共聚焦仪

ECHO 共聚焦可阻挡离焦光，提供比传统宽场显微镜更高分辨率的图像。共聚焦为最小的样品带来更好的清晰度，并能够对较厚的样品进行成像。该系统还减少了光漂白，适合活细胞应用。ECHO 共聚焦采用更小的占地面积、直观的软件和易于观察的设计，线缆更少，重新定义了传统的、复杂的共聚焦体验。转盘共聚焦具有以下优点：• 速度快：可以高速获取活细胞共聚焦显微图像，与扫描式激光共聚焦系统相比，可以立即捕获整个视野，扫描式激光共聚焦一次只能扫描一个点。而转盘共聚焦平铺扫描和z轴堆叠的速度更快，更具优势。• 极具竞争力的转盘共聚焦价格：可以同时兼顾转盘共聚焦和宽场自动显微镜的优势，也能够实现96孔平板转盘共聚焦高内涵（HCS）功能，而且操作更加简便，一机多用。• 光毒性小：ECHO转盘共聚焦对样品更温和，有效减少漂白和对细胞的损伤，帮助用户延长实验时间。• 更便捷：通过简化设计，我们制造了一种比同类其他系统更便捷的共聚焦。ECHO转盘共聚焦结合了ECHO自己的宽场显微镜Revolution的软件，使用极其简单，同时兼具Revolution的所有功能。Revolution的用户可直接上手，过渡平滑无压力；其他用户经过简单的培训也可以快速上手，操作简单化和便捷性完全区别于市面上其他共聚焦，让共聚焦操作不再复杂。搭载ECHO培养箱的共聚焦活细胞样品观察系统ECHO 共聚焦也可搭配培养箱进行活细胞实验，搭配延时摄影可进行长时间活细胞观察。ECHO培养箱完全无风扇，利用对流来加热和循环暖空气。这样可以消除振动，防止外部灰尘进入样品和光学元件。透明结构为用户提供了清晰的视野，并且方便轻松取用样品。轻巧的设计使安装和拆卸变得非常快速和容易。ECHO转盘共聚焦已在美国上市近一年，产品已经过美国市场验证，如今终于走进国内。2024年1月23日，美国工程师同ECHO Confocal一同来到艾普拜苏州技术示范中心，为我们的国内合作伙伴进行了展示和讲解。这也是ECHO Confocal的国内首秀。如您想了解更详细信息欢迎致电艾普拜，我们将竭诚为您服务。

1957年，美国科学家Marvin Minsky提出了共聚焦显微镜的基本概念，并将共聚焦技术注册为专利。但直至1980年代末专用激光器的发展相对成熟时，共聚焦技术才成为标准技术。如今，共聚焦显微镜已成为生物学和医学研究最重要的仪器之一，在材料研究和工业检测领域也有着广泛应用。本文对“重大科研基础设施和大型科研仪器国家网络管理平台”上的共聚焦显微镜数据进行了盘点分析，全国共有502个平台登记了共聚焦显微镜，单位性质主要包括高校和科研院所。根据仪器信息网稍早前调研，共聚焦显微镜货值在100万元以上的占比为93.3%，200万元以上占比为66.6%，300万元以上占比约为35%。共聚焦显微镜价格平均值为260万元左右，根据配置不同，价格也不一样。本次统计该平台共有共聚焦显微镜近1500套，估算总价值近四十亿。那么科研市场上，这些共聚焦显微镜启用时间、地域、应用学科和主要品牌分布如何呢？图1 科研市场共聚焦显微镜价格分布（数据来源于仪器信息网的中标统计）从地域来看，共聚焦显微镜分布区域覆盖全国30个省级行政区，数量前五的省市分别是北京市、上海市、江苏省、广东省和浙江省，前五省共聚焦显微镜共享数量之和超过总数的五成。图2 共享共聚焦显微镜地域分布从仪器启用时间来看，1999年-2013年这15年间各大科研平台的共聚焦显微镜呈指数增长，2016年共享数量达到最高，最近五年数量呈现下降趋势。这里需要指出的是，“重大科研基础设施和大型科研仪器国家网络管理平台”正是在2016年初步建成并进行试运行，2016年启用数量最多或许与该年份大规模数据采集有一定关系。图3 共享共聚焦显微镜启用时间分布共聚焦显微镜在生物学/医学领域的应用最为普遍，甚至在许多文献中表述共聚焦显微镜为“生物医学成像仪器”或“细胞生物学分析仪器”，有数据显示，现如今全球范围内有2500多个细胞生物学实验室使用共聚焦显微镜辅助研究。材料领域是共聚焦显微镜的另一大应用领域，在半导体、芯片、金属等材料科学研究及生产检测领域应用较多。除了上述两个研究领域的应用，共聚焦显微镜也应用于石油地质学、植物学、食品研究等领域。本次共享平台数据中，从学科来看，共聚焦显微镜分布如图4，73.6%的仪器主要用于生物和医学研究中，材料研究占比为23%，农学/食品科学占比为3.1%。图4 共聚焦显微镜应用学科分布目前中国科研市场，高端光学显微镜仍是进口品牌的天下。共聚焦显微镜的主流品牌有蔡司、徕卡、奥林巴斯、尼康、安道尔等。本次统计中，徕卡26.74%，蔡司26.25%，奥林巴斯22.08%，尼康12.12%。“四大家”的品牌占比之和为87.18%。此外，牛津仪器旗下的安道尔品牌占比第五，为2.51%。全部共享仪器中，只有1台国产仪器，为苏州医工所研制。图5 共享平台共聚焦显微镜品牌分布从应用领域来看，虽然仍然是“四大家”品牌占据绝对优势，但不同应用领域各个品牌的占比也有所不同。生物学/医学领域，前六分别是徕卡、蔡司、奥林巴斯、尼康、安道尔、珀金埃尔默、GE医疗；材料科学领域，前六分别是奥林巴斯、蔡司、徕卡、尼康、YONEKURA、基恩士。根据仪器信息网调研，2019年共聚焦显微镜市场规模约为11亿，近年来，需求仍十分旺盛，增长率超过20%。我国共聚焦显微镜的发展起步较晚，除了上文中提到的苏州医工所，近一年，共聚焦显微镜的玩家增多，永新光学于2020年年底正式发布共聚焦显微镜新产品，而去年年初，北京世纪桑尼也发布了共聚焦模块，并计划与合作伙伴共同推出共聚焦显微镜。今年9月，一家名为熵智科技的创业公司发布了一款超分辨及共聚焦显微镜新品 。由此看来，我国已经加快了共聚焦显微镜追赶国际的步伐，未来，在国产仪器相关支持政策的加持下，科研共享平台必将有更多国产共聚焦显微镜的身影。

安捷伦今日宣布在BioTek Cytation C10 共聚焦微孔板成像检测系统中引入水镜和新型共聚焦转盘技术。这些技术通过减少对活细胞样品的有害影响来提高组织和 3-D 细胞球体等较厚样品的成像清晰度，从而改善图像质量和数据结果。在光学显微镜中，水镜技术是在物镜和样本之间自动注水并形成稳定持续的水层。与空气相比，水的折射率更高，能够有效地增加物镜的数值孔径，提高Z轴分辨率，从而获得更高的图像质量和更真实的细胞和组织三维模型。水镜技术还可减少曝光时间，从而降低传统方法在这些实验中通常会产生的光毒性作用，帮助越来越多的研究人员得以开展能直接反映生理生化水平变化的活细胞实验，此类实验与固定细胞实验大为不同。转盘式共聚焦成像技术通过阻挡非焦平面的光到达图像传感器，从而改善显微成像质量。适用于深层组织成像的新型共聚焦转盘（DSD）现作为 Cytation C10的全新选配件，能够帮助研究人员更清晰更深入地观察厚样品。通过DSD获得清晰且锐利的图像非常适合定量分析应用。安捷伦细胞分析事业部市场营销助理副总裁Caleb Foster表示：“Cytation C10 新增了水镜和适用于深层组织穿透的共聚焦转盘，为需要更好成像性能来实现活细胞和3D应用的研究人员提供了重要的新功能。随着人们对更复杂的生理学相关活细胞模型的需求不断增长，Cytation C10将是一款极具价值且能够带来变革的研究工具，用以支持相关领域的成像应用。”Cytation C10作为一款经济实惠的高性能共聚焦显微镜系统，采用了高质量设备组件，包括 Hamamatsu （滨松）科学级 CMOS（sCMOS）相机、奥林巴斯物镜和激光照明。机载环境控制、宽场荧光、明场和相差光学模块进一步增强了系统的成像性能。此外，将其与Agilent BioTek BioSpa 8 全自动培养箱集成，可实现高效的多板位活细胞分析。12月20-22日生物显微技术大会预告：点击图片报名报名链接：https://www.instrument.com.cn/webinar/meetings/swxw2023/

安捷伦近日宣布在 BioTek Cytation C10 共聚焦微孔板成像检测系统中引入水镜和新型共聚焦转盘技术。这些技术通过减少对活细胞样品的有害影响来提高组织和 3D 细胞球体等较厚样品的成像清晰度，从而改善图像质量和数据结果。在光学显微镜中，水镜技术是在物镜和样本之间自动注水并形成稳定持续的水层。与空气相比，水的折射率更高，能够有效地增加物镜的数值孔径，提高 Z 轴分辨率，从而获得更高的图像质量和更真实的细胞和组织三维模型。水镜技术还可减少曝光时间，从而降低传统方法在这些实验中通常会产生的光毒性作用，帮助越来越多的研究人员得以开展能直接反映生理生化水平变化的活细胞实验，此类实验与固定细胞实验大为不同。转盘式共聚焦成像技术通过阻挡非焦平面的光到达图像传感器，从而改善显微成像质量。适用于深层组织成像的新型共聚焦转盘（DSD）现作为 Cytation C10 的全新选配件，能够帮助研究人员更清晰更深入地观察厚样品。通过 DSD 获得清晰且锐利的图像非常适合定量分析应用。上图为使用标准 60 µ m 转盘（左）和 60 µ m DSD（右）采集的细胞球体 Z 轴切片图像。深层切片转盘让有厚度的生物样本内部细节清晰可见，适用于深层组织穿透的共聚焦转盘（DSD）减少了厚组织样本内的信号干扰，从而可以清晰地观察厚组织样本和细胞球体。从具有挑战的（厚）样本类型中获得更详细的数据。安捷伦细胞分析事业部市场营销助理副总裁 Caleb Foster 表示：“Cytation C10 新增了水镜和适用于深层组织穿透的共聚焦转盘，为需要更好成像性能来实现活细胞和 3D 应用的研究人员提供了重要的新功能。随着人们对更复杂的生理学相关活细胞模型的需求不断增长，Cytation C10 将是一款极具价值且能够带来变革的研究工具，用以支持相关领域的成像应用。”Cytation C10 作为一款经济实惠的高性能共聚焦显微镜系统，采用了高质量设备组件，包括 Hamamatsu（滨松）科学级 CMOS（sCMOS）相机、奥林巴斯物镜和激光照明。机载环境控制、宽场荧光、明场和相差光学模块进一步增强了系统的成像性能。此外，将其与 Agilent BioTek BioSpa 8 全自动培养箱集成，可实现高效的多板位活细胞分析。Cytation C10与Biospa8整合实现多板位活细胞分析

一台简单的倒置荧光显微镜，搭配CSIM 100单点扫描模块，就可以快速升级为共聚焦成像系统，实现高分辨率共聚焦成像。 对，是共聚焦，您没有看错！让您实验室的显微镜大-变-身！轻松获取高端大气上档次的照片！快来看看是如何实现的吧！ CSIM 100是一款单点扫描模式的共聚焦产品，可通过C接口与任意品牌的荧光显微镜连接，将原有的宽场荧光成像方式升级为共聚焦成像方式，全面提升成像质量。Coherent OBIS激光器使用相干公司OBIS LX系列激光器，相比于普通的半导体激光器，在波长稳定性、功率稳定性、光束质量上有明显优势。可提供高质量、高品质的光源。优点：最多可同时配置4个激光器固体或半导体激光器长寿命，可达10000小时稳定性好，8小时功率变化＜2%即开即用，操作方便Hamamatsu滨松PMT使用目前的新一代高性能产品：R10699多碱PMT，相比国外品牌的上一代共聚焦产品使用的R928，灵敏度提高超过一倍。可升级为磷砷hua镓（GaAsP），进一步提高了图像的信噪比： GaAsP 的量子效率达到45%。优点：高性能多碱PMT*光谱响应范围185nm~900nmQE 25%@500nm20%@600nm* 可升级为GaAsPSunny XY高速扫描振镜搭载Sunny XY高速扫描振镜后，单向扫描512*512成像速度可达4fps，适用于多细胞大视野的检测应用。*已经为zeiss OCT项目供货。优点：响应时间快重复精度高发热量低温度漂移小其它配件共聚焦/宽场切换接口接口可同时连接共聚焦和相机，可自由选择共聚焦成像或相机成像电动Z轴马达使手动显微镜实现自动调焦功能，实现XYZ三维扫描软件功能全中文界面，简单易用全软件控制完成多维图像采集，实现多通道扫描、时间序列和Z轴序列成像可在用户自定义的ROI(感兴趣区域）内进行成像、光漂白和光刺激全软件控制数据记录，支持成像参数管理导出支持多种图像输出格式

一、项目基本情况项目编号：GXZC2023-J1-001494-JDZB项目名称：超高分辨场发射扫描电子显微镜采购采购方式：竞争性谈判预算金额：275.0000000 万元（人民币）最高限价（如有）：275.0000000 万元（人民币）采购需求：超高分辨场发射扫描电子显微镜1台。如需进一步了解详细内容，详见谈判文件。合同履行期限：自签订合同之日起120个工作日内完成产品安装、调试，通过验收并交付使用。本项目( 不接受 )联合体投标。1.采购人信息名 称：广西师范大学　　　　　地址：广西桂林市雁山区雁中路1号　　　　　　　　联系方式：辛老师、0773-3696563　　　　　　2.采购代理机构信息名 称：广西机电设备招标有限公司　　　　　　　　　　　　地　址：广西桂林市七星区骖鸾路31号湘商大厦603　　　　　　　　　　　　联系方式：郑雯峪、蒋仕波，0773-3696789转1　　　　　　　　　　　　3.项目联系方式项目联系人：郑雯峪、蒋仕波电　话：　　0773-3696789转1二、项目基本情况项目编号：ZBUSTC-GJ-06项目名称：中国科学技术大学苏州高等研究院全光谱激光扫描共聚焦显微镜采购项目预算金额：365.0000000 万元（人民币）最高限价（如有）：365.0000000 万元（人民币）采购需求：包号货物名称数量主要功能是否允许采购进口产品采购预算1全光谱激光扫描共聚焦显微镜1套主要用来进行组织和细胞中荧光标记的分子和结构检测、荧光强度信号的定量分析、深层组织和细胞成像、亚细胞结构高分辨检测、荧光漂白及恢复实验以及其他生物学应用。是365万元合同履行期限：合同签订后 150 天（国内供货）或者L/C后 150 天（进口免税）本项目( 不接受 )联合体投标。1.采购人信息名 称：中国科学技术大学苏州高等研究院　　　　　地址：苏州市独墅湖高教区仁爱路188号　　　　　　　　联系方式：秦老师；wangpeng1107@ustc.edu.cn　　　　　　2.采购代理机构信息名 称：东方国际招标有限责任公司　　　　　　　　　　　　地　址：北京市海淀区丹棱街1号互联网金融中心20层　　　　　　　　　　　　联系方式：李雯；王军；郭宇涵；010-68290530；010-68290508　　　　　　　　　　　　3.项目联系方式项目联系人：李雯；王军；郭宇涵电　话：　　010-68290530；010-68290508三、项目基本情况 项目编号：CBNB-20236027G 项目名称：宁波市中医院激光共聚焦显微镜采购项目 预算金额（元）：5100000 最高限价（元）：5100000 采购需求： 标项名称: 激光共聚焦显微镜 数量: 1 预算金额（元）: 5100000 简要规格描述或项目基本概况介绍、用途：包含扫描检测系统、万能分光系统、荧光寿命传感成像分析系统等。详见招标文件。 备注：组成联合体的成员数量不超过2个。 合同履约期限：详见招标文件。 本项目（是）接受联合体投标。1.采购人信息 名 称：宁波市中医院 地 址：宁波市海曙区丽园北路819号（广安路268号） 传 真：/ 项目联系人（询问）：郑老师 项目联系方式（询问）：0574-87089099 质疑联系人：李老师 质疑联系方式：0574-87089098 2.采购代理机构信息 名 称：宁波中基国际招标有限公司 地 址：宁波市鄞州区天童南路666号中基大厦19楼 传 真：0574-87425373 项目联系人（询问）：周旭坤 项目联系方式（询问）：0574-87425380 质疑联系人：王莹巧 质疑联系方式：0574-87425583 　　　　　　 3.同级政府采购监督管理部门 名 称：宁波市政府采购管理办公室 地 址：宁波市海曙区中山西路19号 传 真：/ 联系人 ：李老师 监督投诉电话：0574-89388042

激光共聚焦成像质量更好的原因激光共聚焦显微镜（Laser Scanning Confocal Microscope，简称LSCM）是一种高性能的显微镜，具有出色的成像质量。那么，为什么激光共聚焦显微镜的成像质量更好呢？激光共聚焦显微镜采用了共聚焦技术，即在样品上使用聚焦的激光束扫描。通过这种方式，LSCM可以在一个特定的焦点上获取清晰的图像。这种成像方式相比传统显微镜有诸多优势。激光显微镜激光器的特点1、激光共聚焦显微镜具有优异的分辨率传统的显微镜在成像时，由于光的衍射效应，无法观察到比波长更小的细微结构。而激光共聚焦显微镜通过聚焦激光束，可以有效地减少光的散射和干扰，突破波长的限制，观察到更小的细胞结构和微观组织。2、激光共聚焦显微镜具有较大的深度聚焦范围传统的显微镜由于焦平面的限制，只能观察到样品的一个薄层。激光共聚焦显微镜激光束的特性，可以在样品的不同深度上获取图像。这使得我们能够观察到三维样品的内部结构，实现三维成像，而不仅仅局限于表面。这对于研究生物学过程中的细胞内部活动以及组织结构的变化非常重要。这种深度成像的能力，使得研究者可以观察到样品内部结构的细节，进一步深入研究生物学和医学领域的问题。3、激光共聚焦显微镜具有较低的背景噪声传统显微镜在成像过程中会受到来自样品和环境的背景干扰，导致图像质量下降。而激光共聚焦显微镜通过使用激光束的聚焦性，缩小激发范围并使用光学切片来消除背景噪声，提高图像的对比度和质量。4、激光共聚焦显微镜灵敏度更高激光束聚焦后，可以通过光电倍增管等探测器，将样品反射或荧光信号转化为电信号。这种高灵敏度的探测方式，使得激光共聚焦显微镜可以观察到非常微弱的信号，进一步提高了成像质量。激光共聚焦显微镜的成像质量更好，得益于其共聚焦技术、优异的分辨率、较大的深度聚焦范围、较低的背景噪声和更高灵敏度。这使得激光共聚焦显微镜在生物学、医学等领域的研究中得到广泛应用，并为我们提供了更多细胞和微观结构的细节信息。

电镜-拉曼联用技术除了在二维材料中有着得天独厚的应用优势，在拉曼共聚焦三维分析中的应用也十分广泛。TESCAN电镜-拉曼一体化系统（RISE显微镜）配备了独有的共聚焦功能，共聚焦不仅仅是可以减少背底，提高拉曼谱图质量及拉曼分布图的空间分辨率，还可以针对不同试样做很多新的拓展分析工作。透明试样分析通常，SEM只能观察到非常表面的信息，而EDS一般也只能分析到表面以下一两微米左右的元素信息，再深层的位置只能靠FIB切开制样或者其他手段了。但是对于透明膜层来说，只要对激光透明，拉曼光谱可以分析到非常深处的信息。如果试样具有多层膜并且都是透明的话，可以利用拉曼的共聚焦功能，通过移动物镜的上下位置进行逐层的分析，从而得到在不同深度位置所对应的拉曼光谱，进而对试样进行全面三维分析。如下图，通过在Z方向进行逐层扫描，获得了不同膜层的拉曼光谱。TESCAN RISE显微镜在深度上的共聚焦分辨率优于1um。而对于传统的电镜，只能分析到最外层膜层的成分信息。在Z方向进行逐层扫描，得到样品截面的光镜图（左）和拉曼光谱图（右）三维立体扫描除了针对透明材料的分析，TESCAN RISE显微镜还可以利用共聚焦进行三维立体扫描。众所周知，普通的拉曼光谱仪是通过光学物镜进行信号采集的，而光学物镜的景深远小于电镜，所以对于表面不是很平整的试样，拉曼光谱无法得到大景深的图像，因此无法定位分析位置。此外，非共焦拉曼在对样品进行面扫描时会掺杂非焦面的信息，无法消除背底信息的干扰，分析的灵敏度和空间分辨度均有大幅下降。而针对此种情况，可以利用TESCAN RISE显微镜的共聚焦立体三维扫描功能，从试样的顶部到底部，逐步改变焦距，进行一层一层的面扫描。这样就可以保证选择区域的每个测试点都可以落在焦面上，不掺杂非焦面的任何信息。最后把平面的拉曼图像转换为空间立体的三维示意图，不但可以得到平面的拉曼特征光谱的分布信息，还得到了试样的三维立体形貌信息。如下图，试样为在空间交叉错落有致的纤维，焦距相差较大，进行三维立体扫描后获得了立体的拉曼图像。纤维试样，SEM图像TESCAN RISE显微镜对试样进行三维立体扫描纤维试样的三维立体扫描结果非透明样品的拉曼三维重构前面所述的共聚焦立体扫描只能对透明试样的内部进行三维立体分析，如果试样表面对激光的吸收很强而不透明，那共聚焦扫描就不能对试样内部结构进行拉曼成像，这就影响了其应用领域。但是TESCAN RISE显微镜不仅仅是基于常规的钨灯丝和场发射扫描电镜平台，同样可以完美的加载于SEM-FIB双束电镜平台上。我们知道，双束电镜可以利用Ga+或Xe+的离子束对试样进行加工，将试样的内部暴露出来。然后即可对加工出的内部表面进行形貌观察、元素分析，以及拉曼光谱分析。每切出一个表面，便可进行拉曼面分析，然后离子束再切出一个表面，再进行拉曼面分析。如此，就可以得到一系列的SEM图像，EDS mapping数据以及拉曼面分布图，最后三维重构成立体示意图。样品截面FIB加工的示意图样品截面的拉曼面分布图由二维分析转向三维分析是测试表征的重要趋势，加载在双束上的RISE显微镜也突破了传统拉曼光谱受试样透明度影响的限制，为拉曼光谱的三维分析开辟了全新的途径。聚苯乙烯粒子镀膜的拉曼三维重构关于TESCANTESCAN发源于全球最大的电镜制造基地-捷克Brno，是电子显微镜及聚焦离子束系统领域全球知名的跨国公司，有超过60年的电子显微镜研发和制造历史，是扫描电子显微镜与拉曼光谱仪联用技术、聚焦离子束与飞行时间质谱仪联用技术以及氙等离子聚焦离子束技术的开拓者，也是行业领域的技术领导者。更多拉曼-电镜联用技术应用案例，请关注“TESCAN公司”微信公众号查看：无机材料分析应用篇碳材料分析应用篇有机材料分析应用篇二维材料分析应用篇

为加强共聚焦显微成像技术及其应用方法的交流，仪器信息网将于2024年6月18日举办“第一届共聚焦显微成像技术及应用”主题网络研讨会，本届网络研讨将邀请多位业内专家做精彩报告，为广大生命科学领域用户搭建一个即时、高效的交流和学习的平台。会议亮点1、内容丰富，多位大型生命科学/分析测试平台资深成像专家分享技术干货，生物医学（类器官、细胞生物学、发育学、组学、毒理学）、食品、环境、半导体材料等方向的应用报告；2、专家阵容强大，来自清华大学、北京大学、中科院系统、上海交通大学、上海科技大学等；3、徕卡、EVIDENT、牛津仪器安道尔等主流共聚焦显微镜供应商现场讲解新产品、新方案，更有艾锐科技国产首款转盘共聚焦产品在线发布！点击图片免费报名点击链接报名：https://www.instrument.com.cn/webinar/meetings/confocal240618/会议联系：李老师（010-51654077-8360，lizk@instrument.com.cn）

2016年9月26-28日，WITec在德国乌尔姆市举办了第13届共聚焦拉曼成像研讨会，WITec CEO Joachim Koenen博士称这是近年来最具信息互动性的研讨会之一。据悉，这家德国显微镜厂家每年都会邀请各个领域的专家学者来参加这个国际性研讨会，旨在分享拉曼显微镜的相关创意及最新研究进展。　　今年共有78位科学工作者出席会议，研讨主题非常广泛，包括生命科学、药剂学及新型材料研究等多个领域。【生物、医学、药学领域】　　共聚焦拉曼成像，可以鉴定样品分子，并对它们的区域分布进行三维成像。鉴于其优势，目前该技术已经得到生物、医学和药学研究领域用户的认可，这点在此次会议上也得到了很好的体现：不仅有5个口头讲座涉及相关主题，而且几乎一半的墙报都来自这些领域。　　其中来自Bochum(德国)Ruhr大学的Tatjana Lechtonen的一张药学领域的墙报赢得了今年的WITec最佳墙报奖，她利用拉曼成像对抗癌药物进行分析，墙报描述了细胞反应以及癌细胞对Erlotinib和Neratinib的抵制。Tatjana Lechtonen总结到，拉曼成像技术在用于新型抗癌药物评估的体外分析方法上展现了巨大的潜能。　　来自美国New Brunswick的百时美施贵宝制药公司的潘多海(音译)博士说，拉曼显微镜在药学研究领域是一个相当新且正在逐步发展的分析方法。然而，在他们公司，拉曼显微镜已经应用于临床毒理学研究和新药物制剂的研发。通过拉曼显微镜，潘博士获得了影响最终产品稳定性和溶解性的结晶与沉淀特征。此外，多晶型的鉴定起到了相当重要的作用，因为尽管多晶型物的化学成分相同，它们在人体内的作用也是不一样的。此外，潘博士还通过拉曼显微镜对不同的样品如乳液、粉末以及整个药片进行了研究。　　来自波兰雅盖隆大学的Malgorzata Baranska教授，在她的演讲中提到了她在血管疾病例如动脉硬化方面的研究。Baranska教授对拉曼、原子力和近场光学显微镜的联用非常感兴趣，她和她的同事们主要使用内皮细胞模型培养物以及肝脏和组织样本，通过拉曼显微镜分析细胞过程中压力和药物引起的变化，通过近场显微镜研究纳米范围内的活细胞，然后将这些结果与更多现有的组织学方法作比对分析。　　来自德国耶拿光子技术研究所的Christian Matthaeus博士同样致力于动脉硬化研究。他的报告是有关巨噬细胞方面的研究，巨噬细胞会吸收和储存脂肪，从而导致动脉硬化斑块形成。Matthaeus博士用拉曼显微镜分析巨噬细胞中的脂肪酸和脂类转运蛋白，通过对斑块组成成分的分析，Matthaeus博士可以对斑块导致血栓、中风和突发心脏病的风险进行筛分。【材料科学】　　当今共聚焦拉曼显微镜在材料科学领域起到了重要作用，尤其是在新材料或改性材料的研发方面。而本次会议材料版块的口头报告与墙报内容也非常丰富，包括建筑水泥材料和原子厚度的二维层状材料等。　　长久以来水泥一直是世界上所有建筑材料中最重要的组成部分。水泥生产过程伴随着庞大的资源消耗和大量的二氧化碳生成。另外，水泥建筑物拆除时也会产生大量废弃物。来自德国卡尔斯鲁厄理工学院(KIT)的Biliana Gasharova博士正在寻求一种生态友好型的高效水泥产品。她研究了改良的生产条件，例如压力或水热条件对水泥形成阶段的效果以及特征。她通过共聚焦拉曼成像技术对水泥形成阶段进行成像和化学鉴定，这样就可以区分晶体结构和多晶区域，从而帮助完善生产流程。　　来自爱尔兰都柏林三一学院的Georg Duesberg教授和他的研究团队则研究了与水泥完全不同的材料。他们主要研究了在太阳能电池、晶体管和电子元器件等方面具有巨大潜在应用前景的新型二维材料，例如石墨烯、MoS2、WS2及PtSe2等二维层状材料。Duesberg教授和他的团队对如何获得可应用于实际的二维材料生长工艺非常感兴趣，因此，获取原子层数、原子层内在缺陷和所产生材料的导电性信息就显得尤为重要。除了原子力显微镜、X射线光电子光谱仪及透射电子显微镜这些显微技术，拉曼显微镜也是Duesberg博士和他的团队的主要表征技术，而且这一技术非常有助于他们的研究分析，他们对低波数范围拉曼信息的材料表征尤其感兴趣。　　二维层状材料是目前全球热门的主题，这一点在来自法国著名的格勒诺布尔大学Néel/CNRS学院的Nedjam Bendiab教授和巴西Belo Horizonte大学的Marcos Pimenta教授的演讲中也得以体现。Bendiab教授主要研究碳纳米材料石墨烯的应变、机械共振和电荷及能量跃迁。Pimenta教授则主要结合拉曼光谱的结果和理论模拟结果来研究不同二维层状材料的原子结构。俄罗斯乌拉尔联邦大学Vladimir Shur教授则概述了共聚焦拉曼显微镜在其他领域的应用。【其他领域】　　为了协助研讨会不同专业领域参会人员的演讲，德国杜伊斯堡-埃森大学Schluecker教授回顾了有关拉曼光谱物理原理的基础知识。同时本身具备理论背景的Schluecker博士也从理论的角度解释了共振拉曼光谱和表面增强拉曼光谱(SERS)等特殊拉曼技术。　　此外，奥地利维也纳科技大学的Johannes Ofner博士介绍了如何高效地分析高光谱图像产生的大数据集。高光谱图像包含来自不同显微技术如电子显微镜、质谱以及拉曼显微镜的信息，Ofner博士采用了滤波器和算法一起评估图像，而不是仅仅分析每个图像本身，有助于结果的演绎。【会议评价】　　来自新加坡A*STAR材料研究和工程学院(IMRE)的Gomathy Sandhya Subramanian说：“共聚焦拉曼成像研讨会的独特之处是，你可以同时遇见同领域的专家和仪器设备专家，你可以从他们那里学到很多如何利用拉曼显微镜研究自己样品的技巧与方法。”　　来自奥地利维也纳科技大学的Johannes Ofner强调：“在科学和社会研究项目上，你非常容易就能联系上研究领域的专家及WITec技术团队，因此这里是一个互相交换知识和经验的理想平台”参会人员集体照 　　第14届共聚焦拉曼成像研讨会将于2017年9月25-27日在德国Ulm举行。

项目编号：SZDL2022002174（0868-2242ZD1233H）项目名称：显微共聚焦拉曼光谱仪预算金额：148.0000000 万元（人民币）最高限价（如有）：148.0000000 万元（人民币）采购需求：显微共聚焦拉曼光谱仪 1项。合同履行期限：合同签定后 90 天（日历日）内，交货期是指所有货物运抵现场安装调试完毕后交付用户验收的日期。本项目( 不接受 )联合体投标。

项目编号：0705-2240 02028249项目名称：复旦大学共聚焦拉曼光谱仪采购预算金额：258.0000000 万元（人民币）最高限价（如有）：252.8400000 万元（人民币）采购需求：包件号名称数量简要技术规格备注1共聚焦拉曼光谱仪1套配置532 nm 单纵模激光器，功率≥30 mW。配置785 nm单纵模激光器，功率≥125 mW预算金额：人民币258万元。最高限价：人民币252.84万元。合同履行期限：合同签订后6个月。 合同履行期限：合同履行期限：合同签订后6个月。本项目( 不接受 )联合体投标。

项目编号：0613-227122244824/01项目名称：ZYCGR22011903共聚焦显微镜平台预算金额：250.0000000 万元（人民币）最高限价（如有）：250.0000000 万元（人民币）采购需求：序号内容数量简要要求1共聚焦显微镜平台1套 研究级全电动倒置荧光显微镜，齐焦距离为国际标准45mm：具备明场、荧光、微分干涉（DIC）等观察功能，显微镜可通过机身按钮、共聚焦软件控制 合同履行期限：合同签订后4个月内交货本项目( 不接受 )联合体投标。

一、项目基本情况1.项目编号：2024-JL13(04)-W10060项目名称：高分辨激光共聚焦显微镜预算金额：490.000000 万元（人民币）最高限价（如有）：490.000000 万元（人民币）采购需求：详见招标文件合同履行期限：详见招标文件本项目( 不接受 )联合体投标。2.项目编号：2024-JL13(04)-W10060项目名称：高分辨激光共聚焦显微镜预算金额：490.000000 万元（人民币）最高限价（如有）：490.000000 万元（人民币）采购需求：详见招标文件合同履行期限：详见招标文件本项目( 不接受 )联合体投标。3.项目编号：2024-JL13(04)-W30048项目名称：倒置荧光显微镜采购方式：竞争性谈判预算金额：37.000000 万元（人民币）最高限价（如有）：37.000000 万元（人民币）采购需求： 见附件合同履行期限：/本项目( 不接受 )联合体投标。二、获取采购文件时间：2024年08月05日 至 2024年08月12日，每天上午8:00至12:00，下午15:00至21:00。（北京时间，法定节假日除外）地点：见附件方式：线上申领售价：￥0.0 元（人民币）三、凡对本次采购提出询问，请按以下方式联系。1.采购人信息名 称：物资采购中心　　　　　地址：023-68774923　　　　　　　　联系方式：夏助理　　　　　　2.项目联系方式项目联系人：夏助理电　话：　　023-68774923

激光共聚焦扫描显微镜能够实现样品普通光学显微观察（如明场， 暗场，偏光， C-DIC ，荧光等）的同时，也能够实现样品快速原位的高分辨三维表面成像，是材料研究分析的多维度和多尺度分析的解决方案，配置共聚焦荧光、 FLIM、STED、DLS和CRS等模块还能够实现生物材料样品高分辨荧光表征、荧光寿命、超分辨观察等研究。01观察更多的洞察力洞察入微收集准确数据Power HyD检测器系列提供更高的光子检测效率（PDE），较低的暗噪声，以及从410到850纳米的广域高灵敏度检测。增强的图像质量STELLARIS兼顾了图像的亮度、分辨率和对比度，可进行高分辨的金相分析。光谱自由新一代白激光允许同时使用多达8条来自整个光谱的单一激发谱线。与其他任何共焦平台相比，您可以对更多的荧光体组合进行成像，并同时使用更多的标签，同时将选择范围扩大到近红外范围。信号检测超灵敏与传统的光电倍增管 (PMT) 相比，光子检测效率 (PDE) 提高到2倍，在近红外一区内更是提高3倍。02探索更多的高潜力全新信息维度尽在眼前STELLARIS独特的TauSense技术能够从每个样品中提取额外的信息，并增加你的研究的科学影响。TauSense由基于荧光寿命的面向应用的成像工具组成，可以对材料进行表面缺陷定位和分析以及发光缺陷观察。STELLARIS搭载荧光寿命成像功能，一种正交于荧光强度并可相互参照的成像模式。崭新的信息维度运用 TauContrast 可提供即时的功能信息，例如代谢状态、酸碱度和离子浓度，获得额外的维度以及崭新的、未曾探索过的深入视角，为您的研究带来巨大的潜在价值。超越光谱的多维度即使发射光谱波段完全重叠，TauSeparation技术也可能将样品组分分离。基于荧光寿命的信息可补充光谱信息,从而扩大同时检测通道的数量。运用 TauGating 技术在保留目标信号的同时去除多余的自发荧光，从而提高检测效率。即使有内在干扰信号，您仍可轻松地从样品中提取相关信息。03完成更多的生产力复杂成像亦可化繁为简简化的设置和采集。ImageCompass是STELLARIS的智能用户界面，为用户提供了一种简单直观的方式，即使是复杂的实验也只需点击几下就能设置好。简单快速通过LIGHTNING高分辨率、动态信号增强（DSE）和强大的AI功能AiviaMotion，实时、全速地提供高质量的图像。 直观的用户界面ImageCompass引导你从实验设置到采集全流程。优化你的实验整合LAS X Navigator工具，快速概览全局，直观成像。“拖-放”添加荧光探针自动优化激发和检测直觉化操作设计自动配置成像参数04共聚焦显微镜STELLARIS 5 & STELLARIS 8 STELLARIS 5STELLARIS 5是一个重新设计的核心系统，树立了共聚焦显微领域的新标准。它是仅有的一个内置WLL的共聚焦系统，并与声光分光器（AOBS）以及新的Power HyD S探测器相结合。STELLARIS 5采用独特的TauSense新技术，在图像质量和所产生的信息数量方面树立起新的标准。智能用户界面ImageCompass可轻松、直观地引导您通过所有实验装置采集数据，获得优异的成像性能。STELLARIS 8STELLARIS 8是未来导向性系统，具有扩展光谱的WLL和专有的Power HyD系列探测器选项，不仅提供STELLARIS 5核心系统的所有优势，还有额外增添的功能。STELLARIS 8能够与所有徕卡显微系统模块相结合，包括快速寿命成像（FALCON）、光谱式多光子显微镜（DIVE）、nm显微镜STED、光片（DLS）和CARS。STELLARIS 8的新特点可更大程度利用这些模块的潜力，使您能够为科学研究树立起新的标准。05产品应用领域金属 / 高分子 / 陶瓷材料表面粗糙度分析，高分辨金相分析，摩擦磨损分析， 断口分析，腐蚀研究， 原位分析。微纳加工结构分析，表面粗糙度分析，高深宽比结构表征，膜厚测量。半导体和微电子表面缺陷定位和分析、发光缺陷观察，表面粗糙度分析，膜厚测量等。 医疗器械检测表面粗糙度分析，金相分析，膜厚测量，微生物观察等。生物材料和医学金属表面细胞生长研究，微生物金属腐蚀研究，植入物表面细菌生长表征等。领拓仪器于2012年开始代理徕卡品牌，拥有十多年的经验积累和强大的技术支持团队。目前领拓仪器是徕卡显微镜的华南、西南授权代理商。了解更多新一代共聚焦显微系统STELLARIS相关产品信息，欢迎前来咨询沟通。

拉曼光谱因其无损、非接触性的快速检测特性，已引起广大科研人员的浓厚兴趣，并广泛应用于各个行业。在生命医学领域中，通过分析入射光对被测物的非弹性散射谱线，获得其分子组成与结构信息。细胞内所有代谢物的拉曼信号构成“单细胞拉曼表型组”，可作为细胞的“分子指纹”，用于微生物种属检测、功能性细胞识别、细胞生理过程监测、组织拉曼成像等，从而实现对细胞生理状态、对内外因素刺激的应答机制、干细胞分化方向等生理代谢过程及机制的原位研究，在生物医学研究领域极具应用价值。作为生物共聚焦拉曼的领航者，长光辰英在深入理解生物医学应用中的基础上，提供高端的共聚焦拉曼产品，为功能微生物筛选，疾病机理，药物研发，细胞生长分化等研究提供了有力工具。推荐产品 P300共聚焦拉曼光谱仪PRECI SCS 微生物单细胞分选仪 (qq.com) PRECI SCS-R300拉曼单细胞分选仪PRECI SCS-R300 拉曼单细胞分选仪 (qq.com) RAColony菌落原位多表型检测与挑取工作站RAcolony 菌落原位多表型检测与挑取工作站 (qq.com) SC-catcher单细胞光镊操纵与分选系统SC-catcher单细胞光镊操纵与分选系统 (qq.com) MicroRaman 颗粒物检测仪MicroRaman 颗粒物检测仪 (qq.com)推荐服务生物拉曼光谱检测技术方案(一)丨生物拉曼在细胞耐药性/活力检测中应用生物拉曼光谱检测技术方案(二)丨拉曼光谱技术在微塑料检测分析中的应用生物拉曼光谱检测技术方案(三)丨拉曼光谱在微生物代谢研究中应用生物拉曼光谱检测技术方案(四)丨拉曼光谱检测分析平台下的细胞/组织检测（病理快检）如果您对我们的产品和服务感兴趣，请随时联系我们

光学显微镜至今已有三百多年的历史，从观察细胞的初代显微镜发展到如今打破分辨率极限的超分辨显微镜。近年来，生命科学领域蓬勃发展，对显微成像技术不断产生新的需求，光学显微镜不断向更高分辨率、快速成像、3D成像等高端技术方向发展。我国高端光学显微镜市场长期处于被国外产品垄断的局面，许多关键核心部件依赖进口。令人欣喜的是，近五年来，市场上涌现出多种国产高端光学显微镜，包括超分辨显微镜、双光子显微镜、共聚焦显微镜、光片显微镜等，逐渐打破当前市场格局。基于此，仪器信息网特别制作“破局：国产高端光学显微镜技术‘多点开花’”专题，并向国产光学显微镜企业广泛征稿（投稿邮箱：lizk@istrumen.com.cn)。 本篇为北京世纪桑尼科技有限公司（以下简称“世纪桑尼”）投稿，作者重点从共聚焦技术角度叙述了共聚焦显微镜的发展现状，世纪桑尼共聚焦成像模块产品是最早的国产共聚焦商业化产品之一。仪器信息网：请回顾一下贵公司光学显微镜技术的发展历程。近20年中国的激光加工产业发展迅猛，增速全球领先，而且绝大部分部件都已经实现国产化，形成了国内供应链，这是我国所有激光相关企业共同努力的结果，也是中国强国梦的基础。北京世纪桑尼科技有限公司成立于2001年，一直致力于激光扫描振镜及控制系统的研发生产，是国内最早开发同类产品的高科技企业，打破了同类产品完全依赖进口的局面，产品被广泛应用于激光加工、激光医疗、激光演示等各个领域。2002年公司推出了第一代CS系列扫描振镜产品——扫描振镜是控制光束（主要是激光）高速地、精确地扫描样品的器件，主要应用在激光打标。激光打标系统和共聚焦扫描成像相比，仅是少了荧光返回分离和检测单元。2014年，经过在激光打标领域的多年积累，我司正式立项开发共聚焦扫描成像系统。第一个项目是阵列（多点）扫描共聚焦成像系统SUNNY ASM，于2015年中完成开发，并于当年年底完成第一台销售。图1 ASM与Zeiss LSM780联用为什么第一个项目选择看似更高端（至少从国外产品对比来说，多点扫描共聚焦是当时最贵的）的阵列扫描共聚焦？因为阵列扫描共聚焦使用的是EMCCD或sCMOS这样的相机成像，开发时只需要将相机的曝光和振镜的扫描做好同步就可以使系统正常工作，甚至是很好地工作，相对来说比较简单。而对于单点扫描共聚焦成像系统来说，还需要涉及到信号转换电路和图像软件的开发——这两点我们直到今天也仍然在优化，以使产品性能更上一层楼。2017年，我司立项单点扫描共聚焦成像系统。2018年初完成样机试制，并于7月份在兰州大学生科院做了第一次演示：当时用的是老师自己的IX71倒置显微镜，只有7：3的分光，但我们拍的线虫肌动蛋白仍然非常清晰。图2 线虫肌动蛋白，100X物镜2019年，我们在广西大学完成了第一台CSIM 100共聚焦扫描成像系统的销售，至今已有7套系统/模块的销售。我们可以为已经采购了研究级显微镜的单位配套CIM共聚焦模块及激光器、配套的控制软件，升级为一套完整的共聚焦显微镜，满足研究人员对共聚焦显微镜的需求，又大大降低了科研经费的投入，这也是我们开发这套系统的初衷。这样的系统我们目前已经完成了几个单位，系统操作方便实用、图片质量不逊色于国外大品牌产品，得到了用户的良好反馈。仪器信息网：当前贵公司主推的产品和技术有哪些。贵公司在高端光学显微镜方面有哪些独具优势的技术？ 当前，我司在生物成像领域主推的产品是CSIM 100/110共聚焦扫描成像系统，后续的工作除了继续优化系统性能、丰富软件功能外，我们也在开发我们自己的超分辨系统，基于环形光束替代高斯光束方法的超分辨技术。共聚焦成像系统是一个光、机、电一体化的工程，要做好共聚焦产品，需要在这三方面同时都做好，不能有短板。否则，做出来的产品只是能用，能动起来完成基本的扫描成像，但得到的图像无法满足实际的应用需求，更不用说追求更好的图像质量了。另外，不管是国外还是国内，第一家做出共聚焦成像系统产品的从来都不是传统的光学显微镜公司，尽管显微镜公司在光学和机械方面一直有着巨大的技术优势。从这里可以看出，电，尤其是高质量的信号转换电路才是开发出一款共聚焦产品的关键，而我司拥有二十年的振镜电机、驱动电路和控制技术的开发制造经验，在电方面有巨大的优势。相对来说，我司在高端光学显微镜（主要指共聚焦）方面的技术优势主要有两点：1、光路结构方面：利用光路可逆性原理，激光和荧光相向穿过同一个针孔，使激发与成像在任何时候都严格共轭，始终保持100%的样品信号采集率；光路稳定性高，免维护。2、自主开发了信号转换放大电路。相对传统共聚焦使用的跨阻放大电路，我们的信号转换放大电路拥有更高的信号转换效率、更低的背景噪声、更宽的动态范围。仪器信息网：您如何看待国产光学显微镜生产商和进口品牌厂商的差距（请结合具体产品回答）？国产高端光学显微镜发展还面临哪些问题？激光扫描共聚焦显微镜是二十世纪80年代发展起来的一项具有划时代的高科技产品 ，它是在荧光显微镜成像基础上加装了激光扫描装置，在反射光 的光路上加上了一块半反半透镜 ，将已经通过透镜的反射光折向其它方向，在其焦点上有一个带有针孔的挡板，小孔就位于焦点处，挡板后面是一个光电倍增管 。利用计算机进行图像处理，把光学成像的分辨率提高了30%--40%，使用紫外或可见光激发荧光探针 ，从而得到细胞或组织内部微细结构的荧光图像。其中光电倍增管探测器是很重要的组成部件，是日本滨松公司生产的，国内还没有成熟的同类产品可以替代，相关企业的产品正处于研发阶段，我们也在密切关注。物镜的性能，主要是数值孔径、消色差等级、平场性能和透光率等方面都还有不小的差距，但如果仅限于应用最广泛的可见光波段，差距已经不大了，至少用共聚焦拍一般的荧光图像，无法仅从图像上分辨哪个是国产拍的、哪个是进口产品拍的。国产高端光学显微镜的发展，最大的问题是用户对国产高端仪器的认可度不足。跑市场，经常能听到这么一句话：“买国产产品出了问题或不能满足要求，做决策的老师就要负责任；买进口产品出了问题，则认为这是目前技术水平的极限，和老师无关。”甚至今年都还有一些省份的政府和专家出面论证，某些仪器只建议采购进口产品。这让我们感到很困惑，难道进口产品都是一个水平、一个档次，就没有高端和低端的区别？低端产品就一定比国产产品好?是否做过对比？如何做的对比，还是只是闭门谈论？产品出现问题，国产产品会被认为质量不行，进口产品则是自己运气不好，在这样的情况下，用户对设备各方面的认识还有待提高，不要被销售人员误导。以上这些，对于国产厂商都是需要去面临和亟待解决的问题。更好地支持国产仪器发展，第一，要靠政策的引导，如科研单位采购国产设备退税就是非常好的政策，希望能够进一步细化，目前退税只退到学校，而不是课题组，对于课题组来说采购成本并没有减少。采购进口设备时，则只需要按免税价格报价。第二，要有权威的检验检测结论。第三，要进行技术和功能利用追踪——例如，招标参数强调了1nm的光谱分辨率，那么在该设备运行期间，这个功能有多少的使用率，出了多少成果。仪器信息网: 您认为，未来几年高端光学显微镜的技术趋势和热点市场需求有哪些？贵公司未来产品技术发展规划是怎样的？超分辨、共聚焦、宽场显微镜大体对应了前沿实验、成熟实验和基本实验，共聚焦成像应该有更广泛的使用面。然而，国外共聚焦显微镜产品的价格仍然“高高在上”，这阻碍了共聚焦成像技术帮助科研人员提升实验水平。未来，降低采购费用和使用成本必将是共聚焦产品的发展趋势。从技术来看，分辨率更高、灵敏度更好、成像速度更快一直都是显微镜的追求，未来的发展大概也会如此。但受限于元器件的发展，未来短期内可能会在通过反卷积计算和人工智能来提高图像的分辨率、信噪比方面有更快的发展。目前光学显微镜市场热点有两点：一、超分辨和活细胞成像，需求主要在经费充足的、已经购买一台或多台共聚焦显微镜的实验室或中心平台；二、单点扫描共聚焦成像系统，降低采购成本，尽可能地满足一般实验室需求。世纪桑尼未来发展希望能够填补国内空白、逐步替代进口产品。依托公司现有的产品和技术实力，研发多通道共聚焦模块、超分辨共聚焦系统、双光子共聚焦系统，为广大的科研人员提供高端实用的分析仪器。国家的强大需要高科技产业的发展，需要拥有自主知识产权的仪器设备，需要培养更多的科研人才，这是我们作为中关村高新技术企业的社会责任，我们义不容辞。

冷冻共聚焦显微镜及其在冷冻电子断层扫描中的价值 Cryo ET（电子断层扫描）是一种专用的透射电子显微镜技术，可以重建观察区域的三维体积。借助先进的冷冻EM（电子显微镜），图像分辨率可以提升到令人难以置信的亚纳米等级。因此，可以在细胞内的原生环境中研究蛋白质以及其他生物分子，从而揭示尚未探明的分子机制。由于细胞和组织必须薄到能够透过电子，样品必须进行切片以获取足够薄的样品体积（薄层）。为对样品中的靶区进行精确的三维定位，冷冻共聚焦显微镜是必不可少的工具。 以下部分，我们将描述冷冻电子断层扫描工作流程的主要步骤，以及如何通过冷冻共聚焦显微镜定位靶区并进行切片，以提高整个工作流程的可靠性。 在EM网格上培养细胞 通常，在涂有多孔碳膜（例如 QuantifoilR）或二氧化硅（SiO2）膜的金质或钛金网格上植入急性分离或培养的细胞（图1，Mahamid等人，2019）在后续步骤中，钛金属和二氧化硅似乎更加坚硬而且稳定，无需额外添加碳层（Toro-Nahuelpan 2019） 网格通过Poly-L-Lysin或纤连蛋白（Fibronectin）实现生物激活，胰蛋白酶解离细胞在前一晚植入，以便在后续步骤中附着在碳层表面（Mahamid等人，2019）。 图1：采用12纳米厚多孔二氧化硅膜（R 1.2/20，即孔径1.2微米，间距20微米）的3毫米EM金质（Au）网格的反射图像拼接图。HeLa细胞已经植入并玻璃化。实心箭头：定位用的中心标记；空心箭头：聚焦离子束进入的切片槽；虚线箭头：空的网格方格。一个网格方格的边长：90微米。 添加微型图案 为进入细胞样品以成功实现FIB切片并在冷冻TEM中开展后续分析，必须确保相关细胞位于网格方格的中心位置或其附近。但细胞喜欢在网格条上生长或者集簇生长，因此不适合进行FIB切片和电子透射分析。为了克服这一挑战，微型图案技术允许用户控制细胞在碳膜（图2）上的位置和分布，提高相关工作流程的可靠性。 网格表面涂有聚乙二醇（PEG），可防止生物材料附着。利用紫外激光移除该涂层，即可对细胞的黏附进行针对性控制，保证FIB切片以及TEM的可操作性（Toro-Nahuelpan 2019）。此外，可以创建特定图案，从而影响整个细胞结构并且有助于使用冷冻电子显微镜研究生物力学现象。 图2：有/无微型图案的细胞分布情况左图：分布不均的细胞（小鼠A9成纤维细胞，使用Alexa Fluor 488 Phalloidin标记，以显示纤维状肌动蛋白）。右图：网格方格中心定位精确的细胞，可进行FIB（成纤维细胞黏附在纤维蛋白原微型图案表面；图片由Alvéole与德国汉堡CSSB中心教授Kay Grünewald博士共同提供。） 投入冷冻 为在固定用于电子显微镜检查的同时确保样品接近原生状态，细胞必须极速冷冻，以免产生破坏性的冰晶。这个过程称为玻璃化，因为冰片变成无结晶的玻璃状（玻璃体） 为让样品细胞达到这种效果，网格必须快速投浸到适当的冷冻剂（通常为乙烷，或者乙烷和丙烷）中。1981年，Jacques Dubochet发表了首个手动吸液和投入冷冻方法，该方法仍获广泛使用以获取出色的结果（Dubochet, J.以及McDowall, A. W.，1981）。 在投入冷冻之前，必须去除多余的液体。标准技术是使用滤纸实现受控吸液（图3，Dubochet, J等人，1982；Bellare等人，1988；Frederik, P. M.等人，1989）。 图3：在投入冷冻前，通过吸液处理对多余液体进行受控移除。使用镊子固定网格，并通过单独步骤将吸液纸移向网格。吸液传感器可以自动并反复执行该过程。 市面上有多种不同的吸液设备，例如用于自动吸液和投入冷冻的Leica EM GP2。根据不同样品类型的多种需求，可以使用多种涉及吸液步骤的样品制备方案（另见此处）。 冷冻状况下的存储、装载和转移 玻璃化之后，样品必须在整个工作流程期间处于冷冻状况下。因此，必须对从存储到转移至不同成像系统的所有步骤进行冷冻处理，以免样品析晶和/或污染这尤其困难，因为这种低温冷冻样品会像磁铁一样吸引附近的湿气和灰尘。研究人员和制造商付出巨大的努力来开发并提供解决方案，以便在工作流程的不同步骤中保证样品安全。 样品通常以四个为一组存储在网格盒内，而网格盒又保存在大型液氮（LN2）罐中的Falcon多孔试管中。还可以使用更为复杂的冰球系统。 转移并装载到样品架时，通常使用液态氮（LN2）。不幸的是，LN2往往会在一段时间后，因为空气中的水分而产生结晶冰污染。在转移时，这些冰晶可能会附着到网格上，干扰随后的切片和成像过程。此外，LN2内部的能见度很低，因为它在不断移动，而且始终会有条纹。 因此，最好在LN2上部的气相部分装载并转移样品以保持冷冻条件，同时为装载步骤（图4）提供出色的可见性。 徕卡显微系统在提供GN2（气态氮）装载和转移设备方面拥有30多年的悠久历史。新的冷冻显微镜套件就在这些经验的基础上开发而成，同时融合众多客户的反馈意见打造出先进的转移舱和夹具系统。 图4：在冷冻显微镜套件转移舱的GN2（气态氮）环境中装载网格。转移舱的可见度在冷冻条件下不受干扰。 检查样品质量和靶分布 在冷冻工作流程中，一般而言，EM操作时间尤其宝贵，因此对样品进行早期质量检查至关重要。许多因素会关系到样品能否转移到下一个工作流程步骤，包括碳箔的结构完整性、玻璃化的质量（包括冰层的厚度及其分布）、目标细胞的存在、分布和可及性，以及目标结构的存在和定位。 所有这些参数均可通过基于相机的冷冻光学显微镜（例如THUNDER Imager EM Cryo-CLEM）或使用STELLARIS冷冻共聚焦显微镜上的相机模式来检查（图5）。 透射模式显示网格、箔膜和细胞质量，反射图像显示网格表面，尤其是呈现玻璃化质量和冰层厚度，而荧光图像可以提供有关不同靶蛋白的表达水平及其分布情况的信息。 图5：不同模式呈现出网格的完整性以及靶分布。A——网格表面的反射图像可以显示碳膜或二氧化硅层的缺陷以及冰层的厚度。B——绿色荧光（线粒体）。C——液滴分布以实现高精度关联D——通过Hoechst标记的细胞核E——所有模式的叠加图像细胞由德国海德堡欧洲分子生物学实验室（EMBL）Mahamid Group的Ievgeniia Zagoriy友情提供。一个网格方格的边长：90微米。 在LAS X Coral Cryo软件工作流程中，用户可以在引导下，通过不同图像模式对整个网格自动创建清晰的合焦概览图像。 标记标志点、薄片点以及液滴中心 为了关联冷冻LM（光学显微镜）的3D图像以及后续的冷冻FIB-SEM/TEM图像，首先需要获取网格的概览图像以便大致对齐两种模式的图像（图6）。这里，反射图像非常重要，因为它们类似于SEM图像，但也可以使用透射图像。中心标记以及其他标志点（例如碳层中的缺陷）有助于快速定位并对齐概览图。 图6：以不同模式获取整个网格的合焦概览图像，用于识别网格缺陷、对齐标记和靶分布。中心标记用实心箭头表示，二氧化硅层中的主要缺陷用空心箭头突出显示。HeLa细胞由德国海德堡欧洲分子生物学实验室（EMBL）Mahamid Group的Ievgeniia Zagoriy友情提供。蓝色 – Hoechst染料，细胞核；绿色 — 线粒体绿色荧光探针，线粒体；红色 - 深红色液滴和Bodipy荧光染料，脂滴。一个网格方格的边长：90微米。完整网格直径：3毫米。 其次，需要超分辨率的共聚焦3D图像。这些图像堆栈用于在潜在薄片位置的范围内执行高精度关联。完成概览图对齐后，可以找到3D共聚焦堆栈的正确位置以便后续进行高精度关联这样做的前提是必须提供图像相对于概览图以及相对于彼此的位置。这就是Coral Cryo软件工作流程之后的处理步骤（图7）。 图7：相机概览图像与共聚焦Z-堆栈相机和共聚焦图像的组合含有XY坐标位置，因此可以匹配。所有图像都包含在Coral Cryo软件工作流程期间创建的相关项目文件夹中。HeLa细胞由德国海德堡欧洲分子生物学实验室（EMBL）Mahamid Group的Ievgeniia Zagoriy友情提供。蓝色 – Hoechst染料，细胞核；绿色 — 线粒体绿色荧光探针，线粒体；红色 - 深红色液滴和Bodipy荧光染料，脂滴。一个网格方格的边长：90微米。完整网格直径：3毫米。 必须组合相机概览图像和超分辨率3D图像以检索靶区位置并在FIB-SEM上定义切片位置。这个步骤非常重要，因为在标准FIB-SEM中，无法看到荧光以及相应的靶区点位。 EM（电子显微镜）制造商近期研发出一种集成了FIB-SEM功能的荧光显微镜，可以作为在切片过程中通过检查荧光来提高工作流程的可靠性和准确性的一种绝佳选择。不过，这些系统并不具备必要的分辨率以及采集模式的灵活性，无法像单独的共聚焦系统那样实现精确的3D定位。 如何关联并检索薄片位置 作为常用的最低标准，研究人员使用LM图像的屏幕截图在EM上检索靶区的XY坐标。不幸的是，并排比较图像不仅费力耗时而且很容易出错，因此并不可靠。身为工作流程提供商，徕卡显微系统致力于通过THUNDER Imager EM Cryo-CLEM来改善这种情况。研究人员可以在图像上定位标志点和靶区标记，然后以开放EM格式的完整坐标集导出。首先，这个流程适用于2D图像，因此合乎逻辑的下一步骤就是提高分辨率并将坐标系扩展到3D坐标。 对于高精度关联和3D定位，目前广泛采用的是基于液滴的方法（Alegretti等人，2020；Klumpe等人，2021年；Bieber, A.，Capitanio, C等人，2021）液滴通常在玻璃化之前添加到细胞中，可在LM和EM中观察到，用于通过XYZ坐标对齐图像堆栈，作为图像数据相关性的基础，从而正确定位FIB切片窗口（图8）。 典型液滴的尺寸为1微米，完全呈球形，这使其中心坐标能够进行亚衍射拟合。通过SEM中的背散射电子，可以更清晰地观察到含有金属的微滴，从而将它们与大小相似的冰晶区分开来。优先选择液滴，使其荧光发射不同于实际靶的荧光发射，以便能够更好地分辨。 图8：3D共聚焦图像（左）和俯视SEM图像（右）的最大投影。荧光液滴（1微米）在两种模式中均可以观察到，因此可以用于对齐数据。SEM图像细胞由德国海德堡欧洲分子生物学实验室（EMBL）Mahamid Group的Herman K. H. Fung和Ievgeniia Zagoriy友情提供。一个网格方格的边长：90微米。 要使用来自冷冻LM和FIB-SEM的3D数据，在冷冻LM的引导下，进行薄片制备，可以使用一款开源软件（3D关联工具箱，简称3DCT，Jan Arnold等人，2016）。 将冷冻LM图像载入到在FIB-SEM上运行的该软件中。二维LM概览图和SEM图像之间的三点关联用于初步定位。之后，使用离子束获取相关视场，并手动点击LM堆栈和FIB图像中的相同液滴图10显示了一张LM图像和一张FIB图像，其中的靶区点位以及液滴可以在定位软件中重现其排列组合。 图9：在LM和FIB图像中关联标记。左图：点击观察结构周围的液滴，并在3D图像中执行质心定义（白圈中的绿点）计算得到的位置随后投影到FIB图像（右图）上根据液滴标记，计算目标结构的位置并标记到FIB图像中（红圈中的红点）。离子束图像由德国海德堡欧洲分子生物学实验室（EMBL）Mahamid Group的Herman K. H. Fung友情提供。比例尺：20微米。 该软件通过对X、Y、Z信号进行高斯拟合，精准确定液滴的中心。近期的改进增加了半自动液滴检测功能以及其他功能，从而更加方便地执行冷冻FIB工作流程。(SerialFIB, Klumpes等人，2021）。 在网格条上选择围绕最终目标结构的几处液滴，作为切片处理的坐标系。基本计算方法是考虑缩放、旋转以及平移之后的线性仿射变换最后，在LM图像中选择目标结构并叠加到FIB图像上。 根据目标结构的位置，就可以定位切片窗口(图10)。 图10：定位切片窗口左：离子束细胞图像，含有标记液滴和目标结构根据目标结构的计算位置，在所用FIB-SEM的切片软件中，交互定位上下切片窗口的位置（细薄条纹上方和下方的红色方块）。图像由德国海德堡欧洲分子生物学实验室（EMBL）Mahamid Group的Herman K. H. Fung友情提供。比例尺：20微米。 Coral Cryo工作流程具有哪些优势？ Coral Cryo软件工作流程旨在为基于液滴的靶区定位工作流程提供支持。它可以提供创建合焦相机概览图像所需的成像作业（图6和图7）。所有必要的自动对焦功能均可以正确调整并分配，并且可以标记潜在薄片位置，同时能够在定义的位置执行超分辨率共聚焦Z-堆栈。 在定位管理器（图11）中，可以确定所有必要的坐标标记，并且以开放格式（*.xml）提供。此类图像会自动保存，其数据格式可以导入任何FIB-SEM软件。 图11：Coral Cryo软件模块标记点、薄片和液滴标记均可以在软件工作流程中定义。反射图像中细胞的顶部和底部坐标值可以作为在FIB SEM中正确计算靶区3D位置的额外参考。本文前述部分图像中的相同细胞经过突出显示，用于标记定义。 对齐标记用于使用相机概览图像对标记点进行初步的粗略对齐。薄片标记具有双重用途：作为进行超分辨率共聚焦3D扫描的位置标记，或者在图像采集后，作为靶结构的精确3D标记。亚像素插值确保该阶段可以在3D图像内进行高精度定位。最后，插值方法还用于标记液滴坐标，以便在FIB-SEM上进行后续液滴关联。 冷冻FIB切片 进行必要的关联并设置切片窗口，薄片位置通常会粗略切薄至大约1微米，随后进行最终的抛光步骤以达到电子透明（图12）。 图12：目标薄片的离子束图像以及SEM俯视图图像由德国海德堡欧洲分子生物学实验室（EMBL）Mahamid Group的Herman K. H. Fung友情提供。比例尺：10微米。 采用两步方法的原因在于冰污染和/或切片材料可能会沉积在薄片上。为避免在最终薄片上发生冰污染，建议采用快速抛光工艺（Schaffer M.等人，2017）。还可以采用开源的商业软件，以自动方式进行切片。 冷冻透射电子显微镜 进行冷冻FIB切片之后，含有薄片的网格转移至冷冻TEM，通过对网格（连同薄片）逐渐倾斜，采集一系列断层扫描图像。图像经过计算处理以重建所记录体积的3D断层扫描图像。通过对样品的多个图像取平均值，可以降低固有噪点，从而对蛋白质或蛋白质复合物等颗粒获得更高分辨率的结构。这种处理方式称为亚断层图像平均（Wan和Briggs，2016；Zhang 2019）。从概念上说，这相当于通过单颗粒成像（SPA），在原位实现对大分子的亚纳米分辨率。 总 结 本文旨在表明冷冻共聚焦显微镜是冷冻工作流程中的一个重要组成部分，用于评估EM网格上玻璃化样品的质量和靶分布。在冷冻条件下记录的高分辨率共聚焦数据使科学家能够在3D荧光下识别目标结构。此外，3D体积可作为相关方法的参考，以便在FIB-SEM中检索靶结构进行切片，然后在冷冻TEM中进行电子断层扫描，以获得靶区的亚纳米分辨率图像。 Coral Cryo工作流程搭配新的共聚焦平台STELLARIS，再加上Coral Cryo软件，可以帮助新手用户创建网格概览图像、超分辨率3D图像以及精确的坐标标记，为后续的FIB切片和冷冻电子断层扫描奠定坚实基础。 参考文献：（上下滑动查看更多） 1.Allegretti M, Zimmerli CE, Rantos V, Wilfling F, Ronchi P, Fung HKH, Lee CW, Hagen W, Turoňová B, Karius K, Börmel M, Zhang X, Müller CW, Schwab Y, Mahamid J, Pfander B, Kosinski J, Beck M.: In-cell architecture of the nuclear pore and snapshots of its turnover. Nature. 2020 Oct 586(7831):796-800. doi: 10.1038/s41586-020-2670-5. Epub 2020 Sep 2. PMID: 32879490. 2.Arnold, J., Mahamid, J., Lucic, V., de Marco, A., Fernandez, J., Laugks, T., Mayer, T., Hyman, A. A., Baumeister, W., Plitzko, J. M., Biophysical Journal, Vol. 110, Feb. 2016, pp 860-869. 3.Bellare, J. R., Davis, H. T., Scriven, L. E. & Talmon, Y.: Controlled environment vitrification system: an improved sample preparation technique. J. Electron Microsc. Tech. 10, 87–111 (1988). 4.Bieber, A., Capitanio, C., Wilfling, F., Plitzko, J., Erdmann, P.S.: Sample Preparation by 3D-Correlative Focused Ion Beam Milling for High-Resolution Cryo--Electron Tomography. J. Vis.Exp. (176), e62886, doi:10.3791/62886 (2021). 5.Dubochet, J. & McDowall, A. W.: Vitrification of pure water for electron microscopy. J. Microsc. 124, RP3–RP4 (1981) 6.Dubochet, J., Lepault, J., Freeman, R., Berriman, J. A. & Homo, J. ‐C.: Electron microscopy of frozen water and aqueous solutions. J. Microsc. 128, 219–237 (1982) 7.Frederik, P. M., Stuart, M. C. A. & Verkleij, A. 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稻热病是最严重的水稻病害。稻热病菌透过分生孢子散播，其分生孢子在植株上萌发后，可形成特化的构造附着器以穿透植物组织，菌丝可经原生质丝在组织间生长蔓延，并再度产生分生孢子，在空气中以气流传播。子囊菌真菌稻热病菌被称为引起稻瘟病的半营养型病原体。稻热病菌感染水稻的叶子、茎和穗，并导致产量严重下降。为了建立对这种疾病的新的控制方法和开发抗性水稻品种，研究稻热病菌与水稻之间基因间和蛋白质间相互作用的细节。本文中，我们将介绍一个使用CFI Apo Lambda S 40XC 水镜拍摄稻热病菌微分干涉成像（DIC）和共聚焦扫描成像的应用实例，东京农业大学Hiromasa Saitoh 教授研究使用植物病原真菌中差异基因表达鉴定新病原基因。实验概述通过对接种水稻子叶的稻瘟病菌分生孢子悬液的进行 RNA-Seq 分析，发现假设的多个效应蛋白基因表达增加，并在接种12 至 24 小时后 (hours post-inoculation , hpi) 达到峰值（随着渗透和扩散逐渐增长），但在36 或 48 hpi 出现下调。在这些效应蛋白基因中，研究人员选择了7 个高表达基因，并制备了相应的稻瘟病菌干扰突变体。其中一个基因突变的菌株表现出低的致病性，该基因被命名为 MoSVP。为了调查MoSVP 在真菌中表达的时间和位点，稻瘟病菌转染报告质粒（MoSVP::mCherry）,在该质粒中mCherry (红色荧光蛋白) 的基因被插入到MoSVP启动子的下游。作为实验对照组，另一个报告质粒（Rp27p::mCherry），插入在稻瘟病菌核糖体蛋白27基因的下游。每一个转化株的孢子悬浊液在盖玻片上孵育或接种在水稻叶鞘内测的上皮，使用DIC 和共聚焦扫描显微镜对感染相关的形态和mCherry荧光的表达进行观察。Figure1. 水稻叶鞘接种和样本准备。Figure2. 表达有MoSVPp::mCherry的水稻瘟病菌的mCherry（红色）和DIC。分生孢子在胚管顶端萌发并发育出附着胞，然后渗透到宿主细胞中并形成侵入性菌丝。通过使用CFI Apo Lambda S 40XC 水镜进行DIC 和荧光观察，发现mCherry 荧光蛋白在玻片孵育18小时后可开始表达，同时接种在水稻叶鞘细胞上的菌丝在接种24小时后可以被观察到。Figure3. 在MoSVPp::mCherry突变菌株中， mCherry荧光的表达在18或24 hpi后在附着胞有明显的增强，然后表达下降。在Rp27p::mCherry 转化菌株中，mCherry荧光的在观察的时间点内表达量稳定。另外， mCherry 荧光在附着胞、分生孢子和胚芽管（12,18,24 hpi）和入侵的菌丝内（30 hpi）内均表达明显. 因此，该文揭示MoSVP 启动子在稻瘟病菌早期渗透到宿主细胞时被激活，表达在附着胞内。实验小结本文制备了一个由 MoSVP 启动子控制的表达mCherry 的稻瘟病菌株，并使用CFI Apo Lambda S 40XC 水镜对其感染相关的形态学进行DIC 和共聚焦观察。 结果证实，MoSVP 表达在稻瘟病菌感染后的早期阶段的附着胞内。这些结果显示，结合高精度的物镜和共聚焦扫描系统可以清晰的对植物致病真菌的荧光信号的定位和表达时间窗进行可视化。参考文献RNA-Seq of in planta-expressed Magnaporthe oryzae genes identifies MoSVP as a highly expressed gene required for pathogenicity at the initial stage of infection. Molecular Plant Pathology (2019) 20 (12), 1682-1695.

11月2日，牛津仪器官方公众号发布消息，ANDOR发布BC43台式共聚焦显微镜。产品介绍：BC43台式共聚焦显微镜，经济易用，小巧简约，能够帮助研究者轻松将3D图像纳入囊中同时节省时间和成本。自下而上的组件设计都恰到好处地平衡了高性能与易用性。通常来说，显微镜拍摄3D图像成本高昂，操作复杂，并且要求环境配备暗室。毋庸置疑，共聚焦技术唯有如此才能提供高质量的3D图像，尤其是厚样本和临床相关标本。ANDOR将用BC43台式共聚焦显微镜扭转这一局面，2D共聚焦图像以毫秒之速呈现，实时生成3D视图以供审视。紧凑的设计使其节时省地，轻轻松松即可置于普通实验室工作台之上。BC43台式共聚焦显微镜综合了从单细胞水平的亚细胞结构细节到稍大的模式生物与大型组织样本的多种成像体验，包括一些其他显微镜难以应付的厚样品。它同时适合研究新手和经验丰富的显微镜专家，简单到能让用户首次使用设备就在一小时内获得图像，也足够复杂到可以处理从活样品到固定样品等多样化成像需求。借此，越来越多的研究学者能够在日常工作流程中以超乎其他共聚焦多倍的速度获取精彩的图像。ANDOR的BC43产品经理Dr.Geraint Wilde评论道：“真的非常高兴能通过我们的BC43台式共聚焦显微镜可以将常规的高质量三维成像带入普通实验室。这个项目的启动是基于我们理解科学家都很繁忙，争分夺秒想尽可能快地收集到大量有意义的数据。如今科学家可以在同一工作台上制样并使用共聚焦技术，仅需短短几分钟就可以看到结果。我们的客户致力于在各个领域取得突破性进展，我们希望可以支持客户并且也相信BC43将会为客户的努力贡献价值。”来自阿尔加维大学的CBMR小组负责人Prof. Alvaro Tavares，在过去的12个月里他大量使用了BC43台式共聚焦显微镜。“这台共聚焦显微镜性能出色，成像质量卓而不凡。而且其结构紧凑，实验台即可放置，无需暗室。最主要是它操作太简单了，任何学生都可以在一个小时内使用这台共聚焦显微镜并产生高质量的结果。对于我这样的实验室的产出，它真的是一款理想的共聚焦显微镜。”ANDOR是一家市场领先的科学相机、显微镜系统和摄谱仪在开发和制造用于学术、工业和政府应用的高性能科学数码相机、显微镜系统和摄谱仪方面，安和或处于全球领先地位。2014年被牛津仪器以1.76亿英镑“无条件”收购。

激光扫描共聚焦显微镜（LSCM）是基于共轭焦点技术设计的显微镜类型，即为使激光光源、被测样品和探测器都处于彼此的共轭位置上。基本原理在一般的显微镜中通过将物镜的焦平面与探测器重合使得观测的像平面与相邻的轴平面隔离开来，而在共聚焦显微镜中通过使用衍射受限的光点照亮样品，并在该光点共轭焦点处的收集光路径中使用针孔来过滤杂散光达到产生这种隔离效果从而提高分辨率。激光共聚焦显微镜原理图成像特点—不同的焦平面上生成“z叠层”图像—上图所示结构中，只有在共轭的样品层反射回的光可以通过收集光路径中的小孔，其余无关的样品层反射被小孔阻隔。这可以得到显著的分辨率的提升。如下图所示的是同一厚样品的多维荧光显微镜和共聚焦显微镜的并排比较。当在不同的焦平面上拍摄一系列图像时，可以生成通常被称为“z叠层”的图像，这一图像显示了共聚焦显微镜提供的分辨率和对比度增益以及这些增益的根本原因。可以看到在成像平面位于组织上方的堆栈顶部检查图像可以发现荧光图像中带有大量的散射光，而共聚焦显微镜的图像则显示为黑色。这种轴向上的PSF的减少直接导致了z叠层中间光学界面上观察到的分辨率差异。同一厚样品多维荧光显微镜和共聚焦显微镜成像比较成像特点—光学切片扫描成像—激光扫描共聚焦显微镜的另一个特点是它是一种扫描成像技术，传统的宽场照明技术是将整个样品都照亮，因此可以图像可以直接被肉眼或探测器捕捉，但是LSCM采用一束或多束聚焦光束穿过样品扫描成像，这样得到的图像被称为光学切片，下所示即为传统的宽场照明方式与激光扫描共聚焦照明方式的区别。传统宽场显微镜和激光扫描共聚焦显微镜照明方式区别因此现代共聚焦显微镜的一种实际的工作方式如下图所示，激光发出的激发光通过二向色镜，通过一对振镜在样品x方向和y方向进行扫描，样品激发（或反射）的光通过针孔进入PMT检测器被记录，记录下的扫描图像通过计算机重构出实际的样品图像。一种实际的激光扫描共聚焦显微镜示意图成像特点—分辨率对比宽场照明大幅提升—在荧光显微镜中，单点发射的光强度由点扩散函数（PSF）描述，其图案就是一个艾里斑，荧光系统的分辨率可以由艾里斑的半径来描述，艾里斑的半径可以由物镜的数值孔径和激发光的波长决定：另一种荧光系统分辨率测量方式是半高宽最大值，即强度下降到峰值50%的值，此时宽场荧光照明的横向分辨率为：激光扫描共聚焦显微镜的分辨率为：这表明，共聚焦显微镜的理论最大分辨率比宽场照明提高了倍。下图表示了宽场显微镜与共聚焦显微镜的对比，左图为宽场显微镜得到的图像，右图为共聚焦显微镜得到的图像。宽场显微镜与共聚焦显微镜成像对比主要应用领域—医疗领域—Li 等人通过LSCM技术对31位虹膜粘连但角膜透明的病人进行了检查，观察到类树干状结构、树枝/灌木状结构、果实特征结构、上皮状结构等一些可能的结构变异，同时发现颜料粒子的减少可能会导致廷德尔积极现象[1]。主要应用领域—生物学领域—L. Cortes等人通过将抗钙结合蛋白（Alexa-568）和抗胶质纤维酸性蛋白（Alexa-488）对小鼠的小脑进行标记得到的图像。并且通过快速获取小鼠大脑的室管膜组织块上荧光标记的运动纤毛的概览，记录下了运动纤毛的确切位置，揭示了运动纤毛的作用机制。小鼠大脑图像小鼠大脑运动纤毛图像德国马克斯普朗克生物物理化学研究所的A. Politi、J. Jakobi以及P. Lenart等人通过Hoechst 44432对海拉细胞的DNA染色，使用微管蛋白抗体Alexa 488对微管染色以及鬼笔环肽Abberior STAR Red对F-肌动蛋白染色，使用LSCM得到了高效、超高分辨率的大视察视野的海拉细胞图像，帮助更好的了解了海拉细胞的结构以及发展变化。Dr. Gerry Apodaca等人通过用iDISCO对透明化的小鼠膀胱进行成像，获得了清晰且完整的小鼠膀胱图，有助于揭示小鼠膀胱内部运动的机理。小鼠膀胱主要应用领域—高分子化学领域—Deng等通过两种 Ｎ－硫代羧基内酸酐（MeSPG-NTA和Sar-NTA）的顺序分段投料聚合合成两亲性嵌段共聚物。通过纳米沉淀法、双乳液法等自组装方法，PMeSPG-b-PSar能分别形成纳米和微米尺度的聚类肽囊泡。在LSCM的表征下，由双乳液法获得的微米囊泡在 H2O2刺激下随时间逐渐崩解的过程被完整记录下来。将一种疏水的光敏剂四苯基卟啉（TPP）引入到 PMeSPG-b-PSar囊泡体系中，TPP可通过疏水相互作用附着在囊泡膜上，在光刺激下会引起囊泡崩解[2]。主要应用领域—表面粗糙度领域—Ibáñez等人通过LSCM对收割不同谷物在镰刀上产生的光泽进行测量，并测试了八种不同的加工材料（骨头、鹿角、木材、新鲜皮、干皮、野生谷物、驯化谷物和芦苇）产生的光泽，并通过分析软件建立预测模型数据库，首次证明了基于LSCM对使用磨损光泽的定量分析可以有效地识别用于加工不同接触材料的工具[3]。NCF950激光共聚焦显微镜配置更加灵活，售后通道更加方便，不输于进口成像的国产激光共聚焦显微系统。无级变速小孔控制单层图像景深，获取更佳图像质量。四荧光通道同时或分时成像，提高效率&消除串色。Z序列层扫，定量分析更轻松准确。20nm步进精度，还原厚样本空间结构。4096×4096图像一键生成，支持大图拼接，软件操作便捷。光强度只有汞灯1/1000，长时间实验观察不损伤样本。Nexcope 激光共聚焦成像图展示更多 Nexcope NCF950 成像图请访问：47.114.153.52:8080/novel.html

详细信息 上海交通大学激光共聚焦显微镜国际招标 上海市 状态：公告 更新时间： 2023-01-27 招标文件: 附件1 上海交通大学激光共聚焦显微镜国际招标公告.pdf × 扫码打开掌上仪信通App 查看联系方式 基本信息 关键内容：共聚焦显微镜 开标时间：2023-02-10 09:30 预算金额：320.00万元 采购单位：上海交通大学 采购联系人：点击查看 采购联系方式：点击查看 招标代理机构：上海国际招标有限公司 代理联系人：点击查看 代理联系方式：点击查看 详细信息 上海交通大学激光共聚焦显微镜国际招标 上海市 状态：公告 更新时间： 2023-01-27 招标文件: 附件1 上海交通大学激光共聚焦显微镜国际招标公告.pdf

仪器信息网讯 2024年6月18日，由仪器信息网主办的“第一届共聚焦显微成像技术及应用”网络会议圆满召开。15位来自知名高校和科研院所的科研专家、大型生命科学公共平台的技术专家以及国内外主流光学显微镜供应商分享了共聚焦显微镜的最新技术和应用进展，会议吸引近900位相关领域从业人员及学生报名参加。专家报告方面，清华大学、上海科技大学、中科院分子植物科学卓越创新中心、北京大学国重实验室、北京大学分析测试中心的成像平台负责人全面系统讲解了共聚焦显微镜的历史、发展、技术原理，并结合自身工作经验，举例分享了共聚焦显微成像技术在生物学、医药研究、发光材料表征等方向的应用；中国科学院上海免疫与感染研究所酒亚明研究员、中科院分子植物科学卓越创新中心凌祺桦研究员等5为学者分享了共聚焦显微镜在其科研工作中的实际应用。企业报告方面，共聚焦显微镜的主流供应商徕卡显微系统展示了其类器官多色深度成像，EVIDENT中国展示了他们全新一代共聚焦显微镜FV4000，牛津仪器ANDOR展示了其跨尺度显微成像及多维图像分析解决方案。国产供应商方面，创新企业艾锐科技在本次会议上重磅发布了国内首款转盘共聚焦显微镜，艾锐科技首席科学家席鹏教授向与会人员介绍了这块产品的技术创新之处，引发广泛讨论。在征得报告嘉宾同意后，本网特别将部分视频整理发布，供广大网友观看学习。（点击图片即可进入视频观看页面）《徕卡助力类器官多色深度成像》报告人：游换阳 徕卡显微系统（上海）贸易有限公司 高级应用专员《多色快速，好用省心----艾锐NovaSD转盘共聚焦解决方案及应用（上）》报告人：席鹏 北京大学/北京艾锐精仪科技有限公司 教授/首席科学家《多色快速，好用省心----艾锐NovaSD转盘共聚焦解决方案及应用（下）》报告人：王刚 北京艾锐精仪科技有限公司 销售总监《超高分辨率显微镜在哺乳动物动纤毛研究中的应用》报告人：陈青霞 上海交通大学医学院附属新华医院 助理研究员 青年PI《Niche inflammatory signals control periodical mammary regeneration and protect stem cells from cytotoxic stress》报告人：刘春业 国科大杭州高等研究院 博士后《“精准定量，光彩未来”——EVIDENT全新一代共聚焦显微镜FV4000》报告人：戚少玲 EVIDENT中国 产品技术总监《认识细胞生物学研究的“扛把子”——共聚焦显微系统的发展、原理及应用》报告人：蔡文娟 中国科学院分子植物科学卓越创新中心 高级工程师《牛津仪器ANDOR跨尺度显微成像及多维图像分析解决方案》报告人：郑垚 牛津仪器科技（上海）有限公司 ANDOR生命科学应用经理《小鼠滋养层类器官的构建及应用》报告人：林照博 上海科技大学生命科学与技术学院 研究员《泛素化介导的叶绿体蛋白调控》报告人：凌祺桦 中科院分子植物科学卓越创新中心 研究组长/研究员《共聚焦显微成像在生物医药研究中的应用》报告人：李文哲 北京大学天然药物及仿生药物全国重点实验室 助理研究员

众所周知，共聚焦显微镜通过针孔设计有效过滤焦平面以外的光，显著提升了对比度和分辨率。针对用户常问的“滨松共聚焦模块MAICO分辨率是多少？”的问题，本文将进行详细解答。 MAICO分辨率概述由于分辨率是由整个光学系统决定的，而MAICO模块本身不带光路，因此没有单独的分辨率概念。其分辨率需结合物镜和放大倍率来考虑。 等效像素尺寸说明 有些客户可能实际关心的是等效像素尺寸，MAICO的等效像素尺寸为6.25 μm。 分辨率公式：宽场显微镜VS共聚焦显微镜 滨松共聚焦模块MAICO的XY方向分辨率最大可达到120-200 nm之间，Z轴可达到250-400 nm（以100× NA1.5为例），具体数值依激光波长不同而有所变化。 显然，共聚焦显微镜分辨率显著高于宽场显微镜。 *有需要详细分辨率数据的客户可以下载滨松推出的MAICO Resolution Simulator方便地进行查询各种条件下MAICO可以达到的分辨率。扫码下载。 或者复制如下链接进入下载页面：https://www.hamamatsu.com/jp/en/product/life-science-and-medical-systems/mems-confocal-unit/resolution-simulator.html 在输入物镜规格和激光通道后，就可以得出三种针孔对应的AU以及XY-Z方向的分辨率。 针孔尺寸与图像质量的平衡为了达到最佳的分辨率，理论上针孔尺寸应当越小越好，不过为了在分辨率和图像灵敏度两者之间取得平衡，可以适当地设置针孔尺寸以达到最合适的图像质量。 针孔尺寸的选择 MAICO为每个通道设置了三档可选的针孔尺寸：S（小）、M（中）、L（大）。 弱荧光样品：推荐使用L（大）针孔，以提高图像信噪比。 强荧光样品：推荐使用M（中）或者S（小）针孔，以获得更高的分辨率。 物镜选择建议 由于光学设计方面限制的原因，我们推荐使用20-100倍的物镜，且物镜NA与放大倍率m满足如下关系： 其中，NA为数值孔径，m为放大倍率。通过合理配置物镜、放大倍率和针孔尺寸，滨松共聚焦模块MAICO能够提供卓越的分辨率和图像质量，满足各种科研和应用的需求。利用MAICO Resolution Simulator工具，用户可以轻松查询并优化其共聚焦系统的分辨率。 编辑：又又&▼

长光辰英超快共聚焦三维成像系统是长光辰英研制的一款用于活细胞快速成像及动态观测的产品，也可用于细胞及组织样品共聚焦荧光信号的快速扫描。为细胞生物学、微生物学、发育生物学、遗传学、组织学等领域科学研究提供更好用的超快三维荧光成像仪器。长光辰英超快共聚焦成像系统全国巡展活动进行中，欢迎各界意向用户踊跃报名参加免费试用，一经审核通过，我们将携试用仪器来到您的城市。报名入口：扫描下方二维码，进入长光辰英展位，扫描展位顶端banner图中的二维码报名即可！长光辰英超快三维荧光成像系统采用先进的三条纹转盘共聚焦成像技术，配合电动Z轴快速扫描，极大提高成像速度，满足活细胞动态观察研究需求。采用LED面光源激发光线更均匀，光毒性、光漂白性大大降低，适合连续观测。紧凑的新型共聚焦光路设计，既可灵活耦合在多品牌显微镜上，也可整机搭建，满足不同实验室需求。超快共聚焦三维成像系统应用结构光照明设计的狭缝转盘：狭缝转盘高速旋转，以通过狭缝结构调制的激光对被测样本进行快速扫描激发，经紧凑设计的短程光路到达探测器，以保证尽可能少的信号衰减。同时得益于狭缝转盘的高光通量特点，使非激光光源应用于三维荧光成像成为可能。本产品使用的相机具备出色的弱荧光捕捉性能，同时拥有超低的读出噪声、高速的帧频、高量子效率、高分辨率等优势。可根据不同应用方向配置多款sCMOS科学相机，既继承传统CMOS相机的高速、低功耗、无溢出等优点，也避免了CCD相机高暗电流、高读出噪声和一致性差等限制，为生物样本弱荧光高速成像提供理想选择。长光辰英超快共聚焦三维成像系统，满足共定位分析对探测器灵敏度苛刻需求。产品中使用的LED激发光源有长达数万小时的有效使用寿命，在使用期限内能保证光源亮度的高稳定性。与汞灯相比，无需频繁更换灯泡。与多通道激光器相比省去光纤、光闸等结构，可以有效提高仪器长期使用的可靠性。配合高光通量转盘，可实现物镜下与激光器相当的荧光激发强度。LED激发均匀，提高荧光光子利用率，降低光漂白性，更适合活细胞长时间成像。LED照明更适合大量数据数据（多层扫描、多视野扫描）对经济型易用性的要求。

详细信息 大连海事大学激光共聚焦显微镜采购项目公开招标公告 辽宁省-大连市-甘井子区 状态：公告 更新时间： 2022-10-18 大连海事大学激光共聚焦显微镜采购项目公开招标公告 2022年10月18日 15:39 公告概要： 公告信息： 采购项目名称 大连海事大学激光共聚焦显微镜采购项目 品目 货物/专用设备/专用仪器仪表/教学专用仪器 采购单位 大连海事大学 行政区域 大连市 公告时间 2022年10月18日 15:39 获取招标文件时间 2022年10月18日至2022年10月25日每日上午:8:30 至 11:30 下午:13:00 至 17:00（北京时间，法定节假日除外） 招标文件售价 ￥300 获取招标文件的地点 大连机械设备成套有限公司（大连市沙河口区西南路350-2号） 开标时间 2022年11月09日 09:30 开标地点 大连市高新园区黄浦路523号海事科技大厦A座（锦辉购物广场高新店漫咖啡后身）13楼会议室 预算金额 ￥275.000000万元（人民币） 联系人及联系方式： 项目联系人 郭崇瑾、张瑞宸 项目联系电话 0411-83608842-121、122 采购单位 大连海事大学 采购单位地址 大连市甘井子区凌海路1号 采购单位联系方式 石老师0411-84729221 代理机构名称 大连机械设备成套有限公司 代理机构地址 大连市沙河口区西南路350-2号 代理机构联系方式 郭崇瑾、张瑞宸0411-83608842-121、122 项目概况 大连海事大学激光共聚焦显微镜采购项目 招标项目的潜在投标人应在大连机械设备成套有限公司（大连市沙河口区西南路350-2号）获取招标文件，并于2022年11月09日 09点30分（北京时间）前递交投标文件。 一、项目基本情况 项目编号：DCZ202210044 项目名称：大连海事大学激光共聚焦显微镜采购项目 预算金额：275.0000000 万元（人民币） 采购需求： 激光共聚焦显微镜1套。 注：投标人所投产品可以为进口产品。（进口产品是指通过中国海关报关验放入中国境内且产自关境外的产品） 合同履行期限：合同签订后3个月内供货安装调试 本项目( 不接受 )联合体投标。 二、申请人的资格要求： 1.满足《中华人民共和国政府采购法》第二十二条规定； 2.落实政府采购政策需满足的资格要求： 无 3.本项目的特定资格要求：无 三、获取招标文件 时间：2022年10月18日 至 2022年10月25日，每天上午8:30至11:30，下午13:00至17:00。（北京时间，法定节假日除外） 地点：大连机械设备成套有限公司（大连市沙河口区西南路350-2号） 方式：本项目不接受现场报名，投标人须将以下资料PDF扫描件（加盖公章）一套发至邮箱guochongjin@163.com（1）投标人购买文件报名表（格式自拟，内容为项目名称、项目编号、投标单位名称、联系人、联系方式、电子邮箱等，邮件主题写清报名项目和单位名称）（2）营业执照副本、法定代表人授权委托书（3）招标文件费用银行电汇凭证（回单）复印件。 售价：￥300.0 元，本公告包含的招标文件售价总和 四、提交投标文件截止时间、开标时间和地点 提交投标文件截止时间：2022年11月09日 09点30分（北京时间） 开标时间：2022年11月09日 09点30分（北京时间） 地点：大连市高新园区黄浦路523号海事科技大厦A座（锦辉购物广场高新店漫咖啡后身）13楼会议室 五、公告期限 自本公告发布之日起5个工作日。 六、其他补充事宜 采购代理机构信息 开户名称：大连机械设备成套有限公司. 开户行：中国银行大连沙河口支行. 帐号：314256319366. 七、对本次招标提出询问，请按以下方式联系。 1.采购人信息 名 称：大连海事大学 地址：大连市甘井子区凌海路1号 联系方式：石老师0411-84729221 2.采购代理机构信息 名 称：大连机械设备成套有限公司 地 址：大连市沙河口区西南路350-2号 联系方式：郭崇瑾、张瑞宸0411-83608842-121、122 3.项目联系方式 项目联系人：郭崇瑾、张瑞宸 电 话： 0411-83608842-121、122 × 扫码打开掌上仪信通App 查看联系方式 基本信息 关键内容：共聚焦显微镜 开标时间：2022-11-09 09:30 预算金额：275.00万元 采购单位：大连海事大学 采购联系人：点击查看 采购联系方式：点击查看 招标代理机构：大连机械设备成套有限公司 代理联系人：点击查看 代理联系方式：点击查看 详细信息 大连海事大学激光共聚焦显微镜采购项目公开招标公告 辽宁省-大连市-甘井子区 状态：公告 更新时间： 2022-10-18 大连海事大学激光共聚焦显微镜采购项目公开招标公告 2022年10月18日 15:39 公告概要： 公告信息： 采购项目名称 大连海事大学激光共聚焦显微镜采购项目 品目 货物/专用设备/专用仪器仪表/教学专用仪器 采购单位 大连海事大学 行政区域 大连市 公告时间 2022年10月18日 15:39 获取招标文件时间 2022年10月18日至2022年10月25日每日上午:8:30 至 11:30 下午:13:00 至 17:00（北京时间，法定节假日除外） 招标文件售价 ￥300 获取招标文件的地点 大连机械设备成套有限公司（大连市沙河口区西南路350-2号） 开标时间 2022年11月09日 09:30 开标地点 大连市高新园区黄浦路523号海事科技大厦A座（锦辉购物广场高新店漫咖啡后身）13楼会议室 预算金额 ￥275.000000万元（人民币） 联系人及联系方式： 项目联系人 郭崇瑾、张瑞宸 项目联系电话 0411-83608842-121、122 采购单位 大连海事大学 采购单位地址 大连市甘井子区凌海路1号 采购单位联系方式 石老师0411-84729221 代理机构名称 大连机械设备成套有限公司 代理机构地址 大连市沙河口区西南路350-2号 代理机构联系方式 郭崇瑾、张瑞宸0411-83608842-121、122 项目概况 大连海事大学激光共聚焦显微镜采购项目 招标项目的潜在投标人应在大连机械设备成套有限公司（大连市沙河口区西南路350-2号）获取招标文件，并于2022年11月09日 09点30分（北京时间）前递交投标文件。 一、项目基本情况 项目编号：DCZ202210044 项目名称：大连海事大学激光共聚焦显微镜采购项目 预算金额：275.0000000 万元（人民币） 采购需求： 激光共聚焦显微镜1套。 注：投标人所投产品可以为进口产品。（进口产品是指通过中国海关报关验放入中国境内且产自关境外的产品） 合同履行期限：合同签订后3个月内供货安装调试 本项目( 不接受 )联合体投标。 二、申请人的资格要求： 1.满足《中华人民共和国政府采购法》第二十二条规定； 2.落实政府采购政策需满足的资格要求： 无 3.本项目的特定资格要求：无 三、获取招标文件 时间：2022年10月18日 至 2022年10月25日，每天上午8:30至11:30，下午13:00至17:00。（北京时间，法定节假日除外） 地点：大连机械设备成套有限公司（大连市沙河口区西南路350-2号） 方式：本项目不接受现场报名，投标人须将以下资料PDF扫描件（加盖公章）一套发至邮箱guochongjin@163.com（1）投标人购买文件报名表（格式自拟，内容为项目名称、项目编号、投标单位名称、联系人、联系方式、电子邮箱等，邮件主题写清报名项目和单位名称）（2）营业执照副本、法定代表人授权委托书（3）招标文件费用银行电汇凭证（回单）复印件。 售价：￥300.0 元，本公告包含的招标文件售价总和 四、提交投标文件截止时间、开标时间和地点 提交投标文件截止时间：2022年11月09日 09点30分（北京时间） 开标时间：2022年11月09日 09点30分（北京时间） 地点：大连市高新园区黄浦路523号海事科技大厦A座（锦辉购物广场高新店漫咖啡后身）13楼会议室 五、公告期限 自本公告发布之日起5个工作日。 六、其他补充事宜 采购代理机构信息 开户名称：大连机械设备成套有限公司. 开户行：中国银行大连沙河口支行. 帐号：314256319366. 七、对本次招标提出询问，请按以下方式联系。 1.采购人信息 名 称：大连海事大学 地址：大连市甘井子区凌海路1号 联系方式：石老师0411-84729221 2.采购代理机构信息 名 称：大连机械设备成套有限公司 地 址：大连市沙河口区西南路350-2号 联系方式：郭崇瑾、张瑞宸0411-83608842-121、122 3.项目联系方式 项目联系人：郭崇瑾、张瑞宸 电 话： 0411-83608842-121、122

项目编号：CLF0122GZ08ZC86项目名称：显微激光共聚焦拉曼光谱仪预算金额：150.0000000 万元（人民币）最高限价（如有）：150.0000000 万元（人民币）采购需求：序号标的名称数量（单位）简要技术需求或服务要求（具体详见采购需求）最高限价（人民币 元）1显微激光共聚焦拉曼光谱仪1台针对河流、湖泊、水库、池塘等水体受污染严重的现象，显微激光共聚焦拉曼光谱仪可以测定多种新型污染物（如：抗生素、微塑料、农药等）的种类和含量，用于研究水体中的氮循环系统、磷循环系统、浮游植物生长系统和溶解氧平衡系统。除此之外，拉曼光谱仪在表征建筑材料的结构和性能、纳米改性剂和纤维改性材料在沥青混合料中的作用和效果、观测黏土近冻结缘区的微结构等方面发挥重要作用。1500000经政府采购管理部门同意，本项目（显微激光共聚焦拉曼光谱仪）允许采购本国产品或不属于国家法律法规政策明确规定限制的进口产品，具体详见采购需求。本项目采购标的所属行业为：工业。合同履行期限：国内供货：在合同签订后（30）天内完成供货、安装和调试并交付用户单位使用；境外供货（可办理免税）：办理免税证明审批通过后（90）天内。本项目( 不接受 )联合体投标。

项目编号：0835-210Z16410581项目名称：华南师范大学物电学院采购激光共聚焦拉曼光谱仪项目采购方式：公开招标预算金额：1,350,000.00元采购需求：合同包1(激光共聚焦拉曼光谱仪):合同包预算金额：1,350,000.00元品目号品目名称采购标的数量（单位）技术规格、参数及要求品目预算(元)最高限价(元)1-1其他专用仪器仪表激光共聚焦拉曼光谱仪1(台)详见采购文件1,350,000.00-本合同包不接受联合体投标合同履行期限：国产设备：签订合同后4个月；进口设备：签订合同后5个月

北京市2012年度激光共聚焦扫描显微学最新进展学术研讨会顺利举行　　仪器信息网讯 2012年3月27日，为推动北京市及周边省市激光共焦扫描显微学的进步和发展，提高广大相关工作者的学术及技术水平，促进激光共焦扫描显微学在生命科学等领域中的应用和发展，北京理化分析测试技术学会和北京市电镜学会在北科大厦成功举办了“北京市2012年度激光共聚焦扫描显微学最新进展学术研讨会”。来自高校、科研院所、企业的100余名专家学者参加了本次会议。会议现场军事医学科学研究院张德添教授北京大学医学部生物医学分析中心何其华高工　　会议由军事医学科学研究院张德添教授，北京大学医学部生物医学分析中心何其华高工主持。Cdc42在小鼠卵母细胞减数分裂成熟中的作用中国科学院动物研究所孙青原研究员　　孙青原研究员现任中国科学院动物研究所计划生育生殖生物学国家重点实验室主任，他在报告中介绍了利用Zeiss LSM710激光共聚焦显微镜、珀金埃尔默Ultra VIEW VOX活细胞实时成像系统等仪器研究Cdc42在小鼠卵母细胞减数分裂成熟中的作用，Cdc42作为一种细胞骨架和细胞极化的重要调节物，在减数分裂和卵母细胞成熟过程中有重要的作用。毫米级多光子显微镜荧光成像奥林巴斯(中国)有限公司位鹏先生　　采集更明亮和更清晰地标本深层图像，对于更好的开展生命科学研究工作来说十分重要。位鹏先生介绍了奥林巴斯在这方面所能提供的解决方案：利用日本理学院Miyawaki博士研发的组织、器官透明液处理小鼠大脑样本，结合奥林巴斯的XLPLN25×SVMP镜头可以观察到深度达4mm处的深层图像。目前奥林巴斯还推出了一款新型的镜头，观察深度可达8mm，不过还未正式推向市场，可接受定制。超高分辨率显微镜技术中国显微图像网秦静女士　　在生命科学研究中科学家总希望看到更加细微的结构，从细胞到细胞器、再到蛋白质等生物大分子，这些结构的尺度都在纳米量级远远超出了常规的光学显微镜的分辨极限，电子显微镜虽然能提供纳米级的分辨率，但不适合观察活细胞，为了解决这一难题，超高分辨显微镜技术应时而生。在报告中秦静女士详细介绍了四种基于不同原理的超高分辨显微镜：4Pi显微镜、STED(受激发射损耗显微镜)、PALM(光激活定位显微镜)、STORM(随机光学重建显微束)，并分析了各类显微镜的性能及优缺点。多光子技术的新进展徕卡仪器有限公司王怡净博士　　王怡净博士从单分子探测(SMD)、相干反斯托克斯拉曼散射(CARS)、光参量振荡器(OPO)等三个方面介绍了多光子技术的最新进展。王怡净博士介绍说如果想观察分子的运动或分子的识别，采用普通的共聚焦技术就比较困难，所以单分子探测技术就应用而生。相干反斯托克斯拉曼散射技术是一种基于分子固有的振动特性的观察方法，样品无需进行荧光标记，避免了荧光漂白等问题，该技术是由华裔科学家谢晓亮发明，徕卡公司购买了该技术并将其产品化。光参量振荡器是一种新型红外激光器，它的激发波长可以达到1300nm，由于激发波长变长，因而散射更小，观测深度更深、对样品损伤更小。现代荧光显微镜学在生命科学中的应用蔡司光学仪器(上海)国际贸易有限公司张宁博士　　张宁博士介绍了在生命科学研究中，不同的样品分析对于仪器的灵活性、观察深度、扫描速度，以及分辨率等都有不同的需求，蔡司根据不同的需求能够提供相应的仪器：如果对深度要求比较高，可以选择多光子显微镜 如果要进行瞬态分析，可以选择转盘式共聚焦显微镜、纯内反射荧光显微镜等 如果对分辨率要求非常高，可以选择光活化定位系统、结构光学照明系统等。此外，张宁博士还介绍了蔡司最新的780点扫描激光共聚焦系统，以及在2011年7月蔡司将光学显微镜部门和电镜部门进行了整合。激光共聚焦扫描技术在神经发育中的作用研究北京大学医学部王韵博士　　神经系统是机体最重要、最复杂的系统。王韵博士在报告中介绍了激光共聚焦扫描显微技术在神经细胞增殖和分化中的应用；胚胎电转结合Confocal技术观察神经细胞的迁移；利用Confocal技术研究神经元极性、观察轴突导向；利用双光子Confocal技术观察培养的海马脑片中单个树突棘长时程结构可塑性改变时分子激活的时空变化、观察活体动物皮层神经元树突棘随外界刺激而出现的数目消长等。Volocity——3D活细胞时代的成像分析软件珀金埃尔默仪器(上海)有限公司公司焦磊博士　　焦磊博士介绍了珀金埃尔默推出的Volocity细胞三维结构分析软件，该软件包括多个功能模块，用户可以在同一软件环境下完成图像获取、分析和数据发表的全过程。Volocity软件的Acquisition模块可以实现多通道、多位点3D图像的精确定位和自动实时采集 Visualization模块可为用户提供多种图像展现方式，用户可以在高分辨率、完全交互的3D模式下实时解决样品构造 Quantitation模块提供了丰富的工具可以在3D模式下对物体进行测量、分析和跟踪描绘 Restoration模块设计用于三维或四维图像的反卷积计算，以提高图像的分辨率。超高分辨率显微镜的引进与发展态势分析中科院生物物理所纪伟博士　　纪伟博士介绍了目前不同的提高分辨率的成像方法的原理及其分辨能力，以及各种方法对样品制备的要求和在实际应用当中的优劣势。采用光敏定位技术的超分辨率显微镜采用大功率激光器和快速采样EMCCD，可以很好的观察活细胞 利用片层光扫描结合光敏定位成像技术可以观察厚样品 具有更高的分辨率，可以研究百nm尺度的细胞器细节结构。最后纪伟博士总结说，更高的分辨率、更快的分析速度以便观察活细胞、以及与其他技术的融合：如TIRF-STED、PALM-EM、STED-AFM、FCS-STED、STORM-AFM等。　　会议中，与会人员同专家及企业人员进行了充分的互动和交流，通过会议大家对于激光共聚焦扫描显微技术的最新进展有了更多的认识和了解。

详细信息 北京大学生命科学学院正置共聚焦显微镜采购项目公开招标公告 北京市-海淀区 状态：公告 更新时间： 2023-09-12 招标文件: 附件1 北京大学生命科学学院正置共聚焦显微镜采购项目公开招标公告 2023年09月12日 16:23 公告信息： 采购项目名称 北京大学生命科学学院正置共聚焦显微镜采购项目 品目 货物/通用设备/仪器仪表/其他仪器仪表 采购单位 北京大学 行政区域 北京市 公告时间 2023年09月12日 16:23 获取招标文件时间 2023年09月12日至2023年09月19日每日上午:9:00 至 12:00 下午:12:00 至 17:00（北京时间，法定节假日除外） 招标文件售价 ￥600 获取招标文件的地点 登录http://www.oitccas.com/注册并购买。 开标时间 2023年10月09日 09:30 开标地点 北京市海淀区丹棱街1号互联网金融中心20层东方厅（一） 预算金额 ￥230.000000万元（人民币） 联系人及联系方式： 项目联系人 吴老师 项目联系电话 010-62758587 采购单位 北京大学 采购单位地址 北京市海淀区颐和园路5号 采购单位联系方式 吴老师；010-62758587 代理机构名称 东方国际招标有限责任公司 代理机构地址 北京市海淀区丹棱街1号互联网金融中心20层 代理机构联系方式 王军、郭宇涵、李雯； 010-68290508；010-68290530 附件： 附件1 第六章 技术要求2006.docx 项目概况 北京大学生命科学学院正置共聚焦显微镜采购项目 招标项目的潜在投标人应在登录http://www.oitccas.com/注册并购买。获取招标文件，并于2023年10月09日 09点30分（北京时间）前递交投标文件。 一、项目基本情况 项目编号：OITC-G230312006 项目名称：北京大学生命科学学院正置共聚焦显微镜采购项目 预算金额：230.0000000 万元（人民币） 最高限价（如有）：230.0000000 万元（人民币） 采购需求： 包号 货物名称 数量 简要技术规格 是否允许采购进口产品 采购 预算 1 正置共聚焦显微镜 1套 正置共聚焦显微镜主要用于对脑片、活体的多色成像，进行紫外到近红外荧光波长的活体成像及检测，需要1-200帧/秒高速成像采集，同时也能应用于植物组织及细胞成像。该设备在生命科学多学科应用广泛，将对多个研究方向产生重要的支撑作用。 是 230 万元 注： 1)投标人须对整个包中全部内容进行投标，不得转包、分包。评标、授标以整个包为单位。具体技术要求详见招标公告所附附件（即，本招标文件第六章）。 合同履行期限：合同签订后120日内交货并安装完毕。 本项目( 不接受 )联合体投标。 二、申请人的资格要求： 1.满足《中华人民共和国政府采购法》第二十二条规定； 2.落实政府采购政策需满足的资格要求： 本项目不属于专门面向中小微企业、监狱企业、残疾人福利性单位采购的项目。 3.本项目的特定资格要求：1） 投标人须符合《中华人民共和国政府采购法》第二十二条的规定；(具体为供应商参加政府采购活动应当具备下列条件：（一）具有独立承担民事责任的能力；（二）具有良好的商业信誉和健全的财务会计制度；（三）具有履行合同所必需的设备和专业技术能力；（四）有依法缴纳税收和社会保障资金的良好记录；（五）参加政府采购活动前三年内，在经营活动中没有重大违法记录；（六）法律、行政法规规定的其他条件。)2） 投标人须在中华人民共和国境内合法注册、有法人资格并符合工商局或相关行业主管部门核准的经营范围或经营许可(进口产品投标必须委托国内代理商投标)；3） 代理商投标必须有制造厂家针对本项目的直接授权（仅针对进口产品投标）；4） 投标人按照招标公告要求购买了招标文件；5） 投标人不得为列入失信被执行人、重大税收违法案件当事人名单、政府采购严重违法失信行为记录名单的供应商。6） 为本项目提供整体设计、规范编制或者项目管理、监理、检测等服务的供应商，不得参加本项目投标；7） 投标单位负责人为同一人或者存在直接控股、管理关系的不同供应商，不得参加同一合同项下的政府采购活动；8）本项目不接受联合体投标。 三、获取招标文件 时间：2023年09月12日 至 2023年09月19日，每天上午9:00至12:00，下午12:00至17:00。（北京时间，法定节假日除外） 地点：登录http://www.oitccas.com/注册并购买。 方式：登陆“东方招标”平台（http://www.oitccas.com/），点击“获取采购文件”链接图标，或直接输入访问地址（http://www.oitccas.com/pages/sign_in.html?page=mine）完成投标人注册手续（免费），然后登陆系统寻找有意向参与的项目，已注册的投标人无需重新注册。招标文件售价：每包人民币600 元。如决定购买招标文件，请完成标书款缴费及标书下载手续。 售价：￥600.0 元，本公告包含的招标文件售价总和 四、提交投标文件截止时间、开标时间和地点 提交投标文件截止时间：2023年10月09日 09点30分（北京时间） 开标时间：2023年10月09日 09点30分（北京时间） 地点：北京市海淀区丹棱街1号互联网金融中心20层东方厅（一） 五、公告期限 自本公告发布之日起5个工作日。 六、其他补充事宜 1、投标文件递交地点：北京市海淀区丹棱街1号互联网金融中心20层东方厅（一） 2、招标文件采用网上电子发售购买方式： 1）登陆 东方招标 平台（http://www.oitccas.com/），点击 获取采购文件 链接图标，或直接输入访问地址（http://www.oitccas.com/pages/sign_in.html?page=mine）完成投标人注册手续（免费），然后登陆系统寻找有意向参与的项目，已注册的投标人无需重新注册。招标文件售价：每包人民币600 元。如决定购买招标文件，请完成标书款缴费及标书下载手续。 2）投标人可以电汇的形式支付标书款、保证金（应以公司名义汇款至下述指定账号）。 开户名称：东方国际招标有限责任公司 开户行：招商银行北京西三环支行 账 号：862081657710001 3）投标人应在平台上填写开票信息。在投标人足额缴纳标书款后，标书款电子发票将发送至投标人在平台上登记的电子邮箱，投标人自行下载打印。 3、以电汇方式购买招标文件和递交投标保证金的，须在电汇凭据附言栏中写明招标编号、包号及用途（如未标明招标编号，有可能导致投标无效）。 4、采购项目需要落实的政府采购政策： （1）政府采购促进中小企业发展 （2）政府采购支持监狱企业发展 （3）政府采购促进残疾人就业 （4）政府采购鼓励采购节能环保产品 七、对本次招标提出询问，请按以下方式联系。 1.采购人信息 名 称：北京大学 地址：北京市海淀区颐和园路5号 联系方式：吴老师；010-62758587 2.采购代理机构信息 名 称：东方国际招标有限责任公司 地 址：北京市海淀区丹棱街1号互联网金融中心20层 联系方式：王军、郭宇涵、李雯； 010-68290508；010-68290530 3.项目联系方式 项目联系人：吴老师 电 话： 010-62758587 × 扫码打开掌上仪信通App 查看联系方式 基本信息 关键内容：共聚焦显微镜,流式细胞仪 开标时间：2023-10-09 09:30 预算金额：230.00万元 采购单位：北京大学 采购联系人：点击查看 采购联系方式：点击查看 招标代理机构：东方国际招标有限责任公司 代理联系人：点击查看 代理联系方式：点击查看 详细信息 北京大学生命科学学院正置共聚焦显微镜采购项目公开招标公告 北京市-海淀区 状态：公告 更新时间： 2023-09-12 招标文件: 附件1 北京大学生命科学学院正置共聚焦显微镜采购项目公开招标公告 2023年09月12日 16:23 公告信息： 采购项目名称 北京大学生命科学学院正置共聚焦显微镜采购项目 品目 货物/通用设备/仪器仪表/其他仪器仪表 采购单位 北京大学 行政区域 北京市 公告时间 2023年09月12日 16:23 获取招标文件时间 2023年09月12日至2023年09月19日每日上午:9:00 至 12:00 下午:12:00 至 17:00（北京时间，法定节假日除外） 招标文件售价 ￥600 获取招标文件的地点 登录http://www.oitccas.com/注册并购买。 开标时间 2023年10月09日 09:30 开标地点 北京市海淀区丹棱街1号互联网金融中心20层东方厅（一） 预算金额 ￥230.000000万元（人民币） 联系人及联系方式： 项目联系人 吴老师 项目联系电话 010-62758587 采购单位 北京大学 采购单位地址 北京市海淀区颐和园路5号 采购单位联系方式 吴老师；010-62758587 代理机构名称 东方国际招标有限责任公司 代理机构地址 北京市海淀区丹棱街1号互联网金融中心20层 代理机构联系方式 王军、郭宇涵、李雯； 010-68290508；010-68290530 附件： 附件1 第六章 技术要求2006.docx 项目概况 北京大学生命科学学院正置共聚焦显微镜采购项目 招标项目的潜在投标人应在登录http://www.oitccas.com/注册并购买。获取招标文件，并于2023年10月09日 09点30分（北京时间）前递交投标文件。 一、项目基本情况 项目编号：OITC-G230312006 项目名称：北京大学生命科学学院正置共聚焦显微镜采购项目 预算金额：230.0000000 万元（人民币） 最高限价（如有）：230.0000000 万元（人民币） 采购需求： 包号 货物名称 数量 简要技术规格 是否允许采购进口产品 采购 预算 1 正置共聚焦显微镜 1套 正置共聚焦显微镜主要用于对脑片、活体的多色成像，进行紫外到近红外荧光波长的活体成像及检测，需要1-200帧/秒高速成像采集，同时也能应用于植物组织及细胞成像。该设备在生命科学多学科应用广泛，将对多个研究方向产生重要的支撑作用。 是 230 万元 注： 1)投标人须对整个包中全部内容进行投标，不得转包、分包。评标、授标以整个包为单位。具体技术要求详见招标公告所附附件（即，本招标文件第六章）。 合同履行期限：合同签订后120日内交货并安装完毕。 本项目( 不接受 )联合体投标。 二、申请人的资格要求： 1.满足《中华人民共和国政府采购法》第二十二条规定； 2.落实政府采购政策需满足的资格要求： 本项目不属于专门面向中小微企业、监狱企业、残疾人福利性单位采购的项目。 3.本项目的特定资格要求：1） 投标人须符合《中华人民共和国政府采购法》第二十二条的规定；(具体为供应商参加政府采购活动应当具备下列条件：（一）具有独立承担民事责任的能力；（二）具有良好的商业信誉和健全的财务会计制度；（三）具有履行合同所必需的设备和专业技术能力；（四）有依法缴纳税收和社会保障资金的良好记录；（五）参加政府采购活动前三年内，在经营活动中没有重大违法记录；（六）法律、行政法规规定的其他条件。)2） 投标人须在中华人民共和国境内合法注册、有法人资格并符合工商局或相关行业主管部门核准的经营范围或经营许可(进口产品投标必须委托国内代理商投标)；3） 代理商投标必须有制造厂家针对本项目的直接授权（仅针对进口产品投标）；4） 投标人按照招标公告要求购买了招标文件；5） 投标人不得为列入失信被执行人、重大税收违法案件当事人名单、政府采购严重违法失信行为记录名单的供应商。6） 为本项目提供整体设计、规范编制或者项目管理、监理、检测等服务的供应商，不得参加本项目投标；7） 投标单位负责人为同一人或者存在直接控股、管理关系的不同供应商，不得参加同一合同项下的政府采购活动；8）本项目不接受联合体投标。 三、获取招标文件 时间：2023年09月12日 至 2023年09月19日，每天上午9:00至12:00，下午12:00至17:00。（北京时间，法定节假日除外） 地点：登录http://www.oitccas.com/注册并购买。 方式：登陆“东方招标”平台（http://www.oitccas.com/），点击“获取采购文件”链接图标，或直接输入访问地址（http://www.oitccas.com/pages/sign_in.html?page=mine）完成投标人注册手续（免费），然后登陆系统寻找有意向参与的项目，已注册的投标人无需重新注册。招标文件售价：每包人民币600 元。如决定购买招标文件，请完成标书款缴费及标书下载手续。 售价：￥600.0 元，本公告包含的招标文件售价总和 四、提交投标文件截止时间、开标时间和地点 提交投标文件截止时间：2023年10月09日 09点30分（北京时间） 开标时间：2023年10月09日 09点30分（北京时间） 地点：北京市海淀区丹棱街1号互联网金融中心20层东方厅（一） 五、公告期限 自本公告发布之日起5个工作日。 六、其他补充事宜 1、投标文件递交地点：北京市海淀区丹棱街1号互联网金融中心20层东方厅（一） 2、招标文件采用网上电子发售购买方式： 1）登陆 东方招标 平台（http://www.oitccas.com/），点击 获取采购文件 链接图标，或直接输入访问地址（http://www.oitccas.com/pages/sign_in.html?page=mine）完成投标人注册手续（免费），然后登陆系统寻找有意向参与的项目，已注册的投标人无需重新注册。招标文件售价：每包人民币600 元。如决定购买招标文件，请完成标书款缴费及标书下载手续。 2）投标人可以电汇的形式支付标书款、保证金（应以公司名义汇款至下述指定账号）。 开户名称：东方国际招标有限责任公司 开户行：招商银行北京西三环支行 账 号：862081657710001 3）投标人应在平台上填写开票信息。在投标人足额缴纳标书款后，标书款电子发票将发送至投标人在平台上登记的电子邮箱，投标人自行下载打印。 3、以电汇方式购买招标文件和递交投标保证金的，须在电汇凭据附言栏中写明招标编号、包号及用途（如未标明招标编号，有可能导致投标无效）。 4、采购项目需要落实的政府采购政策： （1）政府采购促进中小企业发展 （2）政府采购支持监狱企业发展 （3）政府采购促进残疾人就业 （4）政府采购鼓励采购节能环保产品 七、对本次招标提出询问，请按以下方式联系。 1.采购人信息 名 称：北京大学 地址：北京市海淀区颐和园路5号 联系方式：吴老师；010-62758587 2.采购代理机构信息 名 称：东方国际招标有限责任公司 地 址：北京市海淀区丹棱街1号互联网金融中心20层 联系方式：王军、郭宇涵、李雯； 010-68290508；010-68290530 3.项目联系方式 项目联系人：吴老师 电 话： 010-62758587