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梯度洗脱时,是不是采用最低浓度平衡系统?如何不是,当如何?
最近做梯度洗脱时,遇到比较头痛的问题,单进溶剂时基线漂移就比较厉害,甚至有很高的峰出来,如图,17min后没积分的即为基线中也有的峰。当时以为既然溶剂都有,就是空白了,在进样品时就没有积分。但心里还是没底,请教各位高手,这种现象正常不?梯度洗脱基线漂移是正常,但在后面有峰出来还正常吗?会不会是系统里面残留的东西,或是样品没完全洗脱出来?还有能不能改善一下洗脱程序,使基线好看一些啊?问题比较多,见笑了。洗脱程序如下:C18柱,A相甲醇,B相甲醇:水=5:95缓冲盐溶液时间(min)0212222432B%(V/V)1001001515100100
梯度洗脱,一相为甲醇,一相为磷酸盐缓冲盐,使用前需要先用大比例水冲一下系统吗