孔率密定仪

各位做过卤代烃顶空法的，不知道你们怎么做精密度的，我平时做的时候直接配2个平行样进行测定，然后算标准偏差。现在做新方法确认，关于精密度这块，貌似要配制一定浓度的溶液重复进样6,7次左右。这样问题来了！现在普遍使用自动顶空进样器，进完一次样，原样品还可以继续顶空？先不说瓶盖上已经有上次取样时留下的针孔，热乎乎的瓶子还能继续恒温震荡？有没有做过的朋友能给解答一下，不胜感激！

最近在做顶空实验，测水里的乙醇，精密度总是不好，有时候偏差很大，不知道什么原因，刚接触顶空一个多月。顶空条件是： 70度平衡40分钟，不振摇；进样环和传输线的温度是80度 20ml的顶空瓶，样品5ml； 瓶压16.9psi,加压0.2min； 环取样0.15min，环平衡时间0.05min； 柱头压8psi，载气压力8.2psi； 分流比：5：1； 0.32mm的柱子。 大家帮忙看看哪里有问题，仪器配样应该没问题的。

微孔滤膜孔径0.22和0.45微米分别能过滤什么？主要的微孔滤膜孔径就这两种吗？

微孔滤膜　　微孔滤膜由精制硝化棉，加入适量醋酸纤维素、丙酮、正丁醇、乙醇、等制成，亲水，具有无毒卫生，是一种多孔性的薄膜过滤材料，孔径分布比较均匀穿透性的微孔，微孔率高达80‰的绝对孔径。主要用于水系溶液的过滤，故也称水系膜。 　　易燃，保存时应注意密封，防潮湿，防火。 　　一、特点：孔径比较均，孔隙率高，无介质脱落，质地薄，阻力小，滤速快，吸附极小。 　　二、主要用途：滤除药液、气体、油类、饮料、酒类、电子仪表等的微粒的细菌，也可以作微粒、细 　　菌的栓验。 　　三.微孔滤膜，有亲水性和疏水性之分，在现在的众多微孔滤膜中PVDF材料的是应用最广的，效果最好的！ 　　什么是滤膜? 　　滤膜(Membrane)又称分离膜。有人将滤膜依其孔径之大小与分离效能之不同，大致可分类为（由最大孔径至最小孔径）： 　　气体分离滤膜(Gas Separation Membrane) 透析滤膜(Dialysis/Hemodialysis Membrane) 反渗透滤膜(Reverse Osmosis Membrane) 超滤膜(Ultrafiltration Membrane) 微孔滤膜(Microporous Membrane) 全球滤膜之应用，乃始于二十世纪六十年代的海水淡化工程。目前除了大规模应用于海水、苦咸水之淡化与纯水、超纯水生产外，由于滤膜在过滤、分离、吸附、扩散等方面之高超效能与环保优性，如今亦已广泛应用于医药制程、化学工程、饮料制程、半导体电子冲洗、净水处理、生化检验等领域，俨然已成为本世纪生化科学中在过滤分离与检验分析应用上，极为重要之高新技术之一。 　　一般来说，滤膜使用者根据其应用上（过滤分离或检验分析）之不同要求，采用不同种类之滤膜。例如 小分子的浓缩，通常使用NF或RO滤膜，而大分子的澄清，则使用UF或MF滤膜。各滤膜因不同之特质与效能，在今日五花八门的科学与工业领域应用上，均扮演着不可缺少之重要角色。 　　什么是微孔滤膜? 　　微孔滤膜从结构上分析，乃一极薄滤膜，内呈多孔海绵状之结构。一般常见之孔径范围为0.1微米至10微米。时下微孔滤膜之制造者，又按其形态差异，将其分类为： 　　平板薄纸型滤膜(Flat Sheet Membrane) 中空纤维型滤膜(Hollow Fiber Membrane) 管状型滤膜(Tubular Membrane) 而上述三者之中「平板薄纸型滤膜」又依其结构上可再细分为「无支撑物之平板薄纸型滤膜Unsupported」与「有支撑之平板薄纸型滤膜Supported」两种。若由此两者制造上所需科技之要求，生产「无支撑物之平板薄纸型滤膜」则较生产「有支撑物之平板薄纸型滤膜」来得更为精密与复杂。 　　微孔过滤乃筛分过程，属于精密过滤。微孔精密过滤是指滤除0.1μm至10μm 微粒之过滤技术，一般而言，过滤机理分表面型与深层型两类。微孔过滤乃筛分过程，属于精密过滤。经由高级技术制造的MF膜其过滤机理为表面型过滤。因过滤孔径固定，故可确保过滤的精度与可靠度。深层过滤又分非固定不规则孔径与固定不规则孔径，前者如化纤绕线型滤芯，一般只作为比较粗糙的预过滤。 　　 孔径 用途3.0-10.0μmRO脱盐前之保安过滤 0.6-0.8μm大剂量注射液、大输液中的微粒过滤，啤酒、饮料过滤，油类光刻胶、喷漆溶剂等的澄清过滤 0.45μm电子工业高纯水终端过滤，MOS试剂的过滤 0.2μm药液、生物制剂和热敏性流体的除菌过滤，电子工业超纯水终端过滤，低度酒的澄清过滤 　　微孔过滤操作有无流动(Deadend与错流(Crossflow两种。前者应用于稀(固体含量)料液和较小规模应用。滤膜制成滤芯，大多为一次性。错流操作又称切线流操作，对于悬浮粒子大小、浓度的变化不很敏感，适用于较大规模之应用，此类操作的滤膜组件需经常周期性清洗、再生。)) 微孔滤膜应用时应注意以下几点　　① 应作起泡点的测定:测定起泡点压力可以反映微孔滤膜的孔径大小,这与被滤过的药液质量密切相关,也是保证微孔滤膜质量的一种重要手段。使用的微孔滤膜应事先放在70℃左右的注射用水中浸泡1 h。将水倾出后再用温注射用水浸泡过夜备用。临用时取出,用注射用水淋洗干净,即可装入过滤器中使用,安装。时防止滤膜装歪泄漏。 　　② 为保护延长滤膜的使用寿命,可用同等大小的滤纸或绢绸布(应先用质量浓度20 g·L - 1磺酸钠溶液煮沸绢绸布约30 min,然后用注射用水清洗干净)放在滤膜上,防止滤膜破裂。 　　③ 微孔滤膜之孔径为锥体状,光滑的一面孔径小为正面;粗糙的一面孔径大为反面,安装时应将正面朝下,反面朝上,否则易被杂质阻塞孔径,影响滤速。温度低时,应将处理好的滤膜放于与药液温度相同的注射用水中浸泡5～10 min,可避免因温差使滤膜抗拉强度降低而导致破裂现象。 　　④ 在滤器架的排气管的皮管头上,固定一个16号输液针头,用止水夹控制,可避免排气压力与速度过大致使滤膜破裂。 　　⑤ 不要将滤架连同滤膜一起进行灭菌,否则滤膜因热胀冷缩而致脆裂皱折。 [

岛津GC2014-ECD与岛津HS-10分析水中的三氯甲烷和四氯化碳，GC2014上的附加流量设为160KPa，顶空加压压力设置为80Kpa，加压时观察了一下，并没有达到80kPa。我们做精密度都很大，达到20%多，甚至30%多，这个跟加压压力有没有关系？顶空加压压力达不到，是顶空漏气，还是加压时间太短了？

我使用0.45微米的滤膜过滤我的流动相（0.05mol/L磷酸-三乙胺缓冲液：乙腈=82：18）时，为什么最后膜的表面坑坑洼洼，孔隙变很大了？谢谢各位给予技术支持！

大家知道乙二醇单丁醚是哪个法规指令管控吗？

脂肪测定中有关滤纸的孔径问题GB淀粉中脂肪测定中要求滤纸孔径为10微米！可是这在哪里买啊我上网查过，快速，中速和慢速都不符合啊快速：孔径为80～120微米中速：孔径为30～50微米慢速：孔径为1～3微米第二个问题是用定量滤纸还是定性滤纸测定脂肪含量？

做质控样，是滤膜中镉的含量检测，一般重金属的质控样都是直径约2.5cm的那种，磨砂盒装。这次收到一质控样，滤膜好像是直径37mm的，透明盒装。不知道这两种差别大不大。求：如果哪位老师做过或者知道这种滤膜的定值的信息，麻烦跟说一下，万分感谢。

最近在摸索顶空法作食品中的甜蜜素，在作标准曲线时发现有两个峰都成线性关系，一个大一个小，大的峰很稳定，平衡1小时也还有，小的峰不稳定，1小时后就没了，我想问问甜蜜素和亚硝酸钠生成的环己醇亚硝酸酯稳定不稳定，如果稳定的话，那个大的峰可能就是衍生物了。有没有人遇到类似情况？？？

1概述　　　　在线电导率仪主要由电导率电极(传感器)和电导率显示控制仪两部分组成。其工作原理和台式电导率仪的工作原理一样,都是基于电导率、电导和电导池常数的关系式。即:　　　　式中:k—电导率仪,μS·cm-1;Kcell—电导池常数,cm-1;G电导,S;R—电阻,Ω。　　　　由于CM-230型在线电导率仪有自动温度补偿功能,故按照规程要求只需对其进行外观、电子单元引用误差、电子单元重复性、电导池常数示值误差、仪器引用误差和仪器重复性等项目的检定。　　　　2检定用设备及标准物质　　　　检定用设备及标准物质如表1所示。　　　　3检定方法　　　　3.1外观检查　　　　仪器面板应清洁,标示清晰,显示清楚完整;仪器背部接线准确无误且牢固,导线与导线间无直接及间接接触,绝缘良好;调零钮、常数调节钮及换挡插件能正常工作;仪器铭牌干净,标示齐全;传感器单元完好无损,能正常地把信号传输到电子单元。　　　　3.2电子单元引用误差的检定　　　　(1)关闭电源,对照图1连接检定装置。1和3连接电导率仪检定装置,2和4连接温度模拟补偿电阻(精密直流电阻箱)。　　　　(2)调零。断开1或3,将短路插片置于20μS·cm-1档,打开电源,调节ZERO钮,使仪器示值为零,然后把线路还原接好。　　　　(3)调节常数。将短路插片置于常数调节档(CHECK),调节CHECK钮,使常数为1.000cm-1。　　　　(4)检定。将短路插片置于20μS·cm-1量程档,从电导率仪检定装置向被检仪器输入对应量程范围内的电阻值,记下相应的仪器示值,至少检定3个点,且这些点应分散分布,重复测量3次。　　　　(5)切换到其他的量程档,重复c和d操作。　　　　(6)计算。电子单元应用误差按公式(2)计算。　　　　式中`k某点三次示值的平均值,μS·cm-1;ks—对应点输入的标准电导率,μS·cm-1;kF—检定该点时所选量程的上限值,μS·cm-1;Δk—该点仪器示值的绝对误差,μS·cm-1。　　　　3.3电子单元重复性的检定　　　　在电子单元引用误差检定的同时,选择任一量程档(通常选择200μS·cm-1档),输入一标准电导率值(如100μS·cm-1),读取电导率仪示值,连续测量6次,按公式(3)计算电子单元重复性。　　　　式中:ki—第i次仪器的示值,μS·cm-1。

有机挥发性杂质做顶空。参照标准：配制成含二氯甲烷36ppm，三氯甲烷3.6ppm，三氯乙烯4.8ppm，二氧六环22.8ppm，苯0.12ppm的水溶液，精密取5ml于顶空瓶加无水硫酸钠1g密封摇匀作为对照液。精密取样品0.3g置顶空瓶精密加水5ml与无水硫酸钠1g密封摇匀，作为供试液。顶空温度90℃ 平衡30分钟。SE54柱 柱温45℃ 载气为氦气 4.5ml/min FID检测器 残留溶剂应符合规定我用的是danni86.50顶空进样器，里面有震荡功能的，我加了无水硫酸钠密封，设置轻微震荡。结果顶空瓶进样出来，还有无水硫酸钠没有完全溶解！ 后来我加了硫酸钠手摇了再放入了。手动摇了之后rsd最大的一个有7.6%这说明设置轻微震荡不能完全溶解无水硫酸钠的！因为要做rsd重复性要好，手动要感觉有些会弄到瓶壁上的。设置强震荡还没试过会不会完全溶解，有试过的也说说盐析怎么摇匀最好。

我现在要过滤的混合液中硫代硫酸钠为干扰物质，要过滤出沉淀物质硫化锌沉淀。硫代硫酸钠能否透过0.45微米微孔滤膜，还是说0.45微米微孔滤膜只能把水滤过，其它物质都会留在0.45微米微孔滤膜的上面。我的目的是要把混合液中的沉淀物质硫化锌和硫代硫酸钠等水溶性物质分开。单独检测沉淀物质硫化锌

用乙腈配置孔雀石绿、结晶紫、隐色孔雀石绿、隐色结晶紫，用后过几天就发现标准品的峰面积变了，有什么办法没？因为用LCMSMS做的，定量定不准，而且回收率也不稳定，请各位大侠指点一二。

异丙醚在[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相[/url]中用顶空做出几个峰啊？

请问手动气密进样针如何清洗，顶空用的，谢谢

顶空其实用的不多。但是还是少不了。顶空瓶最关键的部位，就是密封垫了。密封不好，气体外泄，肯定严重影响实验结果。你们的密封垫子都是用几次呢？基于什么样的想法这样执行呢？

我想请问各位版友，我们作农饮水检测的气相色谱仪是普析G5+毛细管柱+ECD,主要是为了检测三氯化碳、四氯甲烷，一定需要配置顶空进样器吗？如果一定需要，有没有可以推荐的品牌？

本人所在公司啶虫脒项目开机在即，却没有中控的分析方法，希望各位能够提供帮助，要求仪器，载气流量，所用色谱柱型号，进样量等明确，最好附典型色谱图，我有大量农药方面的分析资料也可与您交换，我的电子邮箱是[email]hxgs5393957@sohu.com[/email]

由于孔雀石绿和无色隐性孔雀石绿均为脂溶性化合物,在鱼体内和环境中残留时间长,并有致突变、致畸和致癌的危险性,因此其是否可作为水产养殖业中使用的兽药在国际上引起了争论。加拿大于1992 年就禁止其作为鱼场杀菌剂使用,且加拿大和美国均规定在食用鱼等水产品中禁止检出孔雀石绿和无色隐性孔雀石绿。欧盟于2002 年6 月颁布法令禁止其在作为食品鱼的鱼场中使用, 我国也于2002 年5 月将孔雀石绿列入《食品动物禁用的兽药及其化合物清单》中。但是,事实上,包括我国和英国在内的许多禁用孔雀石绿的国家,从对市场上销售的鱼类等水产品中孔雀石绿的监测情况来看,仍有在鱼场中非法使用孔雀石绿的现象。 基于这些在水产养殖业中非法使用孔雀石绿的现象,各国政府和消费者密切关注，由此引发各国加大力度进行孔雀石绿的监督检查,同时形成一些标准的检测体系。(一)我国的检测标准【 标准编号 】GB/T 19857—2005 【 标准名称 】水产品中孔雀石绿和结晶紫残留量的测定【 英文名称 】 Determination of malachite green and crystal violet residues in aquatic product【 起草单位 】上海出入境检验检疫局；厦门出入境检验检疫局；广东出入境检验检疫局；福建出入境检验检疫局；江苏出入境检验检疫局；北京出入境检验检疫局；宁波出入境检验检疫局。【 发布日期 】 2005-09-05【 实施日期 】 2005-09-05 【 标准编号 】 SC/T 3021-2004【 标准名称 】 水产品中孔雀石绿残留量的测定.液相色谱法【 英文名称 】 Determination of malachite green residues in fishery products High-performance of liquid chromatography【 起草单位 】 中国海洋大学 国家水产品质量监督检验中心【 发布日期 】 2004-01-17【 实施日期 】 2004-03-01 【 标准编号 】SN/T 1479-2004【 标准名称 】进出口水产品中孔雀石绿残留量检验方法【 发布日期 】2004-11-17【 实施日期 】2005-04-01【 发布单位 】国家质量监督检验检疫总局（二）美国的检测标准1.美国FDA规定的孔雀石绿及其代谢产物实验室检测标准 【 标准编号 】 LIB4363【 标准名称 】鱼和虾中孔雀石绿和隐性孔雀石绿的LC-VIS法和[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]LC-MS[/color][/url]n法【 英文名称 】 Quantitative and Confirmatory Analyses of Malachite Green and Leucomalachite Green Residues in Fish and Shrimp【 起草单位 】U.S. Food and Drug Administration, Animal Drugs Research Center, Denver, CO【 发布日期 】 2005-11 【 标准编号 】LIB4333【 标准名称 】测定和确认鲑鱼中隐性孔雀石绿的[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]LC-MS[/color][/url]方法【 英文名称 】Determination and Confirmation of Leucomalachite Green in Salmon: Laboratory Information Bulletin 4333【 起草单位 】Animal Drugs Research Center, Food and Drug Administration, Denver, CO【 发布日期 】2004-11 【 标准编号 】LIB4334【 标准名称 】快速液相色谱法测定鲑鱼中孔雀石绿和隐性孔雀石绿的方法【 英文名称 】Determination of Malachite Green and Leucomalachite Green in Salmon with In-Situ Oxidation and Liquid Chromatography with Visible Detection【 起草单位 】Food and Drug Administration, Animal Drugs Research Center Denver Federal Center, P.O. Box 25087 Denver, CO 80225-0087【 发布日期 】2004-11 【 标准名称 】美国FDA关于孔雀石绿检测方法4333和4334的补充【 英文名称 】Amendment: Application of Laboratory Information Bulletins 4333 and 4334 for the Determination of Leucomalachite Green and Malachite Green Residues in Catfish, Basa, Tilapia, Trout, and Shrimp 【 发布日期 】 2005-10 2. 美国AOAC协会期刊规定的液相色谱检测方法（J.AOAC Int.1995,78(6):1388-1393 ） 该方法常被等同采用。（三）日本修订孔雀石绿限量标准2006年5月30日，日本厚生劳动省发布食安发第0530002号通知，根据食品卫生法（1947年第233号法律）第11条第1项的规定，规定动物用医药品孔雀石绿是一种食品中不得含有的成分，并制定了孔雀石绿的试验方法，且试验方法的分析对象为孔雀石绿及隐性孔雀石绿。 该修订公布六个月后生效，即2006年11月30日起生效。 此次修订重新制定了孔雀石绿的试验方法，同时向《修订后食品卫生法第11条第3项的相关法令的调整》（2005年11月29日食安发第1129001号当职通知）的附表3中追加如下内容，自2006年11月30日起生效。 农药名称 检出界限（ppm） 孔雀石绿* 0.002 *孔雀石绿的分析对象包括：孔雀石绿及无色孔雀石绿（孔雀石绿的代谢物） 此次修订生效前，暂且施行厚生劳动省制订的一项标准，限量0.01ppm（2005年厚省劳动省告知第497号）。

生物技术研究者追求的两个主要目标，一是新型生物产品的开发，另一就是为传统的或新生生物产品，寻求更经济的生产方式。近十年来，利用遗传工程技术来生产一些重要的生物药物，是生物技术领域中迅速发展的一个重要方向。在这一研究领域里，如何创造更经济、更有效的方法，来提高生产过程的经济性和产品的市场竞争力，已经成为生物技术领域的科学家们所关注的焦点问题。利用重组DNA技术生产重要的生物药物，在人类文明史上具有划时代的意义。由于生产成本和生产率的高低直接影响公司的生存，重组生物药物生产过程的优化已经成为一个重要问题。它包括以下六个方面∶(1)适宜宿主的选择；(2)重组蛋白积累位点(如可溶的胞内积累、胞内聚合积累、周质积累或胞外积累)的确定；(3)重组基因最大表达的分子策略；(4)细胞生长和生产环境的优化；(5)发酵条件的优化；后处理过程的优化。只有这六个方面都以实现高生产率为目标，整个生产过程的最优化才能实现。(一)细胞生长环境的优化策略要提高细胞密度和生产率，首先需要对微生物生长的物理和化学环境进行优化，包括生长培养基的组成，培养物理参数(pH、温度和搅拌)及产物诱导条件。优化这些参数的目的在于保证细胞生长处于最适的环境条件之下，避免营养物过量或不足、防止产物降解以及减少有毒产物的形成。1．培养基组成的优化培养基中通常含有碳(能)源、氮源，以及微营养物如维生素和微量元素，这些营养物的浓度与比例，对实现生产重组微生物的高密度发酵是很重要的。例如，过量的Fe2+和CaCO3与相对低浓度的磷酸盐可促进黄曲霉生产L-苹果酸；链霉菌在60～80 mmol/L CO32-存在下，其丝氨酸蛋白酶生产能力可提高10倍之多；在重组微生物达到高细胞密度后，限制磷酸盐浓度可使抗生素和异源白介素b的产率显著提高。此外还发现，限制精氨酸的浓度虽然会抑制细胞的生长，但比起精氨酸充足时细胞生长优良的情况，其重组a-淀粉酶的产量可提高2倍。培养基中复合氮源的种类对重组大肠杆菌的高密度发酵也非常重要。一般地，当流加培养基中含有酵母膏时，重组蛋白不稳定；而当流加培养基中含有蛋白胨时，大肠杆菌不能再利用其所产生的乙酸。将酵母膏和蛋白胨都加入流加培养基中，不但所生产的重组蛋白非常稳定，细胞还能再利用代谢合成的乙酸，这是一种非常有趣的代谢机制。恒化技术可用于优化精氨酸营养缺陷型大肠杆菌X90的生长培养基。使该菌株以0.4 h-1的比生长速率在含精氨酸的基本培养基上生长，待培养达到稳定状态后，在恒化器内分别加入氨基酸、维生素和微量元素来考察这些物质对菌体生长和精氨酸合成的影响。结果表明，由于氨基酸生物合成途径的末端产物抑制作用，加入某些氨基酸后，细胞生长反而受到抑制。加入NH4Cl后细胞量则出现了戏剧性的增长。而添加维生素对菌体生长基本上没有任何影响。通过计算生物量对每种基质的产率，最终可以确定高密度发酵培养基的组成，在此优化培养基上，大肠杆菌X90细胞密度可达到92 g/L，同时形成56 mg/L的胞外重组蛋白酶。2．特殊营养物的添加在某些情况下，向培养基中添加一些营养物质能提高生产率。这些营养物的作用有可能是作为产物的前体，也有可能是阻止产物的降解，例如，在培养重组大肠杆菌生产氯霉素乙酰转移酶(一种由许多芳香族氨基酸组成的蛋白)时添加苯丙氨酸，可将酶的比活力提高大约2倍；在培养重组枯草芽孢杆菌生产b-内酰胺酶的培养基中添加60 g/L的葡萄糖和100 mmol/L的磷酸钾能使重组蛋白的稳定性显著提高。其原因可能是由于宿主细胞产生的多种胞外蛋白酶的活性被抑制，从而防止了重组蛋白的降解。在生长培养基中添加特殊物质有时还能以一种未知的机制提高生产率。例如，在摇瓶培养Micromonospora cbersina时添加碘化钠可使dynemicin A的产量提高35倍，但在小型反应器中却无法重复这一结果。3．限制代谢副产物的积累培养条件的控制对代谢副产物的形成影响甚大。在分批或流加培养中，某些营养物的浓度过高均会导致Crabtree效应的产生。在这种效应下，酿酒酵母会产生乙醇，大肠杆菌则会产生过量乙酸，一旦生成乙酸，细胞生长及重组蛋白的生产均会受到抑制。大肠杆菌形成乙酸的速度依赖于细胞的生长速度和培养基的组成。业已确证，如果在培养基中添加复合营养物(如大豆水解物)，则会增加乙酸的积累量。针对如何减轻由于乙酸积累而产生的负面影响，众多研究者进行了大量工作，如利用循环发酵技术来限制乙酸在重组大肠杆菌高密度培养中的积累。近来也有研究表明，添加某些氨基酸能减轻乙酸的抑制作用。如在培养基中添加10 mg/L的甘氨酸能显著促进大肠杆菌合成重组a-淀粉酶和b-内酰胺酶，并能刺激酶从周质向培养基中释放，但此时仍有乙酸伴随生成。(二)培养模式由于许多营养物在高浓度下对细胞有抑制作用，而为了达到高细胞密度，又必须供给大量的营养物质，因此，浓缩营养物必须以与其消耗速率成比例的速度加入反应器中。为此产生了多种形式的补料策略，它可以简单到线性补料，也可以复杂到利用数学模型计算得出的策略来控制补料速率。具体来说，培养模式的选择主要依赖于以下三个因素∶(1)所培养细胞的具体代谢行为；(2)利用抑制性底物合成目的产物的潜力；(3)诱导条件以及测量细胞培养各项参数的能力。1．大肠杆菌流加发酵策略大肠杆菌是迄今为止遗传背景最清楚的菌株，广泛用于基因工程的研究中。大肠杆菌高密度培养时最关键的问题是如何尽量减少乙酸的产生，因为高浓度葡萄糖或高比生长速率带来的高浓度乙酸会严重抑制细胞生长和重组蛋白的生产。研究发现，即使葡萄糖浓度只有0.25～0.5 g/L，大肠杆菌仍会产生乙酸。因此，高细胞密度发酵所采用的流加策略必须按照一定的算法制定，以保持反应器中底物浓度处于较低的水平。营养物最好以它们的消耗速率加入反应器中，这样不仅可以防止底物积累到毒性水平，也不会使细胞处于饥饿状态。近年来已经报道了多种控制大肠杆菌流加培养中流加速率的方法，其中大多数是将流加速率与一种物理参数间接耦合(如溶氧、pH或CO2释放速率)。有学者将溶氧控制在一个预定值上以保证较低的生长速率，结果乙酸产生很少，最终细胞干重达到110 g/L，并发现较低的比生长速率还有利于重组蛋白的高表达。在另一个控制低比生长速率的高细胞密度培养中，研究者采用先指数流加葡萄糖、铵盐和无机盐，后采用广义线性流加的培养策略，有效地防止了乙酸的积累，重组大肠杆菌的细胞密度达到66 g/L，通过温度诱导可在胞内形成19.2 g/L的活性重组蛋白。如果将葡萄糖浓度控制在一个不致于产生毒性的足够低的水平上，也可以使细胞在不存在限制性基质的情况下迅速生长到高细胞密度。这种控制策略对仪器的要求较高。Kleman等采用在线葡萄糖分析仪，以微生物对葡萄糖的需求来决定葡萄糖和其它营养物的流加速率，这一算法能够在产物诱导阶段中根据细胞生长的变化自动调整流加速率。培养携带质粒的大肠杆菌 MV1190，其质粒中带有编码1,5-二磷酸核酮糖羧化酶的基因，最终细胞干重达到39 g/L，产生1.7 g/L可溶的活性蛋白。2．重组酵母的流加发酵酵母中广泛用于遗传工程研究的菌株是酿酒酵母。但采用酿酒酵母作为重组宿主也有以下缺点∶(1)重组蛋白生产的水平较低；(2)质粒不稳定；(3)生成乙醇。其中生成乙醇是研究者最不希望出现的，因为这会抑制重组蛋白的形成。近来研究表明，其它酵母，如巴斯德毕赤氏酵母也具有作为重组宿主的潜力。Clare等比较了重组巴斯德毕赤氏酵母和酿酒酵母在高细胞密度状态下表达和分泌鼠表皮生长因子的能力。培养每基因组含有19个拷贝数的巴斯德毕赤氏酵母，最终可获得447 mg/L胞内重组蛋白；而培养酿酒酵母所获得的最高水平仅6～7 mg/L。通过先指数流加，后采用基于CO2释放和RQ值的线性流加控制方式可使重组巴斯德毕赤氏酵母的细胞干重达到80～90 g/L，并分泌高水平的重组人血清蛋白。而培养酿酒酵母，细胞干重和重组蛋白的产量仅分别为25 g/L和20 mg/L。即使将酿酒酵母的生长速率维持在0.12～0.18 h-1，也将形成10～13 g/L的乙醇，因而导致产率降低。但酿酒酵母产乙醇也并不是不可控制的。Shimizu等采用一个复杂的流加系统，将酵母的生长速率控制在0.3 h-1，可使谷胱甘肽(GSH)的生产最大而乙醇的生成最小。3．流加培养的控制一个好的流加控制系统必须避免两种倾向∶一是流加过量，补料组分在反应器中积累从而对细胞生长和产物形成产生抑制；二是流加不足，这可能会导致细胞必需营养物的缺乏。计算机技术的迅猛发展，为流加培养的控制提供了更有效的手段。近年来，应用计算机技术来监测和控制发酵过程的研究屡见报道。由于现代计算机技术的帮助，人们能够采用多种生长参数和数学模型来控制流加培养中营养物的添加，从而使复杂的控制系统得以实现。在各种人工智能技术中，模糊推理(fuzzy reasoning)是应用最广的一种。模糊逻辑控制(fuzzy logic control)部分依赖于数学生长模型，也采用“语言定义的规则系统”(linguistically defined rules system)来帮助系统响应发酵过程的非线性和动态行为。Alfafara等在流加培养酿酒酵母生产谷胱甘肽的研究中，采用一个模糊逻辑控制系统来控制葡萄糖的流加速度，对系统进行优化后谷胱甘肽的比产生速率达到6.2 h-1。目前，在流加培养中应用模糊逻辑控制技术的最大问题在于如何减少底物和产物浓度振荡所需的调整次数。自适应模糊逻辑控制算法的发展可望对此有所

通常大家进行流变测试时, 样品暴露在空气中, 如测试温度与室温有一定差距, 或测试粘度/模量-温度曲线时, 则会得到一定的温度梯度.影响实验结果.安东帕公司提供的ADVANCED PELTIER SYSTEM, 可精密控制温度, 采用上,下半导体附件, 并提供CSA, 用于样品内部多点温度测量. 该装置可以控制样品温度精度优于0.1K.

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