扩散试验仪

前段时间有人到我们实验室做扩散系数的测定实验，但是由于之前没有接触过，摸索了很久，才有了点眉目，今天抛出个么个问题，望有在做或做过这方面研究的版友一起讨论，与大家一同分享经验啊！

琼脂扩散是抗原抗体在凝胶中所呈现的一种沉淀反应。抗体在含有电解质的琼脂凝胶中相遇时，便出现可见的白色沉淀线。这种沉淀线是一组抗原抗体的特异性复合物。如果凝胶中有多种不同抗原抗体存在时，便依各自扩散速度的差异，在适当部位形成独立的沉淀线，因此广泛地用于抗原成分的分析。琼脂扩散实验可根据抗原抗体反应的方式和特性分为单向免疫扩散、双向免疫扩散、免疫电泳、对流免疫电泳、单向及双向火箭电泳实验。一、单向琼脂扩散实验1. 材料（1）诊断血清（抗体：抗人IgG或IgA免疫血清）（2）待检血清（抗原）：人血清http://img.dxycdn.com/trademd/upload/userfiles/image/2013/02/B1361084631_small.jpg （3）参考血清：全国统一人血清免疫球蛋白参考血清（批号不同，免疫球蛋白含量不同）。（4）其它：生理盐水、琼脂粉、微量进样器、打孔器、玻璃板、湿盒等。2. 方法（1）将适当稀释（事先滴定）的诊断血清与予溶化的2%琼脂在60℃水浴预热数分钟后等量混合均匀制成免疫琼脂板。（2）在免疫琼脂板上按一定距离（1.2~1.5 cm）打孔，见图1。（3）向孔内滴加1：2，1：4，1：8，1：16，1：32稀释的参考血清及1：10稀释的待检血清，每孔10 μl，此时加入的抗原液面应与琼脂板一平，不得外溢。（4）已经加样的免疫琼脂板置湿盒中37℃温箱扩散24小时。（5）测定各孔形成的沉淀环直径（mm），用参考血清各稀释度测定值绘出标准曲线，再由标准曲线查出被检血清中免疫球蛋白的含量。二、双向琼脂扩散实验1. 材料（1）诊断血清：兔抗人血清（2）待测血清：人血清（3）阴性对照血清（4）其它：生理盐水、琼脂粉、载玻片、打孔器、微量进样器等。2. 方法（1）取一清洁载玻片，倾注3.5~4.0 ml 加热熔化的1%食盐琼脂制成琼脂板。（2）凝固后，用直径3 mm 打孔器，孔间距为5 mm。孔的排列方式如图2所示。http://img.dxycdn.com/trademd/upload/userfiles/image/2013/02/A1361084537_small.jpg（3）用微量进样器于中央孔加抗体，于周围孔加各种抗原。加样时勿使样品外溢或在边缘残存小气泡，以免影响扩散结果。（4）加样后的琼脂板收入湿盒内置37℃温箱中扩散24~48小时。（5）结果观察：若凝胶中抗原抗体是特异性的，则形成抗原—抗体复合物，在两孔之间出现一清晰致密白色的沉淀线，为阳性反应。若在72小时仍未出现沉淀线则为阴性反应。实验时至少要做一阳性对照。出现阳性对照与被检样品的沉淀线发生融合，才能确定待检样品为真正阳性。（6）结果分析：琼脂扩散结果受许多因素影响。①抗原特异性与沉淀线形状的关系：在相邻两完全相同的抗原与抗体反应时，则可出现两单沉淀线的融合。反之，如相邻抗原完全不同时，则出现沉淀线之交叉；两种抗原部分相同时，则出现沉淀线的部分融合。见图3。http://img.dxycdn.com/trademd/upload/userfiles/image/2013/02/A1361084538_small.jpg②抗原浓度与沉淀先导形状的关系：两相邻抗原浓度相同，形成对称相融合的沉淀线；如果两抗原浓度不同，则沉淀线不对称，移向低浓度的一边。见图4。http://img.dxycdn.com/trademd/upload/userfiles/image/2013/02/A1361084539_small.jpg③温度对沉淀线的影响：在一定范围内，温度扩散快。通常反应在0~37℃下进行。在双向扩散时，为了减少沉淀线变形并保持其清晰度，可在37℃下形成沉淀线，然后置于室温或冰箱（4℃）中为佳。④琼脂浓度对沉淀线形成速度的影响：一般来说，琼脂浓度越大，沉淀线出现越慢。⑤参加扩散的抗原与抗体间的距离对沉淀线形成的影响：抗原、抗体相距越远，沉淀线形成的越慢，所以在微量玻片法时，孔间距离以0.25~0.5 cm 为好，距离远影响反应速度。当然孔距过远，沉淀线的密度过大，容易发生融合，有碍对沉淀线数目的确定。⑥时间对沉淀线的影响：沉淀线形成一般在1~3天出现，14~21天出现的数目最多。玻片法可在1~2小时出现，一般观察72小时，放量过久可出现沉淀线重合消失。

琼脂扩散是抗原抗体在凝胶中所呈现的一种沉淀反应。抗体在含有电解质的琼脂凝胶中相遇时，便出现可见的白色沉淀线。这种沉淀线是一组抗原抗体的特异性复合物。如果凝胶中有多种不同抗原抗体存在时，便依各自扩散速度的差异，在适当部位形成独立的沉淀线，因此广泛地用于抗原成分的分析。琼脂扩散实验可根据抗原抗体反应的方式和特性分为单向免疫扩散、双向免疫扩散、免疫电泳、对流免疫电泳、单向及双向火箭电泳实验。一、单向琼脂扩散实验1. 材料（1）诊断血清（抗体：抗人IgG或IgA免疫血清）（2）待检血清（抗原）：人血清http://img.dxycdn.com/trademd/upload/userfiles/image/2013/02/B1361084631_small.jpg （3）参考血清：全国统一人血清免疫球蛋白参考血清（批号不同，免疫球蛋白含量不同）。（4）其它：生理盐水、琼脂粉、微量进样器、打孔器、玻璃板、湿盒等。2. 方法（1）将适当稀释（事先滴定）的诊断血清与予溶化的2%琼脂在60℃水浴预热数分钟后等量混合均匀制成免疫琼脂板。（2）在免疫琼脂板上按一定距离（1.2~1.5 cm）打孔，见图1。（3）向孔内滴加1：2，1：4，1：8，1：16，1：32稀释的参考血清及1：10稀释的待检血清，每孔10 μl，此时加入的抗原液面应与琼脂板一平，不得外溢。（4）已经加样的免疫琼脂板置湿盒中37℃温箱扩散24小时。（5）测定各孔形成的沉淀环直径（mm），用参考血清各稀释度测定值绘出标准曲线，再由标准曲线查出被检血清中免疫球蛋白的含量。二、双向琼脂扩散实验1. 材料（1）诊断血清：兔抗人血清（2）待测血清：人血清（3）阴性对照血清（4）其它：生理盐水、琼脂粉、载玻片、打孔器、微量进样器等。2. 方法（1）取一清洁载玻片，倾注3.5~4.0 ml 加热熔化的1%食盐琼脂制成琼脂板。（2）凝固后，用直径3 mm 打孔器，孔间距为5 mm。孔的排列方式如图2所示。http://img.dxycdn.com/trademd/upload/userfiles/image/2013/02/A1361084537_small.jpg（3）用微量进样器于中央孔加抗体，于周围孔加各种抗原。加样时勿使样品外溢或在边缘残存小气泡，以免影响扩散结果。（4）加样后的琼脂板收入湿盒内置37℃温箱中扩散24~48小时。（5）结果观察：若凝胶中抗原抗体是特异性的，则形成抗原—抗体复合物，在两孔之间出现一清晰致密白色的沉淀线，为阳性反应。若在72小时仍未出现沉淀线则为阴性反应。实验时至少要做一阳性对照。出现阳性对照与被检样品的沉淀线发生融合，才能确定待检样品为真正阳性。（6）结果分析：琼脂扩散结果受许多因素影响。①抗原特异性与沉淀线形状的关系：在相邻两完全相同的抗原与抗体反应时，则可出现两单沉淀线的融合。反之，如相邻抗原完全不同时，则出现沉淀线之交叉；两种抗原部分相同时，则出现沉淀线的部分融合。见图3。http://img.dxycdn.com/trademd/upload/userfiles/image/2013/02/A1361084538_small.jpg②抗原浓度与沉淀先导形状的关系：两相邻抗原浓度相同，形成对称相融合的沉淀线；如果两抗原浓度不同，则沉淀线不对称，移向低浓度的一边。见图4。http://img.dxycdn.com/trademd/upload/userfiles/image/2013/02/A1361084539_small.jpg③温度对沉淀线的影响：在一定范围内，温度扩散快。通常反应在0~37℃下进行。在双向扩散时，为了减少沉淀线变形并保持其清晰度，可在37℃下形成沉淀线，然后置于室温或冰箱（4℃）中为佳。④琼脂浓度对沉淀线形成速度的影响：一般来说，琼脂浓度越大，沉淀线出现越慢。⑤参加扩散的抗原与抗体间的距离对沉淀线形成的影响：抗原、抗体相距越远，沉淀线形成的越慢，所以在微量玻片法时，孔间距离以0.25~0.5 cm 为好，距离远影响反应速度。当然孔距过远，沉淀线的密度过大，容易发生融合，有碍对沉淀线数目的确定。⑥时间对沉淀线的影响：沉淀线形成一般在1~3天出现，14~21天出现的数目最多。玻片法可在1~2小时出现，一般观察72小时，放量过久可出现沉淀线重合消失。

测定了扩散系数以后，机器会自动处理数据。但所给的数据中每一个峰都会对应一个扩散值，那么就是说对同一个分子上的几个峰就可能会几个略有不同的扩散值。那么我们在报道扩散值的时候是取所有值的平均呢，还是选取某一个峰的值呢，或者是还有其他什么处理的方法？实验过程中还遇到了同一个分子上不同峰机器给出数据差别较大的状况？这个又该怎样处理呢？ 希望大家讨论下， 谢谢！

在用阻抗谱求扩散系数的时候遇到问题：化学扩散（chemical diffusion）和自扩散（self-difffusion）有何区别？化学扩散在电化学阻抗谱中可以通过warburg体现，但自扩散呢？自扩散和化学扩散是否可以通过某些公式进行联系？请各位高手不吝指教

琼脂扩散试验为什么会出现孔底渗漏现像，加完样品后应该放在多少度自由扩散和平皿需要倒置湿盒中孵育吗

另外，自旋扩散实验有什么用？刚接触NMR，很多都不懂。

香水和花露水在研发阶段和检测阶段需要做透皮扩散实验么？

近段时间用碱解扩散滴定法检测了一批土样的水解氮，购买的扩散皿很容易破，大家在使用扩散皿的时候都是具体怎么操作的？

请问你们一般用的是哪里生产的扩散皿,我们这边的扩散皿买了几批都质量不好,我想找质量好的扩散皿,如果那位朋友知道请联系我,我的QQ是745831341,电子邮件是cdchen2003cd@163.com 电话是13980456596,陈先生

各位前辈，我是一个接触电镜不到2个月的菜鸟，很多都不知道，能否给我详细介绍一下扩散泵的工作原理？扩散泵的作用及安装的位置，怎么维护？跪谢！[em0808]

在电化学书中，提到扩散的问题时，有一个扩散系数。这个扩散系数一般用什么办法求？通常公式中有一个电极表面的初始浓度，这个怎么求？

全球最先进的激光导热系数分析仪模块化设计—随时升级，体积更小大功率能量源—测量更准确6样品自动分析—节约宝贵时间高真空设计—测量更精确应用多晶石墨石墨非常适合评估激光法热导仪的性能优劣。对多晶石墨进行的测试曲线显示材料在室温附近导热系数达到最大，热扩散系数随温度增加递减。材料比热可通过参比法测得，测试显示比热与热扩散系数增减趋势相反。铜、铝分别测量了纯铜和纯铝的热扩散系数，测试结果如下图，热扩散系数的测量值与文献值之间的偏差小于 2%。体现了Linseis仪器性能的卓越。石墨（Isotropic）用LFA1000测量了蛤同性石墨的热扩散系数，与日本AIST机构的数据比较，偏差小于2%。德国林赛斯 （LINSEIS Messgeräte GmbH） 林赛斯总部位于德国巴伐利亚州泽尔布(Selb),是一家有超过50年丰富专业经验的世界领先（热）分析仪器设备生产商，公司专门致力于研究、开发、生产热分析科学仪器，其产品的技术和质量方面一直处于业界领先地位。

无论是哪一种微生物实验室，只要操作感染性物质，气溶胶的产生是不可避免的。因此，除了控制空气传播感染，还要防止气溶胶扩散，这是控制空气传播感染的第二环节。在实验室中，有多种措施可以有效防止气溶胶的扩散，例如“围场操作”、“屏障隔开”、“有效拦截”、“定向气流”、“空气消毒”等，这些防护措施的综合利用可以获得良好的效果。(1)围场操作：围场操作是把感染性物质局限在一个尽可能小的空间(例如生物安全柜)内进行操作，使之不与人体直接接触，并与开放之空气隔离，避免人的暴露。实验室也是围场，是第二道防线，可起到“双重保护”作用。围场大小要适宜，以达到既保证安全又经济合理的目的。目前，进行围场操作的设施设备往往组合应用了机械、气幕、负压等多种防护原理。(2)屏障隔离：气溶胶一旦产生并突破围场，要靠各种屏障防止其扩散，因此也可以视为第二层围场。例如，生物安全实验室围护结构及其缓冲室或通道，能防止气溶胶进一步扩散，保护环境和公众健康。例如，BSL-3实验室核心区和半污染区之间的缓冲间则把操作感染性材料的核心区围场在尽可能小的范围内。按国家标准《实验室生物安全通用要求》(GBl9489-2004)的要求，进出核心实验室的缓冲间是必需的设置。这是因为：1)避免污染扩散，尽可能把污染限制在最小的范围内；2)一旦室内出现正压，工作人员可在缓冲室内换气、净化空气、安全撤离；3)退出实验室时可在其内换鞋、脱去外层衣服和手套、必要的消毒，避免内层衣服污染或污染其他房间。(3)定向气流：对生物安全三级以上实验室的要求是保持定向气流。其要求包括：1)实验室周围的空气应向实验室内流动?以杜绝污染空气向外扩散的可能，保证不危及公众；2)在实验室内部，清洁区的空气应向操作区流动，保证没有逆流，以减少工作人员暴露的机会；3)轻污染区的空气应向污染严重的区域流动。以BSL-3实验室为例，原则上半污染区与外界气压相比应为一20Pa，核心实验室气压与半污染区相比也应为一20Pa，感染动物房和解剖室的气压应低于普通BSL-3实验室核心区。(4)有效消毒灭菌：实验室生物安全的各个环节都少不了消毒技术的应用，实验室的消毒主要包括空气、表面、仪器、废物、废水等的消毒灭菌。在应用中应注意根据生物因子的特性和消毒对象进行有针对性的选择。并应注意环境条件对消毒效果的影响。凡此种种，都应在操作规程中有详细规定。(5)有效拦截：是指生物安全实验室内的空气在排人大气之前，必须通过高效粒子空气(HEPA)过滤器过滤，将其中感染性颗粒阻拦在滤材上。这种方法简单、有效、经济实用。HEPA滤器的滤材是多层、网格交错排列的，因此其拦截感染性气溶胶颗粒的原理在于：1)过筛：直径小于滤材网眼的颗粒可能通过，大于的被拦截；2)沉降：对于直径0．3／zm以上的气溶胶粒子作用较强。气溶胶粒子直径虽然小于网眼，由于粒子的重力和热沉降或静电沉降作用也可能被阻拦在滤材上；3)惯性撞击：气溶胶粒子直径虽然小于网眼，由于粒子的惯性撞击作用也可能阻拦在滤材上；4)粒子扩散：对于直径小于o．1Um的气溶胶粒子作用较强，气溶胶粒子虽然小于网眼，由于粒子的扩散作用也可能被阻拦在滤材上。依照上述原理，最不容易滤除的粒子是0．1～0．3／zm的粒子。防止气溶胶的吸入尽管采取了上述防止气溶胶扩散的种种措施，但由于气溶胶具有很强的扩散能力，还是不可避免地污染实验室的空气。所以，实验室工作人员仍然需要进行个人防护，以防止气溶胶吸人。

[font=DengXian]扩散泵注意事项和维护：[/font]1. [font=DengXian]经常观察仪器真空状态，保证前级泵运转良好，提供足够的初级真空。扩散泵加热前必须低于其前级耐压标准，否则泵就不能工作，并且泵油容易氧化，影响泵油的使用寿命。[/font]2. [font=DengXian]确保扩散泵有效进行冷却，否则会有泵油蒸气返飘到质谱腔，可能会出现[/font]m/z446[font=DengXian]离子，干扰或影响质谱本底，造成污染。所以经常检查扩散泵的冷却风扇是否良好工作，扩散泵是否发热发烫。[/font]3. [font=DengXian]每周检查泵油。定期（每年一次）检查扩散泵油的深度量，颜色，状态。如有必要，需及时更换。[/font]4. [font=DengXian]尽量避免突然断电。如果突然停电，扩散泵无法尽快冷却，可能会返油造成质谱污染。最好使用[/font]UPS[font=DengXian]，避免突然断电。[/font]

请问本征扩散、与自扩散系数区别？由元素线扫描数据能得到的是互扩散系数还是本征扩散系数？

目前采用ZLC法测扩散系数的方法成不成熟? 大家有没有做过的？我有一种催化剂颗粒粉末，内孔在微孔和介孔范围，想测试气体在催化剂内扩散的系数，不知道可不可行？北京地区有没有采用ZLC法做这种测试的实验室？请大家多多指教！

我的实验需要测底泥的总氮和总磷，总氮用凯氏定氮，用扩散代替蒸馏，碰到了很多问题，请帮我一起解决一下：首先，消煮到什么时候才算合适，我用380℃消煮，加土样的样品消煮液最后成蓝绿色，消煮管底部是固体物，上次液体还算清亮，但一旦冷却后就混浊了，变成奶绿色。空白样品消煮液是清亮的蓝色，没有固体物。然后，用扩散法，加好样后，40摄氏度恒温培养24小时，指示剂也没变色。我不知道问题是出在哪里了，是没消煮好，还是扩散法有问题？

扩散氢分析：扩散氢存在于晶格中，可自由移动，对钢材，焊材等产品危害非常大，大家都如何分析的呢？

请教一下，我用的日本电子的镀膜机，更换扩散泵油后发现O圈老化，手头没有日本电子的，就买个国产的换上了，不知道是否可以。请大师们指点

请教一下，我用的日本电子的镀膜机，更换扩散泵油后发现O圈老化，手头没有日本电子的，就买个国产的换上了，不知道是否可以。请大师们指点

说说焊缝里面的扩散氢分析方法有哪些～哪里可以做此类的检测机构和实验～

我们的质谱比较老了，还是以前的扩散泵，现在基本没有用的了资金的原因，还在坚持用着不知道扩散泵油是否需要定期更换，印象中似乎从未更换过，不知道用没有什么信号判断是否需要更换呢？又该如何进行更换呢？油的型号是否有要求？

弛豫时间和扩散系数有关系么？如何利用ROESY确定扩散系数呢？各位有没有好的该方面的理论书籍推荐啊？

有谁知道测定土壤潜在有效氮的方法“碱解扩散法”的最初的出处？[em01]

请问扩散泵的真空一般可以达到多少（mba)呢？

国产的扩散泵一般多少钱？谢谢！