬液(1mL茶样稀释均匀液)中粒子(细菌)数的随机性服从泊松分布(Poisson scatter),所以菌落总数(均值)在培养基平板上的随机误差的不确定度可用泊松分布来表示,其相对标准不确定度urel(R2)为均值的倒数。实验室茶样的2个测定平行,茶样单位体积的培养基平板菌落计算结果为N1=47,N2=33,即可算出urel(R2)= 2.25×10-2。4.3人员查计菌落总数引入的相对标准不确定度urel(R3)测定(检测)人员在查计培养基平板上的菌落时,因经验和计数平板上菌落的复杂培养结果等而出现误差,该误差通过对同一个培养基平板的菌落进行多次计数后统计得出,采用贝塞尔公示urel(R3)=计算,试验数据详细见下表1。urel(R3)= 8.717×10-3。表1同一个培养基平板的菌落进行多次计数 平板计数 // 次 1 2 3 4 5 [a

  • 菌落总数检测

    做菌落总数的时候,要做5个稀释度,液体的是:原液、10(-1)、10(-2)、10(-3)、10(-4),固体的是:10(-1)、10(-2)、10(-3)、10(-4)、10(-5),每一个需要做两个平板,共需要5个试样,总共需要50个平板进行培养,大神们,是不是这样?审核的时候,有的审核员说是这样,有的说不需要这么多,按GB4789.2-2022执行,需要2-3个稀释度的样品就可以,现在把我都搞蒙了,求个标准说法

  • 菌落总数的快速测定方法

    菌落总数的快速测定方法1 适用范围:可用于各类食品及原料中菌落总数的测定。也可用于与食品接触的容器、操作台和其他设备表面的卫生检测。2 方法原理:将营养培养基、凝胶和氯化三苯基四氮唑(TTC)显色剂等加载在试纸片,经加样、培养后,细菌菌落在测试片上显现出红色菌斑,通过计数报告结果。3 操作方法3.1样品处理:无菌称取样品25g(或25mL)放入含有225mL无菌生理盐水的采样瓶或均质杯内,经充分振摇(均质)做成1:10的稀释液。用1mL灭菌吸管吸取1:10稀释液1mL,注入含有9mL灭菌生理盐水的试管内,用1mL灭菌吸管反复吸吹制成1:100的稀释液。以此类推,做出1:1000等稀释度的稀释液,每个稀释度更换一支灭菌吸管。3.2接种:一般食品选2~3个稀释度进行检测,含菌量少的液体样品(如食用纯水和矿泉水等)可直接用原液检测。将测试片放在水平台面上,揭开上面的透明薄膜,用灭菌吸管吸取样品原液或稀释液1mL,均匀加到中央的纸片上,轻轻将上盖膜放下,静置5 min使培养基凝固,最后用手轻轻地压一下。每个稀释度接种两片。3.3培养:将测试片叠在一起放回原自封袋中,透明面朝上水平置于恒温培养箱内,堆叠片数不超过12片。培养温度为36℃±1℃,培养15~24h。4 结果判断与计数:4.1细菌在纸片上生长后会显示红色斑点,选择菌落数适中(10个~100个)的纸片进行计数,乘以稀释倍数后即为每克(或毫升)样品中所含的细菌菌落总数。菌落数在100以内时,按实有数报告。大于100时,用二位有效数字,二位有效数字后面的数字,以四舍五入方法计算,并以10的指数来表示。4.2计数原则与报告方式4.2.1通常选择菌落在10个~100个之间的纸片进行计数,乘以稀释倍数报告之(见下表中例次1)。国家标准菌落总数报告方式术语为cfu/g或mL,cfu的含义为菌落形成单位。4.2.2若有两个稀释度的菌落数在10个~100个之内,两者的比值小于2,则取其平均数,若大于2,则采用稀释度小者报告(见下表中例次2和例次3)。4.2.3若三个稀释度的菌落数都有在10个~100个之内时,应选择二个低数值的平均数(见下表中例次4)。4.2.4若三个稀释度的菌落数均小于10个或大于100个时,应重新试用更低或更高的稀释度进行菌落计数;或采用均小于数量标准的最小值,或采用均大于数量标准的最大值(见下表中例次5和例次6)。 例次稀释度两稀释 度之比选定计数 稀释度报告方式 (个/g或 个/mL)10-110-210-31 2 3 4 5 6158 208 265 98 8 295

  • 请教蛋白型固体饮料菌落总数的检验方法?

    我们有个蛋白质含量约45%-60%的蛋白型固体饮料,公司制定菌落总数的检测标准依据GB/T 4789.21进行检验,可是在我们公司检验菌落总数是合格的但送我们省质检院检验就会检测出十几万的菌落总数?GB/T 4789.21这检验方法我们公司很多产品都在用都没有出现问题,就是蛋白型固体饮料与质检院检测结果相差太大。请教各位高手是不是蛋白型固体饮料做微检时有特殊的处理方法?或者需要注意什么?谢谢

  • 【菌落总数】

    一、菌落总数介绍:  菌落是指细菌在固体培养基上生长繁殖而形成的能被肉眼识别的生长物,它是由数以万计相同的细菌集合而成。当样品被稀释到一定程度,与培养基混合,在一定培养条件下,每个能够生长繁殖的细菌细胞都可以在平板上形成一个可见的菌落。  菌落总数就是指在一定条件下(如需氧情况、营养条件、pH、培养温度和时间等)每克(每毫升)检样所生长出来的细菌菌落总数。按国家标准方法规定,即在需氧情况下,37℃培养48h,能在普通营养琼脂平板上生长的细菌菌落总数,所以厌氧或微需氧菌、有特殊营养要求的以及非嗜中温的细菌,由于现有条件不能满足其生理需求,故难以繁殖生长。因此菌落总数并不表示实际中的所有细菌总数,菌落总数并不能区分其中细菌的种类,所以有时被称为杂菌数,需氧菌数等。  菌落总数测定是用来判定食品被细菌污染的程度及卫生质量,它反映食品在生产过程中是否符合卫生要求,以便对被检样品做出适当的卫生学评价。菌落总数的多少在一定程度上标志着食品卫生质量的优劣。二、检验方法  菌落总数的测定,一般将被检样品制成几个不同的10倍递增稀释液,然后从每个稀释液中分别取出1mL置于灭菌平皿中与营养琼脂培养基混合,在一定温度下,培养一定时间后(一般为48小时),记录每个平皿中形成的菌落数量,依据稀释倍数,计算出每克(或每ml)原始样品中所含细菌菌落总数。  基本操作一般包括:样品的稀释--倾注平皿--培养48小时--计数报告。  国内外菌落总数测定方法基本一致,从检样处理、稀释、倾注平皿到计数报告无何明显不同,只是在某些具体要求方面稍有差别,如有的国家在样品稀释和倾注培养进,对吸管内液体的流速,稀释液的振荡幅度、时间和次数以及放置时间等均作了比较具体的规定。  检验方法参见:  GB4789.2-94 《中华人民共和国国家标准 食品卫生微生物学检验 菌落总数测定》  SN0168-92 《中华人民共和国进出口商品检验行业标准 出口食品菌落计数》三、说明(一)样品的处理和稀释:  1.操作方法:以无菌操作取检样25g(或25ml),放于225mL灭菌生理盐水或其他稀释液的灭菌玻璃瓶内(瓶内预置适当数量的玻璃珠)或灭菌乳钵内,经充分振要或研磨制成1:10的均匀稀释液。  固体检样在加入稀释液后,最好置灭菌均质器中以8000~10000r/min的速度处理1min,制成1:10的均匀稀释液。  用1ml灭菌吸管吸取1:10稀释液1ml,沿管壁徐徐注入含有9ml灭菌生理盐水或其他稀释液的试管内,振摇试管混合均匀,制成1:100的稀释液。  另取1ml灭菌吸管,按上项操作顺序,制10倍递增稀释液,如此每递增稀释一次即换用1支1ml灭菌吸管。  2.无菌操作:操作中必须有“无菌操作”的概念,所用玻璃器皿必须是完全灭菌的,不得残留有细菌或抑菌物质。所用剪刀、镊子等器具也必须进行消毒处理。样品如果有包装,应用75%乙醇在包装开口处擦拭后取样。  操作应当在超净工作台或经过消毒处理的无菌室进行。琼脂平板在工作台暴露15分钟,每个平板不得超过15个菌落。  3.采样的代表性:如系固体样品,取样时不应集中一点,宜多采几个部位。固体样品必须经过均质或研磨,液体样品须经过振摇,以获得均匀稀释液。  4.样品稀释误差:为减少样品稀释误差,在连续递次稀释时,每一稀释液应充分振摇,使其均匀,同时每一稀释度应更换一支吸管。  在进行连续稀释时,应将吸管内液体沿管壁流入,勿使吸管尖端伸入稀释液内,以免吸管外部粘附的检液溶于其内。  为减少稀释误差,SN标准采用取10mL稀释液,注入90mL缓冲液中。  5.稀释液:样品稀释液主要是灭菌生理盐水,有的采用磷酸盐缓冲液(或0.1%蛋白胨水),后者对食品已受损伤的细菌细胞有一定的保护作用。如对含盐量较高的食品(如酱油)进行稀释,可以采用灭菌蒸馏水。(二)倾注培养  1.操作方法:根据标准要求或对污染情况的估计,选择2~3个适宜稀释度,分别在制10倍递增稀释的同时,以吸取该稀释度的吸管移取1ml稀释液于灭菌平皿中,每个稀释度做两个平皿。  将凉至46℃营养琼脂培养基注入平皿约15ml,并转动平皿,混合均匀。同时将营养琼脂培养基倾入加有1ml稀释液(不含样品)的灭菌平皿内作空白对照。  待琼脂凝固后,翻转平板,置36±1℃温箱内培养48±2h,取出计算平板内菌落数目,乘以稀释倍数,即得每克(每毫升)样品所含菌落总数。  2.倾注用培养基应在46℃水浴内保温,温度过高会影响细菌生长,过低琼脂易于凝因而不能与菌液充分混匀。如无水浴,应以皮肤感受较热而不烫为宜。  倾注培养基的量规定不一,从12~20ml不等,一般以15ml较为适宜,平板过厚可影响观察,太薄又易于干裂。倾注时,培基底部如有沉淀物,应将底部弃去,以免与菌落混淆而影响计数观察。  3.为使菌落能在平板上均匀分布,检液加入平皿后,应尽快倾注培养基并旋转混匀,可正反两个方向旋转,检样从开始稀释到倾注最后一个平皿所用时间不宜超过[

  • 菌落总数的检验讨论

    菌落总数的检验讨论

    [align=center][font=宋体]菌落总数的检验讨论[/font][/align][align=center][font=宋体] [/font][/align][font=宋体][font=宋体]概念理解[/font] [/font][font=宋体]1、菌落总数英译实为需氧菌平板计数,并不表示实际样品中的所有细菌总数。由于倾注平板法的局限,会有一部分细菌在该实验条件下不生长,故计数结果要比实际值低。 [/font][font=宋体]2、菌落总数并不能区分其中细菌的种类。实际上是把检样中的致病菌、非致病菌、酵母 菌、霉菌都计算在内的微生物杂菌总数。 [/font][font=宋体]3、菌落总数的卫生学意义:用于判定样品受污染的程度、微生物生长存活动态,对样品进行综合卫生评价。反映食品被细菌污染的程度 预测食品耐放程度和时间 估测食品腐败 状况。[/font][font=宋体]菌落:[/font][i][font=宋体]Colony[/font][/i][font=宋体][font=宋体],单个微生物在适固体培养基表面或内部生长繁殖到一定程度;形成肉眼可见有一定细菌群落。[/font] [font=宋体]CFU: [/font][/font][i][font=宋体]Colony Forming Units[/font][/i][font=宋体][font=宋体],菌落形成单位[/font] [/font][font=宋体][font=宋体]鉴于食品的细菌细胞是以单个、成双、链状、葡萄状或成堆的形式存在,因而在平板上出现的菌落可以来源于细胞块,也可以来源于单个细胞,因而平板上所得菌落的数字不应报告活菌数,而应以单位重量、容积或表面积内的菌落数或菌落形成单位([/font][font=宋体]colony forming units,CFU)报告。 [/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]4.检验步骤直接上图[/font][img=,690,443]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/08/202308011004578351_4999_6113937_3.png!w690x443.jpg[/img][font=宋体] [/font][font=宋体]5.培养温度: [/font][font=宋体]? 一般食品:36℃±1℃,培养48h ±2h [/font][font=宋体]? 水产品: 30℃±1℃,培养72h ±3h[/font][font=宋体][font=宋体]注意呀:未加工水产品受到海洋和陆地细菌的污染,[/font] [font=宋体]水产品的培养温度,由于其生活环境水温较低,检验时应采用[/font][font=宋体]30℃±1℃。水产品定义见GB 2760或GB2762 [/font][/font][font=宋体]此处并非指水产制品[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]6.[/font][font=宋体]操作注意事项:[/font][font=宋体][font=宋体]每个样品从开始稀释到倾注平皿所用的时间不得超过[/font][font=宋体]15min,主要为 [/font][/font][font=宋体][font=宋体]防止细菌增殖和产生片状菌落。(因肠杆菌科繁殖一代所需的时间为[/font] [/font][font=宋体]20min,故选择在15min内) [/font][font=宋体]? 样液与琼脂应充分混合,避免将混合物溅到平皿壁和皿盖上。平皿内 [/font][font=宋体][font=宋体]琼脂凝固后,不要长时间放置,然后倒置培养,可避免菌落蔓延生长。[/font] [/font][font=宋体]? 检样过程中应用稀释剂做空白对照,用以判定稀释液、培养基、平皿或吸管可能存在的污染。应为吸取1mL空白稀释液加入到两个无菌平皿内,可表示为空白对照平皿结果0/0。[/font][font=宋体][color=#000090] [/color][/font][font=宋体][font=宋体]选取菌落数在[/font][font=宋体]30~300CFU之间,无蔓延生长的平板计数 [/font][/font][font=宋体][font=宋体]低于[/font][font=宋体]30的记录具体菌落数,大于300的 可记录为多不可计,每个稀释度采用两个平行的均数。 [/font][/font][font=宋体][font=宋体]有较大片状菌落生长者不宜采用,若片状小于平板一半时且余部均匀分布,则以半个平板菌落数[/font][font=宋体]2倍报告 [/font][/font][font=宋体][font=宋体]无明显界限链状菌落每条单链视为一个菌落[/font] [font=宋体](可采用覆盖方式减少菌落蔓延,如对水产、蜂蜜样品时)[/font][/font][font=宋体] [/font]

  • 【第二届网络原创作品大赛】食品卫生微生物学检测菌落总数测定测量结果的不确定度评定

    食品卫生微生物学检测菌落总数测定测量结果的不确定度评定依据JJF1059-1999《测量不确定度评定与表示》、CNAL/AG06《测量不确定度政策实施指南》和CNAL/AR11《测量不确定度政策》分析一、测量方法按照国家标准GB/T4789.2-2003《食品卫生微生物学检验菌落总数测定》规定的检测程序进行。检测过程为:1) 以无菌操作将检样25g(mL)剪碎放于含有225mL灭菌生理盐水或其它稀释液灭菌玻璃瓶内(瓶内预置适当数量的玻璃珠)或灭菌乳钵内,经充分振摇或研磨做出1:10的均匀稀释液。固体检样在加入稀释液后,最好置均置器中以8000r/min~10000r/min的速度处理1min,做出1:10的均匀稀释液。2) 用1mL灭菌吸管吸取1:10稀释液1mL,沿管壁徐徐注入含有9mL灭菌生理盐水或其它稀释液的试管内(注意吸管尖端不要触及管内稀释液),振摇试管,混合均匀,做出1:100的稀释液。3) 另取1mL灭菌吸管,按上条操作方法,做10倍递增稀释,如此每递增稀释一次,即换用1支1mL灭菌吸管。4) 根据食品卫生标准要求或对标本污染情况的估计,选择2个~3个适宜稀释度,分别在做10倍递增稀释的同时,即以吸取该稀释度的吸管移1mL稀释液于灭菌培养皿内,每个稀释度做两个培养皿。5) 稀释液移入培养皿后,应及时将凉至46℃营养琼脂培养基(可放置于46℃±1℃水浴保温)注入培养皿约15mL,并转动培养皿使混合均匀。同时将营养琼脂培养基倾入加有1mL稀释液灭菌培养皿内作空白对照。6) 待琼脂凝固后,翻转平板,置36℃±1℃温箱内培养48h±2h。7) 作平板菌落计数时,可用肉眼观察,必要时用放大镜检查,以防遗漏。在记下各平板的菌落数后,求出同稀释度的各平板平均菌落总数。8) 选取菌落数在30~300之间的平板作为菌落总数测定标准。一个稀释度使用两个平板,应采用两个平板平均数,其中一个平板有较大片状菌落生长时,则不宜采用,而应以无片状菌落生长的平板作为该稀释度的菌落数,若片状菌落不到平板的一半,而其余一半中菌落分布又很均匀,即可计算半个平板后乘2以代表全皿菌落数。平板内如有链状菌落生长时(菌落之间无明显界线),若仅有一条链,可视为一个菌落;如果有不同来源的几条链,则应将每条链作为一个菌落计。同一样品重复测量10次,取其平均值作为测量结果。10次重复测量的结果见表1。表1 单一样品重复测量的计算过程序号测量结果xilgxilgxi- (lgxi- )21350004.5441-0.030670.0009412880004.94450.369730.136731000005.00000.425230.18082142000005.30100.726230.527415650004.81290.238130.056706696003.9823-0.592470.3510217500004.69900.124230.015433898003.9912-0.583570.340554990003.9542-0.620570.38510710330004.5185-0.056270.003166平均值599404.5748二、数学模型从数据看,由于测量结果发散极大,与之相比其它不确定度来源(人员、标准、设备、环境、方法等)无疑均可以忽略不计,这也是微生物测量的特点。因此仅考虑由测量结果发散引入的不确定度分量。于是数学模型可以简单地写为y=x三、测量不确定度评定由于重复测量结果中最大值和最小值相差20倍。因此用常规的直接根据平均值得到标准偏差的方法显得有些不合理。通常的做法是取对数以后在用常规的贝塞尔方法进行计算。具体计算过程如下:1) 测量结果xi(表1第2列);2) 取对数lgxi,得到对数lgxi的平均值为: =4.5748(表1第3列);3) 求残差lgxi- (表1第4列)4) 求残差的平方(lgxi- )(表1第5列),得到残差平方和为 =1.9978595) 合成标准不确定度测量结果为10次重复测量的平均值,故平均值的标准不确定度为 =0.14906) 扩展不确定度由于置信概率p=95%,自由度ν=10-1=9,由t分布表可得k=2.26。于是 7) 取反对数,由lgx坐标回到x坐标由于lgx与x之间的非线性关系,不能直接求扩展不确定度U的反对数,只能给出微生物含量的可能区间。因此首先确定lgx的取值范围为:lgx=4.5748±0.3367,或写成4.2381≤lgx≤4.9115取反对数后可得 1.7×104≤x≤8.2×104四、不确定度报告由于微生物测量结果的特殊性,所以其测量结果的不确定度表示也与其他专业不同。按照国家标准GB/T4789.2-2003《食品卫生微生物学检验菌落总数测定》规定的检测程序进行,被测样品微生物菌落总数(十次测量平均值)在1.7×104和8.2×104之间。[img]http://bbs.instrument.com.cn//images/affix.gif[/img][url=http://bbs.instrument.com.cn/download.asp?ID=194237]食品卫生微生物学检测菌落总数测定测量结果的不确定度评定.doc[/url][color=#DC143C][size=4][font=黑体]应疯子哥的要求,把公式及图片贴上来,在5楼-7楼有版主ROGERSW的完整佳作。[/font][/size][/color]

  • 【求助】请教:关于菌落总数增长倍数的疑问

    1、不同的测试机构,相同的测试样机,96小时后,巴氏杀菌乳的菌落增长倍数相差很大。请问这和测试机构选择的巴氏杀菌乳的不同有多大的关系?2、牛奶厂刚生产时出具的报告显示巴氏杀菌乳的菌落总数是900,而24小时后,检测机构开始测试时,菌落总数已达到27000,菌落总数增长倍数和原样的菌落总数两者有什么样定性和定量的关系呢?请各位大侠指点

  • 75酒精可以杀灭菌落总数吗?

    各位老师好,请教一个问题,用75%的酒精消毒之后会杀灭菌落总数吗?现实我们检测食品内包装箱菌落总数总是超标,结果用75%酒精消毒(喷洒纸箱内层)之后菌落总数还是超标。

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