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碱制绒机

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碱制绒机相关的论坛

  • 【原创大赛】某制剂中溶血磷脂酰胆碱的36月测定

    【原创大赛】某制剂中溶血磷脂酰胆碱的36月测定

    某制剂品种的原料药中含有磷脂酰胆碱,溶血磷脂酰胆碱为其降解产物。磷脂酰胆碱会引起溶血反应,因此要控制制剂中磷脂酰胆碱的限度。药品保质期为两年,根据国家局要求,为了更系统、全面的掌握药物的性质,对储存36个月的样品进行检验。色谱条件:Agilent 1200液相色谱仪;SEXDE 80蒸发光检测器;柱温为40℃;流动相为甲醇-冰醋酸(500:10),用三乙胺调pH值至6.0。色谱柱为TopsilTM(拓谱)Silica 4.6*250mm,5μm(Part Number:Tp5SI425; Serial Number: T11261504 )系统适用性溶液制备:取对照品适量制成含磷脂酰胆碱,溶血磷脂酰胆碱分别约为0.48mg/ml,0.08mg/ml的混合溶液。精密量取20ml注入液相色谱仪,连续进样5次,记录色谱图,规定磷脂酰胆碱峰与溶血磷脂酰胆碱峰的分离度应大于1.5。溶血磷脂酰胆碱峰面积的相对标准偏差不得大于3.0%。对照液制备:取溶血磷脂酰胆碱对照品约20mg,精密称定,置25ml棕色量瓶中,加异丙醇溶解,并稀释至刻度,作为对照品贮备液。精密量取对照品贮备液3ml,置50ml量瓶中,加异丙醇稀释至刻度,摇匀,作为对照品溶液。供试液制备:精密量取样品3ml,置50ml容量瓶中,加异丙醇溶解并定容至刻度,摇匀。即为供试液溶液。测定法:取供试品溶液和对照品溶液各20ml注入液相色谱仪,记录色谱图。标准规定,供试品中溶血磷脂酰胆碱的峰面积不得大于对照品溶液中溶血磷脂酰胆碱的峰面积。系统适用性溶液色谱图:http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2013/09/201309301844_468834_1609327_3.jpg对照色谱图:http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2013/09/201309301844_468835_1609327_3.jpg样品色谱图:http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2013/09/201309301844_468836_1609327_3.jpg结果:http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2013/09/201309301845_468837_1609327_3.jpg结论:36月后,溶血磷脂酰胆碱的含量已超标。

  • 食品中油脂过氧化值的检测用溶剂

    过氧化值的检测需经油脂提取,溶剂回收,油脂一般用氯仿复溶后测定,这里提取溶剂主要有无水乙醚、石油醚(30-60),乙醚由于易氧化且有麻醉作用,使用要求较高,帮使用石油醚的较多,问题是,为什么要把石油醚完全回收后测定,不能使用石油醚直接没溶剂测定,省略溶剂回收、复溶步骤吗,石油醚的主要成分为戍烷和己烷,它对过氧化值测定有干扰吗,干扰的原理是什么?

  • 【讨论】固体制剂溶解定容体积的问题

    定量检测时, 一般是称取适量的样品溶于容量瓶中,在分析主药含量较少(要求做含量均匀度的固体制剂)的药品时,取样量往往比较多,但常常不溶性辅料也很多,影响了实际定容体积,这时,加入的溶剂体积与容量瓶的实际体积有较大差距,还能以容量瓶的体积做的计算稀释倍数代入计算吗?

  • 溶剂残留检测需要如何配置仪器

    最近公司有个产品需要检测溶剂残留,样品为液体,溶剂残留指标值为5ppm,可能需要采购新的仪器,该如何配置呢?仪器主机初步选择为7890A,还需要其他哪些配置,是否增加一个顶空进样就可以了。

  • 标准溶液配制与溶剂效应问题

    最近用[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]液质[/color][/url]法做磺胺检测,遇到了一个标准溶液配制与溶剂效应的问题,特来请教大家。我使用的1ug/ml磺胺混标中间液溶剂是纯乙腈,上机的标准工作溶液浓度分别是10ng/ml, 20ng/ml, 50ng/ml, 100ng/ml,200ng/ml, 400ng/ml。使用初始流动相乙腈:0.1%甲酸水=10:90溶液来稀释配制标准工作溶液。上机后低浓度的标液出峰都正常,但200ng/ml和400ng/ml两个高浓度的标液就出现了问题,在第一个样品峰前出了一个小的溶剂峰,考虑是配制这两个高浓度的标准工作溶液时,从储备液中带入的乙腈较多,定容溶剂中乙腈的实际比例高于10%,从而出现了溶剂效应,这个问题要怎么解决呢?手头暂时又没有更大浓度的母液??

  • 【转帖】浅议制剂的残留溶剂研究。

    摘要] 本文以审评工作中遇到的固体分散体制剂、透皮贴剂等为例,讨论了制剂的残留溶剂对其质量、安全性的影响,希望引起药物研发者对制剂的残留溶剂研究的关注。 [关键词] 制剂 残留溶剂

  • 气相色谱只出现溶剂峰,没有溶质峰

    做的是标10微克每毫升,溶剂丙酮,溶质杀螟松。程序升温,柱相起始温度50,10度每分钟到250度,保持5分钟,分流比1/10.空气300,氢气40,进样口温度250,检测器温度250,每次出的都是溶剂峰。

  • 【原创大赛】标准物质自制--溶剂溶解法自制PAES和PAHS标准物质

    【原创大赛】标准物质自制--溶剂溶解法自制PAES和PAHS标准物质

    溶剂溶解法自制邻苯二甲酸酯PAES和多环芳烃PAHS标准样品 摘要:本法使用四氢呋喃溶解PVC塑料,定量加入PAES,PAHS高浓度标液,搅匀水浴挥发四氢呋喃等溶剂,烘干,称量阳性样品重量,计算出样品中PAES,PAHS的理论含量,剪碎再混匀即制得含PAES,PAHS的阳性样品,经GCMS验证DIBP,DPP,DNHP含量与理论值相对偏差在15%以内(PAHS,DEHP,DNOP还未验证)。流程: 剪碎PVC塑料---加入四氢呋喃溶解—加入目标物标液—水浴挥发溶剂并烘干---称重计算出目标物理论含量---GCMS测试样品实际含量 1 起因要做DIBP,DPP,DNHP的方法确认,苦于没有有证标物,连个有值样品也没有,老用标液搞实在没意思,经高人指点说可以自己制备阳性样品,想想也是,于是先想用加热方式熔融PVC,结果烧得实验室奇臭,样品烧黑了也没熔融,还真不是书上写的热塑性塑料加热就能熔融回去(可能是电加热板无法使塑料均匀受热吧),于是。。。2 简单的准备2.1 空白无值PVC样品2.2 四氢呋喃AR,烧杯2个,电加热板,烘箱,天平,剪刀,高浓度标液等3 简单的制作过程3.1 取样 取空白PVC样品若干,剪碎3.2 溶解加标 加入四氢呋喃溶解,加入量参考CPSC-C1001-CH-09.3,完全溶解后分别加入2ml 1000ppm左右的DIBP,DPP,DNHP,DEHP,DNOP,2ml 20ppm PAHS标液http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/09/201109231437_318876_1689180_3.jpg3.3 水浴挥发 使用水浴加热,挥发掉溶剂四氢呋喃等溶剂http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/09/201109231438_318877_1689180_3.jpg注意:水浴温度高时会有如图的白色泡泡,如果方便的话,水浴温度尽量低点,最好的晾干,因为温度高了,烧杯壁上有附上很薄的样品,导致样品不太均匀,低温挥发的话样品均匀性会好很多3.4 烘干称重,计算样品中目标物理论含量 烘箱60度1小时,用剪刀划开,即可拉起新制成的样品,感觉软了不少啊,再称量其质量,根据加入标液量计算出该样品目标物理论含量。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/09/201109231438_318878_1689180_3.jpg3.5 剪碎再混匀,确保样品均匀性 因发现新制成的样品各个部分泡泡不一样多,而且各处颜色不太均匀(水浴温度太高了导致样品不太均匀),感觉样品不均匀,所以再次剪碎混匀,使样品均匀http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/09/201109231623_318901_1689180_3.jpg3.6 GCMS测试验证 从上述剪碎样品中做2个平行样,按CPSC-C1001-CH-09.3检测DIBP,DPP,DNHP,相对偏差在15%以内http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/09/201109231439_318880_1689180_3.jpg 样品1和样品2DIBP,DPP,DNHP相对平均偏差小于10% 从2个样品结果看: a 与理论值相对偏差均在15%以内,准确度可以接受,第二个样品偏低较多,可能由于样品不太均匀引起的,在水浴挥发溶剂时使用低温挥发效果可能会好些 b 平行性也可以,相对极差小于10%4 其它材料与其他检测项目阳性样品的制备 4.1 其他检测项目阳性样品的制备 其实塑料里面的其他检测项目也应该可以这样制阳性样品(包括重金属,只要溶解塑料的溶剂和水能溶,四氢呋喃是溶于水的),只要它能在实际的塑料中存在,就能加进去,如果怕均匀性不好,就少制点样,一个单样用完。 4.2 其他材料阳性样品的制备 不同类型的塑料选不同的溶剂溶解,橡胶都可以被溶剂溶解,溶剂如乙酸乙酯溶油漆,二甲基甲酰胺溶塑料等

  • 软包装溶剂残留异味及溶剂纯度检测

    本文简要介绍了软包装领域中溶剂残留量超标所引发的社会问题,结合成因及对策,深入介绍软包行业的专用检测设备——由北京兰德梅克包装器材有限公司生产的2061C[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱仪[/url]的技术应用。一、食品包装类溶剂残留量超标所引发的社会问题   去年,随着央视对“甘肃食品袋毒袋”事件的曝光,社会各界对存在危及人体安全隐患——食品医药类复合包装用薄膜的“溶剂残留量超标”问题予以了充分关注……(载:国家质量技术监督局GB/T200中明文规定:包装食品类溶剂残留总量应≤10mg/m² ,其中苯类溶剂残留量≤3mg/m² )意即:如果我们使用的各种包装袋中溶剂残留量超过此标准,那么残留溶剂中的甲苯、二甲苯、丁酮、异丙醇、乙酸丁酯、乙酸乙酯等物质将像无形杀手一样对人体安全产生巨大威胁!   所以,“控制溶剂残留量,保证食品安全”的社会责任已不容置疑地将我们软包装企业推入了舆论的焦点。那么,究竟何种原因导致了溶剂残留量超标?该如何进行生产的过程控制?专用的“2061C[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱仪[/url]”如何检测溶剂残留量?检测实验中应注意哪些问题?对已超标的复合薄膜又将做何处理?以下将作详细说明:二、溶剂残留异味的成因及对策   对软包装厂而言,造成溶剂残留超标(有异味)的因素有很多,诸如:选择基材不当、生产工艺不规范,设备过于简陋老化,生产各环节没有进行必需的检测控制 等等,都与超标(异味)有着直接或间接的影响。拿原料基材来讲:油墨的品质、油墨的释放性以及涂墨的厚度,胶粘剂的品质、涂布量等,有机溶剂的纯度和配比 量以及与基材的相符性,都将影响溶剂的残留量。另外,软包生产设备过于简陋老化导致加热温度不合适,烘干风量不足,或无明晰之作业指导书,员工操作不规范,开机印刷速度不达标,添加剂不足,涂布不均匀、成品包装用材料较随意等等,都是造成其超标的主要因素。  特别值得一提的是:为数不少的软包企业在整个生产过程当中,完全省略了“品质检测”这一重要控制环节,根本没有配置专业用于检测溶剂残留异味及纯度的专用检测设备,就“包装袋异 味”的检测,仅凭经验依靠人的嗅觉进行简单判定,极大程度地增加了溶剂超标的发生机率,给使用企业及社会将造成重大危害。曾经有家企业在9月初,将已产成 的有严重异味的口罩制袋,拿去北京兰德梅克包装器材有限公司用2061C[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱仪[/url]进行检测,结果发现:苯类含量已达7mg/m² !严重超标造成异味!给该企业造成的直接经济损失达上百万(还不算将这些已超标复合膜的重新处理费用)!试想:如果该企业提早注意,加强重要过程的品质控制,是可以避免这种经济损失的。   综合以上分析,可以定论的是:合理的复合层结构,合理的原材料采购和使用,正确的生产工艺,配置专业的检测设备,执行严格标准的检测手法,生产合格安全的复合包装是完全可以的。下文将针对软包装检测,重点介绍2061C[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱仪[/url]的应用。三、软包装领域专业检测设备——2061C[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱仪[/url]的应用:2061C型[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱仪[/url]设计基于色谱分析与氢火焰离子化检测原理。由于氢火焰离子化检测器对有机化合物特别敏感,最小检测器可达10-9克,而对无机化合物无响应或响应很小。FID响应特性属于质量检测器,因此对温度、压力、流量等操作条件极不敏感,具有其他常用检测器无法比拟的操作特性,是目前[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱仪[/url]必配的检测器。值得指出的是,氢火焰离子化检测器也是目前[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱仪[/url]常用检测中唯一可以进水样的检测器。[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]的工作原理:以气体作为流动相、固体作固定相的色谱法。所需要分离的组分,分配在流动相和固定相两相中,色谱过程就是样品组分在通过色谱柱时,不断发生反复的吸附和脱附,或溶解和解析。由于各组分的吸附能或分配系数不同,沿载气方向移动速度不同,相继从柱中洗脱出的时间则不同,从而使组分得到分离。从柱中流出的组分进入检测器,将化学信号转变成电信号,以电压的形式被记录下来,得出各组分的定性和定量信息。  2061C[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱仪[/url]是一种专业用于准确、快速检测印刷包装品溶剂残留含量及检测溶剂纯度的高精度智能化检测系统,具有定性定量分析速度快、对比表现直观、数据精确可靠等系列特点:   1、不仅能直接显示出包装膜的各残留溶剂名称,如:乙醇、异丙醇、乙酸乙酯、乙酸丁酯、丁酮、苯类(甲苯,二甲苯),而且无须核算和计量可直接显示出包装膜每平方米多少毫克(mg/m² )的溶剂残留含量,结果直观、方便、数据精确可靠。   2、除可检测包装膜的溶剂残留含量,还可检测所使用溶剂的纯度,鉴别无味溶剂的成分特性,如乙醇、异丙醇、乙酸乙酯、乙酸丁酯、丁酮、苯类(甲苯,二甲苯)等溶剂,经过色谱检测,均可直接快速测得各含量及杂质等未知物,此举可有效防止溶剂的掺杂使假,杜绝不合格品的使用。   通过2061C[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱仪[/url]的检测,可为软包装企业有效调整生产工艺,控制溶剂,为防止溶剂残留超标提供准确方向,例如苯类超标,可立即判定印刷过程需要调整之工艺 参数,提高溶剂的挥发效率;若乙脂超标,则可判断干复工艺存在的问题,需要调整;对印刷半成品进行检测,则可有效判定印刷过程溶剂量指标,为生产质量控制 提供指引,对复合过程进行检测,则可有效判别复合过程该溶剂的指标。  所以通过2061C[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱仪[/url]上述检测说明,来判断该包装使用复合薄膜的溶剂残留量是否超标,是否需要重新开发生产工艺,对所采用的基材是否恰当等提供理论与技术支持,可以从根本上控制残留量超标的产生。值得一提的是:取样代表性、复合前的首检及熟化后的检验都是使用2061C[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱仪[/url]需重点考虑的地方。[color=red]【由于该附件或图片违规,已被版主删除】[/color][img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=18862]软包装溶剂残留异味及溶剂纯度检测[/url]

  • 液体制剂常用的半极性溶剂

    1.乙醇:没有特殊说明时,乙醇指95%(V/V)乙醇,可与水、甘油、丙二醇等溶剂任意比例混合,能溶解大部分有机药物和药材中的有效成分,如生物碱及其盐类、挥发油、树脂、鞣质、有机酸和色素等。20%以上的乙醇即有防腐作用。但乙醇有一定的生理活性,有易挥发、易燃烧等缺点。  2.丙二醇:药用一般为l,2-丙二醇,性质与甘油相近,但粘度较甘油为小,可作为内服及肌内注射液溶剂。丙二醇毒性小、无刺激性,能溶解许多有机药物,一定比例的丙二醇和水的混合溶剂能延缓许多药物的水解,增加稳定性。丙二醇对药物在皮肤和粘膜的吸收有一定的促进作用。  3.聚乙二醇:液体制剂中常用聚乙二醇300~600,为无色澄明液体、理化性质稳定,能与水、乙醇、丙二醇、甘油等溶剂任意混合。聚乙二醇不同浓度的水溶液是良好溶剂,医学|教育网搜集整理能溶解许多水溶性无机盐和水不溶性的有机药物。本品对一些易水解的药物有一定的稳定作用。在洗剂中,能增加皮肤的柔韧性,具有一定的保湿作用。

  • 溶剂混合对检测的影响

    流动相的配制与混合具有其特殊的意义和作用,混合不当都会对正常的检测造成不同程度的影响,下面几种情况都是色谱检测时经常遇到的,那么,您遇到下面的情况是怎么处理哒呢?下面的混合对检测会造成什么影响呢?欢迎各位版友提出您的建议和处理措施!=======================================================================~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~ 1:流动相的配制方式不同对组分保留时间的影响 a:分别量取规定数量的溶剂和水,然后混合在一起。 b:先量取一定体积的溶剂,然后再加水稀释至规定的总体积。 c:先量取一定体积的水,然后再加入溶剂至规定的总体积。2:流动相比例阀混合温度的变化对检测的影响 a:甲醇与水的混合放出热量。 b:乙腈与水的混合吸收热量。3:流动相的泵前低压混合与流动相的泵后高压混合对检测的影响 a:四元泵低压泵前混合。 b:二元泵高压泵后混合。4:流动相溶剂与缓冲盐互溶性对检测的影响 a:高浓度的溶剂与缓冲盐梯度混合。 b:纯溶剂与水的梯度混合。

  • 【乳制品检测之家】丙酮溶剂能否进ECD?

    群友问:做了一批菊酯,但是定容时误加了丙酮,请问可以进ecd吗?群友一分享:走样前走一两针正己烷,偶尔进几次影响不大。群友二分享:原则上来讲,ECD的溶剂一般用烃类做溶剂,禁止卤素类溶剂,不建议进含电负性元素强的溶积如甲醇,丙酮,酯类等,像偶尔弄错了进几次丙酮影响应该不会太大,但最好不要长期用丙酮溶剂。样品溶剂还得和对照品溶剂一致,所以建议最好之后还得用烃类溶剂重新配。ECD本身是有一定寿命的,长期进电负性强的溶剂会消耗ECD,会引起灵敏度下降的。群友三分享:丙酮会在柱子上反应自己发生缩合反应。感谢乳制品检测之家群友安老师,秋水老师,陈老师等的积极分享建议,整理不当之处,欢迎跟帖指正,也欢迎跟帖继续讨论。

  • 铝钒土熔融制样法?????急

    我们这里需要具体的铝钒土熔融制样法,熔剂配比?脱膜剂配比?是否需要氧化剂?需要多高的温度?(我们的炉子最高1200摄氏度),敬请各位高手提供详细的方法,谢谢!!

  • 溶剂残留标曲绘制溶剂的选择?

    有一个产品需要做溶剂残留,其中可能溶剂有乙腈,乙酸乙酯,正庚烷。我做标曲和样品,用顶空测,其一,如何选择溶剂,水是否合适?其二,我标曲浓度如何配制较为合理?其三,是直接配制不同浓度绘制标曲,还是配制一瓶再稀释绘制标曲更精准?

  • 安谱系列产品之九--气相色谱顶空溶剂,专为溶剂残留分析开发的溶剂,气相色谱终极溶剂

    顶空气相色谱法(HS-GC)已经被制药企业的实验室采用了很多年,但是人们尚未找到过一种挥发性有机物杂质背景值含量极低的溶剂。最近几年,随着检测器的灵敏度不断的增加,残留溶剂最小量的控制要求也越来越严格,所以寻找一种高质量并且适用于HS-GC-FID/HS-GC-MS分析的溶剂成为大势所趋。 在药物生产过程中,无论是原材料还是成品,残留溶剂的分析都是十分必要的。与样品其他组分相比,残留溶剂沸点具有沸点低、易挥发等特点,最合适的分析方法便是使用氢火焰离子化检测器(FID)或者质谱检测器(MS)的顶空气相色谱法。样品需要被溶解于一种无残留溶剂的高沸点溶剂。样品在高温下被孵化,残留溶剂就能以气态和样品的其他组分分离,从而进行HS-GC-FID/HS-GCMS。 气相色谱顶空溶剂中如甲醇、乙腈、乙醇、异丙醇、正丙醇、正丁醇、环己烷、正己烷、正庚烷、二恶烷、二氯甲烷、吡啶、四氢呋喃、叔丁基甲醚、乙酸乙酯、乙酸丁酯、乙酸异丙酯、苯系物(甲苯、乙苯、二甲苯)等数十种有机挥发性化合物杂质背景值极低,均低于1ppm。产品货号 产品名称 品牌 规格4.109001.1000 气相顶空级N,N-二甲基甲酰胺,DMF,for HS-GC CNW 1L 4.109002.1000 气相顶空级N,N-二甲基乙酰胺,DMA,for HS-GC CNW 1L 4.109003.1000 气相顶空级二甲基亚砜,DMSO,for HS-GC CNW 1L 4.109004.1000 气相顶空级1,3-二甲基-2-咪唑啉酮,DMI,for HS-GC CNW 1L 4.109005.1000 气相顶空级N-甲基吡咯烷酮,NMP,for HS-GC CNW 1L 4.109006.1000 气相顶空级环己酮,for HS-GC CNW 1L 4.109008.1000 吹扫捕集级甲醇,for purge and trap CNW 1L 4.109007.1000 气相顶空级水,for HS-GC CNW 1L

  • 【求助】只出溶剂峰

    刚开始只是基线很不稳,后来就拆下检测器口,怕点火圈与喷嘴靠的太近,就用镊子动了动,再装上检测器,基线是稳了,可是只出了一个溶剂峰,但溶剂峰的大小正常,其它峰一个不出。这究竟是怎么回事呢?有可能是FID的问题吗,急,请高手帮忙!!!!

  • 常用酸、碱、盐溶液配制方法大全,太实用啦

    常用酸、碱、盐溶液配制方法大全,太实用啦

    几种常用溶液浓度的表示法(1)质量百分比浓度:用溶质的质量占全部溶液质量的百分比来表示的浓度。简称百分浓度。(2)体积百分比浓度:用溶质的质量占溶剂体积的百分比来表示的浓度。在工农业生产中常用这种浓度。(3)体积比浓度:液体试剂相互混和或液体试剂用水稀释时常用此法。例如,1∶3酒精溶液指的是1体积的酒精和3体积的蒸馏水混和而成的酒精水溶液,1∶3中的前一个数字指的是溶质的体积数,后一个数字指的是溶剂的体积数。(4)物质的量浓度:用1升溶液里含有溶质的量来表示的溶液浓度。目前习惯称摩尔浓度,用M表示。(5)当量浓度:用每升溶液里所含溶质的克当量数表示的浓度。通常用N表示。常用酸、碱、盐溶液的配制1.酸溶液http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/11/201511061840_572639_1253919_3.jpg2.碱溶液http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/11/201511061839_572638_1253919_3.jpg3.盐溶液http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/11/201511061840_572640_1253919_3.jpg常用溶液配制方法1.30%丙烯酰胺溶液【配制方法】将29g丙烯酰胺和1g N,N’-亚甲双丙烯酰胺溶于总体积为60ml的水中。加热至37℃溶解之,补加水至终体积为100ml。用Nalgene滤器(0.45μm孔径)过滤除菌,查证该溶液的pH值应不大于7.0,置棕色瓶中保存于室温。【注意】丙烯酰胺具有很强的神经毒性并可以通过皮肤吸收,其作用具累积性。称量丙烯酰胺和亚甲双丙烯酰胺时应戴手套和面具。可认为聚丙烯酰胺无毒,但也应谨慎操作,因为它还可能会含有少量未聚合材料。一些价格较低的丙烯酰胺和双丙烯酰胺通常含有一些金属离子,在丙烯酰胺贮存液中加入大约0.2体积的单床混合树脂(MB-1Mallinckrodt),搅拌过夜,然后用Whatman 1号滤纸过滤以纯化之。在贮存期间,丙烯酰胺和双丙烯酰胺会缓慢转化成丙烯酰和双丙烯酸。2.40%丙烯酰胺【配制方法】把380g丙烯酰胺(DNA测序级)和20g N,N’-亚甲双丙烯酰胺溶于总体积为600ml的蒸馏水中。继续按上述配制30%丙烯酰胺溶液的方法处理,但加热溶解后应以蒸馏水补足至终体积为1L。【注意】见上述配制30%丙烯酰胺的说明,40%丙烯酰胺溶液用于DNA序列测定。3.放线菌素D溶液【配制方法】把20mg放线菌素D溶解于4ml 100%乙醇中,1:10稀释贮存液,用100%乙醇作空白对照读取OD440值。放线菌素D(分子量为1255)纯品在水溶液中的摩尔消化系数为21,900,故而1mg/ml的放线菌素D溶液在440nm处的吸光值为0.182,放线菌素D的贮存液应放在包有箔片的试管中,保存于-20℃。【注意】放线菌素D是致畸剂和致癌剂,配制该溶液时必须戴手套并在通风橱内操作,而不能在开放在实验桌面上进行,谨防吸入药粉或让其接触到眼睛或皮肤。药厂提供的作治疗用途的放线菌素D制品常含有糖或盐等添加剂。只要通过测量贮存液在440nm波长处的光吸收确定放线菌素D的浓度,这类制品便可用于抑制自身引导作用。4.0.1mol/L腺苷三磷酸(ATP)溶液【配制方法】在0.8ml水中溶解60mg ATP,用0.1mol/L NaOH调至pH值至7.0,用蒸馏水定容1ml,分装成小份保存于-70℃5.10mol/L乙酸酰溶液【配制方法】把770g乙酸酰溶解于800ml水中,加水定容至1L后过滤除菌。6.10%过硫酸铵溶液【配制方法】把1g过硫酸铵溶解于终量为10ml的水溶液中,该溶液可在4℃保存数周。7.BCIP溶液【配制方法】把0.5g的5-溴-4-氯-3-吲哚磷酸二钠盐(BCIP)溶解于10ml 100%的二甲基甲酰胺中,保存于4℃8.2×BES缓冲盐溶液【配制方法】用总体积90ml的蒸馏水溶解1.07g盐溶液BES、1.6g NaCl和0.027g Na2HPO4,室温下用HCl调节 该溶液的pH值至6.96、然后加入蒸馏水定容至100ml,用0.22μm滤器过滤除菌,分装成小份,保存于-20℃。9.1mol/L CaCl2溶液【配制方法】在200ml蒸馏水中溶解54g CaCl2?6H2O,用0.22μm滤器过滤除菌,分装成10ml小份贮存于-20℃。【注意】制备感受态细胞时,取出一小份解冻并用蒸馏水稀释至100ml,用Nalgene滤器(0.45μm孔径)过滤除菌,然后骤冷至0℃。10.2.5mol/L CaCl2溶液【配制方法】在20ml蒸馏水中溶解13.5g CaCl2?6H2O,用0.22μm滤器过滤除菌,分装成1ml小份贮存于-20℃。11.1mol/L二硫苏糖醇(DTT)溶液【配制方法】用20ml 0.01mol/L乙酸钠溶液(pH5.2)溶解3.09g DTT,过滤除菌后分装成1ml小份贮存于-20℃。【注意】DTT或含有DTT的溶液不能进行高压处理。12.脱氧核苷三磷酸(dNTP)溶液【配制方法】把每一种dNTP溶解于水至浓度各为100mmol/L左右,用微量移液器吸取0.05mol/l Tris碱分别调节 每一dNTP溶液的pH值7.0(用pH试纸检测),把中和后的每种dNTP溶液各取一份作适当稀释,在给出的波长下读取光密度计算出每种dNTP的实际浓度,然后用水稀释成终浓度为50mmol/L的dNTP,分装成小份贮存于-70℃。13.0.5mol/l EDTA(pH8.0)溶液【配制方法】在800ml水中加入186.1g二水乙二胺四乙酸二钠(EDTA-Na?2H2O),在磁力搅拌器上剧烈搅拌,用NaOH调节 溶液的pH值至8.0(约需20g NaOH颗粒)然后定容至1L,分装后高压灭菌备用。【注意】EDTA二钠盐需加入NaOH将溶液的pH值调至接近8.0,才能完全溶解。14.溴化乙锭(10mg/ml溶液)  【配制方法】在100ml水中加入1g溴化乙锭,磁力搅拌数小时以确保其完全溶解,然后用铝箔包裹容器或转移至棕色瓶中,保存于室温。  【注意】小心:溴化乙锭是强诱变剂并有中度毒性,使用含有这种染料的溶液时务必戴上手套,称量染料时要戴面罩。15.2×HEPES缓冲盐溶液  【配制方法】用总量为90ml的蒸馏水溶解1.6g NaCl、0.074g KCl、0.027g Na2PO4?2H2O、0.2g葡聚糖和1gHEPES,用0.5mol/l NaOH调节 pH值至7.05,再用蒸馏水定容至100ml。用0.22μm滤器过滤除菌,分装成5ml小份,贮存于-20℃。16.IPTG溶液  【配制方法】IPTG为异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(分子量为238.3),在8ml蒸馏水中溶解2g IPTG后,用蒸馏水定容至10ml,用0.22μm滤器过滤除菌,分装成1ml小份贮存于-20℃。17.1mol/L乙酸镁溶液  【配制方法】在800ml水中溶解214.46g四水乙酸镁,用水定容至1L过滤除菌。18.1mol/L MgCl2溶液  【配制方法】在800ml水中溶解203.4g MgCl2?6H2O,用水定容至1L,分装成小份并高压灭菌备用。  【注意】MgCl2极易潮解,应选购小瓶(如100g)试剂,启用新瓶后勿长期存放。19.β-巯基乙醇(BME)溶液  【配制方法】一般得到的是14.4mol/L溶液,应装在棕色瓶中保存于4℃。  【注意】BME或含有BME的溶液不能高压处理。20.NBT溶液  【配制方法】把0.5g氯化氮蓝四唑溶解于10ml 70%的二甲基甲酰胺中,保存于4℃。21.酚/氯仿溶液  【配制方法】把酚和氯仿等体积混合后用0.1mol/L Tris?HCl(pH7.6)抽提几次以平衡这一混合物,置棕色玻璃瓶中,上面覆盖等体积的0.01mol/l Tris?HCl(pH7.6)液层,保存于4℃。  【注

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